ref p3 vero, hal 2

7/23/2019 ref p3 vero, hal 2

http://slidepdf.com/reader/full/ref-p3-vero-hal-2 1/20

Laporan Praktikum Teknologi Bioindustri

Hari/Tanggal : Selasa, 26 Maret 2013

olongan : P3

!osen : !r" Pra#oga Sur#adarma, S"TP, MT"

$sisten :1"Tutus %ur#ani &3'0(000)

2"*i+ar akaria &3'0(0136

P-.!%S $S$M .-$*% $S$M ST-$T !*$* %LT4$S

5$- !$* %LT4$S SBST-$T P$!$T

.le :%elompok 1

M" 7a8i $9dul Basit &3'1000)

$lo#sius Boris -on#;a#a &3'1000(

Su;i nggar $<riant# &3'1000(1

-oseiga -etno $" &3'100100

Ha<i+a %aerina &3'100110

&atima =umiati &3'100111

2013

!P$-TM* T%*.L. *!ST- P-T$*$*

&$%LT$S T%*.L. P-T$*$*

*STTT P-T$*$* B..-

B..-

7/23/2019 ref p3 vero, hal 2


" P*!$HL$*

1"1 Latar Belakang

$sam sitrat adala asam organik #ang ditemukan ole alkimia>an $ra9?@emen #ang idup

pada a9ad ke #ang 9ernama =a9ir 9n Ha##an" Pada +aman pertengaan, 9an#ak ilmu>an

ropa #ang mem9aas si<at asam sari 9ua lemon dan limau" $sam sitrat pertama kali

diisolasi pada taun 1)' ole kimia>an S>edia, 5arl 7ilelm S;eele, #ang

mengkristalkann#a dari sari 9ua lemon" Pem9uatan asam sitrat skala industri pertama kali

dimulai pada taun 160, terutama mengandalkan produksi 8eruk dari talia" Pada taun 1(3,

5" 7emer menemukan 9a>a kapang Peni;illium dapat mem9entuk asam sitrat dari gula"

Sedangkan pada taun 1(1), kimia>an pangan $merika, =ames 5urrie menemukan 9a>a

galur tertentu kapang $spergillus niger dapat mengasilkan asam sitrat se;ara e<isien, dan

perusaaan kimia P<i+er memulai produksi asam sitrat skala industri dengan ;ara terse9ut"

$sam sitrat termasuk ke dalam golongan asam organik lema #ang ditemukan pada

tum9uan genus 5itrus" Sen#a>a ini 9iasa digunakan se9agai penga>et alami, serta

penam9a rasa asam pada makanan dan minuman ringan" Selain diman<aatkan dalam industri

makanan dan minuman, 8uga diman<aatkan dalam <armasi dan tam9aan dalam makanan

ternak" at ini 8uga dapat digunakan se9agai +at pem9ersi #ang rama lingkungan dan

se9agai antioksidan"

$sam sitrat dapat diproduksi se;ara kimia>i atau se;ara <ermentasi menggunakan

mikroorganisme" Pada proses produksin#a, ada 9e9erapa <aktor #ang mempengarui dan

terutaman#a adala perlakuan kondisi agar asil #ang diperole optimal" Pada praktikum kali

ini, akan dilakukan proses produksi asam organik asam sitrat dengan kultiAasi ;air dan

su9strat padat, seingga praktikan nantin#a akan mengetaui dengan proses #ang mana 8ika

ingin memperole asil #ang le9i optimal" Selain itu 8uga praktikan men8adi le9i

mengetaui <aktor apa #ang mempengarui serta kondisi seperti apa dalam proses produksi

asam sitrat #ang se9enarn#a" Seingga, dalam aplikasin#a dapat diman<aatkan untuk produksi

dengan skala #ang le9i 9esar dan le9i 9erman<aat"

7/23/2019 ref p3 vero, hal 2


1"2 Tu8uan

Tu8uan dari praktikum kali ini adala untuk mengetaui ;ara produksi asam sitrat dengan ,

kultiAasi ;air dan kultiAasi su9strat padat dengan meman<aatkan $spergillus niger , serta

mengamati nilai pH, 9iomassa, gula sisa, dan total asamn#a"

" MT.!.L.

2"1 $lat dan Baan

$lat?alat #ang digunakan pada praktikum kali ini antara lain inku9ator go#ang, penangas,

spatula, gelas ukur, nera;a analitik, 9unsen, lup, korek api, elenme#er, pipet Aolumetrik, pH

meter, saringan, ta9ung reaksi, ta9ung ulir, spektro<otometer, 9uret, otokla<, dan ;orong"

Sedangkan 9aan?9aan #ang di9utukan antara lain gula pasir, ekstrak tauge 20 9/A,

*H'2S.', %H2P.', aCuades, $spergillus niger , kertas saring, pereaksi !*S, *a.H 0,1

*, indikator PP, onggok, dedak alus, alkool, sum9at kapas, alu<o dan %.H"

2"2 Metode

2"2"1 %ultiAasi 5air

2"2"1"1 nokulasi dan &ermentasi

2"2"1"2 Pengukuran pH

2"2"1"3 Biomassa

2"2"1"' ula Sisa Metode !*S

2"2"1"D Total $am

2"2"2 %ultiAasi Padat

2"2"2"1 nokulasi dan &ermentasi

2"2"2"2 8i $sam Sitrat

7/23/2019 ref p3 vero, hal 2


" H$SL !$* PMB$H$S$*

3"1 Hasil pengamatan

terlampir

3"2 Pem9aasan

$sam sitrat merupakan asam organik lema #ang ditemukan pada daun dan 9ua tum9uan

genus 5itrus 8eruk?8erukan" Selain digunakan se9agai penam9a rasa asam pada makanan

dan minuman ringan, sen#a>a ini merupakan 9aan penga>et #ang 9aik dan alami" !alam

9iokimia, asam sitrat dikenal se9agai sen#a>a antara dalam siklus asam sitrat #ang ter8adi di

dalam mitokondria, #ang penting dalam meta9olisme makluk idup" at ini 8uga dapat

digunakan se9agai +at pem9ersi #ang rama lingkungan dan se9agai antioksidan" $sam

sitrat terdapat pada 9er9agai 8enis 9ua dan sa#uran, namun ditemukan pada konsentrasi

tinggi, #ang dapat men;apai 9o9ot kering, pada 8eruk lemon dan limau misaln#a 8eruk

nipis dan 8eruk purut 7ikipedia 2013" -umus kimia asam sitrat adala 56H.)" Struktur

asam ini ter;ermin pada nama P$5?n#a, asam 2?idroksi?1,2,3 propanatrikar9oksilat #ang

ditun8ukkan pada gam9ar 1"

am9ar 1" -umus kimia $sam Sitrat

Sum9er : 7ikipedia 2013

%easaman asam sitrat didapatkan dari tiga gugus kar9oksil 5..H #ang dapat melepas proton dalam larutan" =ika al ini ter8adi, ion #ang diasilkan adala ion sitrat" Sitrat sangat

9aik digunakan dalam larutan pen#angga untuk mengendalikan pH larutan" on sitrat dapat

9ereaksi dengan 9an#ak ion logam mem9entuk garam sitrat" Selain itu, sitrat dapat mengikat

ion?ion logam dengan pengkelatan, seingga digunakan se9agai penga>et dan pengilang

kesadaan air"

Pada temperatur kamar, asam sitrat 9er9entuk ser9uk kristal 9er>arna puti" Ser9uk kristal

terse9ut dapat 9erupa 9entuk an#drous 9e9as air, atau 9entuk monoidrat #ang

7/23/2019 ref p3 vero, hal 2


mengandung satu molekul air untuk setiap molekul asam sitrat" Bentuk an#drous asam sitrat

mengkristal dalam air panas, sedangkan 9entuk monoidrat didapatkan dari kristalisasi asam

sitrat dalam air dingin" Bentuk monoidrat terse9ut dapat diu9a men8adi 9entuk an#drous

dengan pemanasan di atas )' E5" Se;ara kimia, asam sitrat 9ersi<at seperti asam kar9oksilat

lainn#a" =ika dipanaskan di atas 1)D E5, asam sitrat terurai dengan melepaskan

kar9ondioksida dan air 7ikipedia 2013"

Bi+ri 1((', pertama kali melaporkan produksi asam sitrat se9agai asil sampingan pada

<ermentasi produksi asam oksalat dengan menggunakan Peni;illium glau;um" $spergillus

niger dapat mengasilkan asam sitrat pada medium pH renda dengan kadar gula tinggi"

Se8ak saat itu asam sitrat diproduksi se;ara komersial dengan menggunakan kapang $" niger"

%apang $" niger merupakan mikroorganisme #ang dapat tum9u dan 9an#ak digunakan

se;ara komersial dalam produksi asam sitrat, asam glukonat, dan 9e9erapa en+im seperti

pektinase dan amilase Broekui8sen et al", 1((3" $" niger mampu mensintesis asam sitrat

dalam medium <ermentasi ekstraseluler dengan konsentrasi #ang ;ukup tinggi, 8ika di9iakkan

dalam media #ang kadar garamn#a renda dan mengandung gula se9agai sum9er kar9on"

Produksi asam sitrat pada proses <ermentasi dipengarui ole 9e9erapa <aktor diantaran#a

adala 8enis media, pH, media, >aktu <ermentasi, suu, aerasi, dan mikroorganisme #ang

digunakan" &aktor #ang paling menentukan adala media tum9u su9strat dan

mikroorganisme #ang digunakan Mangun>id8a8a 1(('" Pada umumn#a asil samping

pertanian dan perke9unan seperti 8erami padi, onggok, 9agas, dan kulit kakao masi

mengandung lignoselulosa"Lim9a ini masi mengandung pati, protein, lemak, dan sen#a>a

kimia ainn#a" !engan teknologi <ermentasi, asil samping ini dapat diman<aatkan le9i lan8ut

men8adi produk lain #ang 9erguna seperti pangan, pakan ternak, pelarut organik, asam?asam

organik seperti asam sitrat dan lain?lain"

$spergillus niger merupakan sala satu spesies #ang paling umum dan muda diidenti<ikasi

dari genus $spergillus, <amili Monilia;eae, ordo Monoliales dan kelas &ungi imper<e;ti"

$spergillus niger dapat tum9u dengan ;epat, diantaran#a digunakan se;ara komersial dalam

produksi asam sitrat, asam glukonat dan pem9uatan 9erapa en+im seperti amilase, pektinase,

amiloglukosidase dan sellulase" $spergillus niger dapat tum9u pada suu 3D? 3) 5ᵒ

optimum, 6? 5 minimum, 'D ?') 5 maksimum dan memerlukan oksigen #ang ;ukupᵒ ᵒ

7/23/2019 ref p3 vero, hal 2


aero9ik" %oloni $spergillus niger terdiri dari suatu lapisan 9asal #ang kompak 9er>arna

puti ingga kuning dan suatu lapisan konido<or #ang le9at #ang 9er>arna ;oklat tua ingga

itam" %onidia 9er9entuk 9ulat ingga semi9ulat, 9er>arna ;oklat, memiliki ornamentasi

9erupa ton8olan dan duri?duri #ang tidak 9eraturan"

5ara mengisolasi dan mengem9angkan $" niger ini arusla memili media pertum9uan

#ang tepat agar dapat tum9u dengan 9aik" Pertum9uan kapang ini akan mempengarui

asil produksi produk #ang diinginkan seperti produksi asam sitrat" &aktor? <aktor #ang

sangat menentukan persiapan media antara lain:

1" %andungan gula" mumn#a konsentrasi gula #ang tinggi diperlukan untuk mendapatkan

asil #ang 9an#ak" Larutan dengan konsentrasi 1'?20 dapat dipergunakan" Su9stitusi

parsial teradap sukrosa dan <ruktosa atau glukosa, #ang mengasilkan konsentrasi gula 1?D

diluar total 1' akan mengasilkan asam sitrat #ang le9i sedikit 9ila di9andingkan

dengan media #ang an#a mengandung sukrosa" Hidrolisa parsial selama sterilisasi 8uga

menurunkan asil asam sitrat"

2" aram?garam anorganik, seperti nitrogen, kalium, <os<or, 9elerang, dan magnesium"

3" %easaman pH" Hal ini merupakan <aktor #ang sangat penting dalam proses <ermentasi"

aram?garam anorganik dan pH sangat 9erpengaru teradap proporsi asam sitrat dan oksalat

#ang diasilkan" =adi pH dan garam anorganik arus demikian ingga produksi asam sitrat

tinggi dan se9alikn#a asam oksalat ditekan serenda mungkin" Penggunaan pH renda

9an#ak menguntungkan #akni asil asam sitrat #ang tinggi, pem9entukan asam oksalat

tertekan dan 9aa#a kontaminasi minimum" Meningkatn#a pH men8adi '"D selama <ase

produksi akan menurunkan asil asam sitrat sampai 0 Papagianni 1((D"

'" *is9a luas permukaan teradap Aolume media" !alam <ermentasi asam sitrat konAersi

gula men8adi asam sitrat dilakukan ole en+im?en+im intrasel dan 9erlangsung dalam sel

#ang mem9entuk suatu lapisan miselium" ula masuk ke dalam sel?sel se;ara osmosis,

sedangkan asam keluar dengan ;ara di<usi" La8u a>al proses en+imatik dan di<usi akan

menentukan 9e9erapa lama <ermentasi 9erlangsung"

D" Suplai oksigen" Suplai oksigen melalui udara #ang terlalu 9an#ak 8ustru akan

menurunkan rendemen" %adang?kadang 8ustru rendemen akir <ermentasi dengan suplai

udara kusus sama sa8a dengan rendemen akir <ermentasi tanpa suplai udara" Tetapi suplai

udara #ang terlalu sedikit 8uga 9eraki9at tidak 9aik teradap asam sitrat"

6" Suu" Suu #ang tepat tergantung pada organisme dan kondisi <ermentasi" Biasan#a

<ermentasi dilakukan pada suu 2D F 3D 05" =umla asam sitrat #ang diasilkan akan

7/23/2019 ref p3 vero, hal 2


meningkat seiring dengan peningkatan suu dari F 2 05" !i atas 30 05 produksi asam

sitrat akan menurun dan produksi asam oksalat 8ustru akan meningkat" $spergillus niger pada

suu inku9asi mengasilkan kalsium sitrat se9an#ak 2D F 30 g dari 200 g molase #ang

mengalami dua ari <ermentasi" selain itu 8uga diasilkan kalsium glukonat"

$sam sitrat #ang dirasa tela memiliki 9an#ak man<aat ini tela dikem9angkan se8ak 8aman

daulu kala dengan meman<aatkan proses <ermentasi #ang sederana" 7ener 1(3 pertama

kali melaporkan produksi asam sitrat se9agai asil sampingan pada <ermentasi produksi asam

oksalat dengan menggunakan Peni;illium glau;um" Taun 1(1), 8uga tela dilaporkan 9a>a

$spergillus niger dapat mengasilkan asam sitrat pada medium pH renda dengan kadar gula

tinggi" Se8ak saat itu asam sitrat diproduksi se;ara komersial dengan menggunakan kapang $"

niger"

!e>asa ini tela diketaui 9an#ak 8enis kapang #ang dapat mengasilkan asam sitrat, seperti

$" niger, $" a>amori, $" <onse;aeus, $" lu;uensis, $" >entii, $" saitoi, $" <laAus, $"

;laAatus, $" <umari;us, $" poeni;us, Mu;or Airi<ormis, stulina Aulgaris, dan lain? lain

re>al dan %alra 1((D" Selain kapang, 9e9erapa 9akteri dan kamir 8uga dapat

memproduksi asam sitrat, diantaran#a: BreAi9a;terium, 5or#ne9a;terium, $rtro9a;ter dan

5andida"

$sam sitrat se;ara alami terdapat dalam 9er9agai 9ua? 9uaan seperti lemon, 8eruk,

goose9err#, pear, dan lain? lain" $sam sitrat pertama diisolasi dari 8us lemon dan se8ak itu

diketaui se9agai su9stansi alami tanaman terutama dalam 9ua 8eruk seingga asam sitrat

asil ekstraksi dari 9ua? 9uaan ini dikenal se9agai asam sitrat alami" -eman 2003

men#atakan 9a>a asam ditrat diperole dari 9ua? 9uaan diketaui se9agai asam sitrat

alami 8ika di9andingkan dengan #ang diasilkan se;ara sintetis melalui <ermentasi ole

mikro9a"

Produksi asam sitrat se;ara sintetis dapat dilakukan pada media <ermentasi padat dan media

<ermentasi ;air" Pada kedua media ini, di9utukan gula atau sukrosa se9agai sum9er kar9on

dan 9aan 9aku dalam skala industri karena merupakan 9aan 9aku #ang muda diperole

dan paling 9aik" Menurut %u9i;ek dan -or 1(( sukrosa 9aik untuk di8adikan se9agai

sum9er glukosa ole $" niger karena memiliki ikatan interAase m#;elium ekstraseluler #ang

kuat dan akti< pada pH renda seingga idrolisis sukrosa relati< le9i ;epat" Pada media

7/23/2019 ref p3 vero, hal 2


<ermentasi padat, sum9er kar9on #ang digunakan dalam proses <ermentasi selain gula, dapat

9erupa 9er9agai asil pertanian seperti um9i? um9ian singkong atau talas" Selain asil

pertanian, sum9er kar9on dapat diasilkan dari lim9a pengolaan asil pertanian, misaln#a

molases, onggok, dedak pagi atau gandum, lim9a pengolaan kopi, dan lim9a pengolaan

nanas" Pada media <ermentasi ;air, digunakan ekstrak tauge se9agai sum9er kar9on karena

merupakan kar9oidrat, pepton se9agai pen#edia mineral, &eS.' se9agai pen#edia +at 9esi

dan 9elerang, dan *H'*.3 se9agai pen#edia nitrogen atau asam amino di dalam pem9uatan

media terse9ut"

$sam sitrat merupakan meta9olit primer, ter9entuk se9agai sen#a>a antara selama proses

kata9olisme melalui siklus Me#ero<?m9edden, siklus pentose dan siklus asam kar9oksilat"

$da tiga metode #ang dapat digunakan untuk proses produksi asam sitrat, #aitu proses

ekstraksi sederana, proses <ermentasi, dan proses sintesa se;ara kimia" Pada proses ekstraksi

sederana, proses atau metode ini dilakukan dengan ekstraksi 9ua seperti lemon, 8eruk dan

nanas" *amun proses ini suda tidak perna dilakukan lagi seiring dengan pengem9angan

metode <ermentasi proses <ermentasi ter9agi men8adi dua ma;am, #aitu sur<a;e <ermentation

<ermentasi permukaan dan su9merged <ermentation <ermentasi terendam" Pada proses

sur<a;e <ermentation digunakan kapang $spergillus niger " Proses <ermentasi permukaan ini

diterapkan dalam dunia industri se8ak taun 1(20?an" Se9elum mengalami proses <ermentasi

9aan 9aku dien;erkan terle9i daulu ingga konsentrasi gula 30 dalam miGer" Setela itu

ditam9akan asam sul<at, pospor, potassium dan nitrogen dalam 9entuk asam atau garam

se9agai nutrient" 5ampuran ini kemudian disterilkan lalu dien;erkan kem9ali ingga

konsentrasi gula men;apai 1D dan selan8utn#a di<ermentasikan"

Proses <ermentasi dilakukan didalam tangki?tangki #ang ter9uat dari alumunium" nokulum

$spergillus niger disem9urkan 9ersama?sama dengan udara" 7aktu inku9asi selama ( F 11

ari" Lapisan lendir #ang ter9entuk dipermukaan medium diam9il dan diekstraksi, sedangkan

;airan asil <ermentasi di9eri perlakuan panas dan penam9aan kalsium idroksida p ,D

seingga diasilkan kalsium sitrat" %e9utuan energi untuk sur<a;e <ermentation tidak 9an#ak

karena proses aerasi menggunakan peralatan #ang sederana #aitu 9erupa kipas #ang

mengasilkan udara dan digerakkan ole motor elektrik, energi #ang di9utukan 1,3 F 2,6

m=/m3" Berikut ini adala gam9ar sur<a;e <ermentation"

7/23/2019 ref p3 vero, hal 2


am9ar 2" Sur<a;e &ermentation

Sum9er : %irk .tmer 1('D

Pada proses su9merged <ermentation, proses <ermentasi ini ter9agi dua ma;am 9erdasarkan

mikroorganisme #ang digunakan diantaran#a adala su9merged <ermentation menggunakan

kapang $pergillus niger dan su9merged <ermentation menggunakan #east dalam al ini

adala 5andida guilliermondii" Pada proses <ermentasi menggunakan kapang,

mikroorganisme $spergillus niger ditum9ukan dengan mendispersikann#a dalam media ;air"

Be8ana <ermentasi tersusun atas tangki ? tangki steril #ang 9erkapasitas 9e9erapa ratus ku9ik

meter 1000 galon dengan dilengkapi pengaduk mekanik serta pemasukan se8umla udara

steril" Sesuai dengan penelitian #ang dilakukan ole amelung?perCuin, dimana produksi asam

sitrat dengan proses 9iakan ;elup mempertim9angkan penggunaan pospat #ang ter9atas"Proses <ermentasi asam sitrat terdiri dari dua taap" Pertama <ase pertum9uan miselium dan

kedua <ase <ermentasi pem9entukan produk" %eduan#a dikarakteristikkan ole la8u

pen#erapan kar9oidrat" Pada <ase pertama digunakan untuk pem9entukan miselium dan

pada taap kedua kar9oidrat diu9a men8adi asam sitrat" 0 produksi asam sitrat dunia

menggunakan metode ini"

!alam skala industri $spergillus nigeradala strain #ang paling tepat untuk <ermentasi,

>alaupun pada a>aln#a mengasilkan sedikit #ield, namun dalam perkem9angan selan8utn#a

penam9aan metanol dalam larutan <ermentasi akan mengasilkan #ield #ang 9esar" Sampai

sekitar taun 1(6( atau 1()0, $spergillus niger dianggap se9agai satu?satun#a asam sitrat

dalam skala industri" Pada taun 1()0, se9ua inoAasi 9aru #ang mendemonstrasikan 9a>a

produksi asam sitrat dapat dilakukan dengan menggunakan #east seperti 5andida

guilliermondii #ang mengandung glukosa atau molasses itam pekat #ang ekuiAalen dengan

se8umla glukosa" 7aktu <ermentasi le9i singkat daripada $spergillus niger " Penggunaan

strain ;andida sangat e<ekti< untuk pem9uatan asam sitrat dari idrokar9on, dimana konAersi

7/23/2019 ref p3 vero, hal 2


#ang diasilkan dapat men;apai le9i dari 10" Se;ara umum proses su9merged

<ermentation mem9utukan suplai energi #ang ;ukup 9an#ak, karena men;akup proses

pengadukan, aerasi, serta pendinginan" %e9utuan energi 9erkisar F16 m=/m3 2,DFD)

Btu/gal %irk .tmer 1('D"

$dapun per9andingan proses produksi asam sitrat se;ara sur<a;e <ermentation atau

su9merged <ermentation dapat diliat pada ta9el 9erikut"

Pada proses produksi dengan sintesis kimia, =alann#a reaksi didasarkan pada reaksi antara

gliseroldeAirat 1,3?di;loroa;eton dengan sianida" Se;ara umum proses ini 9elum 9isa

diterima dalam industri kimia" Metode #ang dapat digunakan antara lain dengan proses reaksi

re<ormatsk# reaksi 7ile#, %ar9oksilasi aseton menggunakan katalis alkali metal penolate

dalam solAent dan epoksidasi ita;onate, reaksi dengan sianida dan idrolisa"

&aktor?<aktor #ang mempengarui <ermentasi asam sitrat adala pemilian strain

konsentrasi su9strat dan pengaru kondisi <ermentasi #ang meliputi temperatur, dera8at

keasaman, serta luas permukaan" Pemilian strain dalam industri <ermentasi arus memenui

s#arat?s#arat tertentu #aitu murni, unggul, sta9il dan 9ukan patogen" %onsentrasi su9strat

arus diatur dengan tepat tidak terlalu tinggi dan tidak terlalu renda" Su9strat akan

dirom9ak ole mikroorganisme dengan 9antuan en+im mem9entuk asam sitrat" Su9strat #ang

terlalu pekat mengaki9atkan naikn#a tekanan osmosis" $pa9ila tekanan osmosis lingkungan

le9i tinggi dari sitoplasma, akan mengaki9atkan sitoplasma keilangan air #ang selan8utn#a

isi sel akan menge;il dan struktur sel akan an;ur" Su9strat #ang terlalu en;er akan

mengaki9atkan la8u pertum9uan men8adi lam9at $gustian 200D"

Temperatur sangat 9erpengaru teradap pertum9uan dan produksi asam sitrat" $gar

diasilkan konsentrasi asam sitrat #ang tinggi maka <ermentasi arus 9erlangsung pada

temperatur optimal 9erkisar 2D F 30 o5 Aa *oAitasari 7" dkk, 200" !i atas temperatur

optimum, ke;epatan tum9u sel akan menurun se;ara ;epat #ang 9erla>anan dengan

kenaikan temperatur $9dulla Sale 1((D" Temperatur #ang terlalu tinggi akan

mempengarui mem9ran sel mikroorganisme, di mana mem9ran sel akan men8adi ;air

seingga sel keilangan strukturn#a" Sedangkan pada temperatur renda akan men#e9a9kan

mem9ran sel men8adi padat" Hal ini 9erkaitan dengan struktur mem9ran #ang terdiri dari

lapisan lemak dan protein #ang akan mengeras pada temperatur renda seingga proses

7/23/2019 ref p3 vero, hal 2


pemasukan makanan melalui lapisan mem9ran sel tidak ter8adi, selan8utn#a dapat

men#e9a9kan kematian dari sel mikroorganisme terse9ut $gustian 200D"

%andungan gula 8uga merupakan sala satu <aktor #ang mempengarui pem9entukan asam

sitrat" Berdasarkan penelitian, 1D?2D larutan gula dapat diu9a se;ara <ermentasi *ara#ana

dkk 2006" Pem9entukan asam sitrat dapat dilakukan dari 9aan?9aan #ang mengandung

gula seperti : pati, kentang, idrolisat pati, sirup glukosa, sukrosa, sirup gula te9u, dimana 2/3

kandungan sukrosa tela 9eru9a men8adi gula inAers" Berdasarkan penelitian, produksi asam

sitrat maksimum 9iasan#a di;apai pada konsentrasi gula 1'?22 9/A" Sum9er kar9on #ang

digunakan 8uga 9erpengaru pada aktiAitas mikro9a"

Pengaturan pH penting 9agi ke9erasilan proses <ermentasi" ntuk <ermentasi asam sitrat pH

optimum adala 3, sedangkan pH optimum untuk pertum9uan $spergillus niger adala 2,D F

3,D" Penurunan pH men#e9a9kan produksi asam sitrat 9erkurang" Hal ini dise9a9kan pada pH

renda ion <erosinida le9i toksik 9agi pertum9uan miselium" Pada pH #ang tinggi ter8adi

akumulasi asam oksalat La9oratorium Bioindustri TP, &TP, n9ra>, 200"

Pada metode <ermentasi permukaan, <aktor luas permukaan 8uga arus diperatikan" %arena

proses <ermentasi an#a 9erlangsung pada permukaan 9idang media, maka untuk

mendapatkan asil #ang maksimal, luas permukaan diusaakan seluas mungkin dengan

memperke;il kete9alan ;airan pada media ;air atau memperke;il ukuran partikel pada

media padat S;legel 1(6" Parameter lain #ang menentukan produksi asam sitrat

maksimum adala adan#a oksigen" .le karena itu proses aerasi saat <ermentasi arus

dikontrol untuk dapat mengasilkan rendemen asam sitrat #ang maksimum" kadar oksigen

arus antara 20?2D, dengan la8u aerasi 0,2?1 AAm" Sedangkan untuk pengadukan, karena

Aiskositas larutan tidak tinggi dan kultiAasi #ang dilakukan 8uga pada skala ke;il, maka tidak

perlu dilakukan pengadukan #ang terus menerus dan an#a di9antu dengan saker sa8a agar

oksigen #ang 9erada diatas permukaan su9strat dapat ter;ampur merata ke su9strat seingga

aliran oksigen merata"

Mekanisme pem9entukan asam sitrat seperti din#atakan dengan siklus %re9s atau siklus

asam trikar9oksilat, #aitu 9a>a asam piruAat #ang diperole dari glukosa mengasilkan

$;etil 5o$ #ang 9erkondensasi dengan asam oGalo?asetat #ang tela ter9entuk dalam siklus

mengasilkan asam sitrat" Pada $spergillus niger <os<oenol piruAat dapat diu9a langsung

7/23/2019 ref p3 vero, hal 2


men8adi oksaloasetat tanpa melalui piruAat ole en+im <os<enol piruAat kar9oksilase" -eaksi

terse9ut mem9utukan $TP se9agai sum9er energi, Mg2I atau Mn2I dan %I atau *H'I"

$pa9ila sum9er kar9on 9ukan glukosa, tapi misaln#a asam asetat atau sen#a>a ali<atik

9erantai pan8ang 5?(, 5?23, maka isositrat liase terinduksi seingga siositrat diu9a

men8adi malat ole malat ole malat sintesa" -angkaian reaksi melalui glioksilat" Bila

glukosa ditam9akan glukosa, siklus terse9ut teram9at" !iduga 9a>a ter8adin#a akumulasi

asam sitrat ini adala se9agai aki9at dari adan#a kekurangan en+im dise9a9kan kurangn#a

unsur?unsur nutrisi seperti nitrogen, <os<at, mangan, 9esi dan seng" $pa9ila kadar logamn#a

tinggi, maka untuk mengurain#a 9iasan#a tetesn#a mengalami pengolaan pendauluan

terle9i daulu, #aitu dengan penam9aan %alium <errosianida atau dengan ;ara pertukaran

ion 9raim 2011"

Praktikum kali ini adala produksi asam organik asam sitrat sintesis melalui proses

<ermentasi ole mikro9a $spergillus niger " Produksi asam sitrat se;ara sintetis dapat

dilakukan pada dua media #ang 9er9eda, #aitu produksi asam sitrat dengan kultiAasi ;air dan

produksi asam sitrat dengan kultiAasi media padat" Pada media kultiAasi ;air su9strat #ang

digunakan adala ekstrak tauge 20 9/A se9agai media propagasi" kstrak tauge terse9ut

selan8utn#a di;ampurkan dengan *H'2S.' dan %H2P.'se9agai sum9er nitrogen dan

sum9er mineral" Sedangkan gula pasir digunakan se9agai sum9er kar9on 9agi mikro9a"

Media propagasi selan8utn#a diinokulasi dengan mikro9a $spergillus nigerseingga akan

didapatkan inokulum #ang selan8utn#a inokulum di<ermentasikan pada media <ermentasi" pH

dari media <ermentasi arus diatur mendekati netral #aitu sekitar 6" Hal ini dilakukan untuk

mengoptimalkan 8alann#a proses <ermentasi"

Pada praktikum ini, diperole asil 9a>a nilai pH semakin menurun dari pH #ang semula

mendekati netral men8adi asam" Berdasarkan asil praktikum diketaui 9a>a pada

kelompok 1 dimana perlakuann#a adala 1 ari menun8ukan nilai pH ', kelompok 3 nilai pH

2,D kemudian kelompok ' nilai pH n#a 2" Penurunan pH mengindikasikan pem9entukan

produk asam sitrat" pH #ang semakin menurun menun8ukan 9a>a 8umla total produk asam

sitrat #ang ter9entuk semakin meningkat" Berdasarkan peritungan total asam, seperti pada

pH menun8ukan peningkatan sesuai dengan laman#a <ermentasi" Hal itu sesuai dengan

literatur, #aitu semakin lama >aktu <ermentasi semakin 9an#ak produk #ang ter9entuk

seingga pH akan semakin asam" Pada ari ke?1 didapatkan data nilai total asamn#a adala

7/23/2019 ref p3 vero, hal 2


'',16 mg/ml, pada kelompok 2 dimana dilakukan selama 3 ari nilai total asamn#a adala

1),2 mg/ml, kelompok ' dengan nilai total asamn#a 1(2 mg/ml dan kelompok D dengan

lama <ermentasi adala D,sampai pada ari ke?', kemudian pada ari kelima nilai total

asamn#a menun8ukan penurunan #ang diikuti peningkatan pH #aitu mengasilkan nilai pH 3"

Penurunan nilai total asam terse9ut menun8ukan indikasi penurunan aktiAitas mikro9a dalam

memproduksi asam sitrat" Hal ini dikarenakan kemampuan mikro9a untuk mengasilkan

produk tela terenti karena mikro9a tela 9erada pada <ase stasioner atau <ase kematian" Hal

terse9ut dise9a9kan sum9er nutrisi dari media <ermentasi tela dikonAersi selurun#a ole

mikro9a dalam pem9entukan produk maupun penam9aan 8umla 9iomassan#a"

Sama seperti pada media kultiAasi ;air, kultiAasi pada su9strat padat 8uga menun8ukan 9a>a

semakin lama >aktu <ermentasi semakin tinggi 8uga produk asam sitrat #ang ter9entuk" Hal

terse9ut di9uktikan dengan peningkatan kandungan total asam dan penurunan nilai pH" !ata

#ang diperole dari kelompok 1 sampai D se;ara 9erturut?turut adala 1D,36 3',D6 1D, 36

dan (2,16" Berdasarkan data terse9ut dapat diliat 9a>a peningkatan nilai total asam ter8adi

signi<ikan, ke;uali pada kelompok tiga #ang 8ustru menun8ukan adan#a penurunan" Hal

terse9ut tela sesuai dengan literature 9a>a produksi asam sitrat akan terus meningkat

sampai nutrisi #ang terkandung dalam media a9is" =ika nutrisi #ang terkandung dalam media

a9is maka mikro9a akan mengentikan <ase eksponensialn#a dan akan 9eru9a men8adi <ase

stasioner kemudian <ase kematian" .le karena itu asam sitrat arus dipanen ketika asil #ang

didapatkan sedangkan tinggi"

Pada proses <ermentasi, proses #ang 9erlangsung diarapkan 9er8alan e<isien" Proses

dikatakan e<isien apa9ila dapat diasilkan rendemen produk #ang tinggi dalam >aktu

<ermentasi #ang singkat" Hal ini dapat dilakukan dengan 9er9agai ;ara, sala satun#a #aitu

penam9aan nutrisi dalam media <ermentasi" Semakin tinggi konsentrasi nutrisi dalam media

#ang digunakan maka akan didapatkan konsentrasi atau rendemen produk #ang tinggi"

Sementara itu semakin lama >aktu <ermentasi #ang 9erlangsung, maka kadar nutrisi #ang

terkandung dalam media akan semakin a9is"

Pada praktikum kali ini, 8uga dilakukan pengamatan teradap konsentrasi kadar gula pada

media <ermentasi dengan >aktu #ang 9er9eda" Berdasarkan data asil praktikum,

menunu8ukan 9a>a kelompok 1 sampai D mengalami penurunan konsentrasi kadar gula sisa

#aitu 6 )(,D 6( )6 )3" Hal ini sesuai dengan literatur 9a>a semakin lama >aktu

7/23/2019 ref p3 vero, hal 2


<ermentasi, maka kadar gula sisa #ang ada dalam media akan semakin menurun" *amun data

menun8ukan adan#a per9edaan pada kelompok empat, dimana data dari kelompok terse9ut

8ustru kadar gula sisan#a semakin naik" Sementara pada kelompok D data kem9ali normal

#aitu mengalami penurunan" !ata kelompok ' #ang mengalami peningkatan tidak sesuai

dengan literatur" Hal ini kemungkinan dise9a9kan karena adan#a perlakuan #ang tidak aseptis

seingga terdapat mikro9a lain #ang dapat mengganggu 8alann#a <ermentasi produksi asam

sitrat" Penurunan konsentrasi kadar gula sisa ini dise9a9kan ole gula pasir se9agai sum9er

kar9on dikonsumsi ole sel mikro9a, seingga semakin lama konsentrasin#a menurun" Sel

mengkonsumsi gula melalui mekanisme idrolisis inAertasi, seingga 8enis gula #ang

digunakan 8uga akan mempengarui proses inAertase sel teradap gula" Menurut Bodd# et al

1((3, 8enis gula #ang 9aik karena memiliki ikatan inAertase miselium #ang kuat #aitu dari

8enis sukrosa" =enis gula ini mampu akti< pada pH renda seingga idrolisis akan dapat le9i

;epat 9er8alan"

Pada proses <ermentasi #ang mengasilkan produk asam sitrat ini, sel $spergillus niger 8uga

ikut mengalami pertum9uan atau penggandaan diri seingga9iomassan#a 8uga mengalami

peningkatan 8umla" Pertum9uan 9iomassa mengikuti pertum9uan sel, #aitu didasarkan

pada <ase atau taapan #ang dilalui sel dalam kelangsungan idupn#a #ang meliputi empat

taapan #aitu <ase lag, <ase eksponensial, <ase stasioner, dan <ase kematian" Semakin 9an#ak

8umla sel #ang ter9entuk maka 8umla 9iomassa #ang diasilkan 8uga akan semakin tinggi"

Menurut %u9i;ek dan -or 1(( , pertum9uan sel ter;epat #aitu ketika 9erada pada <ase

eksponensial, selan8utn#a akan menurun pada <ase stationer dan <ase kematian" Berdasarkan

data asil praktikum pem9entukan 9iomassa ter9an#ak #aitu pada kelompok ' dengan lama

ari #aitu ' ari" Hal ini menun8ukan 9a>a produkti<itas sel ter9an#ak #akni ter8adi pada

ari ke empat, kemudian mengalami penurunan #ang diaki9atkan kandungan nutrisi dari

media menipis" Berdasarkan data #ang diperole dari asil praktikum nilai 9iomassa semakin

ari akan semakin naik, kemudian akan men;apai titik optimu pertum9uan dan kemudian

nilai 9iomassa akan turun" !ata dari praktikum menun8ukan asil #ang sesuai literature" Pada

kelompok 1 nilai 9iomassa #ang diasilkan #aitu 0,3322 gr, kelompok 2 mengasilkan

9iomassa 0,'' gram, kelompok 3 mengasilkan 9iomassa se9esar 0,) gram, kelompok '

mengasilkan 1,3)( gram dan kelompok D mengasilkan 9iomassa se9esar 0,( gram"

Pertum9uan 9iomassa dan pem9entukan asam sitrat dipegarui ole kandungan media #ang

7/23/2019 ref p3 vero, hal 2


digunakan #aitu e<ek makronutrien dan tra;e element" =umla inokulum optimum untuk

produksi asam sitrat dan 9iomassa adala 10 "

Berdasarkan data #ang tela diregresikan didapatkan 9er9agai nilai koe<isien #ang meliputi

koe<isien @p/G, koe<isien @p/s, dan koe<isien @G/s" koe<isien @p/G menun8ukan 9a>a dalam

1gram 9iomassa akan ter9entuk 9erapa produk asam sitrat" Berdasarkan kurAa #ang

diregresikan didapatkan nilai koe<isien @p/G #aitu ? 0,3D) mg asam sitrat/gram 9iomassa"

Berdasarkan data terse9ut dapat diketaui 9a>a setiap penam9aan 9iomassa #ang

diasilkan se9esar 1 gram akan ter8adi penurunan 8umla asam sitrat #ang diasilkan se9esar

0,3D) mg" !ata terse9ut tela sesuai dengan literatur #ang mengatakan 9a>a semakin tinggi

8umla 9iomassa #ang diasilkan maka akan menurunkan 8umla asam sitrat #ang diasilkan"

.le karena produksi 9iomassa dalam pem9uatan asam sitrat arus di9atasi seingga akan

didapatkan nilai rendemen #ang tinggi %u9i;ek dan -or 1((" Selan8utn#a #aitu koe<isien

@p/s #ang menun8ukan per9andingan antara produk #ang diasilkan dengan asam sitrat #ang

ter9entuk" Berdasrkan data asil praktikum nilai koe<isien @p/s #aitu se9esar 1,6' mg/ ppm"

Hal ini menun8ukan 9a>a dalam 1 ppm glukosa akan didapatkan prosuk asam sitrat se9esar

1, 6' mg" 9erdasarkan literature tela di8elaskan 9a>a semakin tinggi konsentrasi nutrisi

maka 8umla asam sitrat #ang didapatkan 8uga akan semakin tinggi" Selan8utn#a #aitu

koe<isien @G/s #ang menun8ukan per9andingan antara nilai 9iomassa dengan konsentrasi

media #ang digunakan" !ata dari asil praktikum menun8ukan nilai koe<isien @G/s #aitu 0,

20( gram/ppm" !ata ini menun8ukan 9a>a dalam konsentrasi gula se9esar 1 ppm akan

didapatkan 8umla 9iomassa se9esar 0,20( gram" Berdasarkan data #ang diperole diketaui

9a>a la8u pertum9uan maksimum #autu se9esar (, 2 gram /8am"

$plikasi asam sitrat 9an#ak digunakan dalam industri kususn#a industri pangan" $sam

sitrat merupakan sala satu asam organik, dari latar 9elakang terse9ut asam sitrat sering

digunakan dalam industri makanan dan minuman 60 dari total produksi, seperti 9er<ungsi

se9agai pem9eri rasa asam, antioksidan, dan pengemulsi" Selain itu, <laAor sari 9ua, ekstrak

sari 9ua, es krim, marmalade diperkuat dan dia>etkan dengan menggunakan asam sitrat"

$plikasi asam sitrat selain untuk pangan, digunakan 8uga dalam industri <armasi, kosmetik,

dan detergent" !alam industri <armasi 10 dari total produksi, digunakan se9agai 9aan

penga>et dalam penimpanan dara atau se9agai sume9r +at 9esi dalam 9entuk &eriFsitrat"

!alam industri kimia 2D dari total produksi, digunakan se9agai anti 9ui, 9aan pelunak,

;ampuran >arna tekstil, dan ;ampuran deter8en -aman 1((2

7/23/2019 ref p3 vero, hal 2


4" P*TP

'"1 %esimpulan

$sam sitrat merupakan asam organik lema #ang ditemukan pada daun dan 9ua tum9uan"

at ini 8uga dapat digunakan se9agai +at pem9ersi #ang rama lingkungan dan se9agai

antioksidan" -umus kimia asam sitrat adala 56H.) dan nama P$5?n#a, asam 2?

idroksi?1,2,3?propanatrikar9oksilat"

%apang $spergillus niger merupakan mikroorganisme #ang dapat tum9u dan 9an#ak

digunakan se;ara komersial dalam produksi asam sitrat, asam glukonat, dan 9e9erapa en+im

seperti pektinase dan amilase"Produksi asam sitrat pada proses <ermentasi dipengarui ole

9e9erapa <aktor diantaran#a adala 8enis media, pH, media, >aktu <ermentasi, suu, aerasi,

dan mikroorganisme #ang digunakan"

$spergillus niger merupakan sala satu spesies #ang paling umum dan muda diidenti<ikasi

dari genus $spergillus, <amili Monilia;eae, ordo Monoliales dan kelas &ungi imper<e;ti"

$spergillus niger dapat tum9u pada suu 3D? 3) 5 optimum, 6? 5 minimum, 'D ?') 5ᵒ ᵒ ᵒ

maksimum dan memerlukan oksigen #ang ;ukup aero9ik" &aktor? <aktor #ang sangat

menentukan persiapan media antara lain kandungan gula, garam?garam anorganik, keasaman

pH, nis9a luas permukaan teradap Aolume media, suplai oksigen, dan suu" =enis?8enis

kapang, 9akteri, dan kamir #ang dapat mengasilkan asam sitrat, antara lain $" niger, $"

a>amori, $" <onse;aeus, $" lu;uensis, $" >entii, $" saitoi, $" <laAus, $" ;laAatus, $"

<umari;us, $" poeni;us, Mu;or Airi<ormis, stulina Aulgaris, BreAi9a;terium,

5or#ne9a;terium, $rtro9a;ter dan 5andida"

$sam sitrat se;ara alami terdapat dalam 9er9agai 9ua? 9uaan seperti lemon, 8eruk,

goose9err#, pear, dan lain? lain" Produksi asam sitrat se;ara sintetis dapat dilakukan pada

media <ermentasi padat dan media <ermentasi ;air" Pada kedua media ini, di9utukan gula

atau sukrosa se9agai sum9er kar9on dan 9aan 9aku dalam skala industri karena merupakan

9aan 9aku #ang muda diperole dan paling 9aik"

Terdapat tiga metode #ang dapat digunakan untuk proses produksi asam sitrat, #aitu proses

ekstraksi sederana, proses <ermentasi, dan proses sintesa se;ara kimia" Proses <ermentasi

ter9agi men8adi dua ma;am, #aitu sur<a;e <ermentation <ermentasi permukaan dan

su9merged <ermentation <ermentasi terendam" Pada proses sur<a;e <ermentation digunakan

7/23/2019 ref p3 vero, hal 2


kapang $spergillus niger " Proses <ermentasi ini dilakukan di dalam tangki?tangki #ang

ter9uat dari alumunium" %e9utuan energi untuk sur<a;e <ermentation tidak 9an#ak karena

proses aerasi menggunakan peralatan #ang sederana" Pada proses su9merged <ermentation,

proses <ermentasi ini ter9agi dua ma;am 9erdasarkan mikroorganisme #ang digunakan

diantaran#a adala su9merged <ermentation menggunakan kapang $pergillus niger dan

su9merged <ermentation menggunakan #east dalam al ini adala 5andida guilliermondii"

&aktor?<aktor #ang mempengarui <ermentasi asam sitrat adala pemilian strain,

konsentrasi su9strat, dan pengaru kondisi <ermentasi #ang meliputi temperatur, dera8at

keasaman, serta luas permukaan" Pemilian strain dalam industri <ermentasi arus memenui

s#arat?s#arat tertentu #aitu murni, unggul, sta9il dan 9ukan patogen" &ermentasi arus

9erlangsung pada temperatur optimal 9erkisar 2D F 30 o5"Larutan gula 1D?2D dapat diu9a

se;ara <ermentasi" ntuk <ermentasi asam sitrat pH optimum adala 3, sedangkan pH

optimum untuk pertum9uan $spergillus niger adala 2,DF3,D" Proses <ermentasi an#a

9erlangsung pada permukaan 9idang media, maka untuk mendapatkan asil #ang maksimal,

luas permukaan diusaakan seluas mungkin dengan memperke;il kete9alan ;airan pada

media ;air atau memperke;il ukuran partikel pada media padat"

Mekanisme pem9entukan asam sitrat seperti din#atakan dengan siklus %re9s atau siklus

asam trikar9oksilat, #aitu 9a>a asam piruAat #ang diperole dari glukosa mengasilkan

$;etil 5o$ #ang 9erkondensasi dengan asam oGalo?asetat #ang tela ter9entuk dalam siklus

mengasilkan asam sitrat"

*ilai pH dari media <ermentasi arus diatur mendekati netral #aitu sekitar 6 agar proses

<ermentasi 9er8alan se;ara optimal" pH #ang semakin menurun menun8ukan 9a>a 8umla

total produk asam sitrat #ang ter9entuk semakin meningkat" Semakin lama >aktu <ermentasi

semakin 9an#ak produk #ang ter9entuk seingga pH akan semakin asam" Penurunan nilai

total asam terse9ut menun8ukan indikasi penurunan aktiAitas mikro9a dalam memproduksi

asam sitrat" Sama seperti pada media kultiAasi ;air, kultiAasi pada su9strat padat 8uga

menun8ukan 9a>a semakin lama >aktu <ermentasi semakin tinggi 8uga produk asam sitrat

#ang ter9entuk" Hal terse9ut di9uktikan dengan peningkatan kandungan total asam dan

penurunan nilai pH"

7/23/2019 ref p3 vero, hal 2


Produksi asam sitrat akan terus meningkat sampai nutrisi #ang terkandung dalam media

a9is" =ika nutrisi #ang terkandung dalam media a9is maka mikro9a akan mengentikan

<ase eksponensialn#a dan akan 9eru9a men8adi <ase stasioner kemudian <ase kematian"

Semakin tinggi konsentrasi nutrisi dalam media #ang digunakan maka akan didapatkan

konsentrasi atau rendemen produk #ang tinggi" Sementara itu semakin lama >aktu <ermentasi

#ang 9erlangsung, maka kadar nutrisi #ang terkandung dalam media akan semakin a9is dan

kadar gula sisa #ang ada dalam media akan semakin menurun" Perlakuan #ang tidak aseptis

dapat mengganggu 8alann#a <ermentasi produksi asam sitrat"

Semakin tinggi 8umla 9iomassa #ang diasilkan maka akan menurunkan 8umla asam sitrat

#ang diasilkan" Semakin tinggi konsentrasi nutrisi maka 8umla asam sitrat #ang diperole

8uga akan semakin tinggi" $plikasi asam sitrat selain untuk pangan, digunakan 8uga dalam

industri <armasi dan kimia"

'"2 Saran

Pada saat praktikum, terutama saat inokulasi searusn#a praktikan 9enar?9enar dalam

kondisi #ang steril agar diperole asil #ang dikeendaki" Se9aikn#a untuk praktikum

selan8utn#a penggunaan alat dan 9aan 8uga le9i diperatikan kem9ali agar praktikum

9er8alan le9i lan;ar"

7/23/2019 ref p3 vero, hal 2


!$&T$- PST$%$

$gustian, =oni 200D" Mi;ro9iolog#, niAersitas Lampung, Bandar Lampung"

Bi+ri, *"=" dan $"L" 7aem" 1(('" 5itri; $;id and $ntimi;ro9ials $<<e;t Mi;ro9iologi;al

Sta9ilit# and Jualit# o< Tomato =ui;e" ngland: &ood o< S;ien;e Press"

Bodd# L"M", T" Berges, 5" Barreau, M"H" 4ainstain, M"=" =onson dan !"=" Balan;e" 1((3"

Puri<i;ation and ;ara;terisation o< an $spergillus niger inAertase and its !*$ seCuen;e"

5urr enet 2': 60F6"

Broekui8sen M"P, " Mattern, -" 5ontreras, dan ="-" %ingorn" 1((3" Se;retion o<

Heterologons Protein 9# $spergillus niger " 5arolina: Biote;"

Aa *oAitasari, dkk" 200"Pem9uatan tanol !ari Sari %ulit *enas, La9oratorium

Bioindustri TP?&TP *B-$7" ttp://9ioindustri"9logspot";om/200/0D/pem9uatan?etanol?

dari?sari?kulit?nenas"tml" diakses pada 6 $pril 2013

re>al, H"S" dan %"L" %alra"1((D" &ungal Produ;tion o<5itri; $;id" Biote;nol" $dA"13 2 :

20(?23'"saC, $", S" $li, " HaC dan M"$"Jadeer" 2002" Time 5oursePro<ile o< 5itri;

$;id&ermentation 9# $spergillus niger and ts %ineti; -elations"=" Biol" S;i" 2 11 : )60?

)61"

9raim" 2011"Produksi $sam Sitrat ole $spergillus niger L?D1"

ttp://ermani9raim"9logspot";om/2010/11/produksi?asam?sitrat?ole?aspergillus"tml"

diakses pada 6 $pril 2013

%irk ? .tmer" 1('D" n;#;lopedia o<5emi;al Te;nolog#, Tird edition, =on 7ile# and

Sons,*5, *e> @ork

%u9i;ek 5"P dan M" -or" 1((" 5itri; $;id &ermentation" 5rit -eA Biote;nol ': 331? )3"

La9oratorium Bioindustri TP, &TP, n9ra> 200), &ermentasi $sam Sitrat"

ttp://>>>"mediakomunikasipermi;a9angmalang/asam sitrat";om" diakses pada 6 $pril

2013

Mangun>id8a8a !" dan $" Sur#ani" 1(('" Teknologi Bioproses" =akarta: Pene9ar S>ada#a"

7/23/2019 ref p3 vero, hal 2


*ara#ana, %isore, -edd#, 2006, Biokineti; Studies on 5itri; $;id Produ;tion sing

$spergillus niger in Bat; &ermentor, ndian 5emi;al ngineer, 4ol" ' *o"', al 21) F 22("

Papagianni, M" 1((D" Morpolog# and ;itri; a;id produ;tion o< $spergillus niger in

su9merged ;ulture" P! Tesis, niAersit# og Strat;l#de"

-aman" 1((2" Produksi Meta9olit Primer" Pener9it $-5$*" =akarta"

-eman, $", S" $li dan " HaC"2003" Pospate Limitation <or nan;ed 5itri; $;id

&ermentation sing $spergillus niger Mutant A?M( on Semi?pilot S;ale"Pakistan =" Biol"

S;i" 6 1' :12')?12'("

S;legel, " Hans 1(6 Mikro9iologi mum, M Press, @og#akarta"

7ener" 1(3" Petun8uk Praktikum Bioteknologi Mikro9ia" Bogor: &MP$, PB"

7ikipedia" 2013" $sam Sitrat" ttp://id">ikipedia"org/>iki/$samKsitratdiakses pada D $pril

2013

ref p3 vero, hal 2

Documents

Transcript of ref p3 vero, hal 2