Lap. Pengaruh Lingkungan - IVR

8/18/2019 Lap. Pengaruh Lingkungan - IVR

http://slidepdf.com/reader/full/lap-pengaruh-lingkungan-ivr 1/15

ANALISIS STERILITAS RUANGAN

I. KOMPETENSI UMUMPraktikan dapa tmengetahui bagaimana tingkat sterilisasi dari

ruangan LAF, Enkas, dan ruangan lampu UV.

II. KOMPETENSI KHUSUS

Praktikan dapat mengetahui cara menentukan sterilitas ruang

yang disterilkan dengan menggunakan LAF, Enkas , dan Lampu UV.

III. PRINSIP

Mahasiswa dapat mengetahui bagaimana cara mensterilkan

suatu ruangan dan tingkatan ruang steril.

IV. LANDASAN TEORI

Mikroorganisme mempunyai peranan sangat penting dalam

kehidupan, dan eksistensinya merupakan persyaratan mutlak bagi

terbinanya semua kehidupan yang lain !rianto, "##$%.

&alam kondisi lingkungan yang memenuhi persyaratan yang

diperlukannya, bakteri dapat berkembang dengan cepat sekali

ber'lori'erasi% dimana dlam satu (am, satu bakteri dapat

memperbanyak diri men(adi beribu)ribu. *ika lingkungannya tida

memmenuhi persyaratan hidup yang diperlukan oleh bakteri, tidak

berarti bakteri itu akan mati, tetapi pertumbuhannya terhambat

+ranggono, "##$%.

erbagai akti'itas yang dilakukan pada kegiatan analisis

molecular memerlukan kondisi sterilitas yang tinggi untuk mencegah

ter(adinya kontaminasi. -uang steril dipergunakan untuk

IIS VIRDA RAHMANAFRIZAL15020130182




melaksanakan peker(aan yang memerlukan sterilitas tinggi . (ika lokasi

terbatas, maka 'ungsi ruang steril dapat digantikan dengan laminar air

flow cabinet &aisy P, //0%.

1anitasi ruangan dapat dilakukan dengan cara membersihkan

ruangan dari debu dan kotoran lain. 1etelah ruangan bersih dan

kering, ruangan disemprot dengan 'ormalin "2 atau alcohol $#2

sampai seluruh bagian ruangan merata. 1elain ruangan yang harus

bersih dan steril, peralatan yang digunakan (uga harus disterilisasi

(uga Muchro(i, "##3%.

Ada beberapa cara untuk mensterilisasi dan desin'eksi

misalnya sa(a dengan pemanasan, umumnya bakteri 4egetati' mati

dalam waktu 5) # menit pada suhu 65 o7 hal ini sama sa(a baik bakteri

yang mampu berbentuk spora maupun tidak. 1edangkan bentuk

spora perlu waktu lebih lama. Pemanasan dapat mematikan bakteri

menggumpalkan protoplasmanya. Ada (uga sterilisasi dengan uap air

yang ditekan autocla4e%, cara ini yang paling baik karena suhu yang

dicapainya tinggi dan air untuk koagulasi protein banyak, dengan alat

ini, besarnya tekanan uap air yang diperlukan dapat diatur

Ent(ang, "##8%.

1terilisasi dalam mikrobiologi merupakan suatu proses

penghilangan semua (enis organisme hidup seperti proto9oa, 'ungi,

bakteri, mycoplasma , dan 4irus yang terdapat dalam suatu benda.





1terilisasi didesain untuk membunuh atau menghilangkan

mikroorganisme. 1edangkan proses pembunuhan atau penghilangan

mikroorganisme yang dapat menyebabkan penyakit. &isin'eksi tidak

men(amin ob(ek men(adi steril karena spora 4iabel dan beberapa

mikroorganisme tetap dapat tersisa Pratiwi, "##/%.

Ada beberapa tu(uan utama mematikan, menyingkirkan atau

menghambat pertumbuhan mikroorganisme, antara lain % untuk

mencegah in'eksi pada manusia, hewan piaraan dan tumbuhan, "%

untuk mencegah makanan dan lain)lain komoditi men(adi rusak, 8%

untuk mencegah gangguan kontaminasi terhadap mikroorganisme

yang digunakan dalam industri, dan 0% untuk mencegah kontaminasi

bahan)bahan yang dipakai dalam penger(aan biakan murni

dilaboratorium !rianto, "##6%.

Antiseptis (uga merupakan salah satu proses yang mencakup

inakti4si atau mematikan mikroorganisme dengan cara kimiawi.

Antiseptik dapat bersi'at bakteri sidal atau bakteriostatik: proses

bakteriostatik hanya menghentikan pertumbuhan bakteri sedangkan

proses bakterisidal mematikan bakteri ibiana, //0%.

V. METODE KERJA

a. Alat dan ahan

. Alat





Alat)alat yang digunakan pada saat praktikum adalah 7awan

petri, Enkas, Erlenmeyer, ;and sprayer, !nkubator, Laminary Air

Flow LAF%, Lampuspiritus, Lampu UV, osebulat, 1arungtangan,

dan 1poit # ml.". ahan

ahan)bahan yang digunakan pada saat praktikum adalah

Alkohol $# 2, Aluminium 'oil, <ertas label, Medium =A =utrient

Agar%, Medium P&A Potato &e>trose Agar%, dan +issu-ol.b. 7ara <er(a

. Penyiapan Mediuma% =utrient Agar =A%

1iapkan 8 cawan petri steril kemudian diisi dengan

medium nutrient agar =A% steril yang sudah dicairkan

secara aseptic sebanyak # mL, lalu dibiarkan memadat.b% Potato &e>trose Agar P&A%

1iapkan 8 cawan petri steril kemudian diisi dengan

medium potato de>trose agar P&A% steril yang sudah

dicairkan secara aseptic sebanyak # mL, lalu dibiarkan

memadat.". Penyiapan -uang 1terilisasi

a% Lampu Ultra4ioletLampu UV dinyalakan kemudian disemprot dengan

alkohol $#2 kemudian didiamkan selama 8# menit sebelum

dilakukan pengu(ian.

b% Laminary Air Flow LAF%Laminary Air Flow LAF% dinyalakan kemudian disemprot

dengan alkohol $#2 kemudian nyalakan kipasnya lalu

didiamkan selama 8# menit sebelum dilakukan pengu(ian.

c% Enkas





Enkas dinyalakan kemudian disemprot dengan alkohol

$#2 kemudian didiamkan selama 8# menit sebelum

dilakukan pengu(ian.8. U(i 1terilitas -uangan

a% Lampu UV&isiapkan alat dan bahan, masing)masing satu cawan

petri steril yang berisi medium =A dan medium P&A dibuka

?8 bagian dan ditempatkan di bawah sinar lampu UV selama

5 menit pada tempat yang tadinya sudah di semprot dengan

alkohol $# 2. <emudian cawan petri steril tersebut

diinkubasikan pada incubator bersuhu 8$@ 7 selama > "0

(am untuk =A dan dimasukkan di enkas selama 8 > "0 (am

untuk medium P&A. &iamati ada tidaknya koloni mikroba.b% Laminary Air Flow LAF%

&isiapkan alat dan bahan, masing)masing satu cawan


?8 bagian dan ditempatkan di dalam laminary air 'low LAF%

selama 5 menit pada tempat yang tadinya sudah di semprot

dengan alkohol $# 2. <emudian cawan petri steril tersebut

diinkubasikan pada incubator bersuhu 8$@ 7 selama > "0

(am untuk =A dan dimasukkan di enkas selama 8 > "0 (am

untuk medium P&A. &iamati ada tidaknya koloni mikroba.c% Enkas

&isiapkan alat dan bahan, masing)masing satu cawan


?8 bagian dan ditempatkan di dalam enkas selama 5 menit





pada tempat yang tadinya sudah di semprot dengan alkohol

$# 2. <emudian cawan petri steril tersebut diinkubasikan

pada incubator bersuhu 8$@ 7 selama > "0 (am untuk =A

dan dimasukkan di enkas selama 8 > "0 (am untuk medium

P&A. &iamati ada tidaknya koloni mikroba.VI.HASIL PENGAMATAN

a. +abel Pengamatan

Kel.Enkas Lampu UV LAF

NA PDA NA PDA NA PDA

. " 06 8/ 5 "8

". "8 6 0" 8 0/ 65

8. "8 " 58 / "5 00

0. 5# 50 #$ #3 " $5. 88 3 3$ " " 8"

*umlah 0# "06 885 8#/ "" 3+otal "3 0/," 6$ 6 ,3 "0,0 86,"

b. Foto Pengamatan. akteri Medium =A%


LA -A+ -!UM M!<- ! L B!

FA<UL+A1 FA-MA1!

U=!VE-1!+A1 MU1L!M !=& =E1!A

&idiamkan di Enkas Medium =A%




". *amur Medium P&A%


LA -A+ -!UM M!<- ! L B!

FA<UL+A1 FA-MA1!

U=!VE-1!+A1 MU1L!M !=& =E1!A

&idiamkan di UV Medium =A%

LA -A+ -!UM M!<- ! L B!FA<UL+A1 FA-MA1!

U=!VE-1!+A1 MU1L!M !=& =E1!A

&idiamkan di LAF Medium =A%





LA -A+ -!UM M!<- ! L B!

FA<UL+A1 FA-MA1!U=!VE-1!+A1 MU1L!M !=& =E1!A

&idiamkan di Enkas Medium P&A%LA -A+ -!UM M!<- ! L B!

FA<UL+A1 FA-MA1!

U=!VE-1!+A1 MU1L!M !=& =E1!A

&idiamkan di UV Medium P&A%

LA -A+ -!UM M!<- ! L B!

FA<UL+A1 FA-MA1!U=!VE-1!+A1 MU1L!M !=& =E1!A

&idiamkan di LAF Medium P&A%




VII. PEMBAHASANerbagai akti'itas yang dilakukan pada kegiatan analisis

molecular memerlukan kondisi sterilitas yang tinggi untuk mencegah

ter(adinya kontaminasi. -uang steril dipergunakan untuk

melaksanakan peker(aan yang memerlukan sterilitas tinggi .

1anitasi ruangan dapat dilakukan dengan cara membersihkan

ruangan dari debu dan kotoran lain. 1etelah ruangan bersih dan

kering, ruangan disemprot dengan 'ormalin "2 atau alcohol $#2

sampai seluruh bagian ruangan merata. 1elain ruangan yang harus

bersih dan steril, peralatan yang digunakan (uga harus disterilisasi

(uga.

-uang 1teril dibagi men(adi beberapa yaitu a% -uang <elas !

Chite Area%, *umlah Partikel non)patogen% ukuran #,5 Dm

maksimum ##?'t 8: b% -uang <elas !! 7lear Area%, *umlah Partikel

non)patogen% ukuran #,5 Dm maksimum ####?'t 8: 8% -uang <elas





!!! Brey Area%, *umlah Partikel non)patogen% ukuran #,5 Dm

maksimum #####?'t 8: d% -uang <elas !V lack Area%, *umlah

Partikel non)patogen% ukuran #,5 Dm maksimum #####?'t 8.

7ara yang digunakan untuk menghancurkan, menghambat

pertumbuhan dan menyingkirkan mikroorganisme berbeda)beda

tergantung pada spesies yang dihadapi. 1elain itu lingkungan dan

tempat mikroba ini (uga berbeda)beda. ;al tersebut (uga dapat

di(adikan sebagai bahan pertimbangan untuk menentukan cara untuk

menghancurkan mikroorganisme yang digunakan tergantung pada

pengetahuan, keterampilan dan tu(uan dari yang melaksanakannya.

Pada praktikum ini, dilakukan u(i sterilisasi ruangan, dimana

ruangan dibagi men(adi 8 bagian yang dimisalkan dengan sterilisasi

dengan UV, Laminary Air Flow LAF% dan Enkas. Pertama)tama

ketiga tempat tersebut di semprotkan dengan alcohol $#2 kemudian

didiamkan 5 menit. &igunakan alkohol karena e'ekti' membunuh

bakteri dan 'ungi namun tidak dapat membunuh endospora dan 4irus

non en4eloped. Mekanisme aksi alkohol adalah dengan

mendenaturasi protein mikroorganisme, melarutkan lipid dari

membran mikroorganisme. 1elan(utnya disiapkan medium =A

nutrient agar% dan P&A Potato &e>trosa Agar%, dimasukkan dalam

cawan petri dan dibiarkan memadat.





<emudian cawan petri dimasukkan masing)masing kedalam

UV, LAF dan Enkas. Pada saat dimasukkan cawan petri dibuka ?8

bagian dan dibiarkan 5 menit. &igunakan LAF Laminar Air Flow%,

enkas, dan lampu UV karena ketiganya digunakan sebagai alat untuk

mensterilkan atau untuk membantu proses sterilisasi dalam

laboratorium sehingga perlu dilakukan pengu(ian sterilisasi terhadap

ketiganya untuk melihat kemungkinan terkontaminasinya oleh

mikroorganisme. Pada cawan petri dibuka ?8 bagian dengan tu(uan

untuk membiarkan mikroorganisme untuk masuk sehingga dapat

diamati. &ibiarkan 5 menit karena pada selang waktu tersebut

mikroorganisme sudah mampu diisolasi dari suatu tempat

lingkungan% ke dalam suatu medium.

1etelah itu, cawan petri dikeluarkan dan diinkubasi dalam

keadaan terbalik, dimana untuk bakteri menggunakan incubator >

"0 (am sedangkan (amur pada enkas 8 > "0 (am. <emudian diamati

dan dihitung (umlah mikroorganisme yang tumbuh.

VIII. KESIMPULAN

&ari percobaan yang telah dilakukan, maka dapat disimpulkan

bahwa (umlah mirkoorganisme yang tumbuh dalam medium =A

adalah 5# koloni dan yang tumbuh dalam medium P&A adalah 50

koloni dengan ruang u(i lampu UV. *umlah mikroorganisme yang

tumbuh dalam medium =A adalah #$ koloni dan yang tumbuh





dalam medium P&A adalah #3 koloni dengan ruang u(i Enkas. &an

(umlah mikroorganisme yang tumbuh dalam medium =A adalah "

koloni dan yang tumbuh dalam medium P&A adalah $ koloni

dengan ruang u(i LAF. 1ehingga dapat disimpulkan bahwa Alat yang

sangat e'ekti' menghambat pertumbuhan mikroorganisme adalah

LAF Laminar Air Flow%. &imana tekanan udara di dalam LAF lebih

besar daripada dari luar sehingga mencegah masuknya

mikroorganisme dan udara yang berisi mikroba akan ditarik keluar.

LAF (uga dilengkapi saringan sehingga mikroba yang telah keluar

tidak akan dapat kembali lagi.

I . DAFTAR PUSTAKA

ibiana Lay, C. //0. Analisis Mikroba di Laboratorium” . P+. -a(aBra'indo Persada akarta.

&aisy P., 1riyanti ;endaryono. //0. Teknik Kultur Jaringan G. Anggota !<AP! Hogyakarta.

Ent(ang, !ndan. "##8. Mikrobiologi & Parasitologi G. P+. 7itra Adityaakti *akarta.

!rianto, <oes. "##$. Mikrobiologi Menguak Dunia MikroorganismeJilid ” . 7V. Hrama Cidya andung.

!rianto, <oes. "##6. Mikrobiologi Medis” . Al'abeta andung.





Muchro(i., 7ahyana HA. "##3. !udi Daya Jamur Kuping G. Penebar 1wadaya *akarta.

Pratiwi, 1yl4ia +. "##/. G Mikrobiologi "armasi G. Erlangga *akarta.

+ranggono, -etno !swari. "##$. !uku Pegangan #lmu Pengeta$uanK% M'T#K G. P+ Bramedia Pustaka Utama *akarta.

. LAMPIRAN

A. 1<EMA <E-*A

Medium =A?P&A # ml

&alam cawan Petri

LAF Lampu UV Enkas





Alkohol $#2 Alkohol $#2 Alkohol $#2

5 menit 5 menit 5 menit

uka ?8 bagian

&iamkan 5 menit

!nkubasi

1uhu 8$@7 >"0 (am untuk medium =A

1uhu 8$@7 8>"0 (am untuk medium P&A

. < MP 1!1! ME&!UM

. Medium =A =utrien Agar%

Peptone 5,# g

Ekstrak bee' 8,# g

Agar 5 g

AIuadest ### ml

". Medium P&A potato de>trose agar%

Ekstrak kentang 0,# dari "## g kentang





&) glukosa "# g

Agar 5 g

AIuadest ### ml


Lap. Pengaruh Lingkungan - IVR

Documents

Transcript of Lap. Pengaruh Lingkungan - IVR