UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAN KARAKTERISASI KOMPONEN …repositori.uin-alauddin.ac.id/15274/1/AL...
Transcript of UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAN KARAKTERISASI KOMPONEN …repositori.uin-alauddin.ac.id/15274/1/AL...
UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAN KARAKTERISASI
KOMPONEN PENYUSUN MINYAK ATSIRI
KULIT BUAH LEMO CUCO (Citrus sp.)
Skripsi
Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Meraih Gelar Sarjana Sains (S.Si)
pada Jurusan Kimia Fakultas Sains dan Teknologi
UIN Alauddin Makassar
Oleh:
AL MUJAIZAH
NIM: 60500114013
FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI
UNIVERSITAS ISLAM NEGERI ALAUDDIN MAKASSAR
2019
iv
KATA PENGANTAR
Alhamdulillah Wassyukurillah penulis panjatkan kehadirat Allah swt. Yang
telah memberikan rahmat-NYA serta bimbingan dari dosen pembimbing sehingga
penulis mampu menyelesaikan skripsi ini dengan judul “Uji Aktivitas Antibakteri
dan Karakterisasi Komponen Penyusun Minyak Atsiri Kulit Buah Lemo Cuco
(Citrus sp.)”. Salawat dan taslim tak lupa diucapkan kepada junjungan Nabi
Muhammad saw. Beserta keluarga dan para sahabatnya.
Penulis membuat skripsi sebagai salah satu syarat dalam memperoleh gelar
Sarjana Sains (S.Si) Jurusan Kimia Fakultas Sains dan Teknologi Universitas Islam
Negeri Alauddin Makassar. Dalam penyelesaian skripsi ini, penulis mengucapkan
terima kasih atas bimbingan, kerja sama dan bantuan dari berbagai pihak sehingga
skripsi dapat diselesaikan denagan baik. Tak lupa penulis mengucapkan terima kasih
kepada ibunda Nurhayati dan ayahanda Uddin maupun seluruh keluarga atas doa dan
dukungan material dan moril selama penulis menempuh pendidikan hingga ke
perguruan tinggi.
Pada kesempatan ini juga, penulis mengucapkan terima kasih yang tulis
kepada:
1. Bapak Prof. Dr. H. A. Musafir, M.Si selaku rektor Universitas Islam Negeri
(UIN) Alauddin Makassar.
2. Bapak Prof. Dr. Mardan, M. Ag, Bapak Prof. Dr. H. Lomba Sultan, M. A dan Ibu
Prof. Siti Aisyah, M.Ag., Ph.D selaku masing-masing Wakil Rektor I, II, III
Universitas Islam Negeri (UIN) Alauddin Makassar.
3. Bapak Prof. Dr. H. Arifuddin, M.Ag. selaku Dekan Fakultas Sains dan Teknologi
Universitas Islam Negeri (UIN) Alauddin Makassar.
v
4. Ibu Dr. Hj. Washilah, S.T., M.T, Bapak Dr. M. Thahir Maloko, M.H.I dan Bapak
Dr. Ir. Andi Suarda, M.Si, selaku masing-masing Wakil Dekan I, II, III Fakultas
Sains dan Teknologi Universitas Islam Negeri (UIN) Alauddin Makassar.
5. Ibu Sjamsiah, S.Si., M.Si., Ph.D dan Ibu Dr. Rismawaty Sikanna S.Si., M.Si
selaku Ketua dan Sekertaris Jurusan Kimia selaku Ketua Jurusan Kimia, Fakultas
Sains dan Teknologi Universitas Islam Negeri (UIN) Alauddin Makassar.
6. Ibu Asriani Ilyas, S.Si., M.Si selaku pembimbing I dan Ibu Andi Nur Fitriani
Abubakar, S.Si., M.Si selaku pembimbing II yang telah berkenan meluangkan
waktu, tenaga, bantuan, pengarahan, nasihat dan saran mulai dari penyusunan
skripsi ini sampai selesai.
7. Ibu Aisyah, S.Si., M.Si dan Bapak Dr. H. Aan Parhani, Lc., M.Ag selaku penguji
I dan II yang telah berkenan meluangkan waktu serta memberikan saran dan
kritik dalam penyusunan skripsi ini sampai selesai.
8. Segenap Dosen Jurusan Kimia, Fakultas Sains dan Teknologi Universitas Islam
Negeri (UIN) Alauddin Makassar yang senantiasa mendidik dan memberikan
ilmu kepada penulis.
9. Seluruh Staf dan Karyawan Universitas Islam Negeri Alauddin Makassar dan
Fakultas Sains dan Teknologi.
10. Seluruh Staf, Karyawan dan Para kakak Laboran Jurusan Kimia (Nuraini, S.Si.,
Fitri Azis, S.Si., S.Pd., Andi Nurahma, S.Si., Ismawanti, S.Si., Awaluddin Iwan
Perdana, S.Si, dan Ahmad Yani, S.Si) yang telah memberikan sumbangsih baik
tenaga maupun pikiran dalam penelitian ini.
11. Bapak Usman, S.Si., M.Si selaku Laboran Instrumen di Laboratorium Forensik
Cabang Makassar.
vi
12. Rekan-rekan F14vonoid Mahasiswa Kimia Angkatan 2014 Fakultas Sains dan
Teknologi Universitas Islam Negeri (UIN) Alauddin Makassar.
13. Teman-teman seperjuangan Penelitian di Laboratorium Organik Bidang Sintesis
Biodisel (Andi Fachrunnisa, S.Si., Ugah Anriani, S.Si., Rezeki, S.Si., A. Nurul
Wakyah, S.Si., Masliah, S.Si dan Yuniar Hardianti, S.Si). Serta Teman-teman
seperjuangan Penelitian di Laboratorium Organik Bidang Bahan Alam
(Awaluddin, S.Si., Sahyuni Hamzah, S.Si dan Aspina Damadanyanti, S.Si).
14. Teman-teman seperjuangan Penelitian di Laboratorium Analitik (Sari Ningsih,
S.Si., dan Indah Fitriyani, S.Si) serta rekan PKL (Praktik Kerja Lapangan) yang
senantiasa memberikan motivasi dan selalu menghibur. Serta Rekan penelitian
Sulfa yang senantiasa membantu dan menemani penulis dari awal hingga
penyusunan skripsi ini selesai.
15. Teman-teman KKN (Kuliah Kerja Nyata) Polongbangkeng Utara khususnya
posko 7 Desa Pa’Rappunganta serta kepada semua pihak yang tidak dapat
disebutkan satu per satu.
Semoga Allah swt. Memberikan balasan baik di dunia maupun di akhirat
kelak untuk segala bantuan yang telah diberikan baik secara langsung maupun tidak
langsung serta mendapat ridha dan bernilai pahala disisi-Nya. Aamiin.
Akhir kata Penulis, semoga Skripsi ini bermanfaat bagi penulis dan bagi
pembaca.
Gowa, 27 Juni 2019
Penulis
Al Mujaizah
60500114013
vii
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL ............................................................................................ i
PERNYATAAN KEASLIAN SKRIPSI ............................................................. ii
LEMBAR PENGESAHAN ................................................................................. iii
KATA PENGANTAR .......................................................................................... iv
DAFTAR ISI ........................................................................................................ .. vii
DAFTAR TABEL ................................................................................................ ix
DAFTAR GAMBAR. ............................................................................................. x
DAFTAR LAMPIRAN. ....................................................................................... xii
ABSTRAK ............................................................................................................ xiii
ABSTRACT ........................................................................................................... xiv
BAB I PENDAHULUAN. .................................................................................... 1-6
A. Latar Belakang ............................................................................................ 1
B. Rumusan Masalah ....................................................................................... 6
C. Tujuan Penelitian ......................................................................................... 6
D. Manfaat Penelitian....................................................................................... 6
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ......................................................................... 7-35
A. Tinjauan Umum Ayat Al-Quran tentang Tanaman Obat ............................ 7
B. Jeruk (Citrus sp.). ........................................................................................ 10
C. Senyawa Metabolit Sekunder. ..................................................................... 14
D. Minyak Atsiri .............................................................................................. 25
E. Ekstraksi Minyak Atsiri ............................................................................... 27
F. Aktivitas Antimikroba ................................................................................. 29
G. Gas Cromatography- Mass Spekrofotometer (GC-MS) ............................. 34
viii
BAB III METODE PENELITIAN .................................................................. 36-43
A. Waktu dan Tempat ................................................................................... 36
B. Alat dan Bahan. ........................................................................................ 36
C. Prosedur Penelitian. .................................................................................. 37
BAB VI HASIL DAN PEMBAHASAN .......................................................... 44-62
A. Hasil ......................................................................................................... 44
B. Pembahasan. ............................................................................................. 50
BAB V PENUTUP ............................................................................................. 63
A. Kesimpulan .............................................................................................. 63
B. Saran. ........................................................................................................ 63
DAFTAR PUSTAKA . ...................................................................................... 64-73
LAMPIRAN-LAMPIRAN. ............................................................................. 74-106
RIWAYAT HIDUP. ......................................................................................... ..107
ix
DAFTAR TABEL
Tabel 2.1 Kategori Zona Hambat ........................................................................ ... 33
Tabel 2.2 Kategori Daya Hambat ........................................................................ ... 33
Tabel 4.1 Rendemen Minyak Atsiri Kulit Buah Lemo Cuco (Citrus sp.) ........... ... 42
Tabel 4.2 Uji Fitokimia Minyak Atsiri Kulit Buah Lemo Cuco (Citrus sp.) ...... 42
Tabel 4.3 Uji Aktivitas Antibakteri Minyak Atsiri terhadap Bakteri Stapilococcus
aureus. ................................................................................................. 44
Tabel 4.4 Uji Aktivitas Antibakteri Minyak Atsiri terhadap Bakteri Salmonella
thypi ........................................................................................................ 44
Tabel 4.5 Karakterisasi Komponen Penyusun Minyak Atsiri dari Ekstrak Etanol
Kulit Buah Lemo Cuco dengan GC-MS ................................................ 45
Tabel 4.6 Karakterisasi Komponen Penyusun Minyak Atsiri dari Ekstrak n-Heksan
Kulit Buah Lemo Cuco dengan GC-MS ............................................... 45
x
DAFTAR GAMBAR
Gambar 2.1 Buah Jeruk (Citrus sp.) ................................................................. 10
Gambar 2.2 Struktur Fenol. ............................................................................... 15
Gambar 2.3 Struktur Flavonoid. ........................................................................ 16
Gambar 2.4 Struktur Alkaloid. .......................................................................... 17
Gambar 2.4 Struktur Seroid. .............................................................................. 17
Gambar 2.6 Struktur Saponin ............................................................................ 18
Gambar 2.7 Struktur Isoprena. .......................................................................... 18
Gambar 2.8 Reaksi Senyawa Tanin dengan FeCl3. ........................................... 20
Gambar 2.9 Reaksi Senyawa Flavonoid dengan Logam Mg dan HCl .............. 20
Gambar 2.10 Reaksi Senyawa Alkaloid dengan Pereaksi Mayer ....................... 21
Gambar 2.11 Reaksi Senyawa Alkaloid dengan Pereaksi Wagner ..................... 22
Gambar 2.12 Reaksi Senyawa Alkaloid dengan Pereaksi Dragendorff .............. 22
Gambar 2.13 Reaksi Senyawa Steroid dengan Pereaksi Lieberman Burchard ... 23
Gambar 2.14 Reaksi Hidrolisis Senyawa Saponin .............................................. 24
Gambar 2.15 Reaksi Senyawa Terpenoid dengan Pereaksi Lieberman Burchard 25
Gambar 2.16 Bakteri Stapilococcus aureus. ....................................................... 30
Gambar 2.17 Bakteri Salmonella thypi................................................................ 31
Gambar 2.18 Alat Instrumen GC-MS. ................................................................ 34
Gambar 2.19 Skema Konfigurasi GC-MS. ...................................................... 35
Gambar 4.1 Uji Aktivitas Antibakteri Minyak Atsiri terhadap Bakteri Stapilococcus
aureus ............................................................................................. 44
Gambar 4.2 Uji Aktivitas Antibakteri Minyak Atsiri terhadap Bakteri Salmonella
thypi ................................................................................................... 44
xi
Gambar 4.3 Struktur Komponen Senyawa Minyak Atsiri dari Ekstrak Etanol
Kulit Buah Lemo Cuco (Citrus sp.)................................................ 48
Gambar 4.4 Struktur Komponen Senyawa Minyak Atsiri dari Ekstrak n-Heksan
Kulit Buah Lemo Cuco (Citrus sp.)................................................ 49
xii
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1 Skema Penelitian. .............................................................................. 74
Lampiran 2 Skema Prosedur Kerja Penelitian. ..................................................... 75
Lampiran 3 Perhitungan. ....................................................................................... 83
Lampiran 4 Dokumentasi Penelitian .................................................................... 89
Lampiran 5 Gambar Spektrum Hasil Karakterisasi dengan GC-MS. ................... 105
Lampiran 6 Gambar Spektrum Hasil Karakterisasi dengan MS. .......................... 106
xiii
ABSTRAK
Nama : Al Mujaizah
NIM : 60500114013
Judul Skripsi : Uji Aktivitas Antibakteri dan Karakterisasi Komponen
Penyusun Minyak Atsiri Kulit Buah Lemo Cuco
(Citrus Sp.).
Buah Lemo Cuco (Citrus sp.) merupakan salah satu tanaman spesies Rutaceae
yang tumbuh di kabupaten Bone dan Sinjai, Sulawesi Selatan. Kulit buahnya
memiliki aroma khas yang mengindikasikan adanya kandungan minyak atsiri.
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas antibakteri dan komponen
penyusun minyak atsiri kulit buah Lemo Cuco (Citrus sp.). Metode yang digunakan
pada penelitian ini adalah ekstraksi soxhletasi dengan pelarut etanol dan n-heksan,
uji fitokimia dan karakterisasi komponen minyak atsiri dengan GC-MS serta uji
aktivitas antibakeri dengan metode difusi cakram. Hasil yang diperoleh dari
penelitian ini berdasarkan pengukuran daya hambat pada minyak atsiri dari ekstrak
n-heksan kulit buah Lemo Cuco (Citrus sp.) terhadap bakteri Stapilococcus aureus
termasuk kategori kuat (20% dan 10%) dan sedang (5%, 2.5% dan 1.25%).
Sedangkan minyak atsiri dari ekstrak etanol termasuk kategori sedang (20% dan
10%) dan lemah (5%, 2.5% dan 1.25%). Daya hambat minyak atsiri dari ekstrak
n-heksan terhadap Salmonella typhi termasuk kategori lemah (1.25% dan 2.5%),
sedang (5%) dan kuat (10% dan 20%). Sedangkan minyak atsiri dari ekstrak etanol
termasuk kategori sedang (20%), lemah (10% dan 5%) dan tidak aktif (5%, 2.5% dan
1.25%). Hasil uji fitokimia pada minyak atsiri dari ekstrak etanol dan n-heksan kulit
buah Lemo Cuco (Citrus sp.) mengindikasikan adanya golongan senyawa flavonoid,
fenolik, alkaloid, steroid dan terpenoid. Sedangkan saponin hanya terdapat pada
minyak atsiri dari ekstrak n-heksan. Berdasarkan karakterisasi komponen penyusun
minyak atsiri kulit buah Lemo Cuco (Cirus sp.) dengan GC-MS dari ekstrak etanol
menunjukkan adanya senyawa α-farnesen, germakren, δ-kadinen dan β-elemen,
sedangkan ekstrak n-heksan menunjukkan adanya senyawa germakren D,
aromadendren, isospathulenol, δ-cadinen, kariofilen, kopein, α-humulen,
α-terpinen, oplopanon dan nutkaton serta senyawa asam lemak yaitu metil palmiat
dan metil linoleat.
Kata Kunci: Lemo Cuco, Minyak Atsiri, Antibakteri, Stapilococcus aureus dan
Salmonella typhi.
xiv
ABSTRACT
Name : Al Mujaizah
Sudient Number : 60500114013
Title : Antibacterial Activities and Characterization of Essensial
Oil Components Of Peel Lemo Cuco (Citrus sp.)
Lemo Cuco (Citrus sp.) is one of the plant species of Rutaceae which grows in
the districts of Bone and Sinjai, South Sulawesi. The peel have a special scent is
indicate be found essensial oil components. This study aims to determine the
antibacterial activitiy and constituent compounds of peel essensial oil Lemo Cuco
(Citrus sp.). The method used in this study is the extension of soxhletation with
ethanol dan n-hexane, phytochenycal test and the characterization of in essensial oil
components with GC-MS and antibacterial activitiy test using the disc diffusion
method. The results obtained from the study were based on the meansurement of
inhibition power on essensial oil test the antibacterial activities of Lemo Cuco
(Citrus sp.) peel extract against the Stapilococcus aureus bacteria including
categories strong (20% dan 10%) and moderate (5%, 2.5% dan 1.25%). Whereas
essensial oil from ethanol extract categories moderate (20% dan 10%) and weak
(5%, 2.5% and 1.25%). The inhibitory of essensial oil from n-heksane exctract
against Salmonella typhi bacteria including categories weak (1.25% and 2.5%),
moderate (5%) and strong (10% dan 20%). Whereas essesnsial oil from ethanol
extract categories moderate (20%), weak (10% and 5%) and inactive (5%, 2.5%
and 1.25%). Phytochemical test results on essesnsial oil from ethanol extract and
n-heksane exctract of the Lemo Cuco (Citrus sp.) peel extract indicate presensce of
flavonoids, phenolic, steroids, terpenoids and alkaloids. Whereas saponins is only
found in peel essesnsial oils from n-heksane exctract. Characterization of constituen
compounenst of essensial oil Lemo Cuco (Citrus sp.) peel with GC-MS from ethanol
extract showed the presence of farnesen coumpounds, germacren, δ-cadinen dan
β-elemen. Whereas of n-heksane extract showed the presence germacren D,
aromadendren, isospathulenol, δ-cadinen, karyopillen, copaen, α-humulen,
α-terpinen, oplopanon and nootkatone and fatty acid coumpounds methyl palmiate
and methyl linoleic..
Keyword: Lemo Cuco, Essensial Oil, Antibacterial, Stapilococcus aureus
and Salmonella typhi.
1
BAB I
PENDAHULUAN
A. Latar Belakang
Indonesia memiliki kekayaan alam dan keanekaragaman hayati yang sangat
melimpah dan berada pada garis khatulistiwa yang beriklim tropis. Kekayaan yang
dimiliki lebih dari 30.000 jenis tumbuhan tingkat tinggi dan pada saat ini tercatat
7.000 jenis tanaman telah diketahui khasiatnya. Namun, masih kurang dari 3.000
tumbuhan yang digunakan sebagai bahan baku industri farmasi (Mukhriani,
2014: 361). Sekitar 1.260 jenis tumbuhan dimanfaatkan sebagai obat (Ergina, dkk.,
2014: 165).
Tumbuhan yang diciptakan Allah swt. beranekaragam dengan keindahan dan
manfaat yang berbeda seperti pada bidang energi, pangan dan kesehatan. Allah swt.
memerintahkan untuk memperhatikan kekuasaan-Nya di bumi yang telah
menurunkan air hujan dari langit dan menumbuhkan tumbuh-tumbuhan yang
bermacam-macam. Dalam Al-Qur’an Allah swt. berfirman dalam QS Thaha/20: 53.
“Ï% ©!$# Ÿ≅ yèy_ ãΝä3s9 uÚö‘F{ $# #Y‰ôγtΒ y7 n=y™uρ öΝä3s9 $pκ� Ïù Wξç7 ß™ tΑt“Ρr& uρ zÏΒ Ï!$ yϑ¡¡9 $# [ !$ tΒ
$ oΨô_t�÷zr' sù ÿϵÎ/ % [`≡ uρø— r& ÏiΒ ;N$ t7̄Ρ 4®L x© ∩∈⊂∪
Terjemahnya:
“Yang telah menjadikan bagimu bumi sebagai hamparan dan yang telah
menjadikan bagimu di bumi itu jalan-jalan, dan menurunkan dari langit air
hujan. Maka Kami tumbuhkan dengan air hujan itu berjenis-jenis dari
tumbuh-tumbuhan yang bermacam-macam”. (Kementerian Agama RI, 2011).
2
Ayat diatas menjelaskan bahwa Allah swt. banyak menciptakan
keanekaragaman tumbuhan yang mempesona dan menjadi bukti luas kekuasaan-Nya.
Allah swt. menurunkan air hujan dari langit dan menumbuhkan tumbuhan dari air
hujan itu sehingga menghasilkan buah-buahan yang beranekaragam warna, bentuk,
aroma, rasa baik rasa asam, manis dan pahit serta memiliki manfaat sebagai bahan
pangan manusia dan hewan (Shihab, 2002: 316).
Salah satu keanekaragaman hayati yang ada ialah spesies Rutaceae yang
terdapat pada keluarga jeruk seperti jeruk nipis (Citrus aurantium L.), jeruk
pontianak (Citrus nobilis Lour.), jeruk sunkist (Citrus sinensis L. Osbeck), jeruk
purut (Citrus hystrix DC) dan jeruk lemon (Citrus limon L.). Pada wilayah suku
bugis khususnya di daerah Sinjai dan Bone terdapat jenis jeruk yang morfologinya
menyerupai jeruk lemon, masyarakat mengenal dengan sebutan “Lemo Cuco”. Jeruk
ini memiliki aroma yang khas yang biasa digunakan untuk masakan sebagai pemberi
aroma, pereda batuk serta sebagai penghilang bau amis pada ikan dan daging.
Allah swt. berfirman dalam QS Luqman /31: 10:
t, n=yz ÏN≡ uθ≈ yϑ¡¡9 $# Î�ö� tóÎ/ 7‰uΗxå $ pκtΞ÷ρt� s? ( 4’ s+ø9r&uρ ’Îû ÇÚö‘F{ $# zÅ›≡ uρu‘ βr& y‰‹ Ïϑs? öΝä3Î/ £]t/uρ $pκ� Ïù ÏΒ
Èe≅ä. 7π −/!#yŠ 4 $ uΖø9t“Ρr& uρ zÏΒ Ï !$ yϑ¡¡9 $# [!$ tΒ $ oΨ÷Gu;/Ρr' sù $pκ� Ïù ÏΒ Èe≅à2 8l ÷ρy— AΟƒÍ� x. ∩⊇⊃∪
Terjemahnya:
“Dia menciptakan langit tanpa tiang yang kamu melihatnya dan Dia
meletakkan gunung-gunung (di permukaan) bumi supaya bumi itu tidak
menggoyangkan kamu; dan memperkembang biakkan padanya segala macam
jenis binatang. Dan Kami turunkan air hujan dari langit, lalu Kami
tumbuhkan padanya segala macam tumbuh-tumbuhan yang baik”.
(Kementerian Agama RI, 2011)
3
Kata ( AΟƒ Í� x.) karim digunakan untuk menyifati segala sesuatu yang baik
sesuai objeknya. Rizq yang karim adalah yang banyak, halal dan bermanfaat.
Pasangan tumbuhan yang karim adalah tumbuh subur dan menghasilkan apa yang
diharapkan dari penanamannya. Pada surah Al-Luqman di atas, menjelaskan bahwa
kekuasaan Allah swt. menciptakan segala macam tumbuh-tumbuhan yang baik, halal
dan bermanfaat dari penamaannya (Shihab, 2002: 119). Tumbuhan yang
ditumbuhkan Allah swt. dapat diijadikan sebagai sumber pangan dan obat yang
memiliki fungsi farmakologis.
Penggunaan buah dan daun jeruk telah dikenal oleh masyarakat sejak dahulu
sebagai obat tradisional. Bagian daun biasanya digunakan untuk mengatasi letih dan
penyedap masakan. Sedangkan kulit buah digunakan sebagai obat bisul, panas
dalam, radang kulit, radang payudara, kulit bersisik dan kulit mengelupas (Setiawan,
1999), pembuatan kue dan manisan (Copriady, dkk., 2005: 13). Kulit jeruk
mengandung minyak atsiri yang dapat diekstrak sehingga mempunyai nilai jual
tinggi (Hidayati, 2012: 40), yang banyak digunakan sebagai bahan pengharum, sabun
dan industri kosmetik (Siburian, 2008: 8).
Beberapa penelitian tentang jeruk yang telah dilaporkan seperti penelitian
ekstrak kulit jeruk nipis (Citrus aurantium) dapat menurunkan plak gigi dengan
kandungan alkaloid dan flavoniod (Ladytama, 2014: 40), kulit jeruk pontianak
(Citrus nobilis Lour.) dengan kandungan limonen terhadap rayap tanah (Lestari,
2014: 38) dan kulit jeruk sunkist (Citrus sinensis L. Osbeck) sebagai peluruh
sterofoam alami (Fitrianti, 2016). Penelitian lain juga mengungkapkan bahwa ekstrak
kulit jeruk lemon (Citrus limon L.) dan kulit jeruk purut (Citrus hystrix DC)
memiliki aktivitas sebagai antibakteri (Ajitkumar, 2012: 2 dan Klangpetch, dkk.,
2016: 704).
4
Penelitian Ladytama (2014: 42) dan Chowdhury, dkk., (2009: 178),
mengungkapkan bahwa ekstrak kulit jeruk dengan pelarut etanol 70% memiliki
efektifitas yang lebih tinggi terhadap uji mikroorganisme daripada pelarut metanol,
aseton dan diklorometan. Ekstrak etil asetat dan minyak kulit buah jeruk purut lebih
berpotensi terhadap Staphylococus aureus dibanding Escherichia coli (Chantaphon,
dkk., 2008: 127).
Penelitian Abirami, dkk., (2014: 5), menyatakan famili dari rutaceae
memiliki aktivitas antibakteri yang tinggi terhadap 20 serotip dari Salmonella.
Penelitian Widyaningsih, dkk., (2016: 252), menggunakan perasan jeruk purut 100%
memiliki daya hambat optimal pada pertumbuhan Salmonela typhi. Hal ini sesuai
dengan penelitian Ajithkumar (2012), bahwa kulit jeruk purut memiliki daya
antimikroba yang lebih kuat dibandingkan dengan buah jeruk purut.
Pemanfaatan buah jeruk sangat luas, di sisi lain peningkatan jumlah sampah
yang ada disekitar diantaranya sampah rumah tangga, sampah organik dan sampah
berbahan serat alami (Megawati, 2015: 40). Salah satu sampah organik seperti
limbah kulit buah jeruk biasanya hanya dibuang sehingga untuk meningkatkan nilai
ekonomis dari limbah kulit buah tersebut perlu dikaji pemanfaatannya salah satunya
senyawa metabolit sekunder (Yustinah dan Fanandara, 2016: 26).
Beragam tumbuhan yang ada dapat dimanfaatkan baik secara tradisional
maupun modern dengan adanya isolasi senyawa bahan alam berupa senyawa
metabolit sekunder (Alegantina, 2010: 17). Setiap tahun terdapat sekitar 4.000
senyawa metabolit sekunder yang baru dan saat ini terdapat 150.000 senyawa
metabolit sekunder yang sudah diindentifikasi (Ergina, dkk., 2014: 165). Senyawa
metabolit sekunder ini sangat bervariasi dari jenis dan jumlah pada setiap tumbuhan
yang berbeda-beda (Copriady, dkk., 2005: 43).
5
Senyawa metabolit sekunder dapat diperoleh dari bagian-bagian penyusun
tanaman mulai dari buah, kulit, daun, batang dan akarnya (Nurcahyo, 2016: 8),
berupa senyawa aktif seperti flavonoid, alkaloid (Ergina, 2014: 168), saponin, steroid
dan terpenoid (Trabelsi, dkk., 2014: 22). Salah satu senyawa terpenoid adalah
minyak atsiri. Minyak atsiri dapat diperoleh dari beberapa spesies seperti
Compositae, Matricariae, pinaceae, Labiatae, Rutaceae dan lain sebagainya
(Harborne, 1987).
Beberapa penelitian minyak atsiri telah dilaporkan seperti penelitian
Miftahendrawati (2014) dan Khasanah, dkk., (2015: 52), melaporkan bahwa daun
jeruk purut mengandung tanin, steroid, triterpenoid, dan minyak atsiri 1-1.5% dengan
kandungan sitronelal 64.15%, beta sitronelal 10.17% dan lonalol 5.31%. Penelitian
lain seperti yang laporkan Hidayati (2012: 40), mengungkap bahwa kandungan
minyak atsiri kulit buah jeruk purut 2.5 % mengandung komponen utama limonen
94%, geranial 0.2%, sitronelal 0.1%, terpinen-4-ol 11.93%, linalol 0.5%, dekanal
0.4% dan oktanal 0.5%.
Penelitian lain menyatakan kandungan minyak atsiri kulit jeruk nipis terdiri
dari senyawa monoterpen 16%, seskuiterpen 6.55%, senyawa aromatik dan non
aromatik (Montemayor, dkk., 2012). Komponen utama minyak atsiri jeruk nipis
limonen 96%, geranial 97%, pinen 96% dan neral 96% (Dongmo, dkk., 2009).
Munawaroh dan Handayani, (2010: 78) melaporkan bahwa penggunaan pelarut
etanol dan n-heksan diperoleh randeman minyak atsiri 13.39% dan 10.50% dengan
kadar sitronelal 65.99% dan 97.27%.
Miftakhuromah, dkk., (2008) mengungkap bahwa sitronelal mempunyai sifat
antibakteri dan antijamur sehingga memungkinkan digunakan sebagai pestisida
nabati. Hal ini sesuai dengan penelitian Yuliani, dkk., (2011), Miftahendrawati,
6
(2014), dan Jamaluddin (2017: 65) yang menyatakan bahwa minyak atsiri jeruk purut
mampu menghambat pertumbuhan Streptococus mutans pada konsentrasi 25%,
Staphylococus aureus dan terhadap Klebsiella pneumonia ATCC.
Berdasarkan uraian di atas, dalam penelitian ini dilakukan uji aktivitas
antibakteri terhadap bakteri Staphylococus aureus dan Salmonella typhi serta
karakterisasi komponen penyusun minyak atsiri kulit buah Lemo Cuco (Citrus sp).
B. Rumusan Masalah
Rumusan masalah pada penelitian ini adalah:
1. Bagaimana aktivitas antibakteri minyak atsiri kulit buah Lemo Cuco
(Citrus sp.)?
2. Apa komponen penyusun minyak atsiri kulit buah Lemo Cuco (Citrus sp.)?
C. Tujuan Penelitian
Tujuan pada penelitian ini adalah:
1. Untuk mengetahui aktivitas antibakteri minyak atsiri kulit buah Lemo Cuco
(Citrus sp.).
2. Untuk mengetahui komponen penyusun minyak atsiri kulit buah Lemo Cuco
(Citrus sp.).
D. Manfaat Penelitian
Manfaat pada penelitian ini adalah menambah wawasan pembaca tentang
komponen penyusun minyak atsiri kulit buah Lemo Cuco (Citrus sp.) yang dapat
berperan sebagai antibakteri.
7
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
A. Tinjauan Umum Ayat Al Qur’an tentang Tanaman Obat
Tanaman obat memiliki ribuan jenis spesies. Total dari 40.000 jenis
tumbuhan telah dikenal di dunia, 30.000 diantaranya berada di Indonesia. Jumlah
tersebut mewakili 90% dari tanaman obat yang terdapat di wilayah asia. Tanaman
obat merupakan tanaman yang umumnya sebagai bahan baku obat tradisional dan
jamu yang jika dikomsumsi akan meningkatkan sistem kekebalan tubuh. Tanaman
memiliki sifat spesifik sebagai tanaman obat yang bersifat pencegahan dan promotif
melalui kandungan senyawa metabolit sekunder (Munadi, 2017: 1).
Manusia dan tumbuhan sangat erat kaitannya dalam kehidupan. Banyak
sekali manfaat yang diperoleh dari tumbuhan namun, masih banyak pula tumbuhan
yang ada disekitar belum diketahui manfaatnya. Keberadaan tumbuhan di lingkungan
sekitar merupakan berkah dan nikmat dari Allah swt. yang diberikan kepada seluruh
makhluknya. Allah swt. berfirman dalam QS Al Nahl/16: 10-11.
uθ èδ ü“Ï%©!$# tΑt“Ρr& š∅ÏΒ Ï !$ yϑ¡¡9 $# [!$ tΒ ( /ä3©9 çµ÷ΖÏiΒ Ò>#t� x© çµ ÷ΖÏΒ uρ Ö� yfx© ϵŠÏù šχθ ßϑŠÅ¡è@ ∩⊇⊃∪
àM Î6/Ζム/ä3s9 ϵ Î/ tíö‘̈“9 $# šχθçG÷ƒ ¨“9 $#uρ Ÿ≅‹Ï‚̈Ζ9$#uρ |=≈uΖôãF{ $#uρ ÏΒ uρ Èe≅à2 ÏN≡ t� yϑ̈V9 $# 3 ¨βÎ) ’Îû
š�Ï9≡ sŒ Zπtƒ Uψ 5Θ öθs)Ïj9 šχρã� ¤6x�tGtƒ ∩⊇⊇∪
Terjemahnya:
“Dia-lah, yang telah menurunkan air hujan dari langit untuk kamu,
sebahagiannya menjadi minuman dan sebahagiannya (menyuburkan)
tumbuh-tumbuhan, yang pada (tempat tumbuhnya) kamu menggembalakan
ternakmu, Dia menumbuhkan bagi kamu dengan air hujan itu
tanam-tanaman; zaitun, korma, anggur dan segala macam buah-buahan.
Sesungguhnya pada yang demikian itu benar-benar ada tanda (kekuasaan
Allah) bagi kaum yang memikirkan”. (Kementerian Agama RI, 2011).
8
Ayat di atas mengingatkan manusia dengan tujuan agar mereka mensyukuri
nikmak Allah dan memanfaatkan dengan baik anugerah-Nya, bahwa Dia Yang Maha
Kuasa itulah yang telah menurunkan dari arah langit yakni awan air hujan untuk
kamu manfaatkan. Sebagiannya menjadi minuman yang segar sebagian lainnya
menyuburkan tumbuh-tumbuhan yang padanya yakni di tempat tumbuhnya kamu
mengembalakkan ternak kamu sehingga binatang itu dapat makan dan pada
gilirannya dapat menghasilkan untuk kamu susu, daging dan bulu.
Ayat di atas juga menyebut beberapa tanamam yang paling bermanfaat. Dia
menumbuhkan zaitun salah satu pohon yang paling panjang usianya, demikian juga
kurma yang dapat dimakan mentah atau matang, mudah dipetik dan sangat bergizi
dan berkalori tinggi, juga anggur yang dapat kamu jadikan makanan yang halal atau
minuman yang haram dan dari segala macam atau sebagian buah-buahan.
Sesungguhnya pada yang demikian, yakni pada curahan hujan dan akibatnya itu
benar- benar ada tanda yang sangat jelas bahwa yang mengaturnya seperti itu
adalah Maha Esa lagi Maha Kuasa. Tanda itu berguna bagi kaum yang memikirkan.
Betapa tidak, sumber airnya sama, tanah tempat tumbuhnya berdempet tetapi ragam
dan rasanya berbeda-beda (Shihab, 2002: 198). Firman Allah swt. dalam
QS Al-Mu’minun/23: 19-20.
$ tΡù' t±Σr' sù /ä3s9 ϵ Î/ ;M≈̈Ζy_ ÏiΒ 9≅ŠÏƒ̄Υ 5=≈uΖôãr& uρ ö/ä3©9 $ pκ� Ïù çµ Ï.≡ uθsù ×οu�� ÏVx. $ pκ÷]ÏΒ uρ tβθè=ä.ù' s? ∩⊇∪
Zοt� yfx©uρ ßl ã� øƒrB ÏΒ Í‘θ èÛ u !$uΖøŠy™ àM ç6 /Ψs? Ç÷δ‘$!$$ Î/ 8%ö6 Ϲuρ tÎ=Å2EζÏj9 ∩⊄⊃∪
Terjemahnya:
“Lalu dengan air itu, Kami tumbuhkan untuk kamu kebun-kebun kurma dan
anggur; di dalam kebun-kebun itu kamu peroleh buah-buahan yang banyak
dan sebahagian dari buah-buahan itu kamu makan, Dan pohon kayu keluar
dari Thursina (pohon zaitun), yang menghasilkan minyak, dan pemakan
makanan bagi orang-orang yang makan”. (Kementerian Agama RI, 2011).
9
Ayat di atas menjelaskan kekuasaan Allah swt. menurunkan air hujan
sehingga menumbuhkan berbagai tumbuhan yang bermanfaat dalam pembuatan
karpet, pakaian atau makanan ternak. Kayunya digunakan untuk membuat rumah
maupun untuk bahan bakar. Daun-daun, buah-buahan dan akar-akar beberapa jenis
pohon digunakan untuk obat-obatan, salah satunya yaitu pohon zaitun sebagai rezeki
yang dapat menghasilkan minyak kemudian digunakan manusia sebagai bahan
pangan untuk dikomsumsi (Katsir, 2010: 80). Hal ini dapat diperkuat Firman Allah
swt. dalam QS Qaf/50: 9-11.
$ uΖø9 ¨“tΡuρ z ÏΒ Ï !$ yϑ¡¡9$# [ !$ tΒ % Z.t�≈t6 •Β $ uΖ÷Gu;/Ρr' sù ϵ Î/ ;M≈ ¨Ζy_ ¡=ymuρ ωŠÅÁptø: $# ∩∪ Ÿ≅÷‚̈Ζ9$#uρ
;M≈s)Å™$ t/ $ oλ °; Óìù=sÛ Ó‰‹ ÅÒ̄Ρ ∩⊇⊃∪ $ ]%ø—Íh‘ ÏŠ$ t6 Ïèù=Ïj9 ( $ uΖ÷�u‹ ômr&uρ ϵÎ/ Zοt$ ù#t/ $ \Gø‹̈Β 4 y7 Ï9≡ x‹x. ßlρã� èƒø: $# ∩⊇⊇∪
Terjemahnya:
“Dan Kami turunkan dari langit air yang banyak manfaatnya lalu Kami
tumbuhkan dengan air itu pohon-pohon dan biji-biji tanaman yang dipanen.
Dan pohon kurma yang tinggi-tinggi yang mempunyai mayang yang
bersusun- susun. Untuk menjadi rezki bagi hamba-hamba (Kami), dan Kami
hidupkan dengan air itu tanah yang mati (kering). seperti Itulah terjadinya
kebangkitan”. (Kementerian Agama RI, 2011).
Kata basiq digunakan dalam arti tinggi. Kata thal’un berarti berkisar, kompak
dan kata hashid berarti saat-saat yang paling menggembirakan bagi petani, yakni
waktu kematangan. Ayat ini menggunakan air hujan dan menumbuhkan tanaman
untuk menggambarkan tentang kebangkitan. Ayat ini juga menjelaskan penciptaan
alam berdasarkan proses yang terjadi didalamnya seperti pertumbuhan tanaman dan
penurunan air hujan untuk memberikan ketersediaan makanan dan rezeki bagi
orang-orang yang menyembah Allah swt. dan taat kepada-Nya (Imani, 2011: 390).
10
B. Jeruk (Citrus sp.)
1. Deskripsi
Jeruk termasuk buah-buahan tropis yang dihasilkan hampir diseluruh
wilayah di Indonesia. Jeruk dapat tumbuh pada ketinggian 400 meter diatas
permukaan laut (Kurniawan, dkk., 2008: 16). Tanaman Jeruk merupakan buah yang
termasuk dalam keluarga Citrus dari suku Rutaceae. Jeruk termasuk tanaman yang
memiliki aroma khas yang berbeda-beda. Senyawa aktif pada jeruk seperti flavoniod,
karotenoid, limonoid dan mineral sangat penting bagi kesehatan. Jeruk juga
mengandung kalsium, potasium, thiamin, niasin, magnesim (Devy, dkk., 2010: 360).
Buah jeruk memiliki komponen seperti flavedo, albedo dan endocarp.
Komponen pada buah jeruk pada bagian flavedo merupakan bagian yang
memberikan warna kuning pada kulit buah dan terdapat karoten dan gland yang
mengandung minyak jeruk. Pada bagian albedo mempunyai lapisan yang tebal, putih
dan seperti spons sedangkan endocarp merupakan bagian buah yang dapat
dikomsumsi (Kurniawan, dkk., 2008: 16).
Gambar 2.1. Lemo Cuco (Cirus sp.)
11
Tanaman Lemo Cuco (Citrus sp.) dapat diklasifikasikan sebagai berikut:
Kingdom : Plantae
Divisi : Spematophyta
Kelas : Dicotyledonae
Bangsa : Rutales
Suku : Rutaceae
Marga : Citrus
Jenis : Citrus sp.
(Tjitrosoepomo, 1994)
Morfologi dari Citrus sp. dengan buah yang jorong atau memanjang, pada
ujung buah terdapat penonjolan yang jelas, memiliki biji kecil. Tumbuhan ini
diambil bagian luar kulit buah yang masak dan masih segar yang mengandung
minyak atsiri yang terdiri dari, limonen, sitrol, sitronellal, geranil asetat, terpidiol,
metil heptanon, dan siskuiterpen, hesperidin dan lain-lain serta digunakan sebagai
pemberi aroma dan stimulansia (Tjitrosoepomo, 1994)
Kulit jeruk tersusun atas bagian epidermis, flavedo, kelenjar minyak, dan
bagian paling dalam ikatan pembuluh. Bagian segmen-segmen jeruk terdiri dari
dinding segmen, rongga cairan dan biji jeruk. Buah jeruk berbentuk bulat sampai
bundar, ukurnya kecil, kulit buahnya tidak rata, rasa asam dan berbau sedap
(Setyowati, 2016: 32). Sedangkan core jeruk adalah bagian tengah yang terdiri dari
ikatan pembuluh dan jaringan parenkim. Pembuatan produk minuman sari buah
jeruk, akan menghasilkan limbah yang berupa kulit jeruk, ampas dan biji jeruk.
(Yustinah dan Fanandara, 2016: 26).
12
2. Potensi Kimia
Kulit buah jeruk mengandung minyak atsiri yang banyak dimanfaatkan oleh
industri kimia farfum, menambah aroma jeruk pada minuman dan makanan, serta di
bidang kesehatan digunakan sebagai antioksidan dan antikanker (Muhtadin, dkk.,
2013: 98). Kulit jeruk memiliki kandungan senyawa yang berbeda-beda, bergantung
varietasnya dan aroma yang berbeda. Kulit jeruk dapat diekstrak minyak atsirinya
karena mengandung komponen seperti terpen, sesquiterpen, aldehida, ester dan sterol
(Adiyasa, dkk., 2015: 21) tanin dan saponin (Rusli, 2014).
Minyak jeruk purut terdiri dari berbagai macam komponen zat penyusun yang
memiliki titik didih berbeda dan sifat yang tidak stabil atau mudah menguap
(Chanthaphon, dkk., 2008). Mudah teroksidasi oleh panas, udara kelembaban,
dikatalis oleh cahaya dan beberapa harus dikatalis oleh logam (Warsito, dkk., 2017).
Bahan kimia yang terkandung dari minyak buah jeruk purut sebagian besar
adalah hidrokarbon monotorpen, dengan limone 30.73% dan β-penine 18.76%
sebagai komponen utama. Sedangkan komponen minor terdiri dari terpinene-4-ol
10.63%, α-terpinol 8.35%, γ - terpinene (5.09%) dan terpinolon 4.33% (Doreen,
dkk., 2011). Komponen utama minyak jeruk purut adalah sitronelal 81.49%,
sitronelol 6.22% linalol 3.69% dan geraniol 0.31 % (Warsito, dkk., 2017).
3. Manfaat Citrus sp.
Peningkatan komsumsi buah jeruk berdampak positif dapat menurunkan
kasus penyakit jantung dan resiko kanker tertentu (Devy, dkk., 2010: 360). Daging
buah jeruk memiliki kandungan vitamin C tinggi yang dapat menambah daya tahan
tubuh. Selain daging jeruk, manfaat buah jeruk juga banyak terkandung pada kulit
jeruk. Kandungan kulit jeruk memiliki manfaat diantaranya sebagai penenang,
penghalus kulit dan obat anti nyamuk (Friatna, dkk., 2008).
13
Kulit buah jeruk purut mengandung minyak atsiri yang mempunyai efek
sebagai antibakteri (Wongsariya, dkk., 2014 dan Jamaluddin, dkk., 2017: 61),
antifungi (Tanzil, dkk., 2017; Khafidhoh, dkk., 2015: 31), antioksidan (Ratseewo,
dkk., 2015: 188 dan Wungsintawekull, dkk., 2010: 589), penyegar. Efek antibakteri
diperoleh karena adanya senyawa sitronellal di dalamnya (Hayu, dkk., 2013: 244).
Minyak atsiri pada jeruk banyak digunakan sebagai penyedap makanan, farfum dan
formula pada farmasi karena bersifat analgesik, penghilang dahak dan penekan
batuk. Kemampuan daya hambat antibakteri karena adanya senyawa aktif yang
terkandung diantranya limonen, sitronelal dan β-penine (Abirami, dkk., 2014: 2).
Aktivitas minyak atsiri jeruk sunkist (Citrus sinensis L) meiliki kandungan
senyawa limonen yang bersifat polar dan bau yang sangat kuat khas jeruk. Hasil
penelitian Fitrianti (2016: 51) menggunakan minyak atsiri jeruk sunkist sebagai
peluruh stereofoam alami dengan konsentrasi 25% dengan perbandingan minyak
atsiri, etanol dan air adalah 1:1:2. Penelitian Lestari (2014: 38), menggunakan
minyak atsiri kulit buah jeruk Pontianak (Citrus nobilis L) dengan peningkatan
konsentrasi minyak atsiri terhadap rayap tanah. Semakin tinggi konsentrasi yang
diberikan semakin tinggi juga kematian rayap tanah.
Ekstrak kulit jeruk nipis (Citrus aurantifolia) memiliki aktivitas antibakteri
(Lemes, dkk., 2018; Berlian, dkk., 2016), antioksidan (Trabelsi, dkk., 2014: 23)
dengan kandungan senyawa flavonoid, minyak atsiri, alkaloid, saponin, tanin, fenol
dan vitamin C (Pratiwi, 2015). Kandungan eugenol linalool dan geraniol dikenal
sebagai zat penolak serangga sehingga kulit buah jeruk nipis efektif sebagai penolak
nyamuk (Ekawati, 2017). Ekstrak kulit dan perasan buah lemon (Citrus lemon)
memiliki aktivitas sebagai antioksidan (Krisnawan, 2017; Doker, 2017), antibakteri
(Shivani, dkk., 2017; Ali dkk., 2017; Henderson, dkk., 2018).
14
C. Senyawa Metabolit Sekunder
Makhluk hidup dapat menghasilkan bahan organik sekunder (metabolit
sekunder) atau bahan alami melalui reaksi sekunder dari bahan organik primer
(karbohidrat, lemak, protein). Bahan organik sekunder (metabolit sekunder) ini
umumnya merupakan hasil akhir dari suatu proses metabolisme (Ergina, 2014: 165).
Metabolit sekunder berperan melindungi tumbuhan dari bakteri, virus, dan jamur
yang menyerang tanaman (Lemes, dkk., 2018 dan Ensamory, 2017: 7)
Senyawa metabolit sekunder umumnya mempunyai kemampuan bioaktivitas
untuk tumbuhan sendiri dan lingkungannya (Megawati, 2010: 13). Konsentrasi
metabolit sekunder dipengaruhi oleh faktor internal yaitu genetik, kondisi kesehatan
tanaman dan umur sedangkan faktor eksternal yaitu lingkungan dan perawatan
dengan obat. Senyawa hasil metabolit sekunder banyak digunakan sebagai zat warna,
racun, aroma makanan, obat-obatan dan sebagainya (Lenny, 2006: 6).
Karakteristik struktur senyawa metabolit sekunder sangat beragam yang
timbul dari proses biosintesisnya. Metabolit sekunder memerlukan prekursor seperti,
enzim, kofaktor, energi dan nitrogen (Ilyas, 2013: 6). Metabolit sekunder menjadi
kajian yang dibentuk dari pengikatan karbondioksida (CO2) dalam proses
fotosintesis, dilanjutkan dengan pembentukan metabolit primer. Koenzim adenosin
trifosfat (ATP) berperan penting dalam proses metabolisme untuk menghantarkan
energi dan katalisis suatu reaksi (Hakim, 2014: 4).
Metabolit sekunder berupa molekul-molekul kecil, bersifat spesifik, struktur
yang bervariasi dan setiap senyawa memiliki fungsi yang berbeda-beda (Atun, 2008).
Senyawa metabolit sekunder berfungsi mempertahankan diri atau mempertahankan
eksistensinya di lingkungan tempatnya berada. Metabolit sekunder juga sebagai lead
compounds dalam penemuan dan pengembangan obat-obat baru (Ergina, 2014: 166).
15
Pemanfaatan dari zat metabolit sekunder sangat banyak seperti pemanfaatan
pada bidang farmakologi diantaranya sebagai antioksidan (Ratseewo, dkk., 2016:
188), antibiotik (Sapsuha, dkk., 2018), antikanker (Tunjung, dkk., 2015: 465 dan
Nathanael, 2015), antikoagulan darah (Tangkery, dkk., 2011), menghambat efek
karsinogenik, antiagen pengendali hama (Wibaldus, dkk., 2016: 48).
Bahan organik berupa senyawa metabolit sekunder dapat dibagi menjadi tiga
kelompok besar yaitu fenolik, alkaloid dan terpenoid, tetapi pigmen dan porfirin juga
termasuk di dalamnya (Ergina, 2014: 166). Senyawa metabolit sekunder yang umum
terdapat pada tanaman adalah : alkaloid, flavanoid, steroid, saponin, terpenoid dan
tanin (Harborne, 1987; Devy, dkk., 2010: 360).
1. Klasifikasi Senyawa Metabolit Sekunder
a. Fenolik
Senyawa fenolik terdiri atas molekul-molekul besar dengan beragam struktur,
karakteristik utamanya adalah adanya cincin aromatik yang memiliki gugus
hidroksil. Kebanyakan senyawa fenolik termasuk ke dalam kelompok flavonoid.
Fenol bersifat asam, karena sifat gugus hidroksil yang mudah melepaskan diri,
memiliki kemampuan membentuk senyawa kelat dengan logam, mudah teroksidasi
dan membentuk polimer yang menimbulkan warna gelap (Ningsih, 2007: 60).
OH
Gambar 2.2 Struktur Fenol
16
b. Flavanoid
Flavanoid merupakan golongan terbesar dari senyawa fenol mempunyai sifat
efektif menghambat pertumbuhan virus, bakteri dan jamur. Senyawa flavanoid
umumnya bersifat antioksidan dan sebagai bahan baku obat-obatan. Flavanoid
berkerja sebagai antibakteri dengan cara menghambat sintesis asam nukleat bakteri
dan mampu menghambat motilitas bakteri (Nuri, dkk., 2009). Penghambatan kerja
dari enzim reduktase pada proses transfer elektron bakteri mengakibatkan
pertumbuhan bakteri terganggu (Miftahendrawati, 2014).
Flavonoid bersifat polar, memiliki 15 atom karbon yang tersusun dalam
konfigurasi C6-C3-C6 (dua cincin aromatik yang terhubung oleh tiga karbon yang
tidak dapat membentuk cincin ketiga). Gugus hidroksil (-OH) hampir selalu terdapat
dalam flavonoid berupa tempat menempelnya berbagai gula yang berpengaruh
terhadap kelarutan flavonoid dalam air (Prastiwi, 2003).
A
B
1
2
3
Gambar 2.3 Struktur Flavonoid
c. Alkaloid
Alkaloid merupakan golongan zat tumbuhan sekunder yang terbesar.
Alkaloid bersifat basa yang mengandung satu atau lebih atom nitrogen, biasanya
dalam gabungan, sebagai bagian dari sistem siklik. Alkaloid biasanya berwarna,
sering kali bersifat optis aktif, kebanyakan berbentuk kristal tetapi hanya sedikit yang
berupa cairan pada suhu kamar (Hammado, dkk., 2013).
17
Alkaloid bisa dijumpai pada bagian daun, ranting, biji, dan kulit batang.
Alkaloid mempunyai efek dalam bidang kesehatan berupa pemicu sistem saraf,
menaikkan tekanan darah, mengurangi rasa sakit, antimikroba (Hammado, dkk.,
2013), obat penenang, obat penyakit jantung dan lain-lain (Aksara, dkk., 2013).
N
Gambar 2.4 Struktur Alkaloid
d. Steroid
Steroid merupakan senyawa penting dalam pengobatan. Keberadaannya
sebagai salah satu diantara golongan senyawa metabolit sekunder yang memberi nilai
pengobatan pada suatu tumbuhan (Nasrudin, dkk, 2017). Steroid termasuk terpenoid
lipid yang dikenal dengan empat cincin kerangka dasar karbon yang menyatu.
Struktur senyawanya pun cukup beragam. Perbedaan disebabkan karena adanya
gugus fungsi teroksidasi yang terikat pada cincin dan terjadinya oksidasi cincin
karbonya (Samejo, dkk., 2013).
A B
C D
Gambar 2.5 Struktur Stroid
e. Saponin
Saponin merupakan senyawa glikosida kompleks dengan berat molekul tinggi
yang dihasilkan oleh tanaman, hewan laut tingkat rendah dan beberapa bakteri.
Saponin dapat larut dalam air tetapi tdak larut dalam eter. Sifat khas dari saponin
yaitu terasa pahit, berbusa dalam air, beracun pada binatang berdarah dingin (Latifa,
2015: 33).
18
HO
O
COOH
11
3
Gambar 2.6 Struktur saponin
f. Terpenoid
Terpenoid merupakan komponen tumbuhan yang mempunyai aroma dan
dapat diisolasi dari bahan nabati dengan penyulingan. Senyawa terpenoid terdiri dari
kerangka karbon 2 atau lebih unit karbon disebut isopren. Fraksi hasil penelitian
yang mudah menguap terdiri dari golongan terpenoid yang mengandung 10 atom
karbon. Sedangkan fraksi yang mempunyai titik didih tinggi biasanya terdiri dari
terpenoid yang mengandung 15 atom karbon (Lenny, 2006).
Gambar 2.7 Struktur Isoprena
Susunan kepala dan ekor ini disebut kaidah isopren. Kaidah ini merupakan
ciri khas dari sebagian terpenoid sehingga dapat dijadikan dasar penetapan senyawa
terpenoid, sehingga dapat digunakan sebagai dasar penetapan struktur terpenoid
(Achmad, 1986: 4). Terpenoid umumnya larut dalam lemak dan terdapat dalam
sitoplasma sel tumbuhan dengan struktur siklik dan mempunyai satu gugus fungsi
atau lebih (Harborne, 1987).
19
Klasifikasi senyawa terpenoid terdiri dari monoterpenoid, siskuiterpenoid dan
seterusnya. Senyawa terpenoid berfungsi sebagai fungisida, obat antitumor dan
aktifitas antivirus. Monoterpenoid merupakan senyawa terpenoid yang paling
sederhana, terbentuk dari dua unit isopren dan termasuk komponen minyak atsiri.
Monoterpenoid dapat dibagi menjadi tiga golongan yaitu asiklik seperti geraniol,
monosiklik seperti limonen dan bisiklik seperti α pinena (Robinson, 1995: 153).
Seskuiterpenoid sama seperti monoterpenoid terdapat sebagai komponen
minyak astiri, berperan penting dalam memberi aroma pada buah dan bunga
(Robinson, 1995: 147). Contoh senyawa seskuiterpenoid adalah farnesol, santonin
dan γ-bisabolena. Diterpenoid merupakan senyawa yang mengandung atom C20 yang
berasal dari empat satuan isopren. Karena titik didihnya tinggi, biasanya diterpenoid
tidak ditemukan dalam minyak atsiri tumbuhan, kebanyakan penyebarannya sangat
terbatas (Harborne, 1987: 142).
2. Identifikasi Senyawa Metabolit Sekunder
Identifikasi senyawa metabolit sekunder dilakukan untuk menentukan
golongan senyawa dari sampel. Identifikasi dapat dilakukan dengan uji kualiatif yaiu
adanya perubahan warna, adanya endapan dan terdapat busa.
a. Fenolik
Identifikasi untuk menentukan adanya senyawa fenol dapat dilakukan dengan
menggunakan FeCl3. Adanya gugus fenol ditunjukkan dengan warna hijau kehitaman
atau biru tua memberikan hasil positif dimungkinkan dalam sampel terdapat senyawa
fenol dan dimungkinkan salah satunya adalah tanin karena tanin merupakan senyawa
polifenol yang akan membentuk senyawa kompleks dengan ion Fe3+ (Ergina, 2014:
169-140). Hal ini dapat dilihat pada reaksi berikut:
20
OHO
OH
OH
OH
3
+ FeCl3
O
HO
OH
O
HO
HOO
OH
HO
3+Fe
HO
OH
HO
HO OH
OH
+ 3Cl-
Gambar 2. 8 Reaksi Senyawa Tanin dengan FeCl3
(Chintya dan Utami, 2017: 25)
b. Flavonoid
Uji adanya senyawa flavonoid pada sampel dengan penambahkan logam Mg
dan HCl yang akan mereduksi inti benzopiron yang terdapat dalam struktur
flavonoid sehingga terbentuk garam flavilium berwarna merah atau jingga
(Septiyaningsih, 2010) Hal ini dapat dilihat pada reaksi berikut:
O
OH
O
2HClO
OH
OH
O
OH
OH
MgCl2 +
+ MgCl2
O
OH
OH
Mg
22
+
2
+
2
+ MgCl2
Garam Flavilium (Merah atau Jingga)
Gambar 2.9 Reaksi Senyawa Flavonoid dengan Logam Mg dan HCl (Septyaningsih, 2010)
21
c. Alkaloid
Identifikasi senyawa alkaloid dapat dilakukan dengan menggunakan beberapa
pereaksi yaitu pereaksi Mayer, pereaksi Wagner dan pereaksi Dragendorff.
Pembuatan pereaksi Mayer, larutan mercuri (II) klorida (HgCl2) ditambah KI akan
membentuk endapan merah mercuri (II) iodida (HgI2) (Svehla, 1985). Penambaan KI
berlebih maka akan terbentuk kalium tetraiodomerkurat (II) (K2[HgI4]) dengan ion
logam. Pada uji alkaloid dengan pereaksi Mayer, diperkirakan nitrogen pada alkaloid
akan bereaksi dengan ion logam K+ dari K2[HgI4] membentuk kompleks kalium-
alkaloid yang mengendap (Ergina, 2014: 168). Hal ini dapat dilihat pada reaksi
berikut:
N NK+
+ K2 [HgI4] + K[HgI4]-
Kalium - Alkaloid(Endapan putih)
HgCl2 + 2KI HgI2 + 2KCl
HgI2 + 2KI K2 [HgI4]
Kalium tetraiodomerkurat (II)
Gambar 2.10 Reaksi Senyawa Alkaloid dengan Pereaksi Mayer (Marliana, dkk., 2005: 27)
Hasil positif senyawa alkaloid dengan pereaksi Wagner yaitu adanya
endapan cokelat karena adanya pengikatan oleh nitrogen dalam cincin alkaloid yang
akan bereaksi dengan ion logam K+ dari kalium Iodida (KI) sehingga menbentuk
endapan berwarna cokelat.
22
N NK+
+ KI + I2 + I3-
Kalium - Alkaloid
(Endapan cokelat)
I2 + I- I3-
Cokelat
Gambar 2.11 Reaksi Senyawa Alkaloid dengan Pereaksi Wagner
(Marliana, dkk., 2005: 27)
Pembuatan pereaksi Dragendroff, bismuth nitrat (Bi(NO3)3) dilarutkan
dengan asam sehingga terhidrolisis menjadi ion bismutil (BiO+). Bismuth nitrat
bereaksi dengan KI membentuk endapan hitam bismuth (III) iodida (BiI3) yang akan
larut dalam KI berlebih membentuk kalium tetraiodobismutat (K[BiI4]) (Svehla,
1985). Pada uji alkaloid dengan pereaksi Dragendroff, nitrogen dalam cincin alkaloid
akan bereaksi dengan ion logam K+ dari K[BiI4] membentuk kompleks
kalium-alkaloid yang akan mengendap (Ergina, 2014: 169).
N NK+
+ K[BiI4] + [BiI4]-
Kalium - Alkaloid(Endapan jingga)
Bi(NO3)3 + 3KI BiI3 + 3KNO3
BiI3 + KI K[BiI4]
Kalium tetraiodobismutat
Jingga
Gambar 2.12 Reaksi Senyawa Alkaloid dengan Pereaksi Dragendroff
(Marliana, dkk., 2005: 27)
23
d. Steroid
Uji steroid dilakukan dengan menggunakan pereaksi Lieberman Burchard
hasil positifnya ditandai dengan timbulnyawarna hijau sampai kuning muda.
HO
CH3COOH
H3COC
H2O
H2SO4 pekat
H3COC
SO2H
H3COC
Kolesterol Asam-3-Aseto-5-KolesterolSulfonat (Hijau)
CH3COOH
Gambar 2.13 Reaksi Senyawa Steroid dengan Pereaksi Liberman-Burchard
(Chintya dan Utami, 2017: 25)
e. Saponin
Uji saponin dilakukan dengan menggunakan aquades (H2O) panas dengan
pengocokan selama 30 detik hasil positifnya terdapat busa. Busa yang terbentuk
menunjukkan bahwa sampel mengandung senyawa saponin. Timbulnya busa
menujukkan adanya glikosida yang mempunyai kemampuan membentuk buih dalam
air yang terhidrolisis menjadi glukosa da senyawa yang lainnya (Latifa, 2015). Hal
ini dapat dilihat pada reaksi berikut:
24
CO
OO OH
OH
OH
CH2OH
H2O
CO2H+
O
OH
OH
CH2OH
OH
1- Arabiosa - 3-B-asetil oleanolat
Aglikon Glukosa
Gambar 2.14 Reaksi Hidrolisis Senyawa Saponin (Marliana, dkk., 2005: 27)
f. Terpenoid
Idenifikasi senyawa terpenoid dilakukan dengan menggunakan pereaksi
Lieberman Burchard yang akan terkondensasi atau melepaskan H2O dan
penggabungan dengan karbokation. Reaksinya diawali dengan proses asetilasi gugus
hidroksil menggunakan asam asetat anhidrida. Gugus asetil merupakan gugus pergi
yang baik akan lepas sehingga memebentuk ikatan rangkap. Selanjutnya terjadi
pelepasan gugus hidrogen beserta elektronnya, mengakibatkan ikatan rangkap
berpindah. Senyawa akan mengalami resonansi yang bertindak sebagai elektrofil
atau karbokation. Serangan karbokation menyebabkan adisi elektrofilik diikuti
pelepasan hidrogen. Gugus hidrogen dilepas dengan elekronnya akibatnya senyawa
mengalami perpanjangan konjugasi yang menghasilkan munculnya warna merah
sampai ungu (Siadi, 2012: 80-81). Hal ini dapat dilihat pada reaksi berikut:
25
HOO
OAc2O [H+]
- HOAc[H+]
- HOAc
H
+A
+
i
Adisi Elekrofilik
H
B
+
- [H+]
H
- [H+]
- [H+]
i
+
Gambar 2.15 Reaksi Senyawa Terpenoid dengan Pereaksi Liberman-Burchard
(Siadi, 2012: 81)
D. Minyak Atsiri
Minyak atsiri disebut juga dengan essensial oils, etherical oils atau volatile
oil berupa senyawa yang tidak larut dalam air dan mudah menguap (Kurniawan,
dkk., 2008: 15) dan akan larut dalam alkohol dengan kandungan senyawa polar
(Khasanah, dkk., 2015: 52). Minyak atsiri memiliki titik didih dan komposisi yang
berbeda pada setiap kelenjar minyak (Nurcahyo, 2016: 8).
Minyak atsiri yang berasal dari bunga, biji, daun, akar dan kulit batang pada
awalnya dikenal dari penentuan struktur secara sederhana. Minyak atsiri bukanlah
senyawa murni akan tetapi berupa campuran senyawa organik yang kandungannya
26
terdiri dari 25 senyawa yang berlainan (Lenny, 2006: 7). Minyak atsiri pada tanaman
berbeda-beda dan memiliki kandungan zat yang berbeda (Wulandari, dkk., 2015).
Minyak atsiri dapat dipisahkan dari campuran zat yang mudah menguap dengan
membuka kelenjar minyak sebanyak-banyaknya agar minyak atsiri lebih mudah
diperoleh (Munawaroh dan handayani, 2010: 74).
Komponen minyak atsiri secara umum terbagi atas 3 yaitu senyawa yang
mengandung karbon dan hidrogen (Lenny, 2006: 7), senyawa hidrogen, oksigen dan
karbon dan senyawa-senyawa lainnya seperti asam, senyawa belerang dan nitrogen
(Kurniawan, dkk., 2008: 15). Komponen minyak atsiri dapat menyatu kembali dan
tidak stabil secara intra molekuler (Setyawan, 1999: 320).
Minyak atsiri diperoleh dari tanaman yang mengandung senyawa terpenoid
seperti siskuiterpen, turunan hidrokarbon teroksigenasi, siskuiterpen aromatik, dan
hidrokarbon aromatik (Wulandari, dkk., 2015: 662). Minyak atsiri golongan terpen
berupa monoterpen yang paling umum, sisquiterpen yang paling khas dan diterpen
sangat jarang mengandung minyak atsiri (Setyawan, 1999: 320).
Senyawa minyak atsiri banyak mengandungan senyawa polar sehingga kan
larut dalam alkohol. Kandungan minyak atsiri yang sering diujikan karena bersifat
volatil sebagai rempah-rempah (Kawiji, dkk., 2015: 178). Kandungan senyawa
terpenoid pada minyak atsiri lebih cepat larut karena mengandung komponen terpen
teroksigenasi. Terpen takteroksigenasi akan lebih sukar larut karena bersifat non
polar yang tidak memiliki gugus fungsi (Khasanah, dkk., 2015: 53).
Minyak atsiri sangat dibutuhkan dalam berbagai industri seperti industri
parfum, kosmetik, farmasi atau obat-obatan, industri makanan dan minuman. Minyak
atsiri pada makanan dan minuman digunakan untuk flavour eskrim, permen, dan
pasta gigi. Sedangkan untuk farmasi dan kosmetik digunakan untuk sediaan aroma
27
terapi sabun mandi (Nurcahyo, 2016; Yustinah, 2016), shampo, obat luka atau
memar dan parfum (Nuryoto, dkk., 2013: 1).
Mutu minyak atsiri sangat ditentukan oleh sifat dan senyawa kimia yang
terkandung di dalamnya. Mutu minyak atsiri didasarkan pada sifat fisik seperti bobot
jenis, indeks bias, putaran optik, dan kelarutan di dalam etanol 70%. Komposisi
kimia minyak atsiri akan menentukan nilai dan kegunaan minyak atsiri tersebut
(Megawati, 2010: 3-4). Minyak atsiri dapat dianalisis karakteristiknya meliputi
rendemen dan dilakukan juga analisis fisik yang bertujuan untuk mengetahui kualitas
dari minyak atsiri yang dihasilkan (Khasanah, dkk., 2015).
Kandungan minyak atsiri memiliki aktivitas biologis sebagai antimikroba,
antifungi dan antiserangga sehingga dapat dimanfaatkan sebagai pengendalian hama
(Wungshintaweekull, dkk., 2010; Pasaribu, 2015; Lestari 2014; Wibaldus, dkk.,
2016: 44). Penggunaan minyak atsiri dari berbagai sumber atau berbeda pada bagian
tanaman yang diperoleh akan memiliki kemampuan antibakteri yang berbeda pula
(Warsito, 2017: 131).
E. Ekstraksi Minyak Atsiri
Ektraksi minyak atsiri dapat dilakukan dengan metode ekstraksi soxhletasi
(Tumane, 2014; Munawaroh dan Handayani, 2010), maserasi (Sukardi, dkk., 2012;
Kawiji, dkk., 2015), destilasi uap-air, pengempresan, Leaching (Yuliarto, dkk., 2012;
Kurniawan, dkk., 2008). Soxhletasi merupakan proses ekstraksi dengan
menggunakan pelarut yang selalu baru dengan alat khusus soxhlet sehingga terjadi
ekstraksi konstan dengan adanya pendingin balik (Atun, 2014: 55-56).
28
Prinsip ekstraksi soxhletasi adalah melarutkan minyak atsiri dalam bahan
dengan pelarut organik yang mudah menguap. Proses ekstraksi biasanya dilakukan
dalam wadah yang disebut ”extractor”. Pelarut organik umumnya digunakan untuk
mengekstraksi minyak atsiri yang mudah rusak oleh pemanasan dengan uap dan air,
terutama untuk mengekstrak minyak dari bunga (Munawaroh, 2010: 74).
Ekstraksi soxhlet salah satu teknik yang umum dan bersifat stabil
menghasilkan hasil yang lebih tinggi daripada teknik ekstraksi konvensional lainnya.
Metode ini sebagian besar tergantung pada karakteristik tanaman dan ukuran
partikel, seperti difusi internal dapat menjadi langkah membatasi ekstraksi dan
penguapan yang mempengaruhi kualitas produk akhir (Haeria, 2014: 21).
Proses ekstraksi soxhlet dilakukan secara terputus-putus. Pada ekstraktor
soxhlet pelarut dipanaskan dalam labu didih sehingga menghasilkan uap. Uap
tersebut akan masuk ke kondensor melalui pipa kecil dan keluar dalam bentuk fase
cair. Kemudian pelarut akan masuk ke dalam selongsong berisi padatan kemudian
membasahi sampel dan tertahan di dalam selongsong sampai tinggi pelarut dalam
pipa sifon sama tinggi dengan tinggi pelarut di selongsong. Selanjutnya pelarut akan
mengalir masuk kembali ke dalam labu didih dan begitu seterusnya sampai diperoleh
ekstrak (Bintang, 2010: 125).
Keuntungan metode soxhlet adalah penggunaan suhu tinggi yang akan
meningkatkan laju perpindahan massa, penempatan transfer kesetimbangan dengan
penggantian pelarut segar ke bahan padat dan tidak dibutuhkan tahap penyaringan.
Ekstraksi dengan metode soxhlet membutuhkan waktu yang panjang, penggunaan
pelarut dalam jumlah yang besar dan tidak dapat dilakukan pengadukan sehingga
dapat mengakibatkan dekomposisi termal pada senyawa karena ekstraksi dilakukan
pada suhu didih pelarut untuk jangka waktu yang lama (Haeria, 2014: 23).
29
Pelarut etanol merupakan pelarut yang paling banyak digunakan dalam
proses isolasi senyawa organik bahan alam. Etanol dapat digunakan sebagai pelarut
karena mampu melarutkan senyawa organik baik polar, semi polar maupun non
polar. Etanol mempunyai titik didih sekitar 78oC sehingga lebih mudah untuk
memisahkannya (Tanaya, dkk., 2015: 780-781).
Pemisahan pelarut etanol dari komponen atau campuran pelarut tertentu dapat
dilakukan dengan cara destilasi. Etanol berupa cairan tidak berwarna dengan aroma
yang khas. Etanol akan menguap terlebih dahulu dibandingkan pelarut yang lain
(Nurdin, dkk., 2010: 155). Etanol dalam suhu ruang berwujud cair, tidak berwarna
dan mudah menguap (Yustinah dan Fenandara, 2016: 27).
Heksana adalah sebuah senyawa hidrokarbon alkana dengan rumus kimia
C6H14 . Awalan heks- merujuk pada enam karbon atom yang terdapat pada heksana
dan akhiran -ana berasal dari alkana, yang merujuk pada ikatan tunggal yang
menghubungkan atom-atom karbon tersebut, dalam keadaan standar merupakan
cairan tak berwarna yang tidak larut dalam air (Munawaroh, 2010: 75)
F. Aktivitas Antimikroba
Kandungan senyawa aktif pada tanaman jeruk memiliki aktivitas baik sebagai
antibakteri (Warsito, dkk., 2017) dan antifungi (Ensamory, dkk., 2017). Antibakteri
merupakan suatu zat yang memiliki kemampuan menghambat pertumbuhan dan
metabolisme bakteri yang merugikan manusia. Faktor yang mempengaruhi aktivitas
seperti konsentrasi zat mikroba, keasaman atau kebasahan jumlah mikroorganisme,
potensi suatu zat antimikroba dalam larutan yang diuji dan kepekaan terhadap
konsentrasi antibakteri (Krismayanti, 2015). Cara kerja antibakteri dengan merusak
dinding sel, merubah permeabilitas sel, menghambat sintesis protein dan asam
nukleat dan menghambat kerja enzim (Maharani, dkk., 2016: 56).
30
1. Bakteri Staphylococus aureus
Bakteri Staphylococus aureus mempunyai didnding sel yang mengandng
banyak lapisan peptidoglikan sekitar 50 sampai 100 lapis yang berbentuk struktur
kaku dan tebal (Chandarana, dkk., 2014). Bakteri ini termasuk bakteri gram positif
yang terdapat asam teikonat mengandung alkohol yang terdiri dari griserol dan ribito.
Asam tikonat merupakan polimer yang bersifat larut dalam air dan berfungsi sebagai
transport ion positif masuk dan keluar sel (Jannata, dkk., 2014).
Gambar 2.16. Bakteri Staphylococus aureus
(Wordpress)
Bakteri Staphylococus aureus dapat diklasifikasikan sebagai berikut:
Kingdom : Eubacteria
Filum : Firmicutes
Divisi : Protophita
Kelas : Bacilli
Bangsa : Bacillales
Suku : Staphylococcaceae
Marga : Staphylococus
Jenis : Staphylococus aureus
(Todar, 2016)
31
Bakteri ini berbentuk bola atau kokus, bekelompok tidak teratur, berantai
pendek, diameter 0,8-1,0 µm, tidak berbentuk spora dan tidak bergerak, koloni
berwarna kuning, tidak berkapsul tumbuh cepat pada suhu 37 oC. koloni pada
pembenihan padat berbentuk bulat halus, menonjol dan berkilau. Metabolisme dapat
dilakukan dengan aerob dan anaerob (Jawetz, 1996).
Staphylococus aureus diperkirakan 20-75 % ditemukan pada saluran
pernapasan atas, muka, tangan, rambut dan vagina.Infeksi bakteri ini dapat
menimbulkan penyakit dengan tanda yang khas, yaitu peradangan, nekrosis, tampak
sebagai jerawat, infeksi folikel rambut, dan pembentukan abses. Organ yang sering
diserang adalah pembuluh getah bening, pembuluh darah, kulit yang mengalami luka
dan dapat menyebar ke orang lain yang juga mengalami luka. (Razak, dkk., 2013).
2. Bakteri Salmonella typhi
Salmonella typhi merupakan bakteri yang menyebabkan demam tifoid.
Penyakit ini menyerang hampir semua negara terutama negara berkembang seperti
indonesia. Penanganan penyakit ini secara medis masih menggunakan prinsip
triologi yaitu istirahat dan diet (Trisharyanti, dkk., 2017: 67). Bakteri Salmonella
adalah bakteri yang tergolong dalam suku Enterobacteriaceae. Penyakit yang
disebabkan oleh bakteri Salmonella disebut salmonellosis, yaitu infeksi bakteri yang
timbul karena tertelannya sel Salmonella yang masih hidup (Kunarso, 1987).
Gambar 2.17. Bakteri Salmonella typhi (Wordpress)
32
Bakteri Salmonella typhi dapat diklasifikasikan sebagai berikut:
Kingdom : Eubacteria
Filum : Proteobaceria
Divisi : Protophyta
Kelas : Schizomycees
Bangsa : Enterobacteriales
Suku : Enterobacteriaceae
Marga : Salmonella
Jenis : Salmonella typhirium
(Todar, 2015)
Morfologi bakteri Salmonella mempunyai ciri-ciri umum yaitu berbentuk
batang atau silindris, ukurannya tergantung dari jenis bakteri (umumnya mempunyai
panjang ± 2 - 3 µm dan bergaris tengah ± 0,3 µm - 0,6 µm), tidak berspora, motil,
bersifat aerob, mempunyai flagella peritrih di seluruh permukaan selnya (kecuali
pada jenis bakteri Salmonella gallinarum dan Salmonella pullorum), bersifat gram
negatif berkembang biak dengan cara membelah diri. Pada temperatur kamar bakteri
Salmonella ini dapat berkembang dengan cepat (Kunarso, 1987).
Struktur sel bakteri Salmonella terdiri atas bagian inti (nucleus), sitoplasma
dan dinding sel. Dinding sel bakteri ini bersifat gram negatif, sehingga mempunyai
struktur kimia yang berbeda dengan bakteri gram positif. S. typhi adalah bakteri yang
berdasarkan kebutuhan oksigen bersifat fakultatif anaerob, membutuhkan suhu
optimal 37 oC untuk pertumbuhannya (Darmawati, 2009).
Uji aktivitas antibakteri dengan metode cakram merupakan metode yang
paling sering digunakan untuk menentukan kepekaan bakteri terhadap berbagai
macam obat-obatan. Metode ini menggunakan cakram kertas saring (paper disc)
33
yang berfungsi sebagai tempat penampung zat antimikroba. Kertas cakram
diletakkan di atas permukaan media uji dan diinkubasi selama 18-24 jam pada suhu
37oC. Hasil pengamatan yang diperoleh ada atau tidaknya zona bening yang terbenuk
disekiar cakram sebagai zona hambat (Pelczar dan Chan, 1998).
Zona hambat dipengaruhi oleh beerapa faktor yaitu konsentasi mikroba uji
pada permukaan media, ketebalan media, dan niali pH pada medium. Semakin tinggi
konsentrasi mikroba maka zona yang terbenuk semakin kecil, semakin tebal medium
pada cawan petri maka semakin kecil zona hambatnya. Beberapa antibiotik bekerja
baik pada kondisi asam dan beberapa pada kondisi basa (Greenwood, dkk., 1995).
Tabel 2.1 Kategori Zona Hambat
No. Diameter Kekuatan Zona Hambat
1 ≤ 5 mm Lemah
2 6-10 Sedang
3 11-20 Kuat
4 ≥ 21 Sangat kuat
(Susano, dkk., 2012)
Tabel 2. 2 Kategori Daya Hambat
No. Daya Hambat Kekuatan Daya Hambat
1 0 Tidak Aktif
2 0 < Daya Hambat ≤ 25 % Lemah
3 25 < Daya Hambat ≤ 50 % Sedang
4 50< Daya Hambat ≤ 75 % Kuat
5 Daya Hambat > 75 % Sangat kuat
(Novryanti, dkk., 2010)
34
G. Gas Cromatography-Mass Spekrofometer (GC-MS)
GC-MS merupakan gabungan antara kromatografi gas dan spekrofotometer
massa. Teknik GC pertama kali diperkenalkan oleh James dan Martin pada tahun
1952 (Sparkman, dkk., 2011). GC merupakan salah satu teknik kromatografi yang
hanya dapat digunakan untuk mendeteksi senyawa-senyawa yang mudah menguap.
Kriteria menguap adalah dapat menguap pada kondisi vakum tinggi dan tekanan
rendah serta dapat dipanaskan (Drozd, 1985).
Gambar 2.18. Alat Instrumen GC-MS
(Wordpress)
Dasar pemisahan menggunakan kromatografi gas adalah penyebaran cuplikan
pada fase diam sedangkan gas sebagai fase gerak mengelusi fase diam. Cara kerja
dari GC adalah suatu fase gerak yang berbentuk gas mengalir di bawah tekanan
melewati pipa yang dipanaskan dengan fase diam cair yang dibungkus pada suatu
penyangga padat. Analit tersebut dimasukkan ke bagian atas kolom melalui suatu
portal injeksi yang dipanaskan. Suhu oven dijaga atau diprogram agar meningkat
secara bertahap. Ketika sudah berada dalam kolom, terjadi proses pemisahan antar
komponen. Pemisahan ini akan bergantung pada lamanya waktu relatif yang
dibutuhkan oleh komponen-komponen tersebut di fase diam (Sparkman, dkk., 2011).
35
Gambar 2.19. Skema Konfigurasi GC-MS
(Sutar, dkk., 2013)
Spektrometer massa diperlukan untuk identifikasi senyawa sebagai penentu
bobot molekul dan penentuan rumus molekul. Prinsip dari MS adalah pengionan
senyawa-senyawa kimia untuk menghasilkan molekul bermuatan atau fragmen
molekul dan mengukur rasio massa atau muatan. Molekul yang telah terionisasi
akibat penembakan elektron berenergi tinggi tersebut akan menghasilkan ion muatan
positif, kemudian ion tersebut diarahkan menuju medan magnet dengan kecepatan
tinggi. Medan magnet atau medan listrik akan membelokkan ion tersebut agar dapat
menentukan bobot molekul semua fragmen yang dihasilkan (David, 2005 dan Liu,
dkk., 2014). Kemudian detektor akan menghitung muatan yang terinduksi atau arus
yang dihasilkan ketika ion dilewatkan. Proses scanning massa akan menghitung ion
sebagai mass to charge ratio (m/z). Proses dalam spektrometri massa yakni ionisasi,
percepatan, pembelokkan dan pendeteksian (Sparkman, dkk., 2011).
Masuk
GC
Penghubung
ke vakum
Sumber
Ion
Penganalisis
Massa Detektor
Kontrol
Instrumen
dan
Proses
Data Sistem Vakum
36
BAB III
METODE PENELITIAN
A. Waktu dan Tempat
Penelitian ini dilakukan pada bulan Oktober 2018 - Februari 2019. Bertempat
di Laboratorium Organik, Laboratorium Biokimia, Laboratorium Analitik dan
Laboratorium Kimfis Fakultas Sains dan Teknologi, Laboratorium Mikrobiologi
Farmasi Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan UIN Alauddin Makassar serta
Laboratorium Forensik POLRI Cabang Makassar.
B. Alat dan Bahan
1. Alat
Alat-alat yang digunakan pada penelitian ini yaitu Spekrofotometer Gas
Chromatographi- Mass Spectrometry (GS-MS) Agilant GC Tipe 7890 A MS
Tipe 5975, Spekrofotometer UV, rotary evaporator Heidolph Vap-Value, oven Kirin
dan memmert, autoklaf Gea Yx-280D, inkubator Heraeus Thermo Scientific,
Laminar Air Flow Cabinet (LAF) ESCO Isocide, easypure II Barnstead D 3750
Thermo Scientific, lemari pendingin Sharp, lemari asam Esco Frontier Tm, neraca
analitik Electronic Balance Kern ABJ, kompor listrik (hotplate) Maspion elekctronic
stove, Heating Mantel Stirrer B- One, vortekx advanced mixer IR Wizard Velp
Scientifica, lampu UV 254-336 nm, Rangkaian alat soxhlet Pyrex, labu alas bulat
Pyrex, termometer 110°C, Erlenmeyer Pyrex, gelas ukur Pyrex, gelas kimia Pyrex,
pipet skala Pyrex, chamber, mikropipet, tip, cawan petri Normex dan Anumbra@,
jangka sorong digital, pipet tetes Pyrex cawan porselin, plat tetes, jarum ose, bulb,
botol vial, tabung reaksi Pyrex, pinset, spatula, batang pengaduk dan penggaris.
37
2. Bahan
Simplisia yang digunakan adalah kulit buah Lemo Cuco (Citrus sp.) yang
diperoleh dari dari Desa Bijinangka, Kec. Sinjai Borong, Kab. Sinjai Sulawesi
Selatan. Bahan kimia yang digunakan pada penelitian ini yaitu aluminium voil,
alkohol 70% Intraco, antibiotik ampicilin, antibiotik sefiksin, aquadest (H2O),
asam sulfat (H2SO4) pekat, batu didih, benang putih, besi (III) klorida (FeCl3) 5%
dan 1%, dimetil sulfoksida (DMSO) Intraco, etanol (C2H5OH) teknis Duta Gemini,
etil asetat (C4H8O2) Brataco, kapas, kertas cakram, kertas saring Duta Gemini, plat
KLT (Kromatografi Lapis Tipis) TLC Silica gel F254, muller hinton agar (MHA),
natrium klorida (NaCl) fisiologis 0,9%, natrium hidroksida (NaOH) 10%, n-Heksan
(C6H14) Brataco, nutrient agar (NA), peraksi dragendorff, peraksi Liebermen
Burchard, peraksi mayer, peraksi wagner, sedangkan bakteri yang digunakan yaitu
bakteri Staphylocuccus aureus dan Salmonella thypi.
C. ProsedurKerja
1) Penyiapan Simplisia
Sampel buah Lemo Cuco (Citrus sp.) dibersihkan kemudian dipisahkan kulit
dari dagingnya. Selanjutnya, kulit jeruk tersebut dipotong-potong kecil dan
dikeringkan pada suhu ruang. Setelah itu, kulit Lemo Cuco digiling menjadi serbuk
yang selanjutnya disebut simplisia.
2) Ekstraksi dengan Metode Soxhletasi
Penelitian ini dilakukan dua variasi pelarut yaitu n-heksana dan etanol.
Menimbang simplisia 50 gram kemudian memasukkan dalam selongsong yang
terbuat dari kertas saring. Setelah itu, selongsong dimasukkan dalam ekstraktor
soxhlet kemudian diekstraksi dengan 500 mL etanol (C2H5OH) 96% pada suhu
38
81-96ºC (suhu pemanas) sampai warna pelarut kembali menjadi semula. Setelah
dilakukan proses ekstraksi, diperoleh filtrat Lemo Cuco. Filtrat Lemo Cuco yang
diperoleh kemudian dipekatkan dengan rotary evaporator pada suhu 50ºC dan
40 rpm sampai pelarutnya tidak menetes sehingga menghasilkan minyak atsiri.
Dilakukan perlakuan yang sama dengan pelarut n-heksan (C6H14) dengan suhu
72- 86oC.
Analisis rendemen dilakukan dengan menghitung bobot minyak atsiri kulit
Lemo Cuco yang dihasilkan dengan bobot simplisia yang digunakan dan dikalikan
100%.
Rendemen% = Bobotminyakatsiri�gr�
Beratsimplisia�gr�x100%
(Kojong, dkk., 2013)
3) Uji Fitokimia
Minyak atsiri kulit buah Lemo Cuco dilarutkan sedikit menggunakan pelarut
etanol (C2H5OH) 96% dan pelarut n-heksan (C6H14) sampai homogen selanjutnya di
identifikasi dengan uji kualitatif untuk mengetahui golongan senyawa metabolit
sekunder yang terkandung dalam larutan uji.
a. Uji Flavonoid
1). Natrium hidroksida (NaOH) 10%
Penelitian ini dilakukan dengan cara memipet larutan uji ke dalam plat tetes
dan menambahkan larutan natrium hidroksida (NaOH) 10% dan mengamati
perubahan warna yang terjadi yaitu larutan kuning tua sampai kuning muda.
39
2). Asam sulfat pekat (H2SO4) pekat
Penelitian ini dilakukan dengan cara memipet larutan uji ke dalam plat tetes
dan menambahkan larutan asam sulfat pekat (H2SO4) pekat dan mengamati
perubahan warna yang terjadi yaitu merah tua atau merah bata.
3). Besi (III) klorida (FeCl3) 5%
Penelitian ini dilakukan dengan cara memipet larutan uji ke dalam plat tetes
dan menambahkan larutan besi (III) klorida (FeCl3) 5% dan mengamati perubahan
warna yang terjadi yaitu hijau kehitaman atau hijau kekuningan.
b. Uji Alkaloid
1). Pereaksi Mayer
Penelitian ini dilakukan dengan cara memipet larutan uji ke dalam plat tetes
dan menambahkan pereaksi mayer dan mengamati perubahan warna yang terjadi
yaitu endapan putih atau kuning kehijauan.
2). Pereaksi Wagner
Penelitian ini dilakukan dengan cara memipet larutan uji ke dalam plat tetes
dan menambahkan pereaksi wagner dan mengamati perubahan warna yang terjadi
yaitu endapan coklat atau jingga.
3). Pereaksi Dragendorff
Penelitian ini dilakukan dengan cara memipet larutan uji ke dalam plat tetes
dan menambahkan pereaksi dragendorff dan mengamati perubahan warna yang
terjadi yaitu endapan jingga.
c. Uji Steroid
Penelitian ini dilakukan dengan cara memipet larutan uji ke dalam plat tetes
dan menambahkan pereaksi Lieberman Burchard dan mengamati perubahan warna
yang terjadi yaitu hijau muda atau kuning.
40
d. Uji Terpenoid
Penelitian ini dilakukan dengan cara memipet larutan uji ke dalam plat tetes
dan menambahkan pereaksi Lieberman Burchard dan mengamati perubahan warna
yang terjadi yaitu merah, biru sampai ungu.
e. Uji Fenolik
Penelitian ini dilakukan dengan cara memipet larutan uji ke dalam plat tetes
dan menambahkan larutan besi (III) klorida (FeCl3) 1% dan mengamati perubahan
warna yang terjadi yaitu hijau atau biru kehitaman.
f. Uji Saponin
Penelitian ini dilakukan dengan cara memipet larutan uji ke dalam tabung
reaksi dan menambahkan aquades kemudian dipanaskan selama 5 menit selanjutnya
menghomogenkan dengan kuat secara vertikal selama 30 detik dan mengamati
terbentuknya busa yang stabil setinggi 1-10 cm selama 30 menit.
4) Uji Aktivitas Antibakteri Minyak Atsiri Kulit Buah Lemo Cuco
(Citrus sp.) menggunakan Metode Difusi Kertas Cakram
a. Sterilisasi Alat
Seluruh alat yang akan digunakan dalam penelitian dilakukan pencucian
hingga bersih dan dilanjutkan pengeringan. Alat kemudian di bungkus dengan
menggunakan kertas HVS selanjunya serilisasi dilakukan dengan menggunakan oven
pada suhu 180oC selama 2 jam (Widyaningsing, dkk., 2016).
b. Pembuatan Media Nutrient Agar (NA)
Ditimbang 1.125 gram NA dan dilarutkan dengan aquades 45 ml, kemudian
dipanaskan di atas hot plate sambil diaduk hingga homogen. Setelah itu, media di
autoklaf pada suhu 121°C selama 15 menit. Media diangkat dari autoklaf dan
ditunggu sampai media menjadi hangat (suhu ± 50°C). Selanjutnya media dituangkan
41
ke cawan peri dan tabung reaksi masing-masing sebanyak 16 mL dan
6 mL selanjunya didiamkan sampai media memadat (Warsito, dkk., 2017).
c. Peremajaan Bakteri
Peremajaan bakteri dimulai dengan menyiapkan media nutrien agar (NA)
steril. Peremajaan bakteri dilakukan dengan mengambil 1 ose kultur bakteri dengan
jarum ose dari stok kultur, kemudian dipindahkan ke media cawan petri dan media
agar miring. Selanjunya digoreskan berbentuk zig-zag pada permukaan, kemudian di
inkubasi pada suhu 37°C selama 1 hari (24 jam) (Warsito, dkk., 2017).
d. Pengenceran Minyak Atsiri dan Kontrol Positif
Mengencerkan minyak atsiri kulit Lemo Cuco (Citrus sp.) dengan
mennggunkan pelarut dimetil sulfoksida (DMSO) yang sudah disiapkan dengan
konsentrasi 20%, 10% , 5%, 2,5% dan 1.25% dalam 2 mL. Sedangkan kontrol positif
yang digunakaan antibiotik ampicillin (500 mg/tablet) untuk Stapilococcus aureus
dan antibiotik sefiksin (100 mg/tablet) untuk Salmonella typhi dibuat masing-masing
dalam konsentrasi 2% hingga volemenya menjadi 2 mL.
e. Pembuatan Suspensi Uji
Pembuatan suspensi uji dilakukan dengan pengukur nilai transmitan
menggunakan Spektofotometer UV pada panjang gelombang 580. Menyiapkan
natrium klorida (NaCl) fisiologis 0.9% sebanyak 10 mL kemudian mengambil
beberapa jarum ose dari stok kultur bakteri selanjutnya mencelupkan kedalam larutan
NaCl dan menghomogenkan sampai keruh. Selanjutnya Suspensi uji diukur
transmitannya sampai 25% T yang mengindikasikan jumlah koloni dalam suspensi
uji hampir sama dengan jumlah koloni 105-108 CFU/mL.
42
f. Pembuatan Media Uji
Pembuatan media uji menggunakan media muller hintom agar (MHA).
Menimbang media sebanyak 0,5440 gram dan dilarutkan dengan aquades 16 mL
kemudian dipanaskan di atas hot plate sambil diaduk hingga homogen. Setelah itu,
media di autoklaf pada suhu 121°C selama 15 menit. Media diangkat dari autoklaf
dan ditunggu sampai media menjadi hangat (suhu ± 50°C). Selanjutnya memipet
suspensi uji menggunakan mikropipet sebanyak 100 µL ke dalam media dan
menghomonkan kemudian dituang ke cawan petri selanjutnya di ratakan dengan
menggoyang-goyangkan diatas meja kerja dan didiamkan sampai media memadat.
g. Perendaman Kertas Cakram
Perendaman kertas cakram dilakukan dalam plat tetes. Menyiapkan plat tetes
yang telah dibeli label, mikropipet, minyak atsiri dengan berbagai konsentrasi,
kontrol positif dan kontrol negatif. Meletakkan kertas cakram dengan diameter 0,5
cm atau 5 mm diatas plat tetes selanjutnya memipet ekstrak, kontrol positif dan
kontrol negatif masing-masing 50 µL ke permukaan kertas cakram. Perendaman
dilakukan 30 sampai 60 menit dan dibiarkan menyerap sebelum diletakkan pada
media uji.
h. Penanaman Kertas Cakram
Menyiapkan media uji yang telah dibagi menjadi beberapa bagian dan diberi
label kemudian mengambil kertas cakram yag telah diserap dalam minyak atsiri,
dengan berbagai konsentrasi kontrol positif dan kontrol negatif menggunakan pinset
steril dan mengangin-anginkan sampai tidak ada lautan yang menetes. Selanjutnya,
Kertas cakram diletakkan di atas permukaan media uji menggunakan pinset dan
ditekan sedikit. Hal ini dilakukan sampai semua kertas cakram tertanam pada media
uji kemudian diinkubasi pada suhu 37oC selama 24 jam.
43
i. Pengukuran Daya Hambat
Pengukuran zona hambat dilakukan dengan menggunakan jangka sorong.
Mengukur zona bening sebanyak 3 kali pada sisi vertikal, horizontal dan diagonal
kemudian dijumlahkan dan dirata-ratakan. Luas hambatan ditentukan dengan cara
diameter keseluruhan (cakram + zona hambatan) dikurangi dengan diameter cakram
dan diameter zona hambat pelarut (jika pelarut memberikan zona hambat).
5) Karakterisasi Komponen Penyusun MInyak Atsiri Kulit Buah Lemo
Cuco (Citrus sp.) dengan GC-MS.
Minyak atsiri dianalisis mengunakan GC-MS dengan pengaturan sebagai
berikut : gas helium sebagai gas pembawa, kecepatan alir gas 1 mL/min, temperatur
injektor 300 sampai 180℃ pada 4 /min kemudian 180 sampai 250 pada 10. Spektra
massa direkam pada 30 sampai 450 m/z. (Saputra 2017). Alat GC-MS diaktifkan dan
diatur seluruh komponen yang terkait. Atur tampilan analisis, pilih sampel login pada
monitor sementara menunggu GC dan MS pada monitor dalam keadaan ready. Injek
sampel sebanyak 1 µL ke dalam autoinjektor. Jika grafik telah terlihat datar, analisis
GC dapat dihentikan dengan mengklik stop pada monitor. Puncak grafik
diidentifikasi akan menunjukkan komponen yang paling mirip dari beberapa
komponen dari bobot molekul serta tinggi intens peaknya.
44
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Hasil Penelitian
1. Ekstraksi
Hasil ekstraksi dapat dilihat pada tabel dibawah ini:
Tabel 4.1.Rendemen Minyak Atsiri Kulit Buah Lemo Cuco (Citrus sp.)
No. Bobot
Simplisia (g)
Volume
Pelarut (mL)
Bobot
Minyak (g) Rendemen (%) Keterangan
1. 50.0004 500 12.8805 25.8 Etanol
2. 50.0005 500 1.6027 3.2 n-Heksan
2. Uji Fitokimia
Uji fitokimia minyak atsiri kulit buahLemo Cuco(Citrus sp.)dilakukansecara
kualitatif. Hasil dapat dilihat pada tabeldi bawah ini:
Tabel 4.2.Uji Fitokimia Minyak Atsiri Kulit Buah Lemo Cuco (Citrus sp.)
No. Uji Kualitatif Sampel Uji
Senyawa Pereaksi Ekstrak Etanol Ekstrak n-Heksan
1. Flavonoid
NaOH 10% + +
FeCl3 5% + +
H2SO4 pekat + +
2. Alkaloid
Mayer + +
Wagner + +
Dragendorff + +
3. Steroid Lieberman Burchard + +
4. Terpenoid Lieberman Burchard + +
5. Fenolik FeCl3 1% + +
6. Saponin Aquades - +
Keterangan:
+ = Hasil Positif
- = Hasil Negatif
45
3. Uji Aktivitas Antibakteri Minyak Atsiri Kulit Buah Lemo Cuco
(Citrus sp.) menggunakan Metode Difusi Kertas Cakram
Uji Aktivitasini menggunakan minyak atsiri dari ekstraketanoldan ekstrak
n-heksankulit buah Lemo Cuco(citrus sp.)terhadap bakteri Staphylocuccus
aureusdanSalmonella typhi. Hasil dapat dilihat pada gambar dan tabeldi bawah ini:
Gambar 4.1.Uji terhadap Bakteri Stapilococcus aureus. A-E (Ekstrak n-Heksan 20%; 10%;
5%; 2.5% dan 1.25%), F-J(Ekstrak etanol 20%; 10%; 5%; 2.5% dan 1.25%), Kontrol
negatif (DMSO) dan Kontrol Positif (Antibiotik Ampicilin 2%).
Gambar 4.2.Uji terhadap Bakteri Salmonella typhi A-E (Ekstrak n-Heksan20%; 10%; 5%;
2.5% dan 1.25%), F-J(Ekstrak etanol20%; 10%; 5%; 2.5% dan 1.25%), Kontrol negatif
(DMSO) dan Kontrol Positif (Antibiotik Sefiksin 2%).
46
Tabel 4.3.Uji Aktivitas AntibakteriMinyak Atsiri terhadap Bakteri Stapilococcus aureus
No. Sampel Uji Konsentrasi
(%)
Diameter Zona
Hambat (mm)
Daya Hambat
(%) Keterangan
1. Ekstrak
n-Heksan
20 16.55 69.79 Kuat
10 12.39 59.65 Kuat
5 9.73 48.62 Sedang
2.5 7.47 33.10 Sedang
1.25 7.17 30.27 Sedang
2. Ekstrak
Etanol
20 8.39 40.41 Sedang
10 7.68 34.40 Sedang
5 6.62 24.47 Lemah
2.5 5.73 12.74 Lemah
1.25 5.38 7.10 Lemah
3. Kontrol Negatif 0 5.00 0.00 Tidak Aktif
4. Kontrol Positif 2 14.78 66.17 Kuat
Tabel 4.4.Uji Aktivitas AntibakteriMinyak Atsiri terhadap Bakteri Salmonella typhi
No. Sampel Uji Konsentrasi
(%)
Diameter Zona
Hambat (mm)
Daya Hambat
(%) Keterangan
1. Ekstrak
n-Heksan
20 13.08 61.77 Kuat
10 10.72 53.36 Kuat
5 8.61 41.93 Sedang
2.5 6.62 24.47 Lemah
1.25 5.69 12.13 Lemah
2. Ekstrak
Etanol
20 9.31 46.29 Sedang
10 5.51 9.26 Lemah
5 5.27 5.12 Lemah
2.5 5.00 0.00 Tidak Aktif
1.25 5.00 0.00 Tidak Aktif
3. Kontrol Negatif 0 5.00 0.00 Tidak Aktif
4. Kontrol Positif 2 14.31 65.10 Kuat
47
4. Karakterisasi Komponen Penyusun Minyak Atsiri Kulit Buah Lemo
Cuco (Citrus sp.) dengan GC-MS.
Hasil dapat dilihat pada tabel dibawah ini:
Tabel 4.5.Karakerisasi Komponen Penyusun Minyak Atsiri dari Ekstrak EtanolKulit Buah
Lemo Cuco (Citrus sp.) dengan GC-MS
No. Waku
Retensi % Area
Rumus
Molekul
Berat
Molekul Komponen Senyawa
1. 14.301 0.94 C15H24 204 β-Elemen
2. 15.558 4.69 C15H24 204 Germakren
3. 15.708 6.49 C15H24 204 α-Farnesen
4. 16.027 1.94 C15H24 204 δ-Kadinen
Tabel 4.6.Karakerisasi KomponenPenyusun Minyak Atsiri dari Eksrak n-Heksan Kulit Buah
Lemo Cuco (Citrus sp.) dengan GC-MS
No. Waku
Retensi % Area
Rumus
Molekul
Berat
Molekul Komponen Senyawa
1. 13.506 0.51 C10H16 136 α-Terpinen
2. 14.107 1.28 C15H24 204 kopaein
3. 14.747 1.73 C15H24 204 Kariofilen
4. 15.214 1.27 C15H24 204 α-Humulen
5. 15.564 6.43 C15H24 204 Germakren D
6. 16.027 2.86 C15H24 204 δ-Kadinen
7. 16.778 4.61 C15H22 204 Aromandendren
8. 17.334 3.33 C15H24O 220 Isospathulenol
9. 18.585 1.09 C15H26O 238 Oplopanon
10. 19.355 0.87 C15H22O 218 Nutkaton
11. 20.262 1.21 C17H34O2 255 Metil Palmitat
12. 21.951 0.75 C19H32O2 294 Metil Linoleat
H
delta -Kadinenbeta -Elemen Germakren
48
Gambar 4.3. Struktur Komponen Senyawa Minyak Atsiri dari Ekstrak Etanol
Kulit Buah Lemo Cuco (Citrus sp.)
alfa Farnesen
alfa Terpinen
HH
H
Kopein
CH3
H2C
CH3
CH3
H H
KariofilenHumulen
Germakren D
H
delta -Kadinen
49
Gambar 4.3. Struktur Komponen Senyawa Minyak Atsiri dari Ekstrak n-Heksan
Kulit Buah Lemo Cuco (Citrus sp.)
HH
H
H
Aromandendren
CH2
CH3H3C
HHO
H3C
H
H H
Isospatulenol
O
Nutkaton
O
OH
Oplopanon
O
O Metil Linoleat
O
OH
Metil Palmiat
50
B. Pembahasan
1. Preparasi Sampel
Sampel yang digunakan pada penelitian ini adalah buah Lemo Cuco
(Citrus sp). Bagian tanaman yang digunakan adalah kulit buah Lemo Cuco.
BuahLemo Cucodibersihkan sehingga tidak ada lagi zat pengotor yang menempel.
Selanjutnya, dipisahkan kulit dengan daging buahnya dan diiris kecil kemudian
dikeringkan pada suhu ruang. Tujuan dilakukannya pengeringan adalah untuk
mengurangi kadar air (Ketaren, 1985). Sampel dengan kadar air yang tinggi dapat
menyebabkan tumbuhnya jamur (Katno, 2008 dan Belitz, 2009).
Sampel kulit buah Lemo Cuco yang telah dikeringkan selanjutnya dilakukan
penggilingan untuk memperluas permukaan sampel. Semakin luas permukaan
sampel maka akan membuat lebih mudah menyerap pelarut (Wildan, dkk., 2012).Hal
ini juga dilakukan untuk memudahkan proses ekstraksi atau penarikan senyawa aktif
yang terkandung didalam simpilisia kulit buah Lemo Cuco.
2. Ekstraksi dengan Metode Soxhletasi
Ekstraksi soxhlet merupakan ekstraksi yang sederhana dan mudah dilakukan
untuk menarik senyawa volatil dari suatau sampel (Handayani dan Juniarti, 2012,
Handoko, dkk., 2017 dan Utomo, 2016).Penelitian ini menggunakan pelarut etanol
dan pelarut n-heksan. Pelarut etanol memiliki titik didih rendah sehingga lebih
mudah diuapkan dan dapat melarutkan senyawa dengan cepat serta memiliki harga
yang terjangkau (Inayah, dkk., 2012). Pelarut etanol memiliki gugus hidroksil yang
dapat mengikat senyawa-senyawa polar seperti flavonoid dan alkaloid (Markom,
dkk., 2007 dan Marnoto, dkk., 2012, Silalahi, dkk., 2018). Sedangkan pelarut n-
heksan termasuk pelarut non polar yang dapat mengikat senyawa-senyawa non polar
seperti Steroid dan terpenoid (Handayani dan Juniarti, 2012, Wahyuni, dkk., 2015).
51
Hasil ekstraksi soxhlet berupa minyak atsiri cair berwarna hijau tua
(Lampiran 4) yang selanjutnya dipekatkan dengan rotary evaporatoruntuk
memisahkan pelarut dengan minyak atsiri yang ditandai dengan menguapnya pelarut
(Muhlisin, dkk., 2015). Rendemen minyak atsiri kulit buah Lemo Cuco yang
diperoleh terdiri dari ekstrak etanol dan ekstrak n-heksan adalah 25.8% dan 3.2%
(Lampiran 3). Hasil yang diperoleh pada ekstrak etanol lebih besar sedangkan
ekstrak n-heksan lebih kecil daripada penelitian Munawaroh dan Handayani (2010)
yang memperoleh rendeman ekstraketanol dan ekstrak n-heksan dengan metode
ekstraksi soxhlet dari daun jeruk purut sebesar 13.39% dan 10.50%. Penelitian yang
sama dilakukan oleh Tumane, dkk., (2014) yang melakukan penelitian ekstraksi kulit
jeruk sebanyak 20 gram dengan pelarut 200 mL.sedangkan penelitian Hidayati
(2012) memperoleh rendeman ekstrak kulit jeruk sebesar 1.625% dengan
menggunakan metode destilasi uap dan Penelitian Pasaribu, dkk., (2015) juga
melaporkan bahwa rendemen minyak atsiri dari kulit jeruk Citrus nobilis sebesar
19.383% dengan metode maserasi. Banyaknya randemen yang dihasilkan bergantung
pada sifat kelarutan komponen bioaktif dan metode ekstraksi yang digunakan
(Prabowo, 2009).
3. UjiFitokimia
Berdasarkan tabel 4.2 dapat diketahui golongan senyawa yang terdapat pada
minyak atsirikulit buah Lemo Cuco. Hasil uji kualitatif menunjukkan bahwaminyak
atsiri dariekstrak etanol kulit buah Lemo Cuco mengandung golongan senyawa
fenolik, flavonoid, alkaloid, steroid dan terpenoid. Sedangkan minyak atsiri
dariekstrak n-heksan mengandung golongan senyawa fenolik, flavonoid,alkaloid,
steroid, terpenoid dan saponin.
52
Hasil identifikasi yang diperoleh sesuai dengan beberapa penelitian seperti
penelitian Javed, dkk., (2014) memaparkan hasil uji terhadap 5 jenis jeruk
mengandung beberapa golongan senyawa metabolit sekunder cukup tinggi.Penelitian
Trabelsi, (2014)juga melaporkan bahwa komponen penyusun kulit buah jeruk nipis
adalah tanin, flavonoid, polifenol, steroid dan alkaloid.Namun berbeda dengan
penelitian Ensamory (2017)yang mengungkapkan bahwa ekstrak kulit jeruk
mengandung senyawa flavonoid, fenol, Seroid, triterpenoid. Penelitian Abirami,
(2014) memaparkan buah jeruk mengandung senyawa tanin, flavonoid dan alkaloid,
dan penelitian Devy, dkk.,(2010)melaporkan bahwa jeruk kalamodin dan jeruk purut
mengandung senyawa flavonoid dan limonoid. Faktor umum yang dapat
mempengaruhi uji identifikasi senyawa antara lain perbedaan tempat tumbuh dan
iklim yang menyebabkan proses metabolisme berbeda (Sari, 2013).
4. Uji Aktivitas Antibakteri Minyak Atsiri Kulit Buah Lemo Cuco
(Citrus sp.).
Uji aktivitas antibakteri sebagai pengujian suatu senyawa yang digunakan
untuk mengendalikan pertumbuhan bakteri yang bersifat merugikan sehingga dapat
mencegah penyebaran penyakit dan infeksi serta mencegah pembusukan maupun
perusakan bahan yang disebabkan oleh bakteri.
Sampel uji yang digunakan pada penelitian ini adalah minyak atsiri kulit buah
Lemo Cuco (Citrus sp.)berupa ekstrak etanol dan ekstrak n-heksan. Masing-masing
ekstrak yang digunakan 0.8 g yang diencerkan menjadi beberapa konsentrasi yaitu
20%; 10%; 5%; 2.5% dan 1.25%. Pelarut yang digunakan untuk mengencerkan yaitu
dimetil sulfoksida (DMSO) karena pelarut ini mudah melarutkan senyawa organik
maupun anorganik sehingga suspensi sampel merata dan larut sempurna (Reynolds,
1996 dan Assidqi, dkk., 2012). Penelitian ini menggunakan dua uji kontrol yaitu
53
kontrol positif dan kontrol negatif. Kontrol positif yang digunakan antibiotik
ampicilin terhadap bakteri Stapilococcus aureus(Doreen, dkk., 2012) dan antibiotik
sefiksin terhadap bakteri Salmonella typhi(Trisharyanti, 2017). Sedangkan kontrol
negatif digunakan DMSO sebagai pembanding bahwa pelarut yang digunakan
sebagai pengencer tidak mempengaruhi hasil uji antibakteri ekstrak kulit buah Lemo
Cucu.
Pembuatan suspensi uji dilakukan dengan menggunakan larutan natrium
klorida (NaCl) fisiologis 0.9% yang ditambahkan dengan beberapa jarum ose dan
dihomogenkan agar suspensi larut sempurna. Selanjutnya, suspensi uji diukur jumlah
koloninya dalam satuan transmittan dengan menggunakan spektrofotometer UV pada
panjang gelombang 580. Pengukuran jumlah transmittan dilakukan sampai suspensi
uji diperoleh 25% T. Hal ini dapat diindikasikan sebagai suspense uji yang akan
digunakan uji aktivitas hampir sama dengan standar Mc Farlan 105- 108 CFU/mL
jumlah koloni.
Uji aktivitas antibakteri dalam penelitian ini menggunakan metode difusi
kertas cakram. Pemilihan metode ini digunakan karena mudah dan sederhana untuk
menentukan aktivitas antibakteri ekstrak yang di uji (Koneman, 2006 dan Ogioni,
dkk., 2015). Perendaman dilakukan selama 30sampai 60 menit hal ini dilakukan agar
larutan uji terserap sempurna ke dalam cakram. Kertas cakram yang telah diserap
diangin-angingkansampai tidak ada lagi yang menetes agar saat diinkubasi zona
hambat yang terbentuk tidak menyebar. Penanaman kertas cakram dilakukan diatas
media padat yang telah dicampur dengan suspensi uji. Pengerjaan uji aktivitas
dilakukan di dekat api agar tidak ada bakteri lain yang masuk kedalam cawan petri
yang dapat menyebabkan kontaminasi dalam media.Selanjutnyadiinkubasi pada suhu
54
37oC selama 24 jam. Suhu ini digunakan karena sebagai suhu optimum pertumbuhan
bakteri(Kenneth, 2012; Arifin, 2013 dan Darmawati, 2009).
Pengamatan dilakukan setelah diinkubasi untuk melihat zona bening disekitar
kertas cakram. Pengukuran zona hambat pada penelitian ini dilakukan selama 24 jam
untuk melihat adanya respon penghambatan pertumbuhan bakteri oleh senyawa
antibakteri dalam minyak atsiri kulit buah Lemo Cuco.Pengukuran zona hambat
menggunakan jangka sorong digital dengan dengan ketelitian 0.02 mm setiap skala.
Menghitung diameter zona bening yang terbentuk disekitar kertas cakram pada 3 sisi
yaitu vertikal, horizontal dan diagonal selanjutnya dirata-ratakan sebagai zona
hambat ekstrak uji (Arifin, 2013; Yuliana, 2012).
Bakteri yang digunakan pada penelitian ini adalahStapilococcus aureusdan
Salmonella typhi. Alasan penggunaan kedua bakteri ini kerena bakteri secara garis
besar dikelompokkan berdasarkan susunan dinding selnya menjadi 2 yaitu bakteri
gram positif dan bakteri gram negatif (Pelczar, 2008).
Struktur dinding sel bakteri gram positif berlapis dengan kandungan lipid
yang rendah (1-4%) sehingga memudahkan bahan bioaktif masuk kedalam sel
(Hawley, 2003), memiliki lapisan peptidoglikan pada bagian luarnya dan kurang
berperan sebagai pertahanan permiabilitas yang efektif (Scherer dan Gerhard, 1971).
Sedangkan bakteri gram negatif mengandung lebih sedikit lapisan peptidoglikan
(Volks dan Wheeler, 1984) dengan kandungan lipid yang tinggi (11-22%) yang
dinding selnya memiliki 3 lapisan (multilayer) yang terdiri dari lapisan lipoprotein,
fosfolipid dan lipopolisakarida yang menyebabkan dinding selnya sulit di penetrasi
oleh zat antibakteri (Silhavy, dkk., 2010; Nikaido dan Vaara, 1985; Nikado, 2003).
55
Berdasarkan tabel 4.3 hasil uji aktivitas antibakteri minyak atsiri kulit buah
Lemo Cuco yang diperoleh terhadap bakteri Stapilococcus aureus pada ekstrak
n-heksan dan ekstrak etanol mampu menghambat pertumbuhan bakteri. Hal ini dapat
diketahui dari diameter zona hambat dan daya hambatnya yang terbentuk setelah
diinkubasi selama 3x24 jam. Pada konsentrasi minyak atsiri dari ekstrak n-heksan
berturut-turut 20%; 10%; 5%; 2.5% dan 1.25% diperoleh diameter zona hambatnya
yaitu 16.55 mm; 12.39 mm; 9.73 mm; 7.47 mm dan 7.17 mm dengan masing-masing
daya hambat 69.79%; 59.65%; 48.62%; 33.10% dan 30.27%. Berdasarkan hasil yang
diperoleh tersebut dapat dikatakan bahwa minyak atsiri dari ekstrak n-heksan kulit
buah Lemo Cuco asal Kab.Sinjai mempunyai daya hambat terhadap pertumbuhan
bakteri Stapilococcus aureus.
Hasil pengukuran zona hambat minyak atsiridari ekstrak etanolterhadap
bakteri Stapilococcus aureusberturut-turut 20%; 10%; 5%; 2.5% dan 1.25%
diperoleh diameter zona hambatnya yaitu 8.39 mm; 7.68 mm; 6.62 mm; 5.73 mm
dan 5.638 mm dengan masing-masing daya hambat 40.41%; 34.40%; 24.47%;
12.74% dan 7.10%. Hasil tersebut sesuai dengan hasil penelitian yang dilakukan oleh
Sitorus (2015) dan Yuliana (2012) bahwa ekstrak etanol mampu menghambat
pertumbuhan bakteri Stapilococcus aureus.Penelitian yang sama juga dilakukan
Klangpetch, dkk., (2016) yang melaporkan bahwa aktivitas antibakteri ekstrak etanol
kulit jeruk purut memiliki zona hambat sebesar 9 mm terhadap bakteri Stapilococcus
aureus. Hal ini sesuai dengan penelitian Razak (2013) menyatakan bahwa semakin
tinggi konsentrasi jeruk nipis maka semakin baik daya hambatnya dan penelitian
Nurdin (2012) juga melaporkan hasil daya hambat terbaik pada konsentrasi tertinggi
25% terhadap bakteri Stapilococcus aureus.
56
Berdasarkan tabel 4.4 hasil uji aktivitas antibakteri minyak atsirikulit buah
Lemo Cuco yang diperoleh terhadap bakteri Salmonella thypi pada ekstrak n-heksan
dan etanol mampu menghambat pertumbuhan bakteri. Hal ini dapat diketahui dari
diameter zona hambat dan daya hambatnya yang terbentuk setelah diinkubasi selama
3x24 jam. Pada konsentrasi minyak atsiri dari ekstrak n-heksan berturut-turut 20%;
10%; 5%; 2.5% dan 1.25% diperoleh diameter zona hambatnya yaitu 13.08 mm;
10.72 mm; 8.61 mm; 6.62 mm dan 5.69 mm dengan masing-masing daya hambat
61.77%; 53.36%; 41.93%; 24.47% dan 12.13%. Berdasarkan hasil yang diperoleh
tersebut dapat dikatakan bahwa minyak atsiri dari ekstrak n-heksan kulit buah Lemo
Cuco asal Kab.Sinjai mempunyai daya hambat terhadap pertumbuhan bakteri
Salmonella typhi.
Hasil pengukuran zona hambat minyak atsiridari ekstrak etanol terhadap
bakteri Salmonella typhi berturut-turut 20%; 10%; 5%; 2.5% dan 1.25% diperoleh
diameter zona hambatnya yaitu 9.31 mm; 5.51 mm; 5.27 mm; 5.00 mm dan 5.00 mm
dengan masing-masing daya hambat 46.29%; 9.26%; 5.12%; 0.00% dan 0.00%.Hasil
penelitian tersebut sesuai dengan hasil penelitian yang dilakukan oleh Amin (2012)
dan Nanasomat (2005) bahwa ekstrak etanol mampu menghambat pertumbuhan
bakteri Salmonella typhi. Penelitian Widyaningsih, dkk., (2016) melaporkan bahwa
perasan kulit jeruk purut (Citrus hystrix Dc.) memiliki aktivitas daya hambat pada
konsentrasi 25% sampai 100% mempunyai rata-rata zona hambat sebesar 3.4 mm.
selain itu penelitian Pratiwi, dkk., (2013) mengungkapkan bahwa penurunan jumlah
koloni bakteri Salmonella typhi yang cukup tajam setelah diberikan konsentrasi
ekstrak kulit jeruk nipis (Citrus aurantifolium) 6.25% yang sejalan dengan penetilian
Taiwo (2007) bahwa ekstrak kulit jeruk nipis dapat mempengaruhi pertumbuhan
57
pada bakteri Stapilococcus sp, Salmonella sp, Escherichia coli, Slebsiella, Proteus sp
dan Pseudomonassp.
Perbedaan signifikan diperoleh antara zona hambat ekstrak uji terhadap
bakteri Stapilococcus aureus dan Salmonella typhi, Hal ini sesuai penelitian Latifa
(2008) melaporkan hasil ekstrak etanol buah belimbing lebih menghambat bakteri
gram positif dibandingkan bakteri gram negatif. Perbedaan ini disebabkan karena
adanya perbedaan sensitivitas yang tinggi yang ditandai dengan tingginya tingkat
hambatan yang dihasilkan oleh suatu senyawa antibakteri tertentu. Selain itu juga
dipengaruhi oleh beberapa faktor seperti toksisitas bahan uji, kemampuan difusi
bahan uji pada media, interaksi antara komponen medium dan kondisi lingkungan
mikro in vitro. Menurut siswandono dan soekakardjo (2000) kensentrasi suatu
sampel uji sebagai antibakteri merupakan penentu besar kecilnya kemampuan dalam
menghambat pertumbuhan mikroba uji. Adanya perbedaan dikarenakan adanya
perbedaan struktur dinding sel antara kedua bakteri yang mempengaruhi kerja
ekstrak (Chandrasari, dkk., 2012).
Hasil uji pada kontrol positif dengan menggunakan antibiotik ampicilin
terhadap bakteri Stapilococcusa aureus memberikan diameter zona hambat 14.78
mm dengan daya hambat 66.17%, pada bakteri Salmonella thypi menggunakan
antibiotic sefiksin yang memberikan diameter zona hambat 14.31 mm dengan daya
hambat 65.10%. Hasil yang diperoleh sejalan dengan penelitian Doreen,dkk., (2011)
dan Hidayah (2016) yang menggunakan ampicillin terhadap uji aktivitas bakteri
Stapilococcus aureus dengan diameter hambat 8 mm dan 10 mm. Ampicillin sebagai
antibiotik komersial dan termasuk salah satu jenis antibiotik penisilin yang bekerja
dengan cara menghambatsintesis dinding sel. Penelitian Trishardayanti dan Febriani
(2017) dan Rampengan (2013) juga melaporkan beberapa antibiotik yang sering
58
digunakan terhadap bakteri Salmonella thypi salah satunya antibiotik sefiksin.
Sefiksin termasuk antibiotik golongansefalosporin generasi ketiga oral mempunyai
aktifitas sebagai antimikroba termasuk Enterobacterisceae (Hadinegoro, dkk., 2001).
Hal ini menunjukkan bahwa antibiotik yang digunakan sensitif pada kedua bakteri
uji. Sedangkan hasil uji pada kontrol negatif terhadap kedua bakteri uji tidak
memberikan zona hambat. Hal ini menunjukkan bahwa penggunaan pelarut DMSO
tidak mempengaruhi hasil uji antibakteri dari minyak atsiri kulit buah Lemo Cuco.
Penelitian Novryanti, dkk., (2010) melaporkan pada uji infusa kulit jeruk
memiliki tingkat aktivitas daya hambat yaitu sangat kuat (daya hambat > 75%),
kuat (50 < daya hambat ≤ 75%), sedang (25 < daya hambat ≤ 50%), lemah (0 < daya
hambat ≤ 25%) dan tidak aktif (0). Berdasarkan tabel 4.3 dan 4.4 dapat diketahui
efek daya hambat pada minyak atsiridari ekstrak etanol dan ekstrak n-heksan kulit
buah LemoCuco terhadap bakteri Stapilococcus aureus termasuk kategori kuat
(konsentrasi 20% dan 10%) dan sedang (5%, 2.5% dan 1.25%). Sedangkan pada
minyak atsiri dari ekstrak etanol termasuk kategori sedang (20% dan 10%) dan
lemah (5%, 2.5% dan 1.25%). Daya hambat minyak atsiri dari ekstrak n-heksan
terhadap Salmonella typhitermasuk kategori lemah (1.25% dan 2.5%), sedang (5%)
dan kuat (10% dan 20%). Sedangkan minyak atsiri dari ekstrak etanol termasuk
kategori sedang (20%), lemah (10% dan 5%) dan tidak aktif (konsentrasi 5%, 2.5 %
dan 1.25%). Perbedaan diameter zona hambat yang dihasilkan disebabkan karena
adanya perbedaan komponen penyusun pada setiap bagian tanaman (Jamaluddin,
dkk., 2017).
59
Senyawa hasil uji fitokimia dengan uji kualitatif minyak atsiri dari ekstrak
etanol dan ekstrak n-heksan kulit buah LemoCuco memiliki potensi sebagai
antibakteri. Hal ini sesuai dengan beberapa penelitian tentang bahan aktif yang
terdapat pada kulit jeruk nipis yaitu minyak atsiri, fenolat, alkaloid, flavonoid,
saponin dan tanin (Cetin, 2011; Robinson, 1991; Cushnie; 2005 dan Hegerman,
2005). Penelitian Prastiwi dan Ferry (2016) dan Copryady (2015) juga melaporkan
kulit jeruk mengandung minyak atsiri yang terdiri dari golongan senyawa terpen,
sesquiterpen, aldehid, sterol dan ester.
Flavonoid dapat menghambat pertumbuhan bakteri dengan cara mengganggu
permeabilitas dinding sel yang akan menyebabkan lisis pada sel (Dewi, 2010),
karena kemampuannya berinteraksi dengan DNA bakteri dengan merusak ikatan
jembatan hidrogen dari untaian rantai ganda DNA sehingga merusak struktur lipid
dari DNA dan inti sel bakteri akan pecah serta mati (Charyadie, dkk., 2014).
Mekanisme kerja alkaloid sebagai antibakterimelalui penghambatan sintesis
dinding selyang akan menyebabkan lisis pada sel sehingga selakan mati (Lamothe,
dkk., 2009), dapat menganggu komponen penyusun peptidoglikan pada sel bakteri,
sehingga dinding sel tidak tebentuk utuh kematian sel (Robinson, 1991).
Mekanisme kerja terpenoid sebagai antibakteri salah satunya kandungan
monoterpen dan sesquiterpen dari minyak atsiri yang akan terakumulasi ke membran
sehingga merusak membran yang mengikat protein sel bakteri dan membentuk enzim
dari dalam sel (Sikkema, dkk., 1994; Trombetta, dkk., 2005).Triterpenoid bereaksi
dengan proteintransmembran pada dinding selbakteri, membentuk ikatan polimer
yang kuatsehingga mengakibatkan rusaknya porinsebagai pintu keluar
masuknyasenyawa dan mengakibatkan sel bakteri akankekurangan nutrisi, sehingga
pertumbuhannya akan terhambat atau mati (Amalia, dkk., 2008).
60
Mekanisme kerja steroid terhadap bakteri yaitu berinteraksi dengan membran
fosfolipidsel bersifat impermeabel terhadap senyawa-senyawa lipofilik sehingga
menyebabkan integritasmembran menurun, morfologi membran sel berubah dan
menyebabkan membran sel menjadi rapuhdan lisis (Amalia, dkk., 2008 )
Fenol memiliki kemampuan untuk mendenaturasikan protein dan merusak
membran sel (Rinawati, 2009). Mekanisme kerja senyawa fenol dalam menghambat
sel bakteri, yaitu dengan cara mendenaturasi protein sel bakteri, menghambat fungsi
selaput sel dan menghambat sintesis asam nukleat sehingga pertumbuhan bakteri
terhambat (Purwanti, 2007). Fenolat juga dapat menganggu integritas membran sel
dan sintesis komponen struktur bakteri dengan menonaktifkan enzim seluler (Cetin,
2011).
Saponin memiliki rasa pahit, berbusa dalam air dan bersifat antimikroba
dengan menurunkan tegangan permukaan dinding sel dan akan pecah (Widodo,
2005; Pratiwi, 2008), saat tegangan permukaan tergangguzat antibakteri akan dapat
dengan mudah masuk kedalam sel dan mengganggu metabolism (Karlina, dkk.,
2013).Saponin juga dapat menyebabkan pengikatan saponin dengan sterol (protein
bakteri), mengubah struktur dan fungsi membran, menyebabkan denaturasi protein
(Supardjo, 2008).
Mekanisme kerja tanin sebagai antibakteri dengan mengikat salah satu
protein membran bakteri sehingga merusak metabolisme sel bakteri. Tanin akan
membentuk kompleks senyawa dengan prolin yaitu protein bakteri lengkap yang
memiliki ikatan yang dapat menghambat sintesis protein dalam pembentukan dinding
sel (Hegerman, 2002)
61
5. Karakterisasi Komponen Penyusun Minyak Atsiri Kulit Buah Lemo
Cuco(Citrus sp.) denganGC-MS
Identifikasi minyak atsiri kulit buah Lemo Cuco(Citrus sp.)dengan
menggunakan GC-MS untuk mengetahui komponen penyusun yang terkandung
dalam minyak atsiri dari ekstrak etanol dan ekstrak n-heksan berdasarkan analisa
nama senyawa dan berat molekulnya.Hasil yang diperoleh berdasarkan tabel 4.5
(Lampiran 3) komponen senyawa yang terkandung dalam minyak atsiri dari ekstrak
etanol kulit buah Lemo Cuco terdiri dari komponen senyawa sesquiterpenoid yaitu
α-farnesen (C15H24) 6.49%,germacren (C15H24) 4.69%; δ-cadinen (C15H24) 1.94%
dan β-elemen (C15H24) 0.94%.
Hasil yang diperoleh berdasarkan tabel 4.6 (Lampiran 3)komponen senyawa
yang terkandung dalam minyak atsiri dari ekstrak n-heksan kulit buah Lemo Cuco
terdiri dari komponen senyawa monoterpenoid, sesquiterpenoid dan asam lemak
yaitu α-terpinen (C10H16) 0.51%, germakren D (C15H24) 6.43%, aromadendren
(C15H22) 4.61%, isospathulenol (C15H24O) 3.33%, δ-cadinena (C15H24) 2.89%,
karyopilen (C15H24) 1.73%, kopane (C15H24) 1.28%, α-humulena (C15H24) 1.27%,
oplopanon (C15H26O) 1.09%, nootkaton (C15H24O) 0.87%, metil palmitat (C17H34O2)
1,21% dan metil linoleat (C19H32O2) 0.75%. Berdasarkan hasil karakterisasi GC-MS
minyak atsiri dari ekstrak etanol dan minyak atsiri dari ekstrak n-heksan kulit buah
Lemo Cuco memiliki senyawa dominan adalah senyawa monoterpenoid dan
sesquiterpenoid.
Hasil yang diperoleh sesuai dengan beberapa penelitian seperti penelitian
Munawaroh dan handayani (2010) mengungkapkan komponen minyak atsiri adalah
sitronelal 65,99%, nerolidol 19.68%, trans karyopilen 8.61%, sabinen 2.07% dan
decane 0.66%. Penelitian lain seperti penelitianLoh, dkk., (2011),Kasuang, dkk.,
62
(2013), Khasanah, dkk., (2015) yang melaporkan komponen terbesar senyawa
minyak atsiri pada jeruk purut yaitu sitronelal 66. 85%, β-spinen 32.967%. Penelitian
yang sama telah dilakukan oleh Javed, dkk., (2014) mengungkapkan komponen
terbesar dari 5 jenis jeruk adalah limonen 87,84%, karvon 16.97% dan α-terpineol
12.16%. Penelitian Warsito dkk., (2017) juga melaporkan komponen senyawa
minyak atsiri kulit jeruk adalah limonen, β-pinen, sitronelal, α-terpineol, kopaen,
kadinen, karyophilen dan geranil asetat. Adanya perbedaan komponen senyawa
disebabkan karena tempat tumbuh dan iklim yang menyebabkan proses metabolisme
berbeda (Sari, 2013 dan Muntaha 2013).
Berdasarkan karakterisasi komponen penyusun minyak atsiri kulit buah Lemo
Cuco dengan GC-MS dari ekstrak etanol dan minyak atsiri dari ekstrak n-heksan
memiliki senyawa dominan adalah senyawa monoterpenoid dan sesquiterpenoid.
Hasil yang diperoleh mengindikasikan dapat digunakan sebagai antibakteri.
Beberapa penelitian sepertipenelitian Inouye (2001) dan Puvova (2008)
mengungkapkan bahwa minyak atsiri beberapa tanaman telah diketuhi berpotensi
sebagai antibakteri. Penelitian Rosyad (2009) dan Laksono (2014) juga melaporkan
senyawa aktif antibakteri dalam minyak atsiri daun jeruk nipis adalah senyawa
golongan terpen. Senyawa terpen bekerja sebagai antibakteri dengan merusak porin
yaitu protein pada bakteri sehingga pertumbuhan bakteri terhambat (Salni, dkk.,
2011). Penelitian Kindagen, dkk., (2018) juga memaparkan minyak atsiri memiliki
aktivitas antibakteri disebabkan karena minyak atsiri mengandung senyawa yang
dapat menghambat atau membunuh pertumbuhan bakteri. Perbedaan besar kecilnya
penghambatan yang dihasilkan bergantung pada sifat kelarutan komponen bioaktif
dan metode yang digunakan (Prabowo, 2009 dan Lingga, 2016).
63
BAB V
PENUTUP
A. Kesimpulan
Kesimpulan dari hasil penelitian ini adalah:
1. Aktivitas antibakteri minyak atsiri dari ekstrak etanol dan ekstrak n-heksan
kulit buah Lemo Cuco (Citrus sp.) terhadap bakteri Stapilococcus aureus
masuk kategori kuat dan sedang. Sedangkan dari ekstrak etanol termasuk
kategori sedang dan lemah. Daya hambat minyak atsiri dari ekstrak n-heksan
terhadap Salmonella typhi termasuk kategori lemah, sedang dan kuat.
Sedangkan dari ekstrak etanol termasuk kategori sedang, lemah dan tidak aktif
2. Komponen penyusun minyak atsiri kulit buah Lemo Cuco (Citrus sp.) dari
ekstrak etanol menunjukkan adanya senyawa α-farnesen, germakren, δ-kadinen
dan β-elemen, sedangkan ekstrak n-heksan menunjukkan senyawa δ-kadinen
germakren D, aromadendren, isospathulenol, kariofilen, kopain, α- humulen,
α-terpinen, oplopanon dan nutkaton, metil palmiat dan metil linoleat.
B. Saran
Saran dari penelitian ini adalah:
1. Sebaiknya peneliti berikutnya melakukan uji determinasi sampel dan uji
lanjut seperti NMR untuk mengetahui klasifikasi dan struktur senyawa murni
sampel dengan jelas.
2. Sebaiknya peneliti berikutnya menggunakan jenis pelarut lain seperti metanol
dan etil asetat serta bakteri lain untuk melihat perbedaan aktivitas terhadap
bakteri Stapilococcus aureus. dan Salmonella typhi. seperti yang dilakukan
dalam penelitian ini.
64
DAFTAR PUSTAKA
Al- Quran al-Karim.
Abirami, A., dkk. “The Medicinal And Nutritional Role of Underutilized Citrus Fruit-Cytrus hystrix (Kaffir Lime)”. Drug Invention Today 6, (2014). h 1-5.
Achmad, S.A, Kimia Organik Bahan Alam. Universitas Terbuka: Jakarta. 1986.
Adiyasa, dkk. “Efektivitas Jenis Pelarut dan Lama Ekstraksi Terhadap Karakteristik Concrete Minyak Atsiri Kulit Jeruk Mandarin (Citrus Reticulata)”. (2015).
Ajithkumar In,“Effect Of Citrus Hystrix And Citrus Limon Extracts On Antibacterial Activity Against Human Pathogens. As Pacific J Trop Biomed 7 no. 4, (2012): h. 1-4.
Aksara, Riska dkk. “ Identifikasi Senyawa Alkaloid dari Ekstrak Metanol Kulit Batang Mangga (Mangifera indica L)”. Jurnal Entropi 8, no 1 (2013): h. 514-519.
Alegantina, Sukmayati dan Isnawati, Ani. “Identifikasi dan Penetapan Kadar Senyawa Kumarin dalam Ekstrak Metanol Artemisia Annua L. Secara Kromatografi Lapis Tipis- Densitometri”. jurnal Penelitian Kesehatan 38, no. 1 (2010): h. 17-28.
Ali, dkk. “Antimicrobial Activity Of Lemon Peel (Citrus Limon) Extract”. International Journal Of Current Pharmaceutical Research 9, no. 4, (2017): h. 79-82.
Amalia, dkk “Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi N-Heksan Kulit Buah Naga Merah (Hylocereus polyrhizus Britton & Rose) terhadap Bakteri Staphylococcus aureus ATCC 25923. Fitofarmaka Indonesia, 1, no. 2 (2008).
Arifin, Haris Nursyah, dkk.” Antibacterial Ctivity Test Sea Cucumber Exctract (Holothuria scabra) Sidayu Coast Gresik Using Disk Diffusion Method”. Journal Alchemy 2, no. 2 (2013): h. 101-149.
Atun, Sri. “Metode Isolasi dan Identifikasi Struktur Senyawa Organik Bahan Alam”. Konservasi Cagar Budaya Borobudur. Vol. 8. no. 2 (2014): h. 53-61.
Belitz, dkk. “Springer Food Chemistry 4th Revised and Extended Editiom”. Biochemistry, 7, no. 9 (2009): h. 655-681.
Berlian dkk. “Penggunaan Perasan Jeruk Nipis (Citrus Aurantifolia) dalam Menghambat Bakteri Escherichia Coli Pada Bahan Pangan” Jurnal Bioilmi 2 no. 1 (2016): h. 99-107.
Bintang, Maria. Biokimia Teknik Penelitian. Jakarta: Erlangga, 2010.
Candrasari dkk “ Uji Daya Antimikroba Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah (Piper Crocatum Ruiz dan Puv.) terhadap Pertumbuhan Stapilococcus aures ATCC 6538, E coli ATCC 11229 dan Cadida albicans ATCC 10231 secara in vitro”. Biomedika, 4 no. 1 (2012): h. 9-16.
65
Chandarana, H, dkk. “ Comparison of Antibacterial Activities of Selected Spesies of Zingiberaceae Family and Some Synthetic Compounds”. Turkish Journal Biology 29 (2005): h. 83-97.
Chanthaphon, dkk.. “Antimicrobial Activities Of Essential Oils And Crude Extracts From Tropical Citrus Spp. Against Food-Related Microorganisms”, Songklanakarin J. Sci. Technol., 30 (2008): h. 125-131.
Charyadie. “Daya Hambat Ekstrak Daun Alpukat (Persea americana, Mill.) terhadap Pertumbuhan Enterococcus faecalis”. Denta Jurnal Kedokteran Gigi. 8 no.1 (2014): h. 2-8.
Chowdhury A, dkk. “Antimicrobial, Antioxidant And Cytotoxic Activities Of Citrus Hystrix Dc. Fruits”. Dhaka Un J Pharm Sci 8, no. 2 (2009): h.177-180.
Copriady, Jimmi dkk. “Isolasi dan Karakterisasi Senyawa Kumarin dari Kulit Buah Jeruk Purut (Citrus hystrix Dc)”. Jurnal Biogenesis 2, no. 1 (2005): h. 13-15.
Cushine. “Antimicrobial Activity Of Flavonoids”. International Journal Of Antimicrobial Agents, 26 (2005): H. 343-356.
Devy, dkk. “ Kandungan Flavonoid dan Limonoid pada Berbagai Fase Pertumbuhan Tanaman Jeruk Kalamodin (Citrus mitis Blanco) dan purut (Citrus hystrix DC)”. J.Hort 20, no. 1 (2010): h. 360-367.
Dewi, Kurnia Harlina. “Pengaruh Kecepatan Sentrifugasi pada Proses Pemisahan Hasil Ekstrak Teripang Pasir (Holothuria scabra) Sebagai Sumber Testosteron Alami dan Antigen”. Jurnal Pengembagan Teknologi Kimia (2010): h. 1693-4393.
Dongmo, dkk. “Essential oils of Citrus aurantifolia from Cameroon and their antifungal activity against Phaeoramularia angolensis”. African journal of Agricultural Research 4, no. 4 (2009): h. 354-358.
Doreen S., dkk. “Preliminary Evaluation on the Antibacterial Activity of Citrus hystrix oil Emulsions Stabilized by Twen 80 and Span 80”, International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Science 3. no. 2 (2011): h. 209-211.
Drozd, J “Chemical Derivatization in Gas Chromatography”, Journal of Chromatography Library, 19 ., 1985,
Ekawati, Evy Ratnasari. “Pemanfaatan Kulit Buah Jeruk Nipis (Citrus Aurantifolia) Sebagai Larvasida Aedes Aegypti Instar Iii”. Jurnal Biota. 3 no. 1 (2017).
Ensamory, dkk. Aktivitas Antijamur Infusa Kulit Buah Jeruk Siam (Citrus nobilis) terhadap Aspergillus niger EMP1 U2. Labora Medika. 1, no. 2(2017):h. 6-13.
Ergina, dkk. “Uji Kualitatif Senyawa Metabolit Sekunder Pada Daun Palado (Agave Angustifolia) Yang Diekstraksi Dengan Pelarut Air Dan Etanol” J. Akad. Kim. 3, no.3 (2014):h. 165-172.
Fajriati, “Optimasi Metode Penentuan Tanin (Analisis Tanin secara Spektrofotometri dengan Pereaksi Orto-Fenantrolin)”. Kaunia, (2006): h. 107-120.
Fitrianti, Annisa E. “Penentuan Kadar Minyak Atsiri Kulit Jeruk Sunkist (Citrus sinensis L. Osbeck) sebagai Alternatif Peluruh Sterofoam Alami”. IJPST 3, no. 2 (2016): h. 47-52.
66
Friatna, Eza Ria, dkk. “Uji Aktivitas Antioksidan Pada Kulit Jeruk Manis (Citrus Sinensis) Sebagai Alternatif Bahan Pembuatan Masker Wajah”. (2008).
Haeria. Kimia Produk Alami. Masassar: Alauddin Press, 2014.
Hakim, Aliefma. “ Pengembangan Keterampilan Generik Sains, Keterampilan Berpikir Kritis, Dan PemahamanKonsep Mahasiswa Melalui Praktikum Proyek Mini Kimia Bahan Alam”. 2014.
Hammado, dkk. “ Identifikasi Senyawa Bahan Aktif Alkaloid pada Tanaman Lahuna (Eupatorium odoratum)”. Jurnal Dinamika, 4. no. 2 (2013): h.1- 18.
Handoko, dkk. “Studi Efektivitas Ekstraksi (Capsaicin) dari Cabai (Capsicum) Dengan Metode MASE (Microwave Assisted Soxhlet Extraction)”. Jurnal Teknik 6, no. 2 (2017): h. 384-386.
Harborne, J.B. Metoda Fitokimia Penuntun Cara Menganalisa Tumbuhan. Edisi II, ITB, Bandung: 1987.
Hayu. dkk. “Pengaruh Konsentrasi Minyak Atsiri Kulit Buah Jeruk Purut (Citrus hystrix DC) dalam Pasta Gigi Terhadap Karakteristik Fisik dan Daya Antibakteri Streptococcus Mutan”. Farmasuetik 9. no. 1 (2013): h. 243-247
Henderson, dkk. “ Antimicrobial Activity Of Lemon (Citrus Limon) Peel Extract Against Escherichia Coli”. American Scientific Research Journal For Engineering, Technology, And Sciences 39, no 1 (2018):h.268-273.
Hidayah, dkk “uji efektifitas ekstrak sargasum muticum sebagai alternative obat bisul akibat aktivitas Stapilococcus aures “ Creativity studienst 1 no. 1 (2016): h. 1-9.
Hidayati. “Distilasi Minyak Atsiri dari Kulit Jeruk Pontianak dan Pemanfaatannya dalam Pembuatan Sabun Aromaterapi”. Jurnal Biopropal Industri 3, no. 2 (2012): h. 39 49.
Ilyas, Asriani. Kimia Organik Bahan Alam. Makassar: Alauddin Press, 2013.
Imani, Allamah Kamal Faqih. Tafsir Nurul Quran. Terj. Muhammad, Ahsin. Jakarta: Al-Huda, 2006.
Inayah, Nurul, dkk. “Uji Toksisitas dan Identifikasi Awal Golongan Senyawa Aktif Ekstrak Etanol dan n-heksan Teripang Pasir (Holothuria scabra) Kering Pantai Kenjeran Surabaya”. Jurnal Alchemy 2, no. 1 (2012).
Inouye. “Antibacterial activity of essential oil and their major constituents against respiratory by gaseous contact”. Journal of Antimicrobial Chemoterapy 4, no. 7 (2001): h. 565-573.
Jamaluddin, Nasrullah. “Uji Aktivitas Antibakteri Minyak Atsiri Jeruk Purut (Citrus hystrix DC) terhadap Klebsiella pneumoniae ATCC”. Jurnal Teknologi dan Manajemen Agroindustri 6, no. 2 (2017): h.61-66.
Jannata, dkk. “ Daya Antibakteri Ekstrak Kulit Apel Manlagi (Malus sylvestris Mill) terhadap Pertumbuhan Sterptococcus mutans”. Jurnal Kesehatan 2, no. 1 (2014): h. 23-28.
67
Karlina, “Aktivitas Antibakteri Ekstrak Herba Krokot (Portulaca oleracea L.) terhadap Staphylococcus aureus dan Escherichia coli”. Lentera Bio, 2 no. 1 (2013): h. 87–93.
Katsir, Ibnu Al-Misbaahul Muniir fii Tahdziibi Tafsiiri Ibni Katsiir. Jakarta: Pustaka Ibnu Katsir, 2010.
Kawiji, dkk. “Ekstraksi Maserasi Oleoresin Daun Jeruk Purut (Citrus Hystrix Dc): Optimasi Rendemen Dan Pengujian Karakteristik Mutu”. Jurnal Agritech 35, no. 2 (2015): h. 178-184.
Kementerian Agama RI. al-Quran dan Terjemahnya. Suabaya: PT. Sukses Publishing, 2011
Khafidhoh Zakiyatul dkk “Efektivitas Infusa Kulit Jeruk Purut (Citrus Hystrix Dc.) Terhadap Pertumbuhan Candida Albicans Penyebab Sariawan Secara In Vitro” The 2nd University Research Coloquium (2015): h.31-37.
Kharismayanti,” Uji Antibakteri Minyak Atsiri Daun Jeruk Nipis terhadap Porpphromonas gingivalis ATCC secara in vitro”. fakultas kedokteran gigi. 2015
Khasanah, Lia Umi, dkk. “Pengaruh Perlakuan pendahuluan Terhadap karakteristik Mutu Minyak AtsirinDaun Jeruk Purut (Citrus hystrix DC)”. Jurnal Aplikasi teknologi Pangan 4, no. 2 (2015): h. 48-55.
Kindangen, dkk. “Uji Aktivitas Antibakteri Minyak Atsiri Kulit Buah Jeruk Kalamansi (Citrus Microcarpa Bunge.) Terhadap Bakteri Staphylococcus Aureus Dan Escherichia Coli” Pharmaconjurnal Ilmiah Farmasi–Unsrat 7, no. 4 (2018): h. 62-68
Klangpetch W, “Antibacterial And Antioxidant Effects Of Tropical Citrus Peel Extracts To Improve The Shelf Life Of Raw Chicken Drumettes”. Int Food Res J 3, no. 2 (2016):h.700-707.
Kojong dkk. Uji Kualitas Minyak Biji Adas (Foeniculum vulgare) yang diperoleh dengan Metode Soxhletasi. Jurnal MIPA Unsrat. 2. no. 2 (2013): h. 124-127.
Kurniawan, Adityo. “Ekstraksi Minyak Kulit Jeruk dengan Metode Distilasi, Pengepresan dan Leaching”. Jurnal Teknik 7, no. 1 (2008): h.15-24.
Kurniawan, Deddy dan Arifan, Fahmi. “Pengaruh Lama Penyulingan Terhadap Rendemen Minyak Jeruk Purut Menggunakan Distilasi Vakum”.
Ladytama, Rr. Sarah dkk., “Efektivitas Larutan Ekstrak Jeruk Nipis (Citrus Aurantifolia) Sebagai Obat Kumur Terhadap Penurunan Indeks Plak Pada Remaja Usia 12 – 15 Tahun - Studi Di Smp Nurul Islami, Mijen, Semarang”. Odonto Dental Journal 1.no 1. (2014): h. 39-43.
Laksono, dkk. “Isolasi dan Uji Antibakteri Senyawa Terpenoid Ekstrak N-Heksana Rimpang Lengkuas Merah (Alpinia purpurata)”. Jurnal Kimia Sains dan Aplikasi 17, no. 2 (2014): h. 37-42.
Lamothe, dkk “Plant Antimicrobial Agents and Their Effects on Plant and Human Pathogens”. International Journal of Molecular Sciences. no.10 (2009): h. 3400-3419.
68
Lathifah. “Uji Efektifitas Ekstrak Kasar Senyawa Antibakteri pada Buah Belimbing Wuluh (Everrhoa bilimbi L.) dengan Variasi Pelarut”. Skripsi. Fakulas Sainstek UIN Malang, 2008
Lemes dkk. “Chemical composition and antibacterial activity of essential oils from Citrus aurantifolia leaves and fruit peel against oral pathogenic bacteria”. An Acad Bras Cienc. 90, no. 2 (2018): h. 1285-1294.
Lenny, Sovia. “ Senyawa Terpenoid dan Steroid”. Skripsi. FMIPA: Universitas Sumatra Utara, 2006.
Lestari, Ayu. dkk “Uji Bioaktivitas Minyak Atsiri Kulit Buah Jeruk Pontianak (Citrus Nobilis Lour) Terhadap Rayap Tanah (Coptotermes Curvignathus Sp)”. 3, no. 2 (2014):h. 38-43.
Lingga, dkk. “Uji Antibakteri Ekstrak Batang Kecombrang (Nicolaia Speciosa Horan) Terhadap Staphylococcus Aureus Dan Escherichia Coli”. Jom Faperta 2, No. 2 (2016): h. 1-15.
Liu, Yuanyan, dkk. “Study on essential oils from four species of Zhishi with gas chromatography–mass spectrometry”. Chemistry Central Journal 8, no.1 (2014): h. 8-22.
Luangnarumitchai, dkk. “Antimicrobial Activity Of Essential Oils Against Five Strains Of Propionibacterium Acnes”, Mahidol University Journal Of Pharmaceutical Sciences 34, no. 1 (2007): h. 60-64.
Maharani, Tiah. dkk. : Karaktrisasi Senyawa Hasil Isolasi dari Ekstrak Etil Asetat Daun Namnam (Cynometra Caucliflora L) yang Memiliki Aktivitas Antibakteri”. Jurnak Kimia Valensi, Jurnal Penelitiajn dan Pengembangan Ilmu Kimia 2, no. 1 (2016): h. 55-62.
Markom, dkk. “Extraction Of Hydrolysable Tannins From Phyllanthus Ninuri Linn: Effects Of Selvents And Exctraction Methods”. Separation And Purification Technology 5, no. 2 (2007): h. 487-496.
Marlina, dkk. “Isolasi Dan Identifikasi Senyawa Metabolit Sekunder Ekstrak n-Heksan Batang Brotowali (Tinospora crispa Linn)”. (2000): h.77-84.
Marnoto, dkk. “Ekstraksi Tannin sebagai Bahan Pewarna Alami dari Tanaman Putrimalu (Mimosa Pudica) Menggunakan Pelarut Organik”. Reaktor 14, no. 1 (2012): h. 39-45.
Megawati, Rizky Farah. Analisis Mutu Minyak Atsiri Bunga Cengkeh (Syzygium Aromaticum (L.) Meer. & Perry) dari Maluku, Sumatera, Sulawesi dan Jawa dengan Metode Metabolomic Berbasis Gc-Ms. (2010):h. 1-52.
Miftahendrawati. “Efek Antibakteri Ekstrak Daun Jeruk Purut (Citrus hystrix) Terhadap Bakteri Streptococcus Mutans (In Vitro)”. Skripsi. Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Hasanuddin. 2014.
Miftakhurohmah, dkk.“Efektivitas Formula Minyak Serai Wangi Terhadap Pertumbuhan Kapang Asal Buah Merah Dan Sambiloto”Buletin Penelitian Tanaman Rempah Dan Obat. 19, no. 2 (2008): h.138-144.
69
Montemayor, dkk. “Chemical Compodition of hexane Exctract of Citrus Aurantifolia and Anti-Microbacterium tuberculosis Activity of Same og Its Consitutien”. Jurnal Moleculer no. 17 (2012).
Muhlisin, dkk. “Uji Performansi dan Keseimbangan Massa Evaporator Vakum Double Jacket Tipe Water Jet dalam Proses Pengolahan Gula Merah Tebu (Saccharum officinarum L.)”. Jurnal Keteknikan Pertanian Tropis dan Biosistem 3, no. 1 (2015): h. 24-36.
Muhtadin dkk. Pengambilan Minyak Atsiri dari Kulit Jeruk Segar dan Kering dengan Menggunakan Metode Steam Distillation. Teknik Pomits 2, no. 1 (2013): h. 99-103.
Mukhriani. “Ekstraksi, Pemisahan Senyawa, dan Identifikasi Senyawa Aktif”. Jurnal Kesehatan 7. no. 2 (2014): h. 361-367.
Munawaroh, dkk. “Ekstraksi Minyak Daun Jeruk Purut (Citrus Hystrix D.C.) dengan Pelarut Etanol dan N-Heksana”. Jurnal Kompetensi Teknik 2, no.1 (2010): h. 73-78.
Nasrudin. dkk. “Isolasi Senyawa Steroid Dari Kukit Akar Senggugu (Clerodendrum Serratum L.Moon)”. Jurnal Ilmiah Farmasi . 6. no. 3 (2017): h. 332-340.
Nathanael, dkk. “Uji Aktivitas Sitooksik Ekstrak Kulit Jeruk Purut (Citrus hystrix) pada Sl Hela Cervical Cancer Cell Line”. Skripsi, Fakultas Biologi UGM, 2015.
Negri, dkk.” Early State Research on Antifungal Natural Products (Review). Molecules, 2014. 2925-2956.
Nurcahyo, Heru. “Formulasi Minyak Atsiri Daun Jeruk Purut (Citrus Hystrix D.C.) Sebagai Sediaan Aromaterapi”. Pancasakti Science Education Journal 1, no. 1 (2016): h. 7-11.
Nurdin, Muhammad, dkk. “Penentuan Pelarut Terbaik dalam Mengekstrak Senyawa Bioaktif dari Kulit Batang Artocarpus heterphyllus”. Sains dan Teknologi Kimia 1, no. 2 (2010): h. 150-158.
Nuryoto, dkk. “KarakterisasiMinyak Atsiri dari Limbah Daun Cengkeh”. Prosiding Seminar Nasional Teknik Kimia “Kejuangan” (2016): h. 1-4.
Ogioni, dkk. “ Significant Differences Characterize The Correlation Coefficients Between Biocide And Antibiotic Susceptibility Prifiles In Streptococcus aureus”. Curr Pharm 12, no. 16 (2015): h. 25-47.
Pasaribu, dkk. Uji Aktivitas Antijamur Ekstrak Minyak Atsiri Kulit Jeruk Citrus Nobilis var. microcarpa Terhadap Pertumbuha Jamur Schizophyllum commune Fries. Hutan Lestari 3, no. 2 (2015): h. 259 – 264.
Pauvova. “Effectivity of Plant Essential Oils Against Clavibacter michiganensis, in Vitro”. Zemdirbyste-Agriculture 95, no. 3 (2008): h. 440–446.
Pelczar dan Chan. Dasar-dasar Mikrobiologi Jilid 2. Terj. Hadioetomo, dkk. Jakarta: Universitas Indonesia. 1988.
Prastiwi dan Ferry. “Kandungan dan Aktivitas Farmakologi Jeruk Nipis (Citrus aurantifolia). Jurnal Agroteknologi 6, no. 2 (2016).
70
Prastiwi dan Ferry. “Kandungan Dan Aktivitas Farmakologi Jeruk Nipis (Citrus Aurantifolia S.)”. Farmaka Suplemen 15, no. 2 (2003): h. 1-8.
Pratiwi S I, “Aktivitas Antibakteri Tepung Daun Jarak (Jatropha curcas L.) pada Berbagai Bakteri Saluran Pencernaan Ayam Broiler Secara in vitro. Skripsi, Fakultas Peternakan, Institut Pertanian Bogor, 2008.
Pratiwi, Donna, dkk. “Efek Antibakteri Ekstrak Kulit Jeruk Nipis (Citrus Aurantifolia) terhadapa Salmonella typhi Secara In Vitro “. 9, no. 2 (2013): h. 110-115.
Pratiwi, R. “Perbedaan Daya Hambat Terhadap Streptococcus Mutans Dari Beberapa Pasta Gigi Yang Mengandung Herbal. Majalah Kedokteran Gigi 38 no. 2 (2005): h. 64-67.
Purwanti E. “Senyawa Bioaktif Tanaman Sereh (Cymbopogon nardu) Ekstrak Kloroform dan Etanol serta Pengaruhnya terhadap Mikroorganisme Penyebab Diare. Skripsi. Fakultas Pendidikan Biologi dan Ilmu Pendidikan. Universitas Muhammadiyah Malang, 2007.
Ratseewo, dkk. “ Changes in Antioxidant Proprties and Volatile Compounds of Kaffirl Lime Laf as Affected by Cooking Processes”. International Food Reserch Journal 23, no. 1 (2016):h. 188-196.
Rinawati ND. “Daya Antibakteri Tumbuhan Majapahit (Crescentia cujete L) Bakteri Vibrio alginolyticus. Skripsi, FMIPA. ITS, 2009.
Robinson, T. Kandungan Organik Tumbuhan Tinggi. ITB 1995.
Rosyad. “ Formulasi Sedian gel obat jerawat minyak atsiri daun jeruk nipis (citrus aurantifolia) dan uji daya antibakteri secara in vitro” 2009.
Rusli Taty Rusliati. “(Thickening Agent Effect On The Essential Oil Of Rind Lime (Citrus Hystrix Dc) In Deodorant )”. Jurnal Ilmu Kefarmasian Indonesia 14, no. 1 (2014): h.80-85.
Rusli. “Uji Anti Septik Deodoran Minyak Atsiri Dari Kulit Buah Jeruk Purut (Citrus Hystrix Dc)”. JRSKT, 4, no. 2 (2014): h. 394-397.
Samejo, dkk. “Isolation And Characterization Of Steroids From Calligonum Polygonoides”., Jurnal. Pharmacy Res. 6 (2013): h. 346-349.
Sapsuha, dkk.” Pemanfaaan Tanaman Herbal Sebagai Pyrobioik pada Kelompok Peernek Broiler Di Desa Akekolano Kecamatan Oba Utara untuk Mendorong Ketersediaan Daging Broiler Organik Di Provinsi Maluku Utara”. Jurnal Pengabdian Kepada Masyaraka Bidang Kewirausahaan. 1 no. 2 (2018): h. 45-51.
Saputra dkk. Kandungan Kimia Minyak Atsiri dari Kulit Buah Jeruk Bali (Citrus Maxima) Serta Uji Aktivitas Antibakteri Terhadap Staphylococcus Aureus Dan Escherichia Coli. Jurnal Kimia. 11. no. 1 (2017): h. 58-62.
Sayuti, dkk.” Uji Aktivitas Antibakteri Kombinasi Minyak Atsiri Lempuyang wangi (Zingiber aromaticum Val.) dan Bagle (Zingiber cassumunar Roxb.) terhadap bakteri Stapylococcus aureus dan Escherichia coli ”. (2014).
71
Setyawan, Ahmad Dwi.“Status Taksonomi Genus Alpinia Berdasarkan Sifat-Sifat Morfologi, Anatomi dan Kandungan Kimia Minyak Atsiri”. Jurnal Bio SMART 1, no. 1 (1999): h. 31-40.
Setyowati, Ratnaning. “Uji Aktivitas Antiplatelet dan Trombolitik Ekstrak Etanol Kulit Buah Jeruk Purut (Citrus hystrix DC) In Vitro”. Skripsi. Fakultas Farmasi Universitas Jember (2016): h. . 1-50.
Shihab, M. Quraish. Tafsir Al Mishbah: Pesan, Kesan dan Keserasian Al Qur’an. Jakarta: Lentera Hati, 2002.
Shivani, et al. “Antimicrobial Activity Of Lemon Peel Extract Against The Bacterium Belonging To The Genus Xanthomonas”. International Journal Of Pharmaceutical Sciences Review And Research. 45, no. 2 (2017): h. 251-254.
Siadi, K “Ekstrak Bungkil Biji Jarak Pagar Ȍjatropha Curcasȏ Sebagai Biopestisida Yang Efektif Dengan Penambahan Larutan Nacl”. Jurnal Mipa 35, no.1 (2012): h. 77-83.
Siburian, Rikson. “ Isolasi Dan Identifikasi Komponen Utama Minyak Atsiri Dari Kulit Buah Jeruk Manis (Citrus Sinensia L Asal Timor Nusa Tenggara Timur”. Jurnal Natur Indonesia 11, No. 1 (2008): h. 8-13.
Silalahi, dkk. “Isolation of Alkaloid Compounds from Ethanol Extract of Rimpang Galang Merah (Alpinia purpurata (Vielli) K. Schum) and nanoparticle production from its Alkaloid Extract. Comparative Study of Antibacterial Properties on Staphylococcus aureus and Eschericia coli”. Jurnal Kimia Sains dan Aplikasi 21, no. 1 (2018): h. 1 – 7.
Siswandono dan soekardjo Kimia Medicinal. Surabaya : UN AIR press, 2000: h.115-142.
Sitorus, Asrika Mutiara. “Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak n-heksan, Etil asetat dan Etanol Teripang di Pulau Sumatra Utara (Holothuria scabra Jaeger)terhadap Stapilococcus aureus dan Pseudomonas aeuginosa”. Jurnal Pharmacology (2015).
Sparkman, O.D., Penton, Z., Fulton, G., Gas chromatography and mass spectrometry a practical guide, Elsevier.
Sukardi, dkk. “ Penerapan Peef Pada Ekstrak Minyak Atsiri Daun Jeruk Purut (Citrus Hystrix) Dengan Metode Destilasi Air Dan Uap.
Susanti, dkk. “Pengaruh Pemberian Berbagai Kulit Jeruk Sebagai Repelensi Kutu Beras (Sitophilus Oryzae L.) Dan Sumbangsihnya Pada Materi Hama Dan Penyakit Pada Tanaman Dikelas VIII”. Bioilmi 4, no. 2 (2018): h. 110-122.
Svehla G. Textbook Of Macro and Semimicro Qualitative Inorganic Analisis. terj. Setiono dan Handayana Pujatmaka, Teks Analisis anorganik Kualitatif Makro dan Semimikro Edisi Revisi, Jakarta: PT. Kalma Media Pustaka, 1985.
Tanaya, Vivi, dkk. “Fraksi Semi Polar dari Daun Mangga Kasturi (Mangifera casturi Kosterm)”. Pendidikan Kimia, 1, no. 1 (2015): h. 778-784.
72
Tanzil, Lisawati dkk. “Antidandruff Activityof Extracts From Kaffir Lime (Citrus Hystrix Dc.) Prepared By Different Solvents”. Teknologi Dan Seni Kesehatan. 8 no. 1, (2017) :h.57-62
Tjitrosoepomo Taksonomi Tumbuhan Obat-obatan. Yogyakarta: Gadjah Mada University Press, 2010.
Trabelsi, dkk. “Antioxidant anf Antimicrobial Activity of Essensial Oil and Methanolic Extract of Tunisian Citrus aurantium L”. Journal of Environmen Sience and Tecnology and Food Tecnology. 8, no. 5 (2014): h. 18-27.
Trisharyanti, Ika. “ Skrining Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun terhadap Salmonella Typhi Resisten Kloramfenikol”. Journal of Pharmaceutical Science and Chemycal Reserch. 2 (2017): h. 66-77.
Tuasikal. “Daya Hambat Infusa daging Buah pala terhadap Pertumbuhan Candida albicans Penyebab Sariawan. Skripsi fakultas analisis kesehatan 2016
Tumane, dkk. “Comparative Study Of Antibacterial Activity Of Peel Extracts Of Citrus Aurantium L. (Bitter Orange) And Citrus Medica L. (Lemon) Against Clinical Isolates From Wound Infection”. International Journal of Pharma and Bio Sciences, 5 no. 1 (2014): h. 382-387.
Tunjung, dkk. “Anti Cancer Effect of Kaffir Lime (Citrus hystrix DC) Leaft Extract in Cervical Cancer and Neuroblastoma Cell Lines”. Procedia Chemistry 14 (2015): h. 465-468.
Utomo, Suratmin. “Pengaruh Konsentrasi Pelarut N-Heksan Terhadap Randemen Hasil Ekstraksi Minyak Biji Alpukat Untuk Pembuatan Krim Pelembab Kulit”. Jurnal Konversi 5, no. 1 (2016): h. 39-47.
Wahyuni. “Pengaruh Suhu dan Proses Lama Pengendapan terhadap Kualitas Biodisel dari Minyak Jelantah”. Jurnal (2015): h. 5.
Warsito, dkk. “Aktivitas Antioksidan Dan Antimikroba Minyak Jeruk Purut (Citrus Hystrix Dc.) Dan Komponen Utamanya”. Journal Of Environmental Engineering & Sustainable Technology. 4 no. 1 (2017): h 13-18
Warsito, dkk. “Microencapsulation Of Cytrus Hystrix Oil And Its Activity Test As An Antimicrobial Agent” Journal Of Environmental Engineering & Sustainable Technology 4 no. 2, (2017): h.131-137
Wibaldus, dkk. “Bioaktivitas Minyak Atsiri Kulit Buah Jeruk Nipis (Citrus Aurantifolia) Terhadap Rayap Tanah (Coptotermes Sp.)” Jkk, 5 no. 1 (2016): h. 44-51.
Widyaningsih, dkk. “Efek Antibakteri Perasan Kulit Jeruk Purut (Citrus Hystrix) Terhadap Pertumbuhan Salmonella TYPHI Secara In Vitro”. Prosiding (2016).
Wongsariya, dkk. “Synergistic Interaction and Mode of Action of Citrus hystrix Essential Oil Against Bacteria Causing Periodontal Diseases”. Pharm Biol, 52, No. 3 (2014): 273–280.
Wulandary, dkk. “Jenis-Jenis Komponen Minyak Atsiri yang Diisolasi dari Daun Citrus Aurantifolia dan Citrus Nobilis”. Seminar Nasional (2015): h. 662-666.
73
Wungsintaweekul, dkk. “Antimicrobial, Antioxidant Activities and Chemical Composition of Selectted Thai Spies”. Songklanakarin Journal of Science and Techology, 32, no. 6 (2010): h. 589-598.
Yuliani, Ratna dkk., “Aktivitas Antibakteri Minyak Atsiri Daun Jeruk Purut (Citrus Hystrix) Terhadap Staphylococcus Aureus dan Escherichia Coli” . Pharmacon, 12, no. 2, (2011): h.50-54.
Yuliarto, Fuki Tri, dkk. “Pengaruh Ukuran Bahan dan Metode Destilasi (Destilasi Air dan Destilasi Uap-Air) Terhadap Kualitas Minyak Atsiri Kulit Kayu Manis (Cinnamomum Burmannii)”. Jurnal Tekno sains Pangan 1, no. 1 (2012): h. 12-23.
Yulvianti, Meri, dkk. “Pengaruh Perbandingan Campuran Pelarut N-Heksana- Etanol Terhadap Kandungan Sitronelal Hasil Ekstraksi Serai Wangi (Cymbopogon Nardus)”. Jurnal Integrasi Proses 5, no. 1 (2014): h. 8-14.
Yustinah dan Fanandara, Dena. “ Ekstraksi Minyak Atsiri dari Kulit Jeruk Sebagai Bahan Tambahan pada Pembuatan Sabun”. Jurnal Konversi. 5, no. 1 (2016): h. 25-30.
73
Lampiran 1. Bagan Alir Penelitian Secara Umum
- Ekstraksi Soxhlet dengan Etanol 96 % dan n-Heksan
- Evaporasi
- Randemen
- Uji Fitokimia
- Uji Aktivitas - Karakterisasi
pada Bakteri Komponen Penyusun
Staphylocuccus aureus dengan GC-MS
dan Salmonella typhi
Metabolit Sekunder Sifat Antibakteri
Residu Filtrat
Ekstrak Pekat
Simplisia Kulit Lemo Cuco (Citrus sp.)
Ekstrak Encer
74
Lampiran 2. Diagram Alir Prosedur Kerja Penelitian
1. Penyiapan Simplisia
- Sampel buah Lemo Cuco (Citrus sp.) dibersihkan
- Pisahkan kulit dari dagingnya
- Potong-potong kecil kulit Lemo Cuco
- Keringkan pada suhu ruang.
- Kulit Lemo Cuco digiling menjadi serbuk yang selanjutnya
disebut simplisia.
2. Ekstraksi
- Timbang 50 gram simplisia
- Rangkai alat ekstraksi
- Masukkan ke dalam kertas saring (selongsong)
- Masukkan kedalam ektraktor soxhlet
- Ekstraksi dengan Etanol 96 % pada suhu 81-96oC
- Evaporasi pada suhu 50oC dan 40 rpm
- Lakukan perlakuan sama dengan pelarut n-heksan pada
suhu 72-86oC
Buah Lemo Cuco (Citrus sp.)
Residu Filtrat
Minyak Atsiri
Simplisia
Simplisia
75
a. Rendemen
- Timbang Simplisia dan minyak atsiri
- Hitung rendemen
3. Uji Fitokimia
a. Uji Flavonoid
- Dipipet larutan uji ke dalam plat tetes
- Tambahkan ketiga larutan tersebut dan diamati perubahan
warna yang terjadi
- Larutan kuning tua sampai kuning muda (NaOH) 10%
- Merah tua atau merah bata (H2SO4) pa
- Hijau kehitaman atau hijau kekuningan (FeCl3) 5%
b. Uji Alkaloid
- Dipipet larutan uji ke dalam plat tetes
- Tambahkan ketiga pereaksi tersebut dan diamati perubahan
warna yang terjadi
- Endapan putih atau kuning kehijauan (Mayer)
- Endapan coklat atau jingga (Wagner)
- Endapan jingga (Dragendorff).
Simpilisa dan Minyak Atsiri
Randemen
NaOH 10 %, H2SO4 pa.
dan FeCl3 5%
Flavonoid
Alkaloid
Pereaksi Mayer, Wagner
dan Dragendorff
76
c. Uji Steroid dan Terpenoid
- Dipipet larutan uji ke dalam plat tetes
- Tambahkan pereaksi tersebut dan diamati perubahan warna
yang terjadi
- Merah, biru sampai ungu (Terpenoid)
- Hijau muda atau kuning (Steroid)
d. Uji Fenolik
- Dipipet larutan uji ke dalam plat tetes
- Tambahkan larutan tersebut dan diamati perubahan warna
yang terjadi
- Hijau atau biru kehitaman
e. Uji Saponin
- Dipipet larutan uji ke dalam tabung reaksi
- Tambahkan aquade panas dan panaskan selama 30 menit
- Amati perubahan terjadi selama 30 menit
- Terdapat busa
Terpenoid dan Steroid
Pereaksi Liebarman
Burchard
Fe Cl3 1%
Fenolik
Saponin
H2O panas
77
4. Uji Bioaktivitas
a. Sterilisasi Alat
- Dicuci hingga bersih dan kering
- Dibungkus dengan kertas hvs
- Keringkan dengan oven selama 180oC selama 2 jam
b. Pembuatan Media Nutrien Agar (NA)
- Timbang 1.125 gr NA
- Larutkan dengan aquades 45 mL
- Panaskan diatas hot plate dan aduk sampai homogen
- Autoklaf selama 15 menit, suhu 121oC
- Angkat dan tunggu sampai hangat (± 50oC)
- Tuang ke cawan petri sebanyak 16 mL dan 1 mL pada tabung reaksi
- Diamkan sampai media memadat
Alat
Hasil
Nutrien Agar (NA)
Media
78
c. Peremajaan Bakteri
- Siapkan media NA steril
- Ambil 1 jarum ose kultur bakteri dari stok kultur
- Pindahkan ke media dengan digoreskan berbentuk zig-zag pada
permukaan media padat
- Inkubasi pada suhu 37oC selama 1 hari (24 jam)
d. Pengenceran Minyak Atsiri dan Kontrol Positif
- Encerkan minyak atsiri dengan konsentrasi 20 %, 10 %, 5 %, 2,5 %
dan 1.25 % dalam 2 mL dengan menggunkan pelarut DMSO
- Kontrol positif antibiotik ampicillin (Stapilococcus aureus) dan
sefiksin (Salmonella tyhpi) dibuat konsentrasi 2 % dalam 2 mL.
e. Pembuatan Suspensi Uji
- Siapkan 10 mL NaCl fisiologis 0,9% dalam Erlenmeyer
- Ambil beberapa jarus ose kultur bakteri dari stok kultur
- Celupkan ke NaCl fisiologis 0,9% dan menghomogenkan
- Mengukur transmitan sampai 25% T hamper sama jumlah koloni
105-108 CFU/mL
Media dan Bakteri
Bakteri
NaCl 0,9%
Inokulum
Minyak Atsiri
Larutan Uji
79
f. Pembuatan Media Uji
- Timbang 0.5440 gr MHA
- Larutkan dengan aquades 16 mL
- Panaskan diatas hot plate dan aduk sampai homogen
- Autoklaf selama 15 menit, suhu 121oC
- Angkat dan tunggu sampai hangat (± 50oC)
- Pipet suspensi uji sebanyak 100 µL ke dalam media
- Homogenkan dan tuang ke cawan petri
- Ratakan dengan menggoyang-goyangkan diatas meja kerja
- Diamkan sampai media memadat
g. Perendaman Kertas Cakram
- Siapkan semua alat dan bahan (plat tetes yang telah dibeli label,
mikropipet dan larutan uji).
- Letakkan kertas cakram dengan diameter 0,5 cm atau 5 mm
diatas plat tetes.
- Pipet ekstrak dengan berbagai konsentrasi, kontrol positif dan
kontrol negatif masing-masing 50 µL ke permukaan kertas
cakram.
- Rendam selama 30-60 menit dan dibiarkan menyerap sebelum
diletakkan pada media uji.
Muller Hintom Agar (MHA)
Media Uji
Kertas Cakram
Hasil
80
h. Penanaman Kertas Cakram
- Siapkan media uji dan keras cakram yang sudah diserap
- Angkat kertas cakram dengan pinset steril dan angin-anginkan
sampai tidak ada lautan yang menetes
- Letakkan i atas permukaan media uji dengan pinset dan tekan
sedikit
- Lakukan sampai semua kertas cakram tertanam
- Diinkubasi pada suhu 37oC selama 24 jam.
i. Pengukuran Daya Hambat
- Siapkan jangka sorong
- Ukur zona bening pada sisi vertikal, horizontal dan diagonal
selama 24 jam
- Jumlah dan rata-ratakan
- Luas hambatan ditentukan dengan cara diameter keseluruhan
(cakram + zona hambatan) dikurangi dengan diameter cakram
dan diameter zona hambat pelarut (jika pelarut memberikan
zona hambat).
Zona Bening
Zona Hambat
Kertas Cakram dan Media Uji
Zona Hambat
81
5. Karakterisasi Komponen Penyusun Minyak Atsiri Kulit Buah Lemo Cuco
(Citrus sp.) dengan GC-MS
- Menggunakan gas helium sebagai gas pembawa, kecepatan alir gas
1 mL/min, temperatur injektor 30o sampai 180℃ pada 4 /min
kemudian 180 sampai 250 pada 10.
- Spektra massa direkam pada 30 sampai 450 m/z.
- Aktifkan dan diatur seluruh komponen yang terkait.
- Atur tampilan analisis, pilih sampel login pada monitor sementara
menunggu GC dan MS pada monitor dalam keadaan ready.
- Injek sampel sebanyak 1 µL ke dalam autoinjektor. Jika grafik telah
terlihat datar, analisis GC dapat dihentikan dengan mengklik stop
pada monitor.
-Puncak grafik diidentifikasi akan menunjukkan komponen yang
paling mirip dari beberapa komponen dari bobot molekul serta tinggi
intens peaknya.
Minyak Atsiri
Spektrum
82
Lampiran 3. Perhitungan
1. Penentuan Nilai Rendemen
a. Penentuan Nilai Rendemen Minyak Atsiri dari Ekstrak Etanol
(C2H5OH) 96%
Dik : Bobot simplisia = 50.0004 g
Bobot cawan kosong = 105.1005 g
Bobot cawan + minyak = 117.9810 g
Dit : Rendemen = …?
Penye:
Bobot ekstrak = (Bobot cawan + minyak) - Bobot cawan kosong
= 117.9810 g - 105.1005 g
= 12.8805 g
Rendemen = ���������
�������� ���� x 100 %
= ��.�����
��.����� x 100 %
= 25.8 %
b. Penentuan Nilai Rendemen Minyak Atsiri dari Ekstrak n-Heksan
(C6H14)
Dik : Bobot simplisia = 50.0005 g
Bobot cawan kosong = 119.2003 g
Bobot cawan + minyak = 120.8030 g
Dit : Rendemen = …?
Penye:
Bobot ekstrak = (Bobot cawan + minyak) - Bobot cawan kosong
= 120.8030 g - 119.2003 g
= 1.6027 g
83
Rendemen = �����������
�������� ���� x 100 %
= �.�����
��.����� x 100 %
= 3.2 %
2. Pembuatan Media Peremajaan Bakteri
Dik : V1 = 100 mL
G2 = 2.5 g
V2 = 50 mL
Dit : G1 = …?
Penye:
V1 x G1 = V2 x G2
100 mL x G1 = 50 mL x 2.5 g
G1 = ������.��
�����
= 1.2501 g
3. Pengenceran Ekstrak dan Kontrol Positif
a. Pengenceran Ekstrak Etanol dan n-Heksan
Dik : C1 = 20 % C3 = 5 %
V2 = 4 mL C4 = 2.5 %
C2 = 10 % C5 = 1.25 %
Dit : V1 = …?
Penye:
20 % = �
�
= �
���
= 0.8 g
84
1) 20 % dibuat menjadi 10 % dalam 2 mL
C1 x V1 = C2 x V2
20 % x V1 = 10 % x 2 mL
V1 = ��%����
��%
= 1 mL
2) 20 % dibuat menjadi 5 % dalam 2 mL
C1 x V1 = C2 x V2
20 % x V1 = 5 % x 2 mL
V1 = �%����
��%
= 0.5 mL
3) 20 % dibuat menjadi 2.5 % dalam 2 mL
C1 x V1 = C2 x V2
20 % x V1 = 2.5 % x 2 mL
V1 = �.�%����
��%
= 0.25 mL
4) 20 % dibuat menjadi 1.25 % dalam 2 mL
C1 x V1 = C2 x V2
20 % x V1 = 1.25 % x 2 mL
V1 = �.��%����
��%
= 0.125 mL
85
b. Pengenceran Kontrol Positif
Dik : Ampicillin (Staphylococcus aureus)
Sefiksin (Salmonella thypi)
Dit : g = …? Masing-masing dibuat 2 % dalam 2 mL
Penye:
Ampicillin 2 % = �
�
= �
���
= 0.04 g
Sefiksin 2 % = �
�
= �
���
= 0.04 g
4. Pembuatan Media Uji
a. Pembuatan Media Uji Bakteri Stapilococcus Aureus
Dik : V1 = 1000 mL
G2 = 34 g
V2 = 16 mL (1 Erlenmeyer untuk 1 Capet)
Dit : G1 = …?
Penye:
V1 x G1 = V2 x G2
1000 mL x G1 = 16 mL x 34 g
G1 = ��������
������
= 0.5440 g
86
b. Pembuatan Media Uji Bakteri Salmonella Thypi
Dik : V1 = 1000 mL
G2 = 34 g
V2 = 16 mL (1 Erlenmeyer untuk 1 Capet)
Dit : G1 = …?
Penye:
1000 mL x G1 = 16 mL x 34 g
G1 = ��������
������
= 0.5440 g
5. Pengukuran Zona Hambat
a. Bakteri Stapilococcus Aureus
Tabel 3.1. Pengukuran Zona Hambat terdahap Bakteri Stapylococcus aureus
No. Sampel
Uji
Sisi
Vertikal
Sisi
Horizontal
Sisi
Diagonal
Diameter
Zona Hambat Daya Hambat
1. A 16.90 14.62 15.18
16.55 69.79 8.58 16.48 16.14
2. B 14.24 14.12 14.68
12.39 59.65 10.80 10.24 10.20
3. C 12.14 11.28 11.68
9.73 48.62 8.14 7.36 7.74
4. D 7.04 7.04 7.06
7.47 33.10 6.08 5.52 5.80
5. E 8.62 8.04 8.66
8.37 30.27 6.54 6.58 6.38
6. F 6.88 9.54 8.74
8.39 40.41 0.00 0.00 0.00
7 G 7.56 7.83 7.66
7.68 34.40 0.00 0.00 0.00
8. H 7.26 7.76 7.26
6.62 24.47 5.86 5.68 5.86
9. I 5.00 5.00 5.00
5.73 12.74 6.28 6.52 6.54
10 J 5.00 5.00 5.00
5.38 7.10 5.70 5.78 5.80
11. + 14.72 15.06 14.56
14.78 66.17 0.00 0.00 0.00
12 - 5.00 5.00 5.00
5.00 0.00 0.00 0.00 0.00
87
Diameter Zona Hambat = SisiVertikal+SisiHorizontal+SisiDiagonal
3
Daya Hambat = DiameterZonaHambat−diametercakrem
DiameterZonaHambat x 100 %
b. Bakteri Salmonella typhi
Tabel 3.4. Pengukuran Zona Hambat terdahap Bakteri Salmonella tyhpi
No. Sampel
Uji
Sisi
Vertikal
Sisi
Horizontal
Sisi
Diagonal
Diameter
Zona Hambat Daya Hambat
1. A 15.42 11.18 12.86
13.08 61.77 13.16 13.84 12.04
2. B 9.62 8.04 9.76
10.72 53.36 12.06 12.28 12.56
3. C 7.76 6.72 6.48
8.61 41.93 10.28 10.32 10.10
4. D 7.48 7.82 7.34
6.62 24.47 5.82 5.76 5.44
5. E 5.52 5.78 5.72
5.69 12.13 6.48 5.52 5.42
6. F 10.64 16.26 12.16
9.31 46.29 5.64 5.38 5.78
7 G 5.50 5.48 5.56
5.51 9.26 5.52 5.44 5.56
8. H 5.26 5.22 5.20
5.27 5.12 5.52 5.14 5.24
9. I 5.00 5.00 5.00
5.00 0.00 5.00 5.00 5.00
10 J 5.00 5.00 5.00
5.00 0.00 5.00 5.00 5.00
11. + 8.44 7.46 7.66
14.31 65.10 21.58 20.38 20.32
12 - 5.00 5.00 5.00
5.00 0.00 5.00 5.00 5.00
Diameter Zona Hambat = SisiVertikal+SisiHorizontal+SisiDiagonal
3
Daya Hambat = DiameterZonaHambat−DiameterCakrem
DiameterZonaHambat x 100 %
88
Lampiran 4. Dokumentasi Penelitian
1. Penyiapan Simplisia
Buah Lemo Coco (Citrus sp.) Memisahkan Kulit dengan
Daging Buahnya
Simplisia Pengeringan pada Suhu Ruang
89
2. Ekstraksi Minyak Atsiri dengan Metode Soxhletasi
Menimbang Simplisia Menyiapkan Selongsong
Soxhletasi dengan Menggunkan Pelarut Etanol Simplisia dalam Selongsong
(C2H5OH) 96% dan n-Heksan (C6H14)
Minyak dari ekstrak Etanol dan ekstrak n-Heksan dari Simplisia
Kulit Buah Lemo Cuco
90
3. Pemekatan Minyak dengan Metode Evaporasi
Minyak dari Ekstrak Etanol dan n-Heksan dari Simplisia Kulit Buah Lemo Cuco
Evaporasi Minyak dari Ekstrak Etanol dan Ektrak n-Heksan
Minyak Atsiri dari Ekstrak Etanol dan Ekstrak n-Heksan dari Simplisia
Kulit Buah Lemo Cuco
91
4. Penentuan Nilai Rendemen
Bobot Simplisia Kulit Buah Lemo Cuco
Bobot Cawan Kosong
Bobot Minyak Atsiri dari Ekstrak Etanol dan Ekstrak n-Heksan
92
5. Uji Fitokimia
Menyiapkan Alat dan Ekstrak dan Pereaksi Uji
(A) (B)
(C)
Uji Fitokimia dengan Uji Kualitatif Perubahan warna (A dan B) dan Busa (C).
(A) Ekstrak etanol, (B) ekstrak n-Heksan dan (C) Uji Saponin
93
6. Uji Aktivitas Antibakteri
a. Sterilisasi alat
Membersihkan Alat Membungkus dengan Mensterilkan dengan Oven
Kertas HVS Selama 2 jam pada
Suhu 180OC
b. Pembuatan Media Peremajaan Bakteri
Menimbang Media MHA Melarutkan dengan Aquades Memanaskan Media
Media Peremajaan Sterilisasi Media dengan Media Setelah
Autoklaf pada Suhu 121oC dipanaskan
Selama 15 Menit
94
c. Peremajaan Bakteri
Media Peremajaan Mengambil Isolat dari Menggores Secara
Stok Kultur Bakteri Ziq-zaq pada Media
Peremajaan Bakteri Peremajaan Bakteri Inkubasi pada Suhu
Salmonella Thypi Stapilococcus Aureus 37oC Selama 24 Jam
d. Pembuatan Suspensi Uji
Sterilisasi Alat Menyiapkan Isolat Bakteri Natrium Klorida (NaCl)
dan Semua Peralatan 0.9% Fisiologis
95
Menambahkan Beberapa Jarum Memipet NaCl 0.9% Fisiologis
Ose Isolat Bakteri Ke dalam Erlenmeyer
Mengukur Transmitan Jumlah Koloni Bakteri Suspensi Uji
dengan Spektrofotometer UV
e. Pembuatan Media Uji
1) Pembuatan Media Uji Bakteri Stapilococcus Aureus
96
Menimbang Media MHA
Melarutkan dengan Aquades dan Sterilisasi Media
Memanaskan Sampai Mendidih dengan autoklaf
Media Uji Menambahkan Suspensi Uji dan
Menuangkan ke dalam Cawan Petri
97
2) Pembuatan Media Uji Bakteri Salmonella Thypi
Menimbang Media MHA
Melarutkan dengan Aquades dan Memanaskan Sterilisasi Media
Media Uji Menambahkan Suspensi Uji dan
Menuangkan ke dalam Cawan Petri
98
f. Pengenceran Minyak Atsiri dan Kontrol Positif
1) Pengenceran Minyak Atsiri
Menimbang Minyak Atsiri dari Ekstrak Etanol dan Ekstrak n-Heksan
Melarutkan dengan DMSO sampai 2 mL dengan
Konsentrasi 20%; 10%; 5%; 2.5% dan 1.25%
(A-E Ekstrak n-Heksan dan F-G Ekstrak Etanol)
Menghomogenkan dengan Vorteks
99
2) Pengenceran Kontrol Positif
Menghaluskan Antibiotik Ampicillin dan Antibiotik Sefiksin
Menimbang Antibiotik Menimbang Antibiotik
Ampicillin Sefiksin
Melarutkan dengan Aquades dalam 2 mL dengan Konsentrasi 2%
100
g. Perendaman dan Penanaman Kertas Cakram
1) Bakteri Stapilococcus Aureus
Menyiapkan Alat, Kertas Cakram, Larutan Uji, Kontrol Positif dan Kontrol Negatif
Membagi Media Menjadi Menyiapkan Media uji Merendam Kertas Cakram
4 Bagian Serisi Suspensi Uji Selama 30-60 Menit
Meletakkan Kertas Cakram Memberi Label dan Wrap Inkubasi pada Suhu 37oC
Diatas Media UJi Selama 24 Jam
101
2) Bakteri Salmonella Thypi
Menyiapkan Alat, Kertas Cakram, Larutan Uji, Kontrol Positif dan Kontrol Negatif
Membagi Media Menjadi Menyiapkan Media uji Merendam Kertas Cakram
4 Bagian Berisi Suspensi Uji Selama 30-60 Menit
Meletakkan Kertas Cakram Memberi Label dan Wrap Inkubasi pada Suhu 37oC
Diatas Media UJi Selama 24 Jam
102
h. Pengukuran Zona Hambat
1) Bakteri Stapilococcus Aureus
Mengukur Zona Bening disekitar Setelah diinkubasi Selama 24 jam Cakram
pada Sisi Vertikal, Horizontal dan Diagonal
Mengukur Zona Bening disekitar Cakram
103
2) Bakteri Salmonella thypi
Mengukur Zona Bening disekitar Setelah diinkubasi Selama 24 jam Cakram
pada Sisi Vertikal, Horizontal dan Diagonal
Mengukur Zona Bening disekitar Cakram
104
Lampiran 5. Gambar Spektrum Karakterisasi dengan GC-MS
1. Gambar Spektrum Minyak Atsiri dari Ekstrak Etanol Kulit Buah Lemo
Cuco (Citrus sp.)
2. Gambar Spektrum Minyak Atsiri dari Ekstrak n-Heksan Kulit Buah
Lemo Cuco(Citrus sp.)
Library Searched : C:\Database\07 W10N14.LQuality : 99ID : Cyclohexene, 4-ethenyl-4-methyl-3-(1-methylethenyl)-1-(1-methylethyl)-, (3R-trans)-
20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130 140 150 160 170 180 190 200 210 220 230 240 250 260 270 280 290 300 310 320 330 340 3500
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
m/z-->
Abundance Scan 1266 (13.506 min): AL MUJAIZAH.D\data.ms121.1
93.1
136.1
161.1
77.0
107.153.0
189.1 204.1 253.0175.0 281.0 331.0 345.9
20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130 140 150 160 170 180 190 200 210 220 230 240 250 260 270 280 290 300 310 320 330 340 3500
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
m/z-->
Abundance #216413: Cyclohexene, 4-ethenyl-4-methyl-3-(1-methylethenyl)-1-(1-methylethyl)-, (3R-trans)-121.0
93.0
136.0
161.077.0
41.0107.0
55.0
189.027.0 204.0175.0
Library Searched : C:\Database\07 W10N14.LQuality : 99ID : Copaene
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340 360 380 4000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
m/z-->
Abundance Scan 1362 (14.107 min): AL MUJAIZAH.D\data.ms119.1
161.1
93.1
77.0
55.1204.2
136.1
253.0 331.0280.9 405.1
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340 360 380 4000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
m/z-->
Abundance #216680: Copaene119.0
161.0
93.0
41.0
77.0
204.0
136.0
Library Searched : C:\Database\07 W10N14.LQuality : 99ID : Cyclohexane, 1-ethenyl-1-methyl-2,4-bis(1-methylethenyl)-, [1S-(1.alpha. ,2.beta.,4.beta.)]-
20 40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340 360 380 4000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
m/z-->
Abundance Scan 1393 (14.301 min): SULFA.D\data.ms81.1
107.1
55.0
147.0
129.0189.1
252.9
163.1331.0 404.9206.9
20 40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340 360 380 4000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
m/z-->
Abundance #216301: Cyclohexane, 1-ethenyl-1-methyl-2,4-bis(1-methylethenyl)-, [1S-(1.alpha.,2.beta.,4.beta.)]-81.0
41.0
107.0
147.0
189.0
65.0123.0
163.0205.0
Library Searched : C:\Database\07 W10N14.LQuality : 99ID : Bicyclo[7.2.0]undec-4-ene, 4,11,11-trimethyl-8-methylene-, (E)-(1R,9S)-( -)-
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340 360 380 4000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
m/z-->
Abundance Scan 1466 (14.757 min): AL MUJAIZAH.D\data.ms93.1
133.1
69.1
161.153.0
109.1 189.1
252.9205.1 331.0280.9 405.1
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340 360 380 4000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
m/z-->
Abundance #216351: Bicyclo[7.2.0]undec-4-ene, 4,11,11-trimethyl-8-methylene-, (E)-(1R,9S)-(-)-93.0
41.0
133.0
69.0
161.0
109.0
189.0
205.0
Library Searched : C:\Database\07 W10N14.LQuality : 99ID : .alpha.-Humulene
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340 360 380 4000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
m/z-->
Abundance Scan 1539 (15.214 min): AL MUJAIZAH.D\data.ms93.1
121.1
147.177.0
53.1
204.1
175.0 252.9 327.0 405.0269.0 346.0
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340 360 380 4000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
m/z-->
Abundance #216788: .alpha.-Humulene93.0
121.0
147.041.077.0
204.057.0 175.0
Library Searched : C:\Database\07 W10N14.LQuality : 99ID : Germacrene D
20 40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340 360 380 4000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
m/z-->
Abundance Scan 1594 (15.558 min): SULFA.D\data.ms161.1
105.0
81.0
55.1133.1
204.1
253.0 326.9280.9 405.0346.1
20 40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340 360 380 4000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
m/z-->
Abundance #216742: Germacrene D161.0
105.0
81.0
41.0
133.0
204.0
65.0
Library Searched : C:\Database\07 W10N14.LQuality : 99ID : (3E,6E)-3,7,11-TRIMETHYL-1,3,6,10-DODECATETRAENE
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340 360 380 4000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
m/z-->
Abundance Scan 1618 (15.708 min): SULFA.D\data.ms93.1
69.1
119.1
53.1
161.1
135.1207.1189.1 253.0 331.0 405.0269.0 346.0
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340 360 380 4000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
m/z-->
Abundance #216890: (3E,6E)-3,7,11-TRIMETHYL-1,3,6,10-DODECATETRAENE93.0
69.0
119.0
53.0
135.0 161.0189.0204.0
Library Searched : C:\Database\07 W10N14.LQuality : 99ID : .delta.-Cadinene
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340 360 380 4000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
m/z-->
Abundance Scan 1669 (16.027 min): AL MUJAIZAH.D\data.ms161.1
119.1
134.1
204.2
91.1
189.155.1
70.1 253.0 330.9 404.9346.1268.9
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340 360 380 4000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
m/z-->
Abundance #216940: .delta.-Cadinene161.0
119.0134.0
204.0
189.0
92.0
H
Library Searched : C:\Database\07 W10N14.LQuality : 99ID : .delta.-Cadinene
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340 360 380 4000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
m/z-->
Abundance Scan 1669 (16.027 min): SULFA.D\data.ms161.1
119.1
134.1
204.1
91.0
55.1 189.1
73.0 221.1 252.9331.0 405.0346.0269.0
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340 360 380 4000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
m/z-->
Abundance #216940: .delta.-Cadinene161.0
119.0134.0
204.0
189.0
92.0
H
Library Searched : C:\Database\07 W10N14.LQuality : 99ID : 1H-Cycloprop[e]azulen-7-ol, decahydro-1,1,7-trimethyl-4-methylene-, [1ar -(1a.alpha.,4a.alpha.,7.beta.,7a.beta.,7b.alpha.)]-
20 40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340 360 380 4000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
m/z-->
Abundance Scan 1789 (16.778 min): AL MUJAIZAH.D\data.ms91.0
205.1119.1
159.1
69.1
187.1
53.1 135.1
253.0221.1 405.1326.9 346.0
20 40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340 360 380 4000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
m/z-->
Abundance #267797: 1H-Cycloprop[e]azulen-7-ol, decahydro-1,1,7-trimethyl-4-methylene-, [1ar-(1a.alpha.,4a.alpha.,7.beta.,7a.beta.,7b.alpha.)]-119.043.0
91.0
205.0
159.0
69.0
187.0
135.0
27.0
221.0
OH
Library Searched : C:\Database\07 W10N14.LQuality : 99ID : Isospathulenol
20 40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340 360 380 4000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
m/z-->
Abundance Scan 1878 (17.334 min): AL MUJAIZAH.D\data.ms119.1
91.0
159.1
55.1 177.1135.171.1
205.1
221.1 253.0 326.9 405.0
20 40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340 360 380 4000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
m/z-->
Abundance #267808: Isospathulenol119.0
43.0 91.0
162.0
135.067.0 187.0205.0
27.0221.0
Library Searched : C:\Database\07 W10N14.LQuality : 99ID : (1R,7S,E)-7-Isopropyl-4,10-dimethylenecyclodec-5-enol
20 40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340 360 380 4000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
m/z-->
Abundance Scan 1988 (18.022 min): AL MUJAIZAH.D\data.ms91.0
109.1 159.1
55.1
131.1
177.1220.2
202.2
73.0 253.0 326.9 405.0343.1
20 40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340 360 380 4000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
m/z-->
Abundance #267330: (1R,7S,E)-7-Isopropyl-4,10-dimethylenecyclodec-5-enol109.0
91.0
159.0
41.0
67.0
131.0
220.0177.0
202.0
Library Searched : C:\Database\07 W10N14.LQuality : 99ID : 1-((1S,3aR,4R,7S,7aS)-4-Hydroxy-7-isopropyl-4-methyloctahydro-1H-inden-1 -yl)ethanone
20 40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340 360 380 4000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
m/z-->
Abundance Scan 2078 (18.585 min): AL MUJAIZAH.D\data.ms153.1
135.0
71.1
111.0
93.155.0
238.2177.1
205.1 327.0 405.0221.1 281.0
20 40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340 360 380 4000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
m/z-->
Abundance #327818: 1-((1S,3aR,4R,7S,7aS)-4-Hydroxy-7-isopropyl-4-methyloctahydro-1H-inden-1-yl)ethanone153.0
43.0
135.0
71.0
111.0
95.0
238.0177.027.0
Library Searched : C:\Database\07 W10N14.LQuality : 99ID : Nootkatone
20 40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340 360 380 4000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
m/z-->
Abundance Scan 2201 (19.355 min): AL MUJAIZAH.D\data.ms91.1
147.1
121.1
55.1
175.1
203.1
71.0
220.1
402.9341.0281.0238.1
20 40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340 360 380 4000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
m/z-->
Abundance #260150: Nootkatone147.0
121.0
91.0
41.0
175.0
203.067.0
219.0
O
Library Searched : C:\Database\07 W10N14.LQuality : 99ID : Hexadecanoic acid, methyl ester
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340 360 380 4000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
m/z-->
Abundance Scan 2346 (20.262 min): AL MUJAIZAH.D\data.ms74.0
55.1
143.1
227.2270.297.1
185.1123.1 163.1 203.1 402.9341.0253.0
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340 360 380 4000
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
m/z-->
Abundance #434887: Hexadecanoic acid, methyl ester74.0
43.0
143.0
227.097.0 270.0185.0115.0
243.0
O
O
Library Searched : C:\Database\07 W10N14.LQuality : 99ID : 9,12,15-Octadecatrienoic acid, methyl ester, (Z,Z,Z)-
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340 360 380 400 4200
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
m/z-->
Abundance Scan 2616 (21.951 min): AL MUJAIZAH.D\data.ms79.1
55.1
108.1
135.1 216.0173.0
236.1191.0 264.1281.0153.1 340.9 429.1315.0 376.9 405.0
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340 360 380 400 4200
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
m/z-->
Abundance #506648: 9,12,15-Octadecatrienoic acid, methyl ester, (Z,Z,Z)-79.0
41.0
108.0
135.059.0
163.0 236.0 292.0
O
O
RIWAYAT HIDUP
Penulis skripsi ini bernama lengkap Al Mujaizah,
lahir di Sinjai, 09 Januari 1996, anak dua dari lima
bersaudara. Penulis lahir dari pasangan suami istri bapak
Uddin dan Ibu Nurhayati. Penulis memulai pendidikan
formalnya pada tahun 2002 di SDN No. 145 Cobbu, Sinjai
Borong, Sinjai, MTs Negeri pada tahun 2008. Penulis aktif
pada bidang olahraga, seni dan pramuka . tahun 2011 penulis
melanjutkan pendidikan di SMA Negeri 1 Sinjai Timur dan aktif dibidang osis, seni,
olahraga dan PMR Penulis melanjutkan pendidikan pada tahun 2014 di Universitas
Islam Negeri Alauddin Makassar melalui jalur SPAN-PTKIN dengan mengambil
Jurusan Kimia Fakultas Sain dan Teknologi dengan konsentrasi Kimia Organik
khususnya tantang bahan alam hingga lulus pada tahun 2019 dengan gelar Sarjana
Sains (S.Si). Penulis pernah aktif dalam Mahasiswa Jurusan Kimia (HMJ) sebagai
anggota bidang Keilmuan tahun 2015-201. Penulis juga pernah menjadi Asisten
Praktikum Metabolisme Biomolekul tahun 2016-2017, Praktikum Kimia Dasar,
praktikum Kimia Koordinasi dan Ikatan Kimia, Praktikum Biologi Dasar dan
Praktikum Kimia Fisika I tahun 2017-2018 dan Praktikum Kimia Fisika II dan
Preparasi Senyawa Organik tahun 2018-2019. Penulis juga mengikuti Organisasi
kampus yaitu Koperasi mahasiswa (KOPMA).