UJI AKTIVITAS ANTIHIPERURISEMIA EKSTRAK ETANOL, FRAKSI ...repository.ump.ac.id/9044/1/COVER.pdf ·...
Transcript of UJI AKTIVITAS ANTIHIPERURISEMIA EKSTRAK ETANOL, FRAKSI ...repository.ump.ac.id/9044/1/COVER.pdf ·...
i
UJI AKTIVITAS ANTIHIPERURISEMIA EKSTRAK ETANOL, FRAKSI
ETIL ASETAT DAN FRAKSI DIKLORMETAN DAUN LEUNCA (Solanum
nigrum L.) DENGAN METODE SPEKTROFOTOMETRI UV-VIS
SKRIPSI
Skripsi ini diajukan sebagai salah satu syarat
untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi
WAHYU WAHIDATUN SHOLIHAH
1408010165
PROGRAM STUDI FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO
SEPTEMBER 2018
Uji Aktivitas Antihiperurisemia... Wahyu Wahidatun Sholihah, Fakultas Farmasi UMP, 2018
ii
Uji Aktivitas Antihiperurisemia... Wahyu Wahidatun Sholihah, Fakultas Farmasi UMP, 2018
iii
Uji Aktivitas Antihiperurisemia... Wahyu Wahidatun Sholihah, Fakultas Farmasi UMP, 2018
iv
Uji Aktivitas Antihiperurisemia... Wahyu Wahidatun Sholihah, Fakultas Farmasi UMP, 2018
v
KATA PENGANTAR
Puji syukur kepada Tuhan Yang Maha Esa, karena atas berkat dan rahmat-
Nya, dapat menyelesaikan skripsi ini dengan judul Uji Aktivitas Antihiperurisemia
Ekstrak Etanol, Fraksi Etil Asetat dan Fraksi Diklormetan Daun Leunca (Solanum
nigrum L.) dengan Metode Spektrofotometri UV-VIS. Penulisan skripsi ini
dilakukan dalam rangka memenuhi salah satu syarat untuk mencapai gelar Sarjana
Farmasi pada Program Studi S1 Farmasi Fakultas Farmasi Universitas
Muhammadiyah Purwokerto.
Penulis menyadari bahwa tanpa bantuan dan bimbingan dari berbagai pihak,
dari masa perkuliahan sampai pada penyusunan skripsi ini, penulis tidak dapat
menyelesaikan skripsi ini dengan baik. Oleh karena itu, pada kesempatan ini penulis
mengucapkan terima kasih kepada yang terhormat:
1) Dr. H. Syamsuhadi Irsyad, SH., M.H., selaku Rektor Universitas
Muhammadiyah Purwokerto.
2) Dr. Agus Siswanto, M.Si., Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas
Muhammadiyah Purwokerto yang telah memimpin keseluruhan proses
mengajar ditempat penulis menuntut ilmu.
3) Wahyu Utaminingrum, M.Si., Apt., selaku Ketua Program Studi Sarjana
Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto yang telah memberi
berbagai informasi dan bimbingan tentang tata laksana penyusunan skripsi.
4) Dr. Diniatik, M.Sc., Apt., dan Zainur Rahman Hakim, M.Farm., Apt., selaku
pembimbing yang telah memberikan bimbingan dan arahan kepada penulis
serta memberikan koreksi dan masukan yang sangat berguna dalam
menyelesaikan skripsi ini.
5) Segenap staf pengajar Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah
Purwokerto yang telah memberikan ilmunya sehingga membantu penulis
dalam menyelesaikan skripsi ini.
6) Laboran Biologi Farmasi dan Kimia Analisis Fakultas Farmasi Universitas
Muhammadiyah Purwokerto yang telah membantu selama penelitian.
Uji Aktivitas Antihiperurisemia... Wahyu Wahidatun Sholihah, Fakultas Farmasi UMP, 2018
vi
Uji Aktivitas Antihiperurisemia... Wahyu Wahidatun Sholihah, Fakultas Farmasi UMP, 2018
vii
PERSEMBAHAN
Alhamdulillah, puji syukur kepada Alloh SWT atas berkat dan rahmat-Nya
sehingga skripsi ini dapat terselesaikan dengan baik. Skripsi ini akan saya
persembahkan kepada :
Kedua orang tuaku tercinta, Bapak Solihudin dan Ibu Nurkhayati yang tak pernah
lelah membesarkanku dengan penuh kasih sayang, selalu memberikan dukungan,
motivasi, dan nasehat. Terima kasih atas kasih sayang dan do’a yang selalu
tercurah untuk anakmu.
Adik-adikku, Wahyu Siddiqotul Muflihah dan M. Yusuf A. Shidqi terima kasih
atas dukungan, semangat dan do’a untuk kesuksesan kakakmu ini.
Teman seperjuanganku Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto
angkatan 2014 yang telah menjadi keluarga besar. Terima kasih telah memberi
keceriaan, kekompakan, dukungan dan motivasi.
Teman seperjuangan skripsi yaitu Intan, Meta dan Desi yang selalu bersama
ketika penelitian. Terima kasih kebersamaan, dukungan, motivasi dan bantuannya.
Sahabatku yaitu Elma dan Ayu yang selalu memberi semangat, dukungan serta
canda tawa bersama yang kalian berikan. Terimakasih telah menjadi sahabatku.
Khamdan yuwafi yang selalu menjadi tempat keluh kesah, menyemangatiku,
memberikan motivasi dan dukungan disetiap suka dan duka.
Teman-temanku di Pondok Pesantren Al-Amien Purwokerto Wetan yang telah
memberikan pengalaman dalam susah, suka dan duka yang telah dilalui.
Uji Aktivitas Antihiperurisemia... Wahyu Wahidatun Sholihah, Fakultas Farmasi UMP, 2018
viii
RIWAYAT HIDUP
Nama : Wahyu Wahidatun Sholihah
NIM / Angkatan : 1408010165 / 2014
Tempat, Tanggal Lahir : Cilacap, 29 Januari 1997
Jenis Kelamin : Perempuan
Agama : Islam
Alamat : Jalan Ahmad Yani RT 01 / RW 08 Gandrungmanis,
Gandrungmangu, Cilacap
Pendidikan
1. TK / Tahun Lulus : TK MASYITOH Gandrungmanis / 2001
2. SD / Tahun Lulus : SD N Gandrungmanis 02 / 2008
3. SMP / Tahun Lulus : SMP N SATU ATAP 1 Gandrungmangu / 2011
4. SMA / Tahun Lulus : SMA N 1 MAOS / 2014
5. Perguruan Tinggi : UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH
PURWOKERTO (Angkatan 2014)
Uji Aktivitas Antihiperurisemia... Wahyu Wahidatun Sholihah, Fakultas Farmasi UMP, 2018
ix
MOTTO
Jika kita kalah dengan KESABARAN, maka KEEGOISAN lah yang akan menguasai diri kita
BERSABARLAH dengan apa yang telah menjadi kuasa-Nya
(Hamba Allah)
Uji Aktivitas Antihiperurisemia... Wahyu Wahidatun Sholihah, Fakultas Farmasi UMP, 2018
x
Uji Aktivitas Antihiperurisemia... Wahyu Wahidatun Sholihah, Fakultas Farmasi UMP, 2018
xi
UJI AKTIVITAS ANTIHIPERURISEMIA EKSTRAK ETANOL, FRAKSI
ETIL ASETAT DAN FRAKSI DIKLORMETAN DAUN LEUNCA (Solanum
nigrum L.) DENGAN METODE SPEKTROFOTOMETRI UV-VIS
Wahyu Wahidatun Sholihah1, Diniatik2, Zainur Rahman Hakim3
ABSTRAK
Prevalensi kejadian hiperurisemia pada beberapa negara meningkat
sehingga diperlukan pengobatan komplementer. Tujuan penelitian ini yaitu untuk
mengetahui aktivitas antihiperurisemia dari ekstrak etanol, fraksi etil asetat dan
fraksi diklormetan. Pembuatan ekstrak dengan metode maserasi pelarut etanol 70%
dilanjutkan proses hidrolisis dan fraksinasi. Kontrol positif menggunakan inhibitor
enzim xantin oksidase yaitu allopurinol. Hasil penelitian menunjukan aktivitas
antihiperurisemia dengan nilai IC50 meningkat yaitu allopurinol (8,784 μg/ml),
fraksi etil asetat (15,399 μg/ml), ekstrak etanol (25,314 μg/ml) dan fraksi
diklormetan (53,382 μg/ml). Nilai IC50 terkecil menunjukan bahwa aktivitas
antihiperurisemia paling tinggi ditunjukan oleh fraksi etil asetat. Hasil KLT dengan
pembanding kuersetin, fase gerak asam asetat glasial 30%, fase diam selulosa,
disinari sinar UV 366 nm menunjukan pada fraksi etil asetat mempunyai nilai Rf
0,1 sama dengan kuersetin. Pola spektrum fraksi aktif menunjukan pita I 369 nm
dan pita II 255 nm yaitu golongan flavonol (3-OH bebas). Spektrum geser
dihasilkan pita CH3OH+NaOH (425 nm, 266 nm, 326 nm), pita AlCl3 (428 nm, 268
nm), pita AlCl3+HCl (422 nm, 267 nm), pita NaOAc (438 nm, 271 nm), pita
NaOAc+H3BO3 (435 nm, 269 nm). Uji one way ANOVA menunjukan nilai p
0,000<0,05 berarti hasil berbeda signifikan. Disimpulkan bahwa daun leunca
(Solanum nigrum L.) mempunyai aktivitas antihiperurisemia.
Kata kunci: leunca, Solanum nigrum L., antihiperurisemia, flavonoid
Uji Aktivitas Antihiperurisemia... Wahyu Wahidatun Sholihah, Fakultas Farmasi UMP, 2018
xii
A STUDY OF ACTIVITIES ANTIHYPERURICEMIA ETHANOL
EXTRACT, ETHYL ACETATE FRACTION AND DICHLORMETHANE
FRACTION LEUNCA LEAF (Solanum nigrum L.) WITH UV-VIS
SPECTROPHOTOMETRY METHOD
Wahyu Wahidatun Sholihah1, Diniatik2, Zainur Rahman Hakim3
ABSTRACT
The prevalence of hyperuricemia in some countries is increasing so
complementary is needed complementary medicine. Preparation of the extract by
maceration method of 70% ethanol solvent followed by hydrolysis and
fractionation. Positive control using xanthine oxidase inhibitors is allopurinol.
Results showed that antihyperuricemia activity with IC50 value increased, ie
allopurinol (8,784 μg/ml), ethyl acetate fraction (15,399 μg/ml), ethanol extract
(25,314 μg/ml) and dichlormethane fraction (53,382 μg/ml). The smallest IC50
values showed that the highest antihyperuricemia activity was shown by ethyl
acetate fraction. TLC results with quercetin as comparator, 30% glacial acetic acid
(mobile phase), cellulose (stationary phase), exposed to 366 nm UV ray showed on
fraction of ethyl acetate having value of Rf 0,1 equal to quercetin. The active
fraction spectrum pattern shows band I 369 nm and band II 255 nm ie flavonol (3-
OH free). The resulting shear spectrum of the tape CH3OH+NaOH (425 nm, 266
nm, 326 nm), AlCl3 (428 nm, 268 nm), AlCl3+HCl (422 nm, 267 nm), NaOAc (438
nm, 271 nm), NaOAc+H3BO3 (435 nm, 269 nm). One way ANOVA test shows the
mean p 0,000<0,05 are significantly different. The results showed that leunca leaf
(Solanum nigrum L.) had antihyperuricemia activity.
Keywords: leunca, Solanum nigrum L., antihyperuricemia, flavonoids
Uji Aktivitas Antihiperurisemia... Wahyu Wahidatun Sholihah, Fakultas Farmasi UMP, 2018
xiii
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL................................................................................................i
LEMBAR PERSETUJUAN....................................................................................ii
LEMBAR PENGESAHAN....................................................................................iii
LEMBAR PERNYATAAN ORISINILITAS.........................................................iv
KATA PENGANTAR.............................................................................................v
PERSEMBAHAN.................................................................................................vii
RIWAYAT HIDUP..............................................................................................viii
MOTTO..................................................................................................................ix
LEMBAR PERSETUJUAN PUBLIKASI..............................................................x
ABSTRAK.............................................................................................................xi
ABSTRACT............................................................................................................xii
DAFTAR ISI........................................................................................................xiii
DAFTAR GAMBAR.............................................................................................xv
DAFTAR TABEL.................................................................................................xvi
DAFTAR LAMPIRAN........................................................................................xvii
BAB I PENDAHULUAN
A. Latar belakang..........................................................................................1
B. Perumusan masalah..................................................................................3
C. Tujuan penelitian......................................................................................3
D. Manfaat penelitian....................................................................................3
BAB II TINJAUAN PUSTAKA
A. Hasil penelitian terdahulu.........................................................................4
B. Landasan teori
1. Leunca (Solanum nigrum L.).............................................................5
2. Hiperurisemia....................................................................................7
3. Xantin oksidase...............................................................................14
4. Asam urat........................................................................................14
Uji Aktivitas Antihiperurisemia... Wahyu Wahidatun Sholihah, Fakultas Farmasi UMP, 2018
xiv
5. Spektrofotometri UV-VIS...............................................................16
6. Flavonoid.........................................................................................18
7. Kerangka konsep.............................................................................21
8. Hipotesis..........................................................................................21
BAB III METODE PENELITIAN
A. Jenis dan rancang penelitian..................................................................22
B. Variabel penelitian.................................................................................22
C. Waktu dan tempat penelitian.................................................................22
D. Alat dan bahan.......................................................................................22
E. Jalannya penelitian................................................................................23
F. Analisis hasil.........................................................................................29
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Determinasi daun leunca (Solanum nigrum L.)....................................31
B. Pembuatan simplisia kering daun leunca..............................................31
C. Ekstraksi daun leunca............................................................................32
D. Hidrolisis...............................................................................................33
E. Fraksinasi..............................................................................................34
F. Pola kromatogram flavonoid dengan KLT...........................................34
G. Uji antihiperurisemia............................................................................39
H. Pola spektrum fraksi aktif.....................................................................51
I. Analisis hasil.........................................................................................60
J. Keterbatasan penelitian.........................................................................60
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN
A. Kesimpulan..........................................................................................61
B. Saran....................................................................................................61
DAFTAR PUSTAKA..........................................................................................62
LAMPIRAN.........................................................................................................70
Uji Aktivitas Antihiperurisemia... Wahyu Wahidatun Sholihah, Fakultas Farmasi UMP, 2018
xv
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 2.1 Tanaman leunca (Solanum nigrum L.).............................................6
Gambar 2.2 Struktur asam urat...........................................................................14
Gambar 2.3 Mekanisme terbentuknya asam urat...............................................15
Gambar 2.4 Struktur umum flavonoid...............................................................18
Gambar 2.5 Kerangka konsep penelitian...........................................................21
Gambar 4.1 Ekstrak pekat etanol 70%...............................................................32
Gambar 4.2 Hasil hidrolisis ekstrak etanol........................................................33
Gambar 4.3 Profil kromatografi.........................................................................37
Gambar 4.4 Hubungan konsentrasi vs aktivitas enzim ekstrak etanol..............41
Gambar 4.5 Hubungan konsentrasi vs aktivitas enzim pada FEA....................42
Gambar 4.6 Hubungan konsentrasi vs aktivitas enzim pada FDM...................43
Gambar 4.7 Hubungan konsentrasi vs % inhibisi 1 ekstrak etanol, fraksi etil
asetat dan fraksi diklormetan..........................................................45
Gambar 4.8 Hubungan konsentrasi vs % inhibisi 2 ekstrak etanol, fraksi etil
asetat dan fraksi diklormetan..........................................................46
Gambar 4.9 Nilai IC50 ekstrak etanol, FEA dan FDM.......................................48
Gambar 4.10 Hubungan konsentrasi vs aktivitas enzim oleh allopurinol.........50
Gambar 4.11 Spektrum flavonoid (metanol).....................................................53
Gambar 4.12 Spektrum flavonoid (NaOH).......................................................54
Gambar 4.13 Spektrum flavonoid (AlCl3)........................................................55
Gambar 4.14 Spektrum flavonoid (AlCl3 + HCl).............................................56
Gambar 4.15 Spektrum flavonoid (NaOAc).....................................................57
Gambar 4.16 Spektrum flavonoid (NaOAc+H3BO3).......................................58
Gambar 4.17 Dugaan struktur fraksi aktif etil asetat ......................................59
Uji Aktivitas Antihiperurisemia... Wahyu Wahidatun Sholihah, Fakultas Farmasi UMP, 2018
xvi
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 2.1 Obat yang dapat menginduksi terjadinya hiperurisemia......................9
Tabel 2.2 Terapi farmakologi hiperurisemia......................................................12
Tabel 2.3 Rentangan serapan spektrum UV-VIS flavonoid...............................18
Tabel 2.4 Warna bercak yang disinari dengan UV.............................................20
Tabel 4.1 Hasil pembuatan simplisia kering daun leunca (Solanum nigrum L.)32
Tabel 4.2 Hasil ekstraksi daun leunca (Solanum nigrum L.)..............................33
Tabel 4.3 Randemen fraksi diklormetan dan etil asetat......................................34
Tabel 4.4 Pola Kromatogram..............................................................................35
Tabel 4.5 Hasil Penentuan Aktivitas enzim xantin oksidase..............................39
Tabel 4.6 Aktivitas enzim ekstrak etanol, fraksi diklormetan dan etil asetat.....40
Tabel 4.7 Konsentrasi vs % inhibisi ekstrak etanol, fraksi diklormetan dan etil
asetat..................................................................................................44
Tabel 4.8 Aktivitas enzim oleh allopurinol........................................................47
Tabel 4.9 Konsentrasi vs % inhibisi oleh allopurinol.........................................49
Tabel 4.10 Hasil IC50 ekstrak etanol, fraksi diklormetan dan etil asetat............51
Tabel 4.11 Hasil pergeseran fraksi aktif etil asetat.............................................52
Uji Aktivitas Antihiperurisemia... Wahyu Wahidatun Sholihah, Fakultas Farmasi UMP, 2018
xvii
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1 Hasil determinasi 70
Lampiran 2 Perhitungan bahan 71
Lampiran 3 Perhitungan randemen ekstrak dan fraksi 76
Lampiran 4 Perhitungan nilai Rf 77
Lampiran 5 Uji aktivitas antihiperurisemia 79
Lampiran 6 Analisis hasil One way ANOVA 80
Lampiran 7 Hasil Kegiatan Penelitian 84
Uji Aktivitas Antihiperurisemia... Wahyu Wahidatun Sholihah, Fakultas Farmasi UMP, 2018