3.1 Cara Kerja

3.3.1 Pmbuatan Media SCB (19 g/l)

1. Media SCB dibuat sebanyak 200 ml, sehingga harus dihitung dahulu massa media

yang ditimbang yaitu :

2. Ditimbang 3,8 gram bubuk SCB OXOID CM0699 pada neraca analitik dengan

menggunakan gelas beker

3. Dilarutkan dengan aquadest hingga homogen

4. Dimasukkan kedalam Erlenmeyer dan ditambahkan aquadest sampai volumenya

mencapai 200 ml

5. Lalu ditutup dengan aluminium foil

6. Dipanaskan hingga larut sempurna pada kompor listrik

7. Dipipet dengan pipet ukur masing-masing sebanyak 10 ml kedalam 20 buah tabung

reaksi yang telah diisi label sebelumnya

8. Ditutup dengan kapas lemak

9. Media siap digunakan

3.3.2 Pmbuatan Media SSA (63 g/l)

1. Media SCB dibuat sebanyak 300 ml, sehingga harus dihitung dahulu massa media

yang ditimbang yaitu :

2. Ditimbang 18,9 gram bubuk SSA OXOID CM0099 pada neraca analitik dengan

menggunakan gelas beker

3. Dilarutkan dengan aquadest hingga homogen

4. Dimasukkan kedalam Erlenmeyer dan ditambahkan aquadest sampai volumenya

mencapai 300 ml

5. Lalu ditutup dengan aluminium foil

6. Dipanaskan hingga larut sempurna pada kompor listrik

7. Dituang kedalam 20 palte sebanyak 15-20 ml (40-500C)

8. Media siap digunakan

3.3.3 Pmbuatan Media MCA (51,5 g/l)

1. Media SCB dibuat sebanyak 300 ml, sehingga harus dihitung dahulu massa media

yang ditimbang yaitu :

2. Ditimbang 15,3 gram bubuk MCA OXOID CM0137 pada neraca analitik dengan

menggunakan gelas beker

3. Dilarutkan dengan aquadest hingga homogeny

4. Dimasukkan kedalam Erlenmeyer dan ditambahkan aquadest sampai volumenya

mencapai 300 ml

5. Lalu ditutup dengan aluminium foil

6. Dipanaskan hingga larut sempurna pada kompor listrik

7. Disterilisasi pada autoclave dengan suhu 1210 C selama 15 menit

8. Dituang kedalam 20 palte sebanyak 15-20 ml (40-500C)

9. Media siap digunakan

3.3.4 Penanaman biakan ( sampel es gula ) pada media SCB

1. Sampel es gula dituang pada gelas beaker

2. Kemudian sampel dipipet menggunakan pipet ukur sebanyak 10 ml kedam tabung

yang telah berisi media SCB sambil difiksasi

3. Dikocok hingga merata

4. Diinkubasi dalam incubator pada suhu 370C selama 18-24 jam

3.3.5 Penanaman biakan ke media MCA dan SSA

1. Disiapkan media MCA dan SSA yang sudah diberi label

2. Dari tabung media SCB , diinokulasikan/digoreskan dengan ose steril ke media MCA

dan SSA dengan metode gores kuadran (4 kuadran)

3. Media yang telah digoreskan tersebut diinkubasi pada suhu 370C selama 18-24 jam

3.3.6 Pengamatan pada media MCA dan SSA

Diamati koloni yang tumbuh pada media MCA dan SSA secara makroskopis,

dibandingkan dengan cirri-ciri koloni untuk bakteri Salmonella sp. pada media MCA

dan SSA

4.1 DATA HASIL PENGAMATAN

Dari kegiatan praktikum yang telah dilakukan mengenai pembuatan media, penanaman

serta pengamatan atau pemeriksaan pada media didapatkan hasil sebagai berikut :

Identitas Sampel

Sampel yang digunakan : Minuman (Es Gula)

Warna sampel : Merah muda

Kondisi sampel : Dalam keadaan dingin

Media yang digunakan : SCB, SSA dan MCA

Gambar hasil pengamatan

Gambar Hasil Pengamatan Keterangan

Bagian atas merupakan

gambar media MCA setelah

padat dan siap untuk

digunakan.

Bagian bawah merupakan

gambar media SSA setelah

padat dan siap untuk

digunakan.

Alat dan bahan yang akan

digunakan untuk penanaman

bakteri , dipastikan semua alat

dan bahan dalam keadaan

bersih.

Berikut ini merupakan

gambar pengamatan pada saat

sampel dipipet 10 ml untuk

dimasukkan kedalam media

yang telah di inkubator.

Sebelum dimasukkan

kedalam media harus melalui

tahap fiksasi menggunakan

api spiritus

Sampel yang telah dipipet

dimasukkan kedalam tabung

reaksi berisi media sebanyak

10 ml dan difiksasi dengan

api spiritus untuk mencegah

terjadinya kontaminan.

Kemudian sampel

dihomogenkan dengan cara

dikocok dan siap untuk di

inkubasi menggunakan

incubator.

Media dibagi menjadi 4

bagian untuk dilakukan

metode gores 4 kuadran.

Berikut adalah gambar

pengamatan secara

makroskopis terhadap media

yang telah ditanam oleh

sampel (es gula). Hasil

menunjukkan pada media

MCA koloni berwarna pink

dan terjadi perubahan warna

setelah diinkubasi. Pada

media SSA koloni juga

berwarna pink. Dari hasil

tersebut disimpulkan bahwa

sampel (es gula) positif

terdapat bakteri e.colli.

.

SSA

MCA