UJI POTENSI DAN TOLERANSI TERHADAP CEKAMAN

OSMOTIK BAKTERI ENDOFITIK SEBAGAI

PUPUK HAYATI PADI

SKRIPSI

Diajukan untuk Memenuhi Sebagian Persyaratan

Menyelesaikan Studi Sarjana S-1

Jurusan Agronomi

Oleh:

Heny Dwi Sartika

Nim. 201110200311026

JURUSAN AGRONOMI

PROGRAM STUDI AGROTEKNOLOGI

FAKULTAS PERTANIAN PETERNAKAN

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG

2016

RIWAYAT HIDUP

Penulis lahir di Tulungagung pada tanggal 13 Mei 1993

dengan nama Heny Dwi Sartika, sebagai putri kedua dari

dua bersaudara. Penulis beragama Islam, lahir dari pasangan

suami istri ayahanda Murodi dan ibunda Sumini. Kini

penulis beralamat di Dsn. Kalianyar, Ds. Ngunggahan,

RT/RW:03/03, Kecamatan. Bandung, Kabupaten. Tulungagung.

Adapun riwayat pendidikan penulis, yaitu pada tahun 1999 menyelesaikan

pendidikan taman kakan-kanak di TK Dharma Wanita Ngunggahan, kemudian

penulis melanjutkan pendidikan Sekolah Dasar di SD Ngunggahan 03 dan lulus

pada tahun 2005. Kemudian penulis melanjutkan Sekolah Menengah Pertama di

SMP Negeri 1 Bandung sampai lulus pada tahun 2008. Tahun 2011, penulis

menyelesaikan pendidikan Sekolah Menengah Atas di SMA Negeri 1 Gondang.

Penulis melanjutkan pendidikan di jurusan Agroteknologi Fakultas Pertanian –

Peternakan Universitas Muhammadiyah Malang, dengan penyelesaian tugas akhir

berjudul “Identifikasi Bakteri Endofitik pada Tanaman Padi yang Berpotensi

Sebagai Pupuk Hayati” di awal tahun 2016.

LEMBAR PERSEMBAHAN

Yang utama dari segalanya sembah sujud serta syukur kepada Allah SWT

yang telah memberikan kehidupan, kebahagiaan serta waktu untuk menyelesaikan

tugas akhir ini. Sholawat dan salam selalu terlimpahkan kehadiran Rasulullah

Muhammad SAW.

“tanpa lelah, sabar dan syukur”

Rasa bersyukur dan terimakasih yang tiada henti saya sampaikan untuk

kedua orang tua saya ayahanda Murodi dan ibunda Sumini yang telah melahirkan

dan membesarkan saya, yang sampai saat ini tanpa rasa lelah memberikan kasih

sayang, yang tanpa rasa lelah mengucap doa demi kesehatan dan tercapainya cita-

cita kedua putri mu, yang tanpa rasa lelah dan sabar mencari nafkah untuk kedua

putri mu, yang tanpa rasa lelah telah mengajarkan rasa bersyukur dalam segala

hal, yang tanpa rasa lelah memberikan dukungan hingga terselesainya tugas akhir

ini. Terimakasih untuk kakak saya Indah Safitri yang selalu ngomel tapi demi

kebaikan adeknya, serta memberikan nasehat, dukungan dan doa sampai saat ini.

Tulisan ini bukanlah akhir dari perjuangan tetapi, akan menjadi awal terwujudnya

cita-cita yang selama ini ayah dan ibu ingin lihat dalam setiap doa (amin amin

amin yarobbal ‘alamin).

“jika tua nanti kita tlah hidup masing-masing, ingatlah masa (kuliah) ini”

Rizal, Zen, Yudi, Munir, Bang Udin, Heru dan Ana terimakasih untuk

membantu menyelesaikan tugas akhir ini serta, waktu dan canda tawa selama ini

telah menemani menghabiskan masa kuliah bersama. Semua teman-teman

Agroteknologi 2011 terimakasih yang telah memberikan semangat selama ini.

Teman saya satu kost kusuma ayu Prima, Ajeng dan yang lainnya terimakasih atas

dukungan dan semangatnya selama ini. Semoga menjadi terbaik diantara yang

terbaik buat kita semua.

ii

KATA PENGANTAR

Puji syukur kehadirat Allah SWT yang senantiasa memberikan rahmat dan

hidayah-Nya serta kesehatan sehingga penulis dapat menyelesaikan laporan

penelitian (Skripsi) yang berjudul “Uji Potensi Dan Toleransi Terhadap

Cekaman Osmotik Bakteri Endofotik Sebagai Pupuk Hayati Padi”.

Selama proses penulisan laporan ini, penulis mendapatkan banyak

bimbingan dan dukungan dari banyak pihak, baik secara langsung maupun tidak

langsung. Oleh karena itu, pada kesempatan ini penulis ingin mengucapkan

banyak terima kasih kepada semua pihak yaitu :

1. Kedua orang tua yang selalu memberikan doa, dukungan dan kasih sayang

sampai saat ini.

2. Dr. Ir. Ali Ikhwan, MP. selaku dosen pembimbing, yang telah memberikan

banyak bimbingan dan saran selama proses penelitian maupun penulisan

skripsi ini.

3. Prof. Dr. Dyah Roeswitawati, Ir., MS. selaku dosen pembimbing, yang

telah memberikan banyak bimbingan dan saran selama proses penelitian

maupun penulisan skripsi ini.

4. Ir. Sufianto, MM. selaku dosen penguji, yang telah memberikan banyak

bimbingan dan saran selama proses penelitian maupun penulisan skripsi

ini.

5. Dr. Drs. Harun Rasyid, MP. selaku dosen penguji, yang telah memberikan

banyak bimbingan dan saran selama proses penelitian maupun penulisan

skripsi ini.

6. Seluruh Staf Laboratorium Bioteknologi UMM, atas semua masukan

selama proses penelitian.

Penulis menyadari masih banyaknya kesalahan dan kekurangan dalam

penulisan laporan ini. Untuk itu dengan segala kerendahan hati penulis menerima

dengan baik segala kritik ataupun saran untuk perbaikan laporan ini. Semoga

laporan ini dapat bermanfaat bagi semua pihak sebagaimana mestinya.

Malang, 1 Februari 2016

Penulis

iii

DAFTAR ISI

KATA PENGANTAR .................................................................................... ii

DAFTAR ISI ................................................................................................... iii

DAFTAR TABEL........................................................................................... v

DAFTAR GAMBAR ...................................................................................... vi

DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................. vii

RINGKASAN ................................................................................................. viii

I. PENDAHULUAN

1.1. Latar Belakang ..................................................................................... 1

1.2. Tujuan ................................................................................................... 2

1.3. Rumusan Masalah ................................................................................ 3

1.4. Hipotesis ............................................................................................... 3

II. TINJAUAN PUSTAKA

2.1. Peranan Endofit Dengan Tanaman Bakteri .......................................... 4

2.2. Potensi Bakteri Endofit Sebagai Pupuk Hayati (biofertilizer) ............. 6

2.3. Bakteri Endofit Pada Padi .................................................................... 7

2.4. Mekanisme Ketahanan Tanaman Terhadap Cekaman Kekeringan ..... 8

2.5. Pengaruh Fisiologis Dan Morfologis Tanaman Terhadap Cekaman

Kekeringan ........................................................................................... 10

III. METODE PENELITIAN

3.1. Waktu dan Tempat ............................................................................. 12

3.2. Alat dan Bahan ................................................................................... 12

3.3. Metode Pelaksanaan Penelitian .......................................................... 12

3.3.1. Sterilisasi Alat Dan Bahan ....................................................... 12

3.3.2. Pembuatan Media Dan Sterilisasi Media ................................. 13

3.3.2.1. Media Cair Lactose Broth (LB) .......................................... 13

3.3.2.2. Media Padat Lactose Broth (LB) ....................................... 14

3.3.2.3. Pembuatan Media M63 + Nacl ........................................... 14

3.4. Inokulasi Bakteri Endofitik Padi Pada Media Cair LB ...................... 14

3.5. Pemurnian Isolat Bakteri Endofitik Padi Pada Media Padat LB ....... 15

3.6. Uji Pertumbuhan Isolat Bakteri Endofitik Padi ................................ 15

3.7. Uji Produksi Hormon Pertumbuhan MenggunakanGas Chromato-

graph Mass Spectrometer (GCMS) ................................................... 16

3.8. Pembuatan Preparat dengan Metode Pewarnaan Gram ..................... 17

3.9. Uji BD BBL Crystaltm Identification Sytem Enteric/Nonfermeter ID

Kit ...................................................................................................... 18

IV. HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1. Hasil Penelitian .................................................................................. 20

4.1.1. Uji Pertumbuhan Bakteri Endofitik Padi Pada Cekaman

Osmotik (kekeringan) ............................................................... 20

4.1.2. Uji Produksi Hormon Pertumbuhan Menggunakan Gas

Chromatograph Mass Spectrometer (GCMS).......................... 25

4.1.3. Identifikasi Bakteri Dengan Metode Pewarnaan Gram dan BD

BBL CrystalTm Identifikasi System Enteric/Nontermeter ID Kit.. 33

iv

4.2. Pembahasan ........................................................................................ 34

4.2.1. Uji Pertumbuhan Bakteri Endofitik Padi ................................. 34

4.2.2. Uji Produksi Hormon Pertumbuhan Menggunakan Gas

Chromatograph Mass Spectrometer (GCMS).......................... 35

4.2.3. Identifikasi Bakteri Dengan Metode Pewarnaan Gram dan BD

BBL CrystalTm Identification Systems Enteric/Nonfermeter ID

Kit ............................................................................................. 41

V. KESIMPULAN DAN SARAN

5.1. Kesimpulan ........................................................................................ 43

5.2. Saran .................................................................................................. 44

DAFTAR PUSTAKA ..................................................................................... 45

LAMPIRAN .................................................................................................... 50

v

DAFTAR TABEL

Tabel Teks Halaman

1 Identifikasi Pada 5 Isolat Bakteri Endofit .......................................... 22

2 Jenis Dan Konsentrasi Hormon Pertumbuhan Serta Senyawa

Organik Isolat Bakteri Endofitik Pada Padi ....................................... 23

vi

DAFTAR GAMBAR

Gambar Teks Halaman

1 Pola Pertumbuhan Isolat Bakteri Endofitik Padi Pada Media

M63 Standar ....................................................................................... 18

2 Pola Pertumbuhan Isolat Bakteri Endofitik Padi Pada Media

M63 + 0,25 G Nacl .................................................................................. 19

3 Pola Pertumbuhan Isolat Bakteri Endofitik Padi Pada Media M63

+ 0,5 G Nacl ......................................................................................... 20

4 Pola Pertumbuhan Isolat Bakteri Endofitik Padi Pada Media

M63 +0,75 G Nacl .............................................................................. 21

5 Pola Pertumbuhan Isolat Bakteri Endofitik Padi Pada Media

M63 + 1 G Nacl .................................................................................. 22

6 Konsentrasi Trigonelline Dalam 5 Isolat Bakteri Endofitik

Padi ..................................................................................................... 24

7 Konsentrasi Pyridoxine Dalam 5 Isolat Bakteri Endofitik

Padi ..................................................................................................... 25

8 Konsentrasi Indole 3 Acetic Acid Dalam 5 Isolat Bakteri

Endofitik Padi ..................................................................................... 25

9 Konsentrasi Indole 3 Butyric Acid Dalam 5 Isolat Bakteri

Endofitik Padi ..................................................................................... 26

10 Konsentrasi Kinetin Dalam 5 Isolat Bakteri Endofitik Padi ............... 26

11 Konsentrasi Pantothenic Acid Dalam 5 Isolat Bakteri

Endofitik Padi ..................................................................................... 27

12 Konsentrasi Pantothenic Acid Dalam 5 Isolat Bakteri

Endofitik Padi ..................................................................................... 27

13 Konsentrasi Dehydrovomofoliol Dalam 5 Isolat Bakteri

Endofitik Padi ..................................................................................... 28

14 Konsentrasi Nicotinamine Dalam 5 Isolat Bakteri Endofitik

Padi ..................................................................................................... 29

15 Konsentrasi Tricin Dalam 5 Isolat Bakteri Endofitik Padi ................. 29

16 Konsentrasi GA3 Dalam 5 Isolat Bakteri Endofitik Padi ................... 30

17 Konsentrasi GA1 Dalam 5 Isolat Bakteri Endofitik Padi ................... 30

18 Konsentrasi Riboflavin 5 Isolat Bakteri Endofitik Padi ..................... 31

vii

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Teks Halaman

1 Komposisi Media Pertumbuhan Bakteri Endofitik Padi ............ 50

2 Kondisi GC-MS Yang Digunakan .................................................... 52

3 Dokumentasi Hasil Penelitian .................................................... 53

4 Tabel Analisa Ragam Nilai OD Isolat Bakteri Endofitik Padi

Pada Media M63 + NaCl ............................................................ 56

4 Tabel Chromatogram Resume Report ............................................ 58

5 Chromatogram Result ................................................................. 61

45

DAFTAR PUSTAKA

Anonymous, 2015. Niacin and pyredoxine.http://www.ncbi.nlm.nih.gov. diakses

pada tanggal 30 Juli 2015.

Asis, C.A., Adachi, K., 2003. Isolation of endophytic diazotroph Pantoea

agglomerans and nondiazotroph Enterobacter asburiae from sweet

potato stem in Japan. Lett. Appl. Microbiol. 38, 19–23.

Barac T, Taghavi S, Borremans B, Provoost A, Oeyen L, Colpaert JV, et al. 2004.

Engineered endophytic bacteria improve phytoremediation of water-

soluble, volatile, organic pollutants. Nat Biotechnol. 2004;22:583–588.

Bergersen, F. 1980. Methods for evaluating biological nitrogen fixation.

Chichester, UK: John Wiley and Sons.

Boddey RM et al. 1995. Biological nitrogen fixation associated with sugarcane

and rice: Contributions and prospects for improvement. Plant Soil 174:195-209.

Budiman A, 2000. Pengaruh Hormon IBA terhadap Pertumbuhan Stek

Shorea balangeran Korth. Pada Medium Air (Water Rooting System).

(Online), (http://library.fordamof.org/libforda/data_pdf/hormon%20iba.pdf

Diakses tanggal 3 Desember 2015).

Cavalcante V.A., J. Dobereiner. 1988. A new acid-tolerant nitrogen-fixing

bacterium associated with sugarcane Plant Soil., 108, pp. 23–31.

Dong Y, Iniguez AL, Ahmer BM, Triplett EW. 2003. Kinetics and strain

specificity of rhizosphere and endophytic colonization by enteric

bacteria on seedlings of Medicago sativa and Medicago truncatula. Appl

Environ Microbiol 69:1783-1790.

Dong Z., M. J. Canny, M. E. McCully, M. R.Roboredo,C. F. Cabadilla,E.

Ortegaand R. Rodes. 1994. Nitrogen-FixingEndophyte of Sugarcane

Stems (A New Role for the Apoplast).Plant Physiology.105:1139-1147.

Downing, K.J., and J.A.Thomson. 2000. Introduction of serratia marcescens

chiagen into an endophytic colonization by enteric bacteria on

seedings of medicago sativa and medicago truncatula. Applied andervir

an mental , microbiology 69 (3): 1783-1790.

Herz, W. and Bruno, M. 1986. Phytochem. 25(8):1913-1916

46

Huttly AK and Phillips AL. 2003. Gibberellin-regulated plant genes. Physiol

Plant. 1995;95:310–317.

Islami, T., dan W. H. Utomo, 1995. Hubungan Tanah, Air, dan Tanaman. IKIP

Semarang Press. 297 halaman.

James E.K., F.L. Olivares, A.L.M. de Oliveira, F.B. dos Reis Jr., L.G. da Silva,

V.M. Reis. 2001. Further observations on the interaction between sugarc

ane and Gluconacetobacte rdiazotrophicus under laboratory and green-

house conditions J. Exp. Bot., 52, pp. 747–760

Kaplan F, Kopka J, Haskell DW, Zhao W, Schiller KC, Gatzke N, Sung DY, Guy

CL 2004 Exploring the temperature stress metabolome of Arabidopsis.

Plant Physiol 136:4159–4168

Kirchhof, G., V.M. Reis, J.I. Baldani, B. Eckert, J. Dobereiner, and A. Hartman.

1997. Occurrence, physiological, and molecular analysis of

endophytic diazotrophic bacteria in gramineous energy plants. Plant

and Soil 194:45-55.

Kloepper, J.W.1993. Plant Growth Promoting Rhizobacteria as Biological

Control Agens. In Soil Microbial EcologyAplication in Agricultural an

d Environm ental Management, F.B. Metting (eds), Jr. Marcel Dekker,

New York. 255-268.

Kramer, P.J. 1983. Water Relations of Plants. Academic Press Inc, Orlando,

Florida. P. 342 – 389.

Kuklinsky-Sobral, J., Araujo, W.L., Mendes, R., Geraldi, I.O., Pizzirani-Kleiner,

A.A., et al, 2004. Isolation and characterization of soybean-associated

bacteria and their potential for plant growth promotion. Environ. Microbiol. 6, 1244–1251.

Lay, B.W., 1994. Analisis Mikroba di Laboratorium. Jakarta:Rajawali

Lee, S., Sevilla, M., Meletzus, K.T., Oliveira, A., Operlova, L., Nawroth, R.,

Baldani, I. and Kennedy, C. 1998. Analysis of nitrogen fixation and

regulatory genes in the sugarcane endophyte Acetobacter diazotrophi

cus. In "Nitrogen Fixation with Non-Legumes". Proceedings of the 7th

International Symposium on Nitrogen Fixation with Non-Legumes". Malik, K.A., Mirza, M.S. and Ladha, J.K. (edts.). Kluver Academic

Publishers, Dordrecht. pp.11-19.

Levitt, J. 1980. Responses of plants to environmental stresses: Water,

radiation, salt, and other stresses. Vol. II. New York, Academic Press.

47

Mahaffee WE, Kloepper JW, Van Vuurde JWL, Van der Wolf JM & Van den

Brink M. 1997. Endophytic colonization of Phaseolus vulgaris by

Pseudomonas fluorescens strain 89B-27 and Enterobacter asburiae

strain JM22. In Improving Plant Productivity by Rhizosphere

Bacteria. MH Ryder, PM Stephens & GD Bowen (ed), Melbourne:

Common wealth Scientific and Industrial Research Organization. p

180.

Mayer, R.R., Cherry, J.H. and Rhodes, D. (1990) Effects of heat shock on amino

acid metabolismofcowpea cells. Plant Physiol. 94, 796-810.

McInroy, J.A., Kloepper, J.W., 1995. Survey of indigenous bacterial

endophytes from cotton and sweet corn. Plant Soil 173, 337–342.

Mujibur, M.R. 2013. Isolasi dan Uji Potensi Bakteri Endofit dari Empat Jenis

Tanaman Padi dalam Menambat N dan Mensintesis Hormon IAA

Ekstraseluler. [Skripsi] Malang. Fakultas Pertanian-Peternakan.

Universitas Muhammadiyah Malang.

Muthukumarasamy R, Revathi G, Seshadri S, Lak shminarasimhan C.2002.

Gluconacetobacter diazotrophicus (syn.Acetobacter diazotrophicus), a promising diazotrophic endophyte in tropic.CurrSci83:137-145

O’Callaghan, K.J., Stone, P.J., Hu, X., Griffiths, D.W., Davey, M.R., Cocking,

E.C., 2000. Effects of glucosinolates and flavonoids on colonization of

the roots of Brassica napus by Azorhizobium caulinodans ORS571. Appl. Environ. Microbiol. 66, 2185–2191.

Oliveira A.L.M., S. Urquiaga, J. Döbereiner, J.I. Baldani. 2002. The effect of

inoculating endophytic N2 fixing bacteria on micropropagated

sugarcane plants. Plant Soil, 242, pp. 205–215

Prakamhang, Janpen. 2007. Microbial Communities and Their nifh Gene

Expression in Rice Endophytic Diazotroph Bacteria . A Thesis Submitt

ed in Partial Fulfillment of the Requirements for the Degree of Master

of Science in Biotechnology Suranaree University of Technology Thailand

Pratiwi, A. 2009. Pengaruh Faktor Fisika Dan Kimia Terhadap Mikroba

Laut. http://www.scribd.com/doc/50076130/Pengaruh-faktor-fisika-dan-

kimia-terhadap-mikroba-laut. Di akses pada 27 Maret 2011.

Purwani, Eni dan Ambarwati. 2013. Modul praktikum mikrobiologi pangan.

Universitas Muhammadiyah Surakarta. Surakarta

Radji, Maksum. 2005. Peranan Bioteknologi dan Mikroba Endofit Dalam

Pengembangan Obat Herbal. Majalah Ilmu Kefarmasian, 3: p. 113-126.

48

Rao, N. S. S. 1982. Advances in Agricultural Microbiology. Bombay: Oxford

and IBH Publishing Co.

Rathinasabapathi, B., Sigua, C.A., Ho, J. and Gage, D.A. (2000) Osmoprotectant

β-alanine betaine synthesis in the: S-adenosyl-L-methionine dependent

N- of β-alanine to its betaine is via N-methyl and N, N-dimethyl β-

alanines. Physiol. Plant. 109, 225-231.

Rismunandar. 1999. HormonTanamandanTernak. Jakarta: Penebar Swadaya.

Rizhsky, L., Liang, H., Shuman, J., Shulaev, V., Davletova, S. and Mittler, R.

(2004) When defense pathwayscollide. The response ofArabidopsis to

a combination of drought and heat stress. Plant Physiol. 134, 1683-

1696.

Roberts, D. L.; Heckman, R. A.; Hege, B. P.; Bellin, S. A. Chem. J. Org..1968,

33, 3566–3569.

Rochiman dan Harjadi. 1973. Pembiakan Vegetatif. Departemen Agronomi.

Fakultas Pertanian. Institut Pertanian Bogor.

Rolfe MD, Rice CJ, Lucchini S, Pin C, Thompson A, Cameron ADS, Alston M,

Stringer MF, Betts RP, Baranyi J, Peck MW, Hinton JCD. 2012. Lag

phase is a distinct growth phase that prepares bacteria for exponential

growth and involves transient metal accumulation. J Bacteriol. 194

(3):686-701.

Salisbury, F.B. andC.W. Ross. 1992. Plant Physiology. 4th edition. Wadswoth

Publishing Co.

Saut, L. 2002. Pengaruh Perlakuan Perendaman Benih dalam Larutan GA3

dan Shiimarocks terhadap Viabilitas Benih Tomat (Lycopersiconescul

entum Mill.), Terung (Solanum melongena L.) dan Cabai (Capsicum

annuum L.). [Skripsi]. Jurusan Budi Daya Pertanian. Fakultas Pertanian.

Institut Pertanian Bogor.

Shofiana, A., Y.S. Rahayu., L.S. Budipramana. 2013. Pengaruh Pemberian

Berbagai Konsentrasi Hormon IBA (Indole Butyric Acid) terhadap

Pertumbuhan Akar pada Stek Batang Tanaman Buah Naga

(Hylocereusundatus). Lentera Bio Vol. 2 No. 1 Januari 2013:101–

105.

Taghavi S, Garafola C, Monchy S 2009. Gienome Survey And

Characterization Of Endophytic Bacteria Exhibiting A Beneficial

Effect On Growth And Development Of Poplar Trees. Appl

Environ Microbiol 75: 748-757.

49

Tarabily, K., A. H. Nassar., K. sivasithamparam. 2003. Promotion Of Plant

Growth by An Auxin-Producing Isolate Of The Yeast Williosis

Saturnus Endophytic in Maize Root. The Sixth U. A. E University

Research Conference. 60-69.

Triplett, E.W., 1996. Diazotrophic endophytes: progress and prospects for

nitrogen Fixation in monocots. Plant Soil 186, 29–38.

Waluyo, L. 2011. Mikrobiologi Umum : EdisiRevisi. Malang: UMM Press.

Wattimena GA, NA. Matjik, E. Syansudin, NMA. Wendi, A. Gunawan. 1992.

Bioteknologi Tanaman. Bogor : Laboratorium Kultur Jaringan Tanaman,

Pusat Antar Universitas Bioteknologi-IPB. Direktorat Jendral Pendidikan

dan Kebudayaan.

Widawati, S dan Muharam, A. 2012. Uji Laboratorim Azospirillum sp. yang

Diisolasi dari Beberapa Ekosistem. J. Hort. 22(3):258-267

Zinniel DK, Lambrecht P, Beth Harris N, Feng Z, Kuczmarski D, Higley P,

Ishimaru CA, Arunakumari A, Barletta RG, Vidaver AK. 2002. Isolation

and characterization of endophytic colonizing bacteria from

agronomic crops and prairie plants. Appl Environ Microbiol.

68(5):2198-2208.

Zulkarnain. 2009. Kultur Jaringan Tanama., Solusi Perbanyakan Tanaman

Budidaya. PT. Bumi Aksara. Jakarta.