UJI POTENSIASI INFUSA DAUN Macaranga tanarius L. TERHADAP GLIBENKLAMIDA SEBAGAI PENURUN KADAR GLUKOSA DARAH PADA TIKUS PUTIH JANTAN GALUR WISTAR YANG TERBEBANI
GLUKOSA
SKRIPSI
Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.)
Program Studi Farmasi
Oleh:
Ana Puspita Dewi
NIM : 088114153
FAKULTAS FARMASIUNIVERSITAS SANATA DHARMA
YOGYAKARTA2012
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
i
UJI POTENSIASI INFUSA DAUN Macaranga tanarius L. TERHADAP GLIBENKLAMIDA SEBAGAI PENURUN KADAR GLUKOSA DARAH PADA TIKUS PUTIH JANTAN GALUR WISTAR YANG TERBEBANI
GLUKOSA
SKRIPSI
Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.)
Program Studi Farmasi
Oleh:
Ana Puspita Dewi
NIM : 088114153
FAKULTAS FARMASIUNIVERSITAS SANATA DHARMA
YOGYAKARTA2012
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
iv
HALAMAN PERSEMBAHAN
If better is possible, good is not enough
Jika kita menginginkan kesuksesan yang jauh melebihi orang lain pada umumnya, maka berikanlah usaha yang lebih dibandingkan usaha orang-orang pada umumnya.
Don’t be afraid to dream
Don’t be afraid to be different
Believe in your dream and you will get it.
Karya ini kupersembahkan untuk:
Tuhan Yesus Kristus yang menjadi inspirasiku
Orangtua dan kakak tercinta yang selalu mendukungku
Teo Christianto yang selalu menjadi penyemangat dan pengisi hatiku
Sahabat-sahabat dan almamaterku
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
vii
PRAKATA
Puji syukur kepada Tuhan Yang Maha Kasih atas berkatnya yang
melimpah, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi berjudul “Uji Potensiasi
Infusa Daun Macaranga tanarius L. terhadap Glibenklamida sebagai
Penurun Kadar Glukosa Darah pada Tikus Putih Jantan Galur Wistar yang
Terbebani Glukosa” dengan baik.
Skripsi ini disusun untuk memenuhi salah satu syarat memperoleh gelar
Sarjana Farmasi (S.Farm.) program studi Farmasi Universitas Sanata Dharma.
Penulis menyadari sepenuhnya bahwa dalam pelaksanaan dan penulisan
skripsi, tidak terlepas dari bantuan dan campur tangan dari berbagai pihak. Oleh
karena itu, pada kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih kepada :
1. Ipang Djunarko, M.Sc., Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas
Sanata Dharma.
2. Phebe Hendra, M.Si., Ph.D., Apt. selaku Dosen Pembimbing Utama skripsi
ini atas segala kesabaran untuk selalu mendukung, memotivasi, membimbing,
dan memberi masukan serta pengarahan kepada penulis dalam menyusun
skripsi ini.
3. dr. Fenty, M.Kes., Sp.PK selaku Dosen Penguji skripsi atas bantuan dan
masukan kepada penulis demi kemajuan skripsi ini.
4. Prof. Dr. C.J. Soegihardjo, Apt. selaku Dosen Penguji skripsi atas bantuan
dan masukan kepada penulis demi kemajuan skripsi ini.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
viii
5. Rini Dwiastuti, M.Sc., Apt. selaku Kepala Laboratorium yang yang telah
memberikan ijin penggunaan semua fasilitas laboratorium guna penelitian
skripsi ini
6. Jeffry Julianus, M.Si. selaku Dosen Pembimbing Akademik penulis atas
segala pendampingan, dukungan dan bimbingan selama ini.
7. drh. Ari, Mas Parjiman, Mas Heru, Mas Kayat, Mas Yuwono, Mas Wagiran,
dan semua staf laboratorium Farmasi yang telah bersedia membantu dan
menemani selama penelitian berlangsung.
8. Mas Narto, Mas Dwi, dan Mas Sarwanto tim sekretariat S1 Farmasi yang
telah membantu dalam memberikan informasi dan bantuan dalam hal
administrasi untuk penyelesaian skripsi ini.
9. Tim PIMNAS di UNHAS Makassar 2011, yaitu Rm. Dr. Kuntoro Adi,
MA,M.Sc., SJ serta seluruh tim, dosen pendamping, dan mahasiswa terutama
Tim PKMK “Mie Ganyol”, yang turut ambil bagian dalam dinamika
PIMNAS yang tak terlupakan.
10. Bapak Ipang Djunarko, M,Sc., Apt. selaku pembimbing PKMK “Mie
Ganyol” dan Ibu C.M. Ratna Rini Nastiti, M.Pharm, Apt. selaku pembimbing
tim “Spanish” Business Plan USD yang selalu memberikan bimbingan dalam
hal berpresentasi dan memberikan semangat kepada penulis.
11. dr. Purwaka dan perawat ruang ICCU, ruang Cattleya, dan ruang 3C
RS.Bethesda yang telah memberikan pelayanan yang sangat berarti sehingga
penulis bisa sembuh total dan dapat melanjutkan penulisan skripsi ini yang
sempat tertunda.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
x
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL ..................................................................................... i
HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ........................................... ii
HALAMAN PENGESAHAN ....................................................................... iii
HALAMAN PERSEMBAHAN ................................................................... iv
PERNYATAAN KEASLIAN KARYA ....................................................... v
LEMBAR PERSETUJUAN PUBLIKASI KARYA ILMIAH ..................... vi
PRAKATA .................................................................................................... vii
DAFTAR ISI ................................................................................................. x
DAFTAR TABEL ......................................................................................... xiv
DAFTAR GAMBAR .................................................................................... xv
DAFTAR LAMPIRAN ................................................................................. xvi
INTISARI ...................................................................................................... xvii
ABSTRACT .................................................................................................... xviii
BAB I. PENGANTAR .................................................................................. 1
A. Latar Belakang ....................................................................................... 1
1. Perumusan masalah .......................................................................... 4
2. Keaslian penelitian ........................................................................... 4
3. Manfaat penelitian ........................................................................... 5
B. Tujuan Penelitian ................................................................................... 5
BAB II. PENELAAHAN PUSTAKA ........................................................... 6
A. Diabetes Mellitus .................................................................................. 6
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xi
1. Klasifikasi diabetes mellitus ............................................................ 6
2. Gejala-gejala penyakit diabetes mellitus .......................................... 7
3. Pengelolaan diabetes mellitus .......................................................... 8
4. Transport glukosa ............................................................................ 10
5. Uji antidiabetes ................................................................................ 12
6. Metode penetapan kadar glukosa darah ........................................... 14
B. Glibenklamida ........................................................................................ 15
1. Deskripsi glibenklamida .................................................................. 15
2. Farmakodinamika glibenklamida ..................................................... 15
3. Mekanisme aksi glibenklamida ........................................................ 16
C. Macaranga tanarius (L.) ........................................................................ 18
1. Taksonomi ........................................................................................ 18
2. Nama daerah .................................................................................... 18
3. Morfologi ......................................................................................... 18
4. Kandungan kimia ............................................................................. 19
5. Khasiat dan kegunaan ...................................................................... 20
D. Infundasi ................................................................................................ 21
E. Antaraksi Farmakokinetika .................................................................... 22
F. Landasan Teori ....................................................................................... 24
G. Hipotesis ................................................................................................ 25
BAB III. METODOLOGI PENELITIAN .................................................... 26
A. Jenis dan Rancangan Penelitian ............................................................. 26
B. Variabel dan Definisi Operasional ......................................................... 26
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xii
1. Variabel penelitian ........................................................................... 26
2. Definisi operasional ......................................................................... 27
C. Bahan dan Alat Penelitian ...................................................................... 28
1. Bahan penelitian ............................................................................... 28
2. Alat atau instrumen penelitian ......................................................... 29
D. Tata Cara Penelitian ............................................................................... 30
1. Determinasi tanaman ....................................................................... 30
2. Pengumpulan bahan ......................................................................... 30
3. Pembuatan simplisia daun M.tanarius ............................................. 30
4. Pembuatan infusa daun M.tanarius 50,0 % (b/v) ............................. 30
5. Perhitungan dosis pemberian M.tanarius ......................................... 31
6. Preparasi bahan ................................................................................ 31
7. Percobaan pendahuluan .................................................................... 32
8. Penetapan kadar glukosa darah ........................................................ 34
E. Tata Cara Analisis Hasil ........................................................................ 35
BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ..................................................... 36
A. Determinasi Tanaman M.tanarius .......................................................... 36
B. Pembuatan Simplisia dan Infusa Daun M.tanarius ................................ 36
C. Uji Efek Penurunan Kadar Glukosa Darah ............................................ 38
1. Penetapan waktu pemberian glibenklamida ..................................... 38
2. Penetapan waktu pemberian infusa daun M.tanarius ...................... 41
3. Uji efek penurunan kadar glukosa darah kombinasi glibenklamida
dan infusa daun M.tanarius .............................................................. 43
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xiii
BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN ....................................................... 56
A. Kesimpulan ............................................................................................ 56
B. Saran ...................................................................................................... 56
DAFTAR PUSTAKA .................................................................................... 57
LAMPIRAN................................................................................................... 61
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xiv
DAFTAR TABEL
Tabel I. Isi pereaksi enzime Glucose GOD-PAP........................................... 28
Tabel II. Volume pengukuran kadar glukosa darah........................................ 34
Tabel III. Nilai rata-rata LDDK0-240 ± SE larutan Glibenklamida sebelum
UTGO............................................................................................... 41
Tabel IV. Hasil uji Post Hoc LSD LDDK0-240 penurunan glukosa darah tikus
akibat pemberian Glibenklamida ..................................................... 43
Tabel V. Nilai LDDK0-240 pemberian infusa daun M.tanarius ....................... 44
Tabel VI. Rata-rata kadar glukosa darah dan LDDK0-240 pada setiap
kelompok perlakuan ......................................................................... 46
Tabel VII. Rata-rata LDDK0-240 SE masing-masing perlakuan ..................... 48
Tabel VIII. Hasil analisis homogenitas variansi menggunakan uji One Way
Anova................................................................................................ 50
Tabel IX. Hasil uji Post Hoc LSD LDDK0-240 pada kelompok perlakuan
dengan taraf kepercayaan 95%......................................................... 51
Tabel X. Prosentase perbedaan antara kelompok kontrol dan pembanding
terhadap kelompok perlakuan kombinasi......................................... 54
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xv
DAFTAR GAMBAR
GAMBAR 1. Sekresi insullin akibat peningkatan kadar glukosa dalam
darah......................................................................................... 11
GAMBAR 2. Struktur kimia glibenklamida (5-chloro-N-(4-[N-
(cyclohexylcarbamoyl)sulfamoyl]phenethyl)-2-
methoxybenzamide) (Rayanm, Rao, dan Ramana, 2011)........... 15
GAMBAR 3. Mekanisme aksi glibenklamida sebagai obat antidiabetes.......... 17
GAMBAR 4. Struktur ellagitannins yang telah diisolasi dari daun
M.tanarius, yaitu mallotinic acid (1), corilagin (2),
macatannin A (3), chebulagic acid (4), dan macatannin B (5) .. 20
GAMBAR 5. Bagan penggolongan antaraksi obat berdasarkan perubahan
efek.............................................................................................. 22
GAMBAR 6. Reaksi enzimatik glukosa dan reagen GOD-PAP....................... 40
GAMBAR 7. Diagram batang penentuan selang waktu pemberian larutan
glibenklamida sebelum UTGO terhadap mean LDDK0-240 ±SE . 42
GAMBAR 8. Diagram batang waktu pemberian infusa daun M.tanarius
terhadap nilai LDDK0-240............................................................. 44
GAMBAR 9. Kurva hubungan antara waktu sampling dan kadar rata-rata
glukosa darah akibat pemberian aquadest, glibenklamida, dan
infusa daun M.tanarius ............................................................... 47
GAMBAR 10.Diagram batang nilai rata-rata LDDK0-240 SE dari masing-
masing perlakuan ........................................................................ 49
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xvi
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Daun Macaranga tanarius L. ..................................................... 61
Lampiran 2. Infusa daun M.tanarius................................................................ 61
Lampiran 3. Tikus putih jantan galur Wistar .................................................. 62
Lampiran 4. Microlab ...................................................................................... 62
Lampiran 5. Surat determinasi tanaman M.tanarius........................................ 63
Lampiran 6. Kadar glukosa darah tikus pada masing-masing kelompok
perlakuan ..................................................................................... 64
Lampiran 7. Hasil uji Kolmogorov-Smirnov LDDK0-240 perlakuan................. 67
Lampiran 8. Hasil uji One Way ANOVA LDDK0-240 kelompok perlakuan ..... 67
Lampiran 9. Hasil uji Post Hoc LSD pada LDDK0-240 pada kelompok
perlakuan dengan taraf kepercayaan 95% ................................... 68
Lampiran 10. Rangkuman signifikansi hasil uji Post Hoc LSD LDDK0-240
pada kelompok perlakuan............................................................ 69
Lampiran 11. Contoh perhitungan volume pemberian glukosa,
glibenklamida, dan infusa daun M.tanarius ................................ 70
Lampiran 12. Contoh perhitungan LDDK0-240 pada kelompok perlakuan......... 70
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xvii
INTISARI
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh kombinasi infusa daun Macaranga tanarius terhadap glibenklamida dalam menurunkan kadar glukosa darah. Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental murni dengan rancangan acak lengkap pola searah. Penelitian dilakukan menggunakan 30 ekor tikus yang dibagi dalam 6 kelompok. Kelompok I diberi perlakuan aquadest(kontrol negatif), kelompok II diberi glibenklamida dosis 0,45 mg/kgBB (kontrol positif), kelompok III diberi infusa daun M.tanarius dosis 10 mg/kgBB (kontrol 1 infusa), kelompok IV diberi larutan infusa daun M.tanarius dosis 5 mg/kgBB (kontrol ½ infusa), kelompok V diberi perlakuan kombinasi glibenklamida dan infusa daun M.tanarius dengan perbandingan dosis 1:1, kelompok VI diberi perlakuan kombinasi dengan perbandingan dosis 1:0,5. Efek penurunan glukosa darah diuji dengan Uji Toleransi Glukosa Oral (UTGO). Kadar glukosa darah ditetapkan pada menit ke-0 sebelum UTGO dan menit ke-15, 30, 45, 60, 90, 180, dan 240 setelah UTGO. Nilai LDDK0-240 dihitung dari kadar glukosa darah dan dianalisis secara statistik menggunakan uji Kolmogorov-Smirnov, dilanjutkan dengan One Way ANOVA dan uji Post Hoc LSD dengan taraf kepercayaan 95%.
Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa kedua perlakuan kombinasi memiliki perbedaan yang tidak bermakna dengan glibenklamida. Pemberian infusa daun M.tanarius tidak mempengaruhi potensi glibenklamida dalam menurunkan glukosa darah.
Kata kunci : infusa Macaranga tanarius, kombinasi, glibenklamida, UTGO
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xviii
ABSTRACT
This research aims to determine the influence of combination aqueous extract of Macaranga tanarius leaves against glibenclamide in lowering blood glucose levels. This research was purely experimental research designs full of random pattern in the same direction. This research carried out using 30 rats which were divided into 6 groups. The group I was given the treatment of aquadest (negative control), group II was given a dose of 0.45 mg/ kgBB glibenclamide (positive control), group III was given an aqueous extract of M. tanarius leaves dose of 10 mg/kg of weight (control of one infusa), group IV given an aqueous extract of M. tanarius leaves dose 5 mg/kg of weight (control of 0,5 infusa), group V is given the treatment of combination glibenclamide- aqueous extract of M. tanarius leaves by comparison doses of 1: 1, group VI was given treatment combination with comparison of doses 1: 0.5. The effect of a decrease in blood glucose that combination tested with Oral Glucose Tolerance Test (OGTT). Blood glucose levels are set on 0 minute before UTGO and on 15, 30, 45, 60, 90, 180, and 240 minutes after UTGO. The value of AUC0-240 is calculated from blood glucose levels and analyzed statistically using the Kolmogorov-Smirnov test, followed by the One Way ANOVA and Post Hoc LSD test with 95% confidence level.
These results indicate that both combination treatment had no significantdifferences with glibenklamide. The aqueous extract of M.tanarius did not affected the potention of glibenklamide in lowering blood glucose.
Keywords: aqueous extract of Macaranga tanarius leaves, combination, glibenclamide, OGTT
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
1
BAB I
PENGANTAR
A. Latar Belakang
Prevalensi penyakit diabetes mellitus semakin meningkat seiring dengan
perubahan gaya hidup masyarakat yang semakin maju dan menuntut segalanya
serba praktis termasuk dalam hal makanan yang mereka konsumsi. Penyakit
diabetes mellitus merupakan salah satu dari beberapa penyakit degeneratif, yaitu
penyakit akibat fungsi atau struktur dari jaringan atau organ tubuh menurun secara
progresif dari waktu ke waktu yang disebabkan oleh usia atau pilihan gaya hidup
(Subroto, 2006).
Upaya yang dapat dilakukan adalah dengan memperbaiki salah satu
karakteristik dari penyakit diabetes mellitus yang berupa hiperglikemia, yaitu
dengan cara mengurangi absorpsi glukosa dengan jalan menekan penyerapan atau
proses pencernaan karbohidrat oleh senyawa inhibitor α-glukosidase. Senyawa
inhibitor α-glukosidase ini dapat digunakan sebagai obat lini pertama pada
pengobatan DM tipe II dengan spesifikasi target untuk mengatasi hiperglikemia
postprandial. Hiperglikemia posprandial ini dapat dimungkinkan menjadi faktor
resiko bagi penyakit kardiovaskuler (Cariello, 2005).
Menurut Matsui, Ueda, Oki, Sugita, Terahara & Matsumoto (2001);
Nishioka, Kawabata, & Aoyama (1998) telah banyak usaha dan penelitian yang
dilakukan untuk mencari inhibitor α-glukosidase dari bahan alami yang lebih
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
2
aman dan efektif sebagai antidiabetes. Pengembangan terhadap bahan obat alami
mulai meluas, sehingga banyak peneliti tertarik untuk mengembangkan bahan
alam. Tanaman yang mungkin jarang dikenal oleh sebagian besar masyarakat
namun masih dapat dieksplorasi sebagai tanaman alternatif pengobatan yaitu
Macaranga tanarius L. (M.tanarius).
Berdasarkan penelitian yang dilakukan oleh Matsunami, Takamori,
Shinzato, Aramoto, Kondo, Otsuka, dan Takeda (2006) terdapat aktivitas
penangkapan radikal bebas terhadap DPPH secara in vitro. Phommart,
Sutthivaiyakit, Chimnoi, Ruchirawat, dan Sutthivaiyakit (2005) juga melaporkan
bahwa terdapat aktivtas penangkapan radikal bebas dari ekstrak n-heksana dan
kloroform dari daun M.tanarius, sedangkan Mahendra (2010) dan Nugraha (2010)
melaporkan bahwa infusa daun M.tanarius memiliki efek hepatoprotektif.
Menurut Wulandari (2010) efek analgetik juga ditunjukkan oleh infusa daun
M.tanarius.
Berdasarkan penelitian terkait inhibitor α-glukosidase dilakukan oleh
Putri dan Kawabata (2010) diketahui bahwa ekstrak metanol-air daun M.tanarius
memiliki kandungan senyawa inhibitor α-glukosidase yang potent. Senyawa
inhibitor α-glukosidase tersebut berupa corilagin mallotinic acid, chebulagic acid
dan novelellagitannin (macatannin A). Penelitian ini juga diperkuat dengan
penelitian yang dilakukan oleh Theresia (2012) bahwa infusa daun M.tanarius
dapat menurunkan kadar glukosa darah pada tikus. Berdasarkan penelitian
tersebut dosis yang memberikan penurunan glukosa darah terbesar adalah dosis 10
mg/kgBB.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
3
Glibenklamida merupakan obat hipoglikemik oral yang digunakan secara
luas di dalam pengobatan diabetes mellitus tidak tergantung insulin (tipe-2).
Glibenklamida merupakan sulfonilurea paling potent dan dikenal sebagai
sulfonilurea “generasi kedua” (Dollery, 1999).
Pada saat sekarang ini, selain menjalani pengobatan dari dokter
masyarakat juga banyak yang mengkombinasikan pengobatan diabetes mellitus
dengan pengobatan herbal menggunakan obat-obatan tradisional. Hal ini
disebabkan karena masyarakat khususnya penderita diabetes mellitus
mengharapkan kemanjuran dan keamanan yang lebih besar pada pengobatan
jangka panjang untuk penyakit diabetes mellitus. Oleh karena itu, pada penelitian
ini, peneliti ingin menguji potensi atau peningkatan efek penurunan kadar glukosa
darah glibenklamida jika dikombinasikan dengan infusa daun M.tanarius pada
tikus putih jantan galur Wistar yang terbebani glukosa secara in vivo. Peneliti juga
ingin mengetahui seberapa besar pengaruh dari pemberian infusa daun M.tanarius
terhadap efek penurunan kadar glukosa darah yang dimiliki glibenklamida. Pada
penelitian ini menggunakan bentuk sediaan infusa dengan penyari berupa air
sehingga diharapkan senyawa-senyawa inhibitor α-glukosidase yang terkandung
dalam M.tanarius yang bersifat polar dapat tertarik banyak kedalam air yang
merupakan senyawa polar sesuai prinsip “like disolve like”. Metode pengujian
yang dilakukan pada penelitian ini adalah metode Uji Toleransi Glukosa Oral
(UTGO), metode ini dilakukan dengan cara mengukur kadar glukosa darah dari
hewan uji seperti tikus, yaitu dengan memberikan beban glukosa dan diamati
pengaruh terhadap toleransi glukosa.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
4
1. Perumusan masalah
Apakah pemberian infusa daun M.tanarius yang dikombinasikan dengan
glibenklamida dapat mempengaruhi potensi glibenklamida dalam menurunkan
kadar glukosa darah pada tikus putih jantan galur Wistar yang terbebani glukosa?
2. Keaslian penelitian
Penelitian terkait mengenai efek penurunan kadar glukosa darah yang
dimiliki oleh tanaman M.tanarius dilakukan oleh Putri dan Kawabata (2010)
mengenai senyawa inhibitor α-glukosidase yang terkandung dalam ekstrak
metanol-air daun M.tanarius, yaitu corilagin mallotinic acid, chebulagic acid dan
novelellagitannin (macatannin A). Penelitian terkait efek yang dimiliki oleh
infusa daun M.tanarius antara lain adalah efek hepatoprotektif oleh Mahendra
(2010) dan efek hepatoprotektif jangka pendek (Nugraha, 2010) infusa daun
M.tanarius pada tikus jantan galur Wistar terinduksi parasetamol, serta efek
analgesik infusa daun M.tanarius pada mencit betina galur Swiss yang diteliti oleh
Wulandari (2010).
Penelitian lainnya mengenai efek penurunan glukosa darah ekstrak
metanol-air daun M.tanarius pada tikus (Handayani, 2011), efek kombinasi
ekstrak metanol-air daun M.tanarius dengan glibenklamida terhadap penurunan
glukosa darah tikus (Nugrahesti, 2011), efek penurunan kadar glukosa darah
ekstrak metanol-air daun M.tanarius terhadap metformin (Setiawan, 2012), efek
penurunan kadar glukosa darah kombinasi ekstrak metanol-air daun M.tanarius
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
5
dengan metformin (Oktavia, 2012), dan pengaruh pemberian infusa M.tanarius
terhadap penurunan glukosa darah (Theresia, 2012).
Sejauh pengamatan penulis, penelitian tentang “Uji Potensiasi Infusa
Daun M.tanarius terhadap Glibenklamida sebagai Penurun Glukosa Darah pada
Tikus Putih Jantan Galur Wistar yang Terbebani Glukosa” belum pernah
dilakukan sebelumnya.
3. Manfaat penelitian
a. Manfaat teoritis
Hasil penelitian ini diharapkan mampu memberikan tambahan ilmu
pengetahuan baik kefarmasian ataupun di bidang obat herbal.
b. Manfaat praktis
Hasil penelitian ini diharapkan dapat memberikan pengetahuan
kepada masyarakat tentang pengaruh infusa daun M.tanarius jika digunakan
sebagai kombinasi terhadap obat non herbal penurun glukosa darah khususnya
glibenklamida.
B. Tujuan Penelitian
Untuk mengetahui pengaruh infusa daun M.tanarius yang
dikombinasikan dengan glibenklamida terhadap potensi glibenklamida dalam
menurunkan kadar glukosa darah pada tikus putih jantan galur Wistar yang
terbebani glukosa.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
6
BAB II
PENELAAHAN PUSTAKA
A. Diabetes Mellitus
Menurut American Diabetes Association (2003), diabetes mellitus
merupakan kelompok penyakit metabolik dengan karakteristik hiperglikemia yang
terjadi karena kelainan sekresi insulin, kerja insulin atau kedua-duanya
(Soegondo, 2005).
1. Klasifikasi diabetes mellitus
Klasifikasi etiologis diabetes mellitus menurut American Diabetes
Association (2003) yaitu :
a. Diabetes mellitus Tipe 1
Diabetes mellitus tipe 1 merupakan bentuk diabetes parah yang
berhubungan dengan terjadinya ketosis apabila tidak diobati. Keadaan tersebut
merupakan suatu gangguan katabolisme yang disebabkan karena hampir tidak
terdapat insulin dalam sirkulasi, glukagon plasma meningkat, dan sel-sel beta
pankreas gagal merespon semua stimulus insulinogenik. Oleh karena itu,
diperlukan pemberian insulin eksogen untuk memperbaiki katabolisme, mencegah
ketosis, dan menurunkan hiperglukagonemia, serta peningkatan kadar gukosa
darah (Katzung, 2002).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
7
b. Diabetes mellitus Tipe 2
Penderita diabetes mellitus tipe 2 mempunyai sirkulasi endogen cukup
untuk mencegah terjadinya ketoasidosis tetapi insulin tersebut sering dalam kadar
yang kurang normal atau kadarnya relatif tidak mencukupi karena kurang pekanya
jaringan untuk memproduksi insulin. Selain terjadi penurunan kepekaan jaringan
pada insulin, terjadi pula defisiensi respon sel beta pankreas terhadap glukosa
(Katzung, 2002).
c. Diabetes mellitus Tipe Lain
Pada diabetes mellitus tipe lain, hiperglikemia berkaitan dengan
penyakit-penyakit lain yang jelas. Penyakit tersebut meliputi penyakit eksokrin
pankreas, defek genetik fungsi sel beta, defek genetik fungsi insulin,
endokrinopati, karena obat/zat kimia, infeksi, imunologi, dan sindrom genetik
(Soegondo, 2005).
d. Diabetes mellitus Gestasional
Istilah ini dipakai terhadap pasien yang menderita hiperglikemia selama
kehamilan. Pada pasien-pasien ini toleransi glukosa dapat kembali normal setelah
persalinan (Woodley danWhelant, 1995).
2. Gejala-gejala penyakit diabetes mellitus
Gejala utama penyakit diabetes mellitus secara umum, yaitu polifagia
(meningkatnya rasa lapar), polidipsia (meningkatnya rasa haus), dan poliuria
(meningkatnya buang air kecil), serta kehilangan berat badan terutama pada
diabetes mellitus tipe 1 (DiPiro, Tarbet, Yee, Matzke, Wells, and Posey, 2005).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
8
3. Pengelolaan diabetes mellitus
Menurut Soegondo (2005), pengelolaan diabetes mellitus jangka pendek
bertujuan untuk menghilangkan keluhan atau gejala, dan mempertahankan rasa
nyaman dan sehat. Tujuan pengelolaan jangka panjang untuk mencegah
komplikasi sehingga dapat menurunkan angka morbiditas dan mortalitas.
a. Obat berkhasiat hipoglikemik
1) Insulin
Insulin dapat meningkatkan simpanan lemak maupun glukosa (sumber
energi) dalam sel sasaran khusus, serta mempengaruhi pertumbuhan sel dan
fungsi metabolisme berbagai jenis jaringan (Katzung, 2002).
2) Obat hipoglikemik oral
a) Pemicu sekresi insulin
(1) Sulfonilurea
Sulfonilurea bekerja dengan cara menstimulasi sel-sel beta pankreas dari
pulau langerhans pankreas yang kemampuan sekresi insulinnya menurun sehingga
bisa ditingkatkan dengan obat ini. Obat ini hanya efektif pada penderita diabetes
yang tidak tergantung insulin yang begitu berat, sel-sel betanya masih cukup baik
bekerja (Tjay&Rahardja, 2002).
(2) Glinid
Glinid merupakan obat generasi baru yang cara kerjanya sama dengan
sulfonilurea, yaitu meningkatkan sekresi insulin fase pertama. Golongan ini terdiri
dari dua macam obat, yaitu repaglinid (derivat asam benzoat), dan nateglinid
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
9
(derivat fenilalanina). Obat ini diabsorbsi cepat setelah pemberian oral, dan
diekskresi secara cepat melalui hati (Waspadji, 2005).
b) Penambah sensitivitas insulin
(1) Biguanid
Golongan biguanid yang masih dipakai adalah metformin. Penjelasan
lengkap tentang mekanisme kerja biguanid masih belum jelas. Mekanisme yang
diusulkan baru-baru ini meliputi stimulasi glikolisis secara langsung dalam
jaringan dengan peningkatan eliminasi glukosa dalam darah, penurunan
glukoneogenesis hati, melambatkan absorbsi glukosa dalam saluran cerna, dan
penurunan kadar glukagon plasma (Katzung, 2002).
(2) Tiazolidindion
Tiazolidindion merupakan golongan obat antidiabetes oral yang dapat
meningkatkan sensitivitas insulin terhadap jaringan sasaran. Kerja utama obat
golongan tiazolidindion, yaitu untuk mengurangi resistensi insulin dengan
meningkatkan ambilan glukosa dan metabolisme dalam otot dan jaringan adipose
(Katzung, 2002).
c) Penghambat glukosidase alfa
Acarbose merupakan contoh penghambat glukosidase alfa yang sering
digunakan. Obat ini bekerja secara kompetitif menghambat kerja enzim
glukosidase alfa dari dalam sel cerna sehingga dapat menurunkan penyerapan
glukosa dan menurunkan hiperglikemia post prandial (Soegondo, 2005).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
10
4. Transpor glukosa
Karbohidrat glukosa adalah karbohidrat terpenting dalam kaitannya
dengan penyediaan energi di dalam tubuh, hal ini dikarenakan semua jenis
karbohidrat baik monosakarida, disakarida, maupun polisakarida yang dikonsumsi
manusia akan terkonversi menjadi glukosa di dalam tubuh. Glukosa ini akan
berperan sebagai salah satu molekul utama bagi pembentukan energi di dalam
tubuh. Glukosa yang telah diserap (diabsorpsi) oleh usus halus kemudian akan
terdistribusi ke dalam semua sel tubuh melalui aliran darah (Irawan, 2007).
Glukosa di dalam tubuh selain tersimpan dalam bentuk glikogen di dalam
otot dan hati, juga tersimpan pada plasma darah dalam bentuk glukosa darah
(blood glucose). Di dalam tubuh glukosa berperan sebagai bahan bakar bagi
proses metabolisme, dan sumber energi utama bagi kerja otak. Glukosa digunakan
untuk mensintesis molekul Adenosine Triphosphate (ATP) melalui proses
oksidasi. ATP merupakan molekul-molekul dasar penghasil energi di dalam
tubuh. Dalam kebutuhan seharian, glukosa menyediakan hampir 50-75% dari total
kebutuhan energi tubuh (Irawan, 2007).
Sekresi insulin oleh sel ß (beta) tergantung oleh 3 faktor utama yaitu
kadar glukosa darah, ATP-sensitive Kchannels dan Voltage-sensitive Calsium
Channels sel ß pankreas seperti yang ditunjukkan pada Gambar 1. Mekanisme
kerja faktor- faktor tersebut adalah sebagai berikut: pada keadaan puasa, kadar
glukosa darah turun, ATP-sensitive K channels pada membrane sel ß akan
terbuka sehingga ion kalium akan meninggalkan sel ß, dan Ca-channels tertutup,
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
11
akibatnya kalsium tidak dapat masuk ke dalam sel ß, dan perangsangan sel ß
untuk mensekresi insulin menurun (Merentek, 2006).
Gambar 1 menunjukkan bahwa pada saat keadaan setelah makan, kadar
glukosa darah akan meningkat dan akan ditangkap oleh sel ß melalui glucose
transporter 2 (GLUT2) dan dibawa ke dalam sel ß. Di dalam sel, glukosa akan
mengalami fosforilasi menjadi glukosa-6-fosfat (G6P) dengan bantuan enzim
glukokinase. Glukosa-6-fosfat akan mengalami glikolisis menjadi asam piruvat.
Proses glikolisis juga menghasilkan produk 6-8 ATP. Penambahan ATP ini akan
meningkatkan rasio ATP/ADP dan menutup kanal kalium. Penumpukan kalium
dalam sel mengakibatkan depolarisasi membran sel sehingga membuka kanal
kalsium dan kalsium akan masuk kedalam sel dan insulin akan dilepaskan ke
dalam sel (Merentek, 2006).
Gambar 1. Sekresi insulin akibat peningkatan kadar glukosa dalam darah(Cartailler, 2004)
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
12
Sekresi insulin pada orang non diabetes meliputi dua fase, yaitu early
peak (fase 1) yang terjadi dalam 3–10 menit pertama setelah makan. Insulin yang
disekresi pada fase ini adalah insulin yang disimpan dalam sel beta (siap pakai).
Fase 2 atau disebut juga fase lanjut adalah sekresi insulin yang dimulai 20 menit
setelah stimulasi glukosa. Pada fase 1 pemberian glukosa meningkatkan sekresi
insulin untuk mencegah kenaikan kadar glukosa darah, dan kenaikan glukosa
darah selanjutnya akan merangsang fase 2 untuk meningkatkan produksi insulin.
Pada diabetes mellitus tipe-2, sekresi insulin pada fase 1 tidak mampu
menurunkan glukosa darah sehingga merangsang fase 2 untuk menghasilkan
insulin lebih banyak, tetapi sudah tidak mampu meningkatkan sekresi insulin
sebagaimana pada orang non diabetes (Merentek, 2006).
5. Uji antidiabetes
Keadaan diabetes mellitus pada hewan percobaan dapat diinduksi dengan
cara pankreatomi dan dengan cara kimia. Zat-zat kimia sebagai induktor
(diabetogen) pada umumnya diberikan secara parenteral. Jenis hewan percobaan
yang digunakan meliputi mencit, tikus, kelinci, atau anjing (Yayasan
Pengembangan Obat Alam, 1993).
Penentuan kadar gula dapat dilakukan secara kualitatif terhadap glukosa
urin, sedangkan kadar gula darah ditentukan secara kuantitatif. Penentuannya
dilakukan secara kolorimetri atau spektrofotometri pada panjang gelombang
tertentu. Uji efek antidiabetes dapat dilakukan dengan dua metode yaitu metode
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
13
uji toleransi glukosa dan metode uji diabetes aloksan (Yayasan Pengembangan
Obat Alam, 1993).
a. Metode Uji Toleransi Glukosa
Prinsip metode ini yaitu pada kelinci yang telah dipuasakan (20-24 jam),
diberikan larutan glukosa 50% peroral, setengah jam sesudah pemberian obat
yang diujikan. Pada awal percobaan sebelum pemberian obat, dilakukan
pengambilan cuplikan darah vena telinga dari masing-masing kelinci sejumlah 0,5
mL sebagai kadar glukosa darah awal. Pengambilan cuplikan darah vena diulangi
setelah perlakuan pada waktu-waktu tertentu. Cuplikan darah ditampung dalam
ependorf, disentrifuge selama 5 menit pada putaran 3000 – 6000 rpm. Serum yang
diperoleh diberi pereaksi dan diukur serapannya untuk menentukan kadar
glukosanya (Yayasan Pengembangan Obat Alam, 1993).
b. Metode Uji Diabetes Aloksan
Prinsip dari metode ini yaitu induksi diabetes dilakukan pada mencit
yang diberi suntikan aloksan monohidrat dengan dosis 70 mg/kgBB. Penyuntikan
dilakukan secara intravena pada ekor mencit. Perkembangan hiperglikemia
diperiksa tiap hari. Pemberian obat antidiabetik secara oral dapat menurunkan
kadar glukosa darah dibandingkan terhadap mencit positif (Yayasan
Pengembangan Obat Alam, 1993).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
14
6. Metode penetapan kadar glukosa darah
Secara umum menurut Widowati, Dzulkarnain, dan Sa’roni (1997)
metode penentuan glukosa darah dapat ditentukan dengan beberapa cara, yaitu:
a. Metode kondensasi dengan gugus amina
Prinsip: aldosa dikondensasikan dengan orto-toluidin dalam suasana
asam dan menghasilkan larutan berwarna hijau setelah dipanaskan. Kadar glukosa
darah dapat ditentukan sesuai dengan intensitas warna yang terjadi diukur secara
spektrofotometri.
b. Metode enzimatik
Glukosa dapat ditentukan secara enzimatik, dengan menggunakan enzim
glukosa oksidase (GOD). Dengan adanya glukosa oksidase, maka glukosa
dioksidasi oleh udara (O2) menjadi asam glukuronat disertai pembentukan
hidrogen peroksida. Dengan adanya enzim peroksidase (POD), H2O2 akan
membebaskan O2 yang mengoksidasi akseptor kromogen yang sesuai serta
memberikan warna merah. Akseptor kromogennya dapat berupa senyawa
aminoantipirin dan fenol atau orthodianisidin, kadar glukosa darah ditentukan
berdasarkan intensitas warna yang terjadi, diukur secara spektrofotometri.
c. Metode oksidasi-reduksi
Kadar glukosa darah ditentukan dengan cara dioksidasi dengan
menggunakan suatu oksida ferrisianida. Oksida ini direduksi menjadi ferrosianida
oleh glukosa dalam suatu suasana basa dengan pemanasan, kemudian kelebihan
garam ferri dititrasi secara iodometri.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
15
B. Glibenklamida
1. Deskripsi glibenklamida
Gambar 2. Struktur kimia glibenklamida (5-chloro-N-(4-[N-(cyclohexylcarbamoyl)sulfamoyl]phenethyl)-2-methoxybenzamide) (Rayanm,
Rao, dan Ramana, 2011)
Glibenklamida dengan struktur kimia seperti pada Gambar 2 merupakan
obat hipoglikemik oral yang digunakan secara luas di dalam pengobatan diabetes
mellitus tidak tergantung insulin (tipe-2). Glibenklamida merupakan sulfonilurea
paling poten dan dikenal sebagai sulfonilurea “generasi kedua” (Dollery, 1999).
Aksi farmakologi glibenklamida adalah menstimulasi pelepasan insulin
dengan meningkatkan fungsi sel-sel islet α-β pankreas. Pada terapi jangka pendek,
hal ini signifikan dengan peningkatan sirkulasi konsentrasi insulin, tetapi dengan
penggunaan berkelanjutan biasanya terjadi penurunan kadar insulin tanpa merusak
kontrol glikemik (Dollery, 1999).
2. Farmakodinamika glibenklamida
Glibenklamida, generasi kedua sulfonilurea sebagai agen antidiabetes,
menurunkan glukosa darah akut dengan merangsang pelepasan insulin dari
pankreas, efek tergantung pada fungsi sel beta pada pulau pankreas. Dengan
administrasi kronis pada pasien diabetes tipe II, efek menurunkan glukosa darah
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
16
berlanjut meskipun penurunan bertahap sesuai dengan respon sekresi insulin
terhadap obat tersebut. Efek extrapancreatic terjadi dalam mekanisme aksi
sulfonilurea sebagai obat hipoglikemik oral. Kombinasi glibenklamida dan
metformin mungkin memiliki efek sinergis, karena kedua agen bertindak untuk
meningkatkan toleransi glukosa walaupun dalam mekanisme yang berbeda. Selain
menurunkan glukosa darah, glibenklamida memberikan efek diuresis ringan
dengan peningkatan bersihan cairan ginjal. Glibenklamida dua kali lebih ampuh
dibandingkan dengan glipizide yang merupakan generasi kedua agen terkait
(Monami, dkk., 2006).
3. Mekanisme aksi glibenklamida
Sulfonilurea seperti glibenklamida berikatan dengan ATP-sensitif saluran
kalium pada permukaan sel pankreas, mengurangi konduktansi kalium dan
menyebabkan depolarisasi membran. Depolarisasi merangsang masuknya ion
kalsium melalui tegangan-sensitif saluran kalsium, meningkatkan konsentrasi ion
kalsium intraseluler, yang menginduksi sekresi, atau eksositosis dari insulin
(Monami, dkk., 2006).
Glibenklamida adalah obat sulfonilurea yang digunakan dalam
pengobatan diabetes tipe 2. Glibenklamida bekerja pada sel beta pankreas untuk
merangsang sekresi insulin. Dalam kondisi fisiologis, sekresi insulin dari sel beta-
dimediasi oleh konsentrasi glukosa dalam darah. Gambar 3 menunjukkan bahwa
glukosa memasuki sel melalui GLUT2 (SLC2A2) transporter. Setelah masuk sel,
glukosa dimetabolisme untuk menghasilkan ATP. Konsentrasi tinggi dari ATP
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
17
akan menghambat ATP-dependent potasium channel (ABCC8), yang
menyebabkan sel terdepolarisasi. Depolarisasi menyebabkan pembukaan voltage-
gated saluran kalsium, memungkinkan kalsium untuk masuk sel. Kalsium
intraseluler tinggi kemudian merangsang eksositosis vesikel dan sekresi insulin.
Glibenklamida merangsang sekresi insulin dengan langsung menghambat ATP-
dependent potasium channel. Untuk lebih jelasnya dapat dilihat pada Gambar 3
(Mizuno, Chittiboyina, Kurtz, Pershadsingh, dan Avery, 2008).
Gambar 3. Mekanisme aksi glibenklamida sebagai obat antidiabetes(Mizuno, dkk., 2008)
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
18
C. Macaranga tanarius L.
1. Taksonomi
Kingdom : Plantae
Subkingdom : Tracheobionta
Divisio : Spermatophyta
Sub- Divisi : Magnoliophyta
Classis : Magnoliopsida
Sub-classis : Rosidae
Ordo : Euphorbiales
Familia : Euphorbiaceae
Genus : Macaranga
Spesies : Macaranga tanarius L. (Plantamor, 2008).
2. Nama daerah
Tutup ancur (Jawa), mapu (Batak), mara (Sunda) (Prohati, 2011).
3. Morfologi
Merupakan pohon kecil sampai sedang, berdaun hijau memiliki
ketinggian 4-5 meter dengan dahan agak besar. Daun berseling, agak membundar,
dengan stipula besar yang luruh. Perbungaan bermalai di ketiak, bunga ditutupi
oleh daun gagang. Buah kapsul berkokus 2, ada kelenjar kekuningan di luarnya.
Biji membulat, menggelembur. Jenis ini juga mengandung tanin yang cukup
untuk menyamak jala dan kulit (Prohati, 2011).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
19
4. Kandungan kimia
Dalam penelitian kandungan kimia daun Macaranga tanarius
(M.tanarius) yang sudah dilakukan dilaporkan bahwa terdapat empat kandungan
senyawa didalam daun M.tanarius megastigman glukosida dinamai
macarangiosida, bersama dengan malofenol B, lauroside E, methyl brevifolin
carboxylate, hyperin dan isoquercitrin serta lignan glukosida, pinoresinol, dan dua
megastigman glukosida, dinamai macarangiosida E dan F, bersama dengan 15
komponen lain yang telah diketahui dilaporkan terdapat pada daun M.tanarius
(Matsunami, et al., 2006). Uji kandungan kimia dari tanin daun M.tanarius
melaporkan kandungan tanin baru, yaitu tujuh hydrolyzable, bersama dengan 21
tanin yang telah diketahui sebelumnya (Lin, Nonaka dan Nishioka, 1990). Dari
daun M.tanarius ditemukan tiga kandungan senyawa baru yaitu tanarifuranonol,
tanariflavanon C, dan tanariflavanon D bersama dengan tujuh kandungan yaitu
nymphaeol A, nymphaeol B, nymphaeol C, tanariflavanone B, blumenol A
(vomifoliol), blumenol B (7,8 dihydrovomifoliol, dan annuionone) (Phommart, et
al., 2005). Ekstrak metanol-air daun M.tanarius juga diketahui mengandung
senyawa inhibitor α-glukosidase yang potent. Kandungan senyawa inhibitor α-
glukosidase yang berhasil ditemukan dalam ekstrak metanol-air daun M.tanarius
adalah ellagitannins. Ellagitannins yang berhasil diisolasi yaitu corilagin,
mallotinic acid, chebulagic acid dan novel ellagitannin (macatannin A dan
macatannin B) dengan struktur kimia seperti yang ditunjukkan pada Gambar 4
(Puteri dan Kawabata, 2010).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
20
Gambar 4. Struktur ellagitannins yang telah diisolasi dari daun M.tanariusyaitu mallotinic acid (1), corilagin (2), macatannin A (3), chebulagic acid (4),
dan macatannin B (5) (Puteri dan Kawabata, 2010)
5. Khasiat dan kegunaan
Daun M.tanarius secara tradisional digunakan untuk fermentasi tempe
dan pakan hewan (Puteri dan Kawabata, 2010). Daun M.tanarius selain kaya akan
tanin, dapat digunakan sebagai obat diare, luka dan antiseptik (Lin, et al., 1990).
Di Malaysia dan Thailand, dekok akar Macaranga digunakan sebagai antipiretik
dan antitusif. Di Cina tanaman M.tanarius ini menjadi tumbuhan yang komersil,
karena dapat dijadikan sebagai produk minuman kesehatan (Lim, Lim, dan Yule,
2009).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
21
D. Infundasi
Infundasi adalah proses penyarian yang umumnya untuk menyari
kandungan zat aktif yang ada pada sediaan tanaman yang larut dalam air.
Penyarian adalah peristiwa memindahkan massa zat aktif yang semula berada di
dalam sel ditarik oleh cairan penyari sehingga zat aktif larut dalam cairan penyari
(Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan RI, 1986). Sistem pelarut
yang digunakan dalam ekstraksi harus dipilih berdasarkan kemampuannya dalam
melarutkan jumlah maksimal zat aktif dan seminimal mungkin zat yang tidak
digunakan (Ansel, 1989).
Infusa dapat dibuat dengan cara mencampur simplisia dengan derajat
halus yang sesuai dalam panci dengan air dan dipanaskan di atas tangas air selama
15 menit terhitung mulai suhu mencapai 90°C sambil sekali-kali diaduk. Simplisia
dalam bentuk serbuk kering diberi penambahan air sebanyak dua kali bobot
serbuk kering. Kemudian diserkai selagi panas melalui kain flannel, ditambahkan
air panas secukupnya melalui ampas hingga diperoleh volume infus yang
dikehendaki (Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan RI, 1995).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
22
E. Antaraksi Farmakokinetika
Gambar 5. Bagan penggolongan antaraksi obat berdasarkan perubahan efek (Donatus, 1995)
EFEKEFEK
sinergisme
antagonisme
Penambahan(adisi)
Penghambatan( inhibisi )
Penguatanan ( potensiasi )
Penghambatan( inhibisi )Penguatan
( potensiasi )
ANTARAKSI heteroergi
ANTARAKSI homoergi-
heterodinami
ANTARAKSI homoergi -
homodinami
heterodinami/homoergi –
heterodinami )
sama
homodinami/ homoergo -homodinami
OBAT A dan B
EFEKA = B ( homoergi )
A atau B ( heteroergi )
MEKANISME?
beda
EFEK
Penambahan infra( < penjumlahan sederhana / sumasi )
Penambahan sederhana( = penjumlahan sederhana )
Penambahan supra( > penjumlahan sederhana )
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
23
Gambar 5 di atas merupakan bagan rangkuman penggolongan antaraksi
obat berdasarkan perubahan efek. Terdapat dua definisi mengenai antaraksi obat
yang perlu ditelaah maknanya. Pertama berdasarkan akibat (luaran) yang
ditimbulkan, antaraksi obat didefinisikan sebagai peristiwa ketika efek obat
tertentu diubah oleh obat lain (antaraktan) yang diberikan sebelum atau bersamaan
dengan obat tersebut. Kedua berdasarkan perantara (mekanisme kerja), antaraksi
obat didefinisikan sebagai peristiwa yang terjadi ketika dua obat diberikan secara
bersama-sama, saling mempengaruhi proses farmakokinetika dan/atau
farmakodinamika masing-masing obat (Donatus, 1995).
Definisi di atas mengandung makna bahwa: (1) akibat antaraksi dapat
berupa pergeseran kinerja farmakologi dan atau toksikologi obat-obyek; (2)
perantara antaraksi mungkin pergeseran kinerja farmakokinetika dan atau
farmakodinamika obat-obyek; dan (3) penyebab antaraksi mungkin faktor
peringkat dosis dan atau lama masa perlakuan antaraktan (Donatus, 1995).
Antaraksi obat juga digolongkan berdasarkan mekanisme kerja,
utamanya meliputi antaraksi farmakokinetika dan farmakodinamika. Termasuk
antaraksi farmakokinetika ialah yang terjadi ketika suatu antaraktan mengganggu
penyerapan, penyebaran, perubahan hayati, dan atau pengeluaran obat-obyek.
Antaraksi farmakodinamika merupakan antaraksi yang melibatkan kerja atau efek
beberapa obat, yang timbul bila antaraktan dan obat-obyek bekerja pada tempat
kerja, reseptor, atau sistem fisiologi yang sama (Donatus, 1995).
Berdasarkan uraian tersebut dapat disimpulkan bahwa antarksi
farmakokinetika berkenaan dengan perubahan keberadaan obat-obyek di tempat
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
24
kerja, sedangkan antaraksi farmakodinamika dengan perubahan keefektifan reaksi
obat-obyek dengan tempat kerja terkait (Donatus, 1995).
F. Landasan Teori
Diabetes mellitus (DM) ialah suatu penyakit yang ditandai dengan kadar
glukosa yang tinggi di dalam darah karena tubuh tidak dapat melepaskan atau
menggunakan insulin secara tepat (Triplitt, Reasner, dan Isley, 2005).
Karakteristik pada penyakit diabetes mellitus, yaitu terjadinya hiperglikemia.
Pengatasan penyakit diabetes mellitus salah satunya dengan cara menghambat
kerja enzim α-glukosidase dari dalam sel cerna sehingga dapat menurunkan
penyerapan glukosa dan menurunkan hiperglikemia post prandial (Soegondo,
2005). Berdasarkan hasil penelitian yang dilakukan oleh Puteri dan Kawabata
(2010) diketahui bahwa ekstrak metanol-air daun M.tanarius memiliki kandungan
senyawa inhibitor α-glukosidase yang potent. Senyawa inhibitor α-glukosidase
yang terkandung dalam ekstrak metanol-air daun M.tanarius berupa corilagin
mallotinic acid, chebulagic acid dan novel ellagitannin (macatannin A).
Penelitian ini diperkuat dengan penelitian yang telah dilakukan oleh Theresia
(2012) bahwa infusa daun M.tanarius memberikan efek penurunan glukosa darah
yang paling besar pada dosis 10 mg/kgBB.
Salah satu metode yang dapat digunakan untuk menguji efek antidiabetes
adalah Uji Toleransi Glukosa Oral (UTGO). Sesuai dengan kesepakatan WHO
maka tes toleransi glukosa oral harus dilakukan dengan beban 75 gram setelah
berpuasa minimal 8 jam baru kemudian dilakukan pengukuran terhadap glukosa
darah (DiPiro, et al., 2005). Melalui hasil pengukuran terhadap glukosa darah
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
25
nantinya didapatkan dosis efektif antidiabetes dari infusa daun M.tanarius baru
kemudian dilakukan uji potensiasi terhadap glibenklamida. Menurut Martin
(1971), antaraksi obat dikatakan menguntungkan bila akibat yang ditimbulkan
mampu memperbaiki terapi yang berupa : (1) batas aman yang lebih besar, (2)
mula kerja atau masa kerja yang lebih sesuai, (3) ketoksikan berkurang, dan (4)
potensi yang bertambah besar dengan efek samping yang berkurang. Melalui uji
potensiasi tersebut diharapkan infusa daun M.tanarius memberikan antaraksi yang
menguntungkan dengan meningkatkan efektifitas glibenklamida sebagai obat
antidiabetes. Antaraksi menguntungkan yang diharapkan dari pemberian infusa
daun M.tanarius sebagai kombinasi terhadap glibenklamida, yaitu berupa
peningkatan efek dari glibenklamida dalam menurunkan glukosa darah.
G. Hipotesis
Infusa daun M.tanarius memiliki potensi untuk meningkatkan efektifitas
glibenklamida sebagai penurun glukosa darah pada tikus putih jantan galur
Wistar.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
26
BAB III
METODOLOGI PENELITIAN
A. Jenis dan Rancangan Penelitian
Penelitian tentang potensi infusa daun M.tanarius terhadap peningkatan
efek penurun glukosa darah glibenklamida pada tikus putih jantan galur Wistar
terbebani glukosa merupakan jenis penelitian eksperimental murni secara acak
lengkap pola searah.
B. Variabel dan Definisi Operasional
1. Variabel penelitian
a. Variabel utama
1) Variabel bebas dari penelitian ini adalah kombinasi dosis antara infusa
daun M.tanarius dengan glibenklamida.
2) Variabel tergantung pada penelitian ini adalah penurunan kadar glukosa
darah tikus.
b. Variabel pengacau
1) Variabel pengacau terkendali pada penelitian ini, yaitu :
a) Jenis kelamin dan galur hewan uji: tikus putih jantan galur Wistar
b) Umur tikus: 2-3 bulan
c) Bobot tikus: 150-250 gram
d) Cara pemberian ekstrak: per oral
e) Waktu dan tempat pengambilan daun M.tanarius
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
27
2) Variabel pengacau tak terkendali, yang termasuk didalamnya, yaitu:
a) Variabel biologis tikus putih jantan, yaitu proses absorbsi, distribusi,
biotransformasi, dan ekskresi dari mencit jantan terhadap infusa daun
M.tanarius
b) Umur tanaman M.tanarius dan jumlah kandungan kimia daun M.tanarius
2. Definisi operasional
a. Infusa daun M. tanarius adalah infusa dengan konsentrasi 50% (b/v) yang
diperoleh dengan cara mencampur 12,5 g serbuk kering daun M. tanarius
dalam panci dengan 25 ml aquadest, dipanaskan di atas heater selama 15 menit
terhitung mulai suhu mencapai 90°C sambil sekali-kali diaduk. Serkai selagi
panas melalui kain flanel, tambahkan air panas secukupnya melalui ampas
hingga diperoleh volume infus yang dikehendaki.
b. Dosis infusa daun M. tanarius adalah sejumlah berat infusa daun M. tanarius
tiap satuan berat badan hewan uji dengan satuan mg/kgBB.
c. Uji Toleransi Glukosa Oral (UTGO) merupakan suatu metode penetapan kadar
glukosa darah dengan cara memberikan beban glukosa terhadap tikus dengan
larutan glukosa secara oral dengan dosis 1,75 g/kgBB.
d. LDDK0-240 kadar glukosa dalam darah adalah besaran yang menggambarkan
jumlah kadar glukosa dalam darah pada rentang waktu mulai menit ke-0
samapai menit ke-240 yang dihitung menggunakan metode trapezoid.
e. Penurunan kadar glukosa adalah penurunan konsentrasi glukosa dalam darah
yang dinyatakan dalam satuan 1 mg glukosa per 100 ml darah atau mg/dl.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
28
C. Bahan dan Alat Penelitian
1. Bahan Penelitian
a. Hewan uji yang digunakan berupa tikus jantan galur Wistar dengan umur 2-3
bulan dan berat badan 150-250 g yang diperoleh dari Laboratorium Imono
Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma.
b. Bahan Uji adalah daun M. tanarius yang diperoleh dari Kebun Obat Fakultas
Farmasi Universitas Sanata Dharma
c. Senyawa pembanding berupa kaplet generik glibenklamida yang diproduksi
oleh PT. Indofarma.
d. Pereaksi untuk pengukuran kadar glukosa darah yang digunakan adalah enzim
Glucose GOD FS*(DiaSys, Germany), yang komposisinya sebagai berikut:
Tabel I. Isi pereaksi enzim Glucose GOD-PAP
Reagen :
Phosphat buffer pH 7,5 250 mmol/l
Phenol 5 mmol/l
4-aminoantipyrine 0,5 mmol/l
Glucose oxidase (GOD) ≥ 10 kU/l
Phenol aminoantipyrine peroxidase (PAP) ≤ 1 kU/l
Glucose standard 100mg/dl (5,5 mmol/dl)
e. Pereaksi
1) Glukosa monohidrat p.a (Merck) dengan dosis 1,75 g/kgBB sebagai larutan
untuk uji toleransi glukosa oral
2) Aquadest sebagai cairan pelarut untuk pembuatan sediaan uji
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
29
3) Parafin cair sebagai pelancar aliran darah dalam pengambilan sample darah
dari hewan uji
2. Alat atau Instrumen Penelitian
1) Seperangkat alat gelas (Beaker glass, labu takar, gelas ukur, pengaduk) merek
Pyrex
2) Mortir dan stamper
3) Jarum suntik (injeksi peroral) yaitu jarum suntik yang ujungnya diberi bulatan
kecil dengan lubang ditengahnya agar tidak melukai hewan uji
4) Mikropipet
5) Sentrifuge (Hettich WBA SS, Germany), yellow tipe, microtube
6) MicroVitalab dan kuvet
7) Alat timbang elektrik (Mettler Toledo AB 204, Switzerland),
8) Vortex (Janke-Kankel IKA® - Labortechnic)
9) Holder, panci lapis alumunium untuk pembuatan infusa
10) Oven, mesin penyerbuk
11) Heater, termometer, Stopwatch (Olympic)
D. Tata Cara Penelitian
1. Determinasi tanaman
Determinasi dilakukan di Laboratorium Farmakognosi Fitokimia
Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta sesuai dengan buku
acuan (Backer dan Van den Brink, 1965) hingga ke tingkat spesies.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
30
2. Pengumpulan bahan
Daun M.tanarius yang digunakan dalam penelitian ini adalah daun yang
masih segar dan berwarna hijau yang berasal dari tanaman M.tanarius yang
diperoleh dari Kebun Obat Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma.
3. Pembuatan simplisia daun M. tanarius
Daun M.tanarius yang telah terkumpul kemudian dicuci dengan air
mengalir, ditiriskan kemudian dikeringkan dengan menggunakan oven pada suhu
45-50°C selama 24 jam dan diserbuk dengan menggunakan mesin penyerbuk.
Serbuk simplisia kemudian diayak dengan menggunakan ayakan nomor 40.
4. Pembuatan infusa daun M.tanarius 50,0 % (b/v)
Infusa daun M.tanarius dengan konsentrasi 50,0 % (b/v) dibuat dengan
mencampur 50,0 gram serbuk kering daun M.tanarius dengan 100 ml aquadest.
Campuran ini kemudian dipanaskan di atas heater pada suhu 90°C selama 15 menit.
Waktu 15 menit dihitung ketika suhu pada campuran mencapai 90°C. Campuran
kemudian diserkai selagi panas.
5. Perhitungan dosis pemberian M.tanarius
Dosis M.tanarius yang digunakan merupakan dosis efektif yang
diperoleh berdasarkan penelitian sebelumnya, yaitu 10 mg/kgBB (Theresia,
2012).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
31
6. Preparasi bahan
a. pembuatan larutan stok glukosa p.a. 15 % (b/v)
Glukosa monohidrat p.a. ditimbang sebanyak 1,5 gram dan dilarutkan
dengan aquadest dalam labu takar 10,0 ml sampai tanda.
b. penentuan dosis glibenklamida
Dosis glibenklamida yaitu 5 mg pada manusia dengan berat badan 70 kg,
dikonversikan ke tikus 200 gram dengan faktor konversi 0,018.
5 mg glibenklamida x 0,018 = 0,09 mg glibenklamida/ 200 gram
= 0,45 mg glibenklamida/kg BB
Berdasarkan perhitungan maka besarnya dosis glibenklamida pada hewan
uji tikus yaitu 0,45 mg/ kgBB.
c. pembuatan larutan glibenklamida 0,1125 mg/ml
Timbang serbuk glibenklamida setara dengan 25 mg glibenklamida murni,
larutkan dengan aquadest dalam labu takar 10 ml sampai tanda sebagai
larutan induk glibenklamida. Buat dengan konsentrasi 0,1125 mg/ml yaitu
mengambil 0,45 ml larutan induk tambahkan aquadest dalam labu ukur 10
ml hingga tanda.
Perhitungan volumenya yaitu:
C1 = 25 mg/10 ml = 2,5 mg/ml ; C2 = 0,1125 mg/ml
2,5 mg/ml x V1 = 10,0 ml x 0,1125 mg/ml
V1 = 0,45 ml
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
32
7. Percobaan pendahuluan
a. Penetapan waktu pemberian glibenklamida
Tujuan dari penetapan pemberian glibenklamida adalah untuk
melihat pengaruh waktu pemberian terhadap efek hipoglikemik
glibenklamida, agar pada saat Uji Toleransi Glukosa Oral (UTGO),
glibenklamida sudah memberikan efek penurunan kadar glukosa darah.
Orientasi ini menggunakan enam ekor tikus yang terbagi dalam tiga
kelompok dimana masing-masing kelompok diberi perlakuan perlakuan
kontrol positif dan kontrol negatif. Perlakuan tersebut dilakukan terhadap
masing-masing kelompok yaitu pada menit ke-15 sebelum UTGO untuk
kelompok kesatu, menit ke-30 sebelum UTGO untuk kelompok kedua, dan
menit ke-45 sebelum UTGO untuk kelompok ketiga. Semua pemberian
dilakukan secara peroral, selanjutnya dilakukan UTGO dengan diberikan
larutan glukosa monohidrat 15,0% b/v; 1,75 g/kgBB. Pengambilan cuplikan
darah dilakukan sesaat sebelum perlakuan sebagai menit ke-0 dan pada
menit ke-15, 30, 45, 60, 90, 180, dan 240 setelah UTGO. Pengukuran kadar
glukosa darah dilakukan dengan menggunakan metode GOD-PAP.
Selanjutnya, dibuat kurva UTGO dan perhitungan harga LDDK0-240.
Penentuan waktu pemberian infusa daun M.tanarius didasarkan pada harga
selisih LDDK0-240 kontrol positif dan negatif tertinggi.
b. Penetapan waktu pemberian infusa daun M.tanarius
Penetapan waktu pemberian infusa daun M.tanarius digunakan
untuk melihat pengaruh waktu pemberian terhadap efek penurunan kadar
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
33
glukosa darah, agar pada saat dilakukan UTGO infusa daun M.tanarius
sudah memberikan efek dalam menurunkan kadar glukosa darah. Orientasi
ini menggunakan 3 ekor tikus yang masing-masing diberi infusa daun
M.tanarius pada menit ke-15 sebelum UTGO dan bersamaan dengan
UTGO. Semua pemberian dilakukan secara peroral, selanjutnya dilakukan
UTGO dengan diberikan larutan glukosa monohidrat 15,0% (b/v); 1,75
g/kgBB. Pengambilan cuplikan darah dilakukan sesaat sebelum perlakuan
sebagai menit ke-0 dan pada menit ke-15, 30, 45, 60, 90, 180, dan 240
setelah UTGO. Pengukuran kadar glukosa darah dilakukan dengan
menggunakan metode GOD-PAP. Selanjutnya, dibuat kurva UTGO dan
perhitungan harga LDDK0-240. Penentuan waktu pemberian infusa daun
M.tanarius didasarkan pada harga LDDK0-240 terendah.
c. Pengelompokan dan perlakuan hewan uji
Penelitian ini mengikuti rancangan acak lengkap pola searah, yaitu
30 ekor tikus dibagi secara acak menjadi enam kelompok, masing-masing
kelompok terdiri dari lima ekor. Tiap hewan uji diadaptasikan dengan
kondisi yang sama, jauh dari kebisingan dan dihindarkan dari stres. Sebelum
mendapat perlakuan, masing masing kelompok dipuasakan selama 18 jam
dengan tetap diberi minum ad libitum, lalu diberi perlakuan sebagai berikut:
1) Kelompok I, yaitu pemberian aquadest 5 ml/kg BB (kontrol negatif)
2) Kelompok II, yaitu pemberian larutan glibenklamida 0,45 mg/kgBB
(kontrol positif)
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
34
3) Kelompok III, yaitu pemberian kontrol 1 infusa yaitu infusa dengan
dosis 10 mg/kgBB
4) Kelompok IV, yaitu pemberian kontrol ½ infusa yaitu infusa dengan
dosis 5 mg/kgBB
5) Kelompok V, yaitu pemberian kombinasi glibenklamida dan infusa
daun M.tanarius dengan perbandingan dosis 1 : 1
6) Kelompok VI, yaitu pemberian kombinasi glibenklamida dan infusa
daun M.tanarius dengan perbandingan dosis 1: ½ .
Semua pemberian dilakukan secara peroral, selanjutnya dilakukan
UTGO dengan diberikan larutan glukosa monohidrat 15,0% (b/v); 1,75
g/kgBB.
8. Penetapan kadar glukosa darah
Kadar glukosa darah ditetapkan dengan metode GOD-PAP. Pada tiap
kelompok dilakukan pengambilan cuplikan darah sebanyak 0,5 ml melalui vena
lateralis ekor dan ditampung dalam microtube. Pengambilan cuplikan darah
dilakukan sesaat sebelum perlakuan sebagai menit ke-0 dan pada menit ke-15, 30,
45, 60, 90, 180, dan 240 setelah UTGO. Kemudian darah geoxalated ini
dipusingkan 3000 rpm selama 10 menit. Selanjutnya, diambil 0,025 ml plasma
darah, kemudian dilakukan pengukuran seperti dalam Tabel II.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
35
Tabel II. Volume pengukuran kadar glukosa darah
Bahan Sampel (ml) Standar (ml) Blangko (ml)
Supernatan 0.025 - -
Larutan baku glukosa - 0,025 -
Asam benzoat 1% b/v - - 0,025
Pereaksi GOD-PAP 2,5 2,5 2,5
Bahan-bahan tersebut dicampur dan diinkubasi selama operating time.
Kemudian kadar glukosa darah ditetapkan dengan alat microvitalab menggunakan
metode GOD-PAP. Selanjutnya dibuat kurva dengan mem-plot-kan nilai kadar
glukosa darah lawan waktu ke-0 sampai menit ke 240 dengan metode trapezoid
(LDDK0-240) dan rumus yang digunakan adalah sebagai berikut:
Keterangan:t = waktu (jam-1/menit-1)C = konsentrasi zat dalam darah (mg/ml)LDDKto-tn = luas daerah di bawah kurva dari waktu ke-0 sampai ke-n
E. Tata Cara Analisis Hasil
Data kadar glukosa darah pada tiap kelompok dianalisis secara statistik
yaitu dari harga LDDK0-240 glukosa darah dilakukan uji distribusi menggunakan
uji Kolmogorov Smirnov kemudian jika distribusinya normal dilanjutkan dengan
analisis Anova One Way dan post hoc tests LSD dengan tingkat kepercayaan 95%.
Jika nilai LDDK0-240 glukosa darah mempunyai variansi yang berbeda maka
dilakukan uji Kruskal Wallis dan dilanjutkan uji Mann Whitney dengan tingkat
kepercayaan 95% untuk mengetahui perbedaan masing-masing kelompok.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
36
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Determinasi Tanaman M.tanarius
Tanaman yang dipergunakan dalam penelitian ini adalah M. tanarius.
Determinasi tanaman dilakukan dengan tujuan untuk memastikan bahwa tanaman
maupun bagian tanaman yang akan digunakan memang benar sesuai dengan yang
diharapkan, sehingga tidak ada kesalahan mengenai bahan yang dipakai.
Determinasi tanaman dilakukan di Laboratorium Farmakognosi Fitokimia,
Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.
Determinasi dilakukan hingga tingkat spesies pada bagian daun, bunga,
batang, biji serta buah dan terbukti bahwa tanaman yang dipakai merupakan
tanaman M. tanarius. Berikut ini adalah hasil determinasi yang telah dilakukan.
1b, 2b, 3b, 4b, 12b, 13b, 14b, 17b, 18b, 19b, 20b, 21b, 22b, 23b, 24b,
25a................................................................................................99.Euphorbiaceae
1b, 3b, 4b, 6a, 7b, 8b, 10b, 13a, 14b..................................................34. Macaranga
1a,2a,3b,5b.................................................................Macaranga tanarius L.
B. Pembuatan Simplisia dan Infusa Daun M. tanarius
Daun M.tanarius dibuat simplisia dengan cara dikeringkan menggunakan
bantuan panas matahari. Tujuan pengeringan ini yaitu untuk menghilangkan air,
yang dikhawatirkan dapat menghidrolisis senyawa berkhasiat dalam daun
M.tanarius. Simplisia kering kemudian diserbuk/diblender untuk memperluas
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
37
permukaan, sehingga zat-zat yang terkandung di dalam daun M. tanarius lebih
mudah tersari.
Tahap selanjutnya yaitu penyarian dengan aquadest. Sesaat sebelum
dipanaskan, simplisia dibasahi dengan cairan penyari. Tujuannya untuk
memberikan kesempatan kepada penyari untuk memasuki pori-pori simplisia,
mengganti udara di pori-pori simplisia yang kering dengan cairan penyari. Setelah
itu, baru dibuat infusa dengan dipanaskan pada suhu 90oC selama 15 menit.
Pembuatan infusa dilakukan sesaat sebelum pemberian sediaan uji, untuk
menghindari tumbuhnya jamur karena air merupakan media pertumbuhan jamur.
Aquadest dipilih sebagai cairan penyari karena di dalam M.tanarius terdapat
senyawa yang bersifat polar, yaitu tanin. Keuntungan air dibanding pelarut
lainnya yaitu murah, mudah didapat, tidak mudah menguap, tidak mudah terbakar,
tidak beracun, dan alamiah, sedangkan kelemahan air sebagai cairan penyari, yaitu
tidak selektif, mudah ditumbuhi kapang, dan cepat rusak.
Infusa yang dibuat pada penelitian ini adalah infusa dengan konsentrasi
50% (b/v) yang dibuat dengan menyari 12,5 g serbuk kering daun M.tanarius
dengan 25 ml aquadest. Umumnya untuk membuat sediaan infus diperlukan
penambahan air sebanyak 2 kali berat simplisia. Air ekstra ini diperlukan karena
simplisia digunakan pada umumnya dalam bentuk serbuk kering yang akan
menyerap air dengan kuat.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
38
C. Uji Efek Penurunan Kadar Glukosa Darah
Penelitian penurunan kadar glukosa darah ini menggunakan metode
toleransi glukosa oral. Prinsip kerjanya yaitu membebani hewan uji dengan
glukosa hingga keadaan hiperglikemi tanpa merusak pankreas hewan uji. Hewan
uji yang digunakan yaitu tikus jantan galur Wistar berat antara 150 – 250 gram
dengan umur 2 – 3 bulan. Pemilihan jenis kelamin jantan untuk meminimalkan
adanya variasi hasil kadar glukosa darah, karena hewan uji merupakan variabel
kendali. Hewan uji dipuasakan terlebih dahulu selama 20-24 jam sebelum diberi
perlakuan tetapi tetap diberi minum ad libitum. Tujuan dipuasakan yaitu untuk
menghindari pengaruh makanan yang dapat mempengaruhi/mempertinggi kadar
glukosa darah jika tikus dibebani glukosa. Sebagai pengganti cairan tubuh yang
hilang selama puasa, maka tikus diberi minum ad libitum.
Metode uji yang digunakan yaitu uji toleransi glukosa oral (UTGO).
Berbeda dengan metode uji diabetes dengan induksi aloksan, UTGO dapat
memberikan gambaran kenaikan kadar glukosa darah dengan cepat setelah
pembebanan glukosa. Selain itu juga memberikan efek penurunan kadar glukosa
darah cepat pula oleh obat atau zat-zat yang berefek hipoglikemik, karena glukosa
cepat dimetabolisme. Namun, metode toleransi glukosa oral memiliki kelemahan,
yaitu hewan uji hanya dibebani glukosa tanpa merusak pankreas, yang berarti sel-
sel beta masih dalam kondisi normal, dan sekresi insulin masih normal walaupun
jumlah glukosa berlebih. Hiperglikemi terjadi akibat glukosa yang menumpuk
sedangkan sel beta pankreas rusak, sehingga insulin tidak mampu menyalurkan
glukosa ke dalam sel. Glukosa merupakan aldoheksosa, yang sering kita sebut
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
39
sebagai dekstrosa, gula anggur ataupun gula darah. Gula ini terbanyak ditemukan
di alam. Sebagian dari gula sederhana ini kemudian mengalami polimerisasi dan
membentuk polisakarida. Amilum, glikogen, dekstrin dan selulosa merupakan
contoh dari polisakarida. Glikogen merupakan polisakarida yang dapat
meningkatkan kadar glukosa darah karena merupakan cadangan energi pada
hewan dan manusia yang disimpan di hati dan otot sebagai granula, dan jika
dibutuhkan oleh tubuh akan diubah menjadi glukosa yang dikenal sebagai proses
glikogenolisis.
Penetapan kadar glukosa darah dilakukan dengan metode enzimatis, yaitu
dengan menambahkan reagen GOD-PAP yang berisi dapar fosfat 250 mmol/L,
fenol 5 mmol/L, 4-amino antipirin 0,5 mmol/L, glukosa oksidase (GOD) ≥ 10
ku/L, dan peroksidase (POD) ≥1 ku/L. Jika glukosa bereaksi dengan reagen GOD-
PAP akan terbentuk senyawa yang berwarna merah. Mekanisme pembentukan
senyawa berwarna merah tersebut dikenal dengan nama Trinder’s Reaction atau
reaksi Trinder yang ditunjukkan oleh mekanisme reaksi pada Gambar 6. Besarnya
intensitas warna yang terbentuk berbanding lurus dengan jumlah kadar glukosa
darah. Langkah selanjutnya adalah mengukur kadar glukosa darah plasma
menggunakan microvitalab. Selanjutnya dilakukan uji pendahuluan sesuai dengan
rancangan penelitian yang telah dibuat.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
40
Gambar 6. Reaksi enzimatik glukosa dan reagen GOD-PAP (Diasys, 2006)
1. Penetapan waktu pemberian glibenklamida
Tujuan dari penetapan pemberian glibenklamida adalah untuk melihat
pengaruh waktu pemberian terhadap efek hipoglikemik glibenklamida, agar pada
saat Uji Toleransi Glukosa Oral (UTGO), glibenklamida sudah memberikan efek
penurunan kadar glukosa darah.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
41
Waktu pemberian larutan glibenklamida didasarkan pada prosentase
penurunan harga luas daerah di bawah kurva dari menit ke-0 sampai menit ke-240
(LDDK0-240). Hasil perhitungan LDDK0-240 pada penetapan pemberian larutan
glibenklamida sebagai kontrol positif dapat dilihat melalui Tabel III. Dari tabel III
dapat dilihat bahwa pemberian larutan glibenklamida 30 menit sebelum UTGO
memberikan nilai rata-rata LDDK0-240 terkecil dibandingkan dengan pemberian
yang lain. Nilai LDDK0-240 terkecil menunjukkan nilai paling efektif dalam
menurunkan glukosa darah.
Tabel III. Nilai mean LDDK0-240 ± SE larutan glibenklamida sebelum UTGO
Waktu pemberian larutan glibenklamida sebelum
UTGO (menit ke-)
Rata-rata LDDK0-240
(mg.menit/dl)
15 17557,5 ± 1677,7
30 17227,5 ± 993,1
45 22839,8 ± 1534,8
Berdasarkan Tabel III diatas, nilai rata-rata LDDK0-240 terkecil dari
pemberian glibenklamida 30 menit sebelum UTGO adalah 17227,5 ± 993,1
mg.menit/dl. Nilai rata-rata LDDK0-240 masing-masing kelompok perlakuan
tersebut kemudian dibuat diagram batang seperti pada Gambar 7 di bawah ini.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
42
Gambar 7. Diagram batang penentuan selang waktu pemberian larutan glibenklamida sebelum UTGO terhadap mean LDDK0-240
Gambar 7 menunjukkan bahwa nilai mean LDDK0-240 ± SE pada selang
waktu 30 menit sebelum UTGO merupakan nilai terkecil dibandingkan selang
waktu lainnya. Pada menit ke-30 inilah glibenklamida telah mencapai onset
sehingga kemampuan untuk menurunkan kadar glukosa darah paling tinggi
dibandingkan dengan yang lainnya. Nilai LDDK0-240 kemudian diuji secara
statistik menggunakan uji One Way Anova dan dilanjutkan dengan uji Post Hoc
menggunakan uji LSD. Berdasarkan uji One Way Anova dengan taraf kepercayaan
95% didapatkan nilai signifikansi 0,484 > 0,05 yang berarti terdapat perbedaan
yang tidak bermakna dari masing-masing kelompok perlakuan dalam
mempengaruhi kadar glukosa darah.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
43
Tabel IV. Hasil uji Post Hoc LSD LDDK0-240 penurunan glukosa darah tikus akibat pemberian glibenklamida
Selang Waktu Pemberian
glibenklamida (menit)15 30 45
15 - BTB BTB
30 BTB - BTB
45 BTB BTB -
Keterangan:
BTB = Berbeda Tidak Bermakna
Hasil uji statistik pada Tabel IV menunjukkan perbedaan yang tidak
bermakna pada tiap-tiap perlakuan yaitu pemberian glibenklamida pada selang
waktu 15, 30, dan 45 menit sebelum UTGO. Hal ini menunjukkan bahwa pada
masing-masing selang waktu tersebut memberikan efek penurunan glukosa darah
yang sama. Oleh karena itu, pemberian glibenklamida dipilih pada selang waktu
30 menit sebelum UTGO karena memberikan nilai LDDK0-240 terkecil seperti
yang terlihat pada Tabel IV dan diperjelas dengan Gambar 7.
2. Penetapan waktu pemberian infusa daun M.tanarius
Penetapan waktu pemberian infusa daun M.tanarius digunakan untuk
melihat pengaruh waktu pemberian terhadap efek penurunan kadar glukosa darah,
agar pada saat dilakukan UTGO infusa daun M.tanarius sudah memberikan efek
dalam menurunkan kadar glukosa darah.
Penetapan waktu pemberian infusa daun M.tanarius didasarkan pada
harga luas area di bawah kurva pada menit ke-0 sampai dengan menit ke-240
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
44
sebelum dan sesudah UTGO. Hasil perhitungan LDDK0-240 dapat dilihat pada
Tabel V.
Tabel V. Nilai LDDK0-240 pemberian infusa daun M.tanarius
Waktu pemberian infusa daun M.tanarius Rata-rata LDDK0-240 (mg.menit/dl)
15 menit sebelum UTGO 20329 ± 626,3
Bersamaan UTGO 24969 ± 546,5
Tabel V menunjukkan hasil perhitungan LDDK0-240 pemberian infusa
daun M.tanarius pada selang waktu 15 menit sebelum UTGO dan pada saat
bersamaan dengan UTGO. Pemberian infusa daun M.tanarius 15 menit sebelum
UTGO memberikan nilai LDDK0-240 yang lebih kecil dibandingkan dengan
pemberian yang bersamaan UTGO sehingga ditetapkan bahwa pemberian infusa
daun M.tanarius adalah 15 menit sebelum UTGO. Untuk lebih jelasnya dapat
dilihat pada Gambar 8.
Gambar 8. Diagram batang waktu pemberian infusa daun M.tanariusterhadap nilai LDDK0-240
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
45
Pada Gambar 8 diatas dapat diamati bahwa pada 15 menit sebelum
UTGO infusa daun M.tanarius memberikan nilai LDDK0-240 yang paling kecil
dibandingkan pemberian bersamaan dengan UTGO. Pada pemberian 15 menit
sebelum UTGO inilah infusa daun M.tanarius telah mencapai onset sehingga
kemampuan untuk menurunkan kadar glukosa darah paling tinggi dibandingkan
dengan yang lainnya. Berdasarkan data tersebut maka ditetapkan pemberian
infusa daun M.tanarius adalah 15 menit sebelum UTGO.
3. Uji efek penurunan kadar glukosa darah kombinasi glibenklamida dan infusa daun M.tanarius
Tujuan dari uji ini yaitu untuk melihat efek penurunan kadar glukosa
darah dari kombinasi glibenklamida dan infusa daun M.tanarius. Pada penelitian
ini dilakukan penetapan kadar glukosa darah pada 6 kelompok perlakuan yaitu
kontrol negatif diberi aquadest; kontrol positif diberi larutan glibenklamida
dengan dosis 0,45 mg/kgBB; kontrol 1 infusa daun M.tanarius yaitu dosis 10
mg/kgBB; kontrol 0,5 infusa daun M.tanarius, yaitu dosis 5 mg/kgBB; kombinasi
infusa daun M.tanarius dan glibenklamida dengan perbandingan dosis 1:1; serta
kombinasi infusa daun M.tanarius dan glibenklamida dengan perbandingan dosis
1:0,5.
Berdasarkan dari hasil pengukuran kadar glukosa darah tikus dari
masing-masing perlakuan didapatkan rata-rata kadar glukosa plasma darah yang
dapat dilihat pada Tabel VI.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
46
Tabel VI. Rata-rata kadar glukosa darah dan LDDK0-240 pada setiap kelompok perlakuan
Kelompok Perlakuan
Kontrol negatif
Kontrol positif
I II III IV
0Rerata kadar
glukosa darah
(mg/dl) tikus ±
SE
90,2 ± 2,1 86,3 ± 8,0 80,0 ± 7,3 86,4 ± 3,8 124,4 ± 8,8 69,6 ± 7,7
15 158,6 ± 5,0 122,2 ± 3,5 125,8 ± 7,7 149,0 ± 4,6 106,6± 10,7 73,2 ± 8,8
30 170,6 ± 4,8 135,6 ± 7,4 136,6 ± 6,2 161,8 ± 1,9 83,0 ± 8,3 79,6 ± 7,5
45 192,2 ± 6,1 131,6 ± 7,8 129,0 ± 2,9 155,2 ± 4,0 72,8 ± 2,4 83,6 ± 8,1
60 163,0 ± 7,2 113,8 ± 6,9 117,8 ± 5,6 145,0 ± 6,9 78,2 ± 3,6 86,2 ± 7,2
90 112,2 ± 7,4 76,4 ± 3,5 81,0 ± 3,9 85,8 ± 5,3 92,8 ± 5,9 79,4 ± 4,9
180 84,0 ± 4,2 66,2 ± 3,4 65,0 ± 2,0 75,0 ± 2,6 67,6 ± 3,8 106,2 ± 19,1
240 75,8 ± 2,7 59,2 ± 2,7 63,0 ± 2,5 67,2 ± 1,3 101,6 ± 8,5 71,8 ± 7,6
LDDK0-240 27471,0 ± 768,7
19897,7 ± 547,4
21586,5 ± 643,4
23674,5 ± 570,3
20314,5 ± 796,8
20890,5 ±1920,3
Keterangan:Kontrol negatif : aquadestKontrol positif : glibenklamida dosis 0,45 mg/kgBBI. : kontrol 1 infusa (infusa daun M.tanarius dosis 10 mg/kgBB)II. : kontrol 0,5 infusa (infusa daun M.tanarius dosis 5 mg/kgBB)III. : kombinasi 1:1 (glibenklamida-infusa daun M.tanarius dosis 10 mg/kgBB)IV. : kombinasi 1:0,5 (glibenklamida-infusa daun M.tanarius dosis 5 mg/kgBB)
Tabel VI diatas menunjukkan hasil pengukuran kadar glukosa darah tikus
pada masing-masing kelompok perlakuan. Perbandingan kadar glukosa darah
masing-masing kelompok perlakuan dapat dilihat pada kurva hubungan antara
kadar glukosa darah dan waktu sampling dari masing-masing kelompok perlakuan
berikut ini.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
47
Gambar 9. Kurva hubungan antara waktu sampling dan kadar rata-rata glukosa darah akibat pemberian aquadest, glibenklamida, dan infusa daun
M.tanariusKeterangan:Kontrol negatif : aquadestKontrol positif : glibenklamida dosis 0,45 mg/kgBBKontrol 1 infusa : infusa daun M.tanarius dosis 10 mg/kgBB Kontrol 0,5 infusa : infusa daun M.tanarius dosis 5 mg/kgBBKombinasi 1:1 : kombinasi glibenklamida-infusa daun M.tanarius dosis 10 mg/kgBBKombinasi 1:0,5 : kombinasi glibenklamida-infusa daun M.tanarius dosis 5 mg/kgBB
Gambar 9 menunjukkan adanya respon kadar glukosa darah hewan uji
akibat pembebanan glukosa saat UTGO pada berbagai perlakuan. Pada kelompok
kontrol negatif aquadest menunjukkan rata-rata kadar glukosa paling tinggi
dibandingkan perlakuan lainnya. Hal ini dikarenakan pada kontrol negatif
aquadest, tikus hanya diberi aquadest yang tidak memiliki efek terapetik,
sehingga kadar glukosa darah ditentukan oleh kemampuan tubuh tikus sendiri
untuk menurunkan kadar glukosa tanpa adanya penambahan obat ataupun infusa
daun M.tanarius.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
48
Untuk kelompok perlakuan kontrol positif glibenklamida, kelompok
perlakuan infusa daun M.tanarius dosis 5 mg/kgBB dan 10 mg/kgBB serta
kelompok perlakuan kombinasi glibenklamida dengan infusa M.tanarius dosis 1:1
maupun 1:0.5 memberikan profil kurva yang lebih rendah dibandingkan dengan
kontrol negatif aquadest.
Data prosentase kadar glukosa darah dan waktu sampling digunakan
untuk menghitung luas area di bawah kurva atau LDDK0-240. Nilai LDDK0-240 tiap
perlakuan menunjukkan jumlah kadar glukosa dalam darah selama 240 menit.
Nantinya nilai LDDK0-240 ini dapat digunakan untuk menentukan efektifitas dalam
menurunkan kadar glukosa darah. Semakin kecil nilai LDDK0-240 maka
kemampuan menurunkan kadar glukosa darah semakin besar. Nilai LDDK0-240
rata-rata dari masing-masing kelompok terangkum dalam Tabel VII berikut ini.
Tabel VII. Rata-rata LDDK0-240 SE masing-masing perlakuan
Kelompok perlakuan NMean LDDK0-240 SE
(mg.menit/dl)
Kontrol negatif (aquadest) 5 27471,0 ± 768,7
Kontrol positif (glibenklamida) 5 19897,7 ± 547,4
Kontrol 0,5 infusa (5 mg/kgBB) 5 23674,5 ± 570,3
Kontrol 1 infusa (10 mg/kgBB) 5 21586,5 ± 643,4
Kombinasi 1:1 5 20314,5 ± 796,8
Kombinasi 1:0,5 5 20890,5 ± 1920,3
Tabel VII diatas menggambarkan nilai rata-rata LDDK0-240 SE dari
masing-masing kelompok perlakuan. Pada tabel diatas dapat dilihat bahwa nilai
rata-rata LDDK0-240 SE terkecil dimiliki oleh kontrol positif larutan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
49
glibenklamida dengan nilai 19897,66 ± 547,43 mg.menit/dl. Oleh karena itu,
pemberian larutan glibenklamida memberikan efek menurunkan kadar glukosa
darah yang terbesar. Hal ini disebabkan karena penggunaan larutan glibenklamida
sebagai kontrol positif, merupakan obat hipoglikemik oral golongan sulfonilurea
yang memiliki efek terapetik menurunkan kadar glukosa darah. Untuk lebih
jelasnya dapat dilihat pada Gambar 10.
Gambar 10. Diagram batang nilai rata-rata LDDK0-240 SE dari masing-masing perlakuan
Pada Gambar 10 dapat dilihat bahwa kelompok perlakuan pemberian
kombinasi juga memiliki kemampuan menurunkan kadar glukosa darah karena
memiliki nilai rata-rata LDDK0-240 yang lebih kecil dibandingkan dengan kontrol
negatif walaupun tidak lebih rendah dari pada kontrol positif. Nilai rata-rata
LDDK0-240 yang dimiliki oleh kelompok perlakuan kombinasi lebih rendah
dibandingkan kelompok kontrol infusa M.tanarius. Hal ini menunjukkan adanya
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
50
peningkatan kemampuan dalam menurunkan kadar glukosa darah. Akan tetapi,
nilai rata-rata LDDK0-240 dari kelompok perlakuan kombinasi lebih besar
dibandingkan kontrol positif. Hal tersebut menunjukkan adanya penurunan
kemampuan dari glibenklamida dalam menurunkan kadar glukosa darah setelah
dikombinasikan dengan infusa daun M.tanarius. Jika dibandingkan antara kedua
kelompok perlakuan kombinasi, kombinasi 1:1 memiliki nilai rata-rata LDDK0-240
yang lebih kecil, yaitu sebesar 20314,5 ± 796,8 mg.menit/dl, sedangkan kelompok
perlakuan kombinasi 1:0,5 yang memiliki nilai LDDK0-240 sebesar 20890,5 ±
1920,3 mg.menit/dl.
Nilai LDDK0-240 dari semua kelompok perlakuan dianalisis statistik
menggunakan program SPSS 17. Langkah pertama adalah melakukan uji
Kolmogorov-Smirnov, uji ini dilakukan untuk mengetahui apakah data
terdistribusi normal. Nilai signifikansi untuk dosis pembebanan glukosa sebesar
0,643 > 0,05 yang berarti data terdistribusi normal. Selanjutnya, dilakukan analisis
homogenitas varian dengan Levene Statistic untuk mengetahui homogenitas dari
nilai LDDK0-240 tiap-tiap kelompok perlakuan. Dari uji homogenitas varian
didapatkan data LDDK0-240 memiliki varian yang homogen apabila p > 0,05.
Perbedaan variansi data LDDK0-240 dapat dilihat pada Tabel VIII yang
menunjukkan bahwa nilai p > 0,05, yaitu 0,329.
Tabel VIII. Hasil analisis homogenitas variansi menggunakan uji One Way Anova
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
51
Uji statistik Kolmogorov-Smirnov dan Levene statistic untuk waktu
pembebanan glukosa masing-masing mempunyai nilai signifikansi > 0,05. Hal
tersebut berarti data terdistribusi normal dan homogen, sehingga dilanjutkan
dengan analisis variansi satu jalan (One Way Anova). One Way Anova dilakukan
untuk mengetahui apakah perlakuan yang diberikan mempunyai perbedaan yang
signifikan. Berdasarkan uji One Way Anova dengan taraf kepercayaan 95%
didapatkan nilai signifikansi 0,000 < 0,05 yang berarti ada perbedaan yang
bermakna dari masing-masing kelompok perlakuan dalam mempengaruhi kadar
glukosa darah. Untuk mengetahui dan melihat kebermaknaan dari perbedaan pada
masing-masing kelompok tersebut maka uji One Way Anova dilanjutkan dengan
uji Post Hoc menggunakan uji Least Significant Difference (LSD). Hasil uji LSD
dengan taraf kepercayaan 95 % pada beberapa uji ditunjukkan pada Tabel IX.
Tabel IX. Hasil uji Post Hoc LSD LDDK0-240 pada kelompok perlakuan dengan taraf kepercayaan 95%
1 2 3 4 5 6
1 - BB BB BB BB BB
2 BB - BB BTB BTB BTB
3 BB BB - BTB BB BTB
4 BB BTB BTB - BTB BTB
5 BB BTB BB BTB - BTB
6 BB BTB BTB BTB BTB -
Keterangan :1 : aquadest2 : glibenklamida dosis 0,45 mg/kgBB3 : infusa daun M.tanarius dosis 5 mg/kgBB4 : infusa daun M.tanarius dosis 10 mg/kgBB5 : kombinasi glibenklamida-infusa daun M.tanarius dosis 10 mg/kgBB6 : kombinasi glibenklamida-infusa daun M.tanarius dosis 5 mg/kgBBBB : Berbeda BermaknaBTB : Berbeda Tidak Bermakna
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
52
Hasil uji LSD pada Tabel IX di atas menunjukkan adanya perbedaan
yang bermakna antara kontrol negatif aquadest dengan kontrol positif
glibenklamida, kontrol infusa daun M.tanarius serta kelompok perlakuan
kombinasi. Hal ini menunjukkan bahwa glibenklamida, infusa daun M.tanarius
pada dosis 5 mg/kgBB dan 10 mg/kgBB, serta perlakuan kombinasi
glibenklamida dengan infusa M.tanarius pada kombinasi dosis 1:1 maupun 1:0.5
memberikan efek untuk menurunkan kadar glukosa darah pada tikus yang
dibebani glukosa.
Kelompok kontrol positif glibenklamida memiliki perbedaan yang
bermakna terhadap kelompok perlakuan infusa daun M.tanarius pada dosis 5
mg/kgBB. Hal ini berarti, walaupun infusa infusa daun M.tanarius dosis 5
mg/kgBB memiliki efek menurunkan kadar glukosa darah tetapi efeknya tidak
setara dengan glibenklamida. Perbedaan yang tidak bermakna ditunjukkan oleh
kelompok kontrol positif glibenklamida terhadap kelompok perlakuan infusa daun
M.tanarius dosis 10 mg/kgBB serta kelompok perlakuan kombinasi
glibenklamida dengan infusa M.tanarius dosis 1:1 maupun 1:0.5. Hal ini
menunjukkan bahwa kelompok perlakuan infusa daun M.tanarius dosis 10
mg/kgBB dan kelompok perlakuan kombinasi glibenklamida dengan infusa
M.tanarius pada kombinasi dosis 1:1 maupun 1:0.5 memiliki kemampuan yang
setara dengan glibenklamida dalam menurunkan kadar glukosa darah.
Berdasarkan hasil uji Post Hoc LSD, kelompok perlakuan kombinasi
glibenklamida dengan infusa M.tanarius pada kombinasi dosis 1:1 memiliki
perbedaan yang tidak bermakna dibandingkan dengan kelompok perlakuan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
53
kontrol infusa M.tanarius 10 mg/kgBB dan dengan kelompok kontrol positif
glibenklamida. Hasil tersebut menunjukkan bahwa kelompok perlakuan
kombinasi glibenklamida dengan infusa M.tanarius pada kombinasi dosis 1:1
memiliki kemampuan yang setara dengan kelompok perlakuan kontrol infusa
M.tanarius 10 mg/kgBB dan kelompok kontrol positif glibenklamida yang berarti
bahwa pada pemberian infusa yang dikombinasi dengan glibenklamida
menunjukkan penurunan kadar glukosa darah yang setara dengan pemberian
infusa tunggal dosis 10 mg/kgBB maupun glibenklamida tunggal.
Pada kelompok perlakuan kombinasi glibenklamida dengan infusa
M.tanarius pada kombinasi dosis 1:0,5 dibandingkan dengan kelompok perlakuan
kontrol infusa M.tanarius 5 mg/kgBB memiliki perbedaan yang tidak bermakna.
Hal yang sama juga terlihat bila dibandingkan dengan perlakuan kontrol positif
glibenklamida. Hal ini berarti bahwa kelompok perlakuan kombinasi
glibenklamida dengan infusa M.tanarius pada kombinasi dosis 1:0,5 memiliki
kemampuan yang setara dalam menurunkan kadar glukosa darah dengan
kelompok perlakuan kontrol infusa M.tanarius 5 mg/kgBB dan kontrol positif
glibenklamida.
Untuk mengetahui besarnya perbedaan pada kelompok perlakuan kontrol
terhadap kelompok perlakuan kombinasi dapat dihitung melalui prosentase
perbedaan nilai LDDK0-240 dari masing-masing kelompok perlakuan. Hasil
perhitungan prosentase perbedaan dan nilai kebermaknaan perbedaan secara
statistik dapat dilihat pada Tabel X berikut ini.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
54
Tabel X. Prosentase perbedaan antara kelompok kontrol terhadap kelompok perlakuan kombinasi
Kelompok PerlakuanProsentase perbedaan terhadap perlakuan
Kombinasi 1:1 Kombinasi 1:0,5
Kontrol positif (Glibenklamida) (-) 2,05 % (ab) (-) 4,75 % (ab)
Kontrol 0,5 infusa (5 mg/kgBB) - (+) 13,33 %(ab)
Kontrol 1 infusa (10 mg/kgBB) (+) 6,26 %(ab) -
Keterangan :
(-) : Inhibisi (penghambatan) (+) : Potensiasi (penguatan)
b : Berbeda Bermakna ab : Berbeda Tidak Bermakna
Tabel X menunjukkan bahwa kombinasi glibenklamida-infusa
M.tanarius dengan perbandingan dosis 1:1 (infusa M.tanarius dosis 10 mg/kgBB)
memiliki kemampuan inhibisi atau penghambatan terhadap glibenklamida dalam
menurunkan kadar glukosa darah sebesar 2,05 %. Untuk kombinasi
glibenklamida-infusa M.tanarius dengan perbandingan dosis 1:0,5 (infusa
M.tanarius dosis 5 mg/kgBB) memiliki kemampuan inhibisi atau penghambatan
terhadap glibenklamida dalam menurunkan kadar glukosa darah sebesar 4,75 %.
Akan tetapi, jika ditinjau secara statistik kedua perlakuan kombinasi tersebut
memiliki kemampuan menurunkan glukosa darah yang berbeda tidak bermakna.
Berdasarkan hasil tersebut, dapat disimpulkan bahwa pemberian infusa
M.tanarius dikombinasikan dengan glibenklamida tidak mempengaruhi potensi
glibenklamida dalam menurunkan kadar glukosa darah. Ini berarti sebaiknya
infusa daun M.tanarius tidak digunakan bersamaan dengan glibenklamida.
Menurut Byrne, Burhorn, dan Göke (1999), telah terbukti bahwa
acarbose yang merupakan obat golongan inhibitor α-glukosidase tidak secara
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
55
signifikan mengubah karakteristik farmakokinetika dari glibenklamida, yang
merupakan suatu obat golongan sulfonilurea yang paling sering diresepkan. Oleh
karena itu, acarbose dapat dengan aman digunakan bersama glibenklamida.
Sebaliknya, telah terbukti bahwa acarbose secara signifikan dapat mengurangi
biovailabilitas akut dari metformin (Scheen, de Magalhaes, Salvatore, dan
Levebvre, 1994). Hal tersebut didukung dengan penelitian yang telah dilakukan
oleh Oktavia (2012), bahwa pemberian ekstrak metanol-air M.tanarius (EMMT)
dapat menghambat kemampuan metformin dalam menurunkan kadar glukosa
darah tikus.
Berdasarkan uraian tersebut, mekanisme penghambatan yang terjadi
antara infusa daun M.tanarius yang mengandung senyawa inhibitor α-glukosidase
terhadap glibenklamida yang merupakan golongan sulfonilurea belum diketahui
secara pasti. Oleh karena itu, perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai
pengaruh infusa daun M.tanarius terhadap karakteristik farmakokinetika
glibenklamida.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
56
BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
A. Kesimpulan
Infusa daun M.tanarius sebagai kombinasi dari glibenklamida tidak
mempengaruhi potensi glibenklamida dalam menurunkan glukosa darah pada
pada tikus putih jantan galur Wistar yang terbebani glukosa.
B. Saran
1. Sebaiknya infusa M.tanarius tidak digunakan bersamaan dengan
glibenklamida karena infusa M.tanarius dapat menghambat glibenklamida
dalam menurunkan glukosa darah.
2. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut menggunakan kombinasi lain,
misalnya acarbose yang merupakan inhibitor α-glukosidase.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
57
DAFTAR PUSTAKA
Ansel, H. C., 1989, Pengantar Bentuk Sediaan Farmasi, 605-612, UniversitasIndonesia Press, Jakarta.
Backer, A.C., dan Van den Brink, B.C.R., 1965, Flora of Java, Vol.II, N.V.P Noordhoff-Groningen, The Netherlands
Byrne, M.M., Burhorn, M.A., dan Göke, G., 1999, Acarbose: ‘The European Experience’, Diabetes Mellitus in the Elderly, 47-59.
Cartailler, J.P., 2004, Insulin - from secretion to action, www.betacell.org/content/articles/print.php?aid=1, diakses tanggal 30 Maret 2012.
Ceriello, A., 2005, Postprandial hyperglycemia and diabetes complications: Is ittime to treat? , 54, 1–7, Diabetes, Internal Medicine, University of Udine,Italy.
Diasys, 2006, Glucose GOD FS* Diagnostic Reagent for Quantitative In Vitro Determination of Glucose in Serum or Plasma on Photometric Systems, http://site.iugaza.edu.ps/mzaharna/files/2010/03/Glucose_GOD_FS_5_1.pdf, diakses pada 5 Juli 2012
DiPiro, T., Tarbet, L., Yee, C., Matzke, R., Wells, G., and Posey, M., 2005, Pharmacotherapy A Pathopysiologic Approach, 1341, Medical Publishing Division, New York.
Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan RI, 1986, Sediaan Galenik, 8-25, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta.
Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan RI, 1995, Farmakope Indonesia, edisi IV, 31, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta.
Dollery, S.C., 1999, Therapeutic Drugs, 2nd Edition, Vol I, G 64-69, ChurchillLivingstone, London.
Donatus, I.A., 1995, Antaraksi Farmakokinetika, 8-15, Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta.
Handayani, M.T., 2011, Pengaruh Pemberian Ekstrak Metanol-Air Daun M.tanarius Terhadap Penurunan Kadar Glukosa Darah pada Tikus yang Terbebani Glukosa, Skripsi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
58
Irawan,M.A., 2007, Glukosa dan Metabolisme Energi, http://www.pssplab.com/journal/06.pdf, diakses tanggal 30 Maret 2012.
Katzung, B.G., 2002, Farmakologi Dasar Dan Klinik, Edisi III, 585-587, Diterjemahkan Oleh Andrianto. P, Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta.
Lim, T.Y., Lim, Y.Y., dan Yule, C.M., 2009, Evaluation of Antioxidant, Antibacterial and Anti-tyrosinase Activities of Four Macaranga Species, Food Chemistry, 114 (2009), 594-599.
Lin, J.H., Nonaka, G., and Nishioka, I., 1990, Tannins and Related Compounds. XCIV.1)Isolation and Characterization of Seven New Hydrolyzable Tannins from the Leaves of Macaranga tanarius (L.) MUEL(L.), et ARG., Chem.Pharm. Bull, 38 (5) 1218-1223.
Mahendra, A.A., 2010, Efek Hepatoprotektif Infusa Daun Macaranga Tanarius L. pada Tikus Jantan Galur Wistar Terinduksi Parasetamol, Skripsi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.
Martin, E.W. 1971. Hazard of Medication a Manual on Drug Interaction, Imcompatibilities, Contraindications, and Adverse Effect. J.B. Lippincott Company, Philadelphia.
Matsui, T., Ueda, T., Oki, T., Sugita, K., Terahara, N., & Matsumoto, K., 2001, α-Glucosidase Inhibitory Action of Natural Acylated Anthocyanins, 1, Survey of Natural Pigments with Potent Inhibitory Activity. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 49, 1948–1951.
Matsunami, K., Takamori, I., Shinzato, T., Aramoto, M., Kondo, K., Otsuka, H., Takeda,Y., 2006. Radical-scavenging Activities of New Megastigmane Glucosides from Macaranga tanarius (L.) MULL.-ARG. Chem. Pharm. Bull. 54, 1403–1407.
Merentek, E., 2006, Resistensi Insulin Pada Diabetes mellitus Tipe 2, MajalahCermin Dunia Kedokteran, No 150,38, 39, Jakarta.
Mizuno, C.S., Chittiboyina, A.G., Kurtz, T.W., Pershadsingh, H.A, and Avery, M.A., 2008, Type 2 diabetes and oral antihyperglycemic drugs. Curr Med Chem, 15(1), 61-74. PMID: 18220763.
Monami M, Luzzi C, Lamanna C, Chiasserini V, Addante F, Desideri CM, Masotti G, Marchionni N, Mannucci E: Three-year mortality in diabetic patients treated with different combinations of insulin secretagogues and metformin. Diabetes Metab Res Rev. 2006 Nov-Dec;22(6):477-82, http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/16634115, diakses pada 29 Maret 2012.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
59
Nishioka, T., Kawabata, J., & Aoyama, Y., 1998, Baicalein, An a-glucosidase Inhibitor from Scutellaria baicalensis. Journal of Natural Products, 61, 1413–1415.
Nugraha, A.W., 2010, Efek Hepatoprotektif Jangka Pendek Infusa Daun Macaranga Tanarius L. pada Tikus Jantan Galur Wistar Terinduksi Parasetamol, Skripsi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.
Nugrahesti, S.I., 2011, Efek Kombinasi Ekstrak Metanol-air Daun M.tanariusdengan Glibenklamida terhadap Penurunan Glukosa Darah Tikus Terbebani Glukosa, Skripsi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.
Oktavia, T., 2012, Efek Penurunan Kadar Glukosa Darah Kombinasi Ekstrak Metanol-Air Daun Macaranga tanarius L. pada Tikus Putih Jantan Galur Wistar Terbebani Glukosa, Skripsi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.
Phommart, S., Sutthivaiyakit, P., Chimnoi, N., Ruchirawat, S., dan Sutthivaiyakit, S., 2005, Constituents of the Leaves of Macaranga tanarius, J. Nat. Prod., 68, 927-930.
Plantamor, 2008, Informasi Spesies- Mara Macaranga tanarius L. M.A. http://www.plantamor.com/index.php?plant=804, diakses tanggal 18 Maret2011.
Plants of Hawaii, 2000, Macaranga tanarius (parasol leaf tree), http://www.hear.org/starr/images/image/?q=000220-9001&o=plants, diakses tanggal 15 Mei 2012
Prohati,2011,Prosea-Macarangatanarius, http://proseanet.org/prohati2/browser.php?docsid=162, diakses tanggal 18 Maret 2011.
Puteri, M. D. P. T. G., dan Kawabata, J., 2010, Novel α- glucosidase Inhibitors from Macaranga tanarius leaves, Food Chemistry, 123 (2010), 384-389.
Rayanm, V., Rao, A.L., dan Ramana, M.V., 2011, Validated RP - HPLC Method for the Estimation of Glibenclamide in Formulation and Serum, International Journal of Research in Pharmaceutical and Biomedical Sciences, Vol. 2, 2.
Scheen, A.J., de Magalhaes, A.C., Salvatore, T., dan Lefebvre, P.J., 1994, Reduction of the acute bioavailability of metformin by the alpha-glucosidase inhibitor acarbose in normal man, Eur J Clin Invest., 24 Suppl 3:50-4., http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/7818725, diakses pada 19 Juli 2012.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
60
Setiawan, I.P., 2012, Efek Penurunan Kadar Glukosa Darah Ekstrak Metanol-Air Daun Macaranga tanarius L. terhadap Metformin pada Tikus Putih Jantan Terbebani Glukosa, Skripsi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.
Soegondo, S., 2005, Diagnosis dan Klasifikasi Diabetes Melitus Terkini, dalamPenatalaksanaan Diabetes Melitus Terpadu, 17-26, Fakultas KedokteranUniversitas Indonesia, Jakarta.
Subroto, 2006, Ramuan Herbal Untuk Diabetes Melitus, 4-9, Penebar Swadaya, Jakarta.
Theresia, V., 2012, Pengaruh Pemberian Infusa M.tanarius terhadap Penurunan Glukosa Darah Tikus yang Terbebani Glukosa, Skripsi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.
Tjay, T. H., dan Rahardja, K., 2002, Obat-Obat Penting: Khasiat Penggunaandan Efek Samping, Edisi IV, 567-584, Direktorat Jenderal Pengawasan Obat Dan Makanan, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta.
Triplitt, C.L., Reasner, C.A. Isley.L.I., 2005, Diabetes Mellitus, dalam Dipro, J.T, Talbert, R.L., Yee, G.C., Matzke, G.R., Welss, B.G., Posey, L.M., (Eds.), Pharmacotherapy a Phathophysiologic Approach, sixth edition 1333-1365, Appleton and Lange, Standford Canneticut.
Waspadji, 2005, Diabetes Melitus Mekanisme Dasar dan Pengelolaannya yang Rasional, dalam Penatalaksanaan Diabetes Terpadu, Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia, Jakarta.
Widowati, L., Dzulkarnain, B., dan Sa’roni, 1997, Tanaman Obat untuk Diabetes Mellitus, Cermin Dunia Kedokteran, 116, 53-60, Jakarta.
Woodley, M dan Whelant, A., 1995, Pedoman Pengobatan, 36-39, AndioffsetEssensia Medica, Yogyakarta.
Wulandari, D., 2010, Efek Analgesik Infusa Daun Macaranga Tanarius pada Mencit Betina Galur Swiss, Skripsi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.
Yayasan Pengembangan Obat Alam, 1993, Pedoman Pengujian dan Penapisan Farmakologi, 15-17, Pengujian Fitokimia dan Pengujian Klinik, Yayasan Pengembangan Obat Alam, Jakarta.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
61
LAMPIRAN
Lampiran 1. Daun Macaranga tanarius L. (Plants of Hawaii, 2000)
Lampiran 2. Infusa daun M.tanarius
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
62
Lampiran 3. Tikus putih jantan galur Wistar
Lampiran 4. Microlab
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
63
Lampiran 5. Surat determinasi tanaman M.tanarius
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
64
Lampiran 6. Kadar glukosa darah tikus pada masing-masing kelompokperlakuan
Waktu (menit)
Kadar Glukosa Darah Kelompok Kontrol Negatif
(mg/dl)Rata-rata
Kadar (mg/dl)tikus 1 tikus 2 tikus 3 tikus 4 tikus 5
0 96 90 91 83 91 90,215 176 155 159 145 158 158,630 158 186 174 163 172 170,645 170 198 191 207 195 192,260 148 146 172 184 165 16390 132 96 94 122 117 112,2180 95 79 71 90 85 84240 84 74 67 78 76 75,8
LDDK 29175 25950 25387,5 28897,5 27945 27741
Waktu (menit)
Kadar Glukosa DarahKelompok Kontrol Positif
(mg/dl)Rata-rata
Kadar (mg/dl)tikus 1 tikus 2 tikus 3 tikus 4 tikus 5
0 88,5 57,8 83 101 101 86,2615 132,8 115 126 123 114 122,1630 110,1 128 150 143 147 135,6245 102 144 130 140 142 131,660 107 132 91 121 118 113,890 82 63 80 76 81 76,4180 71 53 71 69 67 66,2240 57 51 67 63 58 59,2
LDDK 20192,3 18493,5 20895 21165 18742,5 19897,66
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
65
Waktu (menit)
Kadar Glukosa DarahKelompok Kontrol 1 Infusa
(mg/dl)
Rata-rata Kadar (mg/dl)
tikus 1 tikus 2 tikus 3 tikus 4 tikus 5
0 106 68 86 72 68 8015 150 120 134 121 104 125,830 149 123 146 145 120 136,645 138 129 127 131 120 12960 129 97 124 123 116 117,890 86 68 76 87 88 81180 66 72 62 65 60 65240 61 59 62 73 60 63
LDDK 22192,5 19522,5 21210 21547,5 23460 21586,5
Waktu (menit)
Kadar Glukosa DarahKelompok Kontrol 0,5 Infusa
(mg/dl)
Rata-rata Kadar (mg/dl)
tikus 1 tikus 2 tikus 3 tikus 4 tikus 5
0 100 85 76 86 85 86,415 151 152 163 135 144 14930 167 165 161 156 160 161,845 163 163 145 146 159 155,260 162 156 126 132 149 14590 99 87 78 70 95 85,8180 80 75 77 78 65 75240 69 65 70 69 63 67,2
LDDK 25620 24142,5 22995 22290 23325 23674,5
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
66
Waktu (menit)
Kadar Glukosa DarahKombinasi 1:1
(mg/dl)Rata-rata
Kadar (mg/dl)tikus 1 tikus 2 tikus 3 tikus 4 tikus 5
0 88,5 57,8 83 101 101 86,2615 132,8 115 126 123 114 122,1630 110,1 128 150 143 147 135,6245 102 144 130 140 142 131,660 107 132 91 121 118 113,890 82 63 80 76 81 76,4180 71 53 71 69 67 66,2240 57 51 67 63 58 59,2
LDDK 20192,3 18493,5 20895 21165 18742,5 20314,5
Waktu (menit)
Kadar Glukosa DarahKombinasi 1:0,5
(mg/dl)Rata- rata
Kadar (mg/dl)tikus 1 tikus 2 tikus 3 tikus 4 tikus 5
0 82 81 83 55 47 69,615 87 98 54 54 73 73,230 90 92 86 51 79 79,645 100 104 82 63 69 83,660 88 111 87 68 77 86,290 94 80 83 76 64 79,4180 97 160 92 48 134 106,2240 58 65 92 56 88 71,8
LDDK 21405 26265 20550 14302,5 21930 20890,5
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
67
Lampiran 7. Hasil uji Kolmogorov-Smirnov LDDK0-240 perlakuan
Lampiran 8. Hasil uji One Way ANOVA LDDK0-240 kelompok perlakuan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
68
Lampiran 9. Hasil uji Post Hoc LSD pada LDDK0-240 pada kelompok perlakuan dengan taraf kepercayaan 95%
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
69
Means Plot
Lampiran 10. Rangkuman signifikansi hasil uji Post Hoc LSD LDDK0-240
pada kelompok perlakuan
Kel 1 2 3 4 5 61 0,000(bb) 0,013(bb) 0,000(bb) 0,000(bb) 0,000(bb)
2 0,000(bb) 0,013(bb) 0,242(btb) 0,770(btb) 0,488(btb)
3 0,013(bb) 0,013(bb) 0,151(btb) 0,025(bb) 0,060(btb)
4 0,000(bb) 0,242(btb) 0,151(btb) 0,375(btb) 0,625(btb)
5 0,000(bb) 0,770(btb) 0,025(bb) 0,375(btb) 0,686(btb)
6 0,000(bb) 0,488(btb) 0,060(btb) 0,626(btb) 0,686(btb)
Keterangan :1 : aquadest2 : glibenklamida dosis 0,45 mg/kgBB3 : infusa daun M.tanarius dosis 5 mg/kgBB 4 : infusa daun M.tanarius dosis 10 mg/kgBB5 : kombinasi Glibenklamida-infusa daun M.tanarius dosis 10 mg/kgBB6 : kombinasi Glibenklamida-infusa daun M.tanarius dosis 5 mg/kgBBbb : berbeda bermaknabtb : berbeda tidak bermakna
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
70
Lampiran 11. Contoh perhitungan volume pemberian glukosa, Glibenklamida, dan infusa daun M.tanarius
a. Volume pemberian glukosa (D = 1,75 g/kgBB, C = 0,15 g/ml)D x BB = C x V
1,75 g/kg x 0,2486 kg = 0,15 g/ml x VV = 2,9 ml
b. Volume pemberian Glibenklamida (D = 0,45 mg/kgBB, C= 0,1125 mg/ml) D x BB = C x V
0,45 mg/kg x 0,2486 kg = 0,1125 mg/ml x VV = 0,99 ml
c. Volume pemberian infusa daun M.tanarius (D=10 g/kgBB, C=0,5 mg/ml)D x BB = C x V
10 g/kg x 0,2486 kg = 0,5 g/ml x VV = 4,97 ml
Lampiran 12. Contoh perhitungan LDDK0-240 pada kelompok perlakuan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
71
BIOGRAFI PENULIS
Penulis skripsi yang berjudul “Uji Potensiasi Infusa Daun Macaranga Tanarius (L.) terhadap Glibenklamida sebagai Penurun Kadar Glukosa Darah pada Tikus Putih Jantan Galur Wistar yang Terbebani Glukosa” bernama lengkap Ana Puspita Dewi, dilahirkan di Gunungkidul pada tanggal 19 Juli 1990, yang merupakan putri kedua dari dua bersaudara dalam keluarga pasangan Heribertus Iriyanto dan Maria Margaretha Sri Sugiyatni. Penulis mengawali masa pendidikan di TK Bina Muda IV (1994-1996), SD Legundi II (1996-2002) dan di SLTP Negeri 1 Panggang (2002-2005), kemudian penulis
melanjutkan pendidikan tingkat menengah atas di SMA N 6 Yogyakarta (2005-2008). Penulis melanjutkan pendidikan sarjana di Universitas Sanata Dharma Yogyakarta pada tahun 2008. Semasa menempuh kuliah penulis aktif dalam kegiatan organisasi dan kepanitian antara lain, Sekretaris KPU BEMU USD 2008, Sekretaris I BEMF Farmasi periode 2008-2009, Master of Ceremony dalam Pelepasan Wisuda Fakultas Farmasi tahun 2010, Co Sie Acara Peringatan Hari AIDS Fakultas Farmasi, serta Ketua Panitia Studi Banding oleh ITB di Fakultas Farmasi USD. Penulis juga mendapatkan prestasi sebagai peserta PIMNAS di Unhas Makassar bidang PKMK dan juara I Business Plan Universitas Sanata Dharma 2011. Penulis pernah menjadi asisten praktikum Kimia Dasar pada tahun 2009.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
Top Related