617-669-1-PB

7/26/2019 617-669-1-PB

1/6

Artikel Penelitian

Maj Kedokt Indon, Volum: 59, Nomor: 1, Januari 2009

ValiditasFOKUS DengueIgG/IgMCard Devicesebagai Alat Diagnosis

Demam Berdarah Dengue

Basundari Sri Utami, Harli Novriani, Djoko Yuwono

Puslitbang Biomedis dan Farmasi, Badan Litbang Kesehatan, Departemen Kesehatan

Abstrak: Selama ini diagnosis infeksi dengue ditegakkan berdasarkan gejala klinis sesuai

yang dianjurkan WHO dan dikonfirmasi dengan Haemaglution Inhibition test (uji HI)untukmendeteksi infeksi dengue primer atau sekunder. Tes HI membutuhkan waktu kurang lebih 24

jam dan membutuhkan 2 jenis sampel darah (fase akut dan konvalesen), bila pasien positif akan

terjadi peningkatan titer antibodi sebanyak 4 kali atau lebih pada fase konvalesen. Tes HI tidak

dapat memberikan hasil yang cepat; konfirmasi ditegakkan paling tidak pada hari ke-7,

seringkali saat pasien sudah melewati masa kritis. Akhir-akhir ini telah dikembangkan beberapa

jenis alat diagnosis cepat (rapid test) untuk mendeteksi ant ibodi berdasarkan teknik

immunochromatographic test, salah satunya adalah FOKUS Dengue IgG/IgM Card Device.

Alat ini mendeteksi IgM dan IgG dalam darah, serum atau plasma dalam waktu 5 sampai 30

menit. Untuk mendapatkan diagnosis infeksi virus dengue yang lebih cepat dan tepat dengan

validitas dan reliabilitas yang tinggi, maka dilakukan uji validasi FOKUS Dengue IgG/IgM

Card Device dalam mendeteksi IgM dan IgG pada sejumlah serum pasien DBD dengan uji HI

sebagai baku emas. Hasil uji menunjukkan sensitivitas untuk diagnosis infeksi virus dengue

pada fase akut 98,20%; 98,20%; 88,20% masing-masing untuk serotipe Den-1, Den-2 and Den-

3. Akurasi diagnosis infeksi virus dengue 85,80%; 78,8%; 63,60% masing-masing untuk serotipe

Den-1, Den-2 and Den-3; hasil tersebut valid dengan batas kemaknaan 5%. Hasil uji menunjukkan

bahwa FOKUS dengue IgG/IgM card device mempunyai sensitivitas tinggi untuk menentukan

infeksi virus serotipe Den-1, Den-2, dan Den-3. FOKUS dengue IgG/IgM card devicemempunyai

akurasi yang baik untuk serotipe Den-1 dan Den-2.

Kata kunci: dengue, uji diagnostik, IgG, IgM

8

7/26/2019 617-669-1-PB

2/6

Maj Kedokt Indon, Volum: 59, Nomor: 1, Januari 2009 9

The Validity of FOKUS Dengue IgG/IgM Card Device as

Diagnostic Tool for Dengue Haemorrhagic Fever

Basundari Sri Utami, Harli Novriani, Djoko Yuwono

Biomedic and Pharmacy Research and Development , Research and Development Center,

Indonesian Ministry of Health, Jakarta

Abstract:As WHO recommendation, diagnosis of dengue virus infection is best based on clinically

symptom according to WHO criteria and confirmed by HI test to detect and differentiate primary

and secondary dengue virus infection. HI test used two blood samples (from acute and convales-

cence phase). When the convalescence phase titer shows 4 times greater than acute phase, it

concludes positive case. Therefore, this test was time consuming; the patients get the confirmation

at least on the 7thday of illness. Recently, many rapid test kits based on immunochromatography

principle are now commercially available. One of them is FOKUS Dengue IgG/IgM Card Device.

This kit could detect antibodies to dengue virus in human whole blood, serum or plasma within

5 to 30 minutes. In order to get alternative diagnosis for dengue virus infection, we compared

FOKUS Dengue IgG/IgM Card Device with HI test. The sensitivity for diagnosing dengue virus

infection in acute phase were 98,20%; 98,20%; 88,20% respectively for Den-1, Den-2 and Den-

3 serotype. The accuracy for diagnosing dengue virus infection in acute phase were 85,80%;

78,8%; 63,60% respectively for Den-1, Den-2 and Den-3 serotype; all that result were statisti-

cally valid at the confidence level of 5%. The results indicate that FOKUS dengue IgG/IgM card

showed a good sensitivity to identify virus infection of Den-1, Den-2, and Den-3 serotype. It also

showed a good accuracy for Den-1 and Den-2 serotype.

Key words:dengue, diagnostic tests, IgG, IgM

Pendahuluan

Demam berdarah dengue (DBD) masih merupakan

masalah kesehatan masyarakat, angka ke-sakitannya

meningkat dari tahun ke tahun, terutama di kota-kota besar

seperti Jakarta. Jumlah kasus DBD secara nasional

meningkat sejak tahun 1990 sampai 2006.1 Berdasarkan

laporan Direktorat Jendral Pengendalian Penyakit Menular

dan Penyehatan Lingkungan, meskipun jumlah kasus DBD

dari tahun ke tahun terus meningkat, angka case fatality

rate(CFR) menunjukkan penurunan. Meskipun demikian,

angka CFR terendah masih di atas standar nasional (kurang

dari 1%).2

Manifestasi klinis awal DBD yaitu demam dengue (DD)

tidak spesifik dan sulit dibedakan dengan infeksi/penyakit

lain, misalnya demam typoid, chikungunya dan lain-lain. Di

lain pihak, klinisi dituntut untuk menegakkan diagnosis

secepatnya, sehingga penanganan kasus DBD dapat

dilakukan segera untuk mencegah terjadinya kejadian fatal

pada terminasi kasus DBD.

Selama ini, diagnosis infeksi dengue ditegakkan

berdasarkan gejala klinis sesuai kriteria WHO yang

dikonfirmasi dengan haemaglution inhibitiontest(uji HI)

untuk mendeteksi ada/tidaknya antibodi virus dengue. Tes

ini membutuhkan waktu kurang lebih 24 jam dan mem-

butuhkan dua jenis sampel darah (fase akut dan konvalesens).

Bila pasien positif akan terjadi peningkatan titer antibodi

sebanyak 4 kali atau lebih pada fase konvalesens, sehingga

tes ini tidak dapat memberikan hasil yang cepat. Konfirmasi

ditegakkan paling tidak pada hari ke-7, seringkali saat pasien

sudah melewati masa kritis.3Oleh karena itu, diperlukan alat

diagnosis yang dapat mendeteksi infeksi virus dengue

dengan cepat dan tepat.

Akhir-akhir ini telah dikembangkan beberapa jenis alat

diagnosis cepat (rapid test) untuk mendeteksi antibodi

berdasarkan teknik immunochromatographic test, untuk

mendeteksi IgM dan IgG dalam darah, serum atau plasma

dalam waktu 5 sampai 30 menit. Salah satunya adalah FOKUS

Dengue IgG/IgM Card Device. Uji coba terdahulu menun-

jukkan sensitivitas 98,1% dan spesifisitas 98,9% untuk IgG,

serta sensitivitas 98,2% dan spesifisitas 96,7% untuk IgM.5

Dalam rangka mendapatkan alternatif cara diagnosis infeksi

virus dengue yang lebih cepat, valid, dan reliable, maka

akan dilakukan uji validasi FOKUS Dengue IgG/IgM Card

Device dalam mendeteksi IgM dan IgG pada sejumlah serum

pasien DBD di Jakarta yang diambil secara berpasangan (sta-

dium akut dan konvalesens). Kehadiran IgM dan IgG dapat

Validitas FOKUS Dengue IgG/IgM Card Device sebagai Alat Diagnosis Demam Berdarah Dengue

7/26/2019 617-669-1-PB

3/6



digunakan untuk menduga kejadian infeksi primer dan

sekunder pada pasien DBD dalam waktu paling lama 30 menit.

Kesimpulan/hasil tes dapat dipastikan dengan cepat,

sehingga penanganan terhadap pasien dapat segeradilakukan. Uji validasi meliputi sensitivitas, spesifisitas, nilai

duga positif, nilai duga negatif, positif likelihood ratio,

negatif likelihood ratio,dan akurasi FOKUS Dengue IgG/

IgM Card Device dibandingkan dengan hasil tes HI sebagai

baku emas (gold standard).

Metode

Suatu studi diagnostik dilakukan di laboratorium

Puslitbang Biomedis dan Farmasi selama bulan April dan

Mei 2007, dengan menggunakan sampel sera yang diambil

dari pasien DBD selama tahun 2006 dan sudah diketahui

hasil uji HI-nya. Sampel tersebut berasal dari RS Koja danRS Tarakan Jakarta yang tersimpan di laboratorium

Puslitbang Biomedis dan Farmasi, Badan Litbang Kesehatan,

Jakarta.

Besar sampel dihitung dengan menggunakan rumusdari

Lemeshow et al.4 Dengan asumsi menurut hasil penelitian

terdahulu sensitivitas 98,2% dan spesifisitas 96,7%, tingkat

kepercayaan 95%, dan persisi 5%, maka dibutuhkan minimal

28 subyek positif dan 50 subyek negatif berdasarkan uji HI.

Jumlah keseluruhan subyek dibulatkan menjadi 80. Dari

seluruh subyek dilakukan pemeriksaan sera fase akut dan

konvalesens, sehingga jumlah sampel yang diperiksa

seluruhnya adalah 160. Sampel yang diinklusi dalam penelitian

ini adalah sera yang sudah diuji HI, sedangkan sampel yangdiekslusi adalah sera yang volumenya kurang dan/atau

penyimpanan tidak memenuhi syarat. Pada penelitian ini uji

HI dan FOKUS Dengue IgG/IgMCard Device dilakukan

pada 99 sampel akut dan konvalesens tersangka pasien DBD.

Prinsip kerja uji FOKUS Dengue IgG/IgMCard Device

Sampel uji dapat berupa serum, plasma atau darah. Pada

saat sampel diteteskan, apabila di dalam darah, serum, atau

plasma tersangka pasien mengandung IgM dan atau IgG

anti virus salah satu atau lebih dari keempat serotipe virus

DBD, maka antibodi tersebut akan berikatan dengan partikel-

partikel biru yang sudah diikat dengan recombinant Den-gue envelope proteins antigen (Den-1, Den-2, Den-3 dan

Den-4). Pada saat gabungan antibodi-antigen bergerak

sepanjang kertas tes, gabungan kompleks tersebut akan

ditangkap oleh anti IgM atau IgG yang sudah ditempelkan

pada kertas tersebut, dan akan menyebabkan perubahan

warna biru pucat sampai biru gelap pada lokasi tempat IgM

atau IgG tersebut. Munculnya warna biru dipertimbangkan

sebagai hasil positif. Sebagai indikator untuk menentukan

benar tidaknya tes tersebut, garis kontrol warna merah harus

selalu muncul pada saat tes dilakukan.5

Untuk mengetahui konsistensi hasil FOKUS Dengue

IgG/IgMCard Device, uji dilakukan dengan pengulangan

tiga kali pada sera tersangka pasien DBD baik akut maupun

konvalesens. Keputusan infeksi primer atau sekunder

ditetapkan berdasarkan adanya IgG dan IgM anti virus den-

gue. Infeksi sekunder ditegakkan bila hanya terdapat IgG

atau bila IgG dan IgM hadir bersama-sama. Bila hanya terdapatIgM, dinyatakan sebagai infeksi primer.

Hasil

Hasil uji HI pada sampel tersangka pasien DBD

Berdasarkan uji HI pada sampel akut dan konvalesens,

jumlah infeksi primer yang disebabkan oleh virus Den-1, Den-

2 dan Den-3 ber turut-turut sebesar 2,0%, 5,1% dan 5,1%.

Jumlah infeksi primer yang disebabkan oleh virus Den-1, Den-

2 dan Den-3 tidak berbeda bermakna (x = 0,32, p > 0,05; x =

0,32, p > 0,05; dan x = 0,03, p > 0,05) (tabel 1). Jumlah infeksi

sekunder yang disebabkan oleh virus Den-1, Den-2 dan Den-

3 berturut-turut sebesar 69,7%, 51,5% dan 46,5%; jumlahinfeksi sekunder yang disebabkan Den-1 lebih banyak secara

bermakna dibandingkan dengan Den-2 dan Den-3 (x = 5,82,

p< 0,05 dan x = 9,82, p< 0,05); sedangkan jumlah antara Den-

2 dan Den-3 tidak berbeda nyata (x = 0,53, p>0,05).

Tabel 1. Hasil Uji HI pada Sampel Tersangka Pasien DBD

Hasil HI Jumlah

Positif Negatif

Primer Sekunder

Dengue-1 2 (2%) 69 (69,7%) 28 (28,3%) 9 9

Dengue-2 5 (5,1%) 51 (51,5%) 43 (43,4%) 9 9

Dengue-3 5 (5,1%) 46 (46,5%) 48 (48,5%) 9 9

Hasil FOKUS Dengue IgG/IgMCard Device

Hasil uji FOKUS Dengue IgG/IgMCard Device pada 99

sampel akut dibandingkan dengan uji HI dalam menentukan

pasien DBD serotipe Dengue-1 adalah sebagai berikut: tidak

ada sampel yang dinyatakan positif primer oleh kedua uji

(0%), sebanyak 65,6% (65/99) sampel sepakat dinyatakan

positif sekunder oleh kedua uji dan 19,2% (19/99) sampel

sepakat dinyatakan negatif oleh kedua uji. Hasil kedua uji

Tabel 2. Hasil Uji FOKUS Dengue IgG/IgMCard Device untuk

Diagnosis Serotipe Dengue-1 pada Pasien DBD

Fokus Dengue HI Den-1 Jumlah

IgG/IgM Card Device P ri me r S ek un de r N eg at if

Fase akut

primer 0 0 3 3

sekunder 1 6 5 6 7 2

negatif 1 4 1 9 2 4

Jumlah 2 6 9 2 8 9 9

Fase konvalesens

primer 0 0 3 3

sekunder 2 6 5 6 7 3

negatif 0 4 1 9 2 3

Jumlah 2 6 9 2 8 9 9

7/26/2019 617-669-1-PB

4/6



11

untuk menentukan infeksi primer dan sekunder DBD serotipe

Den-1 tidak berbeda bermakna (x = 0,35, p>0,05 dan x =

0,37, p>0,05) (tabel 2).

Dalam menentukan infeksi serotipe Dengue-2, hasilyang disepakati oleh kedua uji dalam menentukan infeksi

primer, sekunder dan negatif berturut-turut adalah 1% (1/

99), 51,5% (51/99), dan 23,23% (23/99) (tabel 3). Keputusan

infeksi primer serotipe Den-2 antara kedua uji tidak berbeda

bermakna (x = 0,01, p>0,05). Akan tetapi keputusan kedua

uji dalam menentukan infeksi sekunder berbeda secara

bermakna (x = 8,95, p< 0,05).

Tabel 3. Hasil Uji FOKUS Dengue IgG/IgM Card Device untuk


Fokus Dengue HI Den-2 Jumlah

IgG/IgM Card Device P ri me r S ek un de r Negat if

Fase akut

primer 1 0 2 3

sekunder 3 5 1 1 8 7 2

negatif 1 0 2 3 2 4

Jumlah 5 5 1 4 3 9 9

Fase konvalesens

primer 1 0 2 3

sekunder 4 5 0 1 9 7 3

negatif 0 1 2 2 2 3

Jumlah 5 5 1 4 3 9 9

x = 45,2, p 0,05),

tetapi untuk menentukan infeksi sekunder berbeda bermakna

(x = 13,71, p< 0,05).

Tabel 4. Hasil Uji FOKUS Dengue IgG/IgM Card Device untuk


Fokus Dengue HI Den-3

Jumlah

IgG/IgMCard Device P ri me r S ek un de r Negat if

Fase akut

primer 0 0 3 3

sekunder 2 4 3 2 7 7 2

negatif 3 3 1 8 2 4

Jumlah 5 4 6 4 8 9 9

Fase konvalesens

primer 0 0 3 3

sekunder 2 4 6 2 5 7 3

negatif 3 0 2 0 2 3

Jumlah 5 4 6 4 8 9 9

Hasil FOKUS Dengue IgG/IgMCard Device pada Sampel

Fase Konvalesens Tersangka Pasien DBD

Dalam menentukan infeksi serotipe Dengue-1 pada

sampel fase konvalesens, hasil yang disepakati oleh keduauji dalam menentukan infeksi primer, sekunder dan negatif

berturut-turut 0% (0/99), 65,5% (65/99) dan 19,2% (19/99)

(tabel 2). Hasil kedua uji untuk menentukan infeksi primer

dan sekunder DBD serotipe virus Den-1 tidak berbeda

bermakna (x = 0,14, p> 0,05 dan x = 0,60, p> 0,05).

Hasil yang disepakati dalam menentukan infeksi primer,

sekunder dan negatif serotipe Dengue-2 berturut-turut 1%

(1/99), 50,5% (50/99) dan 22,2% (22/99) (tabel 3). Hasil FOKUS

Dengue IgG/IgMCard Device untuk menentukan infeksi

primer Dengue-2 tidak berbeda bermakna (x = 0,02, p>0,05)

dibandingkan HI, tetapi untuk menentukan infeksi sekunder

berbeda bermakna dengan HI (x = 9,94, p 0,05), tetapi dalam menentukan infeksi sekunder

berbeda bermakna (x = 14,91, p

7/26/2019 617-669-1-PB

5/6



12

Tabel 5. Va lidi tas FOKUS Dengue IgG/IgM Card Device untuk Menentukan Pasien Positif atau Negatif DBD (Dengue-1,

Dengue-2, Dengue-3) pada Sampel Akut

Se Sp NDP NDN Akurasi Rasio kecen-

(%) (%) (%) (%) (%) derungan Kappa Nilai ppositif n ega ti f

Dengue-1 95,7 67,8 88,0 79,2 85,9

(92,8-93,0) (67,7-67,9) (87,9-88,1) (79,1-79,2) (85,8-85,9) 2,89 0,103 0,63

7/26/2019 617-669-1-PB

6/6



13

menentukan suatu penyakit dengan tingkat kegawatan tinggi

alat ini bisa diterima; dengan asumsi lebih baik terjadi over

diagnosis dari pada tidak terdiagnosis, sepanjang reliabilitas

dapat diterima. Keunggulan suatu perangkat diagnosis

adalah apabila dapat mendeteksi dan menentukan penyakit

secepat mungkin dengan reliabilitas tinggi. Hal ini didukung

oleh angka rasio kecenderungan untuk diagnosis sera akut

yang baik: terbaik untuk serotipe Den-2 (RKP = 2,11 dan

RKN = 0,033), kemudian serotipe Den-1 (RKP = 2,89 dan

RKN = 0,103) dan Den-3 (RKP = 1,411 dan RKN = 0,31).

Konsistensi hasil FOKUS DENGUE IgG/IgM CARD DEVICE

antara uji pertama, kedua dan ketiga sangat baik (kappa =

0,95). Dengan hasil tersebut, FOKUS Dengue IgG/IgMCard

Device menunjukkan validitas dan reliabilitas yang baik

terutama pada sampel pasien akut DBD.

Ucapan Terima Kasih

Ucapan terimakasih peneliti sampaikan kepada Kepala

Pusat Penelitian Biomedis dan Farmasi, Badan Penelitian dan

Pengembangan Kesehatan, yang telah memberikan

kesempatan untuk melakukan uji ini. Kepada Drg. Sekar

Tuti,MKes serta teman-teman litkayasa (John Master Saragih,

Diana Siti Hutauruk, Farida Siburian, Siti Mariani Saragih,

Dewi Parwati), penulis mengucapkan terima kasih yang

sebesar besarnya atas segala bantuan dan dukungannya

untuk kegiatan penelitian di laboratorium. Kepada para para

dokter dan paramedis di RSU Koja dan RSU Tarakan, penulis

mengucapkan terima kasih yang sebanyak banyaknya atas

semua bantuan dan partisipasinya dalam pengambilan

spesimen sehingga penelitian ini dapat berjalan dengan baik.

Daftar Pustaka

1. Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Pencegahan dan

penanggulangan penyakit demam dengue dan demam berdarah

dengue. Petunjuk lengkap terjemahan dari WHO Regional Publi-

cation SEARO 2003; 29:8 Prevention and Control of Dengue

and Dengue Haemorrhagic Fever.

2. Dirjen Pemberantasan Penyakit dan Penyehatan Lingkungan,

Departemen Kesehatan RI. Rapat kerja pemberantasan penyakit

bersumber binatang tahun 2006.

3. Kandun IN. Upaya penanggulangan dan permasalahan KLB DBD

tahun 2004. Warta Demam Berdarah 2004; 9 (VIII): 2-8.

4. Lemeshow S, Hosmer DW, Klar J, Lwanga SK. Besar sampeldalam penelitian kesehatan (terjemahan). Gajah Mada Univer-

sity Press; 1990.

5. Brosur FOKUS Standard Diagnostics INC.

6. Utami BS, Yuwono D, Novriani H. Komparasi uji HI dan Elisa

sebagai baku emas suatu uji validasi perangkat diagnostik cepat

demam berdarah dengue. Maj Kedokt Indon.2008;58:421-7.

EV

617-669-1-PB

Documents

Transcript of 617-669-1-PB