Hasil dan Diskusi

Aliran cytometry analisis menunjukkan bahwa ploidi tersebut

tingkat nontransformed dan transgenik tanaman T0 adalah

Deteksi diploid.The PCR menunjukkan bahwa T0, T1 dan

Tanaman T2 memiliki gen ZYMV-CP (Gambar 1 A), dan

tidak ada tanaman kontrol nontransformed terkandung

gen. Dalam T1 dan T2 populasi, 71% (57/80) dan

83% (50/60) dari tanaman (masing-masing) mengandung

Gen ZYMV-CP menurut PCR amplifikasi.

Sejak XbaI hanya memotong di satu sisi ZYMV-CP

gen, sisi XbaI lainnya harus datang dari

genom tanaman. Analisis selatan blot menunjukkan bahwa

tanaman kontrol nontransformed tidak memiliki orang

ZYMV-CP gen, dan tanaman yang dipilih oleh PCR

mengandung gen ZYMV-CP sebagai beberapa salinan

T-DNA terintegrasi dalam genom tanaman (Gambar 1 B).

Dalam kedua percobaan, bintik-bintik pada kotiledon, dan lecet

atau bintik-bintik pada helai daun yang absen di nontransgenik

kontrol dan T1 transgenik atau T2 tanaman. Parental

kontrol, dan T1 dan T2 transgenik tanaman yang diploid,

sistem reproduksi mereka berumah satu, dan

kebiasaan pertumbuhan yang pelari. Mengenai sifat-sifat ini,

perbedaan antara genotipe tidak signifikan.

Pada percobaan pertama, tidak ada yang signifikan

Perbedaan antara T1 transgenik dan tanaman kontrol

mengenai batang, cabang, daun, dan bunga segar dan

parameter berat kering (Tabel 1). hipokotil bibit

lebar panjang dan helai daun generasi T1 transgenik

masing-masing adalah 22,04 dan 7,77% lebih tinggi dibandingkan dengan

kontrol nontransgenik (Tabel 2). Namun, bibit

lebar kotiledon dan panjang T1 transgenik yang

16,95 dan 16,48% lebih rendah dibandingkan kontrol orangtua

(Tabel 2).

Dalam percobaan kedua, grooving buah atau marmer,

patch di hilus yang absen, dan warna kulit biji tanah

cokelat dalam kontrol nontransgenik atau T2 transgenik

benih. Perbedaan antara T2 transgenik dan

kontrol nontransgenik mengenai batang, cabang, daun,

bunga, dan buah parameter (Tabel 3 dan 4), dan

biji, berat segar dan kering, hasil total, dan kotiledon

parameter (Tabel 5) tidak signifikan. Namun,

Panjang hipokotil transgenik T2 bibit adalah 8,30%

lebih tinggi dibandingkan dengan kontrol nontransgenik. Selain itu, Gambar 1. Analisis molekuler: A, ethidium bromide patri

gel agarosa menunjukkan amplifikasi dengan PCR dari

Gen ZYMV-CP hadir dalam tanaman transgenik. sampel dari

tanaman transgenik (jalur 1, 4, 6 dan 8-11), tanaman pelarian

(jalur 2, 3, 5 dan 7), kontrol positif (jalur 12, transgenik

semangka), kontrol positif dari pCIB10 plasmid (jalur P),

dan spidol ukuran molekul (jalur M) ditandai. molekuler

spidol berat (bp) yang tertera pada sisi gel. B,

Analisis Southern blot T2 keturunan. PCR fragmen

Gen ZYMV-CP, diperkuat dari pCIB10 tersebut, digunakan sebagai

probe. Total DNA genomik (10 mg), dari transformasi

tanaman (jalur 1) dan tanaman kontrol nontransformed (jalur 2),

dicerna dengan XbaI. daging ketegasan, ukuran putik bekas luka, dan daging warna *

Nilai buah T2 rekayasa genetika yang masing-masing

7.19, 11.69 dan 8.16% lebih besar dibandingkan dengan kontrol

buah. Buah ketebalan kulit dan panjang batang dari

Tabel 1. Nilai batang, cabang, daun, bunga, dan segar

dan parameter berat kering nontransgenik 'Crimson

Manis '(CS) semangka dan T1 keturunan dengan transgen

ZYMV-CP (T1) (1)

(1)Sarana setiap parameter yang diikuti oleh huruf yang sama, di baris, tidak di-

ffer dengan uji LSD, pada probabilitas 5%.

(2)Menurut Uni Internasional

Perlindungan Varietas Baru Tanaman (2004): 3, lemah; 5, intermediate

diate; dan 7, kuat.

(3)Menurut TC Resmi Gazete (1998): 3, akut;

5, bulat; dan 7, tumpul.

Tabel 2. Nilai bibit dan pisau parameter

nontransgenik 'Crimson Manis' (CS) semangka dan T1

keturunan dengan transgen ZYMV-CP (T1) (1)

T2 individu transgenik adalah 7.96 dan 10.88% lebih rendah

dibandingkan dengan individu kontrol. Stripe warna nilai *

buah kontrol nontransgenik lebih tinggi dari itu

T2 transgenik.

Mengenai perbedaan antara air-transgenik

baris melon dengan nontransgenik kultivar orangtua CS,

hanya empat dari 36 karakteristik diselidiki dalam pertama

Percobaan yang signifikan. Dalam percobaan kedua,

hanya tujuh dari 80 yang signifikan. perbedaan

antara berubah dan nontransformed genotipe,

berkaitan dengan lebar dan panjang kotiledon atau helai daun

lebar, tidak jelas, karena perbedaan tersebut

signifikan dalam percobaan pertama (Tabel 2), tetapi tidak di

kedua (Tabel 3 dan 5). Hal ini mungkin disebabkan

perbedaan kondisi lingkungan antara

musim tanam (musim dingin-musim semi dan musim panas-musim gugur),

Tabel 3. Nilai dari batang, parameter cabang, daun, dan bunga

dari nontransgenik 'Crimson Manis' (CS) semangka dan T2

keturunan dengan transgen ZYMV-CP (T2) (1).

(1)Berarti diikuti oleh huruf yang sama, di baris, tidak berbeda dengan uji LSD,

pada 5 probabilitas%.

(2)Menurut Uni Internasional untuk perlindungan

tion Varietas Baru Tanaman (2004): 3, lemah; 5, menengah; dan 7,

kuat.

(3)Menurut TC Resmi Gazete (1998): 3, akut; 5, bulat; dan

7, tumpul.

ketika percobaan dilakukan. Sudah

melaporkan bahwa tiga teknologi profil digunakan untuk

membandingkan dua baris jagung transgenik dengan masing-masing

garis kontrol, dan pengaruh kondisi pertumbuhan sebagai

efek lingkungan tambahan juga dievaluasi

dengan membandingkan garis Bt-jagung dengan garis kontrol,

di tiga lokasi yang berbeda dalam satu musim tanam

(Barros et al., 2010). Para penulis menyimpulkan

bahwa faktor lingkungan menyebabkan lebih variasi

profil transkrip / protein / metabolit berbeda dari

genotipe.

Dalam kedua percobaan, dalam karya ini, hipokotil

panjang bibit semangka transgenik adalah

signifikan lebih tinggi dibandingkan dengan nontransgenik

yang tua (Tabel 2 dan 5). Dalam percobaan kedua,

perbedaan antara transgenik dan nontransgenik

Tabel 4. Nilai parameter buah nontransgenik

'Crimson Manis' (CS) semangka dan T2 keturunan dengan

transgen ZYMV-CP (T2) (1)

(1)Sarana setiap parameter, diikuti dengan huruf yang sama di baris, tidak di-

ffer dengan uji LSD, pada probabilitas 5%.

(2)Menurut kerjasama Eropa

tive Program untuk Sumber Daya Genetik Tanaman (2008): 1, diratakan; 2, bulat;

3, luas elips; 4, elips; 5, pyriform; dan 6, lonjong.

(3)menurut TC Resmi Gazete (1998) dan Uni Internasional untuk Perlindungan

Varietas Baru Tanaman (2004): 1, flat; 2, datar sampai bulat; 3, bulat; 4,

dibulatkan menjadi kerucut; dan 5, kerucut.

individu yang signifikan, tentang buah kulit

ketebalan, daging ketegasan, panjang buah batang, ukuran

dari putik bekas luka, dan daging buah atau warna stripe a * nilai

(Tabel 5). Variasi ukuran putik bekas luka di

baris transgenik tidak diinginkan. Namun, variasi

dalam beberapa karakteristik genotipe transgenik

yang menguntungkan, karena mereka terkait dengan buah dengan

ketebalan kulit kurang, lebih daging ketegasan dan lebih tinggi

daging warna nilai *. Perbedaan antara

baris semangka transgenik dan yang nontransformed

berasal kultivar mungkin akibat efek pleiotropic

transgen, seperti dilansir Montero et al. (2011).

Hasil kami konsisten dengan publikasi sebelumnya

tersedia dalam literatur yang menunjukkan kesamaan yang tinggi

genotipe transgenik nontransgenik mereka

rekan-rekan. Jiao et al. (2010) telah mengungkapkan bahwa

Komposisi pepaya transgenik menunjukkan kesamaan besar

dengan kultivar nontransgenik. Venneria et al. (2008)

menunjukkan bahwa nilai-nilai gizi dari genotipe transgenik

mirip dengan kultivar kontrol nontransgenik dari

gandum, jagung, dan tomat. Tidak ada perbedaan yang signifikan

dilaporkan antara transgenik (dengan ZYMV-CP)

dan mengendalikan genotipe melon, berkaitan dengan L-ascorbic

Tabel 5. Nilai untuk parameter benih, segar dan berat kering,

total hasil, bibit dan buah nontransgenik 'Crimson

Manis '(CS) semangka dan T2 keturunan dengan transgen

ZYMV-CP (T2) (1)

(1) Sarana setiap parameter, diikuti dengan huruf yang sama di baris, tidak

berbeda dengan uji LSD, pada probabilitas 5%.

asam, asam malat, asam sitrat, sukrosa, glukosa, fruktosa

(Yalcin Mendi-et al., 2010). Namun, penulis ini

telah menunjukkan bahwa buah keasaman total secara signifikan

berbeda dalam genotipe melon transgenik dan kontrol.

Menurut Baudo et al. (2006) dan Shewry et al.

(2007), modifikasi genetik memiliki efek yang lebih rendah

pada transcriptome dari biji-bijian gandum dibandingkan dengan

pemuliaan raditional. Coll et al. (2009) menunjukkan bahwa

ia ekspresi gen profil jagung (MON810) dan

sebanding varietas jagung non-genetik dimodifikasi

berbudaya di lapangan lebih mirip daripada

garis konvensional.

Beberapa laporan dalam literatur menunjukkan bahwa ada

kesamaan besar antara genotipe transgenik

ransformed dengan satu atau dua transgen dimaksudkan,

dan tetua nontransgenik (Baudo et al., 2006;

Shewry et al., 2007; Venneria et al., 2008; Coll et al.,

2009; Barros et al., 2010). Namun, ketika lebih dari

wo gen dimaksudkan atau faktor gen transkripsi

ditransfer ke genom tanaman, kesamaan

ransformed dan nontransformed rekan mungkin tidak

begitu besar, apa yang menuntut studi yang cermat, seperti yang dilaporkan

oleh Batista et al. (2008). Berdasarkan hasil yang dilaporkan

sini, tidak mungkin untuk menyimpulkan bahwa semua transgenik

dan tanaman nontransgenik sangat mirip; Namun, itu adalah

mungkin untuk menghasilkan genotipe transgenik yang memiliki

kesamaan besar dengan berasal mereka konvensional

kultivar.

kesimpulan

1. Mentransfer Zucchini Yellow Mosaic Virus mantel

protein (ZYMV-CP) gen untuk semangka kultivar

Crimson Manis (CS) melalui Agrobacterium tumefaciens

mempengaruhi hanya beberapa ciri-ciri dari 80 yang diselidiki.

2. Perubahan ketebalan kulit, daging ketegasan, dan

Warna daging nilai * yang menguntungkan, sementara ukuran putik

bekas luka yang tidak diinginkan.

3. Garis semangka transgenik yang mengandung

ZYMV-CP gen dan kultivar orangtua yang CS sangat

serupa.

Ucapan Terima Kasih

Organisasi Perencanaan Negara (Turki), yang

Ilmiah dan Teknologi Research Council of

Turki, dan Mustafa Kemal University (Antakya,

Turki), untuk pendanaan; Prof Rebecca Grumet dan

Michigan State University, untuk murah hati menyediakan

.

A. tumefaciens EHA 105 dengan pCIB10, mengandung

NPTII dan ZYMV-CP gen, dan untuk berbagi

laboratorium selama percobaan transformasi; dan

Dr. Metin Tuna, untuk penentuan tingkat ploidi

kontrol nontransgenik dan semangka transgenik

tanaman dengan sitometri.

Tabel 3. Nilai dari batang, parameter cabang, daun, dan bunga dari nontransgenik 'Crimson Manis' (CS) semangka dan T2 keturunan dengan transgen ZYMV-CP (T2) (1). (1)Berarti diikuti oleh huruf yang sama, di baris, tidak berbeda dengan uji LSD, pada 5 probabilitas%. (2)Menurut Uni Internasional untuk perlindungan tion Varietas Baru Tanaman (2004): 3, lemah; 5, menengah; dan 7, kuat. (3)Menurut TC Resmi Gazete (1998): 3, akut; 5, bulat; dan 7, tumpul.

Tabel 4. Nilai parameter buah nontransgenik 'Crimson Manis' (CS) semangka dan T2 keturunan dengan transgen ZYMV-CP (T2) (1)

(1)Sarana setiap parameter, diikuti dengan huruf yang sama di baris, tidak differ dengan uji LSD, pada probabilitas 5%. (2)Menurut kerjasama Eropa tive Program untuk Sumber Daya Genetik Tanaman (2008): 1, diratakan; 2, bulat; 3, luas elips; 4, elips; 5, pyriform; dan 6, lonjong. (3)menurut

TC Resmi Gazete (1998) dan Uni Internasional untuk Perlindungan Varietas Baru Tanaman (2004): 1, flat; 2, datar sampai bulat; 3, bulat; 4, dibulatkan menjadi kerucut; dan 5, kerucut.

Tabel 5. Nilai untuk parameter benih, segar dan berat kering, total hasil, bibit dan buah nontransgenik 'Crimson Manis '(CS) semangka dan T2 keturunan dengan transgen ZYMV-CP (T2) (1)

(2) Sarana setiap parameter, diikuti dengan huruf yang sama di baris, tidak berbeda dengan uji LSD, pada probabilitas 5%.

Tabel 1. Nilai batang, cabang, daun, bunga, dan segar dan parameter berat kering nontransgenik 'Crimson Manis '(CS) semangka dan T1 keturunan dengan transgen ZYMV-CP (T1) (1)

(1)Sarana setiap parameter yang diikuti oleh huruf yang sama, di baris, tidak differ dengan uji LSD, pada probabilitas 5%.(2)Menurut Uni Internasional Perlindungan Varietas Baru Tanaman (2004): 3, lemah; 5, intermediate diate; dan 7, kuat. (3)Menurut TC Resmi Gazete (1998): 3, akut; 5, bulat; dan 7, tumpul.

Tabel 2. Nilai bibit dan pisau parametern nontransgenik 'Crimson Manis' (CS) semangka da T1 keturunan dengan transgen ZYMV-CP (T1) (1)

Gambar 1. Analisis molekuler: A, ethidium bromide patri gel agarosa menunjukkan amplifikasi dengan PCR dari Gen ZYMV-CP yang terdapat dalam tanaman transgenik. Sampel dari tanaman transgenik (jalur 1, 4, 6 dan 8-11), tanaman pelarian (jalur 2, 3, 5 dan 7), kontrol positif (jalur 12, semangka transgenik), kontrol positif dari plasmid pCIB10 (jalur P), dan penanda spidol ukuran molekul (jalur M). Molekuler spidol berat (bp) yang tertera pada sisi gel. B, Analisis blot Southern keturunan T2. PCR dari fragmen gen ZYMV-CP, diperkuat dari pCIB10 tersebut, digunakan sebagai probe. Total DNA genomik (10 mg), dari transformasi tanaman (jalur 1) dan tanaman kontrol nontransformed (jalur 2), dicerna dengan XbaI.