KROMATOGRAFI AFINITAS
KROMATOGRAFI AFINITAS
Definisi
pemurnian
prosedur
syarat
aplikasi
Definisi
DEFINISITeknik kromatografi cair yang membuat penggunaan "interaksi biologis" untuk pemisahan dan analisis analit tertentu dalam sampel
Cont :
protein yang mengikat logam
SYARAT KROMATOGRAFI AFINITAS
ligan
PEMURNIANPemurnian dengan teknik kromatografi afinitas disebut pemurnian satu tahap (one step purification) dan diperlukan interaksi spesifik antara protein rekombinan dengan suatu ligan
PROSEDUR
Di siapkan kolom afinitas dengan matriks dan ligan yang sesuai
Sampel Protein dimasukkan ke dalam kolom dan protein akan melalui saringan matriks afinitas manik-manik.
Protein berinteraksi dengan afinitas ligan dengan beberapa protein yang mengikat dengan erat, longgar dan tak berikatan
Protein yang tidak mengikat akan tercuci oleh buffer aplikasi.
Protein yang mengikat di cuci dengan buffer elusi.
Protein elusi yang mengikat erat ligan dan mengumpulkan
protein murni penting
PENGAPLIKASIAN
enzim dengan substrat dan antibodi dengan antigenenzim dengan substrat dan antibodi dengan antigen