Buku Petunjuk Detergen untuk Ekotoksikologi

22
BUKU PETUNJUK PRAKTIKUM EKOTOKSIKOLOGI Disusun Oleh : Tim Asisten Ekotoksikologi 2009 PROGRAM STUDI MANAJEMEN SUMBERDAYA PERAIRAN JURUSAN PERIKANAN FAKULTAS PERIKANAN DAN ILMU KELAUTAN UNIVERSITAS DIPONEGORO

description

Buku Petunjuk Detergen untuk Ekotoksikologi

Transcript of Buku Petunjuk Detergen untuk Ekotoksikologi

Page 1: Buku Petunjuk Detergen untuk Ekotoksikologi

BUKU PETUNJUK

PRAKTIKUM EKOTOKSIKOLOGI

Disusun Oleh :

Tim Asisten Ekotoksikologi 2009

PROGRAM STUDI MANAJEMEN SUMBERDAYA PERAIRAN

JURUSAN PERIKANAN

FAKULTAS PERIKANAN DAN ILMU KELAUTAN

UNIVERSITAS DIPONEGORO

SEMARANG

2009

BUKU PETUNJUK

Page 2: Buku Petunjuk Detergen untuk Ekotoksikologi

PRAKTIKUM EKOTOKSIKOLOGI

Dosen pengampu :

Dr. Ir. Djoko Suprapto

Dr. Ir. Haeruddin, M.Si.

Ir. Siti Rudiyanti, M.Si.

Koordinator praktikum :

Dr. Ir. Haeruddin, M.Si.

Asisten praktikum :

ERLIN SULISTYOWATI

JULANDO YUNIB P

NIA HERNU PUTRI

RAHMAT IBRAHIM

PENDAHULUAN

Latar Belakang

Page 3: Buku Petunjuk Detergen untuk Ekotoksikologi

Ekotoksikologi merupakan ilmu yang mempelajari efek dari senyawa-senyawa kimia terhadap

organisme dan pengaruhnya terhadap populasi dan ekosistemnya, baik secara langsung maupun tidak

langsung (DFG, 1983 dalam Rudolph, 1991). Lebih lanjut dijelaskan oleh Nagel (1988), Rudolph & Boje

(1986) dalam Rudolph (1991) bahwa penelitian mengenai ekotoksikologi menitikberatkan pada perubahan

struktur dan fungsi ekosistem oleh senyawa kimia lingkungan, yang mengakibatkan efek yang berbahaya bagi

organisme.

Ekotoksikologi mulai berkembang di beberapa negara maju sejak tahun 1962, dimana pada tahun

tersebut Rachel Carson (seorang peneliti USA) menerbitkan sebuah buku yang menggambarkan mengenai

dampak pencemaran bahan kimia dan penggunaan pestisida yang persisten secara besar-besaran (de Kruijf,

1988). Sampai saat ini diduga lebih dari 63.000 senyawa kimia telah digunakan secara luas di seluruh dunia

(Moriarty, 1983), dan setiap tahunnya industri-industri yang menggunakan bahan kimia dalam proses

produksinya telah menciptakan 200-1000 senyawa sintetis kimia baru.

Dengan demikian penelitian ekotoksikologi dirasa sangat penting untuk dilakukan. Penelitian

ekotoksikologi diharapkan mampu untuk menduga tingkat pencemaran di lingkungan, dampaknya terhadap

kehidupan organisme, menentukan standar kualitas lingkungan khususnya perairan, dan sebagai kontrol

terhadap bahan-bahan kimia yang menyebabkan turunnya kualitas perairan.

Ikan merupakan komoditas yang mempunyai nilai ekonomis penting bagi manusia. Disamping itu,

selama beberapa dekade terakhir ini ikan dijadikan obyek penelitian untuk mengetahui akumulasi dari residu

bahan-bahan kimia di lingkungan perairan. Ikan menjadi model standar di berbagai kawasan di dunia untuk

menentukan kualitas lingkungan dan penurunan fungsi habitatnya yang menyebabkan menurunnya stok ikan

dunia.

Ketersediaan plankton secara langsung maupun tidak langsung merupakan faktor penting bagi

kehidupan ikan dan segala macam biota yang hidup didalam air, baik air tawar, air payau maupun air laut,

karena plankton khususnya fitoplankton merupakan primary producer atau makanan penghasil yang pertama

dalam siklus mata rantai (Partini, 1999)

Tujuan praktikum

Mengetahui nilai LC50-96 jam dari bahan toksik deterjen yang dipaparkan ke ikan uji

Mengetahui nilai LC50-96 jam dari bahan toksik pestisida yang dipaparkan ke ikan uji

Mengetahui nilai IC50-96 jam dari bahan toksik pestisida dan deterjen yang dipaparkan ke plankton

TINJAUAN PUSTAKA

A. Deterjen

Deterjen dalam arti luas adalah bahan yang digunakan sebagai pembersih, termasuk sabun cuci

piring alkali dan cairan pembersih. Secara khusus, deterjen adalah bahan pembersih yang mengandung

senyawa petrokimia atau surfaktan sintetik lainnya. Deterjen juga merupakan merek dagang dari surfaktan

Page 4: Buku Petunjuk Detergen untuk Ekotoksikologi

sebagai bahan baku utamanya (Rulianto, 2001) yang tersusun dari bahan aktif ABS (Alcyl Benzene

Sulfonate). Senyawa ini termasuk senyawa sintetis keras dan sulit terurai di lingkungan.

Komposisi kimia deterjen terdiri dari tiga kelompok penyusun yaitu surfaktan, bahan pembentuk, dan

bahan tambahan lainnya. Surfaktan berfungsi sebagai bahan pembasah yang menyebabkan turunnya

tegangan muka air. Surfaktan dapat dikelompokkan menjadi dua, yaitu ionik (anionik, kationik, dan

zwitterionik/amphoteric) dan nonionik (www.wikipedia.com).

Deterjen dapat berpengaruh secara langsung maupun tidak langsung pada ikan. Pengaruh secara

langsung mengakibatkan lethal (kematian) atau sub lethal yang menghambat pertumbuhan dan reproduksi.

Bahan yang terkandung dalam deterjen dapat memacu pertumbuhan eceng gondok dan gulma air. Tanaman

yang menutup permukaan perairan akan menghambat proses masuknya sinar matahari dan oksigen,

sehingga mengganggu metabolisme ikan dan menyebabkan penurunan kualitas perairan.

B. Pestisida

Istilah pestisida merupakan terjemahan dari ”pesticide” (Inggris) yang berasal dari bahasa latin yaitu

pestis dan caedo, yang diartikan sebagai racun pembasmi hama. FAO (1986) mendefenisikan pestisida

sebagai campuran bahan kimia yang digunakan untuk mencegah, membasmi, dan mengendalikan

hewan/tumbuhan pengganggu, dengan tujuan kesejahteraan manusia. Sedangkan menurut PP RI No. 6 tahun

1995, pestisida adalah zat atau senyawa kimia, zat pengatur tubuh dan perangsang tumbuh, bahan lain, serta

mikroorganisme atau virus yang digunakan untuk perlindungan tanaman.

Dewasa ini pestisida digunakan secara kurang bijaksana sehingga membawa dampak pada

pengguna, hama sasaran, maupun lingkungan yang sangat berbahaya. Menurut Wudianto (1997), dampak

buruk penggunaan pestisida yaitu :

1. Keracunan bagi pengguna secara cepat (akut) maupun lambat (kronis)

2. Meracuni organisme inang (induk)

3. Hama menjadi resisten

4. Terjadi resurjensi, peningkatan populasi generasi berikutnya

5. Munculnya hama sekunder

6. Merusak organisme yang bermanfaat

7. Mencemari lingkungan baik tanah, air, maupun udara

Pestisida yang digunakan adalah pestisida berbahan aktif sihalotrin – lamda. (Lambda-cyhalotrin; λ-

cyhalotrin), merupakan insektisida non-sitemik dan bekerja sebagai racun kontak serta racun lambung yang

kuat. Insektisida ini memiliki repellent effect dan knock down effect yang kuat, residu yang panjang dan

digunakan di bidang perlindungan tanaman untuk mengendalikan serangga dari ordo Lipidotera dan

Coleoptera, seperti aphids dan thrips. Lambda-sihalotrin memiliki LD50 (tikus) sebear 79 mg/kg; LD50 dermal

(tikus) 632-696 mg/kg menimbulkan iritasai ringan pada mata, tetapi tidak pada kulit; LC50 inhalasi (4 jam) 0.06

mg/lt udara; NOEL (1 tahun, anjing) 0,5 mg/kg; dan ADI 0,005 mg/lt bb. Sihalotrin-lambda bersifat toksik untuk

arthopoda non-target, tetapi umumnya caepat pulih kembali karena degradasinya yang cepat

Page 5: Buku Petunjuk Detergen untuk Ekotoksikologi

C. Bioassay test

Bioassay adalah metode uji menggunakan organisme dengan tujuan untuk mengetahui daya racun

atau efek yang ditimbulkan dari faktor-faktor fisika dan kimia lingkungan. Bioassay test biasanya digunakan

untuk studi pencemaran perairan dan penetapan konsentrasi aman dari berbagai residu yang masuk ke

perairan.

Prinsip bioassay test meliputi pemaparan ikan oleh bahan toksik selama beberapa waktu pada skala

laboratorium dan mengamati mortalitas dan gejala-gejala lain yang timbul selama 96 jam. Untuk menentukan

nilai TLm (Tolerance Limit median), dihitung berdasarkan jumlah ikan uji yang digunakan dan

kelulushidupannya (survival rate) pada konsentrasi bahan toksik yang berbeda.

D. Analisis probit

Pengukuran toksisitas (daya racun) dari suatu jenis bahan pencemar dapat dilakukan dengan

menetapkan nilai LC50 dari bahan pencemar tersebut terhadap hewan uji dengan menggunakan analisa probit.

Analisa probit adalah suatu metode pengujian yang umum digunakan untuk menilai toksisitas dari suatu

bahan pencemar yang diukur dari lethal concentration. Lethal concentration dapat diartikan sebagai berapa

miligram bahan pencemar untuk setiap kilogram hewan uji yang dapat mengakibatkan kematian sebanyak

50% dari populasinya. Analisa probit termasuk kedalam uji statistik parametrik yang menghendaki data

tersebar normal.

E. Kultur Alga

Pengujian ini digunakan untuk mengukur toksisitas kronik dari bahan-bahan uji (contoh, bahan2 kimia,

air sungai, air limbah) terhadap sel tunggal selama 96-h, dengan waktu yang tetap. Oleh karena pertumbuhan

dari sel-sel fitoplankton pada setiap individu sangat cepat, suatu pengujian 96-h dianggap sebagai suatu

ukuran dari toksisitas. Penggunaan sejenis rantai harus dihindarkan karena penjumlahan sel lebih sulit.

Pengujian ini sudah dilaksanakan dengan baik pada sel Dunaliaella tertiolecta dan Tetraselmis sp.

rangsangan dan pertumbuhan dari kedua spesies ini sangat terukur.

Tipe media kultur yang digunakan harus sesuai dengan spesies yang akan dibiakkan. Ada beberapa

cara yang digunakan untuk menyiapkan media pertumbuhan dari alga. Selain alamiah kultur fitoplankton

dapat ditempatkan pada media buatan dan dapat diuji.

kepadatan kultur (cells/ml) dan rata-rata pertumbuhan harus dimonitor secara teratur. perhitungan

jumlah sel dengan menggunakan haemocytometer dan mikroskop, selain itu dapat juga menggunakan

spectrophotometer untuk mengukur absorbansi. Jika menggunakan absorbansi, grafik yang dibuat

menggambarkan hubungan antara data absorbansi dan kepadatan sel (cells/ml). Grafik pertumbuhan

menggambarkan hubungan antara pertumbuhan dan waktu yang juga dibutuhkan saat kultur-kultur berada

pada fase eksponen pertumbuhan. Kultur-kultur alga yang dewasa tidak dapat digunakan dalam percobaan

Page 6: Buku Petunjuk Detergen untuk Ekotoksikologi

ini. Pemeliharaan kultur alga yang berumur kurang dari 7 hari harus di pelihara dengan metode fase eksponen

pertumbuhan.

Perhitungan nilai IC25 dan IC50 menggunakan program ICPIN. Nilai IC25 adalah nilai dari kosenterasi

yang menyebabkan 25% pertumbuhan sel tidak terjadi.

MATERI DAN METODE

Materi

1. Alat dan bahan yang diperlukan dalam aklimatisasi hewan ujiNo. Alat dan bahan Kegunaan1. Air Media hidup ikan uji2. Ikan Hewan uji3. Aerator Alat penambah O2

4. Kontainer Wadah stok hewan uji

2. Alat dan bahan yang diperlukan selama perlakuan

No. Alat dan bahan Kegunaan1. Air Media hidup ikan uji2. Ikan Hewan uji3. Deterjen Bahan toksik4. Pestisida Bahan toksik5. Toples Wadah ikan uji6. Seser Mengambil ikan mati7. Gunting Membedah tutup insang ikan8. Kamera Dokumentasi kondisi insang ikan

Metode

Metode yang digunakan adalah metode bioassay statis, yang dibagi menjadi dua uji yaitu uji

pendahuluan dan uji lanjut.

1. Uji pendahuluan, dilakukan untuk mendapatkan konsentrasi ambang batas atas (LC100-24jam) dan ambang

batas bawah (LC0-48jam). Pada wadah uji dimasukkan ikan uji dengan kepadatan 1 gr/L (atau sesuai ukuran

ikan) dengan konsentrasi bahan toksik (pestisida/deterjen) berdasarkan basis 10 deret logaritmik

(Busvine, 1971 dalam Taufik dan Koesoemadinata, 1999) yaitu 0,1 mg/L, 1 mg/L, 10 mg/L, 100 mg/L, dan

1000 mg/L.

2. Uji lanjut, dilakukan untuk mengetahui konsentrasi dimana ikan uji mati 50 % selama jangka waktu 96 jam

(LC50-96 jam). Untuk menentukan konsentrasi uji lanjut berdasarkan nilai ambang atas dan ambang bawah

adalah sebagai berikut :

Page 7: Buku Petunjuk Detergen untuk Ekotoksikologi

Dimana : N = konsentrasi ambang atas

N = konsentrasi ambang bawah

Analisa probit

Rumus yang digunakan untuk mengetahui nilai LC50-96 jam adalah sebagai berikut :

Y = a + bX

LC50-96 jam = antilog m

dimana

Keterangan :

Y = probit mortalitas ikan uji

X = logaritma konsentrasi (mg/L)

a = konstanta

b = slope

m = nilai X pada Y 50 %

Kultur Alga

Alat dan bahan

Pemeliharaan alga

Menjaga lingkungan dengan cahaya (400 ft-c), pada 27 ± 1o C

Vacuum ffiltrasi apparatus dan 45 -µm Miliporefilters

pH meter, thermometer

Page 8: Buku Petunjuk Detergen untuk Ekotoksikologi

autoclave

larutan yang mengandung nutrient untuk media pertumbuhan alga

botol Erlenmeyer (250 ml, 500ml, or 1L)

kain atau busa dan kertas timah untuk membungkus botol.

Pipet tetes (0,1 – 1 mL) dan ujungnya steril

Mikroskop, hemocytometer dan kaca penutup

Pasteur pipettes dan gelembung

Spectrophotometer

0,1 N HCL dan 0,1N NaOH

Uji toksisitas

Menjaga lingkungan dengan cahaya (400 ft-c), pada 27 ± 1o C

Vacuum ffiltrasi apparatus dan 45 -µm Miliporefilters

Alat ukur kualitas air (pH, DO, conductivity meter dan termometer)

Autoclave

1L botol Erlenmeyer

250 mL botol Erlenmeyer (18 botol/uji)

kain atau busa dan kertas timah untuk membungkus botol.

Pipet tetes (0,1 – 1 mL) dan ujungnya steril

1-L gelas ukur

1 L gelas beker

2 L gelas beker

glass stir rods

larutan yang mengandung nutrient untuk media pertumbuhan alga

Mikroskop, hemocytometer dan kaca penutup

Pasteur pipettes dan gelembung

Spectrophotometer

5% larutan Lugol

Informasi tentang kultur alga

Persiapan wadah kaca

Wadah kaca digunakan untuk kultur alga diberi label dan pisahkan dari wadah kaca laboratorium utama

untuk mengurangi penyebab dari kontaminasi. Semua wadah kaca yang digunakan untuk kultur alga

harus bersih. Seperti yang telah dijelaskan sebeumnya.

Page 9: Buku Petunjuk Detergen untuk Ekotoksikologi

Menyusun media kultur

1. Tipe media kultur yang digunakan harus sesuai dengan spesies yang akan dibiakkan. Ada beberapa cara

yang digunakan untuk menyiapkan media pertumbuhan dari alga. Selain alamiah kultur fitoplankton dapat

ditempatkan pada media buatan dan dapat diuji. Persiapan media meliputi penambahan terhadap

konsentrasi logam berat, nutrien, dan vitamin to autoclaved, dan menyaring air laut. Larutan tersebut

dapat dipersiapkan terlebih dahulu dan dijaga suhunya pada suhu yang sejuk untuk beberapa bulan.

Kultur alga secara normal diatur dalam EDTA, tetapi saat kultur alga berada dalam media uji dapat

dipersiapkan tanpa EDTA.

2. Autoclave suatu volume yang mengalami pengurangan air dalam 15 menit pada 15 psi. Setelah itu tutup

wadah dengan kertas timah dan tempatkan pada suhu yang dingin dalam satu malam. Setelah

pendinginan, siapkan media dengan penambahan larutan nutrien pada setiap medianya.

3. Saring medianya tersebut dengan menggunakan saringan yang ukurannya 0,45 µm.

4. Media kultur tidak dapat digunakan secara langsung, biasanya disimpan terlebih dahulu pada botol yang

berwarna gelap dan disimpan beberapa bulan pada pendingin. Sebelum menggunakan media

penyimpanann terlebih dahulu dileyakkan pada suhu 270 C.

Penyuntikan Media Stok Kultur

1. Untuk memulai uji toksisitas alga, isi 1 L Erlenmeyer dengan 500 ml media pertumbuhan alga dan

pindahkan sekitar 5 ml alga dari Erlenmeyer tersebut. Tempatkan kapas pada leher tabung dan beri label

pada tabung yang berisi tanggal mulai uji. Kebersihan harus dilakukan dalam percobaan ini untuk

menghindari kontaminasi.

2. Tempatkan tabung-tabung tersebut pada ruang inkubasi. Goyang-goyangkan tabung-tabung

tersebut setidaknya sekali dalam sehari dan acak letak tabung-tabung tersebut saat didalam incubator.

3. setelah beberapa hari, saat terjadi perubahan warna, tambahkan tabung dengan 800 ml alga.

Kultur alga tersebut akan mengalami kepadatan sekitar 1 x 106 sel/ml dalam 4 - 7 hari percobaan.

Spesies alga yang tidak dapat tumbuh secara cepat, sangat cocok untuk uji 96-h.

4. kepadatan kultur (cells/ml) dan rata-rata pertumbuhan harus dimonitor secara teratur. Hal ini

dapat dilakukan dengan membuat perhitungan jumlah sel dengan menggunakan haemocytometer dan

mikroskop, selain itu dapat juga menggunakan spectrophotometer untuk mengukur absorbansi. Jika

menggunakan absorbansi, grafik yang dibuat menggambarkan hubungan antara data absorbansi dan

kepadatan sel (cells/ml). Grafik pertumbuhan menggambarkan hubungan antara pertumbuhan dan waktu

yang juga dibutuhkan saat kultur-kultur berada pada fase eksponen pertumbuhan. Kultur-kultur alga yang

dewasa tidak dapat digunakan dalam percobaan ini. Pemeliharaan kultur alga yang berumur kurang dari 7

hari harus di pelihara dengan metode fase eksponen pertumbuhan.

Prosedur percobaan

Page 10: Buku Petunjuk Detergen untuk Ekotoksikologi

Persiapan media kaca

Siapkan semua media kaca untuk digunakan dalam pengujian larutan dan uji lainnya. Setelah tabung-tabung

Erlenmeyer dibersihkan (18 tabung) masukan kapas atau busa, tutup bagian atas tabung dengan kertas

timah, autoclave pada 15 psi selama 15 menit dan dinginkan.

Persiapan pengaturan air

Pertumbuhan medium alga, kecuali pengaturan air yang disispkan tanpa EDTA. Kira-kira 2,5 liter pengaturan

air dibutuhkan untuk uji toksisitas. Persiapkan media tambahan untuk pengurangan selama autoclaving.

Siapkan pengaturan air pada hari sebelum uji inisiasi.

Penentuan kepadatan sel dari kultur

1. The inoculum harus dipersiapkan dalam 2-3 jam dari tes inisiasi. Untuk menyuntikkan kultur alga

menggunakan uji vessel dengan kepadatan sel 1 x 108 cells/mL. apabila diperlukan, dapat menggunakan

spectrophotometer untuk menentukan uji tersebut. Untuk menentukan jumlah kepadatan sel digunakan

hemositometer.

2. Haemositometer adalah perhitungan dalam membagi jumlah sel menjadi lebih mudah. Homositometer

memiliki 25 sisi persegi yang besar. Dari beberapa sisi terdapat 16 sisi persegi yang lebih kecil, jumlah

semua sisi perseginya 400. Jumlah sel dalam setiap persegi mencapai 400 persegi untuk mendapatkan

kepadatan sel selanjutnya.

3. Untuk menentukan kepadatan sel (cell/mL), nilai dari alga ditadai dengan (x) didalam 400 persegi

diformulasikan dengan rumus:

cells/mL

Contoh, jika 372 alga yang telah dihitung dalam 400 persegi maka:

cells/mL

= 3,720,000 cells/mL

Page 11: Buku Petunjuk Detergen untuk Ekotoksikologi

= 3.72 x 108 cells/mL

Dalam keadaan ini dibutuhkan lebih dari kepadatan minimum yang dibutuhkan untuk menggunajkan

kultur stok alga untuk disuntikan pada uji vessel dan stok akan dikurangi menjadi 1 x 106 cellc/mL.

Catat kepadatan kulturnya dan beberapa penyesuaian yang terjadi. Perhitumgan jumlah sel

disesuaikan oleh hemositometer.

Pelaksanaan Uji Test

1. Secara normal ada 5 uji konsentrasi, ditambah kendali negatif yang diujikan. Ada tiga pengulangan dari

setiap perlakuan, dari dari 18 wadah uji. Konsentrasi uji harus dipersiapkan dengan menggunakan 0,5

faktor pelemahan (contoh, 100, 50, 25, 12.5, dan 6.25).

2. Apabila menggunakan air sungai, kira-kira dibutuhkan 1L. Ambil 1L air sample kemudian masukkan air

kedalam gelas beker dan hangatkan pada suhu 270C. ukur pH dan konduktivitasnya. Tambahkan larutan

nutrien pada sampel untuk mendapatkan konsentrasi yang sama seperti air kontrol - hal ini dilakukan

untuk memastikan bahwa beberapa alga yang tidak bisa tumbuh bukan hanya karena kekurangan nutrisi

pada konsenterasi tinggi. Pada keadaan ini terdapat jumlah nutrien, sama dengan kontrol, untuk semua

konsenterasi. Gunakan larutan nutrien tanpa EDTA.

3. Siapkan larutan uji untuk beberapa perlakuan. Siapkan beberapa perlakuan yang berhubungan dengan

analisis kimia untuk memverifikasi konsenterasi uji. Salurkan 100 ml dari larutan uji pada tiga tabung

berukuran 250 ml. ukur pH dan konduktivitas dari larutan yang sama untuk air kontrol, kecil, sedang dan

tinggi konsenterasinya.

4. salah satu dari uji konsenterasi akan membuat kepadatan sel dari stok kultur yang telah di periksa dan

disesuaikan. Setelah itu dilakukan penyuntikan beberapa tabung kultur berukuran 1 ml yang berisi 1 x 106

sel/ml . hal ini akan menghasilkan kepadatan 1 x 104 sel/ml pada beberapa tabung.catat waktu

inokulasinya dan akhiri uji ini dengan waktu yang sama .

5. susun secara acak tabung-tabung pada inkubator. Catat temperature setiap hari. Konduksi uji 27 dan

suhu ± 1 o C dibawah intensitas cahaya 400 ft-c. kocok tabun-tabung tersebut dua hari sekali daan

susunan selalu diubah posisinya sekali dalam sehari. Beberapa tabung harus ditutup dengan kapas

untuk menghindari kontaminasi pada saat pengujian.

Tahap akhir uji dan perhitungan sel

1. siapkan botol kecil (berukuran 2ml), beri label pada botol tersebut, beri perlakuan dan dilakukan

pengulangan.

2. setelah 96 h, goyang-goyangkan tabung agar bahan-bahan didalamnya tecampur, khususnya bagi sel

alga yang nengendap dibawah tabung tersebut.ampil sample sekitar 0,9 ml dari tabung-tabung tersebut

dengan menggunakan pipet, pindahkan sample tersebut kedalam botol kecil yang telah di beri label dan

beri 0,1 ml dari 5% larutan lugol.

Page 12: Buku Petunjuk Detergen untuk Ekotoksikologi

3. gunakan haemocytometer untuk menghitung sel dari sample pada botol tersebut. Catatjumlah sel setiap

400 persegi dengan beberapa pengulangan. Dua perhitungan sel harus selesai untuk bebberapa tabung.

Apabila terjadi perbedaan yang signifikan pada kedua perhitungan tersebut, lakukan perhitungan yang

ketiga. Catat baberapa perbedaanseperti ukuran sel atau penambahan organisme.

4. pengujian dapat diterima apabila kepadatan sel pada tabung kontrol mendekati 2 x 10 5 sel/ml pada akhir

pengujian.hal tersebut juga menunjukan bahwa kepadatan sel pada tabung kontrol tidak sekedar lebih

dari 20% diantara pengulangan.

Analisa data

1. lampirkan data kepadatan sel (sel/ml) pada setiap pengulangan.

2. percent inhibition (I) atau Stimulation (S) dari pertumbuhan relatif dihitung berdasarkan rumus :

I % = C – T x 100 I % = T – C x 100

C C

Dimana : C = Control response, dan T = treatment response.

3. analisa statistik untuk menentukan nilai NOEC dan LOEC dapat digunakan menggunakan program

TOXSTAT. Analisa statistik yang ditampilkan akan tergantung dengan sasaran hasil dari pelatihan,

dimana seharusnya ditetapkan pada saat sebelum memulai pengujian. NOEC adalah konsenterasi

tertinggi dari sampel yang secara statistik tidak terjadi efek yang negatif pada pertumbuhan. Kecuali jika

penetapan beberapa efek yang kurang baik dianggap sebagai larangan pertumbuhan. Perbandingan –

perbandingan statistik hendaknya pada satu sisi dan menggunakan probabilitas = 0,05. jika pertumbuhan

pada tempat yang tersimulasi dengan kontrol sama, maka tidak perlu melakukan analisa statistik. Nilai

NOEC digunakan untuk uji pada konsentrasi yang tinggi.

Untuk menggunaakan program TOXSTAT, masukan data dan tampilkan a log 10 terlebih dahulu. Gunakan

uji Shapiro-Wilk’s dan Bartlett untuk menentukan normalitas dan homogenitas suatu variabel, apabila uji

tersebut sudah dilakukan, lakukan uji ANOVA dan Dunnett t-test. Analisa non-parametrik menggunakan

uji Steel dan uji Many-One.

Perhitungan nilai IC25 dan IC50 menggunakan program ICPIN. Nilai IC25 adalah nilai dari kosenterasi

yang menyebabkan 25% pertumbuhan sel tidak terjadi.

DAFTAR PUSTAKA

de Kruijf, H.A.M. 1988. What is Ecotoxicology ?. Proceeding of the Indo-Dutch Training course on Aquatic Ecotoxicology. H.A.M. de Kruijf, D. de Zwart, P.N. Viswanathan, dan P.K. Ray (Editor). Allied Publishers Private Ltd. India.

Djojosumarto, Panut. 2008. Pestisida dan Aplikasinya. PT Agromedia Pustaka. Tangerang.

Page 13: Buku Petunjuk Detergen untuk Ekotoksikologi

Moriarty, I. 1983. Ecotoxicology: the study of pollutants in ecosystems. Academic Press. London.

Rudolph, P. 1991. Fish in ecotoxicology: precautionary action and risk assessment. Proceeding of an International Symposium. T. Braunbeck, W. Hanke, dan H. Segner (Editor). VCH. Weinheim.

Rulianto, A. dan Agus Hidayat. 2001. Sulitnya mencuci deterjen. Tempo. Jakarta.

Taufik, I. dan Koesoemadinata, S. 2000. Evaluasi Toksisitas Akut dan Kronis Pestisida terhadap Udang Galah di Laboratorium. Prosiding Seminar Hasil Penelitian Perikanan 1999/2000. Pusat Penelitian dan Pengembangan Eksplorasi Laut dan Perikanan, Jakarta.

Wudianto, R. 1997. Petunjuk Penggunaan Pestisida. Penebar Swadaya. Jakarta.

www.wikipedia.com.

Kelompok Ekotoksikologi MSP 2006

KELOMPOK 1 KELOMPOK 2 KELOMPOK 3 KELOMPOK 4KELOMPOK 5

Feri Ani Saputra Aricahyawan Hamida Dwi P Rambu Paji

Page 14: Buku Petunjuk Detergen untuk Ekotoksikologi

Ferbiansyah MAhmad Hisyam C Antonius Hot A Guntur Dwi K Anita Permata sari

Hesti Wijayanti

Roswita Larosa Ayu Wulandari Mutiara S Arni Hastuti Joko Purnomo

Siti RachellaFuquh Rahmat S Rizka Liana S Bayu Nugroho J

M. Surti Wardani

Susilowati Reza Maulana Vina Triyustari Dessy PuspitasariMarisa Nuzulia

Varlinda Ria SaftriYeremias V Mitak Sansistya Dita N

Putri Purnama S

Wigati Sinta Fajarwati Yudhit V Yunan Ardi BStefanus Aditya

KELOMPOK 6 KELOMPOK 7 KELOPMOK 8 KELOMPOK 9KELOMPOK 10

Alhafids Ana Farica Abdul syukur Edwin Agus N Daniel Dwi P

Deni NovangkiFebrianti Amalia Dimas Ario S Lucky Hendrawan

Dian Arifiyani

Dita Ambarsari Filipus Alfa Heny Budi S Marta Dyyu SFerry Wahyu W

Fredy Hermanto Linda Ambika Maria Sofa Martha Sekar A Khoirul Abroni

Indri Putri Monica Dwi K mega retnoMuliawati Handayani Putri March F

Nurul Fathonah Surya Dwi V Ricky Subiakto Steven Antoni Vitrio Deo

Sebrina

Page 15: Buku Petunjuk Detergen untuk Ekotoksikologi