UJI EFEKTIVITAS BEBERAPA ISOLAT JAMUR ENDOFIT ANTAGONISTIK DALAM MENINGKATKAN KETAHANAN INDUKSI BEBERAPA KLON VANILI TERHADAP

PENYAKIT BUSUK BATANG

I Made Sudantha*) dan Abdul Latief Abadi**)

*) PS. Hama dan Penyakit Tumbuhan, Fakultas Pertanian Universitas Mataram**) Jurusan Hama dan Penyakit Tumbuhan, Fakultas Pertanian Universitas Brawijaya

ABSTRAK

Penelitian bertujuan untuk mengetahui efektivitas isolat jamur endofit antagonistik dalam mengendalikan penyakit busuk batang vanili dan meningkatkan ketahanan induksi beberapa klon vanili terhadap penyakit busuk batang. Penelitian menggunakan metode eksperimental yang dilaksanakan di rumah plastik. Penelitian menggunakan rancangan acak lengkap dengan percobaan faktorial terdiri dari dua faktor, yaitu isolat jamur endofit antagonistic terdiri atas 8 aras dan klon vanili terdiri atas dua aras. Perlakuan merupakan kombinasi dari faktor jamur endofit antagonistik dan klon vanili yang masing-masing diulang tiga kali. Variabel yang diamati adalah masa inkubasi penyakit busuk batang, persentase panjang pembusukan pada batang dan panjang tunas daun/sulur. Data hasil pengamatan dianalisis menggunakan analisis keragaman pada taraf nyata 0,05. Hasil penelitian menunjukkan bahwa perlakuan dengan isolat jamur endofit Trichoderma sp. isolat ENDO-01 akar tanah Timbenuh (T. viride), ENDO-02 batang Timbenuh (T. koningii), ENDO-03 buah Timbenuh (T. longibrachiatum), ENDO-05 batang Selebung (T. pseudokoningii), ENDO-06 batang Celelos (T. viride), dan jamur endofit Rhizoctonia spp. isolat ENDO-07 batang Timbenuh dan ENDO-08 batang Selebung, efektif mengendalikan penyakit busuk batang, sehingga menyebabkan bibit vanili tidak terinfeksi oleh penyakit busuk batang. Selain itu perlakuan tersebut dapat meningkatkan ketahanan induksi bibit vanili klon Timbenuh NTB dan klon Malang Jawa Timur menjadi sangat tahan terhadap penyakit busuk batang, dan menyebabkan tunas daun/sulur menjadi lebih panjang.

Kata kunci : endofit, antagonistik, isolat, induksi, vanili

PENDAHULUAN

Jamur Fusarium oxysporum f. sp. vanillae merupakan kendala utama dalam pengembangan tanaman vanili. Jamur ini menyerang semua bagian tanaman mulai dari akar, batang, daun dan buah. Infeksi oleh jamur ini kebanyakan dimulai dari stek tanaman karena jamur sudah terlanjur ada di dalam tanah dan dilanjutkan menyerang pada akar dan batang. Sedangkan serangan pada daun dan buah bersumber dari percikan air atau peralatan yang sudah terinfeksi (Semangun, 1991).

Pada tanaman dewasa tingkat kematian akibat serangan jamur ini mencapai 50-100%, memperpendek umur produksi dari 10 kali panen menjadi dua kali bahkan tidak dapat berproduksi (Hadisutrisno, 2005). Selain itu, menyebabkan produktivitas tanaman vanili menjadi rendah yaitu berkisar antara 0,2-0,5 kg polong kering per pohon, padahal potensinya dapat mencapai 1,0-1,5 kg polong kering per pohon (Ruhnayat, 2004). Menurut Hadisutrisno (dalam Redaksi Trubus, 2004); 7-32% bibit yang berasal dari stek terkontaminasi oleh jamur ini, walaupun tanaman induknya tidak menunjukkan gejala serangan.

Sampai saat ini penyakit busuk batang vanili merupakan salah satu penyakit pada tanaman vanili yang sulit dikendalikan, karena jamur F. oxysporum f. sp. vanillae memiliki struktur bertahan berupa klamidospora yang dapat bertahan dalam tanah sebagai saprofit dalam waktu relatif lama sekitar tiga sampai empat tahun walau tanpa tanaman inang (Sukamto dan Tombe, 1995; Nurawan et al., 1995). Selain itu menurut Hadisutrisno (2005), sulitnya pengendalian penyakit ini disebabkan karena penularannya melalui stek yang sudah terinfeksi, sehingga penyebarannya menjadi cepat dan meluas. Ruhnayat (2004) mengatakan bahwa sampai saat ini belum ditemukan klon vanili yang tahan atau toleran terhadap penyakit ini.

Dari hasil uji patogenisitas tiga isolat jamur F. oxysporum f. sp vanillae yang diisolasi dari kebun vanili Timbenuh, Selebung dan Celelos, ternyata ketiganya menyebabkan infeksi pada klon vanili lokal NTB dan introduksi dari Pulau Jawa, yaitu pada klon Timbenuh NTB, Selebung NTB, klon Ungaran Jawa Tengah dan klon Sumedang Jawa Barat menunjukkan reaksi peka, sedang klon Celelos NTB dan Malang Jawa Timur menunjukkan reaksi agak tahan (Sudantha dan Abadi, 2006).

Pengendalian penyakit busuk batang yang paling banyak dilakukan saat ini adalah penggunaan fungusida melalui perlakuan stek dan penyemprotan pada tanaman. Namun aplikasi fungisida seringkali gagal menghadapi serangan jamur F. oxysporum yang berat (Ruhnayat, 2004). Salah satu alternatif pengendalian adalah secara hayati menggunakan jamur endofit yang bersifat antagonistik untuk meningkatkan ketahanan induksi terhadap penyakit busuk batang.

Ketahanan induksi merupakan ketahanan tanaman terhadap infeksi patogen karena tanaman telah terinfeksi oleh mikroorganisme lain sebelumnya, baik dari jenis yang sama maupun dari jenis lain (Abadi, 2003). Jamur endofit adalah jamur yang hidup di dalam jaringan tanaman sehat tanpa menyebabkan gejala atau kerusakan pada tanaman inang (Petrini dan Petrini, 1985 dalam Davis et al., 2003). Keuntungan dengan adanya jamur endofit pada tanaman inang adalah meningkatnya toleransi terhadap logam berat, meningkatkan ketahanan terhadap kekeringan, menekan serangan hama, resistensi sistemik terhadap patogen (Saikkonen et al., 1998 dalam Arnold et al., 2003).

Berdasarkan hasil isolasi pada jaringan tanaman vanili sehat di kebun vanili Timbenuh Lombok Timur, kebun Selebung Lombok Tengah dan kebun Celelos Lombok Barat NTB ditemukan 16 isolat jamur endofit yang bersifat antagonistik terhadap jamur F. oxysprorum f. sp. vanillae secara in-vitro. Dari 16 isolat jamur endofit tersebut ada tujuh isolat efektif menekan pertumbuhan jamur F. oxysprorum f. sp. vanillae, yaitu Trichoderma sp. ENDO-01 akar tanah Timbenuh (T. viride), Trichoderma sp. ENDO-02 batang Timbenuh (T. koningii), Trichoderma sp. ENDO-03 buah Timbenuh (T. longibrachiatum), Trichoderma sp. ENDO-05 batang Selebung (T. pseudokoningii), Trichoderma sp. ENDO-06 batang Celelos (T. viride), Rhizoctonia sp. ENDO-07 batang Timbenuh, dan Rhizoctonia sp. ENDO-08 batang Selebung (Sudantha dan Abadi, 2006).

Mekanisme antagonisme jamur endofit Trichoderma spp. dan Rhizoctonia spp. terhadap jamur F. oxysporum f. sp. vanillae dengan cara fisik (kompetisi ruang dan mikoparasit) dan mengeluarkan antibiotik yang didifusikan ke dalam medium agar. (Sudantha dan Abadi, 2006). Petrini (1993) melaporkan bahwa jamur endofit menghasilkan alkaloid dan mikotoksin sehingga memungkinkan digunakan untuk meningkatkan ketahanan tanaman terhadap penyakit. Menurut Dahlam et al. (1991), dan Brunner dan Petrini (1992), jamur endofit menghasilkan senyawa aktif biologis secara in-vitro antara lain alkaloid, paxillin, lolitrems dan tetranone steroid. Selain itu menurut Photita (2003 dalam Lumyong et al., 2004), jamur endofit antagonis mempunyai aktivitas tinggi dalam menghasilkan enzim yang dapat digunakan untuk mengendalikan patogen. Jamur endofit Neotyphodium sp. menghasilkan enzim β-1,6-glucanase yang menyerupai enzim yang sama yang dihasilkan oleh jamur T. harzianum dan T. virens (Moy et al., 2002).

Berdasarkan uraian di atas, maka dilakukan uji efektivitas jamur endofit antagonistik dalam meningkatkan ketahanan induksi beberapa klon vanili terhadap penyakit busuk batang dengan tujuan untuk mengetahui efektivitas jamur endofit antagonistik dalam mengendalikan penyakit busuk batang vanili dan meningkatkan ketahanan induksi beberapa klon vanili terhadap penyakit busuk batang.

METODE PENELITIAN

Penelitian menggunakan metode eksperimental yang dilaksanakan di rumah plastik Fakultas Pertanian Universitas Mataram.

a. Rancangan Percobaan

Percobaan menggunakan Rancangan Acak Lengkap dengan percobaan faktorial yang terdiri dari dua faktor, yaitu:

Faktor jenis jamur endofit antagonistik (E) yang terdiri atas delapan aras, yaitu:

e1 = dengan jamur endofit Trichoderma sp. ENDO-01 akar Timbenuh e2 = dengan jamur endofit Trichoderma sp. ENDO-02 batang Timbenuhe3 = dengan jamur endofit Trichoderma sp. ENDO-03 buah Timbenuh e4 = dengan jamur endofit Trichoderma sp. ENDO-05 batang Selebung e5 = dengan jamur endofit Trichoderma sp. ENDO-06 batang Celelose6 = dengan jamur endofit Rhizoctonia sp. ENDO-07 batang Timbenuh e7 = dengan jamur endofit Rhizoctonia sp. ENDO-08 batang Selebung e8 = tanpa jamur endofit antagonistik

Faktor klon vanili (K) yang terdiri atas dua aras, yaitu:

a1 = klon vanili Timbenuh NTB (reaksi peka terhadap penyakit busuk batang)a2 = klon vali Malang Jawa Timur (reaksi agak tahan terhadap penyakit busuk batang)

Perlakuan merupakan kombinasi dari faktor jamur endofit antagonistik dan klon vanili yang masing-masing diulang tiga kali, sehingga terdapat 48 unit percobaan.

b. Persiapan dan Pelaksanaan Percobaan

Semua isolat jamur endofit antagonistik dan jamur F. oxysporum f.sp. vanillae terlebih dahulu dimurnikan, kemudian diperbanyak pada medium PDA dan medium seresah daun kopi (Sudantha dan Abadi, 2007).

Stek vanili klon Timbenuh dan klon Malang dipotong sepanjang empat buku atau sepanjang 40 cm, diambil dari sulur yang belum pernah berbunga dan dari pohon yang pernah berbuah dan mempunyai ruas yang pendek. Sebelum disemai, stek dicuci dengan air mengalir untuk menghilangkan lendir yang terdapat pada ujung-ujung stek dan kotoran yang menempel.

Medium yang digunakan untuk menanam stek vanili adalah tanah, arang sekam, pupuk kandang kuda dan pasir yang sudah disterilkan dengan perbandingan 1 : 1 : 1 : 1 (v/v) yang dimasukkan dalam polybag berukuran 15 x 35 cm. Pangkal Stek vanili yang telah disiapkan direndam dalam suspensi jamur endofit (kerapatan konidia 10 7/ml) selama 30 menit. Selanjutnya ditanam dalam polybag dengan kemiringan antar 20 – 30° untuk memudahkan perambatan sulur vanili pada ajir. Setelah satu minggu diinokulasi dengan suspensi spora jamur F. oxysporum f.sp. vanillae sebanyak 25 ml suspensi (kerapatan konidia 10 7/ml).

c. Pengamatan Variabel

Variabel yang diamati adalah:

1. Masa inkubasi, pengamatan dilakukan setiap hari sampai timbulnya gejala pertama.

2. Panjang pembusukan pada batang, pengamatan dilakukan sampai dengan umur delapan minggu setelah inokulasi patogen. Untuk menilai tingkat ketahanan induksi bibit vanili terhadap penyakit busuk batang maka dibuat kriteria reaksi ketahanan seperti yang tampak pada Tabel 1.

Tabel 1. Reaksi Ketahanan Induksi Bibit Vanili Terhadap Penyakit Busuk Batang yang Disebabkan oleh Jamur F. oxysporum f. sp. vanillae Berdasarkan Persentase Panjang Pembusukan pada Batang

No. Persentase panjang pembusukan pada batang (P) Reaksi ketahanan

1 Tidak terinfeksi Sangat Tahan 2 1% < P ≤ 10% Tahan 3 11% < P ≤ 30% Agak Tahan 4 31% < P ≤ 60% Agak Peka 5 61% < P ≤ 80% Peka 6 81% < P ≤ 100% Sangat Peka

3. Panjang tunas daun/sulur, pengamatan dilakukan dengan mengukur panjang tunas daun/sulur sampai dengan umur delapan minggu setelah patogen.

4. Pertumbuhan miselium jamur endofit antagonistik dalam tanaman diamati dengan cara memotong bagian-bagian tanaman (akar, pangkal batang dan daun), difiksasi, kemudian direndam dalam pewarna jaringan tanaman (lactophenol cotton blue) serta diamati dengan bantuan mikroskop. Pengamatan dilakukan sampai dengan umur delapan minggu setelah inokulasi jamur F. oxysporum f.sp. vanillae, secara destruktif. Pengamatan meliputi lokasi keberadaan jamur endofit dalam jaringan akar, batang dan daun.

Data hasil pengamatan akan dianalisis secara statistik menggunakan Analisis Keragaman pada taraf nyata 0,05 dan apabila antar perlakuan ada yang berbeda nyata (signifikan) maka dilanjutkan dengan Uji Beda Nyata Jujur pada taraf nyata yang sama.

HASIL DAN PEMBAHASAN

Hasil analisis keragaman menunjukkan bahwa faktor jamur endofit antagonistik dan klon vanili serta interaksinya menunjukkan beda nyata terhadap masa inkubasi penyakit busuk batang vanili, persentase panjang pembusukan pada batang yang terinfeksi penyakit busuk batang, dan panjang tunas daun/sulur. Hasil uji lanjut ketiga variabel tersebut disajikan pada Tabel 2, 3 dan 4.

Tabel 2. Hasil Uji Lanjut Masa Inkubasi Penyakit Busuk Batang Vanili Sampai Umur Delapan Minggu Setelah Inokulasi Patogen Sebagai Interaksi Penggunaan Beberapa Jamur Endofit dan Klon Vanili

No. Jenis jamur endofit

Masa inkubasi (hari)Klon vanili

Klon Timbenuh NTB

Klon Malang Jawa Timur

1 Trichoderma sp. ENDO-01 akar tanah Timbenuh (T. viride) 0,000 a*)A**)

0,000 aA

2 Trichoderma sp. ENDO-02 batang Timbenuh (T. koningii) 0,000 aA

0,000 aA

3 Trichoderma sp. ENDO-03 buah Timbenuh (T. longibrachiatum) 0,000 aA

0,000 aA

4 Trichoderma sp. ENDO-05 batang Selebung (T. pseudokoningii) 0,000 aA

0,000 aA

5 Trichoderma sp. ENDO-06 batang Celelos (T. viride) 0,000 aA

0,000 aA

6 Rhizoctonia sp. ENDO-07 batangTimbenuh 0,000 aA

0,000 aA

7 Rhizoctonia sp. ENDO-08 batang Selebung 0,000 aA

0,000 aA

8 Kontrol (tanpa endofit) 8,000 aB

7,667 aB

Ket : data 0 artinya bibit vanili tidak terinfeksi penyakit busuk batang sampai berumur delapan minggu setelah inokulasi patogen (pada analisis keragaman data ditransformasikan dalam Arcsin + 0.5.*) Angka-angka pada baris yang diikuti oleh huruf yang sama (huruf kecil) tidak berbeda nyata p ≤ 0,05.**) Angka-angka pada kolom yang diikuti oleh huruf yang sama (huruf kapital) tidak berbeda nyata p ≤0,05

Pada Tabel 2 terlihat bahwa perlakuan dengan semua jamur endofit Trichoderma sp. isolat ENDO-01 ENDO-01 akar tanah Timbenuh (T. viride), ENDO-02 batang Timbenuh (T. koningii), ENDO-03 buah Timbenuh (T. longibrachiatum), ENDO-05 batang Selebung (T. pseudokoningii), ENDO-06 batang Celelos (T. viride), dan jamur endofit Rhizoctonia spp isolat ENDO-07 batang Timbenuh dan ENDO-08 batang Selebung menyebabkan bibit vanili tidak terinfeksi oleh penyakit busuk batang baik pada klon vanili Timbenuh NTB maupun klon vanili Malang Jawa Timur, sedang pada kontrol (tanpa jamur endofit) terjadi penyakit busuk batang pada bibit vanili dengan masa inkubasi rata-rata 8,000 hari pada klon vanili Timbenuh NTB yang tidak berbeda nyata dengan klon vanili Malang Jawa Timur dengan masa inkubasi rata-rata 7,667 hari.

Pada Tabel 3 terlihat bahwa panjang pembusukan batang stek vanili umur delapan minggu setelah inokulasi patogen pada kontrol (tanpa jamur endofit) mencapai 83,33% (reaksi sangat peka) untuk klon vanili Timbenuh NTB dan 80,83% untuk klon vanili Malang Jawa Timur, sedang apabila diperlakukan dengan isolat jamur endofit Trichoderma sp. isolat ENDO-01 ENDO-01 akar tanah Timbenuh (T. viride), ENDO-02 batang Timbenuh (T. koningii), ENDO-03 buah Timbenuh (T. longibrachiatum), ENDO-05 batang Selebung (T. pseudokoningii), ENDO-06 batang Celelos (T. viride), dan jamur endofit Rhizoctonia spp. isolat ENDO-07 batang Timbenuh dan ENDO-08 batang Selebung menyebabkan pada bibit vanili tidak terjadi infeksi penyakit busuk batang (reaksi sangat tahan), baik pada klon vanili Timbenuh NTB maupun klon vanili Malang Jawa Timur.

Tidak terinfeksinya bibit vanili klon Timbenuh NTB dan klon Malang Jawa Timur setelah perlakuan dengan isolat jamur endofit disebabkan karena jamur endofit secara efektif dapat menekan pertumbuhan jamur F. oxysporum f. sp. vanillae pada jaringan tanaman vanili. Diduga mekanisme antagonisme yang terjadi pada jaringan tanaman vanili sama dengan yang terjadi secara in-vitro. Sudantha dan Abadi (2006) melaporkan bahwa hasil percobaan uji antagonisme antara 16 isolat jamur endofit dengan jamur F. oxysporum f. sp. vanillae secara in-vitro di laboratorium menggunakan metode oposisi langsung dan uji uap biakan, ternyata semua isolat jamur endofit dapat menghambat pertumbuhan jamur F. oxysporum f. sp. vanillae dengan persentase hambatan yang tertinggi oleh Trichoderma spp. disusul oleh Rhizoctonia spp., Aspergillus spp., Penicillium sp. dan Cladosporium spp. Penghambatan pertumbuhan jamur F. oxysporum f. sp. vanillae melalui mekanisme kompetisi ruang (jamur endofit lebih cepat pertumbuhnya), mikoparasit (hifa jamur endofit membelit dan melakukan penetrasi ke dalam hifa jamur patogen) dan antibiosis (jamur endofit mengeluarkan antibiotik yang mudah menguap yang didifusikan ke medium).

Tabel 3. Hasil Uji Lanjut Persentase Panjang Pembusukan pada Batang Vanili dan Reaksi Ketahan Bibit Vanili Umur Delapan Minggu Setelah Inokulasi Patogen Sebagai Interaksi Penggunaan Beberapa Jamur

Endofit dan Klon Vanili

No. Jenis jamur endofit

Klon vaniliKlon Timbenuh NTB Klon Malang Jawa Timur

Panjang pembusukan

(%)

Reaksi ketahanan

Panjang pembusukan

(%)

Reaksi ketahanan

1 Trichoderma sp. ENDO-01 akar tanah Timbenuh (T. viride)

0,000 a*)A**) Sangat Tahan

0,000 a*)A**) Sangat Tahan

2Trichoderma sp. ENDO-02 batang Timbenuh (T. koningii)

0,000 aA Sangat Tahan

0,000 aA Sangat Tahan

3Trichoderma sp. ENDO-03 buah Timbenuh (T. longibrachiatum)

0,000 aA Sangat Tahan

0,000 aA Sangat Tahan

4Trichoderma sp. ENDO-05 batang Selebung (T. pseudokoningii)

0,000 aA Sangat Tahan

0,000 aA Sangat Tahan

5Trichoderma sp. ENDO-06 batang Celelos (T. viride)

0,000 aA Sangat Tahan

0,000 aA Sangat Tahan

6Rhizoctonia sp. ENDO-07 batangTimbenuh

0,000 aA Sangat Tahan

0,000 aA Sangat Tahan

7Rhizoctonia sp. ENDO-08 batang Selebung

0,000 aA Sangat Tahan

0,000 aA Sangat Tahan

8Kontrol (tanpa endofit) 83,33 a

E Sangat Peka80,83 a

F Sangat PekaKet : data 0 artinya bibit vanili tidak terinfeksi penyakit busuk batang sampai berumur delapan minggu setelah

inokulasi patogen (pada analisis keragaman data ditransformasikan dalam Arcsin + 0.5*) Angka-angka pada baris yang diikuti oleh huruf yang sama (huruf kecil) tidak berbeda nyata p ≤ 0,05**) Angka-angka pada kolom yang diikuti oleh huruf yang sama (huruf kapital) tidak berbeda nyata p ≤ 0,05

Dengan tidak terinfeksinya bibit vanili klon Timbenuh NTB dan klon Malang Jawa Timur maka dapat dikatakan bahwa semua isolat jamur endofit tersebut dapat meningkatkan ketahanan induksi bibit vanili terhadap penyakit busuk batang, yang semula bereaksi sangat peka (pada kontrol) berubah menjadi reaksi sangat tahan. Pada Gambar 1 dan 2 memperlihatkan bibit vanili klon Timbenuh NTB dan klon Malang Jawa Timur tumbuh sehat setelah diperlakukan dengan jamur endofit, sedang pada kontrol (tanpa jamur endofit) bibit vanili terinfeksi oleh penyakit busuk batang.

Gambar 1. Bibit Vanili Klon Timbenuh NTB Sehat (Diperlakukan dengan Isolat Jamur Endofit) dan Terinfeksi Penyakit Busuk Batang (Tanpa Perlakuan Jamur Endofit).

Gambar 2. Bibit Vanili Klon Malang Jawa Timur (Diperlakukan dengan Isolat Jamur Endofit) dan Terinfeksi Penyakit Busuk Batang (Tanpa Perlakuan Jamur Endofit).

Terjadinya peningkatan ketahanan induksi bibit vanili terhadap penyakit busuk batang ini disebabkan karena jamur endofit mampu mengendalikan jamur F. oxysporum f. sp. vanillae penyebab penyakit busuk batang melalui mekanisme kompetisi, mikoparasit dan antibiosis. Diduga mekanisme antagonisme yang terjadi secara in-vitro juga terjadi pada jaringan tanaman. Hal ini sesuai dengan pendapat Abadi (2003) bahwa ketahanan induksi dapat terjadi karena tanaman telah terinfeksi oleh mikroorganisme lain sebelumnya, baik dari jenis yang sama maupun dari jenis lain. Lebih lanjut Guest (2005) mengatakan bahwa ketahanan induksi terjadi karena kombinasi dari rintangan pasif dengan respon lokal karena adanya peristiwa matinya sel dan akumulasi antibiotik yang dapat berupa fitoaleksin. Weindling dan Emerson (1936), dan Brian (1944) melaporkan bahwa jamur T. viride menghasilkan antibiotik gliotoksin (dalam Cook dan Baker, 1983). Selanjutnya Brian dan McGowan (1945, dalam Cook dan Baker, 1983) melaporkan bahwa selain gliotoksin jamur T. viride menghasilkan antibiotik viridin. Rifai (1969) melaporkan bahwa jamur T. viride mengeluarkan bau minyak kelapa terutama pada biakan yang sudah tua. Selain itu menurut Jones dan Watson (1969 dalam Cook dan Baker, 1983), jamur T. viride menghasilkan enzim enzim β-(1,3) glucanase, sehingga mampu menghancurkan miselia jamur patogenik.

Sebagai gambaran tentang pertumbuhan dan perkembangan miselium jamur endofit antagonis dalam jaringan batang vanili dilakukan pemotongan jaringan batang secara membujur, kemudian difiksasi dan direndam dalam pewarna jaringan tanaman (lactophenol cotton blue) serta diamati dengan bantuan mikroskop, hasilnya seperti yang tampak pada Gambar 3. Pada bibit vanili yang sudah diperlakukan dengan isolat jamur endofit, ternyata memperlihatkan miselia jamur endofit memenuhi ruang antar sel dalam jaringan batang, sedang pada kontrol, ruang antar sel pada jaringan batang tidak mengandung jamur endofit. Menurut Petrini (1991), jamur endofit adalah jamur yang hidup di dalam jaringan tanaman sehat tanpa menyebabkan gejala atau kerusakan pada tanaman inang. Simbiosis dengan tanaman dapat berupa mutualistik, netralisme dan antagonistik. Kolonisasi jamur endofit pada tanaman dimulai dari masuknya ke jaringan tanaman, perkecambahan spora, penetrasi epidermis dan kolonisasi jaringan.

Miselia jamur Trichoderma sp. ENDO-02 batang Timbenuh (T. koningii)

Miselia jamur Trichoderma sp. ENDO-01 akar tanah Timbenuh (T. viride)

Miselia jamur Trichoderma sp. ENDO-05 batang Selebung (T. pseudokoningii)

Miselia jamur Trichoderma sp. ENDO-06 batang Celelos (T. viride)

Miselia jamur Rhizoctonia sp. ENDO-07 batang Timbenuh

Ruang antar sel dari batang vanili yang tidak mengandung jamur endofit

Gambar 3. Miselia jamur endofit Trichoderma spp. dan Rhizoctonia spp. di ruang antar sel dalam jaringan batang vanili sehat dan ruang antar sel dari batang vanili yang tidak mengandung jamur endofit (kontrol)

Untuk meyakinkan bahwa di dalam jaringan batang tersebut adalah jamur endofit yang serupa dengan perlakuan percobaan maka dilakukan reisolasi yang hasilnya seperti pada Gambar 4 – 9.

Gambar 4. Koloni dan morfologi jamur endofit Trichoderma sp. isolat ENDO-01 akar tanah Timbenuh (T. viride)

Gambar 5. Koloni dan morfologi jamur endofit Trichoderma sp. isolat ENDO-02 batang vanili Timbenuh (T. koningii)

Gambar 6. Koloni dan morfologi jamur endofit Trichoderma sp. isolat ENDO-04 batang vanili Jurang Malang (T. polysporum)

Gambar 7. Koloni dan morfologi jamur endofit Trichoderma sp. isolat ENDO-05 batang vanili Selebung (T. pseudokoningii)

Gambar 8. Koloni dan morfologi jamur endofit Rhizoctonia sp. isolat ENDO-07 batang vanili Timbenuh (Rhizoctonia sp.)

Gambar 9. Koloni dan morfologi jamur endofit Rhizoctonia sp. isolat ENDO-08 batang vanili Selebung (Rhizoctonia sp.)

Tabel 4. Hasil Uji Lanjut Panjang Tunas Daun/Sulur Vanili Umur Delapan Minggu Setelah Inokulasi Patogen Sebagai Interaksi Penggunaan Beberapa Jamur Endofit dan Cara Aplikasinya.

No. Jenis jamur endofit

Klon vaniliKlon Timbenuh NTB Klon Malang Jawa Timur

Panjang tunas daun/sulur (cm)

Panjang tunas daun/sulur (cm)

1 Trichoderma sp. ENDO-01 akar tanah Timbenuh (T. viride)

54,33 a*)B**)

53,67 aB

2 Trichoderma sp. ENDO-02 batang Timbenuh (T. koningii)

52,67 aB

54,00 aB

3 Trichoderma sp. ENDO-03 buah Timbenuh (T. longibrachiatum)

53,33 aB

55,33 aB

4 Trichoderma sp. ENDO-05 batang Selebung (T. pseudokoningii)

55,67 aB

55,33 aB

5 Trichoderma sp. ENDO-06 batang Celelos (T. viride)

53,67 aB

55,33 aB

6 Rhizoctonia sp. ENDO-07 batangTimbenuh 55,00 a 56,33 a

B B7 Rhizoctonia sp. ENDO-08 batang Selebung 51,50 a

B52,00 a

B8 Kontrol (tanpa endofit) 5,20 a

A5,33 a

A*) Angka-angka pada baris yang diikuti oleh huruf yang sama (huruf kecil) tidak berbeda nyata p ≤ 0,05**) Angka-angka pada kolom yang diikuti oleh huruf yang sama (huruf kapital) tidak berbeda nyata p ≤ 0,05

Pada Tabel 4 terlihat bahwa perlakuan dengan semua isolat jamur endofit menyebabkan panjang tunas daun/sulur lebih panjang dari pada kontrol, sedang antar perlakuan dengan isolat jamur endofit tidak menunjukkan beda nyata. Terjadinya perbedaan panjang tunas daun/sulur tersebut disebabkan karena isolat jamur endofit ini menyebabkan bibit vanili sampai dengan umur delapan minggu setelah inokulasi patogen tidak terinfeksi oleh penyakit busuk batang, sehingga pertumbuhan bibit vanili menjadi lebih baik termasuk panjang tunas daun/sulur. Selain itu diduga bahwa jamur endofit Trichoderma spp. menghasilkan etilen yang dapat memacu pertumbuhan dan pemanjangan tunas daun/sulur. Menurut Salisbury dan Ross (1995, beberapa jenis jamur yang hidup di tanah dapat menghasilkan etilen. Diduga etilen yang dilepaskan oleh jamur tersebut membantu mendorong perkecambahan biji, mengendalikan pertumbuhan kecambah, memperlambat serangan organisme patogen tular tanah, dan memacu pembentukan dan pertumbuhan batang, daun, akar, bunga atau buah. Tronsmo dan Dennis (1977 dalam Cook dan Baker, 1983) melaporkan bahwa penyemprotan konidia jamur T. viride dan T. polysporum untuk melindungi tanaman strawberi dari penyakit busuk ternyata dapat memacu pembungaan lebih awal.

KESIMPULAN DAN SARAN

Berdasarkan hasil dan pembahasan maka dapat ditarik beberapa kesimpulan sebagai berikut:

1. Perlakuan dengan jamur endofit Trichoderma sp. isolat ENDO-01 ENDO-01 akar tanah Timbenuh (T. viride), ENDO-02 batang Timbenuh (T. koningii), ENDO-03 buah Timbenuh (T. longibrachiatum), ENDO-05 batang Selebung (T. pseudokoningii), ENDO-06 batang Celelos (T. viride), dan jamur endofit Rhizoctonia spp. isolat ENDO-07 batang Timbenuh dan ENDO-08 batang Selebung, efektif mengendalikan penyakit busuk batang, sehingga menyebabkan bibit vanili klon Timbenuh NTB dan klon Malang Jawa Timur tidak terinfeksi oleh penyakit busuk batang

2. Isolat jamur endofit Trichoderma sp. isolat ENDO-01 ENDO-01 akar tanah Timbenuh (T. viride), ENDO-02 batang Timbenuh (T. koningii), ENDO-03 buah Timbenuh (T. longibrachiatum), ENDO-05 batang Selebung (T. pseudokoningii), ENDO-06 batang Celelos (T. viride), dan jamur endofit Rhizoctonia spp. isolat ENDO-07 batang Timbenuh dan ENDO-08 batang Selebung dapat meningkatkan ketahanan induksi bibit vanili klon Timbenuh NTB dan klon Malang Jawa Timur menjadi bereaksi sangat tahan terhadap penyakit busuk batang.

3. Dengan meningkatnya ketahanan induksi pada bibit vanili klon Timbenuh NTB dan klon Malang Jawa Timur akibat perlakuan dengan isolat jamur endofit Trichoderma sp. isolat ENDO-01 ENDO-01 akar tanah Timbenuh (T. viride), ENDO-02 batang Timbenuh (T. koningii), ENDO-03 buah Timbenuh (T. longibrachiatum), ENDO-05 batang Selebung (T. pseudokoningii), ENDO-06 batang Celelos (T. viride), dan jamur endofit Rhizoctonia spp. isolat ENDO-07 batang Timbenuh dan ENDO-08 batang Selebung maka tunas daun/sulur menjadi lebih panjang.

Berdasarkan hasil penelitian ini maka perlu dilakukan penelitian lebih lanjut penggunaan isolat jamur endofit Trichoderma sp. isolat ENDO-01 ENDO-01 akar tanah Timbenuh (T. viride), ENDO-02 batang Timbenuh (T. koningii), ENDO-03 buah Timbenuh (T. longibrachiatum), ENDO-05 batang Selebung (T. pseudokoningii), ENDO-06 batang Celelos (T. viride), dan jamur endofit Rhizoctonia spp. isolat ENDO-07 batang Timbenuh dan ENDO-08 batang Selebung pada kondisi lapang. Selain itu perlu penelitian lebih lanjut tentang senyawa antibiotik atau etilen yang dihasilkan oleh isolat jamur endofit tersebut.

UCAPAN TERIMA KASIH

Ucapan terima kasih penulis ucapkan kepada Direktur Binlitabmas Dirjen Dikti dan Ketua Lembaga Penelitian Universitas Mataram yang telah memberikan dana penelitian fundamental melalui Binlitabmas

Dirjen Dikti Depdiknas, sesuai dengan Surat Perjanjian Pelaksanaan Penelitian Nomor: 028/SP3/PP/DP2M/II/ 2006 tanggal 1 Pebruari 2006.

DAFTAR PUSTAKA

Abadi, A. L. 2003. Ilmu Penyakit Tumbuhan I Edisi Pertama. Bayumedia Publishing dan Fakultas Pertanian Universitas Brawijaya, Malang Jawa Timur – Indonesia. 137 hal.

Arnold, A. E., L. C. Mejia, D. Kyllo, E. I. Rojash, Z. Maynard, N. Robbins and E. A. Herre. 2003. Fungal Endophytes Limit Pathogen Damage In a Tropical Tree. PNAS vol. 100 No. 26: 15649 – 15654. Published online:

Brunner, F. and O. Petrini. 1992. Taxonomic Studies of Xylaria species and Xylariaceous Endophytes by Izozyme Electrophoresis. Mycological Research 96: 723 – 733.

Cook, R. J. and K. F. Baker. 1983. The Nature and Practice of Biological Control of Plant Pathogens. The American Phytopathological Society. St. Paul, Minnesota. 539 hal.

Dahlam, D. L., H. Eichenseer and M. R. Siegel. 1991. Chemical Perspectives on Endophyte-Grass Interaction and Their Implications to Insect Herbivory. In: Microbial Mediation of Plant-Herbivore Interaction (Eds. Barbosa, P., V. A. Krichil and C. G. Jones). Jhon Wiley & Sons Inc., New York: 227 – 252.

Davis, E. C., J. B. Franklin, A. J. Shaw and R. Vilgalys. 2003. Endophytic Xylaria (Xylariaceae) Among Liverworts and Angiospermae: Phylogenetics, Distribution, and SymSAPROis. American Journal of Botany 9 (11): 1661 – 1667.

Guest, D. 2005. Induced Disease Resistance in Plants. In Program and Abstract The 1st International Conference of Crop Security 2005, Brawijaya University, Malang, September 20 th – 22nd, 2005. 264 p.

Hadisutrisno, B. 2005. Budidaya Vanili Tahan Penyakit Busuk Batang. Penerbit Penebar Swadaya, Depok. 87 p.

Lumyong, S., P. Lumyong and K. D. Hyde, 2004. Endophytes. In Jones, E. B. G., M. Tantichareon and K. D. Hyde (Ed.), Thai Fungal Diversity. Published by BIOTEC Thailand and Biodiversity Research and Training Program (BRTI/TRF. Biotec). 197 – 212.

Moy, M., H. M. Li, R. Sullivan, J. F. White Jr, and F. C. Belanger. 2002. Endophytic Fungal β-1,6-Glucanase Expression in the Infected Host Grass. Plant Physiol.Vol.130: 1298 – 1308. http://www.plantphysiol.org/cgi/content/full/130/ 3/1298 , (18 Maret 2005).

Nurawan, A., M. Tombe dan K. Matsumoto. 1995. Penelitian Daya Antagonisme Isolat Bakteri yang Diisolasi Dari Rhizosfera Berbagai Jenis Tanaman Terhadap Patogen Busuk Batang Vanili. Dalam Parman et al. (Penyunting), Peran Fitopatologi dalam Pembangunan Pertanian Berkelanjutandi Kawasan Timur Indonesia. Risalah Kongres Nasional XIII dan Seminar Ilmiah Perhimpunan Fitopatologi Indonesia di Mataram. 356 – 359.

Petrini, O. 1991. Fungal Endophytes of Tree Leaves. In: Microbial Ecology of Leaves (Eds. Andrews, J. H. and S. S. Hirano). Springer-Verlag, Berlin. 179 – 197.

Petrini, O. 1993. Endophyt of Pteridium spp.: Some Consederations for Biological Control. Sydowia 45: 330 –338.

Redaksi Trubus, 2004. Panduan Praktis: Vanili Kiat bebas Busuk Batang. Penerbit Majalah Trubus, Jakarta. 16 hal.

Rifai, M. A. 1969. A Revision of The Genus Trichoderma. Mycological Papers, No. 16. Commonwealth Mycological Instittute Kew, Surrey, England. 56 hal.

Ruhnayat, A. 2004. Kiat Mengatasi Permasalahan Praktis Bertanam Vanili Si Emas Hijau nan Wangi. Agromedia Pustaka, Jakarta. 51 hal.

Salisbury, F. B. Dan C. W. Ross, 1995. Fisiology Tumbuhan Jilid 3. Perkembangan tumbuhan dan fisiologi Tumbuhan (Terjemahan D. R. Lukman dan Sumaryono). Penerbit ITB Bandung.

Semangun, H. 1991. Penyakit-Penyakit Tanaman Perkebunan di Indonesia. Gadjah Mada Press, Yogyakarta. 529 – 535.

Sudantha, I. M. Dan A. L. Abadi. 2006. Biodiversitas Jamur endofit Pada Vanili (Vanilla planifolia Andrews) dan Potensinya Untuk Meningkatkan Ketahanan Vanili Terhadap Penyakit Busuk Batang. Laporan Kemajuan Penelitian Fundamenatal DP3M DIKTI. Fakultas Pertanian Universitas Mataram, Mataram 107 hal.

Sukamto dan M. Tombe. 1995. Antagonisme Trichoderma viride terhadap Fusarium oxysporum f. sp. vanillae secara In-Vitro. Dalam Parman et al. (Penyunting), Peran Fitopatologi dalam Pembangunan Pertanian Berkelanjutandi Kawasan Timur Indonesia. Risalah Kongres Nasional XIII dan Seminar Ilmiah Perhimpunan Fitopatologi Indonesia di Mataram. 600 – 604.