Kromatografi Lapis Tipis(KLT)

Pokok Bahasan

Tahun 1944

Consden,Gorden & Martin menggunakan Kertas saring untuk memisahkan Asam Amino.

Tahun 1950

Kirchner Mengidentifikasi Terpenoid pada Kertas saring

Tahun 1958

STAHL Mengembangkan Standar untuk analisa menggunakan KLT

Prinsip dari KLT adalah ADSORPSIKomponen yang mempunyai affinitas lebih besar terhadap fasa Diam Akan bergerak lebih lambatKomponen yang mempunyai affinitas lebih kecil terhadap fasa Diam Akan bergerak lebih cepat

Dalam hal ini, Fase Diam adalah Non-polar & Fase gerak adalah polar & ini biasanya digunakan dalam Analisis Farmasi.

Senyawa Polar akan dielusi pertama Senyawa Non-polar akan dilepaskan dalam waktu yang lama

Perbandingan Fase Normal & Fase terbalik :

Fase Normal Fase TerbalikFase DiamPolar Non-polarFase GerakNon-polarPolar Komponen yang dielusi PertamaNon-polarPolar Komponen yang dielusi berikutnyaPolarNon-polarContoh fase DiamSilica gelC4 ,c8 bonded phase

NAMAKOMPOSISISilica gel HSilica gel without binderSilica gel GSilica gel + CaSO4 Silica gel GFSilica gel + Binder + fluorescent indicatorAluminaAl203 Without BinderAl203 GAl203 + BinderCellulose powderCellulose Without BinderCellulose powderCellulose With BinderKieselguhr GDiatomaceous earth + binderPolyamide powderPolyamideFullers earthHydrous magnesium aluminaMagnesium Silicatemagnesol

Sifat dari zat yang akan dipisahkan apakah polar atau non-polar.Jenis Kromatografi.Sifat dari Fase Diam.Jenis Pemisahan yang akan dilakukan.

Contoh : 1) Petroliam ether 2) Cyclohexane 3) Acetone 4) Toluene 5) Ethyl acetate 6) Benzene 7) Alcohols 8) Water 9) Chloroform 10) Pyridine FASE GERAK

Ada 3 Jenis yaitu : plat Penuh : 20cm 20 cm. plate Separo : 20cm 10 cm. plate : 20cm 5 cm. Plat Mikroskop juga dapat digunakan untuk memonitoring laju suatu reaksi kimia.PLAT GELAS

*

PLAT GELAS

Plat KLT dapat disiapkan dengan cara berikut : Penuangan. Pencelupan. Penyemprotan. Penyebaran.

Aktivasi :Memindahkan air removing of water/ moisture & other adsorbed substance from the surface of any adsorbent by heating.

Pembuatan tempat penotolan sampel

wadah pengembangan harus dilapisi dengan kertas saring yang sudah dilembabkan untuk mendapatkan kondisi yang baik dan mencegah

EDGE EFFECT

PENGEMBANGAN

Pengembangan 1 Dimensi. Pengembangan 2 Dimensi. Pengembangan Horizontal. Pengembangan Multiple.

Deteksi Noda dapat dilakukan dengan 2 metoda Metoda Non-Spesifik 1) Metoda Chamber Iodine. 2) Metoda Semprot Asam Sulfat. 3) Chamber UV untuk senyawa fluoresensi. 4) Menggunakan Fase Diam berfluoresensi.(B) Metoda Spesifik 1) FeCl3. 2) Ninhydrine dalam aseton. 3) Reagen Drogendroff. 4) 3,5 Dinitro benzoic acid. 5) 2,4 - Dinitro phenyl hydrazine.

Angka Rf adalah :Perbandingan antara jarak yang ditempuh oleh sampel dengan jarak yang ditempuh pelarut

Contoh Pengembangan KLT

Contoh Pengembangan KLT

Pemisahan Campuran Kimia, Biologi obat.Pemisahan Karbohidrat, vitamin, antibiotik, protein, dll.Identifikasi Obat seperti : Amoxicillin, LevodopaDeteksi Benda asing.Untuk mendeteksi Dekomposisi Produk Obat.

KROMATOGRAFI LAPIS TIPISKROMATOGRAFI KERTASmemerlukan lebih sedikit sampelmemerlukan lebih banyak sampelMembutuhkan sedikit waktuMembutuhkan waktu lebih banyakHasil pemisahan lebih jelasHasil pemisahan kurang jelas dibanding KLTKapasitas Absorban lebih besarKertas Kromatografi lebih kecilAsam Kuat dapat diidentifikasi dengan baikTidak bisa dilakukan dengan KKtReagen Korosif dapat dilapisi dengan Plate KacaTidak bisa terlaksana dengan KKtSecara Fisika lebih kuatSecara Fisika Kurang kuatDapat dipanaskan pada OvenTidak bisaLebih sensitifKurang sensitif

THANK YOU

*