Nama : Maharani

NIM : 7140011

Semester : 3 (Tiga)

Akademi Analis Kesehatan Putra Jaya Batam

LATIHAN BAKTERIOLOGI II

1. Penanganan, penyimpanan, dan pemusnahan sampel Mikrobiologi.

2. Mekanisme Patogenesis Bakteri.

3. Respon tubuh terhadap infeksi yang disebabkan oleh bakteri.

Jawaban :

a. Penanganan

Semua spesimen dapat diterima dan dilanjutkan pemeriksaan apabila telah

dilengkapi data yang benar dan sesuai, jumlah yang dibutuhkan cukup, dan

cara pengambilan sesuai dengan SOP. Berikut penanganan beberapa

sampel pada tahap analitik.

1. Sampel Sputum

Sputum langsung dihapus ke objek gelas dan langsung difiksasi dengan

Alkohol 50-70%, dengan metode fiksasi pelapis (coating fixative).

2. Sampel Luka pada Kulit

Untuk pemeriksaan kuman, sampel perlu dilakukan pewarnaan Gram,

biakan pada agar darah dan perbenihan MacConkey. Untuk biakan Candida

dipergunakan perbenihan Sabouraud dan untuk jamur kulit dibuat sediaaan

basah pada KOH dan biakan pada agar Saboraud.

3. Sampel Darah

Darah yang diambil sebanyak 5-10 ml dipindahkan kedalam 50 ml

perbenihan didalam botol biakan darah. Untuk membiakkan Salmonella

digunakan kaldu glukosa empedu dan untuk organisme lain dipakai kaldu

glukosa. Pada beberapa laboratorium dipakai polianetol sulfonat di dalam

kaldu glukosa untuk mencegah pembekuan darah dan menghambat efek

bakterisida darah. Semua biakan dieramkan pada suhu 370C.

Pemindahbiakan dilakukan sesudah 24 jam, 98 jam dan 14 hari pengeraman

pada suhu 370C.

4. Sampel Feses

Mula-mula feses diperiksa secara makroskopis (warna, bau,

konsistensi, lender dan darah). Lalu diperiksa secara mikroskopis (dibuat

sediaan). Untuk mencari protozoa sering dipakai larutan eosin 1-2% sebagai

bahan pengencer feses. Selain itu larutan asam asetat 10% dipakai untuk

melihat leukosit lebih jelas.

5. Sampel Cerebrospinal Fluid (CSF)

Sesampainya di laboratorium, cairan otak langsung diperiksa secara

makroskopik dahulu untuk melihat warna, kekeruhan dan endapan atau

gumpalan. Lalu diperiksa secara mikroskopik untuk melihat leukosit.

Sedikit cairan otak segera dibiakkan pada kaldu glukosa. Sisa cairan

dipusingkan, lalucairan yang sudah terpisah dari endapannya, diperiksa

reaksi biokimiawinya dengan uji protein, gula dan klorida.

Endapannya dibuat sediaan, lalu diwarnai secara Gram. Endapan ini

juga dibiakkan pada lempeng agar darah. Sesudah dieramkan pada suhu

370C selama 48 jam, lempeng agar ini diperiksa dan koloni yang tumbuh

diperiksa dengan berbagai jenis reaksi biokimiawi dan juga kepekaannya

terhadap antibiotika.

6. Sampel Urine

Cara pembiakan kuman pada urine : Sengkelit platina yang sudah

dibakukan ( garis tengah lingkarannya kira-kira 2,5 mm) dibakar diatas

nyala api, kemudian didinginkan. Sengkelit ini lalu dicelupkan pada urine

yang belum dipusingkan, kemudian digoreskan diatas lempeng agar darah

atau agar MacConkey. Eramkan kedua lempeng agar darah tersebut pada

370C dan periksalah keesokan harinya. Hitung jumlah koloni pada agar

darah dan jumlah koloni kuman Gram negative pada agar MacConkey.

Sesudah menghitung jumlah kuman pada lempeng agar, dilanjutkan dengan

mengidentifikasikan organisme yang ada dan periksa pula kepekaannya

terhadap berbagai antibiotika. Jika sesudah 24 jam tidak tumbuh kuman,

biarkan dalam incubator dan bila pada suhu 370C tetap negatif, dilaporkan

sebagai : Tidak tumbuh kuman sesudah 48 jam.

b. Penyimpanan

1. Sampel Sputum

Penyimpanan pada pot steril berpenutup rapat selama < 24 jam pada suhu

ruang (200C-25

0).

2. Sampel Luka pada Kulit Cotton bud berisi sampel dapat langsung digunakan untuk pemeriksaan

atau apabila dimasukkan ke dalam media transport dapat disimpan pada

suhu kamar (200C-25

0)

3. Sampel Darah - Penyimpanan : < 24 jam pada suhu ruang (200C-250).

- Bila tidak memungkinkan, gunakan media transport berupa Stuart Medium, Amies Medium. Media transport berguna sebagai antikomplemen (mencegah

lisis sel) dan antifagositik (supaya kuman tidak menfagosit sel).

- Bila media transport tidak tersedia gunakan antikoagulan SPS (Sodium Polianitol Sulfonat) 0,05 %, jangan menggunakan antikoagulan lain karena

dapat membunuh viabilitas bakteri.

4. Sampel Feses - Feses tahan < 1 jam pada suhu ruang untuk transport. - Bila > 1 jam maka gunakan media transport (Media Carry and Blair, Stuarts

Medium, Pepton Water).

- Penyimpanan: jika pemeriksaan akan dilakukan < 24 jam, simpan pada suhu ruang, jika > 24 jam simpan pada suhu 4

0C.

5. Sampel Cerebrospinal Fluid (CSF) Penyimpanan dalam suhu 37

0C dan lamanya maksimal 4 hari jika

menggunakan media transport. Namun sebaiknya jangan menunda

pemeriksaan sampel CSF.

6. Sampel Urine - Penyimpanan pada suhu 40C setelah pengambilan. - Wadah spesimen haruslah bersih, kering, dan bermulut lebar. - Sampel harus segera diperiksa dalam waktu 1 jam, jika terpaksa harus

disimpan lebih lama lagi mesti menggunakan pengawet untuk menghambat

perubahan susunannya. Beberapa pengawet tersebut diantara lain : Toluena,

Thymol, Formaldehida, Asam Sulfat Pekat, dan Natriumkarbonat.

b. Pemusnahan - Pemusnahan Spesimen Bakteri

1. Tabung reaksi atau cawan petri yang telah digunakan sebagai media penumbuh bakteri dimasukkan ke dalam panci besar (panci pemusnahan).

2. Panci diisi dengan cairan wipol+bayclean kemudian ditambah dengan air sampai seluruh tabung reaksi dan cawan petri benar-benar terendam

(cairan wipol=1/3 botol dan cairan bayclean=1/2 botol).

3. Panci ditutup dengan rapat lalu dipanaskan hingga mendidih sampai seluruh media agar mencair (suhu pemanas/kompor = 100

0C).

4. Setelah mendidih, angkat panci. Sisa air dibuang ke dalam septictank. Lalu panci dialiri dengan air terus menerus hingga bersih.

5. Tabung reaksi dan cawan petri dicuci dengan detergen menggunakan penggosok hingga bersih.

6. Bila telah bersih, masukkan tabung reaksi dan cawan petri kedalam autoclave untuk di sterilisasi.

- Pemusnahan Sampel Sputum dan Feses Sputum dan Feses sisa dari pemeriksaan dimusnahkan dengan cara

menimbun atau mengubur sampel tersebut ditempat tertentu yang telah

disediakan. Sanitary landfill adalah system pemusnahan yang paling baik.

Dalam metode ini, pemusnahan sampah dilakukan dengan cara menimbun

sampah dengan tanah yang dilakukan selapis demi selapis.

- Pemusnahan Sampel Darah Darah sisa dari pemeriksaan ditampung dalam suatu wadah, setelah itu

diolah oleh petugas penanganan sampel infeksius.

2. Patogenesis infeksi bakteri diawali permulaan proses infeksi hingga mekanisme

timbulnya tanda dan gejala penyakit. Beberapa tahapan pathogenesis bakteri antara

lain:

a. Adhesi, adalah proses bakteri menempel pada permukaan sel inang, pelekatan

terjadi pada sel epitel.

b. Kolonisasi, adalah proses dimana bakteri menempati dan bermultipikasi pada

suatu daerah tertentu dalam tubuh manusia.

c. Invasi, adalah proses bakteri masuk ke dalam sel inang/jaringan dan menyebar

ke seluruh tubuh.

d. Toksigenesis, adalah kemampuan suatu organisme yang memproduksi toksin

yang ikut serta dalam perkembangan penyakit.

3. Ketika bakteri masuk kedalam tubuh, maka system imun dalam tubuh akan

otomatis menjalankan suatu mekanisme untuk mempertahankan tubuh dari

serangan bakteri. Mekanisme pertahanan tubuh ada 2, yaitu mekanisme non

spesifik dan mekanisme spesifik. Innnate imunity terdiri dari

a. Mekanisme Pertahanan Non Spesifik

Mekanisme Pertahanan Non Spesifik disebut juga komponen non adaptif

atau innate, atau imunitas alamiah, artinya mekanisme pertahanan yang tidak

ditujukan hanya untuk satu jenis antigen, tetapi untuk berbagai macam antigen.

Innate imunity terdiri dari barrier fisik dan barrier mikrobiologis (flora

normal), komponen fase cair, dna konstituen seluler (Hirsch & Zee, 1999).

Imunitas alamiah sudah ada sejak bayi lahir dan terdiri atas berbagai macam

elemen non spesifik. Jadi bukan merupakan pertahanan khusus untuk antigen

tertentu.

Contoh mekanisme pertahanan non spesifik tubuh kita adalah kulit dengan

kelenjarnya, lapisan mukosa dengan enzimnya, serta kelenjar lain dengan

enzimnya seperti kelenjar air mata. Demikian pula sel fagosit (sel makrofag,

monosit, polimorfonuklear) dan komplemen merupakan komponen mekanisme

pertahanan non spesifik.

b. Mekanisme Pertahanan Spesifik

Mekanisme pertahanan tubuh spesifik atau disebut juga komponen adaptif

atau imunitas didapat adalah mekanisme pertahanan yang ditujukan khusus

terhadap satu jenis antigen, karena itu tidak dapat berperan terhadap antigen

jenis lain.

Bila pertahanan non spesifik belum dapat mengatasi invasi

mikroorganisme maka imunitas spesifik akan terangsang. Mekanisme

pertahanan spesifik adalah mekanisme pertahanan yang diperankan oleh sel

limfosit, dengan atau tanpa bantuan komponen system imun lainnya seperti sel

makrofag dan komplemen.