1. Uji Asam Amino[1][1]

7/23/2019 1. Uji Asam Amino[1][1]

1/15

LAPORAN TETAP PRAKTIKUM BIOKIMIA I

I. NOMOR PERCOBAAN : I

II. JUDUL PERCOBAAN : UJI ASAM AMINO

III. TUJUAN PERCOBAAN : Untuk mengetahui uji positif dan negatif

terhadap asam amino dari protein melalui uji Millon, uji Hopkins-ole, dan uji

Ninhidrin!

IV. DASAR TEORI

"rotein

"rotein ditemukan di dalam semua sel dan semua #agian sel $ang amat

#er%ariasi $aitu terdapat ratusan jenis $ang #er#eda dapat ditemukan dalam satu sel!

"rotein #erperan penting dalam struktur dan fungsi semua sel makhluk hidup dan %irus!

"eranan penting protein antara lain untuk mem#entuk jaringan otot, &at pengatur serta

se#agai adangan makanan dan energi dalam tu#uh! "rotein merupakan salah satu dari

#iomolekul raksasa, selain polisakarida, lipid, dan polinukleotida, $ang merupakan

pen$usun utama makhluk hidup $ang juga merupakan polimer dari monomer-monomer

asam amino $ang dihu#ungkan satu sama lain dengan ikatan peptida! "rotein tersusun

dari kar#on, hidrogen, oksigen, dan nitrogen, terkadang ditemukan pula sulfur dan

fosfor se#agai pen$usun protein!

'iasan$a ditemukan dua puluh asam amino dalam protein dan masing-masing

jenis protein memiliki urutan asam amino $ang unik seara genetik $ang dirumuskan

untuk menentukan #entuk dan fungsin$a! (e#an$akan protein adalah molekul #esar

$ang mungkin #erisi #e#erapa ratus asam amino $ang tersusun dalam a#ang-a#ang

dan rantai! Setiap protein $ang #er#eda terdiri dari asam amino $ang #erga#ung dalam#er#agai urutan dengan kom#inasi $ang hampir tak ter#atas $ang memiliki peran

se#agai en&im, hormon, imunoglo#ulin, dll dan terli#at dalam transportasi oksigen,

kontraksi otot, transpor elektron dan kegiatan lain di seluruh tu#uh!

"rotein menurut sum#ern$a ter#agi menjadi he)ani dan na#ati! Sum#er protein

he)ani $aitu daging dan organ-organ dalam he)an seperti hati, pankreas, ginjal, paru,

jantung! *ang terakhir ini terdiri atas #a#at dan iso +usus halus dan usus #esar! Susu

dan telur termasuk pula sum#er protein he)ani $ang #erkualitas tinggi! Ikan, kerang-

1

7/23/2019 1. Uji Asam Amino[1][1]

2/15

kerangan dan jenis udang merupakan kelompok sum#er protein $ang #aik, karena

mengandung sedikit lemak, tetapi ada $ang alergis terhadap #e#erapa jenis sum#er

protein hasil laut ini! A$am dan jenis #urung lain serta telurn$a, juga merupakan sum#er

protein he)ani $ang #erkualitas #aik! Harus diperhatikan #ah)a telur #agian merahn$a

mengandung #an$ak kolesterol, sehingga se#aikn$a ditinggalkan pada diet rendah

kolesterol! Jenis kelompok sum#er protein he)ani ini mengandung sedikit lemak,

sehingga #aik #agi komponen susunan hidangan rendah lemak! Namun kerang-kerangan

mengandung #an$ak kolesterol, sehingga tidak #aik untuk dipergunakan dalam diet

rendah kolesterol! (aang-kaangan dan #iji-#ijian seperti kaang kedelai, kaang

tanah, kaang hijau, kaang koro, kelapa dan lain-lain merupakan ontoh protein dari

sum#er na#ati! Asam amino $ang terkandung dalam protein ini tidak selengkap pada

protein he)ani, namun penam#ahan #ahan lain $aitu dengan menampurkan dua atau

le#ih sum#er protein $ang #er#eda jenis asam amino pem#atasn$a akan saling

melengkapi kandungan proteinn$a!

Asam Amino

alam molekul protein, asam-asam amino saling dirangkaikan melalui reaksi

gugusan kar#oksil asam amino $ang satu dengan gugusan amino dari asam amino $ang

lain, sehingga terjadi ikatan $ang dise#ut ikatan peptida! Asam amino sendiri

merupakan sen$a)a $ang memiliki satu atau le#ih gugus kar#oksil +./OOH dan satu

atau le#ih gugus amino +.NH0 $ang salah satun$a terletak pada atom / tepat dise#elah

gugus kar#oksil +atom / alfa! Asam-asam amino #erga#ung melalui ikatan peptida

$aitu ikatan antara gugus kar#oksil dari asam amino dengan gugus amino dari asam

amino $ang disampingn$a! Ikatan pepetida ini merupakan ikatan tingkat primer! ua

molekul asam amino $ang saling diikatkan dengan ara demikian dise#ut ikatandipeptida! 'ila terdapat dua molekul asam amino $ang saling diikatkan dengan ara

demikian dise#ut ikatan dipeptida! Sedangkan tiga molekul asam amino dise#ut

tripeptida dan #ila le#ih #an$ak dan mele#ihi dise#ut pol$peptida! Oligopeptida adalah

pol$peptida $ang han$a terdiri dari sejumlah molekul asam amino! Molekul protein

adalah suatu pol$peptida dimana sejumlah #esar asam-asam aminon$a saling #ertautan

dengan ikatan peptida terse#ut!

2

7/23/2019 1. Uji Asam Amino[1][1]

3/15

(eduapuluh asam amino pada protein seringkali dipandang se#agai asam amino

#aku, utama, dan normal untuk mem#edakan molekul-molekul ini dari jenis-jenis asam

amino lain $ang ada pada organisme hidup, tetapi tidak terdapat di dalam protein! Asam

amino #aku dapat din$atakan dengan singkatan tiga huruf atau lam#ang satu huruf $ang

digunakan seara ringkas untuk menunjukkan komposisi dan urutan asam amino di

dalam rantai polipeptida! /ontohn$a adalah asam amino 1l$sin din$atakan dengan 1l$!

ari duapuluh asam amino, han$a 2 asam amino $ang merupakan asam amino essensial

$ang terdapat dalam protein dan ketersediaann$a menentukan kualitas gi&i protein!

Asam amino essensial adalah suatu kerangka molekul penting pen$usun protein $ang

di#utuhkan oleh tu#uh, tetapi tu#uh tidak dapa memproduksin$a sendiri jadi tu#uh

harus memasokn$a dari luar $aitu dari makanan! (edelapan asam amino essensial itu

adalah Isoleusin, 3eusin, Metionin, 4enilalanin, 5reosin, 6alin, dan 5riptofan

1am#ar struktur asam amino $aitu :

Asam amino mempun$ai dua gugus pada tiap molekuln$a, $aitu gugus amino dan

gugus kar#oksil, $ang digam#arkan se#agai struktur ion dipolar! 1ugus amino dan

gugus kar#oksil pada asam amino menunjukkan sifat-sifat spesifikn$a! (arena asam

amino mengandung kedua gugus terse#ut, sen$a)a ini akan mem#erikan reaksi kimia

$ang $ang menirikan gugus-gugusn$a! 5erdapat &)itter ion +atau ionisasi ganda pada

gam#ar struktur asam amino terse#ut! Ion ganda akan men$e#a#kan #ereaksi denganasam ataupun #asa!

1olongan Asam Amino

Semua asam amino didalam pada protein mempun$ai iri $ang sama, $aitu

gugus kar#oksil dan amino diikat pada atom kar#on $ang sama! 5etapi masing-masing

#er#eda satu dengan $ang lain pada gugus 7-n$a, $ang #er%ariasi dalam struktur,

ukuran, muatan listrik, dan kelarutan dalam air! 'e#erapa asam amino mempun$ai

3

7/23/2019 1. Uji Asam Amino[1][1]

4/15

reaksi $ang spesifik $ang meli#atkan gugus 7-n$a! 8mapt golongan dari 09 asam amino

#erdasarkan strukturn$a $aitu :

1olongan dengan gugus 7 nonpolar atau hidrofo#ik, $aitu Alanin, 6alin, 3eusin,

Isoleusin, "rolin, 4enilalanin, 5riptofan dan Metionin

1olongan dengan gugus 7 polar, tetapi tidak #ermuatan, $aitu 3isin, Serin,

5reonin, Sistein, 5irosin, Asparagin dan 1lutamin

1olongan dengan gugus 7 #ermuatan negatif, $aitu Asam 1lutamat, dan Asam

Aspartat

1olongan dengan gugus 7 #ermuatan positif, $aitu Argini, 3isin, Histidin!

Sifat Asam Amino

Apa#ila asam amino dilarutkan maka ia asam amino akan terionisasi dan dapat

#ersifat se#agai asam atau #asa! Sifat-sifat asam dan #asa ini sangat penting dan dapat

diterapkan dalam seni pemisahan, identifikasi, dan kuatifikasi asam amino $ang

#er#eda, $aitu dalam hal menentukan komposisi dan urutan asam amino dari molekul

protein, $ang didasarkan atas tingkah laku asam #asa $ang khas! "rotein $ang dilarutkan

ke dalam larutan asam atau #asa kuat, akan mem#e#askan unit pem#angun asam amino

dari ikatan ko%alen $ang menghu#ungkan molekul-molekul ini menjadi rantai! Unit

asam amino $ang #e#as $ang ter#entuk merupakan molekul $ang relatif keil, dan

struktur masing-masing telah diketahui!

ari duapuluh asam amino terse#ut #ersifat optik aktif $akni mereka dapat

memutar sinar #idang polarisasi meuju ke suatu arah atau ke#alikann$a! (arena susunan

tetrahedral ikatan %alensi disekitar atom kar#on pada asam amino, keempat gugus

su#stituen $ang #er#eda ini dapat menempati dua susunan $ang #er#eda dalam ruang,

$ang merupakan #a$anngan ermin $ang tidak saling menutupi sesaman$a! (edua

#entuk ini dinamakan isomer optik, enensiomer, atau stereoisomer!

V. ALAT DAN BAHAN

Alat $ang digunakan :

;! 5a#ung 7eaksi

0! 7ak 5a#ung 7eaksi

=! 'unsen

4

7/23/2019 1. Uji Asam Amino[1][1]

5/15

>! "ipet 5etes

?! 1elas Ukur

@! 3a#u Ukur

2! /orong

! (ertas saring

;9! "enjepit 5a#ung

;;! 'atang "engaduk

'ahan $ang digunakan :

;! 7eagen Millon

0! 7eagen Ninhidrin

>! (uning 5elur

?! "utih 5elur

@! Ikan

2! Susu

VI. PROSEDUR PERCOBAAN

;! Uji Millon

"em#uatan 7eagen Millon : 3arutkan ;9 gram merur$ dalam 09 ml asam nitrat

pekat! Apa#ila telah melarut semua dan uap oklat tidak kelihatan lagi, enerkan

dengan ?9 ml air! (emudian simpan!

Uji Millon : 5am#ahkan > tetes reagen Millon ke dalam < ml larutan protein,

panaskan ampuran #aik-#aik! Jika reagen $ang digunakan terlalu #an$ak, maka

)arna akan hilang pada pemanaasan!

Ulangi langkah kedua dengan sampel protein $ang lain

"ertan$aan :

;! Apakah $ang terjadi jika garam merkuri ditam#ahkan ke dalam larutan

proteinB

0! Mengapa larutan al#umin terkoagulasiB

0!Uji Ninhidrin

5am#ahkan 9!> ml larutan Ninhidrin 9,;C ke dalam < ml larutan protein!

"anaskan hingga mendidih!

5

7/23/2019 1. Uji Asam Amino[1][1]

6/15

Ulangi pero#aan dengan sampel protein $ang lain

"ertan$aan:

;! Darna apa $ang ter#entukB0! 1ugus apa $ang mem#erikan uji positifB

VII. HASIL PENGAMATAN

No Uji "ero#aan Hasil "engamatan

1. Uji Millon

A. Putih Tlu!

< ml larutan "utih 5elur > C

E > tetes reagen Millon,

dipanaskan

< ml larutan "utih 5elur = C


dipanaskan

< ml larutan "utih 5elur < C


dipanaskan

< ml larutan "utih 5elur 0 C


dipanaskan

larutan "utih 5elur > C +tidak #er)arna

E 7eagen Millon +tidak #er)arna

endapan putih 8ndapan merah

#an$ak sekali

larutan "utih 5elur = C +tidak #er)arna



#an$ak

larutan "utih 5elur < C +tidak #er)arna



sedikit #an$ak

larutan "utih 5elur 0 C +tidak #er)arna



sedikit

6

7/23/2019 1. Uji Asam Amino[1][1]

7/15

< ml larutan "utih 5elur ; C


dipanaskan

B. Kunin" Tlu!

< ml larutan (uning 5elur >

C E > tetes reagen Millon,

dipanaskan

< ml larutan (uning 5elur =


dipanaskan

< ml larutan (uning 5elur tetes reagen Millon,

dipanaskan

< ml larutan (uning 5elur 0


dipanaskan

< ml larutan (uning 5elur ;


dipanaskan

larutan "utih 5elur ; C +tidak #er)arna



sedikit

larutan (uning 5elur > C +tidak

#er)arna E 7eagen Millon +tidak

#er)arna endapan putih

8ndapan merah #an$ak sekali

larutan (uning 5elur = C +tidak



8ndapan merah #an$ak

larutan (uning 5elur < C +tidak



8ndapan merah sedikit #an$ak

larutan (uning 5elur 0 C +tidak



8ndapan merah sedikit

larutan (uning 5elur ; C +tidak



8ndapan merah sedikit

7

7/23/2019 1. Uji Asam Amino[1][1]

8/15

C. Su#u

< ml larutan susu > C E >

tetes reagen Millon,

dipanaskan

< ml larutan susu = C E >


dipanaskan

< ml larutan susu < C E >


dipanaskan

< ml larutan susu 0 C E >


dipanaskan

< ml susu ; C E > tetes

reagen Millon, dipanaskan

D. I$%n

< ml larutan ikan > C E >


dipanaskan

larutan susu > C +tidak #er)arna E

7eagen Millon +tidak #er)arna


#an$ak sekali

larutan susu = C +tidak #er)arna E



#an$ak

larutan susu < C +tidak #er)arna E



sedikit #an$ak

larutan susu 0 C +tidak #er)arna E



sedikit

larutan susu ; C +tidak #er)arna E



sedikit

larutan ikan > C +tidak #er)arna E



#an$ak sekali

8

7/23/2019 1. Uji Asam Amino[1][1]

9/15

< ml larutan ikan = C E >


dipanaskan

< ml larutan ikan < C E >


dipanaskan

< ml larutan ikan 0 C E >


dipanaskan

< ml larutan ikan ; C E >


dipanaskan

E. Gli#in

< ml larutan glisin ; C E >


dipanaskan

D. Ti!o#in

< ml larutan tirosin ; C E >


dipanaskan

larutan ikan = C +tidak #er)arna E



#an$ak

larutan ikan < C +tidak #er)arna E



sedikit #an$ak

larutan ikan 0 C +tidak #er)arna E



sedikit

larutan ikan ; C +tidak #er)arna E



sedikit

larutan glisin ; C +tidak #er)arna E


tidak #ereaksi

larutan tirosin ; C +tidak #er)arna E


larutan merah dan endapan merah

9

7/23/2019 1. Uji Asam Amino[1][1]

10/15

Uji Ninhi&!in

A. Putih Tlu!

< ml larutan "utih 5elur > C

E > tetes reagen Ninhidrin,

dipanaskan

< ml larutan "utih 5elur = C


dipanaskan

< ml larutan "utih 5elur < C


dipanaskan

< ml larutan "utih 5elur 0 C


dipanaskan

< ml larutan "utih 5elur ; C


dipanaskan

B. Kunin" Tlu!

< ml larutan (uning 5elur >

C E > tetes reagen

Ninhidrin, dipanaskan

larutan "utih 5elur > C +tidak #er)arna

E 7eagen Ninhidrin +tidak #er)arna

larutan #er)arna ungu pekat

larutan "utih 5elur = C +tidak #er)arna


larutan #er)arna ungu sedikit pekat

larutan "utih 5elur < C +tidak #er)arna


larutan #er)arna ungu

larutan "utih 5elur 0 C +tidak #er)arna


larutan #er)arna ungu sedikit pudar

"utih 5elur ; C +tidak #er)arna E

7eagen Ninhidrin +tidak #er)arna

larutan #er)arna ungu pudar

larutan (uning 5elur > C +tidak

#er)arna E 7eagen Ninhidrin +tidak

#er)arna larutan #er)arna ungu

pekat

larutan (uning 5elur = C +tidak


10

7/23/2019 1. Uji Asam Amino[1][1]

11/15

< ml larutan (uning 5elur =

C E > tetes reagen


< ml larutan (uning 5elur tetes reagen


< ml larutan (uning 5elur 0

C E > tetes reagen


< ml larutan (uning 5elur ;

C E > tetes reagen


C. Su#u

< ml larutan susu > C E >

tetes reagen Ninhidrin,

dipanaskan

< ml larutan susu = C E >


dipanaskan

< ml larutan susu < C E >


sedikit pekat

larutan (uning 5elur < C +tidak



larutan (uning 5elur 0 C +tidak



sedikit pudar

larutan (uning 5elur ; C +tidak


#er)arna larutan #er)arna

ungu pudar

larutan susu > C +tidak #er)arna E



larutan susu = C +tidak #er)arna E7eagen Ninhidrin +tidak #er)arna


larutan susu < C +tidak #er)arna E



11

7/23/2019 1. Uji Asam Amino[1][1]

12/15


dipanaskan

< ml larutan susu 0 C E >


dipanaskan

< ml larutan susu ; C E >


dipanaskan

D. I$%n

< ml larutan Ikan > C E >


dipanaskan

< ml larutan Ikan = C E >


dipanaskan

< ml larutan Ikan < C E >


dipanaskan

< ml larutan Ikan 0 C E >


dipanaskan

larutan susu 0 C +tidak #er)arna E


larutan #er)arna ungu sedikit

pudar

larutan susu ; C +tidak #er)arna E



larutan Ikan > C +tidak #er)arna E



larutan Ikan = C +tidak #er)arna E



larutan Ikan < C +tidak #er)arna E



larutan ikan 0 C +tidak #er)arna E7eagen Ninhidrin +tidak #er)arna

larutan #er)arna ungu sedikit

pudar

larutan ikan ; C +tidak #er)arna E



12

7/23/2019 1. Uji Asam Amino[1][1]

13/15

< ml larutan Ikan ; C E >


dipanaskan

E. Gli#in

< ml larutan glisin ; C E >


dipanaskan

larutan glisin ; C +tidak #er)arna E



VIII. PERSAMAAN REAKSI

Uji MILLON

OHO

OH

N+

H

H

H

tyrosin

+ Hg+ NO2

OH

O

OH

N+

HH

HHg

mercuri

berwarna merah bata

7eaksi Negatif pada asam amino 1lisin :

' HgNO< +5idak 'ereaksi

13

7/23/2019 1. Uji Asam Amino[1][1]

14/15

7eaksi "ositif pada Al#umin +"utih 5elur dan (uning 5elur :

UJI NINHI7IN

7eaksi "ositif pem#entukan kompleks #er)arna ungu :

CH3

NH2 O

OH+

O

O

OH

OH

O

O

N

O

O

+ CH3

O

H

+ CO2 + 3H2O + H

+

asam amino ninhidrin

berwarna ungu

I(. PEMBAHASAN

(. KESIMPULAN

14

7/23/2019 1. Uji Asam Amino[1][1]

15/15

(I. DA)TAR PUSTAKA

15

1. Uji Asam Amino[1][1]

Documents

Transcript of 1. Uji Asam Amino[1][1]