UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN KOMBINASI EKSTRAK · PDF fileUji aktivitas antioksidan kuantitatif...
Transcript of UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN KOMBINASI EKSTRAK · PDF fileUji aktivitas antioksidan kuantitatif...
UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN KOMBINASI EKSTRAK ETANOL
BUAH OYONG (Luffa acutangula (L.) Roxb.) DAN JAMUR TIRAM
(Pleurotus ostreatus) DENGAN METODE DPPH
(1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl)
TUGAS AKHIR
Diajukan untuk memenuhi salah satu persyaratan
Memperoleh gelar Ahli Madya D3 Farmasi
Oleh :
DIANNE PARASWATI
NIM. M3512012
PROGRAM STUDI DIPLOMA 3 FARMASI
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
UNIVERSITAS SEBELAS MARET
SURAKARTA
2015
Uji Aktivitas Antioksidan Kombinasi Ekstrak Etanol Buah Oyong
(Luffa acutangula (L.) Roxb.) dan Jamur Tiram (Pleurotus ostreatus)dengan Metode DPPH (1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl)
Dianne Paraswati Program Studi Diploma 3
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Sebelas Maret
INTISARI
Antioksidan merupakan senyawa kimia yang dapat menyumbangkan satu atau lebih elektron (electron donor) kepada radikal bebas untuk menghambat reaksi radikal bebas. Buah oyong (Luffa acutangula (L.) Roxb.) dan jamur tiram (Pleurotus ostreatus) diduga berpotensi memiliki aktivitas antioksidan, namun aktivitas antioksidan ekstrak kombinasinya belum diketahui. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas antioksidan kombinasi ekstrak etanol buah oyong (Luffa acutangula (L.) Roxb.) dan jamur tiram (Pleurotus ostreatus), nilai IC50dan nilai Combination Index (CI).
Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental laboratorium. Ekstrak etanol buah oyong (Luffa acutangula (L.) Roxb.) dan jamur tiram (Pleurotus ostreatus) diperkolasi dengan pelarut etanol 70%. Pengujian aktivitas antioksidan dilakukan dengan metode DPPH (1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl). Identifikasi kandungan fitokimia dan uji aktivitas antioksidan kualitatif dengan kromatografi lapis tipis (KLT). Uji aktivitas antioksidan kuantitatif dengan spektrofotometri UV-Vis pada panjang gelombang 516 nm dengan pembanding vitamin C. Hasil pengujian ekstrak buah oyong dan jamur tiram mengandung senyawa flavonoid, saponin, tanin, alkaloid dan terpenoid. Nilai CI dengan konsentrasi 1/4IC50:1/4IC50 yaitu 0,77, 1/2IC50:1/4IC50 yaitu 0,71, 1/4IC50:1/2IC50 yaitu 0,59, 1/2IC50:1/2IC50 yaitu 0,52. Kata kunci : Buah Oyong, Jamur Tiram, DPPH, IC50, Combination Index,
Antioksidan
Antioxidant Activity Test of Ethanolic Extract Combination of Oyong Fruit (Luffa acutangula (L.) Roxb.) and Oyster Mushroom (Pleurotus ostreatus)Using DPPH (1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl) Method
Dianne Paraswati Diploma of Pharmacy,
Faculty of Mathematic and Sciences Sebelas Maret University
ABSTRACT
Antioxidant is chemical compound that can give one or more electron (electron donor) to free radical which can obstruct free radical reaction. Oyong fruit (Luffa acutangula (L.) Roxb.) and oyster mushrooms (Pleurotus ostreatus) were potential as antioxidant agent but the activity of its combination was unknown. The aim of this study was to know antioxidant activity of ethanolic extract of oyong fruit (Luffa acutangula (L.) Roxb.) and oyster mushrooms (Pleurotus ostreatus), IC50 value and Combination Index (CI) value.
This research was experimental laboratorium. The extraction using percolation method with ethanol 70 % as solvent. Antioxidant activity test using DPPH (1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl) method. Identification of phythochemistry contains and the qualitative antioxidant activity had been done byThin Layer Chromatography (TLC). The quantitative antioxidant activity test had been done by ultraviolet visible spectrofotometric at maximum wavelenght of 516 nm with vitamin C as comparator.
The result show that extract of oyong fruit and oyster mushroom, both of them contained of flavonoids, saponins, tannins, alkaloids, and terpenoids. Concentration of CI value 1/4IC50:1/4IC50, 1/2IC50:1/4IC50, 1/4IC50:1/2IC50, 1/2IC50:1/2IC50was 1,52; 0,50; 0,72; and 0,22. Keywords : Oyong fruit, Oyster mushrooms, DPPH, IC50, Combination Index,
Antioxidant
MOTTO
Sebuah lilin masih akan menyala walaupun apinya diambil untuk menyalakan
seribu lilin lainnya. Kebahagiaan tidak akan pernah berkurang karena dibagi
( Siddarta Gautama )
Kamu tidak dapat mengajari seseorang apa pun, kamu hanya bisa
membantunya menemukan apa yang ada dalam dirinya sendiri
(Galileo Galilei)
Keberhasilan seseorang ditentukan oleh dirinya sendiri, orang lain tidak
mampu untuk menentukan keberhasilanmu, tetapi setidaknya kamu bisa
menjadi yang terbaik untuk dirimu sendiri dan berguna untuk orang lain
(Dianne Paraswati T)
PERSEMBAHAN
Tugas akhir ini kupersembahkan untuk ....
Papa dan Mama yang selalu memberikan semangat,
kasih sayang, dan dukungan serta doa-doanya
selama ini.
Ibu Anif Nur Artanti M.Sc.,Apt yang telah
memberikan motivasi, bimbingan, ilmu dan
pengalamannya.
dr. Wahyu Julianda yang selalu memberi semangat
dan memotivasiku dengan penuh kesabaran.
KATA PENGANTAR
Puji syukur penulis panjatkan kehadirat Tuhan Yang Maha Esa yang telah
melimpahkan rahmat dan karunia-Nya sehinggasaya dapat menyelesaikan Tugas
Akhir berjudul “Uji Aktivitas Antioksidan Kombinasi Ekstrak Etanol Buah Oyong
(Luffa acutangula (L.) Roxb.) dan Jamur Tiram (Pleurotus ostreatus) dengan
Metode DPPH (1,1-Diphenyl-2-Picrylhydrazyl)”dengan baik dan lancar.
Penyusunan Tugas Akhir merupakan salah satu syarat untuk dapat memperoleh
gelar Ahli Madya Farmasi di Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam
Universitas Sebelas Maret, Surakarta. Dalam penulisan Tugas Akhir ini penulis
telah berusaha semaksimal mungkin untuk memberikan hasil yang terbaik.
Pelaksanaan tugas akhir ini tidak mungkin dapat terselesaikan jika tanpa adanya
bimbingan, dorongan, semangat, harapan dan motivasi serta bantuan baik moril
maupun materiil, dan do’a dari berbagai pihak. Penulis pada kesempatan ini
mengucapkan terima kasih kepada:
1. Prof. Ir. Ari Handono Ramelan, M.Sc. (Hons), Ph.D, selaku Dekan Fakultas
Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Sebelas Maret Surakarta.
2. Ibu Estu Retnaningtyas N., S.TP., M.Si selaku Ketua Program Studi D3 Farmasi
Universitas Sebelas Maret Surakarta.
3. Ibu Anif Nur Artanti, M.Sc., Apt selaku pembimbing Tugas Akhir atas segala
kesabaran dan keikhlasannya dalam memberikan arahan, bimbingan, dan saran.
4. Ibu Nestri Handayani, M.Si.,Apt selaku pembimbing akademik yang telah
memberikan motivasi, arahan, bimbingan, saran, motivasi dan ilmunya.
5. Yang terkasih Papa, dan Mamayang telah memberikan doa, penuh
dukungan dan semangat.
6. Sahabat- sahabat seperjuangan khususnya Diah Rakhmawati, Endhayanti
Oktovia, Esdha Titis, Naim Anggraita, Foury Christya, Wahyu Siamsiana,
Murni Ayut dan teman-teman sepenelitian yaitu Nissya Arienda, Astrid
Octaviani, Kartika Monikasari, Rika Triyoga, Suci, Yulfanah Diany dan
Farmasi 2012yang telah berbagi suka dan duka serta pengalaman selama
masa-masa kuliah.
7. dr. Wahyu Julianda yang telah memberikan semangat, dan memotivasiku
dengan kesabaran. Adikku Fajar Nur Hayati yang telah memotivasi.
8. Semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu persatu, yang telah
membantu pelaksanaan dan penyusunan Tugas Akhir ini.
Penulis menyadari masih banyak kekurangan dalam penulisan
Tugas Akhir ini. Untuk itu penulis mengharapkan adanya kritik dan saran
yang membangun dari semua pihak untuk perbaikan sehingga akan
menjadi bahan pertimbangan dan masukan untuk penyusunan tugas-tugas
selanjutnya. Penulis berharap semoga Tugas Akhir ini dapat bermanfaat
bagi pembaca pada umumnya dan dapat menjadi bekal bagi penulis dalam
pengabdian Ahli Madya Farmasi di masyarakat pada khususnya.
Surakarta, 10 Juli 2015
Penulis
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL........................................................................................ i
HALAMAN PENGESAHAN.......................................................................... ii
HALAMAN PERNYATAAN......................................................................... iii
INTISARI......................................................................................................... iv
ABSTRACT...................................................................................................... v
HALAMAN MOTTO...................................................................................... vi
HALAMAN PERSEMBAHAN...................................................................... vii
KATA PENGANTAR .................................................................................... viii
DAFTAR ISI....................................................................................................
DAFTAR TABEL ...................................................................................................
DAFTAR GAMBAR.........................................................................................
DAFTAR LAMPIRAN.....................................................................................
DAFTAR SINGKATAN.........................................................................................
BAB 1 PENDAHULUAN .................................................................................
1.1. Latar Belakang.............................................................................................
1.2 Perumusan Masalah.....................................................................................
1.3. Tujuan Penelitian........................................................................................
1.4. Manfaat Penelitian.......................................................................................
ix
x
xi
xii
xiii
1
4
5
5
5
BAB 2 LANDASAN TEORI ....................................................................................
2.1. Tinjauan Pustaka................................................................................................
2.1.1 Tanaman Oyong..............................................................................................
2.1.1. Klasifikasi Tanaman Oyong.............................................................................
2.1.2. Nama lain Tanaman Oyong..............................................................................
2.1.3. Morfologi Tanaman Oyong.............................................................................
2.1.4. Kandungan Kimia Tanaman............................................................................
2.1.5. Khasiat............................................................................................................
2.2. Jamur Tiram.....................................................................................................
2.2.1. Klasifikasi Tanaman.........................................................................................
2.2.2. Morfologi Jamur Tiram.......................................................................................
2.2.3. Kandungan Kimia Jamur Tiram ........................................................................
2.2.4. Khasiat........................................................................................... .....................
2.3. Ekstrak dan Ekstraksi............................................................................................
2.3.1 Cara Dingin....................................................................................................
2.3.1.1 Maserasi.........................................................................................................
2.3.1.2 Perkolasi..........................................................................................................
2.4. Kromatografi.........................................................................................................
2.4.1. Kromatografi lapis tipis.....................................................................................
2.4.1.1. Fase diam.................................................................................................
2.4.1.2. Fase gerak.................................................................................................
2.4.1.3. Metode Deteksi...........................................................................................
ii
iii
v
vi
vii
1
4
5
5
6
5
7
11
12
12
12
13
13
14
14
14
15
15
8
8
9
9
9
9
10
11
7
7
8
2.5. Radikal Bebas.................................................................................................. 16
2.5.1. Mekanisme Kerja Terbentuknya Radikal Bebas..................................... 16
2.5.2 Mekanisme Pertahanan Tubuh................................................................. 19
2.6. Antioksidan..................................................................................................... 19
2.6.1. Jenis Antioksidan.................................................................................... 19
2.6.2. Sumber Antioksidan................................................................................
2.7 Uji Aktivitas Antioksidan.................................................................................
2.7.1 Penentuan aktivitas antioksidan dengan metode DPPH....................
2.7.2 Aktivitas Peredaman Radikal Superoksida..........................................
2.7.3 Aktivitas Penghambatan Radikal Hidroksil.........................................
2.7.4 Metode Kekuatan Pereduksi................................................................
2.7.5 Metode ABTS......................................................................................
2.7.6 Metode FRAP......................................................................................
2.8 Spektrofotometri UV- VIS................................................................................
2.2 Kerangka Pemikiran................................................................................................
2.3 Hipotesis..................................................................................................................
BAB 3 METODE PENELITIAN.............................................................................
3.1. Jenis Penelitian....................................................................................................
3.1 Alat dan Bahan.....................................................................................................
3.1.1 Alat................................................................................................................
3.1.2 Bahan.................................................................................................
3.2 Waktu dan Tempat Penelitian.......................................................................
20
21
21
22
22
23
23
25
26
27
27
28
28
28
29
19
20
3.2.1. Waktu Penelitian.......................................................................
3.2.2. Tempat Penelitian......................................................................
3.3. Prosedur Penelitian............................................................................
3.3.1. Pengumpulan dan Pengelolaan sampel......................................
3.3.2. Determinasi Sampel...................................................................
3.3.3 Penyiapan Bahan........................................................................
3.3.4. Pembuatan Ekstrak......................................................................
3.3.5 Kontrol kualitas ekstrak..............................................................
3.3.6 Identifikasi Kandungan Kimia.....................................................
3.3.6.1. Uji Flavonoid...........................................................................
3.3.6.2. Uji Saponin................................................................................
3.3.6.3. Uji Tanin...................................................................................
3.3.6.4. Uji Antrakuinon.........................................................................
3.3.6.5. Uji Alkaloid...............................................................................
3.3.6.6. Uji Terpenoid...............................................................................
3.3.7. Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak..................................................
3.3.7.1 Pembuatan Larutan DPPH...........................................................
3.3.7.2 Pembuatan Larutan Blanko.........................................................
3.3.7.3 Penentuan Panjang Gelombang Maksimum Pengukuran...........
3.3.7.4 Operating Time Larutan DPPH 0,004%.....................................
3.3.7.5 Pengujian Aktivitas Antioksidan terhadap Ekstrak dan Vitamin C
3.3.7.6 Pengujian Aktivitas Antioksidan.............................................
31
31
32
32
32
33
33
34
34
34
34
35
35
35
35
36
36
36
36
36
36
36
3.3.7.7 Pengukuran Serapan Sampel..................................................
3.3.8 Pembuatan Larutan Kombinasi Ekstrak..................................
3.3.9 Pengukuran Aktivitas Antioksidan Kombinasi Ekstrak..........
3.3.10. Uji Kualitatif Antioksidan......................................................
3.3.11 Analisa Data............................................................................
BAB 4 HASIL DAN PEMBAHASAN ..................................................
4.4.1 Hasil Determinasi dan Tahap Ekstraksi.................................
4.1.2 Hasil Identifikasi Kandungan Kimia......................................
4.1.3 Hasil Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak................................
4.1.3.1 Uji kualitatif antioksidan.....................................................
4.2 PEMBAHASAN.............................................................................
4.2.1 Determinasi Tanaman..............................................................
4.2.2 Preparasi Bahan.......................................................................
4.2.3 Perkolasi..................................................................................
4.2.4 Uji kuantitatif antioksidan menggunakan metode DPPH ....
4.2.4.1 Penentuan panjang gelombang maksimum DPPH...............
4.2.4.2 Penentuan Operating time ....................................................
4.2.4.3 Analisa Data Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Tunggal
Oyong dan Jamur Tiram.........................................................
4.2.4.4 Uji Aktivitas Antioksidan Kombinasi Oyong dan Jamur
Tiram......................................................................................
46
46
46
47
48
49
49
50
50
56
37
37
39
39
40
44
44
46
46
4.2.4.5 Uji Aktivitas Antioksidan Kombinasi Ekstrak Oyong dan
Jamur Tiram pada Aplikasi Persamaan Tunggal.................... 60
BAB 5 KESIMPULAN..................................................................... 63
5.1 Kesimpulan............................................................................. 63
5.2 Saran....................................................................................... 63
DAFTAR PUSTAKA........................................................................ 64
LAMPIRAN....................................................................................... 68
DAFTAR TABEL
Tabel I. Perbandingan Nilai IC50 Hasil Perhitungan dan Hasil SPSS
Probit.......................................................................................
Tabel II. Konsentrasi Kombinasi Pada Ekstrak Oyong dan Jamur
Tiram.......................................................................................
Tabel III. Konsentrasi Kombinasi Ekstrak Oyong, dan Jamur Tiram
pada aplikasi persamaan tunggal..............................................
Tabel IV. Interpretasi Sifat Senyawa Ekstrak...........................................
55
56
60
61
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Buah Oyong (Luffa acutangula (L.)Roxb.).....................................
Gambar 2. Jamur Tiram (Pleurotus ostreatus)..................................................
Gambar 3. Mekanisme Antioksidan.................................................................
Gambar 4. Ekstrak Etanol Buah Oyong...........................................................
Gambar 5. Ekstrak Etanol Jamur Tiram............................................................
Gambar 6. Hasil Uji Identifikasi Kimia Ekstrak Buah Oyong.........................
Gambar 7. Hasil Uji Identifikasi Kimia Ekstrak Jamur Tiram.........................
Gambar 8. Reaksi Reduksi DPPH oleh Senyawa Antioksidan
Hasil Uji Kualitatif Antioksidan.....................................................
Gambar 9. Kurva Regresi Linier Ekstrak Jamur Tiram dan Buah Oyong........
Gambar 1 Kurva Regresi Linier vitamin C......................................................
Gambar 1 Aktivitas Antioksidan Ekstrak Tunggal Oyong dan Jamur Tiram,
Kombinasi Ekstrak Oyong dan Jamur Tiram dibandingkan dengan
Vitamin C Tunggal.........................................................................
Combination index Ekstrak Oyong dan Jamur Tiram....................
7
9
19
36
37
38
39
42
43
49
51
55
58
Gambar 1.
Gambar 2.
Gambar 3.
Gambar 4.
Gambar 5.
Gambar 6.
Gambar 7.
Gambar 8.
Gambar 9.
Gambar 10.
Gambar 11.
Gambar 12.
Gambar 13.
DAFTAR LAMPIRAN
Lam Determinasi Sampel Ekstrak Buah Oyong
(Luffa acutangula (L.) Roxb)...................................................
Perhitungan Hasil Ekstraksi Buah Oyong.........................
Determinasi Sampel Ekstrak Jamur Tiram........................................
Perhitungan Hasil Ekstraksi Jamur Tiram...........................................
LampPenentuan Panjang Gelombang (Skrining Lamda Maksimum)....
LampGrafik Absorbansi DPPH 0,004% terhadap varian waktu.................
LampAbsorbansi DPPH 0,004% terhadap varian waktu.............................
LampPerhitungan % Inhibisi Ekstrak Oyong, Jamur tiram dan
Vitamin C...............................................................................................
LampHasil Analisis SPSS Regresi Linier Probit Ekstrak
Buah Oyong, Jamur Tiram, dan Vitamin C.........................................
Perhitungan Konsentrasi Kombinasi Ekstrak Oyong dan Jamur
Tiram pada Aplikasi Persamaan Tunggal...........................................
Perhitungan nilai CI Kombinasi Ekstrak Oyong dan Jamur Tiram.......
Lampiran 1.
Lampiran 2.
Lampiran 3.
Lampiran 4.
Lampiran 5.
Lampiran 6.
Lampiran 7.
Lampiran 8
Lampiran 9.
Lampiran 10.
Lampiran 11
66
67
69
70
72
72
73
74
76
85
87
DAFTAR SINGKATAN
CI = Combination index
DPPH = 1,1 Difenil-2-Pikrilhidrazil
IC50 = Inhibitory Concenteration
KLT = Kromatografi Lapis Tipis
nm = nanometer
p.a. = pro analisis
PPM = parts per million
SOD = Superoksida Dismutase
SPSS = Statistical Product and Service Solution
UV = Ultraviolet
Vis = Visible