Uji Saring Infeksi Menular Lewat Transfusi: Cara yang Benar

Uji Saring Infeksi Menular Lewat Transfusi: Cara yang BenarJuly Kumalawati

Departemen Patologi Klinik FKUI-RSCMJakartaInfeksi Menular Lewat TransfusiParasit:MalariaToxoplasmosisChagasBakteria:SifilisPositif GramNegatif Gram

Virus:Hepatitis B, C dan DHIVHTLV-I dan HTLV-IICMV dan EBVParvovirus 19

Uji saring infeksiDeteksi antigen:Spesifik: HBsAg, TPHANon-spesifik: VDRLDeteksi antibodi: anti-HCV, anti-HIVDeteksi materi genetik:DNA: HBVRNA: HCV, HIVLain-lain: malaria (mikroskopik?)SerologikNATPrinsip pemeriksaan serologikAntigen

+Antibodi+IndikatorZat Radioaktif EnzimPartikelKoloid emas4Bentuk pemeriksaan serologikSimple/Rapid:AglutinasiFlow-throughImmunocombImunokromatografiEIA:IndirekKompetitifAntigen / antibody sandwichCapture EIALangkah pemeriksaan simple/rapidPersiapan reagenPenambahan spesimen(Penambahan reagensia)Inkubasi(Pencucian)Pembacaan hasilPersiapan reagensiaSuhu mencapai suhu kamarPastikan tidak ada kristal dalam larutan(Pengenceran)Homogen

Penambahan spesimenSuhu sudah mencapai suhu kamarHomogen(Pengenceran)Volume sesuaiCara penambahan spesimen: tegak lurustidak ada gelembung udara

InkubasiSuhu

(Cahaya)

WaktuPencucianVolume

Cara

SiklusPembacaan hasilWaktu

Pencahayaan

Cara pembacaanPersiapan reagensiaPenambahan spesimen / bahan pemeriksaanInkubasiPencucianPenambahan konjugatInkubasiPencucianPenambahan substratInkubasiPenghentian reaksiPembacaan hasil

Tahapan proses EIAHal yang perlu diperhatikan pada tahap persiapan reagensiaReagensia bersuhu kamar sebelum dipakaiPengerjaan tes sesuai dengan petunjuk dari pembuatJumlah kontrol yang dipakai sesuai petunjukWaktu pembuatan larutan kerjaPenyimpanan larutan kerja :WaktuSuhuKeadaan gelapPenyimpanan reagensia : suhuHal yang perlu diperhatikan pada tahap penambahan spesimen / bahan pemeriksaanJenis spesimen sesuai petunjuk

Spesimen bersuhu kamar sebelum dipakai

Perhatikan identitas spesimen : urutan sesuai lembar kerja

Hal yang perlu diperhatikan pada tahap penambahan spesimen / bahan pemeriksaanCara pemipetan :Satu tip untuk satu spesimen : ganti tip untuk spesimen berikutnyaTip tertancap erat pada ujung pipetPosisi pemipetan tegak lurusVolume spesimen sesuai petunjukLebih baik memakai cara reverse pipettingUjung tip tidak menyentuh dasar dan tepi sumur / tabungSpesimen harus homogen : vortex

Hal yang perlu diperhatikan pada tahap inkubasiHomogenisasi sebelum inkubasi

Suhu dan keadaan lingkungan inkubasi sesuai petunjuk

Waktu inkubasi sesuai petunjukHal yang perlu diperhatikan pada tahap pencucianAlat pencuci bekerja dengan baik : tidak ada yang tersumbat atau tumpah keluarVolume larutan pencuci sesuai petunjukJumlah pencucian dan lamanya kontak larutan pencuci sesuai petunjukKeringkan setelah pencucian dengan cara menetakkan di atas beberapa lapis kertas penyerap / tissueHal yang perlu diperhatikan pada tahap penambahan reagensia (konjugat / substrat / larutan stop)Volume reagensia sesuai petunjukCara pemipetanLebih baik bila menggunakan multi-channel pipettePembuatan dan penyimpanan larutan kerja sesuai petunjukHal yang perlu diperhatikan pada tahap pembacaan hasilPanjang gelombang pembacaan sesuai petunjukHomogenisasi sebelum pembacaanNilai validitas tes sebelum interpretasi hasil :Serapan kontrol negatifSerapan kontrol positifNilai cut-offBila hasil tidak valid / sah, jangan lakukan interpretasiNucleic Acid Testing (NAT)Metoda:

PCR

NASBA

bDNATahapan NATEkstraksi asam nukleat

Amplifikasi

DeteksiEkstraksi asam nukleatSterilitas, cegah kontaminasiSuhuReagensia: bebas RnaseAlat: bebas RnaseCara:PemipetanEkstraksiAmplifikasi dan deteksiPemipetan

Suhu

Waktu

Cegah kontaminasi dari amplikon

ValidasiKesimpulanPengertian tentang prinsip dan cara kerja sangat dibutuhkan untuk mendapatkan hasil yang dapat dipertangungjawabkan

Disiplin dan Tanggungjawab merupakan faktor yang pentingJuly KumalawatiTerima KasihThank You