Soal HPLCSoalSeorang mahasiswa akan menganalisis kandungan vitamin di dalam sediaan tablet multivitamineral. Metode yang digunakan adalah kromatografi PLC/KCKT. Prosedurnya adalah :Sejumlah 20 tablet yang sudah memenuhi keseragaman bobot tablet, bobot rata-rata tablet adalah 128,4 mg. Setelah semua tablet digerus sampai homogen, menimbang 24,5 mg untuk analisis. Selanjutnya serbuk dilarutkan kedalam labu takar 100 ml, dan ditambahkan aquabides hingga tanda. Larutan diambil 1,0 ml diencerkan dengan aquabidest hingga 100 ml. Selanjutnya sebanyak 10 µL larutan sampel dan larutan standar diinjeksikan ke sistem kromatografi HPLC (insrumen sudah dioptimasi). Data kurva baku dan sampel seperti dibawah ini :

Data kurva baku

Vitamin B-1 Vitamin B-2 Vitamin C

tRC (µg/ml)

LA (mV)

tRC (µg/ml)

LA (mV)

tRC (µg/10ml)

LA (mV)

5,8 2 200 3,4 1 90 2,5 10 300

5,8 4 250 3,6 2 200 2,4 20 360

5,7 8 325 3,3 3 385 2.6 30 410

5,7 10 410 3,3 4 340 2.5 40 590

5,8 12 520 3,5 5 410 2.6 50 670

R tabel untuk N=3 adalah 0,87 dengan P=95%

Data sampel

tRLA (mV)

2,6 450

5,7 150

3,5 96

Pertayaan:1. Apakah parameter kualitatif untuk mengetahui senyawa vitamin C,B-1. Dan B-2?2. Berapa kadar mg/tablet senyawa diatas?3. Kemasan tertulis vitamin C mengandung 150 mg/tab, vitamin B-1 mengandung

100 mg/tab dan B-2 menandung 15 mg/tab. Syarat FI ED iv mensyaratkan untuk vitamin C (98-105%), B-1 (97-101%), B-2 (99-101%). Apakah hasil analisis memenuhi syarat FI?

Jawab

1. parameter kualitatif : tR

2. kadar mg/tabletlangkah pertama membuat kurva regresi linear antara C (µg/ml) vs LA (mV)

Diperoleh hasila : 125b : 30r : 0,974y : 30x + 125

selanjutnya cari kadar untuk vitamin B-1 dengan melihat tR nya. Karna vit B-1 tR rata2nya adalah 5,76 maka LA (Mv) nya = 150

y : 30x + 125150 : 30x +12525 : 30xx : 0,833 µg/ml

vt B-1 : kadar vit B-1 x jumlah vol x f.pengenceransampel

: 0,833 µg/ml x 100 ml x 100 24500

: 0,34

Diperoleh hasila : 51b : 78r : 0,907y : 78x + 51

selanjutnya cari kadar untuk vitamin B-1 dengan melihat tR nya. Karna vit B-2 tR rata2nya adalah 3,42 maka LA (Mv) nya = 96

y : 78x + 5196 : 78x +5145 : 78xx : 0,577 µg/ml

vit B-2 : kadar vit B-2 x jumlah vol x f.pengenceransampel

: 0,577 µg/ml x 100 ml x 100 24500

: 0,235

Vitamin B-1

C (µg/ml)

LA (mV)

2 200

4 250

8 325

10 410

12 520

Vitamin B-2

C (µg/ml)

LA (mV)

1 90

2 200

3 385

4 340

5 410

Vitamin C

C (µg/10ml)

LA (mV)

10 300

20 360

30 410

40 590

50 670

Diperoleh hasila : 175b : 9,7r : 0,975y : 175x + 9,7

450 : 175x + 9,7x : 2,516 µg/ml

vit C : kadar vit C x jumlah vol x f.pengenceransampel

: 2,516 µg/ml x 100 ml x 100 24500

: 1,027

Kadar masing2 pertabletVit B-1 : 0,34 x 128,4

: 43,656 mgVit B-2 : 0,235 x 128,4

: 30,174Vit C : 1,027 x 128,4

: 131,87

3. kadar dalam kemasan apakah memenuh syarat FIuntuk mencari kadar tiap zat aktif dalam satu tablet

vitamin : kadar x 100% bobot dalam produk

Vit B-1 : 43,656 x 100% 100

Vit B-2 : 30,1,74 x 100% 15

Vit C : 131,87 x 100% 150