menghitung-mikroba-tidak-langsung.doc

8/12/2019 menghitung-mikroba-tidak-langsung.doc

1/7

Laporan Praktikum Nama : Diana Agustini Raharja

Mikrobiologi NIM : J3L11216

!"las#k"lompok : $ P1#1

PJP : M% Ari& Mul'a( )% Pi%

Asist"n : 1% *uriska )"kar Rani2% Lia )uliani

3% Ram+hani

KUANTITASI MIKROBA: METODE PENGHITUNGAN

TIDAK LANGSUNG

PROGRAM KEAHLIAN ANALISIS KIMIA

PROGAM DIPLOMA

INSTITUT PERTANIAN BOGOR

BOGOR

2013


2/7

Pendahuluan

,al m"n+asar 'ang juga p"rlu +ip"rhatikan +alam Mikrobiologi( 'aitu

analisis kuantitati& t"rha+ap suatu bahan% Analisis ini sangat p"nting untuk

m"ng"tahui jumlah mikroorganism" 'ang a+a pa+a suatu samp"l t"rt"ntu

m"ngan+ung ban'ak mikroorganism" atau s"balikn'a -."r+ia/ 1003%P"ngamatan bakt"ri +apat +ilakukan s"ara in+ii+ual maupun s"ara k"lompok

+alam b"ntuk koloni% 4ila bakt"ri 'ang +itumbuhkan +i +alam m"+ium 'ang ti+ak

air( maka akan t"rja+i suatu k"lompok 'ang +inamakan koloni% 4"ntuk koloni

b"rb"+a5b"+a untuk s"tiap sp"si"s +an b"ntuk t"rs"but m"rupakan iri khas bagi

suatu sp"si"s t"rt"ntu -alu'o 2778%

4"b"rapa ara 'ang +apat +igunakan untuk m"nghitung atau m"ngukur

jumlah jasa+ r"nik +i +alam suatu susp"nsi atau bahan% $ara t"rs"but +ib"+akan

atas b"b"rapa k"lompok 'aitu( p"rhitungan jumlah s"l( t"r+iri +ari hitungan

mikroskopik( hitungan a9an( +an MPN -most probable number p"rhitungan

massa s"l s"ara langsung( t"r+iri +ari olum"trik( graim"trik( +an k"k"ruhan

-turbi+im"tri p"rhitungan massa s"l s"ara ti+ak langsung( t"r+iri +ari analisiskompon"n s"l( analisis pro+uk katabolism"( +an analisis konsumsi nutri"n

-."r+ia/ 1003% )"+angkan m"nurut Irianto -2778( a+a b"b"rapa ara

p"nghitungan jumlah mikroba( 'aitu ara p"nghitungan pa+a l"mp"ng p"mbiakan(

ara m"nghitung langsung -m"to+" kaa obj"k( m"to+" ukur k"k"ruhan( m"to+"

turbi+im"tri( n"&"lom"tri( s"rta +"ngan jumlah p"rkiraan t"r+"kat -JP;% $ara

p"nghitungan pa+a l"mp"ng p"mbiakan +is"but juga m"to+" p"nghitungan bakt"ri

hi+up atau m"to+" p"nghitungan koloni% Pa+a p"nghitungan koloni( +ilakukan

p"n'impanan pa+a suhu 'ang s"suai%


3/7

4roth( m"+ia Plat" $ount Agar +alam a9an p"tri( tabung5tabung b"risi 0 mL

larutan &isiologis -7(?@ Na$l( alkohol 87@( +an rl"nm"'"r 'ang b"risi m"+ia

Plat" $ount Agar air b"rsuhu s"kitar ?7$ -hangat%

P!"#edu! Ke!ja)uasana st"ril harus +iiptakan +ari a9al praktikum hingga akhir praktikum%


4/7

Cambar 1 !oloni bakt"ri pa+a larutan &isiologis 1756-a +an 1758-b +"ngan

m"to+" a9an s"bar

Cambar 2 !oloni bakt"ri pa+a larutan &isiologis 175?-a( 1756-b( +an 1758-

+"ngan m"to+" a9an tuang

Pe&'aha#an

Pros"s st"rilisasi +ibutuhkan s"b"lum m"mulai maupun m"ngakhiri s"buah

p"k"rjaan +i laboratorium +"ngan m"nggunakan t"knik as"ptik% ;"knik as"ptik

+ilakukan +"ngan ara tangan +an ar"a m"ja 'ang +igunakan +is"mprotkan+"ngan alkohol 87@% Spreader( a9an p"tri( +an tip 'ang +igunakan juga harus

st"ril% Spreader +ibuat st"ril +"ngan ara +ir"n+am +alam alkohol 87@ 'ang

k"mu+ian +ipanaskan +alam api k"tika h"n+ak +igunakan% $a9an p"tri baik 'ang

masih kosong maupun 'ang su+ah b"risi m"+ia Plat" $ount Agar harus

+istr"lisasikan t"rl"bih +ahulu +alam autoclave% ;ip 'ang +igunakan juga harus

st"ril% !otak tip baru +ibuka k"tika tip akan +ipasangkan +"ngan mikropip"t +an

s"g"ra +itutup agar kontaminan +ari u+ara ti+ak s"mpat m"n"mp"l pa+a tip% )"tiap

p"ng"rjaan +ilakukan +i +"kat api spirtus% ,al t"rs"but +ilakukan untuk

m"mbunuh mikroorganism" 'ang ti+ak +iinginkan -kontaminan agar +ip"rol"h

p"ngukuran 'ang akurat%

!ons"ntrasi s"l5s"l mikroba +i +alam sp"sim"n pa+a umumn'a ti+ak+ik"tahui s"b"lumn'a( maka p"ng"n"ran p"rlu +ilakukan b"b"rapa tahap

s"hingga s"kurang5kurangn'a satu +i antara a9an t"rs"but m"ngan+ung koloni

t"rpisah +i atas p"rmukaan ataupun +i +alam agar% Pa+a p"ng"n"ran b"rtingkat

'aitu pa+a 1751 sampai 1758( s"b"lum +an s"su+ah +imasukkan susp"nsi bakt"ri

pa+a larutan &isiologis 'ang b"ra+a +alam tabung( mulut tabung +ipanaskan

t"rl"bih +ahulu% ,al ini juga +ilakukan k"tika p"ng"n"ran b"rtingkat +"ngan

tabung lainn'a% )"b"lum +ilakukan p"ng"n"ran b"rtingkat( larutan +ikook

t"rl"bih +ahulu sampai homog"n agar k"tika mikropip"t m"ngambil airan 'ang

juga b"risi bakt"ri% )"t"lah airan +i +alam mikropip"t +ik"luarkan k" tabung 'ang

lainn'a( +ilakukan p"mbilasan +"ngan ara m"ngambil s"jumlah airan 'ang

b"ra+a +i tabung +an m"ng"luarkann'a k"mbali agar bakt"ri 'ang m"n"mp"l pa+a


5/7


6/7

koloni bakt"ri sama s"kali +an pa+a p"ng"n"ran 175? koloni bakt"ri 'ang

t"rb"ntuk m"numpuk +an b"rg"lombol s"hingga sulit untuk +ihitung s"bagai suatu

koloni 'ang +apat pula +is"but +"ngan t"rlalu ban'ak untuk +ihitung -;4=D%

;i+ak t"rb"ntukn'a koloni atau s"+ikitn'a koloni bakt"ri 'ang t"rb"ntuk +apat

+is"babkan ol"h b"b"rapa hal +i antaran'a a9an 'ang b"risi bakt"ri t"rs"butt"rlalu +"kat +"ngan api s"hingga bakt"ri t"rs"but m"nja+i mati atau han'a s"+ikit

saja 'ang hi+up% )"lain itu +apat pula +ikar"nakanspreader'ang +igunakan untuk

m"ratakan larutan p"ng"n"r bakt"ri masih panas s"hingga bakt"ri t"rs"but mati

s"mua atau s"bagian% Jumlah koloni 'ang +ip"rol"h +alam jumlah s"+ikit +apat

pula +ikar"nakan p"ng"n"ran b"rtingkat 'ang +ilakukan ti+ak homog"n s"hingga

larutan t"rs"but t"rlalu "n"r -jumlah bakt"ri t"rlalu s"+ikit% Jika koloni bakt"ri

'ang +ip"rol"h pa+a suatu p"robaan m"miliki 9arna l"bih +ari satu( hal ini

m"nunjukkan bah9a a+an'a kontaminan 'ang ikut tumbuh% Jika suatu a9an

m"mb"ntuk ban'ak koloni maka p"rhitungan +apat +ip"rmu+ah +"ngan ara

m"nggunakan kua+ran +an pa+a salah satu kua+ran +ihitung 'ang +apat m"9akili

kua+ran lainn'a s"p"rti b"rikut%

Cambar 3 P"mbuatan kua+ran untuk m"mp"rmu+ah p"rhitungan koloni bakt"ri

)"makin tinggi tingkat p"ng"n"ran 'ang +ilakukan maka jumlah koloni

bakt"ri 'ang akan t"rb"ntuk s"makin s"+ikit% ,al ini +apat +ilihat pa+a

p"ng"n"ran 175?'ang m"miliki jumlah koloni 'ang t"rlalu ban'ak pa+a a9an

tuang +an pa+a p"ng"n"ran 1758m"miliki jumlah koloni paling s"+ikit atau bahan

ti+ak a+a s"hingga ti+ak m"m"nuhi p"rs'aratan statistik% Jumlah koloni 'ang

b"rkurang s"iring +"ngan p"ningkatan p"ng"n"ran +is"babkan kar"na jumlah

bakt"ri 'ang t"rkan+ung +alam tiap olum" inokulan 'ang +ipin+ahkan s"makin

b"rkurang akibat p"ng"n"ran 'ang +ilakukan%

Jumlah s"l bakt"ri 'ang t"r+apat +alam samp"l +apat +it"ntukan +"ngan

rumus s"bagai b"rikut%

(s"l > koloni E E

)atuan untuk (s"l a+alah $.=#mL 'ang mana $.= m"rupakan colony forming

units p"r mL% )"makin b"sar p"ng"n"ran( maka jumlah koloni s"makin k"il

s"hingga jumlah mikroorganism" +apat +ihitung% .p m"rupakan &aktor

p"ng"n"ran s"+angkan (inokulan m"rupakan larutan p"ng"n"r 'ang +iambil

untuk +iinokulasikan% Pa+a p"robaan olum" inokulan 'ang +igunakan s"b"sar

7(1 mL% Jumlah bakt"ri pa+a p"robaan baik a9an s"bar maupun a9an tuang

ti+ak +apat +ihitung( kar"na ti+ak m"m"nuhi p"rs'aratan statistik%

!"untungan m"nggunakan p"rhitungan s"ara ti+ak langsung ialah m"to+"

t"rs"but han'a +apat m"nghitung jumlah mikroorganism" 'ang hi+up atau s"l

'ang hi+up% ;i+ak s"p"rti p"rhitungan s"ara langsung( s"luruh mikroorganism"


7/7

menghitung-mikroba-tidak-langsung.doc

Documents

Transcript of menghitung-mikroba-tidak-langsung.doc