DiagnosaKloning dari genom HCV dan analisis urutan mengembangkan berbagai antigen dan peptida sintetik yang telah berhasil digunakan di immunoassays untuk mendeteksi antibodi terhadap HCV. generasi ketiga enzim terkait immunosorbent assay (ELISA) dan tes Immunoblot rekombinan (RIBA) telah meningkatkan sensitivitas dan spesifisitas dibandingkan dengan tes pertama dan kedua generasi. Teknik untuk deteksi HCV-RNA dan kuantifikasi, seperti DNA bercabang (bDNA) dan reaksi rantai polymerase (PCR), melebihi standard dan sensitivitasnya telah meningkat. Selanjutnya, genotip virus merupakan klinis yang pentingsebagai manajemen terapi pasien. Virus Hepatitis C tes antibody Deteksi antibodi terhadap HCV biasanya adalah cara yang paling praktis skrining dan diagnosis hepatitis C. ELISA generasi ketiga memiliki sensitivitas dan spesifitas tinggi. Namun, bahkan tes yang lebih baru memiliki kekurangan. Pada infeksi HCV akut, anti-HCV tidak terdeteksi pada semua pasien pada saat puncak tingkat ALT serum dan anti-HCV dapat menjadi terdeteksi beberapa minggu kemudian. Selanjutnya, pasien dengan defisiensi imun, seperti penerima cangkok atau pasien koinfeksi dengan HIV, mungkin memiliki infeksi HCV kronis rendah atau bahkan tidak terdeteksi anti-HCV. Deteksi serum HCV RNA Deteksi HCV RNA dalam serum dengan reverse transcriptase PCR saat ini dianggap gold standard untuk diagnosis infeksi HCV dan menilai respon terapi antiviral. PCR memiliki sensitivitas yang tinggi (di urutan 100 eksemplar per ml) dan keandalan yang baik. Sebuah kualitas multicenter Perancis control study dilakukan pada sembilan laboratorium rutin antara tahun 1991 dan 1993 menunjukkan peningkatan secara keseluruhan sensitivitas dan spesifisitas yang kompatibel dengan klinis penggunaan (47). Deteksi serum HCV RNA dengan PCR adalah yang terbaik Tes untuk diagnosis awal infeksi HCV akut karena positif sesegera 1 minggu setelah paparan (mungkin ini memungkinkan diagnosis dini setelah luka jarum) dan itu positif pada fase akut hepatitis ketika anti-HCV mungkin masih terdeteksi (43). PCR ini diperlukan untuk membedakan pasien dengan infeksi HCV kronis dengan yang normal tingkat ALT serum dari orang-orang dengan masa lalu diselesaikan hepatitis C yang tetap positif anti-HCV selama beberapa dekade. Selain itu, PCR harus dianggap wajib untuk konfirmasi infeksi HCV pada pasien dengan peningkatan tingkat ALT serum sebelum menunjukkan biopsi hati dan sebelum mendiskusikan terapi antivirus untuk mencegah misdiagnosis dengan penyebab lain dari penyakit hati kronis (46).Selama terapi antivirus, hilangnya serum terdeteksi HCV RNA adalah saat standar emas untuk definisi akhir pengobatan dan yang berkelanjutan Tanggapan sejak sebanyak lo-20% pasien dapat menunjukkan perbedaan antara respon biokimia (tingkat ALT serum normal) dan respon virologi. Secara khusus, beberapa pasien, untuk alasan yang tidak diketahui, mungkin memiliki tanggapan virologi selama terapi meskipun kegigihan kadar ALT serum. Hanya SVR, didefinisikan oleh tidak terdeteksi serum HCV RNA, 6 bulan setelah penghentian terapi, telah jelas terbukti berhubungan dengan jangka panjang virologi, respon biokimia dan ditandai dan progresif perbaikan histologist (48,49). Pada pasien dengan respon jangka panjang, HCV RNA belum ditemukan terdeteksi dalam hati dari 27 pasien yang diteliti, l-5 tahun setelah terapi interferon (49). Namun, lebih banyak studi dengan tindak lanjut lagi sangat penting untuk mengkonfirmasi pemberantasan infeksi HCV.Dalam kebanyakan studi, tapi tidak semua, hasil deteksi HCV RNA dalam hati yang konsisten dengan Hasil dalam serum. Namun, studi tersebut harus dilakukan lagi dengan metode PCR lebih sensitive sekarang tersedia untuk menyingkirkan kemungkinan sangat rendah replikasi bertahan di hati tanpa adanya terdeteksi genom virus dalam serum, sebagaimana telah ditunjukkan pada hepatitis B kronis bahkan setelah HBsAg (50). Sayangnya, tidak ada teknik standar yang tersedia sejauh ini untuk hibridisasi in situ dan di PCR situ di jaringan hati dan studi lebih lanjut diperlukan untuk membangun teknik tersebut. Deteksi HCV antigen dalam hati dengan Immunochemistry juga merupakan pendekatan yang menarik namun hanya beberapa studi telah menunjukkan Hasil meyakinkan (51,52) dan ada kebutuhan untuk diandalkan dan teknik standar.Quantification HCV RNAPenilaian kuantitatif tingkat serum HCV RNA dengan amplifikasi sinyal atau kuantitatif PCR adalah sangat berguna alat dalam manajemen klinis pasien sebelum terapi dan dalam penilaian antivirus. tes baru sedang dalam evaluasi menggabungkan kuantifikasi handal dan sensitivitas tinggi (dalam kisaran 100 eksemplar per ml). Selain itu, studi terbaru menunjukkan bahwa standardisasi antara alat tes yang berbeda telah sangat ditingkatkan. Dengan demikian, hasil yang diperoleh berbeda dengan tes komersial sekarang juga berkorelasi. Kuantifikasi dengan tes generasi pertama itu tergantung pada genotipe HCV, tes baru memberikan lebih kuantifikasi handal independen dari genotipe. Karena itu sudah mungkin untuk mengkonfirmasi kadar serum HCV RNA sebagai prediktor SVR terhadap terapi interferon atau terapi kombinasi interferon-ribavirin, secara independen dari genotipe (53-55). Kuantifikasi kadar serum HCV RNA karena sepertinya bermanfaat sebelum terapi untuk menilai kemungkinan respon. Tes kuantitatif telah memungkinkan untuk memahami kinetika virus awal di bawah interferon administrasi dan untuk menguraikan model matematika untuk Omset HCV (12,13). Selain itu, kerusakan dini serum HCV RNA selama jam pertama atau hari terapi interferon adalah prediktor yang baik dari respon. Penelitian lebih lanjut harus menentukan relevansi klinis dan waktu yang optimal untuk serum HCV RNA kuantifikasi setelah memulai terapi dan aplikasi potensinya untuk menjahit jadwal pengobatan.

genotipe HCVPerbandingan genom isolat HCV yang berbeda menunjukkan variasi penting yang menyebabkan klasifikasi HCV ke dalam jenis dan subtipe (56). Untuk nomenklatur, sesuai urutan homologi, HCV dikelompokkan menjadi 6 jenis (1 sampai 6) masing-masing termasuk subtype (a, b, c ...). Genotipe HCV didistribusikan secara berbeda tergantung pada geografi dan etiologi (57). HCV genotipe tidak berguna untuk penilaian dari prognosis tetapi berguna untuk manajemen terapi, karena merupakan prediktor SVR. Selain itu, durasi optimal interferon-ribavirin Terapi tergantung pada genotipe. Kebanyakan metode untuk genotip HCV didasarkan pada amplifikasi fragmen virus subgenomic dengan PCR. Urutan motif khusus untuk setiap jenis HCV dapat dibedakan menggunakan jenis primer spesifik atau probe atau panjang fragmen restriksi polimorfisme (RFLP). Jenis HCV juga dapat ditentukan dengan serologi metode (serotipe), yang lebih sederhana untuk digunakan, tetapi adalah% sedikit kurang sensitif dan spesifik (5-10 sampel dapat genotipe tetapi tidak serotyped) (58). Selanjutnya, subtyping masih tidak mungkin dengan ada tes serotipe. Namun, untuk manajemen klinis, subtyping (khususnya antara subtype la dan lb) tidak diperlukan karena respon terhadap Terapi tampaknya tidak akan berbeda di kedua.QuasispeciesAda kedua metode langsung dan tidak langsung mendeteksi dan quantifiying quasispecies dalam suatu individu pasien. Standar emas sekuensing setelah kloning. Namun, metode ini adalah padat karya dan sederhana dan metode tidak langsung telah dikembangkan. Yang paling digunakan adalah untai tunggal konformasi polimorfisme (SSCP) (59). Dalam analisis SSCP, produk PCR dikenakan analisis elektroforesis bawah denaturasi kondisi, sehingga DNA beruntai tunggal diperoleh. Polimorfisme nukleotida tunggal menghasilkan berbagai mobilitas fragmen untai tunggal yang paling varian HCV lazim, yang mencerminkan keragaman quasispecies. Metode ini memungkinkan penyelidikan relative seri besar pasien. Hampir semua studi menunjukkan korelasi antara quasispesies heterogenitas yang tinggi dan penyakit hati yang lebih parah dan respon yang buruk terhadap terapi interferon (60-62). Dari catatan adalah heterogenitas rendah dari quasispecies kami temukan pada pasien dengan hepatitis C kronis dengan tingkat ALT yang normal dibandingkan dengan pasien dengan peningkatan kadar ALT serum, konsisten dengan tekanan kekebalan yang lebih rendah di bekas (63). Namun, penelitian lebih lanjut harus menjelaskan signifikansi dari heterogenitas quasispecies: apakah itu konsekuensi atau salah satu mekanisme yang terlibat dalam patogenesis penyakit hati? Selanjutnya, apa relevansi klinis mengukur quasispecies heterogenitas untuk prognosis dan keputusan terapi? Studi tentang dinamika quasispecies di bawah terapi dengan karakterisasi populasi virus dipilih bisa sangat penting untuk memahami mekanisme resistensi virus. Selain itu, baru-baru ini studi telah menyarankan bahwa quasispecies beredar dalam plasma yang berbeda dari yang ditemukan di hati atau limfosit (64). Ini kompartementalisasi populasi virus mungkin memiliki implikasi penting dalam kegigihan infeksi HCV dan resistensi terhadap terapi.

Hati histologiBiopsi hati tetap merupakan cara terbaik untuk menilai keparahan hepatitis C kronis, untuk menentukan prognosis dan untuk mengevaluasi indikasi terapi. Memang, risiko mengembangkan sirosis tergantung di atas panggung (tingkat fibrosis) dan kelas (tingkat peradangan dan nekrosis) diamati pada hati awal biopsi. Klinis gejala dan penanda biokimia (terutama serum Tingkat ALT) yang kurang berkorelasi dengan lesi hati (65). Penanda serum fibrosis, seperti prokolagen- III, asam hialuronat atau laminin tidak spesifik, mereka tergantung pada tingkat peradangan dan karena itu tidak dapat diandalkan. Cara noninvasif lebih akurat untuk menilai keparahan penyakit hati (khususnya pengembangan fibrosis) yang diperlukan. Pada pasien dengan hepatitis C kronis dan normal tingkat ALT serum, histologi hati pada sekitar 80% kasus menunjukkan hati, perubahan non-spesifik normal atau hepatitis ringan (2). Pada pasien dengan hepatitis kronis dan peningkatan tingkat ALT serum, histologi hati menunjukkan moderat atau berat hepatitis C kronis pada sekitar 50% kasus (2). Oleh karena itu, biopsi hati dianjurkan dalam pasien yang terakhir tapi tidak di bekas (46). Karena sistem penilaian yang diusulkan pada tahun 1981 oleh Knodel et al. (66) sistem penilaian lainnya telah diusulkan untuk meningkatkan akurasi atau kemampuan untuk memproduksi histologist penilaian (67-69) Sistem penilaian baru-baru ini diusulkan oleh kelompok METAVIR memberikan intraand baik konsistensi interobserver yang mungkin berguna bagi studi kohort atau penilaian histologis pada terapi uji coba (69). Namun, nilai prediksi biopsi hati untuk prognosis tidak sempurna dan sebagian kecil pasien dengan hepatitis ringan kronis pada akhirnya dapat berkembang penyakit hati yang lebih progresif. Memang. karena factor mempengaruhi perkembangan penyakit hati, yang merupakan mungkin tidak linier, tidak diketahui, biopsi hati kedua harus diusulkan 3-5 tahun kemudian untuk menilai kembali evolusi dan kembali membahas indikasi untuk terapi (46).PengobatanTujuan terapi pada pasien dengan hepatitis kronis C adalah untuk menghambat replikasi virus untuk mengurangi aktivitas dari penyakit hati, yang diyakini terkait dengan penurunan risiko terjadinya sirosis dan karsinoma hepatoseluler. Pengaruh interferon alfa Pada hepatitis C kronis, efek anti-virus interferon alfa baik menunjukkan, dengan penurunan cepat serum HCV RNA dalam minggu-minggu pertama terapi, dengan penurunan paralel serum ALT (70). Baru studi tentang kinetika virus di bawah interferon alfa terapi menunjukkan penurunan cepat dalam viral load dalam hari pertama, diikuti dengan tahap kedua penurunan virus yang jauh lambat (Gambar 1) (12,13). Pada tahap pertama, yang karena dengan efek antivirus dari interferon, kemiringan tergantung pada dosis interferon dikelola. Di tahap kedua, yang terkait dengan pembersihan sel yang terinfeksi, kemiringan kurang tergantung dosis dan mungkin dipengaruhi oleh kualitas dari respon kekebalan. Sementara penurunan tahap pertama terlihat di hampir semua pasien yang dirawat, penurunan tahap kedua adalah tidak diamati dalam non penanggap. Responden berkelanjutan dengan ALT terus-menerus yang normal dan tidak terdeteksi serum HCV RNA 6 bulan setelah pengobatan biasanya mempertahankan biokimia dan virology respon (48,49). Dalam sebuah penelitian terhadap 80 pasien dengan respon yang berkelanjutan, dengan tindak lanjut dari 1-7,6 tahun (Artinya? SD, 4.022.0 thn) setelah pengobatan interferon alfa, 93% pasien memiliki ALT terus-menerus yang normal dan serum HCV RNA tetap tidak terdeteksi di 96% (49). Sebuah perbandingan temuan histologis hati sebelum dan l-6.2 tahun setelah pengobatan interferon alfa menunjukkan perbaikan yang jelas pada 94% pasien, dalam 62% dari pasien, biopsi terakhir dilakukan menunjukkan normal atau Temuan histologis mendekati normal. Ditindak lanjuti dari responden berkelanjutan tidak menunjukkan hal apapun kambuh (tidak dipublikasikan). SVR dikaitkan dengan peningkatan kualitas hidup (71). Dengan demikian, terapi interferon tampaknya bermanfaat dalam responden berkelanjutan. Namun, pemberantasan Infeksi HCV tidak terbukti dan manfaat pada kelangsungan hidup kemungkinan namun belum jelas ditunjukkan. Dalam kambuh atau responden non, jangka pendek parsial perbaikan biokimia atau histologi dapat diamati dalam proporsi pasien. Selain itu, jangka pendek efek anti-fibrogenesis alpha interferon telah ditunjukkan (72,73). Namun, manfaat jangka panjang terapi pada pasien ini belum terbukti.Jadwal TerapiSejak studi percontohan pertama dengan Hoofnagle et al. pada tahun 1986 (3), percobaan terkontrol banyak mengkonfirmasi kemanjuran interferon alfa terapi pada sebagian kecil pasien dengan hepatitis C kronis dan mendirikan jadwal 3 juta unit (MU), tiga kali seminggu, selama 12 bulan, sebagai standar (74). Dosis tinggi interferon, mulai dari 5 sampai 10 MU MU atau durasi yang lebih lama selama 18-24 bulan tidak meningkat tajam efikasi dan terkait dengan tolerabilitas miskin (75,76).jadwal standard memberikan kira-kira SVR 20%, respon end-of-perawatan 15% diikuti oleh kambuh dan tingkat tanggapan non 65% (70,75,76). Perbedaan jenis interferon alfa (rekombinan interferon, alpha 2a atau alfa 2b, lymphoblastoid atau konsensus) memberikan tingkat tanggapan yang bertahan sebanding (77,78). Tingkat yang lebih rendah dari tanggapan virologi yang diamati pada percobaan lebih baru, dibandingkan dengan sebelumnya penelitian, terkait dengan peningkatan sensitivitas tes yang digunakan untuk mendeteksi serum HCV RNA. Dengan tes saat ini digunakan, adalah mungkin untuk mendeteksi sekitar 100 genom virus per ml. Kombinasi interferon alfa dengan ribavirin Ribavirin adalah analog nukleosida guanosin-seperti yang memiliki spektrum yang luas dari aktivitas antivirus terhadap beberapa virus. Reichard et al. pertama menunjukkan bahwa ribavirin administrasi menyebabkan penurunan yang signifikan dalam serum ALT pada pasien dengan hepatitis C kronis (79). Namun, penelitian lebih lanjut menunjukkan kecil atau tidak signifikan berpengaruh pada tingkat serum HCV RNA, menunjukkan bahwa ribavirin bertindak lebih sebagai imunomodulator daripada sebagai antivirus (80). Meskipun pengaruh signifikan ribavirin Terapi pada tingkat ALT serum, dikontrol persidangan ribavirin dikelola sendiri tidak menunjukkan dampak yang signifikan pada hati histologi (81,82). Brillanti et al. pertama menunjukkan bahwa terapi kombinasi alpha interferon dengan ribavirin dapat menginduksi berkelanjutan respon pada beberapa pasien yang telah merespon dan kemudian kambuh setelah kursus pertama interferon alfa (83). Selanjutnya, percobaan kecil menunjukkan tinggi tingkat tanggapan yang bertahan dengan kombinasi interferon alfa dan ribavirin dibandingkan dengan interferon sendirian di pasien yang belum pernah diobati (naf pasien) (84,85). Dua percobaan terkontrol besar baru-baru menegaskan bahwa terapi kombinasi lebih efektif dibandingkan interferon sendiri (54,55). Studi ini menunjukkan bahwa kombinasi terapi selama 24 atau 48 minggu memberikan berkelanjutan keseluruhan tingkat tanggapan virologi dari 33% dan 41%, masing-masing dibandingkan 6% dan 16% dengan interferon saja Manajemen hepatitis CHasil ini menyebabkan pertimbangan terapi kombinasi sebagai pengobatan acuan hepatitis C kronis, seperti yang dinyatakan di EASL Internasional Konsensus Konferensi Hepatitis C (46). Itu mekanisme yang bertanggung jawab untuk keberhasilan peningkatan interferon dalam kombinasi dengan ribavirin tidak dikenal.Pengobatan pasien dengan ALT yang normalDalam kecil, uji coba terkontrol alpha interferon dalam kelompok pasien, tingkat respon tidak berbeda dari yang dilaporkan pada pasien dengan kelainan Tingkat ALT (101). Yang penting, dalam kebanyakan studi, serum Tingkat ALT menjadi normal selama terapi pada sekitar setengah dari pasien. Temuan ini menunjukkan bahwa alpha interferon terapi biasanya tidak menguntungkan dan mungkin berbahaya pada pasien ini. Kemanjuran terapi kombinasi belum dievaluasi dalam kelompok pasien.Hepatitis C akutBeberapa studi telah menunjukkan bahwa terapi interferon diberikan kepada pasien dengan hepatitis C akut mengurangi risiko evolusi kronisitas (75.102). Satu dapat memperkirakan bahwa pengobatan mengurangi risiko kronisitas dari 85% menjadi sekitar 50%. Namun, hasil jangka panjang dari pasien yang diobati tidak diketahui dan apakah pengobatan lebih efektif pada tahap awal akut infeksi tidak jelas. Selain itu, interferon optimal jadwal (dosis dan durasi) dalam situasi tertentu tidak diketahui. Tidak ada informasi yang tersedia pada kemanjuran terapi kombinasi dalam kelompok pasien ini.Indikasi pengobatanPada pasien dengan hepatitis C akut, terapi interferon diindikasikan secara signifikan mengurangi risiko kronisitas. Pada pasien dengan hepatitis C kronis merupaakan masalah yang kompleks yang harus memperhitungkan pertimbangan berbagai variabel: umur pasien, keadaan umum kesehatan, risiko sirosis, kemungkinan respon, kondisi medis lain yang dapat menurunkan harapan hidup atau kontraindikasi penggunaan interferon atau ribavirin. Juga, penurunan kualitas hidup selama pengobatan harus diperhitungkan. Indikasi ini didasarkan pada hasil biopsi hati. Sementara rasio manfaat / risiko pengobatan positif pada pasien dengan hepatitis C kronis, belum terbukti untuk pasien dengan hepatitis C. Genotipe ringan kronis dan viral load yang berguna untuk menilai probabilitas berkelanjutan respon terhadap terapi. Namun, virology karakteristik tidak boleh digunakan sebagai alasan untuk menolak pengobatan sejak keputusan untuk mengobati terutama didasarkan pada histologi hati. Pasien naif harus ditangani dengan kombinasi Terapi (interferon pada dosis 3 MU tiga kali mingguan, ribavirin pada dosis 1000-1200 mg per hari). Lamanya pengobatan harus 12 bulan pada pasien dengan genotipe 1 dan viral load yang tinggi dan 6 bulan untuk orang lain. Beberapa penulis merekomendasikan pengobatan 12-bulan pada pasien dengan genotype 1 dan viral load rendah yang memiliki prediktor buruk respon seperti jenis kelamin laki-laki, usia tua, atau fibrosis atau sirosis. Namun, peningkatan kecil diharapkan dalam tingkat SVR harus ditimbang terhadap efek samping meningkat: kasar, frekuensi efek samping berat yang memerlukan penghentian terapi 10% dengan 6 bulan dan 20% dengan 12 bulan pengobatan.