Lap. 1 Mikrobiologi Pengenalan Alat LAb.
Transcript of Lap. 1 Mikrobiologi Pengenalan Alat LAb.
LEMBAR PENGESAHAN
Laporan Lengkap Praktikum Mikrobiologi Unit I dengan judul “Pengenalan
Alat Laboratorium dan Sterilisasi Alat” disusun oleh:
Nama : Ariandi
NIM : 071404075
Kelas/kelompok : A / II
Telah diperiksa dan dikonsultasikan kepada Asisten dan Koordinator Asisten,
maka dinyatakan diterima.
Makassar, November 2009
Koordinator Asisten Asisten
Erwin, S.Pd. Mustainah NIM: 061404057
MengetahuiDosen penanggung jawab
Prof. Dr. Yusminah Hala, M.S. NIP: 1961 12 12 1986 01 2002
BAB IPENDAHULUAN
A. Latar Belakang
Mikrobiologi merupakan bidang ilmu yang mempelajari bentuk, sifat,
kehidupan, penyebaran, dan manfaat jasad hidup termasuk mikroba. Didalam
bidang ilmu ini tercakup satu kelompok besar jasad hidup yang mempunyai
bentuk dan ukuran sangat kecil. Mikroba-mikrobia tersebut memiliki ukuran
sangat kecil sehingga memerlukan alat untuk mengamatinya, alat ini disebut
mikroskop. Selain mikroskop dilaboratorium juga terdapat alat-alat yang dapat
mendukung suatu pengamatan mikrobiologi.
Melancarkan dan memudahkan berlangsungnya praktikum mikrobiologi,
maka pengetahuan mengenai penggunaan alat sangat diperlukan. Peralatan dalam
suatu laboratorium pada dasarnya terdiri dar ipealatan gelas seperti piper, buret,
bachker, alat filtrai dan sebagainya. Peralatan lainnya seperti timbangan,
pemanas, mesin sentrifuge.
Peralatan merupakan alat yang sangat penting dalam laboratorium baik
laboratorim sederehana maupun untuk tujuan penelitian. Ada beberapa jenis kaca
sebagai bahan baku peralatan gelas tersebut dan setiap jenisnya mempunyai sifat
yang berbeda. Di dalam melakukan suatu percobaan di laboratorium, kadang-
kadang harus dipilih bahan peralatanyang cocok, sehingga tidak keliru atau salah
pengertian mengenai sifat bahan peralatan tersebut.
Alat praktikum tersebut digunakan, maka perlu dilakukan sterilisasi agar
peralatan tersebut bebas mikroba atau keadaan menjadi steril. Syarat utama
berhasil tidaknya suatu praktikum mikrobiologi ini adalah keadaan alat yang
steril, sehingga sebelum pelaksanaan praktikum selanjutnya sangat penting
dilakukan sterilisasi alat
Sterilisasi bertujuan untuk mendapatkan keadaan bebas mikroba. Dalam
pekerjaan penelitian atau praktikum bidang mikrobiologi, keadaan steril
merupakan syarat utama berhasil atau tidaknya suatu pekerjaan di laboratorium.
B. Tujuan
1. Untuk mengetahui bentuk dan nama-nama alat yang akan digunakan dalam
praktikum Mikrobiologi, bagian-bagian alat, fungsi alat, dan prinsip kerja dari
alat-alat tersebut.
2. Untuk mengetahui cara sterilisasi dari alat-alat tersebut baik sterilisasi dengan
menggunakan autoklaf ataupun dengan oven dan bunsen
C. Manfaat
1. Mahasiswa dapat menambah pengetahuan tentang alat-alat laoratorium,
terutama dari segi fungsi dan prinsip kerjanya, sehingga praktikan mampu
melakukan kinerja praktikum secara baik dan tepat
2. Mahasiwa dapat melakukan proses sterilisasi yang benar, baik menggunakan
autoklaf maupun dengan oven, sehingga mampu membedakan cara sterilisasi
tersebut dan mengetahui cara kerjanya masing-masing.
BAB IITINJAUAN PUSTAKA
Mikrobiologi adalah telaah mengenai organisme hidup yang berukuran
mikroskopis. Dua mikroorganisme terdiri dari lima kelompok organisme; bakteri,
protozoa, virus, sera algae dan cendawan mikroskopis. Dalam bidang mikrobiologi
kita mempelajari banyak segi mengenai jasad-jasad renik ini (juga dinanamakan
mikrobe atau protista): di mana adanya, ciri-cirinya, kekerabatan antara sesamanya
seperti juga dengan kelompok organisme lainnya, pengandaliannya, dan peranannya
dalam kesehatan serta kesejahtaraan kita. Mikroorganisme sangat erat kaitannya
dengan kehidupan kita (Pelczar, 1998).
Pada dasarnya setiap alat memiliki nama yang menunjukkan kegunaan alat,
prinsip kerja atau proses berlangsungnya ketika alat digunakan. Beberapa kegunaan
dapat dikenali berdasarkan namanya. Penamaan alat-alat yang berfungsi mengukur
biasanya diakhiri dengan kata meter seperti thermometer, spektometer dan lain-lain
(Taiyeb, 2001).
Secara umum fungsi setiap alat diberikan secara umum, karena tidak mungkin
semua fungsi diutarakan, dalam melakukan kegiatan di laboratorium. Untuk
memudahkan dalam memahami alat-alat laboratorium dapat digunakan dalam waktu
relative lama dan dalam keadaan baik, perlu pemeliharaan dan penyimpanan yang
memadai (Wirjosoemarto, 2004).
Porselen sebagai bahan pembuat alat laboratorium mempunyai keunggulan
tahan (resistant) terhadap suhu tinggi. Pada permukaan alat terbuat dari porselen
biasanya diupam (glazir), sehingga bahan porselen tidak tembus sinar. Selain bahan
porselen, masih ada lagi bahan alat laboratorium yang terbuat dari plastic. Plastik
dapat dikelompokkan menjadi beberapa kelompok tergantung dari bahan
penyusunnya. Coba perhatikan alat laboratorium, misalnya corong, botol kimia, atau
gelas kimia. Alat-alat tadi dapat bersifat keras atau lentur, atau tembus sinar, tembus
pandang atau tidak tembus sinar. Hal tersebut disebabkan karena bahannya berbeda.
Bahan penyusun plastic berupa Polythene, Polypropylene, PVC dan Styrene
(Wirjosoemarto, 2004).
Melakukan suatu percobaan di laboratorium, kadang-kadang harus dipilih
bahan peralatan yang cocok, sehingga tidak keliru atau salah pengertian mengenai
sifat bahan peralatan tersebut. Peralatan gelas harus selalu bersih, yaitu dicuci dengan
larutan deterjen yang cukup hangat. Bila memungkinkan perlu dibilas dengan basa
atau asam, lalu dibilas sekali lagi dengan air bersih. Sebelum digunakan, peralatan
gelas tersebut dibilas sekali lagi dengan larutan yang akan digunakan yang akan di
simpan dalam peralatan tersebut. Peralatan gelas seperti pipet, labu takar dan lain-
lain, sangat teliti dan merupakan produksi kerajian dan teknologi yang berkualitas
tinggi. Namun demikian ketelitian tidak akan berarti bila selama analisa, penggunaan
alat dan prosedur tidak dikakukan dengan cermat dan tepat (Hala, 2009).
Menurut Junaidi (2009) Cara kerja sterilisasi adalah cara kerja agar terhindar
dari kontaminasi, cara kerja steril ini digunakan pada pembuatan media, pemeriksaan
kultur dan pembuatan preparat. Sterilisasi dapat dilakukan secara;
1. Fisik di bagi menjadi beberapa bagian antara lain:
a. ”Hot air Sterilization” oven. Bahan dari gelas dibungkus dengan alumunium
foil, suhu 170-250°C selama 2 jam.
b. Panas basah dengan tekanan, suhu 121°C selama 15 menit. Alat yang
digunakan adalah autoclav caranya: alat-alat gelas dibungkus lagi dengan
alumunium foil.
c. Pressure Cooker, caranya: panaskan air mendidih, biarkan klep uap terbuka
agar keluar uap kemudian klep uap ditutup, lihat suhu dan tekanan, bila suhu
telah 121°C dengan tekanan 1,5 atm, dijaga konstan selama 15 menit.
Kemudian buka klep uap hingga tercapai tekanan nol, dan setelah suhu
mencapai suhu kamar, alat dan bahan dikeluarkan.
2. Kimia yaitu dengan menggunakan zat-zat kimia seperti desinfektan, antiseptik
3. Radiasi yaitu dengan menggunakan sinar Ultraviolet, biasanya digunakan pada
ruangan dan alat-alat plastik.
4. Filter yaitu dengan menggunakan membran filter dan Vacum Pump
Pensterilan dengan uap tekanan dilakukan dalam outoklaf. Dalam outoclaf ini
uap berada dalam keadaan jenuh, dan peningkatan tekanan mengakibatkan suhu yang
tercaoai lebuh tinggi, yaitu dibawah tekanan 15 ib (2 ATM). Suhu dapat meningkat
mencapai 121oC. Bila uap itu dicampur dengan udara yang sama banyak, pada tekana
yang sama, maka suhu yang tercapai hanya 110oC. Itu sebabnya udara dalam outoclaf
harus dikeluarkan sampai habis untuk memperoleh suhu yang diinginkan (121oC).
Dalam suhu tersebut mikroorganisme dapat dimusnahkan dalam waktu yang tidak
lama yaitu sekitar 15-20 menit (Irianto, 2006).
BAB IIIMETODE PRAKTIKUM
A. Waktu dan tempat
Hari/tanggal : Rabu dan Selasa / 29 Oktober 2009 dan 3 November 2009
Waktu : Pukul 07.30 s.d 09.10 dan 16.00 s.d 17.45 WITA
Tempat : Laboratorium Biologi Bagian Mikrobiologi Lantai II Barat
FMIPA UNM Makassar
B. Alat dan Bahan
a. Alat
1. Coloni counter
2. Refrigenerator
3. Tabung teaksi
4. Tabung durham
5. Pipa V
6. Batang pengaduk
7. Batang penyebar
8. Pipet mikro
9. Ose bulat
10. Bunsen
11. Pipet ukur
12. Gelas ukur
13. Gelas kimia
14. Rak tabung
15. Cawan perti
16. Penjepit tabung
17. Botol pengencer
18. Botol sprayer
19. Sikat tabung
20. Mikroskop
21. Spektrofotometer
22. Autoklaf
23. Oven
24. Inkubator
25. Engkas
26. Vortex
27. Shaker
28. Waterbath
29. Centrifuge
30. Hot plate
31. Desikator
32. Neraca analitik
33. Labu erlenmeyer
34. Kaki tiga
35. Kasa
36. Pinset
37. Spoit
38. Corong
b. Bahan
a. Kertas Kwarto
b. Kertas Aluminium Oil
c. Kapas
d. Tissue
e. Air ledeng
C. Prosedur Kerja
1. Mengamati dan menggambar alat-alat tersebut lengkap dengan bagian-bagian
keterangannya dan nama alatnya
2. Memahami fungsi dan cara mengoperasikan alat-alat yang digunakan.
3. Menyiapkan alat dan bahan yang akan digunakan dalam proses sterilisasi
4. Membersihkan alat-alat yang digunakan dan mengeringkannya dengan
mengunakan tissue, alat-alatnya yaitu tabung reaksi, cawan petri dan tabung
durham
5. Menyumbat tabung reaski dengan kapas dan membungkusnya lagi dengan
menggunakan kertas aluminium oil, kemudian menyimpannya dalam
bungkusan kertas yang sudah terklip.
6. Membungkus cawan petri bersama tabung durham dengan menggunakan
kertas Kwarto.
7. Melanjutkan dengan sterilisasi dengan menggunakan oven selama 2 jam
dengan suhu 160oC, yang perlu diingat alat-alat dalam oven harus tersusun
rapi dan sesuai aturan dengan benar.
B. Pembahasan
Peralatan Laboratorium
1. Coloni counter
Alat ini berfungsi untuk menghitung jumlah coloni bakteri atau
jamur. Cara menggunakannya yaitu setelah kita on-kan, kita menyimpan
cawan petri yang berisi bakteri atau jamur ke dalam kamar hitung, mengatur
alat penghitung pada posisi dan mulia menghitung dengan menggunakan
jarum penunjuk sambil melihat jumlah pada layar hitung (Taiyeb, 2001).
Coloni counter merupakan alat yang berfungsi sebagai penghitung
jumlah mikroba pada cawan petri menggunakan sinar dan luv. Perhitungan
mikroba dapat dilakukan dengan perbesaran menggunakan luv atau dengan
menandai beberapa koloni yang terdapat pada cawan petri menggunakan
bulpoint yang terdapat pada coloni counter dan juga menggunakan tombol
check (Anonim, 2009).
2. Refrigenerator
Refrigerator merupakan tempat untuk memadatkan medium yang
akan digunakan dalam praktikum mikrobiologi. Selain itu, juga digunakan
sebagai wadah tempat biakan organisme (Hala, 2009).
3. Tabung reaksi
Tabung reaksi berfungsi sebagai tempat media pertumbuhan mikroba
alam bentuk media tegak atau miring yang disumbat dengan kapas,
dibulatkan lalu disterilkan dengan kapas berada tetap di atasnya dan diikat
(Anonim, 2009).
Prinsip kerjanya yaitu pada waktu memanaskan media yang ada di
dalam tabung reaksi, tabung reaksi harus berada dalam keadaan miring
diatas nyala api dan mulut tabung jangan sekali-kali menghadap pada diri
kita atau orang lain. Tabung reaksi yang disterilkan di dalam autoklaf harus
ditutup dengan kapas dan aluminium foil (Taiyeb, 2001).
4. Tabung durham
Tabung Durham berfungsi untuk menangkap gas O2 yang dihasilkan
dari hasil fermentasi mikroorganisme biasa digunakan dalam medium cair.
Cara sterilisasinya menggunakan alat otoklaf (Anonim, 2009).
Merupakan tabung reaksi yang berukuran kecil. Dalam
penggunaannya, maka tabung durham itu ditempatkan terbalik di dalam
tabung reaksi yang lebih besar dan tabung ini kemudian diisi dengan
medium cair. Setelah seluruhnya disterilkan, dan medium sudah dingin,
maka dapat dilakukan inokulasi. Jika bakteri yang ditumbuhkan dalam
media tersebut memang menghasilkan gas, maka gas akan tampak sebagai
gelembung pada dasar tabung durham (Dwidjoseputro, 1998).
5. Pipa V
Untuk menyebarkan cairan dipermukaan agar bakteri yang
tersuspensi dalam cairan dapat tersebar rata dalam pipa
6. Batang pengaduk
Batang pengaduk berfungsi untuk mengaduk dan menghomogenkan
larutan. Batang pengaduk berbentuk seperti pipa kecil yang terbuat dari
kaca. Batang pengaduk yang digunakan dalam praktikum ini biasanya
terbuat dari kaca atau dari pyrex sehingga dapat dipanaskan dengan
autoklaf. Alat ini berfungsi untuk mengaduk bahan kimia atau
menghomogenkan medium yang akan dibuat (Irianto, 2004).
7. Batang penyebar
Alat ini biasa digunakan sebagai alat praktikum mikrobiologi.
Batang penyebar digunakan untuk menyebarkan biakan bakteri yang
terdapat di atas wadah pembiakan. Bentuknya segitiga kecil. Biasanya
fungsi alat ini sesuai dengan namanya, yaitu sebagai alat penyebar mikrobia-
mikrobia (Irianto, 2004).
8. Ose bulat
Ose berfungsi untuk mengambil dan menggores MO, terdiri dari ose
lurus untuk menanam MO dan ose bulat untuk menggores MO yang
biasanya berbentuk zig-zag (Anonim, 2009).
Berfungsi untuk memindahkan atau mengambil koloni suatu mikrobia
ke media yang akan digunakan kembali. Ose bulat juga digunakan untuk
menginokulasi bakteri yang tergolong dalam fakultatif aerob. Prinsip
kerjanya yaitu ose disentuhkan pada bagian mikrobia kemudian
menggosokkan pada kaca preparat untuk diamati (Taiyeb, 2001).
9. Pipet mikro
Pipet mikro berfungsi untuk mengambil dan memindahkan zat cair
dengan volume tertentu. Pipet mikro digunakan untuk mengambil larutan
atau memindahkan larutan dari tempat yang satu ke tempat yang lain. Cara
penggunaannya yaitu dengan memasukkan ujung pipet ke dalam wadah
yang berisi cairan kemudian menekan kembali untuk mengeluarkan cairan
yang terdapat di dalam pipet pada wadah yang ada (Taiyeb, 2001).
10. Bunsen
Bunsen merupakan alat yang digunakan untuk pemijaran serta untuk
mensterilisasikan mikroba. Bunsen juga mempunyai fungsi lain, yakni
mengamankan praktikan pada saat melakukan penanaman medium
(Anonim, 2009).
Bunsen digunakan untuk memanaskan medium, mensterilkan jarum
inokulasi dan alat-alat yang terbuat dari platina dan nikrom seperti jarum
platina dan ose. Cara menggunakannya yaitu menyalakan Bunsen lalu
memanaskan alat-alat tersebut di atas api sampai pijar. Alat ini juga
digunakan dalam pengerjaan secara aseptik yaitu dengan mendekatkan di
sekitar tempat pengerjaan mikrobia untuk menghindari terjadinya
kontaminasi (Taiyeb, 2001).
11. Pipet ukur
Pipet ukur adalah alat yang berfungsi sebagai pengambil larutan atau
sampel sesuai dengan jumlah yang kita tentukan (Anonim, 2009).
12. Gelas ukur
Gelas ukur digunakan untuk menakar air suling dan bahan kimia
yang akan digunakan. Ukuran gelas ini bermacam-macam, mulai dari
volume 25 ml sampai dengan volume 250 ml. jenis gelas ukur ada yang
tahan panas (pyrex) dan ada pula yang tidak tahan panas (gelas biasa).
Pembuatan larutan sterilisasi eksplan, yaitu chlorox selalu menggunakan
gelas ukur. Pada saat menggunakan gelas ukur perlu diperhatikan cara
membaca skala pada gelas ukur (Taiyeb, 2001).
13. Gelas kimia
Fungsinya untuk menyimpan atau memanaskan dan mencampurkan
senyawa meskipun skala tidak terlalu tinggi. Prinsip kerjanya yaitu apabila
ingin mencampurkan suatu senyawa missal 800 ml, maka kita pakai gelas
kimia yang skala 800 ml. Kita hanya tinggal memasukkan senyawa yang
akan dicampur (Taiyeb, 2001).
14. Rak tabung
Berfungsi sebagai tempat dudukan tabung, prinsip kerjanya yaitu
tabung reaksi diletakkan sesuai tempat (lubang yang tersedia) dan disimpan
ditempat yang aman (Hala, 2009).
15. Cawan petri
Alat ini sejenis dengan gelas kimia yang mutlak dibutuhkan dalam
kultur jaringan. Cawan petri biasanya disterilkan bersama dengan kertas
saring di dalamnya. Cawan petri perlu dicuci bersih kemudian dikeringkan,
setelah kering dibungkus dengan kertas putih cokelat untuk disterilisasi
dengan oven. Alat ini berfungsi untuk pembuatan kultur media (Hala, 2009).
16. Penjepit tabung
Digunakan untuk menjepit tabung yang akan digunakan saat
pembakaran. Prinsip kerjanya yaitu memegang lengan tabung reaksi
kemudian memasukkan tabung reaksi ke mulut penjepit tabung
(Taiyeb, 2001).
17. Botol pengencer
Botol pengencer berfungsi sebagi wadah tempat mengencerkan
berbagai macam larutan (Anonim, 2009).
18. Botol sprayer
Berfungsi sebagai tempat alcohol.
19. Sikat tabung
Alat ini digunakan untuk membersihkan tabung reaksi dan alat-alat
laboratorium yang mulut tabungnya kecil. Penggunaannya dengan cara
memasukkan seluruh bagian sikat pada tabung reaksi/alat yang akan
dibersihkan lalu menggosoknya/disikat hingga ke bagian dasarnya
(Lahay, 2004).
20. Mikroskop
Mikroskop berfungsi sebagai alat bantu untuk melihat
mikroorganisme yang tak dapat dilihat oleh mata. Cara penggunaan
mikroskop adalah dengan membelakangi bagian belakang mikroskop.
Mikroskop cahaya (Monokoler) berfungsi untuk melihat objek dengan
bantuan cahaya. Mikroskop ini digunakan dengan satu mata, sehingga
bayangan yang terlihat hanya memilki panjang dan lebar, dan memberikan
gambaran mengenai tingginya. Prinsip kerja dari mikroskop ini adalah
dengan memantulkan cahaya melalui cermin, lalu diteruskan hingga lensa
objektif (Anonim, 2009)
21. Spektrofotometer
Alat ini dapat mengukur kepekatan sel dalam suspensi dalam % T
atau OD (jumlah cahaya yang diabsorbsi dan disebarkan). Dalam
penggunaannya yaitu spektrofotometer dikalibrasikan mempunyai daya
absorbsi 0 bila tidak ada sel. Ini dilakukan dengan memasukkan cuvet yang
berisi larutan. Kerapatan suatu suspensi tidak langsung menunjukkan jumlah
sel dalam suatu populasi, namun jumlah cahaya yang disebarkan oleh
populasi tersebut. Untuk memperoleh jumlah mikroorganisme maka nilai
kerapatan optik harus disetarakan dulu dengan jumlah mikroorganisme
(Dwidjoseputro, 1998).
22. Autoklaf
Berfungsi untuk sterilisasi media, maupun alat-alat seperti pipet,
scalpel, pinset, cawan petri, botol mutlak dibutuhkan autoklaf. Cara
penggunaannya yaitu mengisi air sampai dasar yang berlubang, kemudian
alat dinyalakan. Materi yang akan disterilkan dimasukkan. Selanjutnya
penutup autoklaf dipasang dan skerup dikencangkan. Kran pengatur tempat
keluar uap dibiarkan terbuka dan ditutup hingga tekanan uap naik 2 atm dan
suhu 1210C selama 15-30 menit. Apabila sterilisasi telah selesai, autoklaf
dibiarkan sampai tekanan turun hingga 00C. Kran uap air dibuka secara
perlahan-lahan (Ali dan Hala, 2008).
23. Oven
Alat ini digunakan untuk sterilisasi alat-alat yang tahan terhadap
panas tinggi misalnya cawan petri, tabung reaksi, labu Erlenmeyer, dan lain-
lain. Alat ini umumnya dilengkapi termometer. Prinsip kerjanya yaitu alat-
alat yang ingin disterilkan dibungkus dalam kertas kemudian dimasukkan
dalam oven lalu ditutup. Setelah itu mengaktifkan tombol power dan
mengatur suhu yang diinginkan. Temperatur yang digunakan untuk alat ini
umumnya 1800 C selama 2 jam (Ali dan Hala, 2008).
24. Inkubator
Inkubator adalah suatu unit/suatu kabinet yang suhunya dapat diatur
untuk menyimpan organisme guna tujuan tertentu. Di dalam laboratorium
mikrobiologi digunakan untuk menumbuhkan bakteri pada suhu tertentu,
menumbuhkan ragi dan jamur, menyimpan biakan murni mikroorganisme I
pada suhu rendah. Inkubator biasanya hanya dapat diatur di atas suhu kamar,
sedangkan cooled inkubator dapat diatur baik pada suhu di bawah maupun
diatas suhu kamar. Prinsip kerjanya yaitu mengubah energi listrik menjadi
energi panas. Kawat nikelin akan menghambat aliran elektron yang
mengalir sehingga mengakibatkan peningkatan suhu kawat (Taiyeb, 2001).
25. Engkas
Merupakan sebuah kotak tertutup, terbuat dari kaca/playwood yang
dibagian depannya terdapat dua lubang untuk memasukkan tangan pemakai.
Untuk mensterilkan bagian dalamnya bisa dilakukan dengan cara
menyemprotkan alkohol 95% atau formalin cair. Fungsinya sebagai tempat
untuk mengambil bakteri (menghindari kontaminasi langsung). Dapat juga
digunakan sebagai tempat menanam eksplan dan sub kultur (pengganti
laminar air flow) pada kultur jaringan (Taiyeb, 2001).
26. Vortex
Vortex merupakan peralatan elektronik yang berfungsi untuk
mengaduk senyawa kimia yang ada dalam suatu tabung reaksi atau wadah.
Prinsip kerjanya yaitu dengan adanya tegangan yang diberikan, maka tabung
reaksi yang berisi larutan akan tercampur rata (Dwidjoseputro, 1998).
27. Shaker
Shaker digunakan untuk menghomogenkan larutan. Prinsip kerjanya
yaitu tabung reaksi yang berisi larutan ditaruh di lubang pada shaker
kemudian menekan tombol ON dengan mengatur kecepatannya
(Lahay, 2004).
28. Waterbath
Alat ini berfungsi untuk memanaskan dan menginkubasi serta sebagai
tempat pengujian aktivitas enzim. Penggunaannya dihubungkan dengan arus
listrik dan mengisi bagian dalam dengan air. Setelah itu mengatur suhunya
sampai sesuai dengan yang diinginkan (Taiyeb, 2001).
29. Centrifuge
Centrifuge merupakan alat yang berfungsi sebagai pemisah zat dalam
cairan yang diduga dapat mengendap dengan cara pemutaran menggunakan
kekuatan rotasi. Dengan pemutaran kecepatan tertentu, zat-zat yang tidak
terlarut akan mengendap. Satuaan yang digunakan pada centrifuge adalah
Rpm (Rotation per meter). Perinsip kerja dari alat ini adalah zat yang akan
dipisahkan dimasukkan kedalam tabung yang terdapat pada centrifuge,
kemudian menutup lubang pada centrifuge agar udar yang masuk tidak
mempengaruhi zat yang akan dipisah. Setelah itu tentukan waktu dan rotasi
putaran yang diinginkan, dengan memutar tombol Timer dan Rotation
(Anonim, 2009)
30. Hot plate
Alat ini digunakan untuk mengocok media cair sambil dipanasi. Alat
ini juga dapat dipakai untuk melarutkan ferri tartrat yang tidak mudah
dilarutkan. Dilakukan dengan cara menambah air pada ferri tartrat lalu
meletakkannya di atas hot plate. Setelah dihubungkan dengan arus listik,
alat ini akan menghomogenkan sekaligus memanaskannya (Lahay, 2004).
31. Desikator
Alat ini berfungsi untuk memanaskan dan menginkubasi serta sebagai
tempat pengujian aktivitas enzim. Penggunaannya dihubungkan dengan arus
listrik dan mengisi bagian dalam dengan air. Setelah itu mengatur suhunya
sampai sesuai dengan yang diinginkan (Taiyeb, 2001).
32. Neraca analitik
Merupakan Alat ini berfungsi untuk menimbang bahan yang akan
digunakan dalam praktikum dengan tingkat ketelitian yang tinggi. Prinsip
kerjanya yaitu meletakkan bahan pada timbangan tersebut kemudian melihat
angka yang tertera pada layar, dan angka itu merupakan berat dari bahan
yang ditimbang (Ali dan Hala, 2008).
33. Labu erlenmeyer
Labu erlenmeyer berfungsi sebagai tempat penyimpanan medium,
memanaskan larutan, dan menampung hasil dari penyaringan. Alat ini dapat
disterilisasikan dengan ditutup terlebih dahulu bagian atas dengan kapas,
lalu disterilisasi dengan menggunakan otoklaf (Anonim, 2009).
34. Kaki tiga
Alat ini digunakan sebagai salah satu alat dalam mensterilkan alat-alat
yang terbuat dari platina dan sebagainya (larutan). Prinsip kerjanya yaitu
alat ini sebagai penyangga wadah dari larutan atau alat yang akan disterilkan
sementara alat pembakar (bunsen) berada di bawah alat ini (Taiyeb, 2001).
35. Kasa
Kasa merupakan salah satu bagian dari rangkaian alat-alat kaki tiga
dan Bunsen. Dalam hal ini, kasa digunakan sebagai tempat meletakkan labu
Erlenmeyer pada saat dipanaskan (disterilisasi) (Taiyeb, 2001).
36. Pinset
Pinset berfungsi untuk menjepit atau mengambil pencadang,
sterilisasinya dapat dilakukan dengan dibakar menggunakan lampu spiritus.
Sedangkan pencadang berfungsi untuk melihat daerah hambatan atau zona
halo yang diisi dengan antibiotik. Ukurannya yaitu diameter luar = 8 mm,
diameter dalam = 6 mm, panjang = 10 mm (Anonim, 2009).
37. Spoit
Spoit berfungsi untuk mengambil larutan, zat hasil pengukuran, atau
zat yang mau diuji. Alat ini dapat disterilisasikan dengan menggunakan
otoklaf (uap air bertekanan) dimana sebelum disterilisai dibungkus terlebih
dahulu (Anonim, 2009).
38. Corong
Merupakan alat yang digunakan dalam proses penyaringan dan
memindahkan medium cair dari tempat yang besar ke tempat yang kecil
misalnya pada gelas kimia ke labu Erlenmeyer, prinsip kerjanya yaitu
meletakkan corong pada bagian mulut labu dan di pegang lalu cairan
dipindahkan (Ali dan Hala, 2008).
STERILISASI
Sterilisasi kering dilakukan dengan alat oven ini, biasanya digunakan suhu
160oC – 165oC selama 2 jam. Cara ini baik dilakukan terhadap alat-alat kering terbuat
dari kaca, seperti tabung reaksi, cawan petri, labu Erlenmeyer, pipet dan lain-lain.
Menurut Junaidi (2009) Cara kerja sterilisasi adalah cara kerja agar terhindar
dari kontaminasi, cara kerja steril ini digunakan pada pembuatan media, pemeriksaan
kultur dan pembuatan preparat. Sterilisasi dapat dilakukan secara;
1. Fisik di bagi menjadi beberapa bagian antara lain:
a. ”Hot air Sterilization” oven. Bahan dari gelas dibungkus dengan alumunium
foil, suhu 170-250°C selama 2 jam.
b. Panas basah dengan tekanan, suhu 121°C selama 15 menit. Alat yang
digunakan adalah autoclav caranya: alat-alat gelas dibungkus lagi dengan
alumunium foil.
c. Pressure Cooker, caranya: panaskan air mendidih, biarkan klep uap terbuka
agar keluar uap kemudian klep uap ditutup, lihat suhu dan tekanan, bila suhu
telah 121°C dengan tekanan 1,5 atm, dijaga konstan selama 15 menit.
Kemudian buka klep uap hingga tercapai tekanan nol, dan setelah suhu
mencapai suhu kamar, alat dan bahan dikeluarkan.
2. Kimia yaitu dengan menggunakan zat-zat kimia seperti desinfektan, antiseptik
3. Radiasi yaitu dengan menggunakan sinar Ultraviolet, biasanya digunakan pada
ruangan dan alat-alat plastik.
4. Filter yaitu dengan menggunakan membran filter dan Vacum Pump
BAB VPENUTUP
A. Kesimpula:
Berdasarkan hasil praktikum ini kita dapat menarik kesimpulan sebagai
berikut;
1. Praktikan melakukan pengamatan langsung, kita dapat mengetahui alat-alat apa
saja yang digunakan pada praktikum mikrobiologi beserta mengetahui bagian-
bagiannya, fungsinya dan prinsip kerjanya.
2. Alat-alat yang digunakan pada praktikum harus steril sehingga perlu dilakukan
sterilisasi alat-alat sebelum digunakan. Adapun alat untuk sterilisasi kering
adalah oven dengan suhu sterilisasi 160oC selama 2 jam
B. Saran
1. Diharapkan kepada praktikan agar tetap menjaga kekompakan antar
kelompok supaya hasil yang diperoleh sesuai dengan yang diharapkan
2. Diharapkan kepada praktikan agar teliti didalam melakukan sterilisasi alat.
3. Jumlah asisten diperbanyak sesuai dengan jumlah kelompok yang ada agar
praktikum dapat lebih terarah dan efisien
DAFTAR PUSTAKA
Ali, Alimuddin. 2005. Mikrobiologi Dasar Jilid I. Makasar: Badan Penerbit Universitas Negeri Makassar
Anonim. 2009. Pengenalan Alat Laboratorium dan Fungsinya. www.list-wordpress.com/alat-alat laboratorium-fungsi-prinsip kerja.html . Diakses pada tanggal 30 Oktober 2009
.Dwidjoseputro. 1990. Dasar-Dasar Mikrobiologi. Jakarta: Bambatang
Hala, Yusminah, Oslan Jumadi. 2009. Penuntun Praktikum Mikrobiologi Dasar. Makassar: Jurusan Biologi FMIPA UNM.
Irianto, Koes. 2007. Mikrobiologi. Bandung: Yrama Widya.
Junaidi, Wawan. 2009. Definisi Sterilisasi. http://wawan-junaidi.blogspot.com/2009/ 07/definisi-sterilisasi.html . Diakses pada tanggal 3 November 2009.
Lahay, Tutje. 2004. Teknik Laboratorium. Makassar: Jurusan Biologi FMIPA UNM.
Pelczar, M.J dan E.C.S. Chan. 1994. Dasar-dasar Mikrobiologi. Jakarta: Universitas Indonesia Press.
Taiyeb, M. 2001. Pengenalan Alat Laboratorium. Makassar: Jurusan Biologi FMIPA UNM.
Anonim. 2009. Pengenalan Alat Laboratorium dan Fungsinya. www.list-wordpress.com/alat-alat laboratorium-fungsi-prinsip kerja.html. Diakses pada tanggal 30 Oktober 2009
· Mikroskop Cahaya (Brightfield Microscope)
Salah satu alat untuk melihat sel mikroorganisme adalah mikroskop cahaya. Dengan mikroskop kita dapat mengamati sel
bakteri yang tidak dapat dilihat dengan mata telanjang. Pada umumnya mata tidak mampu membedakan benda dengan diameter lebih kecil
dari 0,1 mm. berikut merupakan uraian tentang cara penggunaan bagian-bagiandan spesifikasi mikroskop cahaya merk Olympus CH20
yang dimiliki Laboratorium Mikrobiologi.
Bagian-bagian Mikroskop:1. Eyepiece / oculars (lensa okuler)
Untuk memperbesar bayangan yang dibentuk lensa objektif1. Revolving nosepiece (pemutar lensa objektif)
Untuk memutar objektif sehingga mengubah perbesaran1. Observation tube (tabung pengamatan / tabung okuler)2. Stage (meja benda)
Spesimen diletakkan di sini1. Condenser (condenser)
Untuk mengumpulkan cahaya supaya tertuju ke lensa objektif1. Objective lense (lensa objektif)
Memperbesar spesimen1. Brightness adjustment knob (pengatur kekuatan lampu)
Untuk memperbesar dan memperkecil cahaya lampu1. Main switch (tombol on-off) 2. Diopter adjustmet ring (cincin pengatur diopter)
Untuk menyamakan focus antara mata kanan dan kiri1. Interpupillar distance adjustment knob (pengatur jarak interpupillar)2. Specimen holder (penjepit spesimen) 3. Illuminator (sumber cahaya) 4. Vertical feed knob (sekrup pengatur vertikal)
Untuk menaikkan atau menurunkan object glass1. Horizontal feed knob (sekrup pengatur horizontal)
Untuk menggeser ke kanan / kiri objek glas1. Coarse focus knob (sekrup fokus kasar)
Menaik turunkan meja benda (untuk mencari fokus) secara kasar dan cepat1. Fine focus knob (sekrup fokus halus)
Menaik turunkan meja benda secara halus dan lambat1. Observation tube securing knob (sekrup pengencang tabung okuler) 2. Condenser adjustment knob (sekrup pengatur kondenser)
·
Autoklaf (Autoclave)Diagram autoklaf vertical1. Tombol pengatur waktu mundur (timer)2. Katup pengeluaran uap3. pengukur tekanan4. kelep pengaman5. Tombol on-off6. Termometer7. Lempeng sumber panas8. Aquades (dH2O)9. Sekrup pengaman10. batas penambahan airAutoclave adalah alat untuk mensterilkan berbagai macam alat dan bahan yang digunakan dalam mikrobiologi menggunakan uap air panas bertekanan. Tekanan yang digunakan pada umumnya 15 Psi atau sekitar 2 atm dan dengan suhu 121oC (250oF). Jadi tekanan yang bekerja ke seluruh permukaan benda adalah 15 pon tiap inchi2 (15 Psi = 15 pounds per square inch). Lama sterilisasi yang dilakukan biasanya 15 menit untuk 121oC.Cara Penggunaan :1. Sebelum melakukan sterilisasi cek dahulu banyaknya air dalam autoklaf. Jika air kurang dari batas yang ditentukan, maka dapat ditambah air sampai batas tersebut. Gunakan air hasil destilasi, untuk menghindari terbentuknya kerak dan karat.2. Masukkan peralatan dan bahan. Jika mensterilisasi botol beretutup ulir, maka tutup harus dikendorkan.3. Tutup autoklaf dengan rapat lalu kencangkan baut pengaman agar tidak ada uap yang keluar dari bibir autoklaf. Klep pengaman jangan dikencangkan terlebih dahulu.4. Nyalakan autoklaf, diatur timer dengan waktu minimal 15 menit pada suhu 121oC.5. Tunggu samapai air mendidih sehingga uapnya memenuhi kompartemen autoklaf dan terdesak keluar dari klep pengaman. Kemudian klep pengaman ditutup
(dikencangkan) dan tunggu sampai selesai. Penghitungan waktu 15’ dimulai sejak tekanan mencapai 2 atm.6. Jika alarm tanda selesai berbunyi, maka tunggu tekanan dalam kompartemen turun hingga sama dengan tekanan udara di lingkungan (jarum pada preisure gauge menunjuk ke angka nol). Kemudian klep-klep pengaman dibuka dan keluarkan isi autoklaf dengan hati-hati.
· Inkubator (Incubator)Inkubator adalah alat untuk menginkubasi atau memeram mikroba pada suhu yang terkontrol. Alat ini dilengkapi dengan pengatur suhu dan pengatur waktu. Kisaran suhu untuk inkubator produksi Heraeus B5042 misalnya adalah 10-70oC..· Hot plate stirrer dan Stirrer barHot plate stirrer dan Stirrer bar (magnetic stirrer) berfungsi untuk menghomogenkan suatu larutan dengan pengadukan.
Pelat (plate) yang terdapat dalam alat ini dapat dipanaskan sehingga mampu mempercepat proses homogenisasi. Pengadukan dengan bantuan batang magnet Hot plate dan magnetic stirrer seri SBS-100 dari SBS® misalnya mampu menghomogenkan sampai 10 L, dengan kecepatan sangat lambat sampai 1600 rpm dan dapat dipanaskan sampai 425oC.· Colony counterAlat ini berguna untuk mempermudah perhitungan koloni yang tumbuh setelah diinkubasi di dalam cawankarena adanya kaca pembesar. Selain itu alat tersebut dilengkapi dengan skala/ kuadran yang sangat berguna untuk pengamatan pertumbuhan koloni sangat banyak. Jumlah koloni pada cawan Petri dapat ditandai dan dihitung otomatis yang dapat di-reset.· Biological Safety CabinetBiological Safety Cabinet (BSC) atau dapat juga disebut Laminar Air Flow (LAF) adalah alat yang berguna untuk bekerja secara aseptis karena BSC mempunyai pola pengaturan dan penyaring aliran udara sehingga menjadi steril dan aplikasisinar UV beberapa jam sebelum digunakan. Prosedur penggunaan BSC seri 36212, Purifier™ Biological Safety Cabinet dari LABCONCO yang dimiliki laboratorium mikrobiologi adalah sebagai berikut:1. Hidupkan lampu UV selama 2 jam, selanjutnya matikan segera sebelum mulai bekerja 2. Pastikan kaca penutup terkunci dan pada posisi terendah 3. Nyalakan lampu neon dan blower4. Biarkan selama 5 menit 5. Cuci tangan dan lengan dengan sabun gemisidal / alkohol 70 %6. Usap permukaan interior BSC dengan alkohol 70 % atau desinfektan yang cocok dan biarkan menguap7. masukkan alat dan bahan yang akan dikerjakan, jangan terlalu penuh (overload) karena memperbesar resiko kontaminan
8. Atur alat dan bahan yang telah dimasukan ke BSC sedemikian rupa sehingga efektif dalam bekerja dan tercipta areal yang benar-benar steril9. Jangan menggunakan pembakar Bunsen dengan bahan bakar alkohol tapi gunakan yang berbahan bakar gas.10. Kerja secara aseptis dan jangan sampai pola aliran udara terganggu oleh aktivitas kerja11. setelah selesai bekerja, biarkan 2-3 menit supaya kontaminan tidak keluar dari BSC12. Usap permukaan interior BSC dengan alkohol 70 % dan biarkan menguap lalu tangan dibasuh dengan desinfektan13. Matikan lampu neon dan blower · Mikropipet (Micropippete) dan TipMikropipet adalah alat untuk memindahkan cairan yang bervolume cukup kecil, biasanya kurang dari 1000 µl. Banyak pilihan kapasitas dalam mikropipet, misalnya mikropipet yang dapat diatur volume pengambilannya (adjustable volume pipette) antara 1µl sampai 20 µl, atau mikropipet yang tidak bisa diatur volumenya, hanya tersedia satu pilihan volume (fixed volume pipette) misalnya mikropipet 5 µl. dalam penggunaannya, mukropipet memerlukan tip.
Cara Penggunaan :1. Sebelum digunakan Thumb Knob sebaiknya ditekan berkali-kali untuk memastikan lancarnya mikropipet.2. Masukkan Tip bersih ke dalam Nozzle / ujung mikropipet.3. Tekan Thumb Knob sampai hambatan pertama / first stop, jangan ditekan lebih ke dalam lagi.4. Masukkan tip ke dalam cairan sedalam 3-4 mm.5. Tahan pipet dalam posisi vertikal kemudian lepaskan tekanan dari Thumb Knob maka cairan akan masuk ke tip.6. Pindahkan ujung tip ke tempat penampung yang diinginkan.7. Tekan Thumb Knob sampai hambatan kedua / second stop atau tekan semaksimal mungkin maka semua cairan akan keluar dari ujung tip.8. Jika ingin melepas tip putar Thumb Knob searah jarum jam dan ditekan maka tip akan terdorong keluar dengan sendirinya, atau menggunakan alat tambahan yang berfungsi mendorong tip keluar.
· Cawan Petri (Petri Dish)Cawan petri berfungsi untuk membiakkan (kultivasi) mikroorganisme. Medium dapat dituang ke cawan bagian bawah dan cawan bagian atas sebagai penutup. Cawan petri tersedia dalam berbagai macam ukuran, diameter cawan yang biasa berdiameter 15 cm dapat menampung media sebanyak 15-20 ml, sedangkan cawan berdiameter 9 cm kira-kira cukup diisi media sebanyak 10 ml.· Pipet Ukur (Measuring Pippete)Pipet ukur merupakan alat untuk memindahkan larutan dengan volume yang diketahui. Tersedia berbagai macam ukuran kapasitas pipet ukur, diantaranya pipet
berukuran 1 ml, 5 ml dan 10 ml. Cara penggunaanya adalah cairan disedot dengan pipet ukur dengan bantuan filler sampai dengan volume yang diingini. Volume yang dipindahkan dikeluarkan menikuti skala yang tersedia (dilihat bahwa skala harus tepat sejajar dengan mensikus cekung cairan) dengan cara menyamakan tekanan filler dengan udara sekitar.
· Pipet tetes (Pasteur Pippete)Fungsinya sama dengan pipet ukur, namun volume yang dipindahkan tidak diketahui. Salah satu penerapannya adalah dalam menambahkan HCl / NaOH saat mengatur pH media, penambahan reagen ada uji biokimia, dll. · Tabung reaksi (Reaction Tube / Test Tube)Di dalam mikrobiologi, tabung reaksi digunakan untuk uji-uji biokimiawi dan menumbuhkan mikroba.Tabung reaksi dapat diisi media padat maupun cair. Tutup tabung reaksi dapat berupa kapas, tutup metal, tutup plastik atau aluminium foil. Media padat yang dimasukkan ke tabung reaksi dapat diatur menjadi 2 bentuk menurut fungsinya, yaitu media agar tegak (deep tube agar) dan agar miring (slants agar). Untuk membuat agar miring, perlu diperhatikan tentang kemiringan media yaitu luas permukaan yang kontak dengan udara tidak terlalu sempit atau tidak terlalu lebar dan hindari jarak media yang terlalu dekat dengan mulut tabung karena memperbesar resiko kontaminasi. Untuk alas an efisiensi, media yang ditambahkan berkisar 10-12 ml tiap tabung.
· Labu Erlenmeyer (Erlenmeyer Flask)Berfungsi untuk menampung larutan, bahan atau cairan yang. Labu Erlenmeyer dapat digunakan untuk meracik dan menghomogenkan bahan-bahan komposisi media, menampung akuades, kultivasi mikroba dalam kultur cair, dll. Terdapat beberapa pilihan berdasarkan volume cairan yang dapat ditampungnya yaitu 25 ml, 50 ml, 100 ml, 250 ml, 300 ml, 500 ml, 1000 ml, dsb.· Gelas ukur (Graduated Cylinder)Berguna untuk mengukur volume suatu cairan, seperti labu erlenmeyer, gelas ukur memiliki beberapa pilihan berdasarkan skala volumenya. Pada saat mengukur volume larutan, sebaiknya volume tersebut ditentukan berdasarkan meniskus cekung larutan.
· Batang L (L Rod) Batang L bermanfaat untuk menyebarkan cairan di permukaan agar supaya bakteri yang tersuspensi dalam cairan tersebut tersebar merata. Alat ini juga disebut spreader.
· Mortar dan PestleMortar dan penumbuk (pastle) digunakan untuk menumbuk atau menghancurkan materi cuplikan, misal daging, roti atau tanah sebelum diproses lebih lanjut.
· Beaker GlassBeaker glass merupakan alat yang memiliki banyak fungsi. Di dalam mikrobiologi, dapat digunakan untuk preparasi media media, menampung akuades dll..· Pembakar Bunsen (Bunsen Burner)Salah satu alat yang berfungsi untuk menciptakan kondisi yang steril adalah pembakar bunsen. Untuk sterilisasi jarum ose atau yang lain, bagian api yang paling cocok untuk memijarkannya adalah bagian api yang berwarna biru (paling panas). Perubahan bunsen dapat menggunakan bahan bakar gas atau metanol.· Glass BeadsGlass Beads adalah manik-manik gelas kecil yang digunakan untuk meratakan suspensi biakan dengan menyebarkan beberapa butir di atas permukaan agar dan digoyang merata. Glass beads digunakan pada teknik spread plate yang fungsinya sama dengan batang L atau Spreader. · Tabung DurhamTabung durham berbentuk mirip dengan tabung reaksi namun ukurannya lebih kecil dan berfungsi untuk menampung/menjebak gas yang terbentuk akibat metabolisme pada bakteri yang diujikan. Penempatannya terbalik dalam tabung reaksi dan harus terendam sempurna dalam media (jangan sampai ada sisa udara). · Jarum InokulumJarum inokulum berfungsi untuk memindahkan biakan untuk ditanam/ditumbuhkan ke media baru. Jarum inokulum biasanya terbuat dari kawat nichrome atau platinum sehingga dapat berpijar jika terkena panas. Bentuk ujung jarum dapat berbentuk lingkaran (loop) dan disebut ose atau inoculating loop/transfer loop, dan yang berbentuk lurus disebut inoculating needle/Transfer needle. Inoculating loop cocok untuk melakukan streak di permukaan agar, sedangkan inoculating needle cocok digunakan untuk inokulasi secara tusukan pada agar tegak (stab inoculating). Jarum inokulum ini akan sangat bermanfaat saat membelah agar untuk preprasi Heinrich’s Slide Culture.· PinsetPinset memiliki banyak fungsi diantaranya adalah untuk mengambil benda dengan menjepit misalnya saat memindahkan cakram antibiotik.· pH Indikator Universalberguna untuk mengukur/mengetahui pH suatu larutan. Hal ini sangat penting dalam pembuatan media karena pH pada media berpengaruh terhadap petumbuhan mikroba. Kertas pH indikator dicelupkan sampai tidak ada perubahan warna kemudian strip warna dicocokkan dengan skala warna acuan.· Pipet Filler / Rubber BulbFiller adalah alat untuk menyedot larutan yang dapat dipasang pada pangkal pipet ukur. Karet sebagai bahan filler merupakan karet yang resisten bahan kimia. Filler memiliki 3 saluran yang masing-masing saluran memiliki katup. Katup yang bersimbol A (aspirate) berguna untuk mengeluarkan udara dari gelembung. S (suction) merupakan katup yang jika ditekan maka cairan dari ujung pipet akan
tersedot ke atas. Kemudian katup E (exhaust) berfungsi untuk mengeluarkan cairan dari pipet ukur.http://wawan-junaidi.blogspot.com/2009/07/definisi-sterilisasi.html
DEFINISI-STERILISASI
Sterilisasi merupakan Metode praktis yang dirancang untuk
membersihkan dari mikroorganisme, atau sengaja untuk
menghambat pertumbuhannya, yang nyata dari kepentingan dasar
di banyak keadaan. Jenis dari mikroorganisme sangat berbeda
dalam kelemahannya terdapat berbagai macam agen antimikroba,
dan lebih banyak lagi, afek yang praktis dari agen ini pada adanya
keadaan nyatayang sangat besar dipengaruhi oleh keadaan sekitar.
Banyak yang akan bertahan, contohnya, pada cuaca tertentu
organisme memiliki kulit, pada beberapa tubuh zat cair atau pada
udara, Air, makanan, kotoran, atau ruangan berdebu. Caranya
harus dirubah, oleh karena itu, dengan masalah nyata. Hal ini tidak
mungkin, bagaimanapun pada garis besarnya tentunya prinsip
dasar digaris bawahi pada umumnya digunakan cara untuk
memusnahkan dan mengontrol kehidupan mikroba (Burdon, 1969).
Cara kerja sterilisasi adalah cara kerja agar terhindar dari
kontaminasi, cara kerja steril ini digunakan pada pembuatan media,
pemeriksaan kultur dan pembuatan preparat. Sterilisasi dapat
dilakukan secara; (1) Fisik di bagi menjadi beberapa bagian antara
lain (a) dengan ”Hot air Sterilization” oven. Bahan dari gelas
dibungkus dengan alumunium foil, suhu 170-250°C selama 2 jam.
(b) panas basah dengan tekanan, suhu 121°C selama 15 menit.
Alat yang digunakan adalah autoclave, caranya: alat-alat gelas
dibungkus lagi dengan alumunium foil. (c) Pressure Cooker,
caranya: panaskan air mendidih, biarkan klep uap terbuka agar
keluar uap kemudian klep uap ditutup, lihat suhu dan tekanan, bila
suhu telah 121°C dengan tekanan 1,5 atm, dijaga konstan selama
15 menit. Kemudian buka klep uap hingga tercapai tekanan nol,
dan setelah suhu mencapai suhu kamar, alat dan bahan
dikeluarkan. (2) Kimia yaitu dengan menggunakan zat-zat kimia
seperti desinfektan, antiseptik. (3) Radiasi yaitu dengan
menggunakan sinar Ultraviolet, biasanya digunakan pada ruangan
dan alat-alat plastik. (4) Filter yaitu dengan menggunakan
membran filter dan Vacum Pump (Anonim, 2007).