UJI EFEK KOMBINASI SIPROFLOKSASIN DENGAN EKSTRAK...

UJI EFEK KOMBINASI SIPROFLOKSASIN DENGAN EKSTRAK

METANOL DAUN SIRIH MERAH (Piper crocatum Ruiz & Pav.)

TERHADAP BAKTERI Staphylococcus epidermidis

SKRIPSI

Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat

Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.)

Program Studi Farmasi

Oleh:

Alamanda Febriani

NIM : 158114101

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SANATA DHARMA

YOGYAKARTA

2019

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

i

UJI EFEK KOMBINASI SIPROFLOKSASIN DENGAN EKSTRAK

METANOL DAUN SIRIH MERAH (Piper crocatum Ruiz & Pav.)

TERHADAP BAKTERI Staphylococcus epidermidis

SKRIPSI

Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat

Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.)

Program Studi Farmasi

Oleh:

Alamanda Febriani

NIM : 158114101

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SANATA DHARMA

YOGYAKARTA

2019


ii


iii


iv

HALAMAN PERSEMBAHAN

Karya ini ku persembahkan untuk

Tuhan Yesus Kristus, sumber kasih dan rahmat

Bapak, ibu, kakak, dan segenap keluarga besar

yang selalu memberikan kasih, doa dan masukkan

Teman-teman terkasih yang selalu memberi dukungan

Dan untuk almamaterku


v


vi


vii

PRAKATA

Segala puji syukur penulis panjatkan kepada Tuhan Yesus Kristus yang

telah memberikan rahmat, pernyertaan serta kasih-Nya sehingga penulis mampu

menyelesaikan penelitian dan penyusunan skripsi yang berjudul “Uji Efek

Kombinasi Siprofloksasin dengan Ekstrak Metanol Daun Sirih Merah (Piper

crocatum Ruiz & Pav.) Terhadap Bakteri Staphylococcus epidermidis”.

Penulis menyadari banyak pihak yang membantu dan medukung dalam

penyelesaian skripsi ini, oleh karena itu penulis ingin mengucapkan terimakasi

kepada :

1. Ibu Dr. Yustina Sri Hartini M.Si., Apt. Selaku dosen pembimbing yang

selalu sabar dalam memberikan arahan, saran, dan evaluasi mulai dari

penyususnan proposal hingga terselesainya skripsi ini.

2. Ibu Dr. Erna Tri Wulandari, Apt. dan ibu Damiana Sapta Candrasari, S.Si.,

M.Sc. selaku dosen penguji yang telah memberikan kritik dan saran kepda

penulis.

3. Laboran lantai satu hingga lantai empat, khususnya Pak Wagiran dan Kak

Intan yang membantu selama melakukan penelitian.

4. Bapak Mulyono dan Ibu Winarni yang selalu memberikan dukungan doa,

semangat serta kasih sayang kepada penulis selama penyususnan skripsi.

5. Kakak penulis Winda Milasari yang selalu mendengarkan cerita penulis dan

memberikan semangat dan doa kepada penulis.

6. Epen, Galang, Pipit, Bryan, Nadia dan Rian yang menjadi teman satu

kelompok skripsi yang selalu memberikan dukungan serta semangat dan

menjalani suka duka bersama-sama.

7. Teman-teman PosKes Kotabaru yang memberikan dukungan doa dan

semangat kepada penulis.

8. Kak Tara, Ce Hanny, Ana yang sudah selalu meluangkan waktu

mendengarkan cerita.

9. Ima, Aulia, Yuli, Shella, Melani dan Yulinda yang sudah memberi semangat

dan keceriaan selama penulis kuliah di Yogyakarta.

10. Devri, Ambar, Amel dan Dinda yang walaupun jauh di Semarang, tetapi

tetap memberikan dukungan dan semangat dalam menyelesaikan

perkuliahan dan skripsi.

11. Teman-teman FSM C dan seluruh angkatan 2015 Fakultas Farmasi

Universitas Sanata Dharma yang telah memberikan keceriaan, semangat

dan kerja sama selama perkuliahan.

12. Semua pihak yang tidak dapat penulis sebutkan satu per satu yang telah

membantu penyusunan skripsi hingga terselesaikan dengan baik.


viii

Penulis menyadari bahwa naskah skripsi ini mesih jauh dari sempurna, oleh

karena itu penulis sangat mengharapkan kritik dan saran agar skripsi ini

menjadi lebih baik. Penulis memohon maaf apabila terdapat kesalahan

dalam penyusunan naskah skripsi. Akhir kata, penulis berharap skripsi ini

bermanfaat bagi banyak pihak.

Yogyakarta,

Penulis


ix

ABSTRAK

Latarbelakang : Staphylococcus epidermidis adalah salah satu bakteri yang dapat

menyebabkan infeksi. Pengobatan infeksi dengan pemberian antibiotik, namun

masalah resistensi antibiotik semakin berkembang. Perlu adanya terobosan terbaru,

salah satunya melakukan kombinasi dengan tanaman. Berbagai penelitian

sebelumnya membuktikan, kombinasi dengan tanaman menunjukan efek sinergis.

Ekstrak metanol daun sirih merah juga terbukti mampu menghambat pertumbuhan

bakteri. Penelitian ini untuk melihat efek kombinasi ekstrak metanol sirih merah

dengan siprofloksasin terhadap pertumbuhan Staphylococcus epidermidis.

Metode : Pengujian aktivitas antibakteri menggunakan metode sumuran, kemudian

dilihat profil senyawa yang terdapat pada kombinasi tersebut menggunakan

Kromatografi Lapis Tipis dan uji tabung. Data zona hambat yang diperoleh

kemudian diuji secara statistik menggunakan uji Kruskal-Wallis dan Mann

Whitney.

Hasil : Zona hambat kombinasi lebih sempit dibanding siprofloksasin tunggal.

Hasil uji statistik menunjukan ada perbedaan antara zona hambat kombinasi dan

zona hambat zat tunggal. Hasil dari skrining fitokimia menunjukan hasil, senyawa

antibakteri berupa alkaloid, flavonoid dan tanin terdeteksi dalam larutan kombinasi.

Kesimpulan : Terdapat perbedaan hasil antara kombinasi dan bahan tunggal. Hasil

kombinasi tersebut tidak menunjukan efek sinergis.

Kata kunci : siprofloksasin, kombinasi, zona hambat, Staphylococcus epidermidis,

kromatografi lapis tipis


x

ABSTRACT

Background: Staphylococcus epidermidis is one of the bacteria that can cause

infection. Treatment of infections with antibiotics, but the prevalence of antibiotic

resistance is increasing. The latest breakthrough is needed, one of which is to do a

combination with plants. Various previous studies have shown, a combination with

plants shows a synergistic effect. Methanol extract of red betel leaf is also proven

to inhibit bacterial growth. This study was to look at the effect of the combination

of red betel methanol extract with ciprofloxacin on the growth of Staphylococcus

epidermidis, and see if there are solutions that contain antibacterial compounds.

Method: Antibacterial activity testing using the well method, then the profile of the

compounds found in the combination was seen using Thin Layer Chromatography

and tube test. The inhibitory zone data obtained were then tested statistically using

the Kruskal-Wallis and Mann Whitney tests.

Results: Combination inhibition zones are narrower than single ciprofloxacin. The

results of statistical tests show there is a difference between the combination

inhibition zone and a single substance inhibition zone. The results of phytochemical

screening showed results, antibacterial compounds in the form of alkaloids,

flavonoids and tannins found in combination solutions.

Conclusion: There are differences in results between combinations and single

materials. The combination results do not show a synergistic effect

Keywords: ciprofloxacin, combination, inhibition zone, Staphylococcus

epidermidis, thin layer chromatography


xi

DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN JUDUL .................................................................................... i

HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ............................................. ii

HALAMAN PENGESAHAN ....................................................................... iii

HALAMAN PERSEMBAHAN .................................................................... iv

PERNYATAAN KEASLIAN KARYA ........................................................ v

LEMBAR PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI .......................... vi

PRAKATA ................................................................................................... vii

ABSTRAK ................................................................................................... ix

ABSTRACT ................................................................................................... x

DAFTAR ISI ................................................................................................ xi

DAFTAR TABEL ........................................................................................ xii

DAFTAR GAMBAR ................................................................................... xiii

DAFTAR LAMPIRAN ................................................................................. xiv

PENDAHULUAN ........................................................................................ 1

METODE PENELITIAN .............................................................................. 3

HASIL DAN PEMBAHASAN ..................................................................... 7

KESIMPULAN DAN SARAN ..................................................................... 15

DAFTAR PUSTAKA ................................................................................... 16

LAMPIRAN ................................................................................................. 20

BIOGRAFI PPENULIS ................................................................................ 26


xii

DAFTAR TABEL

Halaman

Tabel I. Hasil pengukuran zona hambat (dalam milimeter) aktifitas

antibakteri siprofloksasin dan EMDSM ....................................... 9

Tabel II. Hasil uji Mann Whitney ............................................................... 11

Tabel III. Nilai Rf dan warna bercak hasil KLT........................................... 13

Tabel IV. Hasil uji tabung ........................................................................... 14


xiii

DAFTAR GAMBAR

Halaman

Gambar 1. (a) Kontrol Media, (b) Kontol Pertumbuhan Hasil KLT

(c) penyemprotan FeCl3 ......................................................... 8

Gambar 2. Hasil uji sumuran aktifitas antibakteri siprofloksasin dan

EMDSM ................................................................................ 9

Gambar 3. Hasil KLT (a) Deteksi UV 254, (b) Deteksi UV 365 .............. 12


xiv

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Surat Determinasi Tanaman (Daun Sirih Merah) ..................... 20

Lampiran 2. Sertifikat Hasil Uji Staphylococcus epidermidis ...................... 21

Lampiran 3. Sertifikat uji statistik dengan SPSS .......................................... 22

Lampiran 4. Hasil perhitungan statistik uji aktivitas antibakteri metode

sumuran.................................................................................. 23

Lampiran 5. Hasil Uji Tabung ..................................................................... 27


1

PENDAHULUAN

Penyakit infeksi merupakan salah satu penyebab kesakitan pada

masyarakat. Menurut data dari Central for Disease Control and Prevention (2015)

sebanyak 16,8 juta orang mengunjungi fasilitas kesehatan karena penyakit infeksi.

Pengobatan infeksi bakteri dilakukan dengan pemberian antibiotik. Pemberian

antibiotik pada anak banyak yang tidak tepat sasaran, atau dapat dikatakan

sesungguhnya tidak ada indikasi perlunya penggunaan antibiotik (Farida dkk,

2008).

Setiap tahun 23.000 orang di Amerika meninggal akibat terjadinya

resistensi bakteri (CDC, 2013). Penelitian yang dilakukan Handayani et al (2017)

menunjukan bahwa resistensi mikroba cukup menghawatirkan dilihat dari hasil

penelitian dan data rumah sakit yang ada. Hal ini dapat dilihat dari contoh yang

terjadi Laboratorium Pusat Nasional Rumah Sakit Umum Cipto Mangunkusumo,

selama tahun 2010-2012 banyak antibiotik memiliki tingkat sensitivitas lebih

rendah dari 50%. Resistensi ini dapat terjadi karena penggunaan antibiotik yang

tidak bijak dan penetapan standar yang kurang sesuai di fasilitas kesehatan

(Anonim, 2011).

Staphylococcus epidermidis dapat menyebabkan infeksi pada beberapa

tempat seperti infeksi pada blood stream, pneumonia, kulit dan beberapa bagian

lain (Mohammed, et. al, 2014). Staphyloccocus epidermidis merupakan mikrobia

normal tubuh yang berada di kulit dan mukosa tubuh (Brooks, 2013). Laporan

mengenai resistensi bakteri Staphylococcus epidermidis yaitu 75-90% isolat

Staphylococcus epidermidis mengalami resisten terhadap metisilin, selain itu

antibiotik lain yang mengalami resistensi yakni rifampisin, florokuinolon,

gentamisin, serta tetrasiklin (Otto, 2009).

Antibiotik yang dapat digunakan untuk mengatasi Staphylococcus

epidermidis tersebut adalah siprofloksasin. Siprofloksasin sendiri merupakan

antibiotik golongan quinilon generasi ke dua yang paling sering digunakan dalam

pengobatan. Siprofloksasin cukup mudah mengalami resistensi karena perubahan

stuktur bakteri. Siprofloksasin bekerja membunuh bakteri dengan menghambat

sintesis DNA bakteri (Hitchings et al. 2015).


2

Kejadian resistensi antibiotik yang semakin meningkat ini seharusnya

diiringi dengan perkembangan obat antibiotik terbaru, atau dilakukan alternatif

dengan melakukan kombinasi. Pada beberapa penelitian yang sudah dilakukan,

adanya kombinasi antara antibiotik dengan tanaman dapat menimbulkan efek

sinergis yaitu efek kombinasi lebih tinggi dibanding efek tunggal. Aiyegoro dan

Okoh (2009) dalam penelitiannya menyebutkan bahwa tanaman bila dikombinasi

dengan antibiotik menunjukan peningkatan aktivitas antibakteri dan efek sinergis.

Kombinasi ampisilin dan ekstrak etanol, petrolium eter Thymbra spicata

menunjukan hasil yang sinergis yang ditandai dengan nilai Fractional Inhibitory

Concentration Index <0,5 (0,07 dan 0,27) (Haroun and Al-Kayali, 2016). Pada

penelitian Adwan dan Mhanna (2008) menunjukan adanya penurunan MIC

antibiotik setelah dilakukan kombinasi dengan tanaman pada pertumbuhan bakteri

Staphylococcus aureus. Tanaman di Indonesia yang sudah terkenal memiliki

khasiat sebagai antibakteri adalah sirih merah.

Ekstrak etanol daun sirih merah (EEDSM) menunjukan aktivitas

antibakteri terhadap Staphylococcus sp. Salah satu bakteri tersebut Staphylococcus

epidermidis terbentuk zona hambat sebesar 14,95 mm. Pada penelitian yang sama

hasil pythocemical test ekstrak etanol daun sirih merah mengandung alkaloid,

flavonoid, tanin, polifenol, saponin, dan steroid (Kusuma et al, 2016). Penelitian

Rinanda et al (2012) menunjukan aktifitas penghambatan pertumbuhan bakteri

Staphylococcus aureus dengan ekstrak metanol daun sirih merah pada konsentrasi

300mg/mL diperoleh zona hambat sebesar 9,0 mm. Penelitian tersebut juga

mengidentifikasi kandungan dalam ekstrak metanol, zat yang terkandung dalam

ekstrak metanol daun sirih merah yaitu alkaloid, flavonoid, saponin, triterpenoid

dan tanin.

Berdasarkan kemiripan zat yang dikandung pada EEDSM dan EMDSM,

dan belum adanya penelitian mengenai ekstrak metanol daun sirih merah terhadap

Staphylococcus epidermidis namun mampu menghambat pertumbuhan

Staphylococcus aureus, maka pada penelitian ini digunakan ekstrak metanol daun

sirih merah sebagai salah satu bahan. Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui

apakah aktivitas antibakteri kombinasi siprofloksasin dengan ekstrak metanol daun


3

sirih merah terhadap Staphylococcus epidermidis memiliki efek sinergis sehingga

dapat menjadi alternatif mengatasi kasus resistensi, serta melihat apakah didalam

larutan uji mengandung senyawa antibakteri.

METODE PENELITIAN

Jenis dan Rancangan Penelitian

Jenis penelitian ini termasuk jenis penelitian eksperimental murni dengan

rancangan eksperimental sederhana atau post only control group design.

Bahan dan Alat Penelitian

Bahan-bahan yang digunakan dalam penitian ini adalah bakteri uji

Staphylococcus epidermidis dalam bentuk kultur, daun sirih merah yang diperoleh

dari daerah Sleman, Yogyakarta, media Nutrien Agar (Merck) dan Nutrien Broth

(Merck) yang didapat dari Laboratorium Mikrobiologi Universitas Sanata Dharma,

pelarut metanol, aquadest, larutan standart Mc Farland 0.5, toluen,

Dimetilsulfoksida (DMSO) 1%, Buffered Pepton Water (Merck), tablet

siprofloksasin 500mg, plat Kromatografi Lapis Tipis Silika Gel 60 F 254 (Merck),

etil asetat.

Alat-alat yang digunakan yaitu oven (Hemmert), shaker (Optimal),

blender, kertas saring, timbangan analitik (OHAUS), inkubator (Hemmert), rotary

evaporator (Buchi), mikropiper (Socorex), nephelometer (PhoenixSpec),

Biological Safety Cabinet class II type A2 (ESCO), autoclave (ALP), vortex, hot

plate, yellow tip, corong Buchner, alat-alat gelas (beker, tabung reaksi, cawan petri,

labu takar, erlenmeyer, pipet volume (Iwaki Pyrex)), pengayak no. 50, bunsen, rak

tabung, jarum ose, alat destilasi.

Pengumpulan bahan dan determinasi tanaman

Sirih merah yang digunakan sebagai salah satu bahan penelitian diperoleh

dari daerah Sleman, Yogyakarta. Sirih merah kemudian dideterminasi di Fakultas

Biologi, Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta.

Pembuatan simplisia daun sirih merah

Daun sirih merah yang digunakan dipilih daun yang berukuran sedang,

tidak berlubang serta berwarna hijau dengan garis keabuan pada permukaan daun


4

dan bagian dasar berwarna kemerahan. Daun yang telah dikumpulkan kemudian

dilakukan sortasi basah untuk memisahkan dari pengotor (bagian tanaman yang

tidak digunakan). Daun sirih merah kemudian dicuci menggunakan air mengalir

dan diulang sebanyak tiga kali. Daun sirih menudian dipotong melintang kira-kira

2cm. Daun sirih merah yang sudah dipotong kemudian dikerinkan dalam oven

dengan suhu 40oC hingga kering. Daun yang telah kering kemudian diserbuk

dengan bantuan blender, lalu diayak dengan ayakan no. 50 agar ukuran serbuk lebih

seragam dan memperluas permukaan sehingga lebih banyak bagian yang terbasahi.

Serbuk disimpan dalam wadah kering yang terlindung dari sinar matahari langsung

dan diletakkan pada suhu ruang.

Penetapan kadar air simplisia kering daun sirih merah

Pereaksi toluen jenuh air dibuat terlebih dahulu dengan cara mencampur

toluen P dengan sedikit air kemudian dikocok lalu dibiarkan terpisah, bagian air

dapat dibuang. 10 gram simplisia kering daun sirih merah dan 200 ml toluen jenuh

air dimasukkan ke dalam labu. Labu dipanaskan selama 15 menit. Setelah toluen

mendidih, kecepatan penyulingan diatur lebih kurang 2 tetes tiap detik, hingga

sebagian besar air tersuling, kemudian kecepatan penyulingan dinaikan hingga 4

tetes tiap detik. Penyulingan dilanjutkan selama 5 menit, kemudian hasil

penyulingan didinginkan hingga air dan toluen memisah sempurna.

Pembuatan ekstrak metanol daun sirih merah

Tahapan maserasi dilakukan dengan cara merendam 10 g serbuk daun sirih

merah dalam 100 mL metanol selama 24 jam, dilakukan pengadukan dengan

bantuan shaker. Hasil maserasi disaring menggunakan corong buchner dan

didapatkan hasil berupa maserat. Serbuk hasil penyaringan direndam kembali

dengan 75mL metanol selama 24 jam. Remaserasi dilakukan sekali lagi dengan

merendam serbuk dalam 25mL metanol selama 24 jam. Setelah itu disaring

menggunakan corong buchner sehingga diperoleh maserat.

Maserat dari hasil pertama dan kedua kemudian diuapkan menggunakan

rotary evaporator pada suhu 65oC untuk menguapkan pelarut. Penguapan

kemudian dilanjutkan di atas waterbath dengan suhu 50-65oC hingga diperoleh

bobot tetap (Badan Pengawas Obat dan Makanan RI, 2010; Kusuma, 2016).


5

Pembuatan seri konsentrasi ekstrak metanol daun sirih merah

Larutan stok dibuat dengan melarutkan 400mg ekstrak kental ke dalam

DMSO 1% hingga volume 10mL, maka akan diperoleh konsentrasi larutan stok

40mg/mL. Dari larutan stok dilakukan pengenceran hingga didapat seri konsentrasi

20mg/mL, 10mg/mL dan 5mg/mL.

Pembuatan larutan uji antibiotik siprofloksasin

Larutan stok siprofloksasin dibuat dengan menggerus halus tablet

siprofloksasin 500mg kemudian disuspensikan ke dalam aquadest steril hingga

volume 10mL sehingga diperoleh konsentrasi 50mg/mL. Pengenceran dilakukan

kembali, hingga diperoleh konsentrasi akhir siprofloksasin 4µg/mL sebagai larutan

uji.

Penyiapan bakteri uji

Kultur bakteri Staphylococcus epidermidis diambil 1-2 ose dimasukkan

kedalam Nutrien Broth (NB) steril, kemudian dilakukan inkubasi selama 24 jam

pada suhu 37oC. Suspensi bakteri yang diperoleh kemudian disetarakan dengan Mc

Farland 0,5 menggunakan nephelometer.

Uji aktivitas antibakteri menggunakan metode sumuran

Media NA yang telah disterilkan dan masih dalam bentuk cair

ditambahkan suspensi bakteri sebanyak 1mL kemudian di-vortex, dituangkan ke

dalam petri kemudian didiamkan hingga memadat. Setelah padat dengan bantuan

pelubang sumuran dibuat sumuran pada media sebanyak 6 sumuran. Sumuran-

sumuran tersebut akan diisi antibiotik tunggal, ekstrak metanol daun sirih merah

tunggal, kombinasi antibiotik dan ekstrak, serta kontrol negatif yang berisi aquadest

steril, DMSO 1%, dan BPW.

Pada sumuran-sumuran tersebut kemudian diujikan 4µg/mL

siprofloksasin tunggal sebanyak 15µL, ekstrak metanol daun sirih merah 10mg/mL

sebanyak 15µL. Kombinasi antibiotik siprofloksasin 4µg/mL dan ekstrak metanol

daun sirih merah 5mg/mL, kombinasi antibiotik siprofloksasin 4µg/mL dan ekstrak

metanol daun sirih merah 10mg/mL, kombinasi antibiotik siprofloksasin 4µg/mL


6

dan ekstrak metanol daun sirih merah 20mg/mL dengan perbandingan 1:1

(15µL:15µL). Kontrol negatif digunakan aquadest steril, BPW, dan DMSO 1%

dengan volume masing-masing 10µL.

Dilakukan inkubasi selama 24 jam pada suhu 37oC. Setelah dilakukan

inkubasi dilakukan pengamatan dan pengukuran zona hambat. Pengukuran

diameter diukur secara vertikal dan horizontal yang masing-masing dikurangkan

diameter sumuran kemudian dicari rata-rata.

Uji fitokimia kombinasi dengan metode Kromatografi Lapis Tipis (KLT)

Plat KLT Silika Gel 60 F254 disiapkan, dipotong ukuran 7x13cm. Aktivasi

plat yang telah disiapkan dengan meletakkan plat dalam oven bersuhu 50oC selama

satu jam. Disiapkan fase gerak dalam chamber berupa etil asetat : toluen (9:1). Plat

yang telah diaktivasi kemudian ditotolkan standar dan larutan uji. Standar yang

digunakan adalah standar flavonoid (kuersetin). Larutan uji berupa ciprofloxacin

4µg/mL, ekstrak metanol daun sirih merah 10mg/mL, kombinasi 4µg/mL dan

ekstrak metanol daun sirih merah 5mg/mL, kombinasi 4µg/mL dan ekstrak metanol

daun sirih merah 10mg/mL, serta kombinasi 4µg/mL dan ekstrak metanol daun sirih

merah 20mg/mL.

Plat yang telah ditotol dengan larutan uji kemudian dielusi, jarak elusi dari

totolan sejauh 10cm. Plat lalu disemprot dengan FeCl3 untuk mempertegas bercak.

Letakkan dalam oven sekitar 1-2 menit. Bercak dilihat dibawah sinar UV 254 dan

365.

Uji Tabung

1. Uji Flavonoid

1mL larutan uji ditambahkan serbuk logam Mg 0,1g dan 5 tetes HCl

dilakukan dengan pemanasan, dalam 2-5 menit larutan akan berubah

warna menjadi warna merah (Hartini, 2016, MMI, 1979).

2. Uji Tanin

1mL larutan uji ditambahkan 1mL air, kemudian ditambahkan 2-3 FeCl

III. Warna biru kehitaman menunjukan adanya senyawa tanin (Hartini,

2016, Kursia, 2016).


7

3. Uji Alkaloid

5mL larutan uji ditambhakan HCl10% 2,5mL kemudian dimasukkan

dalam 2 tabung, tabung 1 ditetesi 3 tetes reagen Mayer dan tabung lain

sebagai pembanding. Terbentuknya endapan putih menunjukan adanya

alkaloid (Hartini, 2016, MMI, 1979).

4. Uji Saponin

2mL larutan uji, ditambahkan 2mL air kemudian dikocok selama 5 menit,

akan terbentuk buih setinggi 1-10cm menunjukan adanya saponin (Hartini,

2016, MMI, 1979).

5. Uji Minyak Atsiri

1mL larutan uji dimasukkan dalam cawan porselin, kemudian diuapkan

hingga diperoleh residu. Aroma khas yang tercium menandakan adanya

minyak atsiri (Ciulei, 1984).

Teknik Analisis Data

Data dianalis menggunakan uji Shapiro-Wilk untuk melihat distribusi

normalitas. Uji homogenitas varian menggunakan uji Levene, apabila data

terdistribusi normal dan homogen maka dilanjutkan dengan uji ANOVA One-way.

Bila ditemukan perbedaan, maka dilanjutkan dengan uji Post-Hoc Tukey pada taraf

kepercayaan 95%. Bila data tidak terdistribusi normal atau homogen maka diuji

menggunakan uji Kruskall Wallis, kemudian dilanjutkan uji Mann Whitney.

HASIL DAN PEMBAHASAN

Bahan utama dari penelitian ini adalah daun sirih merah yang diperoleh

dari daerah Sleman, Daerah Istimewa Yogyakarta. Sebagai pembuktian kebenaran

bahan yang digunakan, dilakukan determinasi. Hasil determinasi membuktikan

bahwa tanaman yang digunakan dalam penelitian ini adalah Piper crocatum Ruiz

& Pav. Daun sirih merah yang telah dikumpulkan dilakukan sortasi basah untuk

memisahkan daun dari pengotor lain, kemudian daun dicuci dengan air mengalir,

dikeringkan menggunakan oven pada suhu 40oC, kemudian diserbuk dan diayak

dengan ayakan no. 50. Setelah diayak, dilakukan pengujian kadar air dengan


8

metode destilasi toluena. Tujuan dilakukan pengukuran kadar air ini untuk

mengetahui besarnya kadar air yang terkandung dalam serbuk sirih merah. Kadar

air yang baik yang diperbolehkan yaitu kurang dari 10% (Dirjen POM, 1995).

Kadar air sirih merah yang diperoleh dari hasil penelitian ini adalah 4,89% ini sudah

sesuai dengan peraturan yang ada.

Ekstrak metanol daun sirih merah dibuat dengan metode maserasi. Serbuk

sirih merah direndam dengan metanol selama 24 jam. Kemudian hasil rendaman

disaring dan dilakukan remaserasi selama 24 jam. Remaserasi dilakukan sebanyak

2 kali. Hasil filtrasi kemudian diuapkan dengan bantuan rotary evaporator dan

dilanjutkan dengan waterbath hingga diperoleh ekstrak kental dengan bobot tetap.

Ekstrak kental yang diperoleh pada penelitian ini yaitu sebesar 12, 5453g dari berat

awal serbuk yang dimaserasi 60, 9073g. Rendemen ekstrak dihitung, yaitu sebesar

20,60%. Nilai rendemen ini menggambarkan banyaknya senyawa metabolit yang

tersari dan keefektifan metode ekstaksi (Wijaya, 2018).

Uji aktivitas antibakteri diawali dengan uji difusi sumuran pada media

Nutrien Agar untuk mengetahui apakah siprofloksasin dan ekstrak metanol daun

sirih merah mampu menghambat pertumbuhan. Kontrol media dibuat untuk

memastikan media yang digunakan tidak terkontaminasi dan kontrol pertumbuhan

bakteri untuk memastikan bakteri Staphylococcus epidermidis dapat tumbuh baik

pada media NA. Kontrol negatif berisi DMSO 1%, aquadest steril, BPW. Kontrol

negatif dibuat untuk memastikan bahwa pelarut-pelarut yang digunakan tersebut

tidak memberikan efek antibakteri pada perlakuan ini.

(a) (b)

Gambar 1. (a) Kontrol Media, (b) Kontol Pertumbuhan


9

Uji aktivitas aktibakteri dengan metode difusi sumuran menunjukan zona

hambat yang berupa daerah jernih disekitar sumuran. Uji aktivitas ini dilakukan

replikasi sebanyak tiga kali. Zona hambat yang terbentuk diukur menggunakan

penggaris, baik secara vertikal maupun horizontal.

Gambar 2. Hasil uji sumuran aktifitas antibakteri siprofloksasin dan EMDSM

Keterangan : A = Siprofloksasin 4µg/mL, B = EMDSM 10mg/mL, C =

Siprofloksasin 4µg/mL dan EMDSM 20mg/mL, D = Siprofloksasin 4µg/mL dan

EMDSM 10mg/mL, E = Siprofloksasin 4µg/mL dan EMDSM 5mg/mL, F = kontrol

negatif.

Hasil pengukuran zona hambat uji aktivitas antibakteri kombinasi

siprofloksasin dan ekstrak metanol daun sirih merah disajikan dalam Tabel I.

Tabel I. Hasil pengukuran zona hambat (dalam milimeter) aktifitas antibakteri

siprofloksasin dan EMDSM

Replikasi A B C D E F

I 10 7,5 10 6,5 6 0

II 10,5 7 8 7 7 0

III 10 7 8,5 7 7 0

Mean ±

SD

10,17±0,29 7,17±0,29 8,83±1,04 6,83±0,29 6,67±0,58 0



EMDSM 10mg/mL, E = Siprofloksasin 4µg/mL dan EMDSM 5mg/mL, F = kontrol

negatif.

A

B

C D

E

F


10

Menurut penelitian Nopiyanti et al (2016) aktivitas antibakteri

berdasarkan zona hambatnya digolongkan menjadi sangat kuat (>20mm), kuat (10-

20mm), sedang (5-10mm), dan lemah (<5mm). Berdasarkan hal tersebut zona

hambat yang terbentuk termasuk kategori sedang. Hasil tersebut juga menunjukan

bahwa siprofloksasinmemiliki daya antibakteri paling poten dibanding dengan

larutan uji lain. Kontrol negatif tidak menunjukan adanya zona hambat berarti

membuktikan bahwa pelarut DMSO 1% yang digunakan untuk mengencerkan

ekstrak dan aquadest steril untuk mengencerkan siprofloksasin tidak memberikan

aktivitas antibakteri. Hasil dalam kombinasi memiliki zona hambat yang lebih kecil

jika dibanding siprofloksasin tunggal. Hal ini berarti kombinasi yang dilakukan

tidak meningkatkan aktivitas antibakteri pada siprofloksasin.

Efek sinergis didefinisikan sebagai interaksi positif yang terbentuk dari

dua agen yang dikombinasi dan menghasilkan efek penghambatan lebih baik

dibanding agen tunggal (Sharma and Kaur, 2014). Efek sinergis tidak terjadi

mungkin karena adanya kesamaan target aksi antara siprofloksasin dan flavonoid

sebagai salah satu komponen yang diduga memiliki aktivitas antibakteri.

Siprofloksasin memiliki target aksi pada topoisomerase II (Fabrega et al, 2009).

Menurut Chung et al (2011), kombinasi akan berefek sinergis bila memiliki tempat

aksi yang berbeda. Basri et al (2014) juga menyebutkan bahwa kombinasi

antimikroba akan berefek sinergis bila bekerja pada lokasi yang berbeda. Penelitian

yang dilakukan Jayaraman et al (2010) pada bakteri Pseudomonas aeruginosa

menyebutkan siprofloksasin bila dikombinasi dengan beberapa senyawa tanaman

seperti kuersetin dan myricetin dapat menimbulkan efek indifferent yaitu apabila

efek kombinasi sama dengan efek tunggal.

Data hasil uji sumuran dilakukan uji homogenitas dengan uji levene

menunjukan hasil yang tidak homogen karena p-value 0,008 (<0,05). Setelah itu

dilakukan uji normalitas dengan Saphiro Wilk menunjukan hanya data pada larutan

uji siprofloksasin 4µg/mL dan EMDSM 20mg/mL adalah data normal karena p-

value 0,463 (>0,05). Maka uji yang digunakan adalah uji Kruskal Walliss karena

data tidak terdistribusi homogen. Pada uji Kruskall Waliss diperoleh hasil terdapat


11

perbedaan karena p-value diperoleh 0,008 (<0,05). Untuk melihat kebermaknaan

dilanjutkan uji Mann Whitney.

Tabel II. Hasil Uji Mann Whitney

Perlakuan p-value Makna

Larutan A Larutan B 0,043 Berbeda bermakna

Larutan C 0,105 Tidak berbeda bermakna

Larutan D 0,043 Berbeda bermakna

Larutan E 0,043 Berbeda bermakna

Larutan F 0,034 Berbeda bermakna

Larutan B Larutan C 0,046 Berbeda bermakna

Larutan D 0,197 Tidak berbeda bermakna

Larutan E 0,197 Tidak berbeda bermakna


Larutan C Larutan D 0,046 Berbeda bermakna

Larutan E 0,046 Berbeda bermakna


Larutan D Larutan E 0,796 Tidak berbeda bermakna


Larutan E Larutan F 0,034 Berbeda bermakna

Keterangan : A = Ciprofloxacin 4µg/mL, B = EMDSM

10mg/mL, C = Ciprofloxacin 4µg/mL dan EMDSM

20mg/mL, D = Ciprofloxacin 4µg/mL dan EMDSM

10mg/mL, E = Ciprofloxacin 4µg/mL dan EMDSM

5mg/mL, F = kontrol negatif.

Hasil pada uji statistik pada larutan A yang berisi siprofloksasin tunggal

dibanding larutan C yang berisi kombinasi siprofloksasin dan EMDSM 80mg/mL

menunjukan tidak berbeda bermakna. Hal ini berarti kombinasi tersebut memiliki

kemampuan yang sama dalam menghambat pertumbuhan bakteri dengan

siprofloksasin tunggal. Sama dengan yang terjadi pada larutan B dibanding larutan

D, larutan B dibanding dengan larutan E dan larutan D dibanding larutan E. Efek

antibakteri yang dihasilkan dianggap memiliki kemampuan yang sama dalam

menghambat pertumbuhan bakteri. Pada perbandingan lain, hasil berbeda

bermakna berarti kemampuan menghambat pertumbuhan bakteri yang dihasilkan

lebih lemah dibanding tunggal.


12

Zat dalam sirih merah yang diduga memiliki aktivitas antibakteri adalah

flavonoid, alkaloid, minyak atsiri dan tanin (Herryawan and Sabirin, 2018). Target

flavonoid dalam menghambat pertumbuhan bakteri dengan menghambat DNA

topoisomerase II (Shuchi et al, 2016). Alkaloid memiliki aktivitas menghambat

pertumbuhan bakteri dengan mengganggu pembentukan peptidoglikan sel bakteri,

sehingga dinding sel bakteri tidak terbentuk sempurna (Herryawan and Sabirin,

2018). Minyak atsiri sendiri memiliki mekanisme menghambat pembentukan

membran plasma atau dinding sel bakteri, sehingga pembentukannya tidak

sempurna (Herryawan and Sabirin, 2018). Mekanisme tanin yaitu penghambatan

enzim ekstraseluler, menghambat metabolisme dengan penghambatan dari

oxidative phosphorylation (Scalbert, 1991).

Pengujian dilanjutkan dengan uji KLT dan uji tabung untuk melihat

apakah senyawa yang diduga sebagai antibakteri terdeteksi dalam larutan uji.

(a) (b) (c)

Gambar 3. Hasil KLT (a) detektor UV 254, (b) detektor UV 365,

(c) penyemprotan FeCl3

Keterangan : A = standar flavonoid (kuersetin), B= Siprofloksasin 4µg/mL, C =

EMDSM 10mg/mL, D = Siprofloksasin 4µg/mL dan EMDSM 5mg/mL, E =

Siprofloksasin 4µg/mL dan EMDSM 10mg/mL, F = Siprofloksasin 4µg/mL dan

EMDSM 20mg/mL, Fase diam = Silika Gel 60 F254, Fase Gerak = etil asetat : toluen

(9:1), jarak elusi = 10cm, pereaksi semprot = FeCl3.


13

Tabel III. Nilai Rf dan warna bercak hasil KLT

Sampel No Deteksi UV 254 Deteksi UV 365 Penyemprotan FeCl3

Rf (cm) Warna Rf (cm) Warna Rf (cm) Warna

A 1 0,68 coklat 0,68 biru-

ungu

0,68 kehitaman

B - - - - - - -

C 1 0,4 coklat 0,4 ungu 0,4 coklat

2 0,62 biru-ungu - - - -

3 0,7 biru-ungu - - 0,79 hijau tua

4 0,79 hijau-

kuning

0,79 ungu-

merah

- -

D 1 0,42 coklat 0,42 ungu 0,42 coklat

2 0,62 biru-ungu 0,62 biru 0,72 Kehitaman

3 0,7 biru-ungu 0,72 ungu 0,79 hijau tua

4 0,79 hijau-

kuning

0,79 ungu-

merah

- -

E 1 0,42 coklat 0,42 ungu 0,42 coklat

2 0,62 biru-ungu 0,62 biru 0,72 kehitaman


4 0,79 hijau-

kuning

0,79 ungu-

merah

- -

F 1 0,46 coklat 0,46 ungu 0,46 coklat

2 0,62 biru-ungu 0,62 biru 0,72 kehitaman


4 0,79 hijau-

kuning

0,79 ungu-

merah

- -

Keterangan : A = standar flavonoid (kuersetin), B= Siprofloksasin 4µg/mL, C =

EMDSM 10mg/mL, D = Siprofloksasin 4µg/mL dan EMDSM 5mg/mL, E =

Siprofloksasin 4µg/mL dan EMDSM 10mg/mL, F = Siprofloksasin 4µg/mL dan

EMDSM 20mg/mL

Hasil KLT pada pengamatan dibawah UV 254 dan 365 menunjukan

flavonoid (kuersetin) tidak tampak pada kombinasi, maupun EMDSM tunggal

karena perbedaan warna bercak yang dihasilkan dan Rf yang tidak identik. Warna

pada standar menunjukan warna coklat dan pada perlakuan menunjukan warna

hijau kekuningan. Warna hasil KLT pada deteksi dibawah sinar UV 254

menunjukan warna kekuningan menunjukan adanya flavonoid (Skorek et al, 2016).

Warna hasil KLT pada deteksi dibawah sinar UV 365 menunjukan warna


14

kemerahan yang menunjukan adanya klorofil (Wagner et al, 1983). Warna ungu

yang ditunjukkan dibawah sinar UV 365 menunjukan adanya flavonoid

(Dwiatmaka, 2010). Pada penelitian Susanti dkk (2017) menunjukan identifikasi

senyawa fenol menunjukan hasil positif berwana kehitaman setelah dilakukan

penyemprotan dengan FeCl3, karena bersifat oksidator.

Tabel III. Hasil uji tabung

A B C D E

Alkaloid - √ √ √ √

Flavonoid - √ √ √ √

Tanin - √ √ √ √

Saponin - - - - -

Minyak atsiri - √ √ √ √



EMDSM 10mg/mL, E = Siprofloksasin 4µg/mL dan EMDSM 20mg/mL.

Hasil pada uji tabung menunjukan terdeteksinya alkaloid, flavonoid, tanin

dan minyak atsiri. Hasil uji tabung flavonoid sedikit berbeda dengan KLT, ini

mungkin terjadi karena standar flavonoid yang digunakan berbeda dengan senyawa

yang terdapat dalam EMDSM. Kadar senyawa yang kecil juga mungkin

meyebabkan tidak terdeteksinya senyawa yang dimaksud.

Dalam kombinasi terdeteksi zat lain yang memiliki aktivitas lain sebagai

antibakteri dengan mekanisme yang berlainan dengan siprofloksasin, tetapi hasil

tetap tidak sinergis. Hal ini mungkin terjadi karena kadar zat tersebut kecil,

sehingga efek antibakteri yang dihasilkan juga kecil. Tanaman juga memiliki

senyawa aktif yang kompleks, sehingga sulit menilai kontribusi masing-masing

komponen dan sulit mengevaluasi adanya interaksi (Williamson et al, 2009).


15

KESIMPULAN DAN SARAN

Diameter zona hambat siprofloksasin tunggal 10,17±0,29mm; EMDSM

tunggal 7,17±0,29; kombinasi siprofloksasin 4µg/mL dan EMDSM 20 mg/mL,

10mg/mL, 5mg/mL berturut-turut adalah 8,83±1,04mm; 6,83±0,29mm;

6,67±0,58mm. Hasil kombinasi siprofloksasin dengan EMDSM lebih lemah

dibanding bahan tunggalnya. Hasil uji fitokimia didapatkan bahwa dalam

kombinasi tersebut masih terdeteksi senyawa yang diduga memiliki aktivitas

antibakteri yaitu alkaloid, flavonoid, tanin dan minyak atsiri.

Saran untuk penelitian selanjutnya yaitu perlu dilakukan perbandingan

volume pada kombinasi dan penambahan seri konsentrasi antibiotik maupun

ekstrak.


16

DAFTAR PUSTAKA

Adwan, G., and Mhanma M., 2008, Synergistic Effect of Plant Extracts and

Antibiotics on Staphylococcus aureus Strains Isolated from Clinical

Specimens. Middle-East Journal of Scientific Reasearch., 3(3), 134-139.

Aiyegoro, O.A., Okoh, A.I., 2009. Use of bioactive plant products in combination

with standard antibiotics: Implications in antimicrobial chemotherapy. Journal

of Medicinal Plants Research., 3(13), 1147-1152.

Anonim, 2011. Peraturan Menteri Kesehatan Republik Indonesia tentang Pedoman

Umum Penggunaan Antibiotik, Jakarta : Kementrian Kesehatan Republik

Indonesia, 2.

Badan Pengawas Obat dan Makanan RI, 2010. Acuan Sediaan Herbal. Volume 5,

Edisi 1, Jakarta: Badan Pengawas Obat dan Makanan, 6-8.

Basri, D.F., Xian, L. W., Abdul Shukor, N.I., and Latip, J., 2014, Bacteriostatic

Antimicrobial Combination: Antagonistic Interaction Between Epsilon-

Viniferin and Vancomycin Against Methicillin-Resistant Staphylococcus

aureus. BioMed Research Internasional., 2014.

Brooks, G.F., Carroll, K.C., Butel, J., Morse, S.A., and Mietzner, T., 2013. Medical

Microbiology. Jawetz, Melnick, & Adelberg’s Medical Microbiology.

Centers for Disease Control and Prevention, 2013. Antibiotic Resistance Threats in

the United States. United State. CDC (online),

http://www.cdc.gov/drugresistance/threat-report-2013 accessed 3 April 2018.

Central for Disease Control and Prevention, 2015. Infectious Disease, United State.

CDC (online), https://www.cdc.gov/nchs/fastats/infectious-disease.htm,

diunduh 22 Juni 2018

Chung, P.Y, Navaratnam, P., Chung, L.Y., 2011. Synergistic antimicrobial activity

between pentacyclic triterpenoids and antibiotics against Staphylococcus

aureus strain. Annals of Clinical Microbiology and Antimicrobials., 10(25), 1-

4.

Ciulei, I., 1984. Methodology for Analysis of Vegetable Drugs. Bucharest: Faculty

of Pharmacy, 11-26.


http://www.cdc.gov/drugresistance/threat-report-2013%20accessed%203%20April%202018

17

Departemen Kesehatan RI, 2000. Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan

Obat. Cetakan 1, Jakarta: Departemen Kesehatan RI, 9-12.

Departemen Kesehatan RI, 2014. Farmakope Indonesi edisi V. Jakarta: Departemen

Kesehatan RI, 42.

Direktorat Jendral Bina Kefarmasian Kefarmasian dan Alat Kesehatan RI, 2011.

Farmakope Herbal. Suplemen II. Edisi I, Jakarta: Kementerian Kesehatan RI,

110-111.

Dwiatmaka, Y., 2010. Identifikasi Flavonoid Herba Pegagan (Hydrocotyle

sibthotpioides Lmk.) Hasil Isolasi Secara KLTP serta Uji Kemurniannya

Dengan HPLC. SIGMA., 13(2), 167-177.

Fabrega, A., Madurga, S., Girait, E., and Vila, J., 2009. Mechanism of Action of

and Resistance to Quinolones., Microbial Biotechnology, 2(1), 40-61.

Farida, H., Herawati, Hapsari, MM., Notoatmodjo, H., Hardian, 2008. Penggunaan

Antibiotik Secara Bijak Untuk Mengurangi resistensi Antibiotik, Studi

Intervensi di Bagian Kesehatan Anak RS Dr. Kariadi. Sari Pediatri., 10(1), 34-

41.

Handayani, R.S., Siahaan, S., Herman, M.J., 2017. Antimicrobial Resistance and

Its Contro Policy Implementation in Hospital in Indonesia. Jurnal Penelitian

dan Pengembangan Pelayanan Masyarakat, 4(2), 131-140.

Haroun, M.F., and Al-Kayali, R.S., 2016,Synergistic effect of Thymbra spicata L.

Extracts with antibiotics against multidrug-resistant Staphylococcus aureus

and Klebsiella pneumoniae strains. Iranian Journal of Basic Medical Sciences.,

19(11), 1193-1200.

Hartini, Y.S., Wahyuono, S., Widyarini, S., dan Yuswanto, A., 2013, Uji Aktivitas

Fagositosis Makrofag Fraksi-Fraksi dari Ekstrak Metanol Daun Sirih Merah

(Piper crocatum Ruiz & Pav.) Secara In Vitro. Jurnal Ilmu Kefarmasian

Indonesia., 11(2), 108-115.

Herryawan and Sabirin, I.P.R., 2018. The Effectiveness of Red Betel leaf (Piper

crocatum) Extract Against Periodontal Patogens. Bali Medical Journal (Bali

Med J), 7(3), 732-735.


18

Hitchings, A., Lonsdale, D., Burrage, D., Baker, E., 2015. The Top 100 Drugs

Clinical Pharmacology and Practical Prescribing. China, Elsevier, 194-195.

Jayaraman, P., Sakharkar, M.K., Lim, C.S., Tang, T.H., and Sakharkar, K.R., 2010,

Activity and Interaction of Antibiotic and Phytochemical Combination Against

Pseudomonas aeruginosa in vitro, International Journal of Biological

Sciences., 6(6), 556-569.

Kursia, S., Lebang, J.S., Taebe, B., Burhan, A., Rahim, W.O.R., dan Nursamsiar,

2016. Ujiaktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Sirih Hijau (Piper betle L.)

terhadap Bakteri Staphylococcus epidermidis. IJPST., 3(2),72-77.

Kusuma, S.A.F., Zuhrotun, A., Meidina, FB., 2016. Antibacterial Spectrum of

Ethanol Extract of Indonesian Red Piper Betel Leaf (Piper crocatum Ruiz &

Pav) Against Staphylococcus species. International Journal of Pharma

Sciences and Research, 7(11), 448-452.

Menteri Kesehatan Republik Indonesia, 1979. Materia Medika Indonesia. Jilid III,

Jakarta : Departemen Kesehatan Republik Indonesia, 167-171.

Mohammed, M., Mohammed, A.H., Mirza, M.A.B., Ghori, A., 2014. Nosocomial

Infection : An Overview. Internasional Researc Journal Of Pharmacy., 5(1),

7-12.

Nopiyanti, H.T., Agustriani, F., Isnaini., Melki., 2016, Screening of Nypa Fructions

as Antibacterial of Bacillus subtilis, E. Coli, and S. aureus, Journal Maspori.,

8(2), 83-90.

Otto, M., 2009, Staphylococcus epidermidis The Accidental Pathogen, Nat. Rev.

Microbio.l, 7(8), 555-567.

Rinanda, T., Zulfitri, Alga, D.M., 2012. Antibacterial Activity of Red Betel (Piper

crocatum) Leaf Methanolic Extracts Aginst Methicillin Resistent

Staphylococcus aureus. In : Proceedings of The 2nd Annual Internasional

Conference Syiah Kuala University 2012 & The 8th IMT-GT Biosciences

Conference, Banda Aceh 2012. 270-275.

Scalbert, A., 1991. Antimicrobial Properties of Tannins, Phytochemistry., 30(12),

3875-3883.


19

Sharma, V., and Kaur, K., 2014. Identification and Characterization of

Medicicanally Important Plants of Kangra valey with Synergistic Effects of

Traditional Antibiotics Against Microbial Infection., The Journal of

Phytopharmacology, 3(2), 102-112.

Shuchi, A., Bhone, M.K., and Chu, S.L., 2016. Combination Antibiotic-

Phytochemical Effect on Resistance Adaptation in Staphylococcus aureus.,

African Journal of Microbiology Research, 10(46), 1973-1982.

Skorek, M., Jurczyk, K., Sajewicz, M., and Kowalska, T., 2016. Tin -Layer

Chromatograpic Identification of Flavonoids and Phenolic Acids Contained in

Cosmetic Raw Materials. Journal of Liquid Chromatography & Related

Technologies., 39(5-6), 286-291.

Susanti, N.M.P., Dewi, L.P.M.K., Manurung, H.S., dan Wirasuta, I.M.A.G., 2017.

Identifikasi Senyawa Golongan Fenol Dari Ekstrak Etanol Daun Sirih (Piper

betle Linn.) dengan Metode KLT-Spektrofotodensitometri. Jurnal Metafora

Journal of Biological Sciences., IV(1), 108-113.

Wagner, H., Bladt, S., and Zgainski, E.M., 1983. Plant Drug Analysis, A Thin Layer

Chromatography Atlas. 2nd edition. Berlin : Springer Verlag, 90.

Wijaya, H., Novitasari, dan Jubaidah S., 2018. Perbandingan Metode Ekstrasi

Terhadap Rendemen Ekstrak Daun Rambai Laut (Sonneratia caseolaris L.

Engl), Jurnal Ilmiah Manuntung., 4(1) 79-83.

Williamson, E., Samuel, D., Karen, B., 2009. Stockley’s Herbal Medicine

Interaction. USA: Pharmaceutical Press, 6.


20

LAMPIRAN

Lampiran 1. Surat Determinasi Tanaman (Daun Sirih Merah)


21

Lampiran 2. Sertifikat Hasil Uji Staphylococcus epidermidis


22

Lampiran 3. Sertifikat uji statistik dengan SPSS


23

Lampiran 4. Hasil perhitungan statistik uji aktivitas antibakteri metode sumuran

Uji Levene

Test of Homogeneity of Variances

Levene Statistic df1 df2 Sig.

5,323 5 12 ,008

Uji Shapiro Wilk

Tests of Normalityb

Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk

Statistic df Sig. Statistic df Sig.

Larutan A ,385 3 . ,750 3 ,000

Larutan B ,385 3 . ,750 3 ,000

Larutan C ,292 3 . ,923 3 ,463

Larutan D ,385 3 . ,750 3 ,000

Larutan E ,385 3 . ,750 3 ,000

a. Lilliefors Significance Correction

b. Larutan F is constant. It has been omitted.

Uji Kruskal Walliss

Test Statisticsa,b

Diameter

Sumuran (mm)

Chi-Square 15,635

df 5

Asymp. Sig. ,008

a. Kruskal Wallis Test

b. Grouping Variable: Larutan

Uji


24

Uji Mann Whitney

Test Statisticsa

Diameter

Sumuran

Mann-Whitney U ,000

Wilcoxon W 6,000

Z -2,023

Asymp. Sig. (2-tailed) ,043

Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] ,100b

a. Grouping Variable: Larutan Uji

b. Not corrected for ties.

Test Statisticsa

Diameter

Sumuran

Mann-Whitney U 1,000

Wilcoxon W 7,000

Z -1,623





Test Statisticsa

Diameter

Sumuran

Mann-Whitney U ,000

Wilcoxon W 6,000

Z -2,023





Test Statisticsa

Diameter

Sumuran

Mann-Whitney U ,000

Wilcoxon W 6,000

Z -2,023





Test Statisticsa

Diameter

Sumuran

Mann-Whitney U ,000

Wilcoxon W 6,000

Z -2,121




Test Statisticsa

Diameter

Sumuran

Mann-Whitney U ,000

Wilcoxon W 6,000

Z -1,993





25



Test Statisticsa

Diameter

Sumuran


Wilcoxon W 8,000

Z -1,291





Test Statisticsa

Diameter

Sumuran


Wilcoxon W 8,000

Z -1,291





Test Statisticsa

Diameter

Sumuran

Mann-Whitney U ,000

Wilcoxon W 6,000

Z -2,121





Test Statisticsa

Diameter

Sumuran

Mann-Whitney U ,000

Wilcoxon W 6,000

Z -1,993





Test Statisticsa

Diameter

Sumuran

Mann-Whitney U ,000

Wilcoxon W 6,000

Z -1,993


Test Statisticsa

Diameter

Sumuran

Mann-Whitney U ,000

Wilcoxon W 6,000

Z -2,087



26







Test Statisticsa

Diameter

Sumuran


Wilcoxon W 10,000

Z -,258


Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] 1,000b



Test Statisticsa

Diameter

Sumuran

Mann-Whitney U ,000

Wilcoxon W 6,000

Z -2,121





Test Statisticsa

Diameter

Sumuran

Mann-Whitney U ,000

Wilcoxon W 6,000

Z -2,121






27

Lampiran 5. Hasil Uji Tabung

1. Uji Flavonoid

A = Ciprofloxacin 4µg/mL, B = EMDSM 10mg/mL, C = Ciprofloxacin

4µg/mL dan EMDSM 5mg/mL, D = Ciprofloxacin 4µg/mL dan EMDSM

10mg/mL, E = Ciprofloxacin 4µg/mL dan EMDSM 20mg/mL.

2. Uji Alkaloid




3. Uji Tanin




A B C D E

A B C D E

A B C D E


28

4. Uji Saponin




5. Uji Minyak Atsiri

A = EMDSM 10mg/mL, B = Ciprofloxacin 4µg/mL dan EMDSM

5mg/mL, C = Ciprofloxacin 4µg/mL dan EMDSM 10mg/mL, D =

Ciprofloxacin 4µg/mL dan EMDSM 20mg/mL.

A B C D E

A B

C D


29

BIOGRAFI PENULIS

Penulis bernama lengkap Alamanda Febriani, lahir di

Semarang, 14 Februari 1997. Penulis yang akrab dipanggil

Manda merupakan anak kedua dari dua bersaudara pasangan

Mulyono dan Winarni. Penulis menempuh pendidikan di TK

Pelita Hati (2001-2003), SD Kristen Gergaji (2003-2009), SMP

Negeri 7 Semarsang (2009-2012), SMK Farmasi Theresiana

Semarang (2012-2015), dan pada tahun 2015 melanjutkan

pendidikan di Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma.

Selama berkuliah di Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma penulis

aktif mengikuti kegiatan kemahasiswaan diantaranya panitia pelepasan wisuda

divisi acara (2016 dan 2017), panitia malam kearaban JMKI divisi dana dan usaha

(2017), panitia OsteoDay divisi dana dan usaha (2017), menjadi peserta dalam

perlombaan Patient Counseling Competition-Pharmacy Festival yang diadakan

Universitas Indonesia tahun 2017, peserta Patient Counseling Event-Pharmacy on

Innovation yang diadakan Institut Teknologi Bandung tahun 2017. Penulis juga

mengikuti Program Kreativitas Mahasiswa yang berhasil didanai oleh Kementrian

RISTEKDIKTI tahun 2018. Penulis juga menjadi asisten dosen pada praktikum

Botani Farmasi (2016 dan 2017).


UJI EFEK KOMBINASI SIPROFLOKSASIN DENGAN EKSTRAK...

Documents

Transcript of UJI EFEK KOMBINASI SIPROFLOKSASIN DENGAN EKSTRAK...