PEMBUATAN PREPARAT SAYATAN LAMBUNG PUYUH JANTAN(Coturnix coturnix) DENGAN

METODE PARAFIN

Oleh :Irwin SeptianF05110003Kelompok 2

Pembuatan preparat dengan metode parafin merupakan suatu metode yang paling umum digunakan. Metode ini banyak digunakan karena pembuatannya lebih mudah dan lebih cepat serta material kering dapat disimpan lebih lama (Kiernan, 1990 dalam Supartinah, 2012).

METODE PARAFIN

Ketebalan irisan metode parafin dapat mencapai rata-rata 6 mikron. Irisan-irisan yang bersifat seri dapat dikerjakan dengan mudah bila menggunakan metode ini.

Kelemahan dari metode ini ialah jaringan menjadi keras, mengerut, dan mudah patah. Jaringan-jaringan yang besar tidak dapat dikerjakaan dengan menggunakan metode ini karena sebagian besar enzim-enzim yang terdapat pada jaringan akan larut (Kiernan, 1990 dalam Supartinah, 2012).

Sekilas metode parafin

1.Pembiusan (Nacrose)2.Pengambilan Tissue

(Diseksi)3.Fiksasi (Fixation)4.Pencucian (Washing)5.Dehidrasi

(Dehydration)6.Penjernihan (Clearing)7.Infiltrasi (Infiltration)

8.Penanaman (Embedding)

9.Penyayatan (Sectioning)

10.Afiksing (Afixing)11.Deparafinasi

(Defaraffination)12.Pewarnaan

(Staining)13.Pelabelan

(Mounting)

Tahapan Metode Parafin

1

2.

3.

Cara kerja praktikum

SamplingPenyembelihan puyuh jantan

(Coturnix coturnix)Pengambilan tisu (diseksi)

Diambil organ lambungnya

Fiksasi (fixation)

NaCl fisiologis 0.9% (30 menit)

dicuci dengan

FAA hingga organ matang

4.

5.

6.

Lanjutan....

Dehidrasi (dehydration)

Alkohol bertingkat (@

30 menit)

30% 50% 70%(Stopping point)

80% 96%

Penjernihan (clearing)

Xylol selama 45 menit

Infiltrasi (infiltration)

Dalam oven bersuhu 58°

Xylol : parafin (1:3)Xylol : parafin (1:1)Xylol : parafin (3:1)

Parafin murni

7.

8.

Lanjutan....

Penanaman (embedding)

Parafin cair

Organ Lambung

Kulkas (1 minggu)

Pemotongan (sectioning)

Mikrotom Putar 4-6 µm

Hasil berupa pita-pita

9.

10.

lanjutan....

Afiksing Albumin

Akuades Sampel

Hot plate

Deparafinasi Xylol selama 3

menit

11.

12.

Lanjutan....

Rehidrasi

Alkohol 96%,96%, 80%, 70%, 50%, dan 30 % sebanyak

10 kali

Akuades selama 10 menit

Pewarnaan (stainning)

a. Hematoksilin: 15 detik, bilas dengan

air, lalu amati di Mikroskop

b. Eosin: 15 detik, bilas dengan air lalu amati di mikroskop

Cuci dengan air mengalir, Lalu rendam dengan

Lanjutan....

Rehidrasi

30% 70% 96%50% 80%

@30 detik

Xylol (3 menit)

Mikroskop

Diamati dengan

Mounting

96%

Hasilnya di foto

HASIL PREPARATGambar 1. Preparat Sayatan Organ Lambung Perbesaran 40X HE

1

2

3Keterangan:1. Musculari

s Mukosa2. Gastric

Pits3. Gastric

Lumen

Gambar 2. Sayatan LambungSumber : http://histology-world.com/photoalbum/displayimage.php?album=26&pid=4274

GAMBAR LITERATUR

Pada pembuatan preparat lambung, keadaan preparat sudah cukup baik. Akan tetapi jika dibandingkan dengan gambar sebenarnya terdapat beberapa tampilan yang rusak. Hal ini disebabkan pada proses fiksasi yang kurang baik. Selain itu, ada terdapat sisa albumin yang ikut tewarnai sehingga mengganggu hasil pengamatan.

PEMBAHASAN

Supartinah. (2012). Analisis Deskriptif Kemunduran Mutu Jeroan (Usus, Hati,Ginjal) Ikan Bandeng (Chanos chanos) selama Penyimpanan Suhu Chilling melalui Pengamatan Histologis. Skripsi. Teknologi Produk Perairan Fakultas Perikanan dan Kelautan IPB : Bogor

SUMBER

Terima Kasih....