SKRIPSI

YULIA WILDAYATI

UJI AKTIVITAS ANTIKANKER HERBA PACAR AIR (Impatients

balsamina Linn.) TERHADAP SEL KANKER SERVIKS (Sel HeLa)

SECARA IN VITRO DENGAN METODE MTT (Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol)

PROGRAM STUDI FARMASI

FAKULTAS ILMU KESEHATAN

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG

2013

i

SKRIPSI

YULIA WILDAYATI

UJI AKTIVITAS ANTIKANKER HERBA PACAR AIR (Impatients

balsamina Linn.) TERHADAP SEL KANKER SERVIKS (Sel HeLa)

SECARA IN VITRO DENGAN METODE MTT (Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol)

PROGRAM STUDI FARMASI

FAKULTAS ILMU KESEHATAN

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG

2013

ii

Lembar Pengesahan

UJI AKTIVITAS ANTIKANKER HERBA PACAR AIR (Impatients

balsamina Linn.) TERHADAP SEL KANKER SERVIKS (Sel HeLa)

SECARA IN VITRO DENGAN METODE MTT (Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol)

SKRIPSI

Dibuat untuk memenuhi syarat mencapai gelar Sarjana Farmasi pada

Program Studi Farmasi Fakultas Ilmu Kesehatan

Universitas Muhammadiyah Malang

2013

Oleh :

YULIA WILDAYATI

NIM : 09040010

Disetujui Oleh :

Pembimbing I Pembimbing II

Prof.Dr. Sukardiman, MS.,Apt Annisa Farida Muti, S.Farm.,M.Sc.,Apt

NIP 196301091988101001 NIDN 070. 709. 860. 3

iii

Lembar Pengujian

UJI AKTIVITAS ANTIKANKER HERBA PACAR AIR (Impatients

balsamina Linn.) TERHADAP SEL KANKER SERVIKS (Sel HeLa)

SECARA IN VITRO DENGAN METODE MTT

(Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol)

SKRIPSI

Telah di uji dan dipertahankan didepan tim penguji

Pada tanggal 31 Juli 2013

Oleh :

YULIA WILDAYATI

NIM : 09040010

Tim Penguji

Penguji I Penguji II

Prof.Dr. Sukardiman, MS., Apt Annisa Farida Muti, S.Farm.,M.Sc.,Apt. NIP 196301091988101001 NIDN 070. 709. 860. 3

Penguji III Penguji IV

Siti Rofida, M. Farm., Apt Ahmad Sobrun Jamil, S. Si., MP

NIP 114. 0804. 0453 NIP 113. 0907. 0469

iv

KATA PENGANTAR

Assalamu’alaikum warohmatullahi wabarokatuh

Alhamdulillahirrobbil’alamin, segala puji dan syukur penulis panjatkan

kepada Allah SWT atas segala rahmat, nikmat dan pertolonganNya sehingga

penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul UJI AKTIVITAS

ANTIKANKER HERBA PACAR AIR (Impatients balsmina Linn)

TERHADAP SEL KANKER SERVIKS (SEL HeLa) SECARA In Vitro

DENGAN METODE MTT (Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol).

Skripsi ini diajukan untuk memenuhi syarat untuk mencapai gelar Sarjana

Farmasi pada Program Studi Farmasi Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas

Muhammadiyah Malang. Dalam penyusunan skripsi ini penulis tidak terlepas dari

peranan pembimbing dan bantuan dari seluruh pihak. Oleh karena itu, dengan

segala kerendahan hati, penulis ingin mengucapkan banyak terima kasih kepada:

1. Dra. Uswatun Chasanah, M.Kes., Apt., selaku Ketua Program Studi Farmasi

Universitas Muhammadiyah Malang yang telah memberi motivasi dan

kesempatan penulis belajar di Program Studi Farmasi Universitas

Muhammadiyah Malang

2. Prof.Dr.Sukardiman,MS.,Apt. selaku dosen pembimbing I dan Annisa

Farida Muti, S.Farm., M.Sc.,Apt. selaku dosen pembimbing II atas saran,

bimbingan, dan arahannya yang dengan sabar telah meluangkan waktu untuk

membimbing dan mengarahkan penulis sampai terselesaikannya skripsi ini.

3. Siti Rofida, M.Farm.,Apt dan Ahmad Sobrun Jamil,S.Si.,M.P selaku Dosen

Penguji yang telah banyak memberikan saran dan masukan demi

kesempurnaan skripsi ini.

4. Tri Lestari H., M.Kep., Sp. Mat selaku Dekan Fakultas Ilmu Kesehatan

yang telah memberikan kesempatan penulis belajar di Fakultas Ilmu

Kesehatan Universitas Muhammadiyah Malang.

v

5. Fakultas Farmasi Universitas Airlangga khususnya ibu Lusi dan teman-

teman FFUA (Dini, Aula, dkk) yang telah membantu dalam pembelajaran

sehingga penulis dapat mengenal dan mempelajari tentang kultur jaringan.

6. Laboratorium Parasitologi Fakultas Kedokteran Universitas Gajah Mada,

khususnya Prof.Dr.Supargiyono,DTM&H.,SU.,PhD.,Sp.ParK dan Ibu

Rumbi yang telah bersedia meluangkan waktu dan memberikan tempat agar

penulis dapat melaksanakan penelitiannya dengan baik.

7. Ika Ratna Hidayati, S.Farm., Apt., selaku Dosen wali. Terima kasih banyak

atas arahan ibu selama ini.

8. Untuk semua Dosen Farmasi Universitas Muhamadiyah Malang yang sudah

memberikan waktunya untuk mengajarkan ilmu-ilmu yang sangat

bermanfaat. Terutama Ibu Arina Swastika Maulita, S.Farm., Apt., yang telah

susah payah membantu jalanya ujian skripsi sehingga kami dapat

melaksanakan ujian skripsi dengan baik.

9. Staff Tata Usaha Program Studi Farmasi Fakultas Ilmu kesehatan

Universitas Muhammadiyah Malang terima kasih karena telah banyak

membantu dalam hal administrasi.

10. Untuk Abah dan Mama tercinta yang tiada hentinya memotivasi dalam

segala hal, dengan sabar mendoakan untuk kebaikan dan kesuksesan

putrinya. Terima kasih banyak atas didikan dan kerja keras untuk membuat

putrinya bahagia serta mendapatkan ilmu yang bemanfaat.

11. Untuk kedua saudara tersayang Ka Rizka dan Ka Ima yang selalu

mendoakan dan memberikan semangat.

12. Untuk Joki, terimakasih atas kesabaran, pengertian, perhatiannya selama ini

yang menjadi penyemangat untuk menyelesaikan skripsi ini, semoga Allah

memberikan kemudahan selalu untuk kita.

13. Teman–teman seperjuangan bahan alam : Emma, Atika dan Farah atas

kebersamaan, bantuan, motivasi dan semangat serta kerjasamanya sehingga

skripsi ini dapat terwujud.

vi

14. Teman-teman Farmasi 2009 terutama Reshtia, Etika, Dita dan Melda,

terimakasih atas kebersamaannnya selama 4 tahun terakhir ini, kalian

memberikan warna baru dalam kehidupan ini.

15. Teman-teman kos veteran dalam 7c : Afifah, Mergie, Nadia, Yosi, Imik, dan

Ria atas kebersamaannya.

16. Untuk semua pihak yang belum disebutkan namanya, penulis mohon maaf

dan terima kasih yang sebesar-besarnya. Semua keberhasilan ini tak luput

dari bantuan, doa yang telah kalian semua berikan.

Jasa dari semua pihak yang telah membantu dalam penelitian ini, penulis

tidak mampu membalas dengan apapun. Semoga amal baik semua pihak mendapat

imbalan dari Allah SWT. Penulis menyadari bahwa skripsi ini jauh dari

kesempurnaan, oleh karena itu penulis mengharapkan saran dan kritik yang

membangun dari pembaca demi kebaikan skripsi ini. Semoga penulisan ini dapat

berguna bagi penelitian berikutnya, amiin.

Wassalamu’alaikum warohmatullohi wabarokatuh

Malang,

Penyusun

Yulia Wildayati

vii

RINGKASAN

UJI AKTIVITAS ANTIKANKER HERBA PACAR AIR (Impatients balsamina

Linn.) TERHADAP SEL KANKER SERVIKS (SEL HeLa) SECARA IN

VITRO DENGAN METODE MTT

(Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol)

Sampai saat ini, penyakit kanker merupakan salah satu penyakit yang paling

mengancam dalam dunia kesehatan (Ganiswara dan Nafrialdi, 1995). Kanker

serviks atau karsinoma serviks uterus merupakan jenis kanker yang kedua terbanyak

pada perempuan di seluruh dunia setelah kanker payudara (Dalimartha, 2003).

Namun, di Indonesia, kanker serviks menduduki peringkat pertama (Rasjidi, 2007).

Berbagai cara penyembuhan telah dilakukan untuk melawan kanker seperti

pembedahan, penyinaran, kemoterapi dan imunoterapi. Namun demikian, masing-

masing cara tersebut memiliki kelemahan sehingga pengobatan kanker sendiri

belum memuaskan sampai saat ini (Sonlimar dkk, 2002). Oleh sebab itu berbagai

upaya untuk mencari obat alternatif masih terus dilakukan oleh para peneliti guna

menemukan bahan obat yang memiliki efektifitas tinggi namun rendah efek

sampingnya terhadap pasien. Salah satu sumber dapat dimanfaatkan sebagai

antikanker adalah obat herbal Dewick, 2002; Setiawati et al; 2007).

Salah satu tanaman herbal yang dapat dimanfaatkan adalah pacar air

(Impatiens balsamina Linn). Studi pendahuluan telah dilakukan dengan tujuan

untuk menskrining senyawa toksik dari herba pacar air dengan metode Brine

Shrimp Lethality Test (BST). Suatu ekstrak dinyatakan memiliki potensi antikanker

jika mempunyai harga LC50 < 1000 µg/ml. Berdasarkan studi pendahuluan dengan

BST diketahui bahwa ekstrak metanol herba pacar air memiliki LC50 yaitu sebesar

744,4893 ± 85,96 µg/ml yang menggunakan larva Artemia salina Leach. Sehingga

dapat disimpulkan bahwa ekstrak metanol herba pacar air bersifat sitotoksik dan

memiliki potensi sebagai antikanker.

Ekstrak yang diuji yaitu ekstrak n-heksana dan ekstrak metanol, dimana

ekstrak n-heksana mempunyai IC50 yaitu 191,244 µg/ml dan ekstrak metanol yaitu

438,954 µg/ml. Menurut NCI (National Cancer Institute) jika suatu uji sitotoksik

suatu senyawa menghasilkan harga IC50 ≤ 30 µg/ml maka senyawa tersebut

dinyatakan memiliki potensi untuk dikembangkan sebagai senyawa antikanker. Dari

hasil tersebut dapat disimpulkan bahwa kedua ekstrak tidak menunjukkan adanya

aktivitas antikanker terhadap sel kanker serviks (sel HeLa) dengan menggunakan

metode MTT Assay secara in vitro. Hasil skrining golongan senyawa kimia dengan

menggunakan KLT diketahui bahwa ekstrak n-heksana mengandung suatu senyawa

golongan flavonoid dan steroid/triterpenoid.

Penelitian ini perlu dilakukan untuk identifikasi senyawa yang aktif yang

terdapat dalam ektrak n-heksana dan ektrak metanol herba pacar air (Impatients

balsamina Linn) dan juga terhadap sel kanker yang berbeda atau pelarut yang

berbeda misalnya dengan sel kanker kolon WiDr atau dengan pelarut etil asetat.

viii

ABSTRAK

UJI AKTIVITAS ANTIKANKER HERBA PACAR AIR (Impatients balsamina

Linn.) TERHADAP SEL KANKER SERVIKS (SEL HeLa) SECARA IN

VITRO DENGAN METODE MTT

(Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol)

Pacar air (Imaptients balsamina Linn) adalah tanaman yang berfungsi

sebagai penghenti perdarahan (hemostatis), meningkatkan fungsi pencernaan,

melancarkan peredaran darah, melunakkan benjolan yang keras (tumor), antikanker,

peluruh haid, melancarkan persalinan. Penelitian ini digunakan untuk menguji

aktivitas antikanker ekstrak n-heksana dan ektrak metanol dari herba pacar air

(Imaptients balsamina Linn) terhadap sel kanker serviks (sel HeLa) dengan metode

MTT (Microculture Tetrazolium Salt) Assay dan mengetahui golongan senayawa

kimia dari ekstrak yang postif terhadap uji MTT Assay. Aktivitas dari sel kanker

dapat dilihat dari prosentase sel hidup yang di inkubasi selama semalam kemudian

ditentukan besarnya IC50 dengan menggunakan Probit Analysis. Menurut NCI

(National Cancer Institute) jika suatu uji sitotoksik suatu senyawa menghasilkan

harga IC50 ≤ 30 µg/ml maka senyawa tersebut dinyatakan memiliki potensi untuk

dikembangkan sebagai senyawa antikanker. Ekstrak yang diuji yaitu ekstrak n-

heksana dan ekstrak metanol, dimana ekstrak n-heksana mempunyai IC50 yaitu

191,244 µg/ml dan ekstrak metanol yaitu 438,954 µg/ml. Hasil skrining golongan

senyawa kimia dengan menggunakan KLT diketahui bahwa ekstrak n-heksana

mengandung suatu senyawa golongan flavonoid dan steroid/triterpenoid.

Kata kunci : Herba Pacar Air, Sel HeLa, MTT Assay, n-Heksana, Metanol

ix

ABSTRACT

IN VITRO ANTICANCER ACTIVITIES TEST OF Impatients balsamina Linn

HERBS EXTRACT ON CERVIX CANCER CELLS (HeLa CELL) TROUGH

MTT ASSAY

(N-Hexane extract and Metanol Extract)

Garden balsam (Impatiens balsamina Linn.) is a plant which can be used to

stop bleeding or hemostasis, enhance digestion process, optimize the blood

circulation, temper tumor, anti cancer, laxative menstruation and help the birthing.

This research is aimed to find out the anti cancer activity in n-hexane and methanol

extracts of garden balsam herbs (Impatiens balsamina Linn) against cervix cancer

cells (HeLa cell) through MTT (Microculture Tetrazolium Salt) assay and to

discover the chemical compound class of extracts which are positive towards MTT

assay examination. The anti cancer activity can be seen from the percentage of the

living cells which are incubated during a night. Then, the value of IC50 is decided

by applying Probit Analysis. Based on NCI (National Cancer Institute), if a

cytotoxicity test of a compound shows IC50 ≤ 30 µg/ml, so the compound is

potential to be developed as anti cancer compound. From the extracts examined,

which are n-hexane and methanol extract, n-hexane extract has IC50 191,244 µg/ml

while methanol extract has IC50 438,954 µg/ml. From the result of the chemical

compound screening by using KLT, it is found that n-hexane extract contains

particular flavonoid and steroid/triterpenoid compounds.

Key words: Impatiens balsamina Linn, HeLa Cell, MTT Assay, n-Hexane,

Methanol

x

DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN JUDUL.............................................................................. i

LEMBAR PENGESAHAN ................................................................... ii

LEMBAR PENGUJIAN ....................................................................... iii

KATA PENGANTAR ........................................................................... iv

RINGKASAN ........................................................................................ vii

ABSTRAK ............................................................................................. viii

ABSTRACT ........................................................................................... ix

DAFTAR ISI ....................................................................................... x

DAFTAR TABEL ............................................................................... xiii

DAFTAR GAMBAR ...........................................................................xiv

DAFTAR LAMPIRAN ....................................................................... xv

BAB I. PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang Masalah ..................................................... 1

1.2 Rumusan Masalah............................................................... 3

1.3 Tujuan Penelitian ................................................................ 4

1.4 Hipotesis.............................................................................. 4

1.5 Manfaat Penelitian .............................................................. 4

BAB II. TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Tinjauan Tentang Pacar Air.................................................6

2.1.1 Klasifikasi……........................................................... 6

2.1.2 Sinonim….………………………………................. 6

2.1.3 Nama Daerah…........................................................... 7

2.1.4 Morfologi................................................................... 7

2.1.5 Ekologi dan Penyebaran............................................. 8

2.1.6 Khasiat………………………………......................... 8

2.2.7 Kandungan Kimia Tanaman……….......................... 8

2.2 Tinjauan Tentang Kanker…................................................ 11

2.2.1 Definisi Kanker .......................................................... 11

2.2.2 Sifat dan Karakteristik Sel Kanker ............................. 12

2.2.3 Proses Karsinogenesis ................................................ 13

xi

2.3 Tinjauan Tentang Kanker Serviks....................................... 17

2.3.1 Definisi ....................................................................... 17

2.3.2 Etiologi ........................................................................ 18

2.3.3 Faktor Resiko .............................................................. 20

2.3.4 Gejala …...………...................................................... 20

2.3.5 Stadium ....................................................................... 21

2.4 Sel Hela ................................................................................. 22

2.5 Tinjauan tentang Kuktur Sel ................................................ 23

2.6 Tinjauan tentang Antikanker ............................................... 24

2.7 Tinjauan tentang Ekstraksi .................................................... 28

2.8 Tinjauan tentang Metode MTT ............................................. 30

2.9 Tinjauan tentang Tanaman Antikanker ............................... 33

BAB III. KERANGAKA KONSEPTUAL

3.1 Uraian Kerangka Konseptual ........................................ 35

BAB IV. METODE PENELITIAN

4.1 Bahan Penelitian ................................................................. 38

4.1.1 Bahan Tanaman ......................................................... 38

4.1.2 Bahan Kimia ............................................................... 38

4.1.2.1 Bahan yang digunakan untuk ekstraksi ................. 38

4.1.2.2 Bahan yang digunakan untuk uji aktivitas ............ 38

4.2 Alat-alat Penelitian ............................................................. 39

4.3 Variabel Penelitian.............................................................. 40

4.3.1 Variabel Bebas ............................................................ 40

4.3.2 Variabel Tergantung .................................................... 40

4.4 Metode Penelitian .............................................................. 39

4.4.1 Rancangan Percobaan .................................................. 40

4.4.2 Kerangka Operasional .................................................. 41

4.4.3 Prosedur Kerja ............................................................. 42

4.4.3.1 Pembuatan Ekstrak Bahan Uji ............................... 42

4.4.3.2 Pembuatan Media .................................................. 44

4.4.3.3 Pembuatan Larutan Uji .......................................... 45

4.4.3.4 Pembuatan Kontrol Sel .......................................... 44

xii

4.4.3.5 Pembuatan Kontrol Media ..................................... 44

4.4.3.6 Penumbuhan Sel .................................................... 45

4.4.3.7 Penggantian Media ................................................ 46

4.4.3.8 Panen Sel ................................................................ 46

4.4.3.9 Perhitungan Sel .................................................... 47

4.5 Uji Aktivitas Antikanker dengan Metode MTT .................. 48

4.6 Analisis Data ....................................................................... 50

4.7 Uji Skrining Zat Kandungan dalam Ekstrak yang Aktif ..... 51

BAB V. HASIL PENELITIAN

5.1 Pembuatan Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol

Herba Pacar Air (Imptients balsamina Linn) ……………... 53

5.2 Perhitungan Sel HeLa dan Volume Panenan Sel yang

Ditransfer …………………………………………………. 53

5.3 Uji Aktivitas Antikanker dari Ekstak n-Heksana dan

Ekstrak Metanol Herba Pacar Air (Imptients balsamina Linn)

Terhadap Sel Kanker Serviks (Sel HeLa) dengan

Metode MTT …………………………………………….... 54

5.4 Penentuan Harga IC50 Doxorubicin, Harga IC50 Ekstrak

n-Heksana dan Ekstrak Metanol Herba Pacar Air (Imptients

balsamina Linn) dan Terhadap Sel Kanker Serviks (Sel

HeLa) dengan Probit Analisis ………...……………….. 60

5.5 Hasil Uji KLT Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol … 58

BAB VI PEMBAHASAN ................................................................. 60

BAB VII. KESIMPULAN DAN SARAN …………………………... 64

DAFTAR PUSTAKA .......................................................................... 65

LAMPIRAN ........................................................................................ 70

xiii

DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

II.1 Stadium Kanker Serviks ............................................................... 21

IV.1Kelompok perlakuan kultur sel kanker serviks (sel HeLa) dalam tiap percobaan ............................................................................... 40

V.1 Hasil Pembuatan Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak

Metanol Herba Pacar Air (Imptients balsamina Linn) ………….. 53

V.2 Hasil Absorbansi Kontrol Sel dan Kontrol

Media……………………………………………………………. 54

V.3 Hasil Uji Kontrol Positif Doxorubicin ……………………… 54

V.4 Hasil Uji Aktivitas Antikanker dari Ekstak

n-Heksana dan Ekstrak Metanol Herba Pacar Air (Imptients

balsamina Linn) Terhadap Sel Kanker Serviks (Sel HeLa)

dengan Metode MTT …………………………………………….. 56

V.5 Harga IC50 Doxorubicin, Harga IC50 Ekstrak n-Heksana dan

Ekstrak Metanol Herba Pacar Air (Imptients balsamina Linn)

Terhadap Sel Kanker Serviks (Sel HeLa) ………………………... 58

xiv

DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

2.1 Tanaman Herba Pacar Air (Impatients balsamina L.).................... 6

2.2 Struktur Flavonoid ......................................................................... 9

2.3 Struktur Saponin ….......................................................................... 10

2.4 Struktur Steroid ………………………………………................... 11

2.5 Proses Karsinogenesis..................................................................... 14

2.6 Siklus Sel ……………………………………................................. 16

2.7 Struktur Vinblastin ………………..................................................24

2.8 Struktur Vinkristin.......................................................................... 25

2.9 Struktur Vindesin............................................................................ 25

2.10 Struktur Podofilotoksin …………………..................................... 26

2.11 Struktur Teniposida ……….......................................................... 26

2.12 Struktur Etoposida........................................................................ 27

2.13 Struktur Paclitaxel......................................................................... 28

2.14 Struktur Docetaxel........................................................................ 28

2.1 Reaksi reduksi MTT..................................................................... 31

3.1 Bagan Kerangka Konseptual........................................................... 36

4.1 Skema Kerangka Operasional ……………..................................... 41

4.2 Skema Ekstraksi dengan Pelarut n-heksana dan Metanol…………. 43

5.1 Hubungan Antara Konsentrasi Kontrol Positif dan Bahan Uji

terhadap Viabilitas Sel Kanker Serviks (Sel HeLa) ......................... 58

5.4 Hasil uji KLT flavonoid dan steroid ekstrak n-heksana herba

pacar air …………………………………………………………… 59

6.1 Hasil uji aktivitas antikanker sel HeLa dengan menggunakan

pelarut n-Heksana ……………………………………………….... 62

xv

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

1. Daftar Riwayat Hidup........................................................................... 70

2. Surat Pernyataan …………………....................................................... 71

3. Surat Determinasi Tanaman………………........................................... 72

4. Sertifikat Kultur Jaringan ……………….............................................. 73

5. Data Hasil Pembacaan ELISA reader ………… …………………….. 74

6. Pembuatan Larutan Uji Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol

Herba Pacar Air (Impatients balsamina Linn) ………………………… 75

7. Pembuatan Konsentrasi Doksorubisin ………………………………… 76

8. Gambar Kultur Sel Setelah Penambahan Larutan Uji dan Larutan

MTT Ekstrak n-heksana dan Ekstrak Metanol ……………………….. 78

9. Gambar Kultur Sel Setelah Penambahan Kontrol Positif

Doxorubicin …………………………………………………….. 80

10. Analisis Probit Kontrol Positif Doxorubicin ………………………….. 81

11. Analisis Probit Ekstrak n-Heksana ……………………………………. 83

12. Analisis Probit Ekstrak Metanol ……………………………………… 85

13. Lampiran Foto ………………………………………………………... 87

xvi

DAFTAR SINGKATAN

BST = Brine Shrimp Lethality Test

DLA = Dalton’s Ascites Lymphoma

DMEM = Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium

DMSO = Dimethyl Sulfoxide

DNA = Deoxyribose Nucleic Acid

EEIB = Ekstrak Etanol Impatiens balsamina

FBS = Fetal Bovine Serum

HCl = Hidroclhoride Acid

IC50 = Inhibitory Concentration 50

MEM = Mal Essential Medium

MK = Media Kultur

MTT = Microculture Tetrazolium Salt

PBS = Phospate Buffer Saline

RPMI = Rosewall Park Memorial Institute

SDS = Sodium Dedocyl Sulfate

WHO = World Health Organization

xvi

DAFTAR PUSTAKA

Achmad, S.A. 1987. Buku Materi Pokok Kimia Organik Bahan Alam. Karunika.

Alongkornsopit., Jariya, Wipasa., Jiraprapa, Luangkamin., Suwaporn, and

Wongkham., Weerah., 2011. Anticancer Activity of Ethyl Acetate and

N-Buthanol Extracts form Rhizomes of Agapetes Megacrpa

W.W.Smith. African Journal of Bioteknolgi Vol. 10.

http:www.academijournalala.org/AJB.

Amalia, Rafinda. 2011. Uji Praskrining Aktivitas Antikanker Herba Pacar Air

(Impatients balsamimum Linn.) Dengan Metode Brine Shrimp

Lethality Test (BST) (Ekstrak n-heksana dan Ekstrak Metanol).

Malang : Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Muhammadiyah Malang.

Anonim a., 2012. Penderita Kanker Diperkirakan Menjadi Penyebab Utama

Beban Ekonomi Terus Meningkat. www.depkes.go.id/indexphp/berita.

diakses 22 januari 2013.

Anonim b., 2012. Saponin. Chemical Engineering. www.chemical-

engineering.co/2012/11/29/saponin/. Diakses februari 2013.

Ansel. 1989. Pengantar Bentuk Sediaan Farmasi, Edisi 4. Jakarta : UI-press.

Arivani, Setyaningrum., 2010. Kapasitas Anti Radikal Ekstrak Anrtosianin Buah salam

(Syzygium poluanthum (Wight.) Walp) Segar Dengan Variasi Proporsi Pelarut.

Jurusan Ilmu dan Teknologi Pangan Universitas Negeri Surakarta.

Assays for Bioactivity, Vol. 6, Academic Press, London, pp. 71-133. Sukandar,

Dede. 2006. Screening Fitokimia Tumbuhan Obat Tradisional Jawa

Barat dan Proses Isolasi Senyawa Aktifnya. Laporan Penelitian, FST.

Jakarta.

Canavan, T. P. dan Doshi, N. R., 2000, Cervical Cancer. http://www.aafp.org,

diakses 2008.

Capes, D., Theodosopoulos G., dan Atkin I. 2010. “Check your cultures! A list of

cross-contaminated or misidentified cell lines”. Int J Cancer 127 (1) : 1–

8.

CCRC (Cancer Chemoprevention Research Center)., 2009. Prosedur Tetap.

Yogyakarta : Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada.

http://ccrcfarmasiugm.wordpress.com/protokol/.

xvi

CCRC (Cancer Chemoprevention Research Center)., 2009. Kanker Leher Rahim

(serviks). Yogyakarta : Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada.

http://ccrcfarmasiugm.wordpress.com/ensiklopedia/ensiklopedia-

kanker/kanker-serviks/.

CCRC (Cancer Chemoprevention Research Center)., 2009. Sel HeLa. Yogyakarta :

Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada.

http://ccrcfarmasiugm.wordpress.com/ensiklopedia/ensiklopedia-

kanker/sel-hela/.

Clevenger, S., 1958. The Flavonols of Impatiens balsamina L. Arch Biochem

Biophys, Vol. 76.

Dalimartha, S., 2003. Atlas Tumbuhan Obat Indonesia III. Jakarta : Trubus

Agriwidya.

Dalimartha, S., 2003. Ramuan Tradisional Untuk Pengobatan Kanker. Cetakan

VI. Jakarta : Penebar Swadaya.

De Jong, Wim. 2004. Kanker, Apakah Itu?. Cetakan I. Jakarta : Arcan.

DeFillippis, R.A., Goodwin, E.C., Wu, L., dan DiMaio, D. 2003. “Endogenous

Human Papillomavirus E6 and E7 Proteins Differentially Regulate

Proliferation, Senescence, and Apoptosis in Hela Cervical Carcinoma

Cells”. Journal of Virology 77 (2) : 1551-1563.

Depkes RI. 1995.Farmakope Indonesia.Edisi V . Jakarta : Depkes RI.

Depkes RI. 1986, Sediaan Galenik, Departemen Kesehatan Republik Indonesia,

Hal 10 – 16.

Devi, B. Parimala, Baskar, N, Jayakar, B., 2012. Anticancer Studies On Ethanol

Extract of Impatients balsamina. India : PRIST Univesity.

Dewick, P.M. 2002.Medicinal Natural Products. John Wiley & Sons, Ltd.

Chichester.

Diananda, Rahma., 2007. Mengenal Seluk Beluk Kanker. Cetakan I. Jogjakarta :

Katahati.

Ding, Zhi-Shan, Jiang, Fu-Sheng, Chen Ni-Pi, Lv, Gui-Yuan, and Zhu Cheng-

Gang., 2008. Isolation and Identifitcation of an Anti-Tumor

Component Form Leaves of Impatients balsamina. China : Faculty of

Life Science, Zhejiang Chinese Medical University.

xvi

Dipiro, Joseph T., 2005. Pharmacoteraphy : A Phatophsyologic Approach. Sixth

Edition. The McGraw-Hill Companies, Inc.

Djajanegara, Ika dan Wahyudi Prio., 2009. Pemakaian Sel HeLa dlam Uji

Sitotoksisitas Fraksi Kloroform dan Etanol Ekstrak Daun Annona

squamosa. Jurnal Ilmu Kefarmasian Indonesia. Hal 7-11.

Doyle A and Griffiths SB, 2000, Celland Tissue Cultur for Medical Research.

New York : John Willey and Sons Ltd. Hal. 403 – 423.

Erdman, John W Jr., Balentine, Doughls., Arab, Lenore., Beecher, Gary, Dwyne,

Johanna T.r, Folts, Johny., Harnly, James., Hollman, Peter., Keen, Carl

L., Mazza, G., Messina, Mark., Scalbert, Augustin., Vita, Joseph.,

Williamson, Gary., and Burrowes, Jerilynn, 2005. Flavonoid and

Hearth Health : Proceedings of the ILSI North America Flavonoids

Workshop. The Journal of Nutrition.

Freshney, I.R., 1987. Culture of Animal Cells: A Manual of Basic Technique,

Second edition, Alan R. Liss Inc., New York, pp.

Freshney, R. 2000. Culture of Animal Cells: A Manual of Basic Technique.

Fourth Ed. A John Wiley and Sons, Inc. : USA

Freshney, R.I., 1986, Animal Cell Culture, A Practical Approach. 1st Ed. IRL

Press, Washington D.C.

Ganiswara, S. G., & Nafraldi. 1995. Farmakologi dan Terapi. Edisi keempat.

Jakarta : Fakultas Kedoketeran Universitas Indonesia.

Goodwin, E.C., DiMaio, D. 2000. Repression of human papillomavirus

oncogenes in Hela cervical carcinoma cells causes the orderly

reactivation of dormant tumor suppressor pathways. Biochemistry,

Vol.97, no.23.

Hamburger M and Hostettman., 1991. Bioactivity in Plant : The Link Between

Phytochemistry and Medicine. Phytochemistry. 12 : 3864-3874.

Hanahan, D., Weinberg, R.A. 2000. The Hallmarks of Cancer : Cell. 100 : 57-70.

Harahap, Rustam, E. 1984. Kanker Ginekologik. Jakarta : PT. Gramedia, hal 61-

62.

Harborne, J.B.. 1987. Metode Fitokimia-Penuntun Cara Modern Menganalisisa

tumbuhan. Bandung : Institut Teknologi Bandung.

xvi

Hariana, H. Arief., 2008. Tumbuhan Obat dan Khasiatnya Jilid 2. Jakarta :

Penebar Swadaya.

Heti, D. 2008. Uji Sitotoksik Ekstrak Etanol 70% Herba Sisik Naga

(Drymoglossum piloselloides Presl) terhadap sel T47D. Fakultas

Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta. Surakarta.

Kartawiguna, Elna., 2001. Faktor-faktor yang Berperan Pada Karsinogenesis.

Jakarta : Jurusan Kedokteran Universitas Trisakti.

King, R. J. B., 2000. Cancer Biology. 2nded. Pearson Education Limited, London.

Kristanti, A.N, Aminah, N.S, Tanjung, M dam Kurniadi, B., 2008. Buku Ajar

Fitokimia. Surabaya : Airlangga University Press.

Macville M, Schröck E, Padilla-Nash H, et al., 1999. “Comprehensive and

definitive molecular cytogenetic characterization of HeLa cells by

spectral karyotyping”. Cancer Res. 59 (1) : 141–150.

Mariono, S. A., 2002. Karakteristik Kandungan DNA dan Aktivitas Proliferasi

Pada Kanker Paru. Jakarta, Cermin Dunia Kedokteran No.127: 15-17.

Martindale : The complete Drug Reference., 2009. Thirthy six edition.

Pharmaceutical Press.

Maryati, dan Sutrisna EM., 2007. Potensi Sitotoksik Tanaman Ceplukan

(Physalis angulata L.) Terhadap Sel HeLa. Surakarta. Fakultas Farmasi

Universitas Muhammadiyah Surakarta.

Meilani, Sri Wahyuni., 2006. Uji Bioaktivitas Zat Ekstraktif Kayu Suren (Toona

sureni Merr.) dan Ki Bonteng (Platea latifolia BL.) Menggunakan

Brine Shrimp Lethality Test (BSLT). Departemen Hasil Hutan Fakultas

Kehutanan Institut Pertanian Bogor.

Meiyanto, E., Supardjan, Muhammad D., dan Dewi A., 2006. “Efek

antiproliferatif Pentagamavunon-0 terhadap Sel Kanker Payudara

T47D”. Jurnal Kedokteran Yarsi 14 (ITS).

Meye, E., 2009. Sitotoksisitas dan Efek Ekstrak Etanol Kulit Buah Jambu

Mente (Anacardium occidentale L.) Terhadap Sel Mieloma. Fakultas

Biologi UGM. Yogyakarta.

Meyer. B. N., Ferrigini. N. R., Putman, J. E., Jacbsen, L. B., Nicols, D. E., dan

McLaughlin. J L., 1982. Brine Shrimp : A Convenient General

Bioassay For Active Plant Constituents. Plant Medica. Vol. 45.

xvi

Nafrialdi dan Ganiswara. S., 2007. Farmakologi dan Terapi. Edisi 4. Jakarta :

Departemen Farmakologi dan Terapuetik FK UI.

Novi kristanti,Alfinda.dkk.2008.Buku Ajar Fitokimia.Surabaya:Airlangga

University.

Nurlaila, Ika dan Hadi, Miftachul, 2008. Kanker : Pertumbuhan, Terapi dan

Nanomedis. (www.nano.lipi.go.id/artikel).

Rahbari R., Tom S., Modes V., Pam C., Catriona M., dan Richard M., 2009. "A

novel L1 Retrotransposon Marker for HeLa Cell Line

Identification”. Biotechniques 46 (4): 277–84.

Ramli, Muchlis., Umbas, Rainy, dan Panigoro, Sonar. S., 2002. Deteksi Dini

Kanker. Jakarta : Fakultas Kedokteran UI.

Rang, H., M. Dole, Ritter, dan Moore., 2003. Pharmachology. Fifth edition.

Churchill Livingstone : New York.

Rasjidi, I., 2007. Panduan Penatalaksanaan Kanker Ginekologi Berdasarkan

Evidance Bacse. Cetakan I. Jakarta : EGCG, hal 6.

Rusga, Masriani., 2012. Hubungan Intake Nutrisi Dan Tingkat Kesembuhan

Penderita TB Paru Pada Anak Di Poliklinik Anak RSUD Dr. Rasidin

Padang. Universitas Andalas.

Setiawati, Agustina., Septisetyani, Endah Puji., Wijayanti, Titi Ratna., Rokhman

Rifki M., 2007. Sambung Nyawa (Gynura procumbens (Lour.) Merr.)

Sebagai Agen Kemopreventif. Yogyakarta : Cancer Chemoprevention

Research Center, Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada.

Silalahi, Jansen., 2006. Tinjauan Kepustakaan Antioksidan Dalam Diet dan

Karsinogenesis. Cermin Dunia Kedokteran. Medan : Jurusan Farmasi

Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Sumatera

Utara.

Sirait M, 2007. Penuntun Fitokimia dalam Farmasi. Bandung: ITB.

Siswandono dan Soekardjo, B., 2008. Kimia Medisinal. Edisi ke-2, Surabaya :

Airlangga University Press.

Steenis, C. G. G. J., Den Hoed, D., Bloembergen, S., dan Eyma, P. J., 2008. Flora

Untuk Sekolah di Indonesia, Cetakan ke-12. Jakarta : Pradnya Paramita,

hal-258-59.

xvi

Suffness M, Pezzuto JM, 1990. Assays related to cancer drug discovery. In:

Hostettmann K (ed). Methods in Plant Biochemistry:

Sukardja, I Dewa Gede., 2000. Onkologi Klinik. Surabaya : Airlangga University

Press.

Sumastuti, R. dan M. Sonlimar. 2002. Efek sitotoksik ekstrak buah dan daun

mahkota dewa (Phaleria macrocarpa (Scheff) Boerl.) terhadap sel

hela. Medika 28 (12): 773-777.

Sumarawati, Titiek dan Fatmawati, Dina., 2011. Isolasi dan Uji Sitotoksik

Senyawa Alkaloid Mahkota Dewa (Phaleria macocarpa) Pada Kultur

Sel Payudara (T47D). Semarang : Fakultas Kedokteran Islam Sultan

Agung.

Syaifuddin, M. 2007. “Gen Penekan Tumor p53, Kanker dan Radiasi Pengion”.

Buletin Alara, 8 (3) : 119 – 128.

Syofyan., Lucida, Henny, Bakhtiar, Amri., 2008. Peningkatan Kelarutan

Kuersetin Melalui Pembentukan KOmpleks Inklusi dengan β-

Siklodekstrin. Jurnal Sains dan Teknologi farmasi, Vol 13, No2 hal : 43-

48.

Tjay, Tan Hoan dan Rahardja. K. 2007. Obat-obat Penting : Khasiat Penggunaan

dan Efek-efek Sampingnya. Edisi ke VI. Jakarta : PT. Elex Media

Komputindo.

Tjindarbumi D, R.Mangunkusumo. Cancer in Indonesia, present and future.

Japan J. Clin Oncol; 2002; 32(Supplement 1): S17-S21 (36-69-1-

SM_2)Universitas Terbuka. Jakarta.

Underwood, J.C.E., 1994. Patologi : Umum dan Sistematik. Edisi 2. Cetakan 1.

EGC : Jakarta.

Voight., 1995.Buku Pelajaran Teknologi Farmasi. Edisi 5. Yogyakarta : UGM-press.

Wardhani, Lilies Kusuma dan Sulistyani, Nanik. 2012. Uji Aktivitas Antikbakteri Ekstrak Etil

Asetat Daun Binahong (Anredera scandens (L.) Moq.) terhadap Shigella flexneri

Beserta Profil Kromatografi Lapis Tipis. Yogyakarta : Fakultas Farmasi Universitas

Ahmad Dahlan.

Watts, Denise Watson. 2010. “HeLa Cancer Cells Killed Henrietta Lacks. Then

They Made Her Immortal”. The Virginian-Pilot 1 : 12–14.

Widyastuti, Palupi., 2005. Bahaya Bahan Kimia paa Kesehatan Manusia/WHO.

Jakrta : EGC.

xvi

Winarno F G. 1997. Kimia Pangan dan Gizi. Jakarta : Gramedia.

Winarno, Eko. 2011. Uji Sitotoksik Ekstrak Kapang Aspergillus sp. Terhadap

Sel Kanker payudara T47D. Jakarta : Fakultas Matematika dan Ilmu

Pengetahuan Alam Universitas Indonesia.

Yamato, K., Fen, J., Kobuchi, H., Nasu, Y., Yamada,T., Nishihara, T., Ikeda, Y.,

Kizaki, M., and Yoshinouchi M., 2006.Induction of Cell Death in

Human Papillomavirus 18-Positive Cervical Cancer Cells by E6

siRNA, Cancer Gene Therapy, 13: 234-241.

Yohanes, R., 2000. The Evaluation of Breast Cancer. New South Wales :

Australia ltd.co.al.

Zulfikar., 2010. Steroid. Situs Kimia Indonesia. http://www.chem-is-

try.org/materi_kimia/kimia-kesehatan/biomolekul/steroid/