Struktur Genetik Dan Filogenetik Ikan Tuna (Thunnus Spp.) Di Tpi Tanjung Luar, Lombok Berdasarkan...

download Struktur Genetik Dan Filogenetik Ikan Tuna (Thunnus Spp.) Di Tpi Tanjung Luar, Lombok Berdasarkan Dna Mitokondria

of 37

Transcript of Struktur Genetik Dan Filogenetik Ikan Tuna (Thunnus Spp.) Di Tpi Tanjung Luar, Lombok Berdasarkan...

  • STRUKTUR GENETIK DAN FILOGENETIK IKAN TUNA

    (Thunnus spp.) DI TPI TANJUNG LUAR, LOMBOK

    BERDASARKAN DNA MITOKONDRIA

    GEDE SUASTIKA JOKA WIJAYA

    DEPARTEMEN ILMU DAN TEKNOLOGI KELAUTAN

    FAKULTAS PERIKANAN DAN ILMU KELAUTAN

    INSTITUT PERTANIAN BOGOR

    2013

  • ii

  • iii

    PERNYATAAN MENGENAI SKRIPSI DAN

    SUMBER INFORMASI SERTA PELIMPAHAN HAK CIPTA

    Dengan ini saya menyatakan bahwa skripsi berjudul Struktur Genetik dan

    Filogenetik Ikan Tuna (Thunnus spp.) di TPI Tanjung Luar, Lombok Berdasarkan

    Penanda Genetik Mitokondria adalah benar karya saya dengan arahan dari komisi

    pembimbing dan belum diajukan dalam bentuk apa pun kepada perguruan tinggi

    mana pun. Sumber informasi yang berasal atau dikutip dari karya yang diterbitkan

    maupun tidak diterbitkan dari penulis lain telah disebutkan dalam teks dan

    dicantumkan dalam Daftar Pustaka di bagian akhir skripsi ini.

    Dengan ini saya melimpahkan hak cipta dari karya tulis saya kepada Institut

    Pertanian Bogor.

    Bogor, Mei 2013

    Gede Suastika Joka Wijaya

    NIM C54090011

  • iv

    ABSTRAK

    GEDE SUASTIKA JOKA WIJAYA. Struktur Genetik dan Filogenetik Ikan Tuna

    (Thunnus spp.) di TPI Tanjung Luar, Lombok Berdasarkan DNA Mitokondria.

    Dibimbing oleh HAWIS MADDUPPA dan BEGINER SUBHAN.

    Ikan tuna merupakan komoditi perikanan terbesar ketiga di Indonesia

    setelah udang dan ikan dasar. Identifikasi tuna cukup sulit karena spesies ini

    memiliki hubungan genetik yang erat dan beberapa karakter morfologi telah

    hilang atau rusak setelah ikan didaratkan. Penelitian ini bertujuan untuk

    mengidentifikasi spesies, mengetahui struktur genetik, dan filogenetik ikan tuna

    yang terdapat di TPI Tanjung Luar, Lombok. Penelitian ini menggunakan

    pengolahan data berbasis PCR (Polymerize Chain Reaction) untuk

    mengamplifikasi gen mitokondria control region pada setiap sampel. Sejumlah 43

    sampel sirip tuna yang dianalis dan diketahui spesiesnya terdiri dari 34 individu

    Thunus albacares dan 9 individu Thunus obesus dengan nilai homologi analisis

    BLAST berkisar antara 98-100%. Panjang sekuen yang terbentuk rata-rata 533 bp

    dengan 30 basa nukleotida yang berbeda. Pohon filogenetik yang terbentuk

    terbagi menjadi dua clade besar dengan jarak genetik berkisar antara 0-0,145.

    Clade yang terbentuk memiliki nilai bootstrap dan hubungan yang baik.

    Metodologi ini sangat berguna untuk menegakkan peraturan yang mengatur

    industri perikanan tuna sirip biru di Indonesia.

    Kata kunci: biodiversitas, DNA barcoding , filogenetik, konservasi, tuna

    ABSTRACT

    GEDE SUASTIKA JOKA WIJAYA. Genetic and Phylogenetic Structure of Tuna

    (Thunnus spp.) in TPI Tanjung Luar, Lombok Based on Mitochondrial DNA.

    Supervised by HAWIS MADDUPPA and BEGINER SUBHAN.

    Tuna is the third largest fishery commodities in Indonesia after shrimp and

    demersal fish. Identification of tuna has been difficult because of the close genetic

    relationships among these species and the ease with which morphological

    characters may be removed once a fish has been landed. This research aims to

    identify species, investigate the genetic and phylogenetic structure of tuna that

    landed and traded in Tanjung Luar fish market, Lombok. The polymerase chain

    reaction was used to amplify segment of the mitochondrial control region gene

    from members of these species. 43 samples fins tuna were collected consists of 34

    Thunus albacares and 9 Thunus obesus, with homology analysis of BLAST

    ranged between 98-100%. The average of sequence was 533 bp and there were 30

    nucleotides different. Phylogenetic trees forming two clades, Thunus albacares

    and Thunus obesus, with genetic distance ranged from 0 to 0,145. The clades

    revealed after bootstrapping generally corresponded well with expectations. This

    methodology should prove very useful for enforcing the regulations governing

    Indonesia's bluefin tuna fishing industry.

    Keywords: biodiversity, conservation, DNA barcoding, phylogenetic, tuna

  • v

    STRUKTUR GENETIK DAN FILOGENETIK IKAN TUNA

    (Thunnus spp.) DI TPI TANJUNG LUAR, LOMBOK

    BERDASARKAN DNA MITOKONDRIA

    GEDE SUASTIKA JOKA WIJAYA

    Skripsi

    sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar

    Sarjana Ilmu Kelautan

    pada

    Departemen Ilmu dan Teknologi Kelautan

    DEPARTEMEN ILMU DAN TEKNOLOGI KELAUTAN

    FAKULTAS PERIKANAN DAN ILMU KELAUTAN

    INSTITUT PERTANIAN BOGOR

    2013

  • vi

  • vii

    Judul Skripsi : Struktur Genetik dan Filogenetik Ikan Tuna (Thunnus spp.) di

    TPI Tanjung Luar, Lombok Berdasarkan DNA Mitokondria

    Nama : Gede Suastika Joka Wijaya

    NIM : C54090011

    Disetujui oleh

    Diketahui oleh

    Dr Ir I Wayan Nurjaya, MSc

    Ketua Departemen

    Tanggal Lulus: 23 Mei 2013

    Dr Hawis Madduppa, SPi MSi

    Pembimbing I

    Beginer Subhan, SPi MSi

    Pembimbing II

  • viii

    PRAKATA

    Puji syukur kepada Tuhan Yang Maha Esa atas segala limpahan karunia,

    yang diberikan, sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian yang berjudul

    Struktur Genetik dan Filogenetik Ikan Tuna (Thunnus spp.) di TPI Tanjung Luar, Lombok Berdasarkan DNA Mitokondria. Penelitian ini merupakan salah satu syarat untuk untuk memperoleh gelar Sarjana Ilmu Kelautan pada Departemen

    Ilmu dan Teknologi Kelautan.

    Terima kasih penulis ucapkan kepada Bapak Dr Hawis Madduppa, SPi MSi

    dan Bapak Beginer Subhan, SPi MSi selaku komisi pembimbing. Penghargaan

    penulis sampaikan kepada Laboratorium Indonesia Biodiversity Research Center

    (IBRC) beserta seluruh staff IBRC telah membantu selama pengumpulan data dan

    analisis laboratorium. Ungkapan terima kasih juga disampaikan kepada orang tua

    serta seluruh keluarga atas segala doa dan kasih sayangnya, Made Ayu Pratiwi,

    teman-teman Ilmu dan Teknologi Kelautan, Crazier 46, anggota Fisheries Diving

    Club (FDC) Diklat 28, teman-teman MSP 46, sahabat Wisma Kosovo, KMHD

    IPB, serta semua pihak yang telah mendukung demi terselesaikannya karya ilmiah

    ini.

    Semoga karya ilmiah ini bermanfaat.

    Bogor, Juni 2013

    Gede Suastika Joka

  • ix

    DAFTAR ISI

    DAFTAR TABEL vii

    DAFTAR GAMBAR vii

    DAFTAR LAMPIRAN vii

    PENDAHULUAN 1

    Latar Belakang 1

    Tujuan Penelitian 2

    METODE 2

    Waktu dan Lokasi Penelitian 2

    Proses Pengambilan Sampel 2

    Ekstraksi dan Amplifikasi DNA Mitokondria 3

    Elektroforesis 3

    Siklus Pengurutan Nukleotida 3

    Analisis Data 3

    HASIL DAN PEMBAHASAN 4

    Hasil Pengurutan Basa Nukleotida dan Identifikasi Spesies 4

    Struktur Genetik Tuna 7

    Jarak Genetik dan Hubungan Filogenetik 8

    Implikasi Manajemen dan Perdagangan Perikanan Tuna 10

    KESIMPULAN DAN SARAN 10

    Kesimpulan 10

    Saran 11

    DAFTAR PUSTAKA 11

    LAMPIRAN 14

  • x

    DAFTAR TABEL

    1. Komposisi basa nukleotida spesies tuna di TPI Tanjung Luar, Lombok 8

    2. Matriks probabilitas substitusi nukleotida spesies tuna 8

    3. Matriks jarak genetik spesies tuna di TPI Tanjung Luar, Lombok 9

    DAFTAR GAMBAR

    1. Komposisi spesies tuna yang teridentifikasi di TPI Tanjung Luar, Lombok 5

    2. T. albacares (atas) dan T. obesus (bawah) (FAO Species Catalogue) 7

    3. Pohon filogenetik spesies tuna di TPI Tanjung Luar, Lombok 10

    DAFTAR LAMPIRAN

    1. Protokol standar komposisi master mix pada PCR 15

    2. Hasil identifikasi spesies menggunakan analisis BLAST 15

    3. Hasil pengurutan basa nukleotida spesies tuna 16

    4. Matriks jarak genetik antara spesies tuna 25

  • 1

    PENDAHULUAN

    Latar Belakang

    Ikan tuna merupakan komoditi perikanan terbesar ketiga di Indonesia

    setelah udang dan ikan demersal (Habibi et al. 2011). Potensi sumberdaya tuna di

    wilayah Samudera Hindia termasuk 200 mil wilayah ZEEI sebesar 216.275

    ton/tahun atau 39,4% dari total potensi tuna Indonesia yaitu sebesar 548.387

    ton/tahun (Uktolseja et al. 1997). Ikan tuna dari genus Thunnus merupakan jenis

    yang menguasai lebih dari 80% komoditas tuna di pasar internasional. Beberapa

    spesies tuna dari genus Thunnus yang menjadi komoditas utama adalah tuna

    albakora (T. alalunga), tuna mata besar (T. obesus), tuna sirip biru Atlantik (T.

    thynnus), tuna sirip biru Pasifik (T. orientalis), tuna sirip biru selatan (T.

    maccoyii) dan tuna sirip kuning (T. albacares) (Majkowski 2007; FAO 2010).

    Ikan tuna yang termasuk dalam Famili Scombridae dapat diklasifikasikan

    dalam 4 genus, yaitu Thunnus, Euthynnus, Katsuwonus, dan Auxis (Majkowski

    2007). Ikan tuna dari genus Thunnus memiliki karakteristik eksternal yang

    berbeda-beda teksturnya pada tubuh, kepala, mata, sirip dada, sirip ekor, serta

    pewarnaan sisipnya (Itano dan Fukofuka 2007). Beberapa spesies ikan tuna seperti

    tuna sirip kuning (Thunnus albacares) dan tuna mata besar (Thunnus obesus) pada

    ukuran kurang dari 40 cm memiliki kemiripan morfologi yang dapat

    menimbulkan kesalahan identifikasi dan salah estimasi hasil tangkapan (Gerasmio

    2012). Hal tersebut akan menjadi kendala pada identifikasi dan pemisahan tuna

    secara visual, sehingga perlu adanya kajian molekuler dengan menggunakan

    teknik DNA Barcoding guna mendukung pengkajian stok dan pengelolaan ikan

    tuna.

    Teknik DNA barcoding merupakan teknik yang banyak dikembangkan

    untuk mengidentifikasi spesies, karena relatif mudah dilakukan dibandingkan

    teknik lainnya (Wong dan Hanner 2008). Penggunaan DNA mitokondria banyak

    dilakukan untuk identifikasi karena memiliki beberapa kelebihan diantaranya

    ialah berevolusi lebih cepat dibandingkan DNA inti, berukuran lebih kecil

    dibandingkan DNA inti, terdapat beberapa salinan di dalam sel dan sekuens DNA

    mitokondria beberapa organisme perairan telah diketahui spesiesnya (Kyle dan

    Wilson 2007). Lokus control region pada DNA mitokondria memiliki tingkat

    polimorfisme tinggi dan mempunyai laju mutasi yang lebih cepat dibandingkan

    dengan ruas lainnya, sehingga menyebabkan urutan nukleotida control region

    sangat bervariasi antar individu (Meadows 2005). Analisis pada daerah control

    region dapat digunakan untuk melihat keragaman genetik antar subspesies

    ataupun antar populasi.

    Struktur genetik pada suatu spesies berbeda dengan spesies lainnya.

    Struktur genetik DNA pada suatu organisme dibentuk oleh basa nukleotida DNA

    yaitu adenin, guanin, tinin dan sitosin. Pada DNA mitokondria basa adenin dan

    tinin memiliki frekuensi yang besar dibandingkan dengan basa lainnya. Penelitian

    Chiang et al. (2006), mengemukakan bahwa struktur basa nukleotida tuna mata

    besar yaitu, A= 38.2%, T = 27.7%, C= 20.2%, G= 13.9%. Filogenetik merupakan

    suatu metode yang digunakan untuk melihat dan memodelkan kedekatan suatu

    spesies dengan spesies lainnya. Analisis filogenetik ini digunakan untuk

  • 2

    mengkontruksi dengan tepat hubungan antara organisme dan mengestimasi

    perbedaan yang terjadi dari satu nenek moyang kepada keturunannya (Li et al.

    1999). Penelitian Wijana dan Mahardika (2010), mengkonstruksi pohon

    filogenetik spesies tuna sirip kuning dengan nilai bootstrap kurang dari 50% dan

    memiliki keragaman genetik yang relatif tinggi serta membentuk nilai bootstrap

    sebesar 86 % dengan spesies outgroup tuna mata besar.

    Kabupaten Lombok Timur merupakan wilayah yang mempunyai potensi

    perikanan tangkap tinggi mencapai 15.683,52 ton pada tahun 2010 (DKP 2011).

    Berdasarkan data statistik Dinas Kelautan dan Perikanan Kabupaten Lombok

    Timur (2011), terdapat tiga jenis ikan yang nilai tangkapannya di atas 1000 ton

    yaitu, ikan tongkol (2000 ton), ikan cakalang (1666,5 ton), dan ikan tuna (1163

    ton) (DKP 2011). Oleh karena itu, penelitian ini difokuskan untuk mengetahui

    jenis ikan tuna di Tempat Pelelangan Ikan Tanjung Luar, Lombok melalui metode

    identifikasi molekular menggunakan DNA mitokondria.

    Tujuan Penelitian

    Penelitian ini bertujuan untuk: mengidentifikasi spesies ikan tuna;

    mengetahui struktur genetik ikan tuna; dan mengetahui hubungan filogenetik tuna

    yang didaratkan di TPI Tanjung Luar, Lombok.

    METODE

    Waktu dan Lokasi Penelitian

    Sampel ikan tuna diambil pada bulan Juli 2012 di Tempat Pelelangan Ikan

    Tanjung Luar, Lombok. Sampel Ikan tuna disimpan di Laboratorium Indonesian

    Biodiversity Research Center. Analisis laboratorium dilaksanakan pada bulan

    Januari-Maret 2013 di Laboratorium Indonesian Biodiversity Research Center

    (IBRC) Bali dan Laboratorium Biodiversitas dan Biosistematika Kelautan,

    Departemen Ilmu dan Teknologi Kelautan, FPIK IPB.

    Proses Pengambilan Sampel

    Pengambilan sampel dilakukan secara langsung di lokasi penelitian.

    Sampel ikan tuna didapatkan dari TPI Tanjung Luar, Lombok. Sampel diambil

    dari bagian sirip pektoral (sirip dada) dan disimpan dalam larutan ethanol 96%,

    serta diberi label pada masing-masing botol sampelnya.

    Ekstraksi dan Amplifikasi DNA Mitokondria

    Ekstraksi DNA bertujuan untuk menghancurkan sel dan memisahkan

    DNA pada sampel. Ekstraksi DNA ini menggunakan metode chelex (Walsh et al.

    1991). Tahap ekstraksi harus dalam keadaan steril untuk mencegah kontaminasi.

    Proses amplifikasi DNA menggunakan metode Polymerize Chain

    Reaction (PCR) Hotstart yang telah dimodifikasi. Primer yang digunakan yaitu

    CRK (5-agc tca gcg cca gag cgc cgg tct tgt aaa-3) dan primer CRE (5-cct gaa

  • 3

    gta gga acc aga tg-3) (Lee et al. 1995). Amplifikasi DNA dilakukan dengan menggunakan mesin PCR (thermo cycler). Pada dasarnya metode dengan mesin

    PCR terdiri dari beberapa proses yaitu pemisahan DNA utas ganda (denaturasi)

    pada suhu 94 oC selama 5 menit (satu siklus), denaturasi pada suhu 94

    oC selama

    15 detik, penempelan primer (annealing) pada suhu 50 oC selama 30 detik dan

    pemanjangan segmen DNA (extention) pada suhu 72 oC selama 45 detik. Proses

    tersebut dilangsungkan sebanyak 38 siklus dan tahap akhir extention pada suhu 72 oC selama 5 menit (satu siklus) (Martnez dan Zardoya 2005).

    Elektroforesis

    Elektroforesis adalah teknik untuk memisahkan molekul bermuatan,

    bertujuan untuk mengetahui ada tidaknya hasil amplifikasi DNA dalam produk

    PCR. Tahap awal elektroforesis adalah pembuatan gel agarosa 1% dengan

    pewarna Etidium Bromida (4 L) yang digunakan sebagai media elektroforesis.

    Hasil PCR diambil sebanyak 4 L dan dicampurkan dengan loading dye (1

    L), kemudian disisipkan dalam sumuran agarosa. Elektroforesis menggunakan

    mesin elektroforesis pada tegangan 200 V dan arus 400 mA. Hasil elektroforesis

    tersebut dilihat dan difoto pada mesin ultraviolet pada panjang gelombang

    ultraviolet 254 nm.

    Siklus Pengurutan Nukleotida

    Siklus pengurutan nukleotida (DNA Sequencing) adalah metode untuk

    menentukan urutan nukleotida yang terdapat dalam DNA. DNA sequencing

    menggunakan metode PCR sebagai pijakannya. DNA yang akan ditentukan

    urutan basa ACGT-nya dijadikan sebagai cetakan untuk kemudian diamplifikasi

    menggunakan enzim dan bahan-bahan yang mirip dengan reaksi PCR, namun ada

    penambahan beberapa pereaksi tertentu. Produk PCR yang posotif teramplifikasi

    selanjutnya dibaca urutan nukleotidanya menggunakan DNA sequencer.

    Penentuan urutan nukleotida dilakukan di Sequencing Facility UC Berkeley,

    California dengan mengirim hasil PCR yang telah dipindahkan dalam plate

    pengirimin produk PCR.

    Analisis Data

    Identifikasi Spesies

    Hasil pembacaan urutan basa nukleotida tersebut kemudian diolah

    menggunakan program MEGA 5.05 (Molecular Evolutionary Genetic Analysis).

    Data tersebut disejajarkan (alignment) menggunakan CustalW pada program

    MEGA 5.05 untuk melihat keragaman basa nukleotidanya. Untuk menentukan

    spesies dilakukan proses BLAST (Basic Local Alignment Search Tool) yaitu

    membandingkan dengan database sekuen DNA pada genbank yang terhubung

    dengan genbank (http://blast.ncbi.nlm.nih.-gov).

    Struktur Genetik

    Sekuen DNA yang telah analisis dan diketahui spesiesnya kemudian

    diolah dengan program MEGA 5.05. Pembuatan model komposisi dan perbedaaan

    basa nukleotida spesies tuna menggunakan metode maximum likehihood.

  • 4

    Substitusi transisi dan tranversi basa nukleotida dihutung dengan metode model

    dua parameter Kimura (1980).

    Analisis Filogenetik

    Analisis filogenetik merupakan metode untuk mengetahui kekerabatan dan

    jarak genetik suatu spesies. Jarak genetik merupakan ukuran perbedaaan genetik

    antar populasi karena mutasi, seleksi, persilangan acak dan penghanyutan gen

    yang akan menyebabkan terjadinya evolusi. Pembuatan pohon filogenetik pada

    penelitian ini menggunakan metode bootstrap neigbor joining tree dengan nilai

    bootstrap 100. Jarak genetik spesies dihitung dan dimodelkan menggunakan

    model Kimura dua parameter. Data sekuen spesies outgroup yang digunakan

    diunduh dari genbank pada website www.ncbi.com.

    HASIL DAN PEMBAHASAN

    Hasil Pengurutan Basa Nukleotida dan Identifikasi Spesies

    Diperoleh 43 sampel DNA tuna yang dianalisis DNA mitokondrianya dari

    TPI Tanjung Luar, Lombok. Hasil identifikasi 43 sekuen DNA terbagi menjadi 34

    individu Thunnus albacares (tuna sirip kuning) dan 9 individu Thunnus obesus

    (tuna mata besar) (Gambar 1). Tingkat kesamaan (homologi) yang diperoleh dari

    analisis BLAST sebesar 98-100%, yang menunjukkan bahwa identifikasi spesies

    tuna dari TPI Tanjung Luar, Lombok memliki kesamaan yang tinggi dengan data

    pada genbank (Lampiran 3).

    Gambar 1. Komposisi spesies tuna yang teridentifikasi di TPI Tanjung Luar,

    Lombok

    Spesies Thunnus albacares (tuna sirip kuning) lebih banyak yang

    teridentifikasi daripada Thunnus obesus (tuna mata besar). Hal tersebut sesuai

    dengan penetitian Soraya (2012), yang menyebutkan bahwa Thunnus albacares

    merupakan jenis ikan yang produksinya cukup tinggi di Daerah Lombok Timur

    selain ikan cakalang dan tongkol abu-abu. Spesies Thunnus obesus bukan

    merupakan komoditas perikanan yang biasanya tertangkap di Kabupaten Lombok

    Timur sehingga jumlah yang teridentifikasi lebih sedikit. Produksi ikan tuna sirip

    kuning di Kabupaten Lombok Timur mengalami peningkatan sebesar 739,10 ton

    Tahun 2006 dan Tahun 2010 produksinya mencapai 2.596,80 ton (DKP 2011).

    Thunnus albacares

    79%

    Thunnus obesus21%

  • 5

    Thunnus albacares memiliki kedalaman renang rata-rata yang lebih

    dangkal daripada Thunnus obesus. Mayoritas jalur ruaya Thunnus albacares,

    mengarungi lapisan kolom perairan yang tidak lebih dari 100 m dan relatif jarang

    menembus lapisan termoklin. Termoklin adalah suatu lapisan pada perairan di

    mana dapat terjadi perubahan suhu secara drastis terhadap kedalaman. Thunnus

    albacares di Samudera Hindia menghabiskan 85% waktunya di kedalaman kurang

    dari 75 m (Sumadhiharga 2009). Laju tangkap Thunnus obesus di Samudera

    Hindia sangat rendah pada kedalaman kurang dari 100 m dan lebih tinggi pada

    kedalaman lebih dari 200 m (Mohri dan Nishida 1999). Daerah penangkapan jenis

    ikan ukuran besar seperti hiu, cakalang dan tuna, berada di perairan Nusa

    Tenggara Barat, perairan Nusa Tenggara Timur dan perairan Sulawesi (Ardi

    2002).

    Faktor lain yang menyebabkan komposisi jenis Thunnus albacares lebih

    banyak daripada Thunnus obesus adalah penggunaan alat tangkap. Jenis alat

    tangkap yang digunakan untuk menangkap ikan tuna di Lombok adalah pancing

    tonda dan jaring insang (Ardi 2002). Alat tangkap jenis tersebut lebihh sedikit

    mencapai kedalaman renang Thunnus obesus, sehingga mengindikasikan ikan

    tuna jenis ini sedikit yang tertangkap. Pancing tonda merupakan alat tangkap ikan

    yang digunakan untuk menangkap ikan tongkol, tuna dan cakalang. Pancing tonda

    terdiri dari seutas tali pancing, mata pancing, dan umpan dan ditarik di belakang

    perahu motor atau kapal yang sedang bergerak. Terdiri dari tali utama yang

    terbuat dari nilon tunggal dengan panjang 7-60 m (Wiratama 2011).

    Jaring insang merupakan alat tangkap jaring yang berbentuk persegi

    panjang yang berfungsi untuk menjerat ikan. Salah satu jenis jaring insang yaitu

    jaring insang hanyut yang digunakan untuk menangkap ikan-ikan pelagis besar

    seperti tuna sirip kuning, cakalang dan tongkol. Jaring insang hanyut adalah jaring

    insang yang cara pengoperasiaannya dibiarkan hanyut di perairan, baik itu

    dihanyutkan di permukaan perairan, kolom perairan atau dihanyutkan di dasar

    perairan (Martasuganda 2008). Ikan tuna merupakan ikan pelagis yang dapat

    ditangkap dengan jaring insang yang dihanyutkan pada kolom perairan.

    Ikan tuna merupakan ikan perenang cepat yang memiliki kebiasaan untuk

    bermigrasi sepanjang hidupnya sehingga dapat ditemukan di beberapa perairan,

    bahkan spesies tertentu ditemukan hampir di seluruh perairan dunia. Kebiasaan

    ikan tuna untuk bermigrasi didukung oleh sistem metabolisme tuna yang dapat

    mengatur jumlah panas yang ada di dalam tubuh untuk mencapai kondisi biologis

    yang efektif (FAO 2009). Perairan Indonesia merupakan jalur migrasi ikan tuna

    karena terletak di antara Samudera Pasifik dan Hindia sehingga beberapa wilayah

    perairan pantai dan laut teritorial di Indonesia memiliki sumberdaya perikanan

    tuna yang melimpah.

    Tuna sirip kuning merupakan jenis ikan yang berukuran besar dan

    memiliki ciri-ciri: badan memanjang, bulat seperti cerutu, panjang tubuhnya

    mencapai 195 cm, namun umumnya 50-150 cm, memiliki dua sirip punggung,

    sirip depan biasanya pendek dan terpisah dari sirip belakang, pada bagian

    punggung berwarna biru kehitaman dan berwarna keputih-putihan pada bagian

    perut. Spesies ini termasuk jenis ikan buas, bersifat predator, hidup bergerombol

    kecil pada waktu mencari makan (Miazwir 2012). Tuna sirip kuning biasanya

    membentuk schooling (gerombolan) di bawah permukaan air pada kedalaman

    kurang dari 100 meter (Collette dan Nauen 1983).

  • 6

    Tuna mata besar merupakan speseis tuna yang mimiliki mata relatif besar

    dibandingkan tuna lainnya, mempunyai lekukan yang dangkal pada pusat celah

    sirip ekor. Profil badan seluruh bagian dorsal dan ventral melengkung secara

    merata. Ikan tuna mata besar dengan ukuran kurang dari 75 cm (10 kg)

    mempunyai sirip dada yang lebih panjang dari pada ikan tuna sirip kuning dari

    ukuran ukuran yang sebanding (Itano dan Fukofuka 2007). Spesies tuna mata

    besar menyebar pada perairan tropis ke subtropis yang biasanya berada pada

    kedalaman hingaa 250 meter (Collette dan Nauen 1983).

    Berdasarkan IUCN (2012), Thunnus obesus termasuk dalam kategori

    vulnerable (rentan) yang sedang menghadapi risiko kepunahan di alam liar,

    sedangkan Thunnus albacares termasuk dalam ketegori near threatened.

    Penurunan jumlah populasi tuna dikarenakan penangkapan yang berlebihan

    terhadap ikan tersebut. Penangkapan ikan tuna yang berlebihan akan mengurangi

    jumlah populasi dari tahun ke tahun. Hal tersebut seharusnya ditanggapi dan

    diatasi dengan manajemen penangkapan yang efisien.

    Gambar 2. T. albacares (atas) dan T. obesus (bawah) (FAO Species Catalogue)

    Struktur Genetik Tuna

    Proses aligment menghasilkan urutan nukleotida dengan panjang

    bervariasi yaitu rata-rata 533 bp pada spesies Thunnus albacares dan Thunnus

    obesus. Hasil analisis komposisi nukleotida DNA mitokondria diperoleh rata-rata

    frekuensi basa nukleotida tuna sirip kuning (Thunnus albacares) yaitu A=34,5%;

    T/U=29,1%; C=21,5% dan G=14,8%, sedangkan komposisi nukleotida spesies

    Thunus obesus yaitu A=34,3%; T/U=28%; C=22,5% dan G=15,2% (Tabel 1).

  • 7

    Tabel 1. Komposisi basa nukleotida spesies tuna di TPI Tanjung Luar, Lombok

    Sampel

    Komposisi nukleotida

    (%) Jumlah

    Nukleotida T(U) C A G

    Thunnus albacares 29,1 21,5 34,5 14,8 533

    Thunnus obesus 28,0 22,5 34,3 15,2 533

    Penelitian Wijana dan Mahardika (2010), mendapatkan hasil yang relatif

    sama dengan frekuensi basa DNA mitokondria tuna mata besar (Thunnus obesus)

    yaitu A=38,7%; T/U=29,2%; C=20,1% dan G=12,0%. Basa adenin dan tinin pada

    kedua spesies yang ditemukan di TPI Tanjung Luar Lombok memilki frekuensi

    lebih besar dari basa guanin dan sitosin. Penelitian Anggriawan (2008),

    mengemukakan hal yang sama yaitu, basa A dan T pada mtDNA memiliki

    frekuensi yang sangat tinggi yaitu 88,9%. Berdasarkan hasil analisis rantai DNA,

    diperoleh komposisi basa nukleotida spesises Thunus albacares dan Thunus

    obesus tidak memililiki perbedaan yang besar.

    Tabel 2. Matriks probabilitas substitusi nukleotida spesies tuna

    A T C G

    A - 1.50* 1.13* 11.97^

    T 1.86* - 20.74^ 0.75*

    C 1.86* 27.4^ - 0.75*

    G 29.42^ 1.50* 1.13* -

    Keterangan : ^ Transisi

    * Tranversi

    Mutasi gen merupakan faktor yang menyebabkan timbulnya

    keanekaragaman genetik yang berakibat pada timbulnya keanekaragaman dalam

    kehidupan. Dilihat dari sudut penyebabnya, mutasi dikelompokkan menjadi dua

    jenis yaitu mutasi spontan dan mutasi terimbas. Mutasi spontan merupakan mutasi

    yang terjadi pasa kondisi alami selama proses replikasi, perbaikan, dan

    rekombinasi DNA. Mutasi terimbas adalah mutasi yang disebabkan oleh agen-

    agen lingkungan spesifik (Sofro 1994). Mutasi substitusi merupakan jenis mutasi

    gen dimana basa nukleotida berubah menjadi bentuk basa lain dalam urutan DNA

    yang dapat menyebabkan terjadinya evolusi. Mutasi substitusi dibagi ke dalam

    dua jenis yaitu transisi dan tranversi. Transisi adalah pengubahan antara A dan G

    (purin) atau antara C dan T (pirimidin). Tranversi adalah pengubahan antara purin

    dengan pirimidin. Substitusi transisi ditunjukkan oleh angka yang bercetak tebal

    sedangkan substitusi tranversi ditunjukkan oleh angka yang bercetak miring.

    Mutasi inilah yang menyebabkan variasi genetik pada suatu organisme.

    Nilai mutasi substitusi paling tinggi ditemukan pada basa A, diikuti oleh

    basa T, C, dan G. Hal ini berkaitan erat dengan frekuensi masing-masing

    nukleotida. Semakin tinggi frekuensi nukleotida bersangkutan maka kemungkinan

    untuk terjadinya substitusi semakin besar (Wijana dan Mahardika 2010). Mutasi

    substitusi transversi lebih kecil dan lebih jarang terjadi dibandingkan substitusi

    transisi. Substitusi tranversi yang terjadi antara purin dengan pirimidin akan lebih

    sulit daripada substitusi transisi yang terjadi antara purin dengan purin dan

  • 8

    pirimidin dengan pirimidin. Hal tersebut dipengaruhi struktur molekul basa

    nukleotida antara purin dan pirimidin memiliki struktur molekul yang berbeda

    (Wijana dan Mahardika 2010). Oleh karena itu, substitusi transisi akan lebih besar

    daripada tranversi.

    Substitusi transisi umumnya terjadi selama replikasi DNA karena proses

    tautomerisma (penyusunan kembali senyawa keton menjadi aldehida). Pada

    peristiwa ini terjadi pergeseran yang menyebabkan bentuk molekul sedikit

    berubah. Sedangkan penyebab transversi umumnya berbeda dengan penyebab

    transisi karena transversi tidak terjadi selama replikasi DNA melainkan terkait

    dengan sistem replikasi DNA yang rentan terhadap kesalahan. Akibat dari mutasi

    transisi dan tranversi dapat terjadi mutasi misens atau nonmisens. Pada mutasi

    misens, asam amino pada rantai polipeptid yang disintesis digantikan oleh asam

    amino lain. Pada mutasi nonmisens, kodon yang menyandi suatu asam amino

    berubah menjadi kodon henti sehingga sintesis rantai polipeptid berhenti sebelum

    waktunya (Sofro 1994).

    Jarak Genetik dan Hubungan Filogenetik

    Jarak genetik digunakan untuk melihat kedekatan hubungan spesies tuna

    di Lombok dan spesies tuna outgroup pada genbank. Matriks perbedaan jarak

    genetik dari 43 individu tuna dari TPI Tanjung Luar, Lombok dan dua spesies

    outgroup dari genbank dapat dilihat pada Tabel 3.

    Tabel 3. Matriks jarak genetik spesies tuna di TPI Tanjung Luar, Lombok

    T.albacares T.obesus T.maccoyii T.thymus

    T.albacares

    T.obesus 0,096

    T.maccoyii 0,109 0,105

    T.thymus 0,113 0,121 0,083

    Matriks jarak genetik pada Tabel 3 menunjukkan bahwa spesies yang

    memiliki jarak tejauh yaitu Thunus obesus dan outgroup Thunnus thynus sebesar

    0,121. Thunnus obesus memiliki jarak yang sangat dekat dengan Thunnus

    albacares yaitu sebesar 0,096. Thunnus obesus memiliki jarak yang lebih dekat

    dengan outgroup Thunnus maccoyii sedangkan Thunnus albacares memilki jarak

    yang lebih dekat dengan Thunus thymus. Jarak genetik rata-rata secara

    keseluruhan sebesar 0,058. Hal ini menunjukkan bahwa pada panjang sekuen 533

    bp terdapat 30 basa nukleotida yang berbeda. Jarak genetik gen control region

    mitokondria berkisar antara 0-0,145. Penelitian Wijaya dan Mahardika (2010)

    menyebutkan hasil serupa, dimana jarak genetik antara Thunnus albacares dan

    Thunnus obesus berkisar antara 0,078-0,098.

    Pohon filogenetik merupakan suatu metode untuk mngetahui tingkat

    evolusi dan kekerabatan suatu spesies. Spesies tuna yang memiliki rantai DNA

    yang mirip akan membentuk suatu cabang yang berdekatan dan akan membentuk

    satu kelompok yang besar (clade). Hasil analisis pohon filogenetik terbagi

    menjadi dua kelas besar yaitu 34 individu Thunus albacares dan 9 individu

    Thunnus obesus. Dua spesies tuna diunduh dari genbank diantaranya satu individu

    Thunnus thynnus dan Thunnus maccoyii yang digunakan sebagai spesies outgroup

  • 9

    (Gambar 4). Spesies outgroup yang digunakan merupakan spesies yang

    mempunyai perbedaan rantai DNA yang signifikan tetapi masih terdapat korelasi

    taksonomi dengan spesies yang akan diuji. Pohon filogenetik (Gambar 4)

    menunjukkan bahwa hasil analisis BLAST sesuai dengan karakteristik cabang

    yang dibentuk oleh pohon filogenetik.

    Gambar 3. Pohon filogenetik spesies tuna di TPI Tanjung Luar, Lombok

    Uji bootstrap merupakan suatu metode yang digunakan untuk menguji

    reabilitas pohon filogenetik. Nilai bootstrap terletak pada cabang-cabang pohon

    filogenetik. Hasil percabangan Thunnus albacares dan Thunnus obesus

    menunjukkan nilai bootstrap 100%. Hal tersebut menunjukkan bahwa posisi

    filogentik tersebut telah maksimal dari tidak akan ada percabangan baru di antara

    cabang tersebut. Pada percabangan spesies outgroup Thunnus thynnus dan

    Thunnus maccoyii juga menunjukkan nilai bootstrap yang besar yaitu sebesar

    98%, sehingga terdapat kemungkinan membentuk cabang baru ataupun berpindah

    posisinya. Pohon filogenetik yang terbentuk pada clade Thunnus albacares

    Clade 1

    Clade 2

  • 10

    memiliki nilai bootstrap kurang dari 50%, yang menunjukkan bahwa spesies

    tersebut memilki keanekaragaman yang tinggi (Wijana dan Mahardika 2010).

    Pada clade Thunnus albacares membentuk beberapa kelompok

    percabangan yang mengindikasikan bahwa terdapat populasi yang berbeda pada

    clade Thunnus albacares. T. albacares IBRC0201035 terlihat berada di luar

    percabangan yang mengindikasikan individu ini berasaal dari populasi yang

    berbeda dengan yang lainnya. T. albacares IBRC0201024, IBRC0201047,

    IBRC0201019 berada pada satu cabang yang sama dan berdekatan, yang

    menunnjukkan ketiga individu ini memiliki kekerabatan yang sangat dekat. Pada

    clade Thunnus albacares terlihat membentuk beberapa sub kelompok besar yang

    menunjukkan bahwa clade ini terdiri dari populasi yang berbeda. T.obesus

    IBRC0201016 terlihat berada pada percabangan berbeda pada clade T.obeus yang

    menunjukkan individu ini memiliki jarak genetik terjauh dengan yang lainnya.

    Panjang suatu cabang yang berbeda-beda antar spesies menunjukkan

    perbedaan basa nukleotida dan laju evolusinya. Semakin panjang cabang yang

    terbentuk menunjukkan spesies tersebut memiliki perbedaan basa DNA yang lebih

    besar daripada spesies lainnya. Sebaliknya, semakin pendek suatu cabang

    menunjukkan perbedaan basa nukleotida dan laju evolusi yang lebih sedikit.

    Implikasi Manajemen dan Perdagangan Perikanan Tuna

    Jenis tuna yang terdapat di Indonesia dan diperdagangkan yaitu Thunnus

    tonggol (tongkol abu-abu), Thunnus albacares (tuna sirip kuning), Thunnus

    alalunga (tuna albakora), Thunnus obetus (tuna mata besar) dan Thunnus

    maccoyii (tuna sirip biru selatan). Terdapat beberapa spesies tuna yang terancam

    kepunahan yaitu tuna sirip biru atlantik, tuna sirip biru pasifik dan tuna mata besar

    (Collette 2011). Keberadaan spesies tuna yang jumlahnya terancam memerlukan

    manajemen penangkapan yang efektif. Manajemen perikanan tuna sebaiknya

    mencakup tujuan jangka panjang dalam segi konservasi sehingga kelangsungan

    sumberdaya dengan hasil tangkapan yang optimal dapat tercapai. Penggunaan

    genetika konservsi dapat dijadikan acuan untuk melestarikan biota tersebut di

    alam. Suatu populasi yang memilki keragaman genetik tinggi akan

    mengindikasikan populasi tersebut masih belum banyak mengalami gangguan di

    alam. Sebaliknya, jika keragaman genetik suatu populasi rendah menunjukkan

    populasinya di alam juga rendah (Nugraha 2009).

    Teknik DNA barcoding dapat mengidentifikasi secara akurat suatu

    organisme sampai tingkat spesies. Sehingga, dapat melindungi hak konsumen

    terhadap industri produk olahan yang menggunakan ikan tuna sebagai bahan

    bakunya. Pengujian terhadap ikan tuna segar maupun produk olahan tuna dengan

    teknik DNA barcoding ini dapat digunakan untuk memperkecil penipuan dan

    pemalsuan produk perikanan ternasuk produk olahan tuna maupun tuna segar

    (Hadi 2011).

  • 11

    KESIMPULAN DAN SARAN

    Kesimpulan

    Hasil analisis genetik mitokondria 43 sampel yang diperoleh dari TPI

    Tanjung Luar Lombok terdiri dari 34 individu Thunus albacares dan 9 individu

    Thunus obesus yang terbagi menjadi dua clade besar. Tingkat kesamaan analisis

    BLAST berkisar antara 98-100%. Panjang rata-rata sekuen DNA yaitu 533 bp.

    Komposisi basa nukleotida spesies Thunus albacares dan Thunus obesus tidak

    memililiki perbedaan yang besar. Jarak genetik yang terbentuk berkisar antara 0-

    0,145. Nilai Bootstrap yang terbentuk pada pohon filogenetik antara Thunnus

    albacares dan Thunnus obesus sebesar 100, yang menunjukkan bahwa posisi

    filogentik tersebut telah maksimal dan tidak akan ada percabangan baru di antara

    cabang tersebut.

    Saran

    Penanda lokus mitokondria selain control region, sebaiknya digunakan

    dalam identifikasi molekuler untuk mendapatkan perbedaan antara spesies yang

    memiliki sekuen DNA yang mirip serta perlu dilakukan penelitian mengenai

    genetika populasi ikan tuna untuk mengetahui persebaran ikan tuna sehingga

    dapat dijadikan referensi dalam penangkapan dan perdagangan ikan tuna.

    DAFTAR PUSTAKA

    Anggriawan. 2008. Variasi Gen lrRNA Lebah Madu Apis cerana di Lombok,

    Sumbawa, dan Flores. [Skripsi]. Bogor (ID). Institut Pertanian Bogor. 21

    hal.

    Ardi I. 2002. Analisis Sistem Pelabuhan Perikanan di Kabupaten Lombok Timur,

    Nusa Tenggara Barat. [Thesis]. Bogor (ID): Institut Pertanian Bogor. 95 hal.

    Collette BB, CE Nauen.1983. FAO species catalogue. Vol. 2. Scombrids of the

    world. An annotated and illustrated catalogue of tunas, mackerels, bonitos

    and related species known to date. FAO Fish.Synop. 125(2). Rome (IT) :

    Food and Agriculture Organization.

    Collette BB, KE Carpenter, BA Polidoro, MJJ Jord, A Boustany, DJ Die, C

    Elfes, W Fox, J Graves, LR Harrison, R McManus, CVM Vera, R Nelson V

    Restrepo, J Schratwieser, CL Sun, A Amorim, MB Peres, C Canales, G

    Cardenas, SK Chang, WC Chiang, NdO Leite, JrH Harwell, R. Lessa, FL

    Fredou, HA Oxenford, R Serra, KT Shao, R Sumaila, SP Wang, R Watson,

    E Yez. 2011. High Value and Long Life Double Jeopardy for Tunas and

    Billfi shes. www.sciencemag.org Science. 333.

    [DKP] Dinas Kelautan dan Perikanan. 2011. Sumber daya perikanan dan kelautan

    Pulau Lombok. [internet]. (diacu 5 Maret 2012); Tersedia dari:

    http://lomboktimurkab.go.id/?pilih=hal&id=51.

  • 12

    [DKP NTB] Dinas Kelautan dan Perikanan Nusa Tenggara Barat. 2011. Statistik

    Perikanan Tangkap Nusa Tenggara Barat Tahun 2007 2011. Mataram: Dinas Kelautan dan Perikanan Provinsi NTB. Hal 1 92.

    [FAO] Food and Agriculture Organization. 2009. FAO yearbook 2007: Fishery

    and Aquaculture Statistics. Rome (IT): FAO. 73 pp.

    Gerasmio IRP, RP Babaran, MD Santos. 2012. Discrimination of Juvenile

    Yellowfin (Thunnus albacares) and Bigeye (T. obesus) Tunas using

    Mitochondrial DNA Control Region and Liver Morphology. PLoS ONE

    7(4).

    Habibi A, D Anyogagautama, Sugiyanta. 2011. Perikanan Tuna-Panduan

    Penangkapan dan Penanganan. Jakarta (ID): WWF-Indonesia. 27 hal.

    Hadi FR. 2011. Autentikasi Aneka Produk Tuna (Thunnus sp.) dengan Metode

    DNA Barcoding. [Thesis]. Bogor (ID): Institut Pertanian Bogor. 38 hal.

    Itano DG, S Fukofuka. 2007. Handbooks For The Identification Of Yellowfin

    And Bigeye Tunas In (1) Fresh, (2) Frozen And (3) Fresh But Less Than

    Ideal Condition. Pelagic Fisheries Research Program. Amerika Serikat

    (US): University of Hawaii. 27 pp.

    [IUCN] International Union for Conservation of Nature. 2012. IUCN Red List of

    Threatened Species. Version 2012.2 [internet]. (diacu 9 Mei 2013); tersedia

    dari : www.iucnredlist.org.

    Kyle CJ, CC Wilson. 2007. Mitochondrial DNA identification of game and

    harvested freshwater fish spesies. Forensic Sciece Internasional 166(1): 68-

    76.

    Lee WJ, J Conroy, WH Howell, TD Kocher. 1994. Structure and Evolution of

    Teleost Mitochondrial Control Regions. J Mol E. 41: 54-66.

    Li S, Pearl DK, Doss H. 1999. Phylogenetic tree construction using Markov

    ChainMonte Carlo.Fred Huntchinson Cancer Research Center Washington.

    Fred Hutchinson Cancer Research Center Washington. 29 pp.

    Majkowski J. 2007. Global Fishery Resources of Tuna and Tuna-Like Species.

    FAO Fisheries Technical Paper. Rome (IT): FAO. 483 : 54 pp.

    Martasuganda. 2008. Jaring Insang (Gillnet). Bogor (ID): Institut Pertanian

    Bogor. 143 hal.

    Meadows, K Li, J Kantanen, M Tapio, W Sipos, V Pardeshi, V Gupta, JH Calvo,

    V Whan, B Norris, JW Kijas. 2005. Mitochondrial Sequence Reveals High

    Levels of Gene Flow Between Breeds of Domestic Sheep from Asia and

    Europe. Journal of Heredity 96(5):494501. Martnez P dan R Zardoya. 2005. Genetic Structure Of Bigeye Tuna (Thunnus

    Obesus) In The Atlantic Ocean. Col. Vol. Sci. Pap. ICCAT, 57(1): 195-205.

    Miazwir. 2012. Analisis Aspek Biologi Reproduksi Ikan Tuna Sirip Kuning

    (Thunnus albacares) yang Tertangkap di Samudera Hindia. [Thesis]. Depok

    (ID): Universitas Indonesia. 68 hal.

    Mohri M, T Nishida. 1999. Seasonal Changes In Bigeye Tuna Fishing Areas In

    Relation To The Oceanographic Parameters In The Indian Ocean. IOTC

    Proceedings. 2: 207-220.

    Nugraha B. 2009. Studi Tentang Genetika Populasi Ikan Tuna Mata Besar

    (Thunus obesus) Hasil Tangkapan Tuna Longline Yang Didaratkan di

    Benoa. [Thesis]. Bogor (ID): Institut pertanian bogor. 62 hal.

    Sofro ASM. 1994 Keanekaragaman Genetik. Yogyakarta: Andi Offset. 127 hal

  • 13

    Soraya. 2012. Optimasi Pengembangan Perikanan Cakalang di Kabupaten

    Lombok Timur provinsi Nusa Tenggara Barat. [Thesis]. Bogor (ID): Institut

    Pertanian Bogor. 110 hal.

    Sumadiharga OK. 2009. Ikan Tuna Pusat Penelitian Oseonegrafi. Jakarta (ID):

    Lembaga Ilmu Penelitian Indonesia. 129 hal.

    Uktolseja JCB, B Gafa, R Purwasasmita, B Iskandar. 1997. Sumberdaya ikan

    Pelagis Besar: Potensi dan Penyebaran Sumberdaya Ikan Laut di Perairan

    Indonesia. Jakarta (ID): Departemen Pertanian.

    Walsh PS, DA Metzger, R Higuchi. 1991. Chelex-100 as a medium for simple

    extraction of DNA for PCR-Based Typing from Forensic Material.

    Biotechniques 10: 506-513.

    Wijana IMS, IGN Mahardika. 2010. Struktur Genetik Dan Filogeni Tuna Sirip

    Kuning (Thunnus albacares) Berdasarkan Sekuen DNA Mitkondria Control

    Region Sitokrom Oksidase I Pada Diversitas Zone Biogeografi. Jurnal Bumi

    Lestar. 10(2): 270 274. Wiratama. 2011. Kelayakan Ikan Tuna untuk Tujuan Ekspor pada Kegiatan

    Penangkapan Menggunakan Pancing Tonda di Sadeng Yogyakarta.

    [Thesis]. Bogor (ID): Institut Pertanian Bogor. 85 hal.

    Wong EH, RH Hanner. 2008. DNA Barcoding Detects Market Substitution in

    NoNorth American Seafood. Food Research International 41(8): 828-837.

  • 14

    LAMPIRAN

  • 15

    Lampiran 1. Protokol standar komposisi master mix pada PCR

    Lampiran 2. Hasil identifikasi spesies menggunakan analisis BLAST

    no Kode lokasi spesies max identifikasi

    1 IBRC0201016 Lombok Thunnus obesus 98%

    2 IBRC0201017 Lombok Thunnus albacares 98%

    3 IBRC0201018 Lombok Thunnus obesus 99%

    4 IBRC0201019 Lombok Thunnus albacares 98%

    5 IBRC0201020 Lombok Thunnus albacares 99%

    6 IBRC0201021 Lombok Thunnus albacares 98%

    7 IBRC0201022 Lombok Thunnus albacares 98%

    8 IBRC0201023 Lombok Thunnus obesus 100%

    9 IBRC0201024 Lombok Thunnus albacares 98%

    10 IBRC0201025 Lombok Thunnus albacares 98%

    11 IBRC0201027 Lombok Thunnus albacares 98%

    12 IBRC0201028 Lombok Thunnus albacares 99%

    13 IBRC0201029 Lombok Thunnus albacares 98%

    14 IBRC0201030 Lombok Thunnus albacares 98%

    15 IBRC0201031 Lombok Thunnus albacares 98%

    16 IBRC0201032 Lombok Thunnus albacares 98%

    17 IBRC0201033 Lombok Thunnus albacares 99%

    18 IBRC0201034 Lombok Thunnus albacares 99%

    19 IBRC0201035 Lombok Thunnus albacares 98%

    20 IBRC0201036 Lombok Thunnus albacares 98%

    21 IBRC0201037 Lombok Thunnus albacares 99%

    22 IBRC0201038 Lombok Thunnus obesus 98%

    23 IBRC0201039 Lombok Thunnus albacares 98%

    24 IBRC0201040 Lombok Thunnus albacares 98%

    25 IBRC0201041 Lombok Thunnus albacares 99%

    26 IBRC0201042 Lombok Thunnus albacares 98%

    27 IBRC0201043 Lombok Thunnus obesus 98%

    28 IBRC0201044 Lombok Thunnus albacares 98%

    29 IBRC0201045 Lombok Thunnus albacares 99%

    30 IBRC0201046 Lombok Thunnus albacares 98%

    31 IBRC0201047 Lombok Thunnus albacares 98%

    32 IBRC0201048 Lombok Thunnus albacares 98%

    33 IBRC0201049 Lombok Thunnus obesus 98%

    34 IBRC0201050 Lombok Thunnus albacares 98%

    35 IBRC0201051 Lombok Thunnus obesus 99%

    36 IBRC0201052 Lombok Thunnus albacares 99%

    37 IBRC0201053 Lombok Thunnus albacares 99%

    (1 l of template) MM1 MM2

    ddH20 14.5 5.5 9

    10 X PCR Buffer (PE-II) 2.5 1.5 1

    dNTPs (8 M) 2.5 2.5 --

    MgCl2 (25 mM) 2.0 2.0 --

    Primer 1 (10 mM) 1.25 1.25 --

    Primer 2 (10 mM) 1.25 1.25 --

    PE Amplitaq (5 units/L) 0.125 -- 0.125

    Total 24 14 10.125

  • 16

    38 IBRC0201054 Lombok Thunnus albacares 98%

    39 IBRC0201055 Lombok Thunnus albacares 98%

    40 IBRC0201056 Lombok Thunnus obesus 99%

    41 IBRC0201057 Lombok Thunnus albacares 99%

    42 IBRC0201059 Lombok Thunnus albacares 98%

    43 IBRC0201060 Lombok Thunnus obesus 100%

    44 HQ630710 Spanyol Thunnus thynnus -

    45 HQ630707 Spanyol Thunnus maccoyii -

    Lampiran 3. Hasil pengurutan basa nukleotida (sequencing) pada spesies tuna

    1. Thunnus obesus IBRC0201016 AGCGCCGGTCTTGTAAACCGGACGTCGGAGGTTAAAATCCTCCCTTTTGCTCAAAGAAAGGAGATTTTAACTCCTACCCCTAACTCCCAAAGCTAGGATTCTAAATTAAACTATTCTTTGCTCCACCGTGCGCACATATTTCAATATGTCTGCGCACGTACATATATGTAATTACACCATATTTATATATGGACCATATACAATAATGTTCTAGGACATATATGTATTAAAACCATTACTAGTACTAAACCATTCATATATCAACAAACAATGAAGAGTTACATAAACCATACAAATATATTCCAACATTCAAATTAAGTCAGGTAATTAAACGAGATTTAAGACCTACCACAAACACTAAATCGTCTAAGCCATACCAAGTCTCCT

    CATTCCTGAAGTCGAGTAAATTTAAGCGCAGTAAGAGCCTACCATCCAGTCCATATCTTAATGCATACGGTTATTGAAGGTGAGGGACAATAATTGTGGGGGTAGCACCTGGTGAATTATTCCTGGCATCTGGTTCCTACTTCAGG

    2. Thunnus albacares IBRC0201017

    AGAGCGCCGGTCTTGTAAACCGGACGTCGGAGGTTAAAATCCTCCCTTTTGCTCAAAGAAAGGAGATTTTAACTCCTACCCCTAACTCCCAAAGCTAGGATTCTAAATTAAACTATTCTTTGTTCCACTATGCGCACATATTTCAATATGTCTACGCATGTACATATATGTAATTACACCATACTCATATATCGACCATATATAATAATGCTTTAGGACATATATGTATTAAAACCATTACTAGTACTAAACCATTCAT

    ATGTCAACAAACAATGAAGACTTACATAAACCATACAGATATATTTTAACATTCAGCCTAAGTCAAGTAATTAAACGAGATTTAAGACCTACCATAACAACTAAATCGTCTAAGCCATACCAAGTATCCCCATTCCTAAAGTCAAGTAAATTTAAGCGCAGTAAGAGCCTACCATCCAGTCCATATCTTAATGCATACGGTTATTGAAGGTGAGGGACAATGATTGTGGGGGTAACACCTAGTGAACTATTCCTGGCATCTGGTTCCTACTTCAGGA

    3. Thunnus obesus IBRC0201018 AGAGCGCCGGTCTTGTAAACCGGACGTCGGAGGTTAAAATCCTCCCTTTTGCTCAAAGAAAGGA

    GATTTTAACTCCTACCCCTAACTCCCAAAGCTAGGATTCTAAATTAAACTATTCTTTGCTCCACCGTGTGCACATATTTCAATATGTCTGCGCACGTACATATATGTAATTACACCATATCTATATATGGACCATATACAGTAATGTTCTAGGACATATATGTATTAAAACCATTACTAGTACTAAACCATTCATATATCAACAAACAATGAAGACTTACATAAACCATACAGATATATTCCAACATTCAAGTTAAGTCAGGTAATTAAACGAGATTTAAGACCTACCACAAACACTAAATCGTCTAAGCCATACCAAGTCTCCTCATCCCTAAAATCAAGTAAATTTAAGCGCAGTAAGAACCTACCATCCAGTCCATATCTTAATGCATACGGTTATTGAAGGTGAGGGACAATAATTGTGGGGGTAGCACTCAGTGAATTATTCCTGGCATCTGGTTCCTACTTCAGGAA

    4. Thunnus albacares IBRC0201019

    AGCGCCGGTCTTGTAAACCGGACGTCGGAGGTTAAAATCCTCCCTTTTGCTCAAAGAAAGGAGATTTTAACTCCTACCCCTAACTCCCAAAGCTAGGATTCTAAATTAAACTATTCTTTGTTCCACTATGCGCACATATTTCAATATGTCTACGCATGTACATATATGTAATTACACCATACTCATATATCGACCATATATAATAATGCTTTAGGACATATATGTATTAAAACCATTACTAGTACTAAACCATTCATATGTCAACAAACAATGAAGATTTACATAAACCATACAGATATACCTCAATATTCGATCTAAGTCAAGTAATTAGACGAGATTTAAGACCTACCATAACAACTAAATCGTCTAAGCCATACCAAGTATCCTC

    ATTCCTAAAGTCAGGTAAATTTAAGCGCAGTAAGAGCCTACCATCCAGTCCATATCTTAATGCATACGGTTATTGAAGGTGAGGGACAATGATTGTGGGGGTAACACCTAGTGAATTATTCCTGGCATCTGG

    5. Thunnus albacares IBRC0201020 AGCGCCGGTCTTGTAAACCGGACGTCGGAGGTTAAAATCCTCCCTTTTGCTCAAAGAAAGGAGATTTTAACTCCTACCCCTAACTCCCAAAGCTAGGATTCTAAATTAAACTATTCTTTGTTCCACTATGCGCACATATTTCAATATGTCTACGCATGTACATATATGTAATTACACCATACTCATATATCGACCATATATAATAATGCTTTAGGACATATATGTATTAAAACCATTACTAGTACTAAACCATTCATATG

    TCAACAAACAATGAAGATTTACATAAACCATACAGATATATCTTAACATTCAGCCTAAGTCAAG

  • 17

    TAATTAGACGAGATTTAAGACCTACCATAACAGCTAAATCGTCTAAGCCATACCAAGTATCCCCATTCCTAAAGTCGGGTAAATTTAAGCGCAGTAAGAACCTACCATCCAGTCCATATCTTAATGCA

    TACGGTTATTGAAGGTGAGGGACAATGATTGTGGGGGTAACACCTA

    6. Thunnus albacares IBRC0201021 AGCGCCGGTCTTGTAAACCGGACGTCGGAGGTTAAAATCCTCCCTTTTGCTCAAAGAAAGGAGATTTTAACTCCTACCCCTAACTCCCAAAGCTAGGATTCTAAATTAAACTATTCTTTGTTCCACCATGCGCACATATTTCAATATGTCTACGCATGTACATATATGTAATTACACCATACTCATATATCGACCATATACAATAATGCTTTAGGACATATATGTATTAAGACCATTACTAGTACTAAACCATTCATATGTCAACAAACAATGAAGATTTACATAAACCATACATATATATCTTAACATTTAACCTAAGTCAAG

    TAATTAAACGAGATTTAAGACCTACCATAACAACTAAATCGTCTAAGCCATACCAAGTATCCTCATTCCTAAAGTCAAGTAAATTTAAGCGCAGTAAGAACCTACCATCCAGTCCATATCTTAATGCACACGGTTATTGAAGGTGAGGGACAATGATTGTGAGGGTAACACCTAGTGAATTATTCCTGGCATCTGGTTCCTACTTCAGGA

    7. Thunnus albacares IBRC0201022 AGCGCCGGTCTTGTAAACCGGACGTCGGAGGTTAAAATCCTCCCTTTTGCTCAAAGAAAGGAGATTTTAACTCCTACCCCTAACTCCCAAAGCTAGGATTCTAAATTAAACTATTCTTTGTTCCACTATG

    CGCACATATTTCAATATGTCTGCGCATGTACATATATGTAATTACACCATATTCATATATCGACCATATATAATAATGCTTTAGGACATATATGTATTAAAACCATTACTAGTACTAAACCATTCATATGTCAACAAACAATGAAGATTTACATAAACCATACAGATATATCTTAATATTCAGCCTAAGTCAAGTAATTAAACGAGATTTAAGACCTACCATAATAACTAAATCGTCTAAGCCATACCAAGTATCCCCATTCCTAAAGTCAAGTAAATTTAAGCGCAGTAAGAGCCTACCATCCAGTCCATATCTTAATGCATACGGTTATTGAAGGTGAGGGACAATAATTGTGGGGGTAACACCTAGTGAATTATTCCTGGCATCTGGTTCCTACTTCAGGAA

    8. Thunnus obesus IBRC0201023 AGCGCCGGTCTTGTAAACCGGACGTCGGAGGTTAAAATCCTCCCTTTTGCTCAAAGAAAGGAGATTTTAACTCCTACCCCTAACTCCCAAAGCTAGGATTCTAAATTAAACTATTCTTTGCTCCACCGTGCGCACATATTTCAATATGTCTGCGCACGTACATATATGTAATTACACCATACTTATATATGCACCATATACAATAATGTTCCAGGACATATATGTATTAAAACCATTACTAGTACTAAACCATTCATATATCAACAAACAACGAAGACTTACATAAACCATACGAATATACTCCAACACTCAAATTAAGTCAAGTAATTAGACGAGATTTAAGACCTACCACAAACACTAAATCGTCTAAGCCATACCAAGTCTCCCCATTCCTGAAATGAGTAAATTTAAGCGCAGTAAGAGCCTACCATCCAGTCCATATCTTAATGCA

    TACGGTTATTGAAGGTGAGGGACAACAATTGTGGGGGTAGCACTCAGTGAATTATTCCTGGCATCTGGTTCCTACTTCAGGA

    9. Thunnus albacares IBRC0201024 AGAGCGCCGGTCTTGTAAACCGGACGTCGGAGGTTAAAATCCTCCCTTTTGCTCAAAGAAAGGAGATTTTAACTCCTACCCCTAACTCCCAAAGCTAGGATTCTAAATTAAACTATTCTTTGTTCCACTATGCGCACATATTTCAATATGTCTACGCATGTACATATATGTAATTACACCATACTCATATATCGACCATATATAATAATGCTTTAGGACATATATGTATTAAAACCATTACTAGTACTAAACCATTCATATGTCAACAAACAATGAAGATTTACATAAACCATACAGATATACCTCAATATTCGATCTAAGTC

    AAGTAATTAGACGAGATTTAAGACCTACCATAACAACTAAATCGTCTAAGCCATACCAAGTATCCTCATTCCTAAAGTCAGGTAAATTTAAGCGCAGTAAGAGCCTACCATCCAGTCCATATCTTAATGCATACGGTTATTGAAGGTGAGGGACAATGATTGTGGGGGTAACACCTAGTGAATTATTCCTGGCATCTGGTTCCTACTTCAGGA

    10. Thunnus albacares IBRC0201025 AGCGCCGGTCTTGTAAACCGGACATCGGAGGTTAAAATCCTCCCTTTTGCTCAAAGAAAGGAGATTTTAACTCCTACCCCTAACTCCCAAAGCTAGGATTCTAAATTAAACTATTCTTTGTTCCACTATG

    CGCACATATTTCAATATGTCTACGCATGTACATATATGTAATTACACCATACTCATATATCGACCATATATAATAATGCTTTAGGACATATATGTATTAAAACCATTACTAGTACTAAACCATTCATATGTCAACAAACAATGAAAACTTACATAAACCATACAGATATATCTTAACATTCAACCTAAGTCAAGTAATTAAACGAGATTTAAGACCTACCATAACAACTAAATCGTCTAAGCCATACCAAGTATCCCCATTCCTAAAGTCAGGTAAATTTAAGCGCAGTAAGAGCCTACCATCCAGTCCATATCTTAATGCATACGGTTATTGAAGGTGAGGGACAATGATTGTGGGGGTAACACCTAGTGAATTATTCCTGGCATCTGGTTCCTACTTCAGGAA

  • 18

    11. Thunnus albacares IBRC0201027 AGCGCCGGTCTTGTAAACCGGACGTCGGAGGTTAAAATCCTCCCTTTTGCTCAAAGAAAGGAGA

    TTTTAACTCCTACCCCTAACTCCCAAAGCTAGGATTCTAAATTAAACTATTCTTTGTTCCACTATGCGCACATATTTCAATATGTCTACGCATGTACATATATGTAATTACACCATACTCATATATCGACCATATATAATAATGCTTTAGGACATACATGTATTAAAACCATTACTAGTACTAAACCATTCATATGTCAACAAACAATGAAGATTTACATAAACCATACAGATATATCTTAATATTCAATCTAAGTCAAGTAATTAAACGAGATTTAAGACCTACCATAACAACTAAATCGTCTAAGCCATACCAAGTATCCCCATTCCTAAAGTCAGGTAAATTTAAGCGCAGTAAGAGCCTACCATCCAGTCCATATCTTAATGCATACGGTTATTGAAGGTGAGGGACAATGATTGTGGGGGTAACACCTAGTGAATTATTCCTGGCATCTGGTTCCTACTTCAGGAA

    12. Thunnus albacares IBRC0201028

    AGCGCCGGTCTTGTAAACCGGACGTCGGAGGTTAAAATCCTCCCTTTTGCTCAAAGAAAGGAGATTTTAACTCCTACCCCTAACTCCCAAAGCTAGGATTCTAAATTAAACTATTCTTTGTTCCACTATGCGCACATATTTCAATATGTCTACGCATGTACATATATGTAATTACACCATACTCATATATCGACCATATACAATAATGCTTTAGGACATATATGTATTAAAACCATTACTAGTACTAAACCATTCATATGTCAACAAACAATGAAGATTTACATAAACCATACAGATATATCTTAATATTCAGTCTAAGTCAAGTAATTAGACGAGATTTAAGACCTACCATAATAACTAAATCGTCTAAGTCATACCAAGTATCCCC

    ATTCCTAAAGTCAGGTAAATTTAAGCGCAGTAAGAGCCTACCATCCAGTCCATATCTTAATGCATACGGTTATTGAAGGTGAGGGACAATGATTGTGGGGGTAACACCTAGTGAATTATTCCTGGCATCTGGTTCCTACTTCAGGA

    13. Thunnus albacares IBRC02010129 AGAGCGCCGGTCTTGTAAACCGGACGTCGGAGGTTAAAATCCTCCCTTTTGCTCAAAGAAAGGAGATTTTAACTCCTACCCCTAACTCCCAAAGCTAGGATTCTAAATTAAACTATTCTTTGTTCCACTATGCGCACATATTTCAATATGTCTACGCATGTACATATATGTAATTACACCATACTCATATATCG

    ACCATATATAATAATGCTTTAGGACATATATGTATTAAAACCATTACTAGTACTAAACCATTCATATGTCAACAAACAATGAAGATTTACATAAACCATAAAGATATATCTCAATATTCAACCTAAGTCAAGTAATTAGACGAGATTTAAGACCTACCATAACAACTAAATCGTCTAAGCCATACCAAGTATCCCCATCCCTAAAGTCAGGTAAATTTAAGCGCAGTAAGAGCCTACCATCCAGTCCATATCTTAATGCATACGGTTATTGAAGGTGAGGGACAATGATTGTGGGGGTAACACCTAGTGAATTATTCCTGGCATCTGGTTCCTACTTCAGGA

    14. Thunnus albacares IBRC0201030 AGAGCGCCGGTCTTGTAAACCGGACGTCGGAGGTTAAAATCCTCCCTTTTGCTCAAAGAAAGGAGATTTTAACTCCTACCCCTAACTCCCAAAGCTAGGATTCTAAATTAAACTATTCTTTGTTCCACTATGCGCACATATTTCAATATGTCTACGCATGTACATATATGTAATTACACCATAATCATATATCGACCATATATAATAATGCTTTAGGACATATATGTATTAAAACCATTACTAGTACTAAACCATTCATATATCAACAAACAATGAAGATTTACATAAACCATACAGATATATCTTAACATTCAATCTAAGTCAAGTAATTAAACGAGATTTAAGACCTACCATAATAACTAAATCGTCTAAGCCATACCAAGTACCCCCATCCCTAAAGTCAGGTAAATTTAAGCGCAGTAAGAGCCTACCATCCAGTCCATATCTTAATGCATACGGTTATTGAAGGTGAGGGACAATGATTGTGGGGGTAACACCTAGTGAATTATTCCTGGCATCTGGTTCCTACTTCAGGA

    15. Thunnus albacares IBRC0201031

    CCAGAGCGCCGGTCTTGTAAACCGGACGTCGGAGGTTAAAATCCTCCCTTTTGCTCAAAGAAAGGAGATTTTAACTCCTACCCCTAACTCCCAAAGCTAGGATTCTAAATTAAACTATTCTTTGTTCCACTATGCGCACATATTTCAATATGTCTACGCATGTACATATATGTAATTACACCATACTCATATATCGACCATATATAATAATGCTTTAGGACATATATGTATTAAAACCATTACTAGTACTAAACCATTCATATGTCAACAAACAATGAAGACTTACATAAACCATACAAATATATCTTAACATTCAACCTAAGTCAAGTAATTAAACGAGATTTAAGACCTACCATAACAACTAAATCGTCTAAGCCATACCAAGTA

    TCCCCATTCCTAAAGTCAGGTAAATTTAAGCGCAGTAAGAACCTACCATCCAGTCCATATCTTAATGCATACGGTTATTGAAGGTGAGGGACAATGATTGTGGGGGTAACACCTAGTGAATTATTCCTGGCATCTGGTTCCTACTTCAGGA

    16. Thunnus albacares IBRC0201032 AGAGCGCCGGTCTTGTAAACCGGACGTCGGAGGTTAAAATCCTCCCTTTTGCTCAAAGAAAGGAGATTTTAACTCCTACCCCTAACTCCCAAAGCTAGGATTCTAAATTAAACTATTCTTTGTTCCACCATGCGCACATATTTCAATATGTCTACGCATGTACATATATGTAATTACACCATACTCATATATCG

    ACCATATATAATAATGCTTTAGGACATATATGTATTAAAACCATTACTAGTACTAAACCATTCATATGTCAACAAACAATGAAGATTTACATAAACCATACATGTATATCTTAATATTTAATCTAAGTCAGGTAATTAAACGAGATTTAAGACCTACCATAACAACTAAATCGTCTAAGCCATACCAAGTATCCTCATTCCTAAAGTCAAGTAAATTTAAGCGCAGTAAGAGCCTACCATCCAGTCCATATCTTAATGC

  • 19

    ATACGGTTATTGAAGGTGAGGGACAATGATTGTGGGGGTAACACCTGGTGAATTATTCCTGGCATCTGGTTCCTACTTCAGGAA

    17. Thunnus albacares IBRC0201033

    CCAGAGCGCCGGTCTTGTAAACCGGACGTCGGAGGTTAAAATCCTCCCTTTTGCTCAAAGAAAGGAGATTTTAACTCCTACCCCTAACTCCCAAAGCTAGGATTCTAAATTAAACTATTCTTTGTTCCACTATGCGCACATATTTCAATATGTCTACGCATGTACATATATGTAATTACACCATACCCATATATGGACCATATATAATAATGCTTTAGGACATATATGTATTAAAACCATTACTAGTACTAAACCATTCATATGTCAACAAACAATGAAGATTTACATAAACCATACAAGTATATCTTAATATTCAATCTAAGTCAAGTAATTAAACGAGATTTAAGACCTACCATAACAACTAAATCGTCTAAGCCATACCAAGTA

    TCCCCATTCCTAAAGTCAGGTAAATTTAAGCGCAGTAAGAGCCTACCATCCAGTCCATATCTTAATGCATACGGTTATTGAAGGTGAGGGACAATGATTGTGGGGGTAACACCTAGTGAATTATTCCTGGCATCTGGTTCCTACTTCAGGA

    18. Thunnus albacares IBRC0201034 AGCGCCGGTCTTGTAAACCGGACGTCGGAGGTTAAAATCCTCCCTTTTGCTCAAAGAAAGGAGATTTTAACTCCTACCCCTAACTCCCAAAGCTAGGATTCTAAATTAAACTATTCTTTGTTCCACCATGCGCACATATTTCAATATGTCTACGCATGTACATATATGTAATTACACCATACTCATATATCGACC

    ATATATAATAATGCTTTAGGACATGTATGTATTAAAACCATTACTAGTACTAAACCATTCATATGTCAACAAACAATGAAGATTTACATAAACCATACATATATATCTTAACATTTAACCTAAGTCAAGTAATTAAACGAGATTTAAGACCTACCATAACAACTAAATCGTCTAAGCCATACCAAGTATCCTCATCCCTAAAGTCAAGCAAATTTAAGCGCAGTAAGAGCCTACCATCCAGTCCATATCTTAATGCATACGGTTATTGAAGGTGAGGGACAATGATTGTGGGGGTAGCACCTAGTGAATTATTCCTGGCATCTGGTTCCTACTTCAGGAA

    19. Thunnus albacares IBRC0201035 AGCGCCGGTCTTGTAAACCGGACGTCGGAGGTTAAAATCCTCCCTTTTGCTCAAAGAAAGGAGATTTTAACTCCTACCCCTAACTCCCAAAGCTAGGATTCTAAATTAAACTATTCTTTGTTCCACTATGCGCACATATTTCAATATGTCTACGCATGTACATATATGTAATTACACCATACTCATATATCGACCATATATAATAATGCTTTAGGACATATATGTATTAAAACCATTACTAGTACTAAACCATTCATATGTCAACAAACAATGAAGGTTTACATAAACCATACAGATATATCTCAATATTCAACCTAAGTCAAGTAATTAAACGAGATTTAAGACCTACCATAACAACTAAATCGTCTAAGCCACACCAAGTATCCCCATTCCTAAAGTCAAGTAAATTTAAGCGCAGTAAGAACCTACCATCCAGTCCATATCTTAATGCATACGGTTATTGAAGGTGAGGGACAATAATTGTGGGGGTAGCACCTGGTGAATTATTCCTGGCAT

    CTGGTTCCTACTTCAGG

    20. Thunnus albacares IBRC0201036 CCAGAGCGCCGGTCTTGTAAACCGGACGTCGGAGGTTAAAATCCTCCCTTTTGCTCAAAGAAAGGAGATTTTAACTCCTACCCCTAACTCCCAAAGCTAGGATTCTAAATTAAACTATTCTTTGTTCCACTATGCGCACATATTTCAATATGTCTACGCATGTACATATATGTAATTACACCATACTCATATATCGACCATATATAATAATGCTTTAGGACATATATGTATTAAAACCATTACTAGTACTAAACCATTCATATGTCAACAAACAATGAAGATTTACATAAACCATACAGATATGTCTTAACATTCAACCTAAGTCAAGTAATTAGACGAGATTTAAGACCCACCATAACAACTAAATCGTCTAAGCCATACCAAGTA

    TCCCCATTCCTAAAGTCAAGTAAATTTAAGCGCAGTAAGAACCTACCATCCAGTCCATATCTTAATGCATACGGTTATTGAAGGTGAGGGACAATGATTGTGGGGGTAACACCTAGTGAATTATTCCTGGCATCTGGTTCCTACTTCAGGA

    21. Thunnus albacares IBRC0201037 AGAGCGCCGGTCTTGTAAACCGGACGTCGGAGGTTAAAATCCTCCCTTTTGCTCAAAGAAAGGAGATTTTAACTCCTACCCCTAACTCCCAAAGCTAGGATTCTAAATTAAACTATTCTTTGTTCCACTATGCGCACATATTTCAATATGTCTACGCATGTACATATATGTAATTACACCATACTCATATATCG

    ACCATATATAATAATGCTTTAGGACATATATGTATTAAAACCATTACTAGTACTAAACCATTCATATGTCAACAAACAATGAAGATTTACATAAACCATACAAATATATCTTAATATTCAATCTAAGTCGAGTAATTAAACGAGATTTAAGACCTACCATAACAACTAAATCGTCTAAGCCATACCAAGTATCCCCATTCCTAAAATCAGGTAAATTTAAGCGCAGTAAGAGCCTACCATCCAGTCCATATCTTAATGCATACGGTTATTGAAGGTGAGGGACAATGATTGTGGGGGTAGCACCTAGTGAATTATTCCTGGCATCTGGTTCCTACTTCAGGAA

    22. Thunnus obesus IBRC0201038 AGCGCCGGTCTTGTAAACCGGACGTCGGAGGTTAAAATCCTCCCTTTTGCTCAAAGAAAGGAGATTTTAACTCCTACCCCTAACTCCCAAAGCTAGGATTCTAAATTAAACTATTCTTTGCTCCACCGTGCGCACATATTTCAATATGTCTGCGCACGTACATATATGTAATTACACCATATTTATATATGAACCATATACAGTAATGTTCTAGGACATATATGTATTAAAACCATTGCTAGTACTAAACCATTCATATGTCAACAAACAATGAAGACTTACATAAACCATACAGATATATCCCAACACTCAAACTAAGTCAA

  • 20

    GTAATTAAACGAGATTTAAGACCTACCACAAACACTAAATCGTCTAAGCTATACCAAGTCTCCTCATCCCTGAAATCGAGTAAACTTAAGCGCAGTAAGAGCCTACCATCCAGTCCATATCTTAATGC

    ATACGGTTATTGAAGGTGAGGGACAATAATTGTGGGGGTAGCACTTAGTGAATTATTCCTGGCATCTGGTTCCTACTTCAGGAA

    23. Thunnus albacares IBRC0201039 GCCAGAGCGCCGGTCTTGTAAACCGGACGTCGGAGGTTAAAATCCTCCCTTTTGCTCAAAGAAAGGAGATTTTAACTCCTACCCCTAACTCCCAAAGCTAGGATTCTAAATTAAACTATTCTTTGTTCCACTATGCGCACATATTTCAATATGTCTACGCATGTACATATATGTAATTACACCATACTCATATATCGACCATATATAATAATGCTTTAGGACATATATGTATTAAAACCATTACTAGTACTAAACCATT

    CATATGTCAACAAACAATGAAGATTTACATAAACCATACAGATATATCTTAATATTCAATCTAAGTCAAGTAATTAAACGAGATTTAAGACCTACCATAACAACTAACTCGTCTAAGCCATACCAAGTATCCTCATTCCTAAAGTCAAGTAAATTTAAGCGCAGTAAGAGCCTACCATCCAGTCCATATCTTAATGCATACGGTTATTGAAGGTGAGGGACAATGATTGTGGGGGTAACACCTAATGAATTATTCCTGGCATCTGGTTCCTACTTCAGGA

    24. Thunnus albacares IBRC0201040 AGAGCGCCGGTCTTGTAAACCGGACGTCGGAGGTTAAAATCCTCCCTTTTGCTCAAAGAAAGGA

    GATTTTAACTCCTACCCCTAACTCCCAAAGCTAGGATTCTAAATTAAACTATTCTTTGTTCCACTATGCGCACATATTTCAATATGTCTACGCATGTACATATATGTAATTACACCATATTCATATATCGACCATATATAATAATGCTTTAGGACATATATGTATTAAAACCATTACTAGTACTAAACCATTCATATGTCAACAAACAATGAAGATTTACATAAACCATACAGATATATCTTAACATTCAACCTAAGTCAAGTAATTAAACGAGATTTAAGACCTACCATAATAACTAAATCGTCTAAGCCATACCAAGTATCCCCATCCCTAAAGTCAAGTAAATTTAAGCGCAGTAAGAGCCTACCATCCAGTCCATATCTTAATGCATACGGTTATTGAAGGTGAGGGACAATGATTGTGGGGGTAACACCTAGTGAATTATTCCTGGCATCTGGTTCCTACTTCAGGA

    25. Thunnus albacares IBRC0201041

    TCAGCGCCAGAGCGCCGGTCTTGTAAACCGGACGTCGGAGGTTAAAATCCTCCCTTTTGCTCAAAGAAAGGAGATTTTAACTCCTACCCCTAACTCCCAAAGCTAGGATTCTAAATTAAACTATTCTTTGTTCCACTATGCGCACATATTTCAATATGTCTACGCATGTACATATATGTAATTACACCATACTCATATATCGACCATATATAATAATGCTTTAGGACATATATGTATTAAAACCATTACTAGTACTAAACCATTCATATGTCAACAAACAATGAAGATTTACATAAACCATACAGATATATCTTAATATTCAGTCTAAGTCAAGTAATTAGACGAGATTTAAGACCTACCATAATAACTAAATCGTCTAAGCCATACC

    AAGTATCCTCATTCCTAAAGTCAGGTAAATTTAAGCGCAGTAAGAACCTACCATCCAGTCCATATCTTAATGCATACGGTTATTGAAGGTGAGGGACAATGATTGTGGGGGTAACACCTAGTGAATTATTCCTGGCATCTGGTTCCTACTTCAGG

    26. Thunnus albacares IBRC0201042 AGAGCGCCGGTCTTGTAAACCGGACGTCGGAGGTTAAAATCCTCCCTTTTGCTCAAAGAAAGGAGATTTTAACTCCTACCCCTAACTCCCAAAGCTAGGATTCTAAATTAAACTATTCTTTGTTCCACTATGCGCACATATTTCAATATGTCTACGCATGTACATATATGTAATTACACCATACTCATATATCGACCATATATAATAATGCTTTAGGACATATATGTATTAAAACCATTACTAGTACTAAACCATTCAT

    ATGTCAACAAACAATGAAGATTTACATAAACCATACAGATATATCTTAACATTCAACCTAAGTCAAGTAATTAGACGAGATTTAAGACCTACCATAACAACTAAATCGTCTAAGCCATACCAAGTATCCTCATTCCTAAAGTCGAGTAAATTTGAGCGCAGTAAGAACCTACCATCCAGTCCATATCTTAATGCATACGGTTATTGAAGGTGAGGGACAATGATTGTGGGGGTAACACCTAGTGAATTATTCCTGGCATCTGGTTCCTACTTCAGGA

    27. Thunnus obesus IBRC0201043 AGCGCCGGTCTTGTAAACCGGACGTCGGAGGTTAAAATCCTCCCTTTTGCTCAAAGAAAGGAGA

    TTTTAACTCCTACCCCTAACTCCCAAAGCTAGGATTCTAAATTAAACTATTCTTTGCTCCACCGTGCACACATATTTCAATATGTCTGCGCACAATACATATATGTAATTACACCATATCTATATATGAACCATATACAATAATGTTCTAGGACATATATGTATTAAAACCATTACTAGTACTAAACCATTCATATGTCAACAAACAATGAAGACTTACATAAACCATACGAATATATTCCAACATTCAGATTAAGTCAAGTAATTAAACGAGATTTAAGACCTACCACAAACACTAAATCGTCTAAGCCATACCAAGTCTCCCCATCCCTGAAATCAAGTAAATTTAAGCGCAGTAAGAACCTACCATCCAGTCCATATCTTAATGCATACGGTTATTGAAGGTGAGGGACAACAATTGTGGGGGTAGCTCTTAGTGAATTATTCCTGGCATCTGGTTCCTACTTCAGGAA

    28. Thunnus albacares IBRC0201044

    AGAGCGCCGGTCTTGTAAACCGGACGTCGGAGGTTAAAATCCTCCCTTTTGCTCAAAGAAAGGAGATTTTAACTCCTACCCCTAACTCCCAAAGCTAGGATTCTAAATTAAACTATTCTTTGTTCCACTATGCGCACATATTTCAATATGTCTACGCATGTACATATATGTAATTACACCATACTCATATATCG

  • 21

    ACCATATATAATAATGCTTTAGGACATATATGTATTAAAACCATTACTAGTACTAAACCATTCATATGTCAACAAACAATGAAGACTTACATAAACCATACAAATATATCTTAACATTCAACCTAAGTC

    AAGTAATTAAACGAGATTTAAGACCTACCATAACAACTAAATCGTCTAAGCCATACCAAGTATCCTCATTCCTAAAGTCAGGTAAACTTAAGCGCAGTAAGAGCCTACCATCCAGTCCATATCTTAATGCATACGGTTATTGAAGGTGAGGGACAATGATTGTGGGGGTAACACCTAGTGAATTATTCCTGGCATCTGGTTCCTAACTTCAGGA

    29. Thunnus albacares IBRC0201045 CCAGAGCGCCGGTCTTGTAAACCGGACGTCGGAGGTTAAAATCCTCCCTTTTGCTCAAAGAAAGGAGATTTTAACTCCTACCCCTAACTCCCAAAGCTAGGATTCTAAATTAAACTATTCTTTGTTCCA

    CCATGCGCACATATTTCAATATGTCTACGCATGTACATATATGTAATTACACCATACTCATATATCGACCATATATAATAATGCTTTAGGACATATATGTATTAAAACCATTACTAGTACTAAACCATTCATATGTCAACAAACAATGAAGATTTACATAAACCATACATATATATCTTAACATTTAATCTAAGTCAAGTAATTAAACGAGATTTAAGACCTACCATAATAACTAAATCGTCTAAGCCATACCAAGTATCCTCATTCCTAAAGTCAAGCAAATTTAAGCGCAGTAAGAGCCTACCATCCAGTCCATATCTTAATGCATACGGTTATTGAAGGTGAGGGACAATGATTGTGGGGGTAACACCTAGTGAACTATTCCTGGCATCTGGTTCCTACTTCAGGA

    30. Thunnus albacares IBRC0201046 GAGCGCCGGTCTTGTAAACCGGACGTCGGAGGTTAAAATCCTCCCTTTTGCTCAAAGAAAGGAGATTTTAACTCCTACCCCTAACTCCCAAAGCTAGGATTCTAAATTAAACTATTCTTTGTTCCACTATGCGCACATATTTCAATATGTCTACGCATGTACATATATGTAATTACACCATACTCATATATTGACCATATATAATAATGCTTTAGGACATATATGTATTAAAACCATTACTAGTACTAAACCATTCATATGTCAACAAACAATGAAGATTTACATAAACCATACAGATATATCTTAATATTCAACCTAAGTCGAGTAATTAAACGAGATTTAAGACCTACCATAACAACTAAATCGTCTAAGCCATACCAAGTATCCTCATTCCTAAAATCAGGTAAATTTAAGCGCAGTAAGAGCCTACCATCCAGTCCATATCTTAATGC

    ATACGGTTATTGAAGGTGAGGGACAATGATTGTGGGGGTAACACCTAGTGAATTATTCCTGGCATCTGGTTCCTACTTCAGGA

    31. Thunnus albacares IBRC0201047 AGAGCGCCGGTCTTGTAAACCGGACGTCGGAGGTTAAAATCCTCCCTTTTGCTCAAAGAAAGGAGATTTTAACTCCTACCCCTAACTCCCAAAGCTAGGATTCTAAATTAAACTATTCTTTGTTTCACTATGCGCACATATTTCAATATGTCTACGCATGTACATATATGTAATTACACCATACTCATATATCGACCATATATAATAATGCTTTAGGACATATATGTATTAAAACCATTACTAGTACTAAACCATTCATA

    TGTCAACAAACAATGAAGATTTACATAAACCATACAGATATACCTCAATATTCGATCTAAGTCAAGTAATTAGACGAGATTTAAGACCTACCATAACAACTAAATCGTCTAAGCCATACCAAGTATCCTCATTCCTAAAGTCAGGTAAATTTAAGCGCAGTAAGAGCCTACCATCCAGTCCATATCTTAATGCATACGGTTATTGAAGGTGAGGGACAATGATTGTGGGGGTAACACCTAGTGAATTATTCCTGGCATCTGGTTCCTACTTCAGGA

    32. Thunnus albacares IBRC0201048 AGCGCCGGTCTTGTAAACCGGACGTCGGAGGTTAAAATCCTCCCTTTTGCTCAAAGAAAGGAGATTTTAACTCCTACCCCTAACTCCCAAAGCTAGGATTCTAAATTAAACTATTCTTTGTTCCACTATG

    CGCACATATTTCAATATGTCTGCGCATGTACATATATGTAATTACACCATATTCATATATCGACCATATATAATAATGCTTTAGGACATATATGTATTAAAACCATTACTAGTACTAAACCATTCATATGTCAACAAACAATGAAGATTTACATAAACCATACAGATATATCTTAATATTCAGCCTAAGTCAAGTAATTAAACGAGATTTAAGACCTACCATAACAACTAAATCGTCTAAGCCATACCAAGTATCCCCATTCCTAAAGTCAAGTAAATTTAAGCGCAGTAAGAGCCTACCATCCAGTCCATATCTTAATGCATACGGTTATTGAAGGTGAGGGACAATAATTGTGGGGGTAACACCTAGTGAATTATTCCTGGCATCTGGTTCCTACTTCAGGAA

    33. Thunnus obesus IBRC0201049 AGCGCCGGTCTTGTAAACCGGACGTCGGAGGTTAAAATCCTCCCTTTTGCTCAAAGAAAGGAGATTTTAACTCCTACCCCTAACTCCCAAAGCTAGGATTCTAAATTAAACTATTCTTTGCTCCACCGTGTGCACATATTTCAATATGTCTGCGCACGTACATATATGTAATTACACCATATCCATATATGGACCATATACAGTAATGTTCTAGGACATATATGTATTAAAACCATTACTAGTACTAAACCATTCATATGTCAACAAACAATGAAGACTTACATAAACCATACAGATATATTCCAACATTCAAATTAAGTCAAGTAATTAAACGAGACTTAAGACCTACCACAAACACTAAATCGTCTAAGCCATACCAAGTCTCCTCATCCCTGAAATCGAGTAAATTTAAGCGCAGTAAGAGCCTACCATCCAGTCCATATCTTAATGC

    ATACGGTTATTGAAGGTGAGGGACAATAATTGTGGGGGTAGCACTCAGTGAATTATTCCTGGCATCTGGTTCCTACTTCAGGA

  • 22

    34. Thunnus albacares IBRC0201050 AGAGCGCCGGTCTTGTAAACCGGACGTCGGAGGTTAAAATCCTCCCTTTTGCTCAAAGAAAGGA

    GATTTTAACTCCTACCCCTAACTCCCAAAGCTAGGATTCTAAATTAAACTATTCTTTGTTCCACTATGCGCACATATTTCAATATGTCTACGCATGTACATATATGTAATTACACCATACTCATATATCGACCATATATAATAATGCTTTAGGACATATATGTATTAAAACCATTACTAGTACTAAACCATTCATATGTCAACAAACAATGAAGATTTACATAAACCATACAGGTATATCTCAATATTCAACCTAAGTCAAGTAATTAAACGAGATTTAAGACCTACCATAACAACTAAATCGTCTAAGCCATACCAAGTATCCCCATTCCTAAAGTCAGGTAAATTTAAGCGCAGTAAGAGCCTACCATCCAGTCCATATCTTAATGCATACGGTTATTGAAGGTGAGGGACAATGGTTGTGGGGGTAACACCTAGTGAATTATTCCTGGCATCTGGTTCCTACTTCAGGAA

    35. Thunnus obesus IBRC0201051

    NGCGCCGGTCTTGTAAACCGGACGTCGGAGGTTAAAATCCTCCCTTTTGCTCAAAGAAAGGAGATTTTAACTCCTACCCCTAACTCCCAAAGCTAGGATTCTAAATTAAACTATTCTTTGCTCCACCATGCGCACATATTTCAATATGTCTGCGCACGTACATATATGTAATTACACCATATCTATATATGAACCATATACAGTAATGTTCTAGGACATATATGTATTAAAACCATTACTAGTACTAAACCATTCATATATCAACAAACAATGAAGATTTACATAAACCATACAGATATATTCCAACATTCAACCTAAGTCAGGTAATTAAACGAGATTTAAGACCTACCACAAACACTAAATCGTCTAAGCCATACCAAGTCTCCT

    CATCCCTGAAATCAAGTAAATTTAAGCGCAGTAAGAACCTACCATCCAGTCCATATCTTAATGCATACGGTTATTGAAGGTGAGGGACAATAATTGTGGGGGTAGCACTCAGTGAATTATTCCTGGCATCTGGTTCCTACTTCAGGAA

    36. Thunnus albacares IBRC0201052 AGAGCGCCGGTCTTGTAAACCGGACGTCGGAGGTTAAAATCCTCCCTTTTGCTCAAAGAAAGGAGATTTTAACTCCTACCCCTAACTCCCAAAGCTAGGATTCTAAATTAAACTATTCTTTGTTCCACTATGCGCACATATTTCAATATGTCTACGCATGTACATATATGTAATTACACCATACTCATATATCG

    ACCATATATAATAATGCTTTAGGACATATATGTATTAAAACCATTACTAGTACTAAACCATTCATATGTCAACAAACAATGAAGATTTACATAAACCATACAGATATATCTTAATATTCAACCTAAGTCAAGTAATTAAACGAGATTTAAGACCTACCATAACAACTAAATCGTCTAAGCCATACCAAGTATCCTCATTCCTAAAGTCAGGTAAATTTAAGCGCAGTAAGAGCCTACCATCCAGTCCATATCTTAATGCATACGGTTATTGAAGGTGAGGGACAATGATTGTGGGGGTAGCACCTAGTGAATTATTCCTGGCATCTGGTTCCTACTTCAGGA

    37. Thunnus albacares IBRC0201053 AGAGCGCCGGTCTTGTAAACCGGACGTCGGAGGTTAAAATCCTCCCTTTTGCTCAAAGAAAGGAGATTTTAACTCCTACCCCTAACTCCCAAAGCTAGGATTCTAAATTAAACTATTCTTTGTTCCACTATGCGCACATATTTCAATATGTCTACGCATGTACATATATGTAATTACACCATACTCATATATCGACCATATATAATAATGCTTTAGGACATATATGTATTAAAACCATTACTAGTACTAAACCATTCATATGTCAACAAACAATGAAGACTTACATAAACCATACAGATATATCTTAACATTCAACCTAAGTCAAGTAATTAGACGAGATTTAAGACCCACCATAACAACTAAATCGTCTAAGCCATACCAAGTATCCCCATTCCTAAAGTCGAGTAAATTTAAGCGCAGTAAGAACCTACCATCCAGTCCATATCTTAATGCATACGGTTATTGAAGGTGAGGGACAATGATTGTGGGGGTAACACCTAGTGAATTATTCCTGGCATCTGGTTCCTACTTCAGGA

    38. Thunnus albacares IBRC0201054

    AGAGCGCCGGTCTTGTAAACCGGACGTCGGAGGTTAAAATCCTCCCTTTTGCTCAAAGAAAGGAGATTTTAACTCCTACCCCTAACTCCCAAAGCTAGGATTCTAAATTAAACTATTCTTTGTTCCACCATGCGCACATATTTCAATATGTCTACGCATGTACATATATGTAATTACACCATACTCATATATCGACCATATATAATAATGCTTTAGGACATATATGTATTAAAACCATTACTAGTACTAAACCATTCATATGTCAACAAACAATGAAGATTTACATAAACCATACATATATATCTTAACATTTAACCTAAGTCAAGTAATTAAACGAGATTTAAGACCTACCATAACAACTAAATCGTCTAAGCCATACCAAGTATC

    CTCATTCCTAAAGTCAAGCAAATTTAAGCGCAGTAAGAGCCTACCATCCAGTCCATATCTTAATGCATACGGTTATTGAAGGTGAGGGACAATGATTGTGGGGGTAACACCTAGTGAATTATTCCTGGCATCTGGTTCCTACTTCAGGA

    39. Thunnus albacares IBRC0201055 AGCGCCGGTCTTGTAAACCGGACGTCGGAGGTTAAAATCCTCCCTTTTGCTCAAAGAAAGGAGATTTTAACTCCTACCCCTAACTCCCAAAGCTAGGATTCTAAATTAAACTATTCTTTGTTCCACTATGCGCACATATTTCAATATGTCTACGCATGTACATATATGTAATTACACCATACTCATATATCGACC

    ATATATAATAATGCTTTAGGACATATATGTATTAAAACCATTACTAGTACTAAACCATTCATATGTCAACAAACAATGAAGATTTACATAAACCATACAGATATATCTTAATATTCAATTTAAGTCAAGTAATTAAACGAGATTTAAGACCTACCATAACAACTAAATCGTCTAAGTCATACCAAGTATCCCCATTCCTAAAGTCAAGCAAATTTAAGCGCAGTAAGAGCCTACCATCCAGTCCATATCTTAATGCA

  • 23

    TACGGTTATTGAAGGTGAGGGACAATGATTGTGGGGGTAACACCTAGTGAATTATTCCTGGCATCTGGTTC

    40. Thunnus obesus IBRC0201056

    AGAGCGCCGGTCTTGTAAACCGGACGTCGGAGGTTAAAATCCTCCCTTTTGCTCAAAGAAAGGAGATTTTAACTCCTACCCCTAACTCCCAAAGCTAGGATTCTAAATTAAACTATTCTTTGCTCCACCGTGCGCACATATTTCAATATGTCTGCACACGTACATATATGTAATTACACCATATCTATATATGGACCATATACAGTAATGTTCTAGGACATATATGTATTAAAACCATTACTAGTACTAAACCATTCATATATCAACAAACAATGAAGACTTACATAAACCATACAGATATATTCCAACATTCAAACTAAACCAAGTAATTAAACGAGATTTAAGACCTACCACAAACACTAAATCGTCTAAGCCATACCAAGTCTC

    CTCATCCCTGAAATCAAGTAAATTTAAGCGCAGTAAGAACCTACCATCCAGTCCATATCTTAATGCATACGGTTATTGAAGGTGAGGGACAATAATTGTGGGGGTAGCACTCAGTGAATTATTCCTGGCATCTGGTT

    41. Thunnus albacares IBRC0201057 AGCGCCGGTCTTGTAAACCGGACGTCGGAGGTTAAAATCCTCCCTTTTGCTCAAAGAAAGGAGATTTTAACTCCTACCCCTAACTCCCAAAGCTAGGATTCTAAATTAAACTATTCTTTGTTCCACCATGCGCACATATTTCAATATGTCTACGCATGTACATATATGTAATTACACCATACTCATATATCGACC

    ATATATAATAATGCTTTAGGACATATATGTATTAAAACCATTACTAGTACTAAACCATTCATATGTCAACAAACAATGAAGACTTACATAAACCATACATATATATCTTAACATTTAATCTAAGTCAAGTAATTAAACGAGATTTAAGACCTACCATAACAACTAAATCGTCTAAGCCATACCAAGTATCCTCATTCCTAAAGTCAAGCAAATTTAAGCGCAGTAAGAGCCTACCATCCAGTCCATATCTTAATGCATACGGTTATTGAAGGTGAGGGACAATAATTGTGGGGGTAACACCTAGTGAATTATTCCTGGCATCTGGTT

    42. Thunnus albacares IBRC0201059 AGCGCCGGTCTTGTAAACCGGACGTCGGAGGTTAAAATCCTCCCTTTTGCTCAAAGAAAGGAGATTTTAACTCCTACCCCTAACTCCCAAAGCTAGGATTCTAAATTAAACTATTCTTTGTTCCACTATGCGCACATATTTCAATATGTCTACGCATGTACATATATGTAATTACACCATACTCATATATCGACCATATATAATAATGCTTTAGGACATATATGTATTAAAACCATTACTAGTACTAAACCATTCATATATCAACAAACAATGAAGATTTACATAAACCATACAGATATATCTTAACATTCAACCTAAGTCAAGTAATTAGACGAGATTTAAGACCTACCAATAACAACTAAATCGTCTAAGCCATACCAAGTATCCTCATTCCTAAAGTCAAGTAAATTTAAGCGCAGTAAGAGCCTACCATCCAGTCCATATCTTAATGCATACGGTTATTGAAGGTGAGGGACAATGATTGTGGGGGTAGCACCTAGTGAATTATTCCTGGCA

    TCTGG

    43. Thunnus obesus IBRC0201060 CCAGAGCGCCGGTCTTGTAAACCGGACGTCGGAGGTTAAAATCCTCCCTTTTGCTCAAAGAAAGGAGATTTTAACTCCTGCCCCTAACTCCCAAAGCTAGGATTCTAAATTAAACTATTCTTTGCTCCACCGTACGCACATATTTCAATATGTCTGTGCACGTACATATATGTAATTACACCATATCTATATATGGACCATATACAGTAATGTTTTAGGACATATATGTATTAAAACCATTACTAGTACTAAACCATTCATATATCAACAAACAATGAAGATTTACATAAACCATACAAATATATTCCAACATTCAAGCTAAGTCGGGTGATTAAACGAGATTTAAGACCTACCACAAACACTAAATCGTCTAAGCCATACCAAGTC

    TCCTCATCCCTGAAATCAAGTAAATTTAAGCGCAGTAAGAACCTACCATCCAGTCCATATCTTAATGCATACGGTTATTGAAGGTGAGGGACAATAATTGTGGGGGTAGCACTTAGTGAATTATTCCTGGCATCTGGTTCCTACTTCAGGA

    44. Thunnus thynnus HQ630710 Spanyol TGTACATATATGTAATTACACCATATTCATATATAGACCATATATAATAATGTTTTAGGACATATATGTATTAAAACCATTACTAGTATTAAACCATTCATATGCCAATAAATAATGAAGATTTACATAAACCATACAAATAAACCTCAACATTCATCTTGAATTCAGGTGATTAAACGAGATTTAAGACCTA

    ACATAAATCTAAATCGTCTAAGCCATACCAAGTCTCCTCATCTCTGACATCTCGTAAACTTAAGCGCAGTAAGAACCTACCATCCAGTCCATTTCTTAATGCATACGGTTATTGAAGGTGAGGGACAATAATTGTGGGGGTAACACCTAGTGAATTATTCCTGGCATTGGTTCCTACTTCAGGGCCATAGCTTGGTAACACTCCCCATTCTTTCATCGACGCTTGCATAAGTTATTGGTGGAGTACATGAGATTCATTAAGCCACATGCCGGGCGTTCTCTCTAGGGGGTCAGGTTATTTTTTTCTCTCCTTCCTTTCACTTGACATCTCACAGTGCAAATGCAACAATGATCAACAAGGTAGAACATTTTCTTGCTTGCAGGGTAAATAGTCTGCATGGCTTAATTCCTATTACCTAAATAACCACATAAGAGGATATCACGAGCATAATGATAATATTACCCGTAAAATATCTAAGACACCCCCTCTCGGCTTTTGCGCGTTAAACCCCCCTACCC

    CCCTAAACTCGTGATATCATTAACACTCCTGTAAACCCCCCGTAAACAGGAAAATCTCGAGTGGGGTATTTTATGGCCCA

  • 24

    45. Thunnus maccoyii HQ630707 Spanyol TGTACATATATGTAATTACACCATATTTATATATCGACCATACATAATAATGCTTTAGGACATAT

    ATGTATTAAAACCATTACTAGTATTAAACCATTCATATGTCAACAAACAACGAAGATTTACATAAACCATACAGATAAACTCCAACATTCTCTTAAATTCAAGTAACTAAACGAGATTTAAGACCTAACACAAATCTAAATCGTCTAAGCCATACCAAGTCTCCTCATCCCTGAGGTCTGGTAAATTCAAGCGCAGTAAGAACCTACCATCCAGTCCATTTCTTAATGCACACGGTTATTGAAGGTGAGGGACAATAATTGTGGGGGTAGCACTCAGTGAATTATTCCTGGCATCTGGTTCCNACTTCAGGGCCATGACTTGGTAACATTCCCCACTCTTTCATCGACGCTTGCATAAGTTGTTGGTGGAGTACATGAAATTCATTAAGCCACATGCCGGGCGTTCTCTNTAGGGGGTCAGGTTATTTTTTTCTCTCCTTCCTTTCATTTGGCATCTCACAGTGCAAATGCAACAATGATCAACAAGGTAGAACATTTTCTTGCTTGCAAGTAAAT

    AGTCTGCATGGCTTAATTCCTATTACCTAAATAACCACATAGAGGGATATCACGAGCATAATGATAATATTACCCGTAAAATATCTAAGACTCCCCCTCTCGGCTTTTGCGCGTTAAACCCCCCTACCCCCCTAAACTCGTGATATCATTAACACTCCTGTAAACCCCCCGTAAACAGGAAAATCTCGAGTGGGGTATTTTATGGCCCA

  • 1

    Lampiran 5. Matriks jarak genetik antara spesies tuna

    1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44

    IBRC0201017

    IBRC0201019 0,030

    IBRC0201020 0,021 0,027

    IBRC0201021 0,033 0,040 0,037

    IBRC0201022 0,018 0,030 0,027 0,040

    IBRC0201024 0,030 0,000 0,027 0,040 0,030

    IBRC0201025 0,012 0,024 0,021 0,033 0,024 0,024

    IBRC0201027 0,021 0,015 0,024 0,037 0,021 0,015 0,015

    IBRC0201028 0,027 0,021 0,024 0,043 0,021 0,021 0,027 0,018

    IBRC0201029 0,027 0,015 0,024 0,043 0,027 0,015 0,021 0,018 0,024

    IBRC0201030 0,030 0,030 0,033 0,046 0,027 0,030 0,024 0,021 0,027 0,027

    IBRC0201031 0,015 0,027 0,018 0,027 0,027 0,027 0,009 0,018 0,030 0,024 0,027

    IBRC0201032 0,033 0,027 0,043 0,030 0,033 0,027 0,033 0,024 0,037 0,037 0,040 0,033

    IBRC0201033 0,030 0,024 0,033 0,043 0,030 0,024 0,024 0,015 0,027 0,027 0,030 0,021 0,024

    IBRC0201034 0,030 0,037 0,040 0,027 0,037 0,037 0,030 0,033 0,046 0,033 0,037 0,030 0,027 0,040

    IBRC0201035 0,034 0,034 0,037 0,043 0,027 0,034 0,034 0,030 0,043 0,030 0,046 0,030 0,037 0,040 0,040

    IBRC0201036 0,021 0,027 0,018 0,030 0,027 0,027 0,021 0,024 0,030 0,024 0,033 0,018 0,037 0,033 0,033 0,030

    IBRC0201037 0,030 0,024 0,034 0,043 0,030 0,024 0,024 0,015 0,027 0,027 0,030 0,021 0,030 0,018 0,033 0,034 0,034

    IBRC0201039 0,021 0,015 0,030 0,030 0,021 0,015 0,021 0,012 0,024 0,024 0,027 0,024 0,018 0,021 0,027 0,030 0,024 0,021

    IBRC0201040 0,018 0,030 0,027 0,033 0,012 0,030 0,018 0,021 0,027 0,021 0,015 0,021 0,033 0,030 0,024 0,034 0,021 0,030 0,021

    IBRC0201041 0,027 0,015 0,018 0,037 0,021 0,015 0,027 0,018 0,012 0,024 0,027 0,024 0,030 0,027 0,040 0,037 0,024 0,027 0,018 0,027

    IBRC0201042 0,024 0,024 0,015 0,027 0,030 0,024 0,024 0,027 0,034 0,027 0,037 0,021 0,033 0,037 0,030 0,034 0,015 0,037 0,021 0,024 0,021

    IBRC0201044 0,018 0,024 0,027 0,030 0,030 0,024 0,012 0,021 0,034 0,027 0,030 0,009 0,030 0,024 0,027 0,040 0,027 0,024 0,021 0,024 0,027 0,024

    IBRC0201045 0,027 0,027 0,037 0,024 0,027 0,027 0,027 0,024 0,030 0,037 0,027 0,027 0,018 0,030 0,015 0,043 0,030 0,030 0,018 0,021 0,024 0,027 0,024

    IBRC0201046 0,027 0,021 0,030 0,037 0,027 0,021 0,021 0,018 0,030 0,024 0,033 0,024 0,030 0,024 0,033 0,037 0,030 0,015 0,018 0,027 0,024 0,027 0,021 0,030

    IBRC0201047 0,030 0,000 0,027 0,040 0,030 0,000 0,024 0,015 0,021 0,015 0,030 0,027 0,027 0,024 0,037 0,034 0,027 0,024 0,015 0,030 0,015 0,024 0,024 0,027 0,021

    IBRC0201048 0,015 0,027 0,024 0,037 0,003 0,027 0,021 0,018 0,024 0,024 0,030 0,024 0,030 0,027 0,033 0,024 0,024 0,027 0,018 0,015 0,024 0,027 0,027 0,030 0,024 0,027

    IBRC0201050 0,024 0,018 0,027 0,040 0,024 0,018 0,018 0,015 0,027 0,015 0,030 0,021 0,027 0,018 0,037 0,027 0,027 0,024 0,021 0,024 0,027 0,030 0,024 0,033 0,021 0,018 0,021

    IBRC0201052 0,021 0,015 0,024 0,030 0,021 0,015 0,015 0,012 0,024 0,018 0,027 0,018 0,024 0,021 0,021 0,024 0,024 0,015 0,012 0,021 0,018 0,021 0,015 0,024 0,012 0,015 0,018 0,015

    IBRC0201053 0,018 0,030 0,015 0,033 0,030 0,030 0,018 0,027 0,034 0,027 0,037 0,015 0,040 0,037 0,037 0,034 0,009 0,037 0,027 0,024 0,027 0,012 0,024 0,033 0,034 0,030 0,027 0,030 0,027

    IBRC0201054 0,021 0,027 0,030 0,018 0,027 0,027 0,021 0,024 0,037 0,030 0,033 0,021 0,018 0,030 0,009 0,037 0,024 0,030 0,018 0,021 0,030 0,021 0,018 0,006 0,024 0,027 0,024 0,027 0,018 0,027

    IBRC0201055 0,024 0,024 0,034 0,040 0,024 0,024 0,024 0,015 0,021 0,027 0,030 0,027 0,027 0,024 0,030 0,034 0,027 0,024 0,015 0,024 0,027 0,030 0,030 0,021 0,027 0,024 0,021 0,024 0,021 0,030 0,021

    IBRC0201057 0,024 0,030 0,040 0,027 0,030 0,030 0,024 0,027 0,040 0,040 0,037 0,024 0,021 0,033 0,018 0,040 0,033 0,033 0,021 0,030 0,033 0,030 0,021 0,009 0,033 0,030 0,027 0,037 0,027 0,030 0,009 0,024

    IBRC0201059 0,021 0,021 0,024 0,030 0,027 0,021 0,021 0,024 0,030 0,024 0,027 0,024 0,030 0,033 0,021 0,030 0,018 0,027 0,018 0,021 0,024 0,015 0,021 0,024 0,024 0,021 0,024 0,027 0,012 0,021 0,018 0,027 0,027

    IBRC0201016 0,079 0,085 0,092 0,089 0,079 0,085 0,085 0,089 0,092 0,092 0,085 0,082 0,078 0,086 0,085 0,079 0,092 0,085 0,082 0,079 0,092 0,082 0,079 0,082 0,089 0,085 0,079 0,089 0,079 0,085 0,082 0,085 0,078 0,072

    IBRC0201018 0,086 0,096 0,103 0,096 0,089 0,096 0,092 0,100 0,103 0,096 0,089 0,089 0,099 0,096 0,092 0,089 0,096 0,096 0,092 0,082 0,096 0,092 0,092 0,096 0,092 0,096 0,089 0,100 0,089 0,092 0,096 0,096 0,089 0,082 0,040

    IBRC0201023 0,099 0,103 0,110 0,121 0,110 0,103 0,106 0,114 0,110 0,110 0,113 0,103 0,124 0,110 0,117 0,110 0,110 0,103 0,113 0,110 0,117 0,106 0,106 0,113 0,114 0,103 0,110 0,114 0,110 0,099 0,113 0,110 0,106 0,096 0,049 0,059

    IBRC0201038 0,092 0,096 0,103 0,103 0,089 0,096 0,092 0,100 0,103 0,096 0,096 0,096 0,106 0,103 0,092 0,096 0,103 0,096 0,092 0,082 0,103 0,092 0,086 0,096 0,092 0,096 0,089 0,100 0,089 0,092 0,096 0,103 0,089 0,089 0,049 0,046 0,059

    IBRC0201043 0,089 0,114 0,106 0,110 0,092 0,114 0,103 0,110 0,106 0,106 0,106 0,092 0,121 0,100 0,106 0,099 0,106 0,099 0,110 0,092 0,106 0,110 0,103 0,110 0,110 0,114 0,092 0,110 0,106 0,103 0,110 0,106 0,103 0,106 0,053 0,043 0,049 0,053

    IBRC0201049 0,082 0,092 0,100 0,099 0,086 0,092 0,089 0,096 0,100 0,092 0,092 0,092 0,103 0,093 0,089 0,092 0,100 0,092 0,089 0,079 0,100 0,089 0,089 0,092 0,089 0,092 0,086 0,096 0,086 0,089 0,092 0,092 0,085 0,086 0,040 0,024 0,053 0,034 0,043

    IBRC0201051 0,089 0,096 0,100 0,092 0,086 0,096 0,096 0,100 0,103 0,092 0,089 0,093 0,100 0,097 0,089 0,086 0,093 0,096 0,092 0,079 0,096 0,089 0,096 0,096 0,089 0,096 0,086 0,096 0,086 0,096 0,092 0,103 0,096 0,079 0,043 0,015 0,062 0,040 0,043 0,030

    IBRC0201056 0,089 0,100 0,107 0,099 0,092 0,100 0,096 0,103 0,107 0,099 0,092 0,092 0,110 0,100 0,096 0,092 0,100 0,100 0,096 0,086 0,100 0,096 0,096 0,099 0,096 0,100 0,092 0,103 0,092 0,096 0,099 0,107 0,092 0,086 0,046 0,018 0,059 0,040 0,043 0,024 0,018

    IBRC0201060 0,092 0,096 0,103 0,092 0,089 0,096 0,100 0,100 0,103 0,096 0,089 0,089 0,096 0,089 0,089 0,089 0,096 0,082 0,092 0,082 0,096 0,092 0,092 0,092 0,086 0,096 0,089 0,100 0,089 0,100 0,092 0,103 0,092 0,082 0,043 0,024 0,073 0,053 0,049 0,043 0,021 0,030

    HQ630707 0,106 0,102 0,102 0,113 0,102 0,102 0,109 0,113 0,120 0,105 0,109 0,106 0,127 0,123 0,109 0,106 0,113 0,116 0,113 0,099 0,106 0,106 0,109 0,116 0,113 0,102 0,102 0,109 0,099 0,113 0,113 0,116 0,116 0,106 0,105 0,098 0,116 0,116 0,112 0,098 0,095 0,095 0,105

    HQ630710 0,116 0,109 0,109 0,119 0,105 0,109 0,116 0,119 0,127 0,112 0,116 0,105 0,119 0,120 0,116 0,116 0,116 0,116 0,116 0,102 0,112 0,109 0,102 0,116 0,109 0,109 0,105 0,116 0,112 0,116 0,112 0,119 0,116 0,116 0,112 0,120 0,145 0,123 0,127 0,120 0,116 0,123 0,105 0,083

    25

  • 1

    RIWAYAT HIDUP

    Penulis dilahirkan di Bali pada tanggal 13 Januari

    1991 dari ayah I Wayan Joka dan ibu Ni Made Rentet.

    Penulis adalah putra pertama dari tiga bersaudara. Tahun 2009

    penulis lulus dari SMA Negeri 1 Denpasar dan pada tahun

    yang sama penulis lulus seleksi masuk Institut Pertanian

    Bogor (IPB) melalui jalur Undangan Seleksi Masuk IPB dan

    diterima di Departemen Ilmu dan Teknologi Kelautan.

    Selama mengikuti perkuliahan penulis menjadi asisten

    mata kuliah Biologi Laut pada Tahun ajaran 2012/2013 dan Asisten

    Keanekaragaman Hayati Laut pada tahun ajaran 2012/2013. Penulis aktif sebagai

    pengurus HIMITEKA bagian Keilmuan Pengindraan Jauh Kelautan Tahun

    2011/2012. Bulan Juli-Agustus 2012 penulis melaksanakan Praktek Kerja Lapang

    di Pelabuuhan Perikanan Pantai (PPP) Rembang, Jawa tengah dengan judul

    Pendugaan Hasil Tangkapan Lestari Ikan Pelagis Di Perairan Sekitar Tasik

    Agung, Rembang, Jawa Tengah

    Penulis aktif sebagai anggota Keluarga Mahasiswa Hindu Dharma

    (KMHD) IPB Tahun 2009/2010 dan sebgai pengurus bidang Kewirausahaan

    KMHD IPB Tahun 2010/2011. Penulis aktif sebagai anggota Fisheries Diving

    Club (FDC) IPB Pada Tahun 2009/2010. Penulis mengikuti pendidikan dan

    pelatihan selam sertifikasi A1 Tahun 2009/2010 dan sertifikasi A2 Tahun

    2011/2012. Penulis aktif menjadi pengurus FDC bagian Pendidikan dan Latihan

    periode 2010/2011 dan 2011/2012. Penulis mengikuti Jambore selam II Forum

    Penyelam Mahasiswa di Makassar Tahun 2011 dan Jambore selam III Forum

    Penyelam Mahasiswa di Bali Tahun 2012. Penulis juga mengikuti Ekspedisi

    Zooxanthellae 12 di Daerah Perbatasan Indonesia-Malaysia Desa Temajuk,

    Kalimantan Barat pada Tahun 2012.

    Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar sarjana pada program

    studi Ilmu dan Teknologi Kelautan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan,

    Institut Pertanian Bogor, penulis menyusun skripsi dengan judul Struktur Genetik dan Filogenetik Ikan Tuna (Thunnus spp.) di TPI Tanjung Luar, Lombok

    Berdasarkan DNA Mitokondria.

    26