Arti Metabolisme Protein

8/3/2019 Arti Metabolisme Protein

1/23

Eur. J. Biochem. 97, 251 -256 (1979)

Kontrol hormonal Metabolisme Glikogen

Protein fosforilasi Fosfatase Inhibitor-1 in vivo di Respon untuk Adrenalin

J. Gordon Foulkes dan COHEN Philip

Departemen Biokimia, University of Dundee

(Diterima 9 Januari 1979)

Inhibitor-1 telah terbukti terfosforilasi di otot rangka in vivo. Pada hewan yang diberi normal

tingkat fosforilasi adalah 31 i 7% dan nilai ini meningkat 70% f 12 menyusul

intravena suntikan adrenalin.

Hasil penelitian menunjukkan bahwa fosforilasi inhibitor-1 mungkin sama sama pentingnya dengan

fosforilasi kinase fosforilasa dalam mengangkat tingkat fosforilasa a. Peran

inhibitor-I dalam metabolisme dibahas

Siklik AMP awalnya diidentifikasi sebagai heatstable

senyawa yang terbentuk dalam hati dalam menanggapi

adrenalin, yang dapat menggantikan hormon dalam meningkatkan

proporsi hati fosforilasa di

homogenat [l]. Penemuan ini berarti bahwa siklus

AMP baik harus mengaktifkan fosforilasa kinase yang

dikonversi b fosforilasa ke, atau menghambat fosforilasa

fosfatase yang dikonversi fosforilasa sebuah

untuk h. Selanjutnya, ditemukan bahwa jika fosforilasa

kinase diinkubasi dengan Mg-ATP kegiatan itu

meningkat dan bahwa reaksi ini dirangsang oleh

siklik AMP [2]. Pada akhirnya, hal ini menyebabkan penemuan

protein siklik-AMP-tergantung enzim kinase,


2/23

yang merupakan jejak kontaminan endogen di suci

persiapan kinase fosforilasa, bertanggung jawab

untuk fosforilasi dan aktivasi enzim

131. Temuan ini menyarankan bahwa adrenalin merangsang

glikogenolisis melalui urutan reaksi

ditunjukkan di bawah ini, dan sekarang ada bukti-bukti

bahwa masing-masing peristiwa berlangsung di otot rangka

di vivh (ditinjau dalam [4,5]).

Dibesarkan Caz terfosforilasi Diaktifkan Ditinggikan

Adrenalin fosforilasa protein siklik --- phospho-

AMP kinase kinase sebuah rylase

Temuan ini tidak mengecualikan Namun kemungkinan

AMP siklik yang mungkin juga meningkatkan tingkat

fosforilasa melalui penghambatan fosforilasa

fosfatase, dan kepentingan dalam regulasi

~ ~ ~

EnzymPs. Fosforilasa (EC 2.4.1.1); kinase fosforilasa

(EC 2.7.1.38); protein kinase (EC 2.7.1.37); phosphatase protein

(EC 3.1.3.-); glikogen sintase (EC 2.4.1.11).

Singkatan. Siklik AMP, adenosin 3 ': 5'-monophosphate.

fosfatase fosforilasa diintensifkan berikut

kesadaran bahwa ini hanyalah salah satu kegiatan dari

enzim multifungsi disebut protein phosphatase 1

[S]. Enzim ini juga yang mengkatalisis dephosphorylation

dari fosforilasa kinase dan glikogen sintase [4-71,


3/23

dan oleh karena itu masing-masing melakukan dephosphorylation yang

reaksi yang menghambat glikogenolisis atau mengaktifkan

sintesis glikogen. Perubahan dalam kegiatan ini

enzim sehingga akan diharapkan untuk mempengaruhi

keadaan fosforilasi beberapa yg menukar satu sama lain

enzim.

Setelah laporan oleh Brandt et al. [8,9] bahwa hati

dan otot ekstrak mengandung trypsinlabile tahan panas

protein (s) yang menghambat fosfatase fosforilasa,

Huang dan Glinsmann menunjukkan

adanya dua inhibitor protein-stabil panas fosforilasa

fosfatase dalam otot rangka, yang mereka

disebut inhibitor-1 dan inhibitor-2. Mereka membuat kunci

pengamatan bahwa inhibitor-1 hanya menghambat fosforilasa

fosfatase ketika terfosforilasi oleh

siklik-AMP-dependent protein kinase [lo, 11 1.

Inhibitor-1 telah dimurnikan untuk homogenitas dalam

laboratorium dan struktur dan interaksi dengan

protein fosfatase-1 telah ditandai secara ekstensif

[12-161. Namun pertanyaan yang beredar utama

yang harus dijawab sebelum peran fisiologis

inhibitor-1 dapat dianggap sebagai keprihatinan didirikan,

fosforilasi protein ini in vivo. Dalam hal ini

kertas kami menunjukkan bahwa inhibitor-1 memang terfosforilasi

dalam otot rangka in vivo dan bahwa derajat


4/23

dari fosforilasi meningkat drastis oleh adrenalin.

Sebuah account awal bagian dari pekerjaan ini

disajikan [17].

252 Fosforilasi Inhibitor-1 di viw

PROSEDUR PERCOBAAN

E. \-l "Strategi rimental

Dalam rangka untuk memperkirakan tingkat fosforilasi

protein in vivo perlu untuk mengekstrak jaringan

bawah kondisi yang mencegah fosforilasi lebih lanjut

dan dephosphorylation dari mengambil tempat, tetapi

yang tidak merusak aktivitas biologis. Ini adalah

biasanya dicapai oleh homogenisation di hadapan

EDTA dan natrium fluoride. EDTA chelates

ion magnesium dan menghambat kinase protein, sedangkan

natrium fluorida merupakan inhibitor kuat protein

fosfatase. Pada penelitian ini, alternatif

prosedur untuk menghancurkan enzim interconverting

dapat digunakan, mengingat stabilitas ekstrim

inhibitor-1 menjadi asam. Inhibitor-1 tidak dipercepat atau

tidak aktif ketika jaringan otot yang diambil dalam

1,5 - 2'5 () asam triklorasetat. Selanjutnya, sejak

inhibitor-1 hanya protein phosphatase inhibitor dalam

nya terfosforilasi bentuk, tingkat fosforilasi

dapat diukur lebih sederhana, dengan melaksanakan

pengujian sebelum dan sesudah fosforilasi maksimal dengan


5/23

siklik-AMP-dependent protein kinase.

Muterials

L-Epinefrin (adrenalin) dan sapi pankreas

insulin diperoleh dari Sigma Chemical Co

(Poole, Dorset, Inggris), L-askorbat asam dari BDH

Chemicals Ltd (Poole, Dorset, Inggris) dan [Y-~ ~ PIATP

dari Pusat Radiokimia (Amersham, Bucks,

Inggris). Natrium pentobarbitone dibeli sebagai

20 ",, (w / v) larutan dari bulan Mei Sr Baker (Dagenham,

Essex, Inggris) dan Sephadex GlOO (kelas prima)

dari Pharmacia G.B. Ltd (London, Inggris).

Preparat setiap proteinnya ion Pro

Semua protein diisolasi dari kelinci kerangka

otot. Fosforilasa b [Aku 81, fosforilasa kinase

[I91 dan inhibitor-1 [I21 telah dimurnikan untuk homogenitas

dan fosforilasa 32P-label telah disiapkan dari

fosforilasa b fosforilasa menggunakan kinase dimurnikan

dan [)-. 32P] ATP [6]. Protein fosfatase-1 dimurnikan

300 - 400 kali lipat, dan disimpan pada - 20 "C, dalam 50 mM

Tris-HCl / l O mM. EDTA pH 7.0 (25 "C) (buffer A),

mengandung 50 mM mercaptoethanol, 6 mM MnC12

dan 50'x gliserol [20]. Subunit katalitik siklik-

AMP-protein kinase tergantung sangat dimurnikan

dengan kromatografi pada CM Sephadex [21]. Protein

ditentukan dengan metode Bradford [26].


6/23

Pengujian Protein-Fosfatase 1 dan Inhibitor-I

Pengukuran ini dilakukan seperti yang dijelaskan

sebelumnya [6,12]. Satu unit protein fosfatase-I

adalah jumlah yang melepaskan 1,0 nmol fosfat

per menit dari fosforilasa 32P-label yang, di bawah

kondisi standar. Satu unit inhibitor-1 adalah bahwa

jumlah yang menghambat 0,02 unit protein fosfatase

Saya sebesar 50% dalam uji standar.

Fosforilasi dan Aktivasi Inhibitor-I

Inhibitor-aku maksimal terfosforilasi dengan inkubasi

dengan subunit katalitik dari siklik-AMPdependent

protein kinase dan Mg-ATP. inkubasi ini

mengandung subunit katalitik cukup untuk mengatasi

kehadiran inhibitor protein spesifik siklik-

AMP-dependent protein kinase yang mencemari

inhibitor-1 pada tahap awal dalam pemurnian [12].

Dephosphorylation dari Inhibitor-I

Inhibitor-I dephosphorylated dan tidak aktif oleh

protein fosfatase-1 di hadapan mangan

ion [13]. Fraksi yang mengandung inhibitor-1 (0,05 ml)

karena itu diinkubasi dengan 0,15 unit protein

fosfatase-I (0,05 ml) dalam buffer A mengandung 6 mM

MnC12 dan 1,0 mg albumin bovine serum / ml. The

dephosphorylation inhibitor-1 telah selesai dalam

2 jam kondisi ini.


7/23

Injeksi 'Adrenalin

Adrenalin dilarutkan dalam 10 mM asam askorbat.

Sebuah alikuot 0,1-ml (250 pg) ditambahkan untuk 3,0 ml 10%

natrium pentobarbitone dan campuran itu disuntikkan

ke dalam vena telinga marjinal perempuan Selandia Baru

Kelinci putih (3 -4 kg bobot badan). Kontrol percobaan

dilakukan dengan cara yang sama kecuali

adrenalin yang dihilangkan.

Injeksi Insulin

Insulin dilarutkan dalam 3 mM HCI dan glukosa

dilarutkan sebagai solusi 20 (w / v) dalam 0,1 5 M NaC1.

Glukosa (2 g / kg berat badan) ini dikelola intraperitoneal

dan insulin (3 unit / kg berat badan)

disuntikkan ke dalam vena telinga marjinal 10 menit kemudian. Setelah

min 25 lebih lanjut, hewan-hewan diberi dosis yang mematikan

dari pentobarbitone natrium. Dalam percobaan kontrol

penyuntikan kedua glukosa dan insulin dihilangkan.

Isolasi Inhibitor-I setelah aktivasi dalam vivo

Pada 45 detik setelah suntikan, kelinci itu exsanguinated,

dikuliti, dan otot dari tungkai belakang

dan kembali dihapus, dan ditempatkan di es. Otot

(Sekitar 700g) adalah cincang dan homogen pada rendah

kecepatan dalam blender Waring dalam 4 jilid. dari% es dingin 1,5 ', atau

2 '%; trikloroasetat acid/4.0 mM EDTA, seluruh

J. G. Foulkes dan P. Cohen 253


8/23

operasi yang selesai dalam 8 menit yang asli

injeksi.

homogenat itu disentrifugasi pada 6000 g x untuk

45 menit dan supernatan (pH 2,5 f 0,1) tertuang

melalui wol kaca. Solusi 100% (b / v) triklorasetat

asam kemudian ditambahkan perlahan ke supernatan

untuk memberikan konsentrasi akhir 15% (b / v).

Setelah berdiri pada 4 C selama paling sedikit 3 jam, suspensi

itu disentrifugasi pada 20000 g x selama 10 menit. Supernatan

dibuang, endapan resuspended di

0,5 M Tris-HCl pH 8.0 (25 C) dan suspensi

disesuaikan dengan pH 7,4 dengan 10 hidroksida amonium M

untuk memberikan volume akhir 200 ml. Suspensi itu

didialisis di 4 '; C selama 20 jam, terhadap 5 mM Tris-HCI

pH 8.0 (25-C) dengan satu perubahan buffer dialisis. The

endapan berat dihapus oleh sentrifugasi pada

20000 x g selama 10 menit (langkah 1) dan supernatant

dipindahkan ke botol kaca 200 ml kerucut. labu The

direndam dalam bak air mendidih selama 15 rnin dan

didinginkan sampai 4 C di es. Ini diendapkan protein

dihilangkan dengan sentrifugasi pada 20000 xg selama 10 menit

dan supernatan lyophilised. The beku-kering

bahan dilarutkan dalam 20 ml air (langkah 2) dan

amonium sulfat padat ditambahkan untuk membawa solusi

untuk kejenuhan 60 2,. Setelah berdiri di 4 "C selama 4 jam,


9/23

suspensi disentrifugasi pada 20.000 xg selama 20 menit,

endapan dipekatkan dalam 200 mM Tris-HC1 pH 7,5 /

O 1 mM. EDTA (langkah 3), dan didialisis semalam terhadap

buffer ini mengandung 45 '%, etanol pada 4 C. The diendapkan

protein dihapus oleh sentrifugasi pada

20000 xg selama 10 menit dan supernatan didialisis

melawan buffer A untuk menghapus etanol, dan lyophilised.

Bahan beku-kering yang dipekatkan di

air (langkah 4) dan dikenakan gel filtrasi Sephadex

GlOO prima diequilibrasi dalam buffer A (langkah 5).

HASIL

Kegiatan 'Inhibitor-aku

di trikloroasetat-Asam E.utructs

dari 'Skeletal Muscle

1,5-15 Y4) asam trikloroasetat ekstrak otot

ditemukan mengandung 1,0 x lo6 unit inhibitor-1

per 1000 g jaringan berikut fosforilasi maksimal

protein dengan kinase siklik-AMP-dependent. Ini adalah

serupa dengan yang diperoleh oleh prosedur standar

yang melibatkan homogenisation dalam larutan encer

EDTA pada pH 7,0 dilanjutkan dengan perlakuan panas pada 90 "C

[12]. Aktivitas spesifik inhibitor-1 pada tahap ini

(Langkah 1) adalah 3-4 kali lipat lebih tinggi daripada yang diperoleh setelah

pemanasan ekstrak encer EDTA otot pada 90'C

(Tabel 1) [12]. Jika 1,5 - 15 (x triklorasetat ekstrak


10/23

dipanaskan dalam penangas air mendidih-selama 15 menit,

aktivitas spesifik meningkat menjadi 12.000-16.000 unit / mg

menunjukkan bahwa inhibitor-1 sudah terwakili 7 -% 9 ',

protein pada tahap ini (Tabel 1).

Tabel 1. Purificution Qf inhihitor-l ufier phosp IOR ~ ~ lutictiini vivo

750 g otot kelinci digunakan dalam persiapan masing-masing. Kegiatan Tertentu

diukur setelah fosforilasi maksimal dengan siklik-AMPdependent

protein kina:

Volume langkah khusus phos-Yield

Kegiatan phorylation

A. Kontrol Atiii? Iol.v

1. 2 - 15 'I),: trichloro-

2. Perlakuan panas

3. 60 '%, amonium

ekstraksi asam asetat

dan konsentrasi

sulfat

pengendapan

natant

eluat

4. Etanol 45 super-

5. Sephadex GI00

B. ADRC, iiaIinc,-trentrtl

1. 2-15 ', 7) trikloroasetat

ekstraksi asam


11/23

2. Perlakuan panas

dan konsentrasi

3. 60 ';:, amonium sulfat

pengendapan

4. 45 yd3 etanol supernatant

5. Sephadex GI00

eluat

I

196

20

2.0

2.5

180

20

2.0

2.7

3 200

12000

29 000

46000

145000, '

4 300

I6 000

52 000

83000


12/23

148 000 "

33

31

36

38

32

58

57

59

60

56

100

95

44

24

100

95

53

26

Aktivitas spesifik tabung puncak

Fosforilasi Qf Inhibitor-I in vivo

Fosforilasi Persentase inhibitor-1

diukur setelah langkah 1 dari pemurnian, dengan

membuat tiga pengukuran berikut. Pertama,

aktivitas inhibitor diukur tanpa pretreatment apapun;


13/23

kedua, aktivitas inhibitor total diukur

setelah fosforilasi maksimal oleh katalitik

subunit protein kinase siklik-AMP-dependent;

ketiga, aktivitas inhibitor diukur setelah

maksimal dephosphorylation oleh protein-fosfatase 1.

Percobaan khas diilustrasikan dalam Gambar 1 dan

Ringkasan hasil diberikan dalam Tabel 2. Ketika

bahan diperoleh pada langkah 1 diinkubasi dengan protein

fosfatase-I, aktivitas inhibitor benar-benar

hancur (Gambar l), menunjukkan bahwa inhibitor-2

absen. Sejak inhibitor-2 dapat diendapkan dengan 15?


14/23

protein fosfatase-1 solusi dipanaskan di 1OO'C selama 2 menit untuk menonaktifkan protein fosfatase

dan kemudian diinkubasi selama

lebih 90 menit dengan protein kinase dan Mg-ATP (0). t segitiga menunjukkan incubations kontrol di

mana protein kinase (v) atau protein fosfatase-

1 (V) dihilangkan

trikloroasetat asam, dan kemudian dipanaskan pada 90 C selama

15 menit, serupa tingkat fosforilasi diamati

dengan hasil yang ditunjukkan pada Tabel 2.

Konfirmasi bahwa Fosfatase Protein Inhibitor

Terdeteksi pada Langkah 1 Apakah Identik dengan Inhibitor-1

Inhibitor protein fosfatase terdeteksi pada

langkah 1 benar-benar dihancurkan oleh inkubasi dengan

protein fosfatase-1, dan inhibitor tidak aktif

sepenuhnya bisa diaktifkan kembali oleh inkubasi dengan

katalitik subunit protein siklik-AMP-dependent

kinase dan Mg-ATP (Gbr. 1).

Untuk membuktikan bahwa bahan penghambatan di

langkah 1 itu identik dengan inhibitor-1, sebuah prosedur baru

dikembangkan untuk memperoleh sangat murni inhibitor

1, yang tidak seperti prosedur standar [12] copurified

baik terfosforilasi dan dephosphorylated

bentuk protein. Hasil dari penelitian ini adalah

diringkas dalam Tabel 1. Hal ini dapat dilihat bahwa persentase

fosforilasi tetap konstan di seluruh

prosedur di kedua kontrol dan adrenalinetreated

persiapan. Pada langkah terakhir filtrasi, gel


15/23

Sephadex G100, yang hambat co materi-dielusi

dengan inhibitor-1 dengan nilai / V Vo dari 1,45 (Gbr.2). The

alasan untuk kegiatan total yang lebih rendah dari inhibitor-1 di

Gambar. 2 B adalah karena berukuran lebih kecil alikuot dimuat.

Aktivitas spesifik pada tahap ini (145000-150000

unit / mg) hanya sedikit lebih rendah dari inhibitor murni-1

terisolasi oleh prosedur standar (1 80.000 unit / mg

[12]), dan elektroforesis di 10 gel polyacrylamide

di hadapan natrium sulfat dodesil menunjukkan

utama protein-pewarnaan band dengan mobilitas dibedakan

dari inhibitor-1 (tidak digambarkan). Ketika

Tabel 2. Phosphorylution # / inhibitor-1 in vivo

Persentase inhibitor-aku dalam bentuk terfosforilasi aktif

diukur setelah langkah 1 dari pemurnian seperti yang dijelaskan dalam teks.

Percobaan biasanya dilakukan menggunakan dua atau tiga

hewan, huruf a percobaan untuk f menunjukkan dilakukan dalam

jangka waktu 60 menit pada hari yang sama

Percobaan Inhibitor dalam bentuk diaktifkan dari

Normal insulin-adrenalinefed

diperlakukan diperlakukan

kontrol hewan hewan

..

o / / 0

32 "58

33 23 68


16/23

34 23 76

42 24 90

24 32 '69

23 '25 59'

Standar deviasi 31 f 7 25 f 4 70 f 12

gel diiris dan diuji tanpa inkubasi sebelumnya

dengan protein kinase siklik-AMP-dependent dan Mg-

ATP, aktivitas inhibitor ditemukan mengelusi di

posisi pita protein-pewarnaan utama (tidak

ilustrasi).

DISKUSI

Hasil yang dijelaskan dalam makalah ini menunjukkan

bahwa-1 adalah inhibitor fosforilasi pada kelinci rangka

J. G. Foulkes dan P. Cohen 255

otot in vivo dan bahwa tingkat fosforilasi

meningkat drastis oleh adrenalin. Tingkat fosforilasi

rata-rata 31 k 7 "/; pada hewan makan normal,

dan nilai ini meningkat menjadi 70 12 pada hewan yang

telah disuntik dengan adrenalin. Toth et al. [22]> nd

Tao et al. [23] juga melaporkan bahwa adrenalin

meningkatkan konsentrasi inhibitor tahan panas

dari fosfatase fosforilasa dalam otot rangka tikus

in vivo tetapi mereka tidak menetapkan bahwa protein ini

8t A

Aku


17/23

L

0 x) 40 60 80 00 120

Elusi volume (RNL)

Gambar. 2. Gc.1, jiltrution inhibitor-aku pi-c, purution.s. Aliquot dari

materi dari kontrol (A) atau adrenalin yang diobati (B) binatang

dikenakan gel filtrasi Sephadex (300-100 prima (45 x 2,5 cm)

diequilibrasi dalam buffer A (langkah 5). Fraksi yang diuji untuk

protein phosphatase inhibitor aktivitas langsung (O), setelah preincubation

dengan protein kinase siklik-AMP-dependent dan Mg-ATP (0)

dan setelah preincubation dengan protein fosfatase-I dan mangan

ion (v). Tingkat aliran 18 ml / jam dan fraksi 2,0-2,5-ml

dikumpulkan.

inhibitor-1, juga tidak menentukan tingkat fosforilasi

protein.

Kami telah menunjukkan sebelumnya bahwa inhibitor-1 adalah

terfosforilasi oleh protein siklik-AMP-dependent

kinase in vitro pada tingkat yang sama dengan fosforilasa kinase

dan glikogen sintase [14] yang merupakan mapan

fisiologis substrat untuk enzim ini di

otot (lihat [4,5] untuk review). Konsentrasi

inhibitor-I di otot (01:05) sebanding dengan fosforilasa

kinase (14:05) dan glikogen sintase

(14:08) dan lebih tinggi dari protein cncentration

fosfatase-1 [13]. Karena hambatan konstan

(KJ adalah 1,5-2 nM in vitro [13], ada cukup jelas


18/23

inhibitor-1 untuk menghambat sebagian besar

protein fosfatase-1 pada otot. Selain itu,

inhibitor-1 menghambat fosfatase fosforilasa,

fosforilasa kinase fosfatase dan glikogen sintase

fosfatase kegiatan protein fosfatase-1

dengan cara yang sama, menunjukkan bahwa perubahan

keadaan fosforilasi inhibitor-1 akan

diharapkan untuk mengatur keadaan fosforilasi

beberapa enzim yg menukar satu sama lain. Hasil ini,

ditambah dengan pekerjaan ini, memberikan bukti yang kuat

bagi keterlibatan inhibitor-1 di kontrol

glikogenolisis oleh adrenalin. Nampaknya bahwa

fosforilasi inhibitor-1 mungkin sama sebagai

penting sebagai aktivasi fosforilasa yang

kinase dalam peningkatan fosforilasa tingkatan oleh

adrenalin (Gbr. 3).

Kami telah menyarankan bahwa protein fosfatase-1 adalah

mungkin enzim yang dephosphorylates inhibitor

1 in vivo [5]. Alasan untuk membuat pernyataan ini

adalah bahwa-inhibitor 1 tidak menghambat dephosphorylation sendiri

oleh protein fosfatase-1, bahkan pada konsentrasi

setinggi 13:00 [5,13]. Selanjutnya,

itu dephosphorylated dengan konstanta kinetik yang sama

kepada mereka untuk dephosphorylation substrat lainnya

ini [13] enzim. Hal ini menunjukkan bahwa inhibitor-1 dapat


19/23

menjadi substrat yang dephosphorylated preferentially

in vivo.

Adrenalin

Diaktifkan

siklik-AMP-dependent

Aku

Diaktifkan terfosforilasi Aku n t c i v e t d

Layang - n aku t c i v e t d '

fosforilasa p U r t o e i n fosfatase-I

Gambar. 3. Stiniulution dari glj.cogenoly.si.s dalam otot rangka melalui phosphorylution simultanrous

dari phosphoryluse inhibitor-I, kinusc, und

gljcogrrt sj.11 thase

256 JG Foulkes dan P. Cohen: Fosforilasi Inhibitor-I di iliiw

Inhibitor-aku seharusnya tidak hanya membuat keadaan

fosforilasi enzim yg menukar satu sama lain dari

glikogen sangat peka terhadap kecil metabolisme

perubahan dalam konsentrasi intraselular siklik

AMP, tetapi juga untuk perubahan kecil dalam kegiatan

protein fosfatase-1 (asalkan protein fosfatase

Saya adalah enzim yang dephosphorylates inhibitor

1 in vivo). Selain itu, karena protein fosfatase

Aku dephosphorylates situs terfosforilasi oleh protein

lain daripada protein kinase siklik-AMP-dependent

kinase [6], inhibitor-1 mungkin merupakan mekanisme

memperkenalkan kontrol oleh AMP siklik menjadi protein

yang terfosforilasi oleh kelas-kelas lain


20/23

protein kinase. Bukti terbaru menunjukkan protein yang

fosfatase-1 mungkin terlibat dalam pengaturan

selain metabolisme glikogen, dalam jaringan proses

selain otot [24]. Dalam hal ini inhibitor-1 bisa

memiliki peran yang lebih luas, tergantung pada jaringan distribusi tersebut.

Tidak ada bukti bahwa inhibitor-1 dapat diaktifkan

oleh protein kinase lain selain siklus-AMPdependent

protein kinase. Oleh karena itu akan menjadi

bunga untuk menguji pengaruh insulin pada keadaan

fosforilasi inhibitor-I in vivo, mengingat

mengklaim bahwa menghasilkan insulin penghambat siklik-

AMP-dependent protein kinase dalam otot [25]. Tabel 2

menunjukkan hasil percobaan awal sedikit

yang pengaruh insulin pada tingkat fosforilasi

inhibitor-1 telah diselidiki. Setelah suntikan

insulin, tingkat phoysphorylation adalah

25 47


21/23

ekstremitas persiapan.

Karya ini didukung oleh hibah dari Penelitian Medis

Dewan, London dan Asosiasi Diabetes Inggris. Gordon

Foulkes adalah penerima beasiswa pascasarjana dari

Medical Research Council dan Philip Cohen adalah penerima

Wellcome Trust Fellowship Khusus.

DAFTAR PUSTAKA

Aku. Robinsin, G. A,, Butcher, Sutherland Sr RW, EW (1971)

di AMP siklik, hal 1 - 16. Academic Press, New York.

2. Krebs, G. E.. Cinta, D. S., Batvold, G. E.. Trayser. K. A.,

Mayer, WL Sr Fischer, EH (1964) Bioc / iemi.stry, 3,1022 -

1033.

3. Walsh, D. A.. Perkins, JP Krebs &, EG (1968) J. Biol.

Chem. 243, 3763-3765.

4. Nimmo, H. G. Cohen Sr. P. (1977) Adv. C, / ~ 'Ul' Clic lYJtidlR,. Cs.

5. Cohen, P. (1 978) Curr. Top. Ci4l. RcJgul. 14, 11 8-196.

6. Antoniw, J. F., Nimmo, H. G., Yeaman. S. Cohen J. Sr. P.

7. Cohen, P., Nimmo, G. A. Antoniw Sr. J. F. (1977) B ~ (JC / I ~ aku J. V J.

8. Brandt, H., Killilea, SD Lee Sr, EYC (1974) Bioclicw?.

9. Brandt, A.. Lee, E. Y. Killilea C. Sr. S. D. (1975) Bioc, / wr??.

10. Huang, Glinsmann Sr FL, WH (1976) FEBS Lrtt. 62.

1 1. Huang, F. L. Sr Glinsmann, W. H. (1976) Eur. J. Biochem. 70,

12. Nimmo, G. A. Sr Cohen, P. (1978) Eur. J. Biochm 7?. 87, 341 -

13. Nimmo, G. A. Cohen Sr. P. (1978) Eur. J. Bioc, hem. 87, 353 -

14. Cohen, P., Rylatt, D. Nimmo B. Sr. G. A. (1977) FEBS L.c, tt.


22/23

15. Shenolikar, S., Foulkes, JG 91 Cohen, P. (1978) Bioi.liem.

Soc. Truns. 6, 935-937.

16. Cohen, P., Nimmo, GA, Shenolikar, S. Sr Foulkes, JG

(1978) dalam Cyclic A'ucleotides di Cell Ri, gulution (Wollenberger,

A., Krause, E. G. Pinna Sr. L., eds) Tekan Pergamon,

Oxford, hal 161-169.

17. Foulkes, JG Sr Cohen, P. (1979) 3 Eropa S oii ~ wzpo.sium

Hormon Cell und Regulution ut Lr Bisc1imher.g I978 (van

der Molen. H. G., Dumont, J. E. Sr Numez, J., eds) Elsevier:

Tekan Holland Utara Biomedis, hal 115-126.

18. Fischer, H. Sr E. Krebs, E. G. (1958) J. Bio /. Chem. 231.

19. Cohen, P. (1973) Eur. J. Biochem. 34, 1 - 14.

20. Antoniw, J. F. Sr Cohen, P. (1976) Eur. J. Biochem. 68,45-54.

21. Beavo, J. A,, Bechtel, Krebs Sr PJ, EG (1974) Met1zod.s

Enzymol. 38, 299-308.

22. Toth, G.. Gergely, P., Parsadanian, H. K. Sr Bot. C. (1977)

Actu Biochim. Biophys. Acud. Sci. Hung. 12. 389-398.

23. Tao. S., Huang, F. L.. Lynch, Glinsmann SC A., W. H. (1978)

24. Burchell, A,, Foulkes, J. G., Cohen. P. T. W., Condon, G. D.

25. Larner. J., Huang, L. C.. Brooker, G., Murad, Sr F. Miller, T.

26. Bradford, M. M. (1976) Dan. Bioclzem. 72. 248-254.

8, 145-166.

(1 977) Bioclzen?. J. 162, 423-433.

162.435 - 444.

Biophys. RRS. Commun. 68. 45 - 54.


23/23

Biophys. R1J.s. Commun. 63, 950-956.

326-329.

41 9 -426.

351.

365.

76, I82 - 186.

65-71.

Biochem. J. 176, 347-350.

Sr Cohen, P. (1978) FEBS Biarkan /. 92. 68-72.

B. (1974) Fed. Proc. 33, 261.

JG Foulkes dan Cohen P., Departemen Biokimia, Institut Ilmu Kedokteran, Universitas Dundee,

Dundee. Inggris, 4HN DDL

Arti Metabolisme Protein

Documents

Transcript of Arti Metabolisme Protein