LAPORAN PRAKTIKUM

MIKROBIOLOGI

Hari, Tanggal : Selasa, 27 September 2011

Materi Praktikum : Teknik pembuatan media padat atau cair

Tujuan Praktikum : Mengetahui cara pembuatan media padat atau cair

A. DASAR TEORI

Medium adalah suatu bahan yang terdiri darin campuran nutrsi yang dipakai utnuk menumbuhkan mikroba. Selain untuk menumbuhkan mikroba, medium dapat digunakan pula untuk isolasi. Memperbanyak, pengujian sifat-sifat fisiologi dan perhitungan jumlah mikroba.

syarat-syarat medium :

Supaya mikiroba dapat tumbuh baik dalam suatu medium, perlu dipenuhi

syarat-syarat sebagai berikut :

1. Medium harus mengandung semua nutrisi yang diperlukan oleh mikroba

2. Medium harus mempunyai tekana osmotic, tegangan muka dan pH yang sesuai.

3. Medium tidak mengandung zat penghambat.

4. Medium harus steril.

Berdasarkan komposisi kimianya dikenal medium sintetik dan medium non sintetik.

Komposisi medium sinetic diketahui dengan pasti dan biasanya dibuat dari bahan-bahan

kimia yang kemurnianya tinggi dan ditentukan dengan tepat. Dipihak lain komposisi kimiawi

medium non sintetik tidak diketahui dengan pasti.

Karena kaldi nutrien merupakan medium yang umum digunakan dalam bakteriologis

maka medium ini disebut medium serba guna. Sedangkan medium yang mengandung zat-zat

kimia tertentu yang dapat menghambat pertumbuhan organisme yang diingkan disebut

medium selektif. Disamping itu dikenal pula medium diferensial yaitu medium yang

mengandung zat-zat kimia tertentu yang memungkinkan si pengamat membedakan berbagai

tipe bakteri.

konsistensi medium dapat dibuat bermacam-macam tergantung keperluannya.

Misalnya, medium cair seperti kaldu nutrien atau kaldu glukosa dapat digunakan untuk 7

berbagai keperluan seperti pembiakan, penelahan fermentasi dan berbagai macam uji. Bila

diinginkan medium padat ditambahkan bahan pemadat dalam medium. Medium padat

biasanya digunakan untuk mengamati penampilan atau morfologi koloni dan mengisolasi

biakan murni. Sedangkan medium dengan konsistensi pertengahan disebut medium setengah

padat, kegunaanya antara lain unrtuk menguji ada tidaknya motilitas dan kemampuan

fermentasi. Medium ini mengandung gelatin atau agar-agar dalam konsentrasi lebih sedikit

dibandingkan medium padat.

Bahan yang paling umum digunakan untuk memadatkan medium adalah agar-agar.

Meskipun bahan utamanya adalah galaktan yaitu suatu komplek karbohidrat yang diekstrasi

dari algae genus gelidium, namun sebagaian besar mikroba tidak dapat menggunakannya

sebagai makanan sehingga agar-agar dapat berlaku semata-mata sebagai pemadat. Agar

menjadi cair bila dipanaskan pada suhu hampir 100 C dan tetap berbentuk cair bila

didinginkan sampai kurang lebih 43 C

Media adalah bahan yang digunakan untuk menumbuhkan mikrobia dengan tujuan :

1. Untuk mengisolasi bakteri

2. Menyimpan bakteri

3. Dan untuk pemeriksaan bakteri

B. ALAT DAN BAHAN

C. CARA KERJA

Pembuatan media Phospat Buffer Salin

1. Timbang Na2HPO4 sebanyak 0,18 gram

dan KH2PO4 sebanyak 1,8 gram.

Alat :

1. Neraca

2. Tabung reaksi

3. Tabung durham

4. Erlenmeyer

5. Pipet ukur

6. Autoclave

7. Sendok penyu

8. Kertas payung

9. Rak tabung reaksi

Bahan:

1. Na2HPO4

2. KH2PO4

3. NaCl 0,9%

4. Kapas

2. Kedua bahan tersebut dimasukkan ke dalam erlenmeyer kemudian dilarutkan

dengan NaCl 0,9% sampai dengan 100ml.

3. Setelah larut, media dibagi-bagi dalam tabung reaksi masing-masing 10ml.

4. Tabung reaksi disumbat dengan kapas , lalu dimasukkan ke dalam beaker glass

lalu ditutup dengan kertas samak dan diikat bdengan kenur.

5. Media disterilkan dengan autoclave pada suhu 1210 selama 20 menit.

D. HASIL

Didapatkan media cair PBS yang siap digunakan untuk pengembangbiakan mikroba .

E. PEMBAHASAN

Media pertumbuhan mikroorganisme adalah suatu bahan yang terdiri dari campuran zat-zat

makanan (nutrisi) yang diperlukan mikroorganisme untuk pertumbuhannya. Mikroorganisme

memanfaatkan nutrisi media berupa molekul-molekul kecil yang dirakit untuk menyusun

komponen sel. Dengan media pertumbuhan dapat dilakukan isolat mikroorganisme menjadi

kultur murni dan juga memanipulasi komposisi media pertumbuhannya. Media adalah bahan

yang digunakan untuk menumbuhkan mikrobia dengan tujuan :

1. Untuk mengisolasi bakteri

2. Menyimpan bakteri

3. Dan untuk pemeriksaan bakteri

Media PBS ini biasanya digunakan untuk pengembangbiakan kuman dan bakteri

coliform. Sehingga media ini digunakan pada pemeriksaan angka kuman pada

makanan dan usap alat makan.

F. KESIMPULANDari hasil percobaan diatas dapat diketahui cara – cara dalam pembuatan media baik

padat maupun cair dengan berbagai bahan dan teknik pembuatan.

Pembimbing Praktikum Praktikan

Juni PurwatiP07133111057

Neni Purwandari

P07133111066

Niken KriswandariP07133111067

Yusuf Toto PurwokoP07133111081