Pengelolaan Spesimen Klinis Dan Kultur Mikroba

8/17/2019 Pengelolaan Spesimen Klinis Dan Kultur Mikroba

1/38

PENGELOLAAN SPESIMEN KLINIS

DAN KULTUR MIKROORGANISME

Bagian Mikrobiologi

Fakultas Kedokteran UnsyiahBanda Aceh, 2013


2/38

Kegiatan Praktikum yang akan

dilaksanakan

• Penilaian makroskopis spesimen klinis serta kultur

mikroorganisme

•

Evaluasi mikroskopis : Pewarnaan Gram, Ziehl-Neelsen, pemeriksaan KOH 10%

• Identifikasi mikroorganisme : Karakteristik fisiologi

dan biokimia mikroorganisme

• Uji Sensitivitas

• Isolasi DNA

• PCR


3/38

Pengelolaan Spesimen Klinis


4/38

Pengambilan spesimen

Evaluasi makroskopis

Identifikasi

Evaluasi Mikroskopis

Uji Sensitivitas

Penanaman di media

Langkah Identifikasi

Penyebab Iinfeksi dari

Spesimen Klinis


5/38

Spesimen Klinis

• Darah

• Urin

•

Sputum• Eksudat luka, luka bakar dan abses

• Swab saluran genitalia, rectal/feses, sekret

telinga• Cairan serebrospinal


6/38

Aspek penting dalam pengelolaan

spesimen

• Bekerja dengan bersih/steril, Biosafety,

pengambilan dan transpor spesimen,

penilaian kelayakan spesimen, pelabelanspesimen, pemrosesan dan pembuangan

spesimen.


7/38

• Kebersihan/sterilisasi

– Wajib dipatuhi, mempengaruhi hasil

•

Pengambilan dan transpor spesimen – Secara aseptik desinfeksi area pengambilan

– Waktu sebelum antibiotik diberikan, waktukhusus yang berbeda tiap spesimen

– Tata cara tertentu, berbeda tiap spesimen

– Transpor sesegera mungkin, penggunaanmedia transpor (mis. Stuart, Amies, Carry Blair)


spesimen


8/38

• Biosafety melindungi pemeriksa, APD wajib

• Penilaian kelayakan spesimen, mis. skor Bartlett

untuk sputum

• Pelabelan harus teliti agar tidak tertukar, memuat

informasi yang penting

• Pemrosesan pemilihan media yang tepat sesuai

spesimen, lingkungan yang tepat (aerob atauanaerob)

• Pembuangan dipisahkan dari sampah biasa,

incinerator


spesimen


9/38

Kuntaman, 2007


10/38

Pengambilan Spesimen

1. Sputum

– Sputum malam hari atau pagi sebanyak 3-5 mL

– Ditampung pada wadah/pot bermulut lebar, tutup ulir,

disposable – Pasien berkumur, posisi berdiri/bungkuk

– Ketika muncul rangsangan untuk batuk, inspirasi maksimal,

langsung membatukkan ke dalam pot

– Harus sputum, bukan air liur (pastikan dengan skor Barlett) – Segera analisis, jika >2 jam disimpan di lemari es


11/38

2. Darah

– Diambil pada saat suhu tubuh meningkat mis. Tifoid pada

demam minggu pertama

–

Bakteriemia intermitten darah diambil 3x di tempatyang berbeda dalam 24 jam

– Desinfeksi daerah pengambilan dengan povidon iodine dan

alkohol 70%lakukan punksi vena di lengan dengan jarum

steril



12/38

2. Darah

– Jumlah darah: bayi 1-3 mL, anak 3-5 mL, dws 10-20 mL

– Botol tutup ulir yang berisi antikoagulan Sodium

polyetanol sulfonat 0,025-0,5%+BHI atau tanpa koagulanuntuk uji serologis mis. Widal

– Jangan disimpan di kulkas, segera analisis



13/38

3. Urin

– 3 cara: urin kateter, urin pancar tengah (clean

catch urine) dan aspirasi suprapubik

– Dipilih berdasarkan kondisi/indikasi tertentu

• Sakit parah/tidak sadar urin kateter

• Anak aspirasi suprapubik

–

Paling representatif urin pancar tengah



14/38

3. Urin

Urin kateter:

Jepit kateter


15/38

3. Urin

Urin pancar tengah:

Dianjurkan urin pagi, buang 1/3 urin pertama,tampung di wadah bersih.



16/38

Kuntaman, 2007


17/38

Kuntaman, 2007


18/38

3. Urin

Aspirasi suprapubik:

• Bebas kontaminasi

• Curiga bakteri anaerob

• Desinfeksi dan anestesi di daerah midline ( 2 cm di

atas simfisin pubis), aspirasi dengan semprit ukuran

10 mL dan jarum ukuran 22



19/38

Pengambilan spesimen

Evaluasi makroskopis

Identifikasi

Evaluasi Mikroskopis

Uji Sensitivitas

Penanaman di media

Langkah Identifikasi

Penyebab Iinfeksi dari

Spesimen Klinis


20/38

Pengamatan makroskopis spesimen

• Warna;

– Coklat gelap atau coklat kekuningan abses amoeba

– Pus biru kehijauan dari luka P. aeruginosa

• Konsistensi – Gelatinosa abses amoeba

– Kaseosa khas TB

• Bau

– Tajam dan menyengatbakteri anaerob atau campuran


21/38

PEMBENIHAN KUMAN


22/38

1. Menanam kuman dari media cair ke

media padat

Tujuan mendapatkan koloni secara terpisah

dari biakan campuran


23/38


24/38

2. Menanam kuman kuman dari media padat ke

media semisolid

Tujuan:

Mengetahui ada tidaknya pergerakan kuman


25/38


26/38

Tujuan: Untuk stok kuman

3. Menanam kuman dari media

padat ke media agar miring


27/38


28/38

Tujuan

Untuk perbanyakan kuman

4. Menanam kuman dari media

padat ke media cair


29/38

Teknik Kultivasi Mikroba


30/38

Penanaman/Perbenihan Mikroba


31/38

1. Streak Plate Method

2. Pour Plate Method

Metode Kultivasi/Perbenihan Mikroba


32/38

Streak Plate Method


33/38

Streak Plate (Quadrant Streak)


34/38

Streak Plate Method

Pour Plate Method


35/38

Pour Plate MethodPour Plate Method


36/38

Pour Plate Method

Viable cell counts


37/38

Viable cell counts


38/38

Praktikum hari ini

Perbenihan sampel klinis sputum Non Tb

1. Perbenihan ke Media MCA

2. Perbenihan ke Media BA

Pengelolaan Spesimen Klinis Dan Kultur Mikroba

Documents

Transcript of Pengelolaan Spesimen Klinis Dan Kultur Mikroba