Standar Pemeriksaan Air

Tujuan dilakukannya pemeriksaan air secara standar adalah menentukan kualitas air secara mikrobiologik dengan parameter kehadiran bakteri Coliform. Pemeriksaan ini bersifat kualitatif. Ada 3 langkah dalam pemeriksaan ini secara berurutan, langkah-langkah tersebut adalah

1. Tes dugaan (presumptive test) = tes ini spesifik untuk mendeteksi bakteri Coliform, medium yang digunakan adalah kaldu laktosa. Uji ini ditujukan untuk mendeteksi mikroorganisme yang dapat memfermentasi laktosa menghasilkan asam dan gas.

2. Tes pasti (confirmed test) = tes ini memastikan kehadiran bakteri Coliform baik untuk sampel tes dugaan yang positif maupun yang meragukan. Medium padat yang digunakan adalah EMB atau Endo. Koloni E. coli tampak berwarna hijau metalik, dan disebut sebagai koloni tipikal, tipe lain disebut atipikal.

3. Tes lengkap (completed test) = tes ini memastikan kehadiran bakteri Coliform dalam sampel air, memastikan hasil yang meragukan dari tes-tes sebelumnya.

Medium EMBA merupakan medium diferensial , yaitu medium yang dapat memisahkan antar koloni bakteri yang berbeda dan digunakan sebagai media isolasi dan identifikasi. Medium ini digunakan untuk bakteri coliform (bakteri yang sebagian besar terdiri dari bakteri E. coli), yang salah satunya dapat memfermentasi laktosa, dari koloni yang berwarna biru kehitaman menjadi koloni yang berwarna hijau metalik (Marietta, 2008).

Ketiga langkah tersebut secara lengkap diuraikan dalam gambar dibawah ini

A.Tes Perkiraan (Presumptive test)1.Dis iapkan l ima buah tabung yang masing-masing ber is i 10 ml lac tose broth double strength (tabung 1a s/d 5a). Disiapkan pula 2 buah tabung yang masing-masing berisi10 ml lactose broth single strength (tabung 1b dan 2b).

2.Sampel air diinokulasikan dengan pipet steril masing-masing 10 ml ke dalam tabung1a s/d 5a. Ke dalam tabung 1b, diinokulasikan 1 ml sampel air. Dan ke dalam tabung2b, diinokulasikan 0,1 ml sampel air.3.Tabung-tabung tersebut digoyang secara perlahan agar sampel air tersebar merata keseluruh bagian media.4.Tabung-tabung tersebut diinkubasi pada suhu 37oC selama 24-48 jam.5.Setelah diinkubasi selama 24 jam, masing-masing tabung diamati ada tidaknya gas pada tabung durham. Apabila ada gas berarti presumtive positif. Namun, apabila tidak ada gas maka inkubasi dilanjutkan 24 jam lagi. Apabila setelah 2x24 jam tidak adagas berarti presumtive negative. Dan apabila ada gas maka dilanjutkan dengan tes penegasan.

B.Tes Penegasan (Confirmative Test)1 .Dar i se t iap tabung yang presumtive posi t i f d iambi l 1-2 ose la lu dimasukkan dalamtabung yang berisi 10 ml BGLB.2.Satu seri BGLG diinkubasi pada suhu 37oC untuk pemeriksaan coliform dan satu serilagi diinkubasikan pada suhu 44oC untuk pemeriksaan E.Coli selama 24 jam.3 . P e m b a c a a n d i l a k u k a n s e t e l a h 2 4 j a m d e n g a n m e l i h a t j u m l a h t a b u n g B G L B y a n g menunjukkan adanya confirmative positif