docx

ABSTRAK

Tujuan: Asiklovir profilaksis jangka panjang (ACV) , dianjurkan untuk mencegah herpes simplex virus berulang Tipe 1 (HSV-1) dapat menimbulkan risiko untuk ACV-refractory disease karena resisten ACV. Kami menentukan pengaruh profilaksis ACV pada prevalensi HSV-1 resisten ACV(ACVr) kornea dan konsekuensi klinis daripadanya pada pasien dengan Keratitis HSV-1 berulang (RHK).

Metode. Frekuensi virus resisten ACV ditentukan pada 169 kornea HSV-1 isolat dari 78 pasien RHK dengan riwayat penyakit stroma. Profil kerentanan ACV isolat berkorelasi dengan parameter klinis untuk mengidentifikasi faktor risiko predisposisi dari RHK resisten ACV

Hasil. HSV-1 kornea isolat dengan> 28% virus resisten ACV yang didefinisikan sebagai ACVr isolat. Empat puluh empat isolat (26%) adalah resisten ACV. Analisis multivariat mengidentifikasi ACV profilaksis jangka panjang (12 bulan) (rasio odds [OR] 3,42; 95% confidence interval [CI], 1,32-8,87) dan durasi kambuh45 hari (OR 2.23; 95% CI, 1.02- 4,87), menunjukkan ACVrefractory disease, sebagai faktor risiko independen untuk ACVr isolat. Selain itu, kornea ACVr Isolat adalah faktor risiko untuk penyakit ACV-refractory diseasea (OR 2.28; 95% CI, 1,06-4,89).

Kesimpulan. Data menunjukkan bahwa ACV profilaksis jangka panjang merupakan predisposisi ACV refractory disease karena munculnya HSV-1 kornea resistan ACV. Pengujian kerentanan ACV dijamin selama follow up pasien RHK.

Herpes simplex virus tipe 1 (HSV-1) adalah human alpha-herpes virus yang endemik di seluruh dunia. Virus biasanya diperoleh pada masa anak usia dini melalui rute orofasial, yang mengarah ke pembentukan infeksi laten seumur hidup neuron yang terletak di dalam ganglia trigeminal. Reactivations Intermittent menyebabkan virus shedding dan kadang-kadang untuk penyakit berulang [ 1 ]. HSV-1 menyebabkan berbagai penyakit, mulai dari herpes labialis ringan sampai penyakit mata mengancam [ 1 ]. Infeksi HSV-1 pada kornea, disebut sebagai herpes keratitis (HK), adalah penyebab infeksi umum yang menyebabkan gangguan penglihatan terutama karena sifat berulang mereka [ 2 , 3 ]. HK bermanifestasi sebagai keratitis epitel menular (IEK), yang ditandai dengan replikasi virus dangkal, atau bisa menginfeksi stroma kornea yang mendasari dan menyebabkan herpes stroma keratitis (HSK) [ 2 ] .Recurrent HSK dapat mengakibatkan kebutaan kornea [4 ]. Obat pilihan untuk mengobati infeksi HSV-1 adalah acyclovir (ACV). ACV adalah prodrug selektif dikonversi oleh HSV-1 timidin kinase (TK) ke ACV-monofosfat, memungkinkan konversi berikutnya oleh kinase seluler ke bentuk aktif ACV-trifosfat, yang memblok replikasi virus [ 3 ]. ACV umumnya ditoleransi dengan baik, dan yang digunakan secara luas telah menghasilkan penurunan yang signifikan dalam gangguan penglihatan yang disebabkan oleh penyakit okuler yang diinduksi oleh HSV-1[ 1 , 3 ]. Namun, pengobatan ACV dapat menyebabkan munculnya HSV-1 resisten ACV (ACVr). Semua klinis HSV-1 isolat mengandung virus resisten ACV dan frekuensi virus ini menentukan fenotif kerentanan ACV isolat : ACVr atau ACV-sensitif (ACVs ) [ 5 - 7 ]. Prevalensi HSV-1 yang resisten ACV lebih tinggi di antara pasien immunocompromised (hingga 30%) dibandingkan dengan orang yang sehat ( 3 kali durasi normal episode IEK isolat (yaitu, 2 minggu), sebagai ACV-refraktori HK. Profil kerentanan ACV isolat kornea tidak diketahui sewaktu meresepkan ACV, dan penulis tidak memiliki akses dengan hasil tes kerentanan ACV selama penyusunan dari data klinis.

Tes Kerentanan ACVPersentase virus resisten ACV di HSV-1 kornea isolat adalah ditentukan oleh uji efisiensi plating [ 16 , 17 ]. Secara singkat, seri pengenceran 10 kali lipat dari HSV-1 kornea isolat disuntikkan ke sel-sel ginjal monyet (yaitu, Vero sel) dalam medium kultur yang terdiri dari Dulbecco yang dimodifikasi eagle medium dilengkapi dengan 5% heat inactivated fetal bovine serum dan antibiotik (semua dari Gibco). Setelah adsorpsi pada 37 C selama 1 jam, inokulum telah dihapus dan sel-sel yang dilapisi dengan medium kultur yang mengandung 2% v / v metilselulosa (Sigma) dilengkapi dengan tanpa ACV atau 20 umol / L ACV (Roche) dan dibudidayakan selama 3 hari dan 10 hari pada suhu 37 C, masing-masing. Konsentrasi ACV dan periode kultur dipilih untuk memastikan bahwa hanya virus yang resisten ACV akan terbentuk plak [ 5 ]. Persentase virus yang resisten ACV di setiap isolat dihitung dengan membagi jumlah plak virus yang diperoleh dengan adanya 20 umol / L ACV dengan jumlah plak yang diperoleh setelah kultur dengan tidak adanya ACV [ 5 , 7 ]. Secara keseluruhan fenotip kerentanan ACV pada set isolat kornea yang dipilih ditentukan oleh HSV-1-spesifik real time uji polymerase chain reaction kuantitatif (qPCR)[ 12 , 18 ]. Secara singkat, sel-sel Vero terinfeksi dengan kornea HSV-1 isolat yang diencerkan 100 kali lipat. Setelah adsorpsi pada 37 C selama 1 jam, inokulum telah dihapus dan sel-sel diinkubasi, dalam rangkap tiga, dengan konsentrasi yang berbeda dari ACV yang diencerkan pada media kultur. Dua puluh empat jam setelah inokulasi (penyuntikan), sel-sel lisis dan DNA virus memuat dalam sel lisis ditentukan oleh qPCR HSV-1-spesifik [ 12 , 18 ]. Median ACV Inhibitor Concentration (IC 50) dari masing-masing isolat didefinisikan sebagai konsentrasi ACV yang mengurangi jumlah salinan virus 50% dibandingkan dengan kontrol sel yang terinfeksi tanpa ACV. Isoldianggap resisten