IV. HASIL PENGAMATAN DAN PEMBAHASANHasil pengamatan jenis mikroorganisme halofilik ialah sebagai berikut.Tabel 1. Hasil Pengamatan Mikroorganisme HalofilikKelMediaJumlah koloniNilai SPC(Koloni/ml)Keberadaan Mikroorganisme LainGambar

10-210-3

6NA1791,7 x 103Kapang(1 koloni)10-2

10-3

7NA+5% NaCl2-2,0 x 102-10-2

10-3

8NA+10% NaCl6-6x102-10-2

10-3

9NA+15% NaCl1-1,0 x 10210-2

10-3

10NA+5% NaCl1831,8 x 10310-2

10-3

11NA+10% NaCl1571,5 x 10310-2

10-3

(Sumber: Dokumentasi Pribadi,2015)

Berdasarkan teori yang ada, garam merupakan bahan yang sangat penting dalam pengawetan ikan, daging, dan bahan pangan lainnya ( Ilmu Pangan, 2007 ). Garam berperan sebagai penghambat selektif pada mikroorganisme pencemar tertentu. Namun, masih tetap ada jenis mikroorganisme yang dapat tumbuh pada bahan pangan yang mengandung garam, baik garam dengan kadar rendah, maupun garam dengan kadar tinggi. Jenis ini disebut dengan bakteri halofilik. Bakteri halofilik membutuhkan konsentrasi NaCl minimal tertentu untuk pertumbuhannya (Srikandi F, 1992). Bakteri merupakan jenis mikroorganisme yang sering terdapat pada bahan pangan. Bakteri dapat dibedakan berdasarkan sifat pertumbuhannya didalam bahan pangan, yaitu :1. Bakteri asam laktat1. Bakteri asam asetat1. Bakteri proteolitik1. Bakteri lipolotik1. Bakteri sakharolitik1. Bakteri pektolitik1. Bakteri termofilik1. Baklteri psikotropik1. Bakteri halofilik1. Bakteri osmofilik1. Bakteri berfigmen1. Bakteri pembentuk lender1. Bakteri pembentuk gas1. KoliformBakteri halofilik merupakan bakteri yang dapat hidup pada kondisi konsentrasi garam yang tinggi. Kebutuhan garam untuk pertumbuhan dapat bervariasi, yaitu :1. Halofilik ringan : kadar garam 5 %1. Halofilik sedang : kadar garam 5-20 %1. Halofilik ekstrim : kadar garam 20-30 %1. Bakteri halotolerant : bakteri yang dapat tumbuh dengan atau tanpa adanya garam , contohnya adalah halobacterium, Sarcina, Micrococcus, Pseudomonas, Vibrio, Pediococcus, Alcaligens. Praktikum kali ini, dilakukan untuk pengujian bakteri halofilik pada bahan pangan. Pemeriksaan pada bahan pangan ini, bertujuan untuk menguji kemungkinan jenis bakteri halofilik apa yang terdapat pada sampel. Sampel yang digunakan pada praktikum kali ini adalah ikan peda yang merupakan salah satu contoh ikan yang telah diasinkan sehingga memiliki kadar garam yang tinggi karena telah dilakukan penggaraman untuk proses pengawetan dan penambah cita rasa sehingga kemungkinan keberadaan bakteri halofilik ini dapat terlihat pada pengujian ini. Medium yang digunakan adalah medium NA, NA+NaCl 5%, NA+NaCl 10%, NA+NaCl 15%. Tujuan penambahan NaCl yang bervariasi ini adalah untuk mengetahui kebutuhan garam terhadap pertumbuhan bakteri koliform rendah hingga koliform ekstrim dan hal ini juga bertujuan untuk mengetahui kadar garam optimum bagi pertumbuhan bakteri halofilik atau bakteri halotoleran pada medium tanpa garam tetapi semakin media NA ditambahkan konsentrasi NaCl yang semakin tinggi maka semakin lama agar media membeku, sedangkan untuk medium yang tidak ditambah NaCl adalah untuk mendeteksi pertumbuhan bakteri non-koliform. Garam mempengaruhi aktivitas air (Aw) sehingga dapat mengendalikan pertumbuhan mikroorganisme, tetapi bakteri halofilik mampu tumbuh dalam penyimpanan yang lama sehingga pertumbuhan bakteri halofilik pada medium diperkirakan sedikit (Buckle at all, 1987).Bakteri yang tahan pada kadar garam tinggi, umumnya mempunyai kandungan KCl yang tinggi dalam selnya. Selain itu bakteri ini memerlukan konsentrasi Kalium yang tinggi untuk stabilitas ribosomnya. Bakteri halofil ada yang mempunyai membran purple bilayer, dinding selnya terdiri dari murein, sehingga tahan terhadap ion Natrium. Sampel Ikan peda termasuk pada bahan pangan dengan kadar garam ekstrim yaitu sekitar 20%, sehingga mikroorganisme yang dapat tumbuh merupakan mikroorganisme yang memang sangat tahan garam. Garam bersifat bakteriostatik dan merupakan elektrolit yang mampu memecah ikatan air dalam protein akibatnya dapat terjadinya denaturasi protein. Garam sebagai pengawet berfungsi menaikkan tekanan osmotik sehingga menyebabkan terjadinya plasmolisis pada sel mikroorganisme, dehidrasi, dan bersifat racun akibat terbentuknya ion klorida serta menyebabkan sel mikroorganisme menjadi peka terhadap karbondioksida.Sample yang digunakan adalah sampel yang telah diencerkan sampai 10-3. Sample yang digunakan merupakan padatan, sehingga harus dihaluskan terlebih dahulu dan ditimbang sebanyak satu gram lalu dilarutkan dalam larutan pengencer yang digunakan berupa NaCl fiz. Pada Pengenceran 10-2 dan 10-3 sampel dituangkan pada cawan petri dengan medium masing-masing kelompok berbeda dan setelah itu diikubasi selama 3 hari dalam suhu 300C.1. Sampel ikan peda dengan medium NAHasil pengamatan kelompok 6 dengan sampel ikan peda pada medium pengenceran 10-2 terdapat 9 koloni bakteri sedangkan pada pengenceran 10-3 terdapat 17 koloni bakteri dan adanya keberadaan mikroorganisme lain yaitu 1 koloni jenis kapang sehingga didapat nilai SPC 9 x 102. Pada hasil pengenceran kelompok 6 kemungkinan terjadi kontaminan karena hasil yang tidak sesuai dengan prinsip pengenceran dimana seharusnya semakin tinggi pengenceran maka hasil jumlah koloni akan lebih selektif atau berkurang, kemungkinan kontaminan tersebut bisa berasal dari udara ataupun saat suspensi pengenceran.1. Sampel ikan peda dengan medium NA+5% NaClHasil pengamatan kelompok 7 dengan sampel ikan peda pada medium pengenceran 10-2 terdapat 2 koloni bakteri sedangkan pada pengenceran 10-3 tidak terdapat pertumbuhan koloni bakteri sehingga didapat nilai SPC 2,0 x 102. Sedangkan hasil pengamatan dari kelompok 10 pada sampel ikan peda pada medium pengenceran 10-2 terdapat 18 koloni bakteri sedangkan pada pengenceran 10-3 terdapat 3 koloni bakteri sehingga didapat nilai SPC 1,8 x 103.1. Sampel ikan peda dengan medium NA+10% NaClHasil pengamatan kelompok 8 dengan sampel ikan peda pada medium pengenceran 10-2 terdapat 6 koloni bakteri sedangkan pada pengenceran 10-3 tidak terdapat pertumbuhan koloni bakteri sehingga didapat nilai SPC 6 x102. Sedangkan hasil pengamatan dari kelompok 11 pada sampel ikan peda pada medium pengenceran 10-2 terdapat 15 koloni bakteri sedangkan pada pengenceran 10-3 terdapat 7 koloni bakteri sehingga didapat nilai SPC 1,5 x 103.1. Sampel Ikan peda dengan medium NA+NaCl 15%Hasil pengamatan kelompok 9 dengan sampel ikan peda pada medium pengenceran 10-2 terdapat 1 koloni bakteri sedangkan pada pengenceran 10-3 tidak terdapat pertumbuhan koloni bakteri sehingga didapat nilai SPC 1,0 x 102 dari hasil perhitungan analisis kuantitatif terhadap hasil pengamatan yang dapat dihitung dengan metode SPC sebagai berikut :

SPC = = 1,0 x 102Hasil pengamatan ketika konsentrasi garam semakin meningkat yang ditambahkan pada media hasil pengenceran cenderung semakin sedikit bahkan tidak dihasilkan koloni hal ini mungkin disebabkan oleh tidak adanya bakteri halofilik pada kadar garam 10 - 15 %. Kadar garam tersebut mungkin terlalu tinggi , sehingga bakteri halofilik tersebut tidak dapat tumbuh. Kemungkinan lain adalah matinya bakteri akibat medium yang terlalu panas. Panas dapat mematikan mikroorganisme pada suhu tertentu. Medium yang telah dicampur dengan garam lebih cepat membeku saat diinkubasi karena garam mengurangi kadar air, sehingga titik beku naik. Berdasarkan hasil pengamatan dari masing-masing kelompok, dapat dilihat bahwa semakin kita menambahkan konsentrasi NaCl pada medium, maka semakin sedikit koloni mikroorganisme yang tumbuh. Sehingga dapat disimpulkan bahwa kemungkinan jenis bakteri yang tumbuh adalah jenis bakteri halofilik ringan karena koloni bakteri yang tumbuh lebih banyak pada medium NA dengan penambahan NaCl kadar 5%. Selain itu, kemungkinan jenis bakteri yang tumbuh adalah jenis bakteri halotoleran, yakni bakteri yang dapat tumbuh dengan atau tanpa adanya garam, seperti hanya tumbuh pada medium NA saja. Kemungkinan jenis bakteri lain yang dapat tumbuh adalah Halobacterium yang merupakan jenis halofilik sedang tumbuh pada konsentrasi 3.5% sampai jenuh, Micrococcus dan kapang seperti yang terdapat dari hasil pengamatan kelompok 6. Kapang bisa saja tumbuh di ikan asin karena pengolahan ikan asin telah mengurangi nilai kadar air pada ikan sehingga pada AW yang rendah kapang bisa tersebut bisa tumbuh. Jenis bakteri lain yang dapat tumbuh pada ikan-ikan asin yang bisa diperkirakan adalah jenis bakteri Vibrio parahaemolyticus. Bakteri ini merupakan flora normal dari daerah estuaria dan pantai yang tumbuh pada kadar NaCl optimum 3%, kisaran suhu 5 43C, pH 4.8 11 dan Aw 0.94 0.99. Pertumbuhan berlangsung cepat pada kondisi suhu optimum (37C) dengan waktu generasi hanya 910 menit.

KESIMPULAN1. Pengujian bakteri halofilik pada praktikum ini dilakukan pada produk olahan ikan peda1. Semakin tinggi kadar garam pada media, semakin sedikit jumlah bakteri yang dihasilkan sehingga adanya kemungkinan tidak adanya bakteri halofilik yang tumbuh pada kadar garam yang tinggi.1. Pada medium dengan kadar garam diatas 10% menghasilkan koloni yang lebih sedikit karena terlalu tingginya kadar garam tersebut atau terjadinya kesalahan pada praktikum, misalnya medium yang digunakan terlalu panas.1. Pada sample ikan peda medium NA dan NA+NaCl 5% kemungkinan jenis bakteri yang tumbuh adalah Halobacterium yang merupakan bakteri yang dapat tumbuh dengan atau tanpa adanya garam.

DAFTAR PUSTAKAAfrianto, E. dan E. Liviawaty. 1994. Pengawetan dan Pengolahan Ikan. PenerbitKanisius, Yogyakarta.

Buckle, K. A., R. A. Edwards, G. H. fleet, dan M. Wootton. 1987. Ilmu Pangan. Penerjemah : Hari Purnomo dan Adiono. Penerbit Universitas Indonesia (UI- Press), Jakarta.Fardiaz, S. 1992. Mikrobiologi Pangan 1. PT Gramedia Pustaka Utama. Jakarta.Hadiwiyoto, S. 1993. Teknologi Pengolahan Hasil Perikanan Jilid 1. Liberty,Yogyakarta.

Moeljanto. 1984. Penanganan Ikan Segar. PT. Penebar Swadaya, Jakatra

Pelczar, Jr et al. 1986. Dasar-Dasar Mikrobiologi. Penerbit Universitas Indonesia Press, Jakarta.

Tjahjadi, Carmencita dan H.Marta.2011. Pengantar Teknologi Pangan Vol I dan II. Jurusan Teknologi Industri Pangan Universitas Padjadjaran, Jatinangor.

Winarno, F.G. dan S. Fardiaz. 1973. Dasar Teknologi Pangan . Departemen Teknologi Hasil Pertanian Fatemeta, IPB, Bogor.