Hasil-pengamatan-proteinku

VIII. Hasil Pengamatan

No. Percb

Prosedur KerjaHasil Pengamatan

Dugaan/Reaksi KesimpulanSebelum Sesudah

1. Denaturasi Proteina.denaturasi karena perubahan asam asetat

Larutan protein :

-Susu: larutan berwarna putih

-Putih telur: larutan tidak berwarna

-CH3COOH: larutan tidak berwarna

-Larutan rotein susu + 2 tetes CH3COOH 1 N: larutan keruh dan terbentuk endapan putih

- Protein putih telur +2 tetes CH3COOH 1 N: larutan jernih tak berwarna dan terbentuk endapan putih

-Setelah dipanaskan:

- Susu : endapan putih bertambah banyak (++)

-Telur : endapan putih bertambah banyak (+)

- Denaturasi akibat penambahan asam asetat dapat mengakibatkan terjadinya reaksi kimia antara gugus-gugus yang ada dengan senyawa yang ditambahkan

-Struktur protein karena denaturasi menyebabkan terbentuknya endapan

-Larutan protein susu dan telur mengalami denaturasi karena penambahan asam asetat ditandai dengan terbentuknya endapan. Endapan pada susu yang terbentuk > dari endapan telur

5 mL larutan Protein

- dimasukkan ke dalam tabung reaksi- ditambahkan 2 tetes CH3COOH 1 N

sambil dikocok

Endapan putih

Endapan putih

- Dipanaskan dalam penangas air selama 5 menit

b. denaturasi karena pemanasan -Larutan protein susu: berwarna putih

-Larutan protein telur: jernih tidak berwarna

-(NH4)2SO4: larutan tidak berwarna

-Larutan protein susu dipanaskan: larutan menjadi keruh

-Setelah didinginkan :

* Susu : larutan berwarna putih

* Telur : jernih tak berwarna

-Bagian I :

+ 2 tetes (NH4)2SO4 dan dipanaskan :

*Susu : larutan keruh dan terbentuk endapan putih (++)

*Telur : larutan keruh dan terbentuk endapan putih (+)

-Bagian II setelah dipanaskan:

*Susu : larutan berwarna putih (+)

*Telur : larutan jernih tak berwarna

-Denaturasi akibat pemanasan mengakibatkan perubahan struktur protein, sehingga aktifitas protein hilang. Sehingga memberikan kecenderungan membentuk sifat koagulasi yang berkurang dan akhirnya hilang sama sekali ( larutan menjadi jernih )

-perubahan struktur yang diakibatkan konfigurasi protein dari bentuk a-helik menjadi memenjang

Pemanasan:

-Larutan protein yaitu susu dan telur mengalami denaturasi karena pemanasan dan + ammonium sulfat yang ditandai dengan terbentuknya endapan

Endapan Endapan

- ditambahkan 1-2 tetes ammonium sulfat

- dipanaskan

- dipanaskan

2-3 mL larutan Protein

- dimasukkan ke dalam tabung reaksi- dipanaskan selama 1 menit

- didinginkan- dibagi menjadi 2 bagian

Bagian IIBagian I

Endapan putih

R

NH2

CO2H R

H

NH3+

O

O-

CCC

R

NH2

CO2H R

H

NH3+

O

O-

CCC

Penambahan (NH4)2SO4:

c. denaturasi karena penambahan formaldehid -Larutan protein susu: berwarna putih

-Larutan protein telur: jernih tidak berwarna

-Formaldehid: larutan jernih tidak berwarna

-Aquades: tidak berwarna

-Formaldehid + aquades + larutan tak berwarna

-+ larutan protein :

*3 tetes susu : terbentuk endapan berwarna putih (+)

*5 tetes telur : terbentuk endapan berwarna putih

Penambahan formaldehid akan menyebabkan terjadinya reaksi padagugus amino pada protein dengan membentuk asam amino dimetil. Hasil reaksi memberikan endapan yang tidak larut dalam air dan mengeras

Larutan protein susu dan telur mengalami denaturasi karena penambahan formaldehid yang ditandai dengan terbentuknya endapan. Endapan pada susu > endapan telur

- dimasukkan ke dalam tabung reaksi

- ditambahkan larutan berprotein

1-15 mL larutan Formaldehid + 2 mL aquades

Endapan putih

NH2SO4 C

O+

R

NHOH C

O+

R

H2SO4 H+

kalor

NH2SO4

R

+ COOH + NH2CHCOOH

R

NH2SO4 C

O+

R

NHOH C

O+

R

H2SO4 H+

kalor

NH2SO4

R

+ COOH + NH2CHCOOH

R

R CH

NH3+

C

O

O+ 2CH2 R CH CO2H

NHOCH2CH2OH

R CH

NH3+

C

O

O+ 2CH2 R CH CO2H

NHOCH2CH2OH

2 Reaksi Amfoter Protein - Larutan protein susu: berwarna putih

-Larutan protein telur: tidak berwarna

-Aquades: tidak berwarna

-HCl: larutan tidak berwarna

-Kertas lakmus: berwarna merah

-NaOH: larutan tidak berwarna

-Indikator PP: larutan tidak berwarna

- aquades + HCl: larutan tidak berwarna + larutan protein :

*Susu : Larutan berwarna putih keruh

*Telur : larutan jernih tak berwarna

- + kertas lakmus berwarna merah dan biru:

*Susu : kertas lakmus merah tetap merah dan kertas lakmus biru berubah menjadi merah

*Telur : kertas lakmus merah tetap merah dan kertas lakmus biru berubah menjadi merah

-NaOH + larutan protein + indikator PP :

*Susu : larutan berwarna mera muda

*Telur : larutan berwarna mera muda

-Protein merupakan koloid yang bersifat amfoter, dapat bersifat asam atau basa

-sifat amfoter tergantung pada jumlah gugus –NH2 dari amina dan –COOH diasam

Reaksi ketika ditambahkan asam:

Reaksi ketika ditambahakan basa:

-Larutan protein susu dan telur bersifat (amfoter) bersifat asam, saat diuji dengan lakmus biru, kertas lakmus berubah warna menjadi merah

-Bersifat basa saat diuji dengan indikator PP warnanya menjadi merah muda

3. Pengendapan Protein -Larutan protein -Larutan protein + larutan Penambahan ammonium Pengendapan

3 mL aquades

Kertas lakmus berwarna merah

2-3 mL larutan protein

- ditambahkan bertetes-tetes larutan NaOH diatas dalam tabung reaksi

3 mL larutan NaOH encer

- dimasukkan ke dalam tabung reaksi- ditambahkan beberapa tetes indikator PP

- dimasukkan ke dalam tabung reaksi- ditambahkan 1 tetes HCl 1 N- ditambahkan beberapa tetes indikator

kongoLarutan berwarna biru

- ditambahkan 2-3 mL larutan protein

Larutan berwarna merah jambu

Larutan berwarna merah jambu

R

CNH3+ H + H+

CO2-

NH3+

R

C H

CO2H

R

CNH3+ H + OH-

CO2-

NH2

R

C H + H2O

CO2-

H

R

CNH3+ H + H+

CO2-

NH3+

R

C H

CO2H

R

CNH3+ H + OH-

CO2-

NH2

R

C H + H2O

CO2-

H

R

CNH3+ H + H+

CO2-

NH3+

R

C H

CO2H

R

CNH3+ H + OH-

CO2-

NH2

R

C H + H2O

CO2-

H

R

CNH3+ H + H+

CO2-

NH3+

R

C H

CO2H

R

CNH3+ H + OH-

CO2-

NH2

R

C H + H2O

CO2-

H

a.Pengendapan Protein dengan Ammonium Sulfat susu: berwarna putih

-Larutan protein putih telur: tidak berwarna

-(NH4)2SO4 : larutan tidak berwarna

-Aquades: Tidak berwarna

jenuh ammonium sulfat :

*Susu : larutan berwarna putih keruh (+)

*Telur : larutan berwarna putih keruh

-1 mL larutan keruh + aquades =

*Susu : larutan jernih (endapan larut)

*Telur : larutan jernih (endapan larut)

sulfat pekat menyebabkan terjadinya dehidrasi protein (kehilangan air). Sehingga mudah menguap.

Protein yang diendapkan dengan cara ini tidak mengalami perubahan kimia, sehingga mudah dilarutkan kembali dengan penambahan air (bersifat reversibel)

protein dengan penambahan ammonium sulfat, HCl pekat dan logam berat bersifat reversible. Sedangkan pengendapan protein dengan penambahan HNO3 pekat bersivat irreversible

Susu dan telur dapat bersifat reversible jika ditambahkan dengan ammonium sulfat, ditandai dengan adanya endapan yang larut

- dimasukkan ke dalam tabung reaksi- ditambahkan 3-4 mL larutan jenuh ammonium

sulfat- dikocok pelan-pelanLarutan keruh

- ditambahkan 1 mL larutan kedalam tabung reaksi

- ditambahkan 2-3 mL aquades- -dikocok larutan


Endapan larut

R

CNHCN NHCHC

O O

R

H2O2 H+

NH2SO4 + CO2H +NH2CHCO2H

RR

R

CNHCN NHCHC

O O

R

H2O2 H+

NH2SO4 + CO2H +NH2CHCO2H

RR

b. Pengendapan protein dengan asam mineral -HNO3 pekat: larutan tidak berwarna

-HCl pekat: larutan tidak berwarna

-Larutan protein susu: berwarna putih

-Larutan putih telur: tidak berwarna

- HNO3 pekat + larutan protein :

*Susu : terbentuk cincin putih

*Telur : terbentuk cincin putih

-Dikocok

*Susu : cincin larut

*Telur : cincin larut

- HNO3 pekat :

*Susu : endapan lebih banyak (+) ( 10 tetes)

*Telur : endapan lebi banyak ( 20 tetes)

-HCl pekat :

*Susu : endapan larut ( 20 tetes)

*Telur : endapan larut ( 20 tetes)

Asam mineral pekat pada protein menyebabkan terbentuknya senyawa garam dari reaksi asam dengan gugus amino protein. Diproleh endapan protein pada umumnya pengendapan dengan penambaan asam mineral kuat (kecuali HNO3 pekat) yaitu HCl bersifat reversibl

Susu dan telur dapat bersifat reversible jika ditambahkan dengan HCl pekat, ditandai dengan adanya endapan yang larut saat ditambahkan Cl pekat secara terus menerus. Sedangkan susu dan telur dapat bersifat irreversible jika ditambahkan dengan HNO3 pekat , ditandai dengan adanya endapan yang lebih banyak saat ditambahkan terus menerus

1 mL HNO3 pekat

Endapan lebih banyak

1-2 mL HCl pekat

- ditambahkan larutan asam nitrat pekat dan asama klorida pekat pada masing-masing tabung

Endapan larut

Terbentuk cincin putih

- dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang berbeda

- dimiringkan tabungnya- ditambahkan 1-15 mL larutan protein

bertetes-tetes lewat dinding tabung- ditegakkan kembali tabungnya dan

didiamkanTerbentuk cincin putih

R CO2H + HNO3 pekatCN

NH2

H

R CO2HCN

NH3 + NO3-

R CO2H + HCl pekatCN

NH2

H

R COOHCN

NH3 + Cl-


NH2

H

R CO2HCN

NH3 + NO3-


NH2

H

R COOHCN

NH3 + Cl-


NH2

H

R CO2HCN

NH3 + NO3-


NH2

H

R COOHCN

NH3 + Cl-


NH2

H

R CO2HCN

NH3 + NO3-


NH2

H

R COOHCN

NH3 + Cl-

c. Pengendapan protein dengan logam berat -Larutan protein susu: berwarna putih

-Larutan protein putih telur: tidak berwarna

-CuSO4: larutan berwarna biru

-ZnSO4: larutan tidak berwarna

- FeSO4: larutan tidak berwarna

-Larutan protein + CuSO4:

*Susu : + 1 tetes CuSO4

terbentuk endapan berwarna biru

-Ketika + 40 tetes CuSO4: endapan larut

*Telur : + 5 tetes CuSO4

terbentuk endapan berwarna biru

-Ketika + 10 tetes CuSO4 : endapan larut

-Larutan protein + FeSO4:

*Susu : + 2 tetes FeSO4

terbentuk endapan berwarna coklat

-Ketika + 20 tetes FeSO4: endapan larut

*Telur : + 3 tetes FeSO4

terbentuk endapan berwarna kecoklatan

-Ketika + 45 tetes FeSO4 : endapan larut

Larutan protein + ZnSO4:

*Susu : + 1 tetes terbentuk endapan berwarna putih

-Ketika + 38 tetes ZnSO4:

-Pengendapan logam berat dapat terjadi apabila protein berada dalam bentuk isoelektrik yang bermuatan negatif.

-muatan positif dari logam berat akan terjadi reaksi netralisasi dari protein dan dihasilkan garam netral piofeinat yang mengendap.

-endapan larut kembali pada penambahan alkali

Susu dan telur dapat bersifat irreversible jika ditambahkan dengan logam berat, seperti Cu2+, Zn2+, dan Fe2+, ditandai dengan adanya endapan yang larut saat ditambahkan terus menerus

- ditambahkan CuSO4 kembali sampai larut


Larutan berwarna biru

Endapan larut


- ditambahkan FeSO4 kembali sampai larut

- dimasukkan ke dalam tabung reaksi- ditambahkan tetes demi tetes FeSO4

- dikocok


- dimasukkan ke dalam tabung reaksi- ditambahkan tetes demi tetes ZnSO4

- dikocok

- ditambahkan ZnSO4 kembali sampai larutEndapan larut

Endapan larut


- dimasukkan ke dalam tabung reaksi- ditambahkan tetes demi tetes CuSO4

- dikocok


R COO- + Pb2+C

NH2

H

R COO-CN

NH2

H

Pb2+

2

R COO- + Zn2+C

NH2

H

R COO-CN

NH2

H

Zn2+

2

R COO- + Cu2+C

NH2

H

R COO-CN

NH2

H

Cu2+

2

R COO- + Pb2+C

NH2

H

R COO-CN

NH2

H

Pb2+

2

R COO- + Zn2+C

NH2

H

R COO-CN

NH2

H

Zn2+

2

R COO- + Cu2+C

NH2

H

R COO-CN

NH2

H

Cu2+

2

R COO- + Pb2+C

NH2

H

R COO-CN

NH2

H

Pb2+

2

R COO- + Zn2+C

NH2

H

R COO-CN

NH2

H

Zn2+

2

R COO- + Cu2+C

NH2

H

R COO-CN

NH2

H

Cu2+

2

4. Reaksi Warna Proteina. Reaksi Biuret

-Larutan protein susu: berwarna putih


-NaOH 40%: larutan tidak berwarna

-CuSO4: larutan berwarna biru

- larutan protein + NaOH 40% :

*Susu : larutan berwarna putih

*Telur : larutan tak berwarna

-Ketika ditambahkan CuSO4 :

*Susu : larutan berwarna ungu

*Telur : larutan berwarna ungu dan terdapat endapan berwarna biru

terbentuknya warna ungumenandakan reaksi positif. Warna ungu yang terbentuk dari senyawa kompleks antara Cu2+ dan N dari molekul ikatan peptida

Banyaknya asam amino yang terikat pada ikatan peptida mempengaruhi warna reaksi. Senyawa dengan dipeptida memberikan warna biru, tripeptida ungu dan tetrapeptida serta peptid komplek smemberikan warna merah.

Susu dan telur merupakan protein, yang ditandai dengan perubahan warna larutan yang berubah menjadi warna ungu saat ditambahkan dengan pereaksi biuret

- dimasukkan ke dalam tabung reaksi- ditambahkan 1 mL NaOH 40%- ditambahkan 0.5 mL CuSO4 bertetes-tetesLarutan berwarna merah/ungu

3 mL larutan protein

COOH

+ NaOH + CuSO4

H2C

OC

Cu

HC

H2C

HC

C

HO

O

NH2 NH2

O

H2C

NH2 HC

O

OH

COOH

+ NaOH + CuSO4

H2C

OC

Cu

HC

H2C

HC

C

HO

O

NH2 NH2

O

H2C

NH2 HC

O

OH

b. Reaksi Ksantho protein Larutan protein susu: berwarna putih


- HNO3 pekat: larutan tidak berwarna

-Amonia: larutan tidak berwarna

-Larutan protein susu+ HNO3 pekat + dipanaskan :

*Susu : larutan berwarna kuning dan terbentuk endapan kuning

*Telur : larutan berwarna kuning dan terbentuk endapan kuning

-didinginkan

-setelah ditambahkan amonia :

*Susu : larutan berwarna jingga

*Telur : larutan berwarna jingga

-Reaksi warna ksanthoprotein dapat terjadi karena reaksi nitrasi pada cincin benzene dari asam amino penyusun protein.

-Tes positif ditunjukkan dengan warna kuning yang disebabkan terbentuknya suatu senyawa polinitrobenzena dari asam amino protein

-reaksi positif untuk protein yang mengandung asam amino dengan inti benzena, misalkan triosin, fenil anilin, dan triptofan

-Warna kuning berubah menjadi kuning muda sampai jingga disebabkan sifat keasaman fenol yang bereaksi dengan alkali

Susu dan telur merupakan protein yang mengandung asam amino dengan inti benzena, yang ditandai dengan perubahan warna larutan yang berubah menjadi warna jingga saat ditambahkan dengan HNO3 pekat

Larutan kuning

- dimasukkan ke dalam tabung reaksi- ditambahkan 1 mL HNO3 pekat- dipanaskan


CH2

CH COOH

H2N

+ HNO3 HO

NO2

NO2

H2C C

H

NH2

COOH

CH2

CH COOH

H2N

+ HNO3 HO

NO2

NO2

H2C C

H

NH2

COOH

c. Reaksi Ninhidrin -Larutan protein susu pH 6: berwarna putih

-Larutan putih telur pH 7 : tidak berwarna

-Larutan ninhidrin 0.2%: tidak berwarna

- Larutan protein + larutan ninhidrin:


*Telur : larutan berwarna putih

-Setelah dipanaskan :

*Susu : larutan berwarna ungu (+)

*Telur : larutan berwarna ungu

Reakasi warna protein dengan ninhidrin menunjukkan positif bila memberikan warna biru atau ungu. Reaksi ini terjadi pada gugus amino bebas dari asam amino dengan ninhidrin

Susu dan telur merupakan protein, yang ditandai dengan perubahan warna larutan yang berubah menjadi warna ungu saat ditambahkan dengan Pereaksi ninhidrin

d. Reaksi Millon -Larutan protein susu: berwarna putih

-Larutan protein + merkuri sulfat :

*Susu : larutan berwarna

-Pereaksi millon + senyawa Hg ke dalam protein yang

Susu dan telur merupakan protein yang mengandung

- dimasukkan ke dalam tabung reaksi- ditambahkan 10 tetes ninhidrin 0.2 %- dipanaskan pada sushu 100 selama 10 menit

1 mL larutan protein 0.5 % pH 7

Larutan berwarna merah/ungu


- dimasukkan ke dalam tabung reaksi- ditambahkan 1 mL pereaksi merkuri sulfat

didalam tabung- dipanaskan

CO2H

OH

O

+ AgNO3+

CH

NH2

H2C

NO2

CHH2C C

NH2

OHg

CO2H

OH

O

+ AgNO3+

CH

NH2

H2C

NO2

CHH2C C

NH2

OHg


-Merkuri sulfat: larutan tidak berwarna

-1% NaNO2: larutan bertidak berwarna

putih


-setelah dipanaskan :

*Susu : terdapan endapan berwarna merah (+)

*Telur : terdapan endapan berwarna merah

-Didinginkan :



- + NaNO3 :

*Susu : larutan tak berwarna dan terdapan endapan berwarna merah (+)

*Telur : larutan tak berwarna dan terdapan endapan berwarna merah

-Dipanaskan :



mengasilkan endapan putih dari senyawa merkuri

-untuk protein yang mengandung tirosin atau triptofan penambahan pereaksi millon memberikan warna merah

tirosin atau triptofan, yang ditandai dengan adanya endapan berwarna merah bata saat ditambahkan dengan pereaksi merkuri sulfat

Endapan Kuning

- didinginkan dengan air- ditambahkan 1 tetes larutan 1% NaNO2

- dipanaskanEndapan Merah

CH2CHCO2H

NH2

NH

e. Reaksi Hopkin-Cole -Larutan protein susu: berwarna putih


-Formaldehid: larutan tidak berwarna

-Pereaksi Merkuri sulfat: larutan tidak berwarna

-H2SO4 pekat: larutan tidak berwarna

-larutan protein + 1 tetes formaldehid :

*Susu : larutan menjadi berwarna putih


-setelah ditambahkan pereaksi Merkurisulfat :

*Susu : larutan menjadi berwarna putih

* Telur : larutan tak berwarna

-setelah ditambahkan H2SO4 pekat:

*Susu : terdapat cincin berwarna putih

*Telur : terdapat cincin berwarna putih

-Terbentuknya cincin ungu menunjukkan positif mengandung protein

-pembentukan cincin deikarenakan terbentuknya kondensasi 2 inti indol dari triptofan dngan aldeid. Aldehid diperoleh dari glioksalat

Asam-2,3,4,5- tetrahidra-β-karbolin-4-karboksilat (cincin ungu)

Seharusnya susu dan telur merupakan protein, yang ditandai dengan terbentuknya cincin berwarna ungu saat ditambahkan dengan pereaksi Hopkin-Cole.

Tetapi pada kelompok kami tidak terbentuk cincin berwarna ungu tetapi cincin berwarna putih, sehingga percobaan yang kami lakukan tidak berhasil, dikarenakan beberapa faktor, salah satunya saat penambahan H2SO4 pekat kami kurang berhati – hati.

Terbetuk dua lapisan

- dimasukkan 1 tetes larutan formaldehid encer didalam tabung reaksi

- ditambahkan 1 tetes pereaksi merkuri sulfat

- ditambahkan 1 mL H2SO4 pekat melalui dinding dan tabung

- dimiringkan


+ COOH

H

NH

NH

H

H2C

CO2H

H

H2SO4

H H

NH

+ COOH

H

NH

NH

H

H2C

CO2H

H

H2SO4

H H

NH

5. Hidrolisis Protein dan Test Adanya Belerang -Larutan protein susu: berwarna putih


-NaOH 10 %: larutan tidak berwarna

-Pb-Asetat: larutan tidak berwarna

-larutan protein + 10 % NaOH :



-setelah dipanaskan:

*Susu : larutan berwarna kekuningan

*Telur : larutan berwarna kekuningan

-Pb-asetat :

*Susu : terbentuk endapan berwarna hitam

*Telur : terbentuk endapan berwarna hitam

Penambahan NaOH > dari penambahan garam Pb, senyawa ini mengubah Pb dalam suasana basa menjadi endapan PbS yang mudah diamati

Reaksi:S2-+2H2O+PbO2

2-→ PbS↓+4OH-

Susu dan telur dapat terhidrolisis saat dilakukan penambahan NaOH 10% dan dilakukan pemanasan.

Lalu susu dan telur merupakan protein yang mengandung adanya belerang (PbS) yang ditandai dengan adanya endapan berwarna hitam saat dilakukan penambahan Pb asetat pada larutan

Warna hitam

- ditambahkan larutan 10% NaOH dalam tabung reaksi

- dipanaskan selama 1 menit- ditambahkan 1 tetes Pb asetat


Hasil-pengamatan-proteinku

Documents

Transcript of Hasil-pengamatan-proteinku