SKRIPSI

LISNA ANDRIANI

PERBANDINGAN AKTIVITAS ANTIOKSIDAN

EKSTRAK ETANOL KULIT BATANG

Jatropha curcas L. DENGAN BERBAGAI

METODE REMASERASI

PROGRAM STUDI FARMASI

FAKULTAS ILMU KESEHATAN

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG

2015

ii

Lembar Pengesahan

PERBANDINGAN AKTIVITAS ANTIOKSIDAN

EKSTRAK ETANOL KULIT BATANG

Jatropha curcas L. DENGAN BERBAGAI

METODE REMASERASI

SKRIPSI

Dibuat untuk memenuhi syarat mencapai gelar Sarjana Farmasi pada

Program Studi Farmasi Fakultas Ilmu Kesehatan

Universitas Muhammadiyah Malang

2015

Oleh :

LISNA ANDRIANI

NIM : 201010410311039

Disetujui Oleh :

Pembimbing I Pembimbing II

Siti Rofida, S.Si., M.Farm., Apt. Sovia Aprina B., S.Farm., M.Si., Apt.

NIP. 114.0804.0453 NIP. 114.0804.0452

iii

Lembar Pengujian

PERBANDINGAN AKTIVITAS ANTIOKSIDAN

EKSTRAK ETANOL KULIT BATANG

Jatropha curcas L. DENGAN BERBAGAI

METODE REMASERASI

SKRIPSI

Telah diuji dan dipertahankan di depan tim penguji Pada tanggal 29 Juni 2015

Oleh :

LISNA ANDRIANI

NIM : 201010410311039

Tim Penguji :

Penguji I Penguji II

Siti Rofida, S.Si., M.Farm., Apt. Sovia Aprina B., S.Farm., M.Si., Apt.

NIP. 114.0804.0453 NIP. 114.0804.0452

Penguji III Penguji IV

Drs. H. Achmad Inoni, Apt. Ahmad Shobrun Jamil, S.Si., M.P.

NIP. 113.0907.0469

iv

KATA PENGANTAR

Assalamu’alaikum warohmatullahi wabarokatuh

Puji syukur tercurahkan kepada Allah SWT, Tuhan semesta alam karena

berkat rahmat dan ridho-Nya, penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul

“Perbandingan Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Kulit Batang Jatropha

curcas L. dengan Berbagai Metode Remaserasi.”

Skripsi ini diajukan untuk memenuhi syarat mencapai gelar Sarjana Farmasi

pada Program Studi Farmasi, Fakultas Ilmu Kesehatan, Universitas

Muhammadiyah Malang. Penulis menyadari bahwa penyusunan skripsi ini tidak

terlepas dari dukungan berbagai pihak. Oleh karena itu, dengan segala kerendahan

hati penulis mengucapkan terima kasih kepada:

1. Allah SWT, Tuhan semesta alam yang memberikan rahmat, nikmat, dan

hidayah kepada umat-Nya. Rasulullah SAW, yang telah menuntun kita

menuju jalan yang lurus.

2. Siti Rofida, S.Si., M.Farm., Apt. dan Sovia Aprina Basuki, S.Farm., M.Sc.,

Apt. selaku dosen pembimbing atas nasehat dan motivasi yang diberikan.

3. Drs. H. Achmad Inoni, Apt. dan Ahmad Shobrun Jamil,S.Si.,M.P selaku

dosen penguji yang telah banyak memberikan saran sehingga skripsi ini dapat

terselesaikan dengan baik.

4. Yoyok Bekti Prasetyo, S.Kep., Ns., M.Kep., Sp.Kom selaku Dekan Fakultas

Ilmu Kesehatan atas motivasi yang telah diberikan.

5. Nailis Syifa’, S.Farm., M.Sc., Apt selaku Ketua Program Studi Farmasi,

Fakultas Ilmu Kesehatan atas bimbingan selama ini.

6. Dosen dan laboran Program Studi Farmasi yang telah membagi banyak ilmu

dan pengalaman selama penulis menempuh pendidikan.

7. Kedua orang tua tercinta, Bapak Muhammad Anwar dan Ibu Siti Aminah

untuk inspirasi dan doa yang tidak pernah putus.

8. Kakak tersayang Fedy Haryanto, Kusuma Wardhani, Rahmili Heldawati, dan

Agus Riyanto. Keponakan Bagus Rian Kusuma dan Naysila Dwi Agustina

atas motivasi yang selalu diberikan.

v

9. Keluarga besar H.Soendoeng dan Hj. Rolita Lusyana untuk dukungan yang

tak ternilai sehingga penulis dapat menyelesaikan pendidikan sarjana di

Program Studi Farmasi, Universitas Muhammadiyah Malang.

10. Teman seperjuangan Farmasi Bahan Alam 2015 dan Mas Ferdi sebagai

laboran atas kerja samanya sehingga skripsi ini dapat terwujud.

11. Kakak-kakak 2006-2009 dan teman-teman 2010-2014 untuk cerita yang tidak

akan pernah terlupakan di Farmasi UMM.

12. Teman-teman seperjuangan di HMJ Farmasi, ISMAFARSI UMM, dan Senat

Mahasiswa FIKES sebagai tempat berbagi pengetahuan softskill.

13. Tim Praktikum Farmasi Bahan Alam yang banyak berbagi pengalaman

selama 2 tahun di laboratorium sintesis.

14. Staf IRO UMM, alumni EM UMM, dan teman-teman EM Indonesia 2012

atas dukungan dan inspirasi yang tidak akan pernah terlupakan.

15. MOVER family: Irene, Helen, Akmal, Kang Fauzi, dan Amiin. Sahabat

berbagi suka duka selama 10 bulan di Cagliari. In bocca al lupo!

16. Dosen-dosen Università di Cagliari, staf CLA dan ISMOKA, teman-teman

ESN, dan all my classmates in Cagliari, grazie mille!

17. Teman-teman MAWAPRES UMM dan MAWAPRES Jawa Timur 2014 yang

telah menginspirasi penulis untuk terus berprestasi.

Kepada semua pihak yang belum disebutkan, penulis mohon maaf dan terima

kasih yang sebesar-besarnya. Keberhasilan ini tak luput dari dukungan dan doa

yang telah diberikan. Semoga amal baik semua pihak mendapat imbalan dari

Allah SWT.

Penulis menyadari bahwa skripsi ini jauh dari kesempurnaan. Oleh sebab itu,

penulis mengharapkan saran dan kritik yang membangun dari pembaca. Semoga

skripsi ini membawa manfaat untuk pengembangan ilmu pengetahuan khususnya

dalam bidang kefarmasian. Aamiin.

Wassalamu’alaikum warohmatullohi wabarokatuh

Malang, 29 Juni 2015

Penyusun

(Lisna Andriani)

vi

RINGKASAN

Faktor pemicu radikal bebas sangat mudah dijumpai pada kehidupan sehari-

hari. Padahal, radikal bebas berhubungan dengan beberapa penyakit kronis seperti

alzheimer, parkinson, hipertensi, dan kanker. Beberapa antioksidan diproduksi

oleh tubuh namun tidak mencukupi pada keadaan stres oksidatif sehingga

diperlukan antioksidan eksogen. Antioksidan eksogen-sintesis untuk terapi

sebagian besar belum dilakukan uji klinik pada manusia sehingga penggunaan

antioksidan yang berasal dari tanaman lebih diminati seperti beberapa penelitian

yang menunjukkan bahwa sinergisme kandungan flavonoid dan fenol

berkontribusi pada aktivitas antioksidan dari kulit batang J. curcas L. Metode

ekstraksi berpengaruh terhadap aktivitas antioksidan. Maserasi digunakan secara

luas karena memiliki banyak keuntungan seperti cocok untuk senyawa yang tidak

tahan pemanasan, prosedur dan peralatan yang sederhana, serta biaya yang

terjangkau namun memerlukan waktu yang lebih lama. Pemilihan metode

remaserasi bertujuan untuk memperlambat terjadinya kejenuhan dan penambahan

gerakan pelarut semakin mempercepat proses difusi dengan meningkatkan

penyebaran larutan di sekitar partikel. Oleh sebab itu, pada penelitian ini

digunakan metode remaserasi kinetik dan non kinetik.

Pada penelitian ini ingin diketahui nilai IC50 ekstrak etanol 96% kulit batang

J. curcas L. yang diekstraksi menggunakan metode remaserasi non kinetik

maupun remaserasi kinetik serta mengetahui perbedaan penghambatan dari

ekstrak etanol 96% kulit batang J. curcas L. antara kedua metode ekstraksi.

Berdasarkan latar belakang tersebut, hipotesis dari penelitian ini adalah aktivitas

penghambatan terhadap radikal DPPH dari ekstrak etanol 96% kulit batang

J. curcas L. menggunakan metode ekstraksi remaserasi kinetik lebih tinggi

daripada menggunakan metode remaserasi non kinetik.

Radikal bebas jika diproduksi berlebihan akan mengakibatkan stres

oksidatif yang berujung pada kerusakan sel dan cedera jaringan. Kulit batang

J. curcas L. memiliki potensi sebagai antioksidan tetapi di Indonesia tanaman ini

digunakan sebagai pagar pembatas, pengendali erosi, dan pewarna kain.

Standardisasi bertujuan untuk menjamin mutu, keamanan, dan manfaat dari

ekstrak. Terpenuhinya standar mutu tersebut tidak terlepas dari pengendalian

proses yang terstandar, salah satunya mutu ekstrak. Oleh sebab itu penting untuk

meneliti metode ekstraksi yang memberikan hasil maksimal terhadap

penghambatan radikal bebas DPPH oleh kulit batang J. curcas L.

Pada penelitian ini terdapat dua kelompok perlakuan yaitu pengujian

menggunakan ekstrak dari metode remaserasi non kinetik dan metode remaserasi

kinetik. Tahapan kegiatan yang dilakukan meliputi persiapan ekstrak

menggunakan metode remaserasi non kinetik dan remaserasi kinetik, identifikasi

profil senyawa kimia dengan metode KLT, persiapan larutan pengujian aktivitas

antioksidan, dan pengukuran aktivitas antioksidan dengan spektrofotometri

menggunakan metode DPPH.

Dari hasil penelitian didapatkan simplisia segar seberat 1492,44 g, simplisia

kering 249,62 g, dan simplisia serbuk 240 g dengan rincian 15,59 g dari nomor

pengayak 20 dan 220,46 gram dari nomor pengayak 40. Ekstrak dari metode

remaserasi non kinetik yang didapatkan sebesar 4,5809 g dan sebesar 4,5819 g

vii

dari metode remaserasi kinetik atau rendemen 4,76%. Ekstrak remaserasi kinetik

lebih banyak karena proses ekstraksi yang disertai dengan pengadukan sehingga

penarikan senyawa lebih efektif. Hasil identifikasi menunjukkan bahwa ekstrak

etanol 96% kulit batang J. curcas L. yang diekstraksi menggunakan metode

remaserasi non kinetik maupun remaserasi kinetik positif mengandung senyawa

alkaloid, terpenoid, flavonoid, polifenol, dan antrakuinon. Kelima senyawa

tersebut memiliki aktivitas sebagai antioksidan yang berpengaruh terhadap

kuatnya intensitas penghambatan radikal DPPH. Mekanisme kerja penghambatan

tersebut berbeda pada setiap senyawa. Senyawa alkaloid menghentikan reaksi

rantai radikal bebas secara efisien, terpenoid dengan mendonorkan atom hidrogen

dan memutus reaksi berantai, fenolik merupakan terminator radikal bebas dan

pengkelat ion logam, serta antrakuinon dapat mengkelat logam dan mengikat

radikal hidroksil.

Dari hasil pengujian, didapatkan IC50 sebesar 31,17 µg/ml pada ekstrak non

kinetik dan 26,44 µg/ml pada ekstrak kinetik sedangkan IC50 vitamin C sebesar

1,68 µg/ml. Ketiganya memiliki intensitas aktivitas antioksidan sangat aktif

meskipun aktivitas antioksidan vitamin C jauh lebih kuat. Delokalisasi elektron

pada vitamin C terjadi dua kali sedangkan senyawa seperti alkaloid dan fenol

yang terkandung dalam kulit batang J. curcas L. mengalami delokalisasi sebanyak

satu kali sehingga vitamin C dapat menangkap radikal bebas lebih banyak

dibandingkan senyawa fenolik dan alkaloid.

Berdasarkan uji T dua sampel independent diketahui bahwa ekstrak etanol

96% kulit batang J. curcas L. yang diekstraksi menggunakan metode remaserasi

non kinetik dan remaserasi kinetik memiliki kemampuan penghambatan yang

sama terhadap radikal DPPH. Meski demikian, nilai IC50 dari ekstrak metode

remaserasi kinetik lebih besar daripada ekstrak metode non kinetik. Metode

remaserasi kinetik memiliki keuntungan karena gerakan pelarut akan

mempercepat proses difusi dan membantu meningkatkan penyebaran larutan di

sekitar partikel. Gerakan tersebut mengubah kesetimbangan menuju saturasi

pelarut sehingga mempercepat proses ekstraksi. Pada proses ekstraksi bahan aktif,

pelarut harus berdifusi ke dalam sel dan zat aktif harus cukup larut dalam pelarut

sehingga akan dicapai kesetimbangan antara pelarut dan zat terlarut. Keuntungan

ini merupakan kekurangan utama dari metode remaserasi non kinetik yaitu waktu

yang dibutuhkan untuk ekstraksi cukup lama.

Tingginya aktivitas antioksidan ekstrak etanol dari kulit batang J. curcas L.

maka perlu dilakukan penelitian lanjutan secara in vivo dan isolasi atau fraksinasi

untuk mengetahui komponen yang memiliki aktivitas antioksidan terbesar.

Selama penelitian pengukuran aktivitas antioksidan sebaiknya perlu diperhatikan

waktu inkubasi agar data yang diperoleh memenuhi presisi dan akurasi.

viii

ABSTRAK

PERBANDINGAN AKTIVITAS ANTIOKSIDAN

EKSTRAK ETANOL KULIT BATANG Jatropha curcas L.

DENGAN BERBAGAI METODE REMASERASI

LISNA ANDRIANI

Latar belakang: pemicu radikal bebas sangat mudah dijumpai padahal radikal

bebas berhubungan dengan beberapa penyakit kronis. Antioksidan diproduksi

oleh tubuh namun tidak mencukupi pada keadaan stres oksidatif sehingga

diperlukan antioksidan eksogen. Antioksidan eksogen-sintesis belum dilakukan

uji klinik terkait keamanan pada manusia sehingga penggunaan antioksidan dari

tanaman lebih diminati. kulit batang J. curcas L. lebih digunakan sebagai pewarna

kain di Indonesia padahal kandungan polifenolnya berkontribusi pada aktivitas

antioksidan. Penelitian menunjukkan bahwa perbedaan metode ekstraksi

berpengaruh terhadap aktivitas antioksidan sehingga pada penelitian ini digunakan

metode remaserasi kinetik dan non kinetik.

Tujuan: mengetahui nilai IC50 ekstrak etanol 96% kulit batang J. curcas L. dari

metode remaserasi non kinetik dan remaserasi kinetik serta perbedaan

penghambatan dari kedua metode ekstraksi terhadap radikal DPPH.

Metode: pengujian menggunakan ekstrak etanol 96% kulit batang J. curcas L.

dari metode remaserasi non kinetik dan metode remaserasi kinetik meliputi

persiapan ekstrak, identifikasi profil senyawa kimia dengan metode KLT,

persiapan larutan pengujian aktivitas antioksidan, dan pengukuran aktivitas

antioksidan dengan spektrofotometri menggunakan metode DPPH. Data

pengujian aktivitas antioksidan kemudian dianalisis menggunakan uji T dua

sampel independent.

Hasil dan kesimpulan: rendemen dari ekstrak metode remaserasi non kinetik dan

remaserasi kinetik sebesar 4,76% yang mengandung alkaloid, terpenoid,

flavonoid, polifenol, dan antrakuinon. Nilai IC50 ekstrak dari metode remaserasi

non kinetik 31,17 µg/ml dan remaserasi kinetik 26,44 µg/ml sedangkan vitamin C

1,68 µg/ml. Ekstrak dari kedua metode memiliki kemampuan penghambatan yang

sama terhadap radikal DPPH.

Kata kunci: antioksidan, J. curcas L., remaserasi kinetik, remaserasi non kinetik,

uji DPPH

ix

ABSTRACT

COMPARISON ANTIOXIDANT ACTIVITY OF

ETHANOL EXTRACT FROM Jatropha curcas L. STEM BARK

WITH VARIOUS EXTRACTION METHODS

LISNA ANDRIANI

Background: the triggers of free radicals are very easy to find whereas the free

radicals associated with several chronic diseases. Antioxidant produced in the

body but insufficient on oxidative stress necessitating exogenous antioxidants.

Exogenous antioxidants-synthesized have not been performed related its safety

and clinical trials in humans so that exogenous antioxidants is more desirable

from plants. Recently, stem bark of J. curcas L. has been using as a natural fabric

dye in Indonesia whereas it is contain polyphenolics as the antioxidant activity.

Previous studies displayed differences in extraction methods affects to activity of

antioxidants.

Aim: the study aimed to ascertain IC50 values from 96% ethanol extract of

J. curcas L. stem bark from non kinetic and kinetic remaceration as well as

differences in inhibition both these extraction methods against DPPH radicals.

Method: the 96% ethanol extracts from non kinetic and kinetic remaceration were

analysed phytochemically with thin layer chromatography (TLC) and antioxidant

activity of these extracts assessed againts 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH)

with spectrophotometric method. Data were analyzed using independent-samples

T test.

Result and conclusion: the result showed non kinetic and kinetic remaceration

extract produce 4.76% of yield and presence of many secondary metabolites

including alkaloids, terpenoids, flavonoids, polyphenols, and anthraquinone. The

IC50 values from kinetic extract, kinetic extract, and vitamin C were found to be

31.17 ug/ml, 26.44 ug/ml, and 1.68 ug/ml. Both of those extraction methods have

the same potential as DPPH radical scavenging activity.

Keywords: antioxidant, J.curcas L., kinetic remaceration, non kinetic

remaceration, DPPH assay

x

DAFTAR ISI

Halaman

KATA PENGANTAR......................................................................... iv

RINGKASAN...................................................................................... vi

ABSTRAK........................................................................................... viii

ABSTRACT........................................................................................... ix

DAFTAR ISI ....................................................................................... x

DAFTAR TABEL ............................................................................... xiii

DAFTAR GAMBAR ........................................................................... xiv

DAFTAR LAMPIRAN ....................................................................... xv

DAFTAR SINGKATAN...................................................................... xvi

BAB I. PENDAHULUAN.................................................................... 1

1.1 Latar Belakang..................................................................... 1

1.2 Rumusan Masalah.............................................................. 3

1.3 Tujuan Penelitian............................................................... 4

1.4 Hipotesis............................................................................ 4

1.5 Manfaat Penelitian ............................................................ 4

BAB II. TINJAUAN PUSTAKA......................................................... 5

2.1 Jatropha curcas L. (Jarak Pagar)........................................ 5

2.1.1 Klasifikasi Tanaman.................................................. 5

2.1.2 Morfologi.................................................................... 5

2.1.3 Daerah Asal dan Penyebaran...................................... 6

2.1.4 Kandungan dan Khasiat............................................. 7

2.2 Ekstraksi............................................................................. 9

2.2.1 Jumlah simplisia........................................................ 10

2.2.2 Derajat Kehalusan Simplisia..................................... 10

2.2.3 Jenis Pelarut.............................................................. 11

2.2.4 Temperatur Penyari................................................... 13

2.2.5 Gerakan Pelarut......................................................... 13

2.2.6 Lama Waktu Penyarian............................................. 13

2.2.7 Metode Ekstraksi....................................................... 13

xi

2.3 Standardisasi Obat Bahan Alam......................................... 17

2.4 Radikal Bebas.................................................................... 19

2.4.1 Pembentukan Radikal Bebas..................................... 19

2.4.2 Faktor Pemicu Radikal Bebas..................................... 21

2.4.3 Patofisiologi......................................................... 22

2.5 Antioksidan ....................................................................... 25

2.5.1 Vitamin C sebagai Antioksidan................................. 27

2.5.2 Flavonoid sebagai Antioksidan.................................. 28

2.6 Metode Uji Aktivitas Antioksidan...................................... 29

2.6.1 Metode DPPH........................................................... 29

2.6.2 Metode ABTS........................................................... 31

2.6.3 Metode FRAP........................................................... 31

2.7 Spektrofotometri................................................................. 32

2.8 Kromatografi Lapis Tipis................................................... 33

BAB III. KERANGKA KONSEPTUAL............................................... 34

3.1 Uraian Kerangka Konseptual.............................................. 34

BAB IV. METODE PENELITIAN........................................................ 37

4.1 Tempat dan Waktu Penelitian............................................. 37

4.2 Bahan Penelitian................................................................. 37

4.2.1 Bahan Tanaman......................................................... 37

4.2.2 Bahan Kimia ............................................................ 37

4.3 Alat Penelitian.................................................................... 38

4.4 Rancangan Penelitian ........................................................ 39

4.4.1 Desain Penelitian....................................................... 39

4.4.2 Variabel Penelitian.................................................... 40

4.5 Prosedur Penelitian............................................................. 40

4.5.1 Persiapan Ekstrak Etanol 96% Kulit Batang

J. curcas L................................................................... 40

4.5.2 Identifikasi Profil Senyawa Kimia dengan Metode

KLT............................................................................. 41

4.5.3 Persiapan Larutan Pengujian Aktivitas Antioksidan.. 42

xii

4.5.4 Pengukuran Aktivitas Antioksidan dengan

Spektrofotometri......................................................... 46

4.6 Analisis Data...................................................................... 47

4.6.1 Perhitungan Persen Penghambatan............................ 47

4.6.2 Perhitungan IC50........................................................ 48

4.6.3 Analisis Analitik......................................................... 48

BAB V. HASIL PENELITIAN.............................................................. 49

5.1 Persiapan Ekstrak Etanol 96% Kulit Batang J. curcas L...... 49

5.1.1 Pembuatan Serbuk Simplisia ..................................... 49

5.1.2 Pembuatan Ekstrak ..................................................... 50

5.2 Identifikasi Profil Senyawa Kimia dengan Metode KLT..... 52

5.2.1 Alkaloid....................................................................... 52

5.2.2 Terpenoid.................................................................... 53

5.2.3 Flavonoid.................................................................... 54

5.2.4 Polifenol...................................................................... 54

5.2.5 Antrakuinon................................................................ 55

5.3 Pengukuran Aktivitas Antioksidan dengan

Spektrofotometri............................................................... 56

5.3.1 Pengukuran λmaks Menggunakan Larutan Kontrol

Pereaksi....................................................................... 56

5.3.2 Optimasi Waktu Inkubasi........................................... 57

5.3.3 Pengukuran Absorbansi............................................... 58

5.4 Analisis Data........................................................................ 59

5.4.1 Perhitungan Persen Penghambatan dan IC50............... 59

5.4.2 Analisis Analitik.......................................................... 61

BAB VI. PEMBAHASAN.................................................................... 62

BAB VII. KESIMPULAN DAN SARAN............................................. 70

7.1 Kesimpulan.......................................................................... 70

7.2 Saran..................................................................................... 70

DAFTAR PUSTAKA .......................................................................... 71

xiii

DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

II.1 Beberapa Aktivitas/Indikasi Terapi J. Curcas L............................ 7

II.2 Kandungan Senyawa Kimia Kulit Batang J. Curcas L................. 8

II.3 Klasifikasi Serbuk Berdasarkan Derajat Halus.............................. 10

II.4 Sifat Fisikokimia Pelarut yang Sering Digunakan pada Proses

Ekstraksi Produk Bahan Alam....................................................... 12

II.5 Beberapa Contoh Senyawa Reaktif............................................... 20

II.6 Beberapa Penyakit yang Berhubungan dengan Radikal Bebas..... 23

II.7 Molekul Penanda pada Kerusakan Oksidatif yang Berhubungan

dengan Beberapa Penyakit pada Manusia..................................... 24

II.8 Klasifikasi Antioksidan Berdasarkan Sumbernya......................... 25

II.9 Sumber Utama Antioksidan Eksogen dari Makanan Sehari-Hari. 27

II.10 Tingkat Kekuatan Antioksidan dengan Metode DPPH................. 30

V.1 Rendemen Hasil Ekstraksi Kulit Batang J. curcas L..................... 51

V.2 Data Penimbangan Ekstrak untuk Identifikasi Profil Senyawa

Kimia dengan Metode KLT........................................................... 52

V.3 Hasil Identifikasi Profil Senyawa Kimia dengan Metode

KLT................................................................................................ 56

V.4 Pengukuran λmaks dan Absorbansi untuk Larutan Sampel............. 56

V.5 Pengukuran λmaks dan Absorbansi untuk Larutan Kontrol Positif. 57

V.6 Optimasi Waktu Inkubasi.............................................................. 57

V.7 Absorbansi Larutan Pengujian Aktivitas Antioksidan................... 58

V.8 Nilai IC50 dari Larutan Ekstrak Metode Remaserasi Non Kinetik

sebagai Larutan Sampel A............................................................. 59

V.9 Nilai IC50 dari Larutan Ekstrak Metode Remaserasi Kinetik

sebagai Larutan Sampel B............................................................. 60

V.10 Nilai IC50 dari Larutan Vitamin C sebagai Larutan Kontrol

Positif............................................................................................. 60

xiv

DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

2.1 Jatropha curcas L.......................................................................... 6

2.2 Struktur Radikal Bebas.................................................................. 19

2.3 Klasifikasi Antioksidan Enzimatik dan Non Enzimatik................ 26

2.4 Reaksi Penghambatan Aktivitas Senyawa ROS oleh Flavonoid... 28

2.5 Tempat Ikatan Logam pada Flavonoid.......................................... 29

2.6 Reaksi Penangkapan Radikal oleh DPPH...................................... 31

3.1 Bagan Alur Konsep Penelitian....................................................... 36

5.1 Proses Pembuatan Simplisia Serbuk.............................................. 49

5.2 Ekstrak Kental Kulit Batang J. curcas L....................................... 51

5.3 Hasil Identifikasi KLT Golongan Alkaloid................................... 53

5.4 Hasil Identifikasi KLT Golongan Terpenoid................................. 53

5.5 Hasil Identifikasi KLT Golongan Flavonoid................................. 54

5.6 Hasil Identifikasi KLT Golongan Polifenol................................... 55

5.7 Hasil Identifikasi KLT Golongan Antrakuinon............................. 55

xv

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

1. Daftar Riwayat Hidup..................................................................... 82

2. Surat Pernyataan.......................................................... ................... 83

3. Surat Determinasi Tanaman............................................................ 84

4. Perhitungan Larutan Pengujian Aktivitas Antioksidan................. 85

5. Bagan Alur Kerja........................................................................... 90

6. Data Pengukuran Absorbansi Larutan Ekstrak Etanol 96% Kulit

dari Metode Remaserasi Non Kinetik sebagai Larutan Sampel A... 101

7. Data Pengukuran Absorbansi Larutan Ekstrak Etanol 96% Kulit

dari Metode Remaserasi Kinetik sebagai Larutan Sampel B............ 107

8. Data Pengukuran Absorbansi Larutan Vitamin C sebagai Larutan

Kontrol Positif................................................................................... 112

9. Grafik Persen Penghambatan dari Pengukuran Aktivitas

Antioksidan....................................................................................... 118

10. Perhitungan Persen Penghambatan dan Nilai IC50............................ 121

11. Hasil Analisis Menggunakan Uji T 2 Sampel Independent.............. 124

12. Alat dan Bahan.................................................................................. 125

xvi

DAFTAR SINGKATAN

Singkatan

µg mikrogram

µl mikroliter

µm mikrometer

8-OH-dG 8-hydroxy-20-deoxyguanosine

ABTS 2,2′-azino-bis-(3-ethyl-benzthiazoline-6-sulfonic acid)

AGE advanced glycation end products

BHA butylated hydroxyanisole

BHT butylated hydroxytoluene

BI larutan baku induk

BK larutan baku kerja

BM berat molekul

BPOM badan pengawas obat dan makanan

BPTP balai penelitian tanaman pangan

C celcius

Ca2+

kalsium

cm sentimeter

cPoise sentipoise

DNA deoxyribonucleic acid

DPPH 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl

Fe++

fero

Fe+++

feri

FRAP ferric reducing ability of plasma

g gram

GSH reduced glutathione

GSSG oxidised glutathione

H●

hidrogen

H2O air

H2O2 hidrogen peroksida

HIV human immunodeficiency virus

HNE 4-hydroxy-2-nonenal

xvii

Singkatan

IC50 inhibitor concentration 50%

K kinetik

kHz kilohertz

KLT kromatografi lapis tipis

KV koefisien variasi

MDA malondialdehyde

mg miligram

ml mililiter

mM miliMolar

NAD(P)H nikotinamida adenin dinukleotida fosfat hidrogen

NK non kinetik

nm nanometer

NO2-Tyr 3-nitro-tyrosine

O−

2● anion superoksida

OH●

ion hidroksil

ppm part per million (contoh: 1 gram dalam 1 liter)

RBS reactive bromine species

RCS reactive chlorine species

Rf retention factor

RK remaserasi kinetik

RNK remaserasi non kinetik

RNS reactive nitrogen species

ROS reactive oxygen species

rpm rotasi per menit

SD standar deviasi atau simpangan baku

Sinar UV-Vis sinar ultraviolet-visible (sinar tampak)

TLC thin layer chromatography

71

DAFTAR PUSTAKA

Agati, G., Azzarellob, E, Pollastri, S., and Tattini, M., 2012. Flavonoids as

antioxidants in plants: location and functional significance. Plant Science,

Vol. 196, pp. 67–76.

Agoes, G., 2007. Teknologi Bahan Alam. Bandung: Institut Teknologi Bandung,

hal.7-64.

Aiyelaagbe, O.O., Adeniyi, B.A., Fatunsin, O.F., and Arimah, B.D., 2007. In vitro

antimicrobial activity and phytochemical analysis of Jatropha curcas.

International Journal of Pharmacology, Vol. 3 No.1, pp. 106-10.

Arief, S., 2007. Radikal Bebas, http://old.pediatrik.com/buletin/06224113752-

x0zu6l.pdf, Diakses tanggal 10 Februari 2015.

Arts, I.C.W. and Hollman, P.C.H., 2005. Polyphenols and disease risk in

epidemiologic studies. The American Journal of Clinical Nutrition,

Vol. 81, pp. 317-25.

Arun, K.P. and Brindha, P., 2012. Studies on antioxidant and antiarthritic

potentials of Jatropha tanjorensis Ellis and Saroja. International Journal

of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences, Vol. 4 No. 2, pp. 136-8.

Asuk, A. A., Dasofunjo, K., Okafor, A.I., and Mbina, F.A., 2015. Antidiabetic and

antioxidative effects of Jatropha curcas extracts in streptozotocin-induced

diabetic rats. British Journal of Medicine & Medical Research, Vol. 5

No. 3, pp. 341-9.

Ayucitra, A., Indraswati, N., Mulyandasari, V., Dengi, Y.K., Francisco, G., dan

Yudha, A., 2011. Potensi senyawa fenolik bahan alam sebagai antioksidan alami

minyak goreng nabati. Widya Teknik, Vol. 10 No. 1, hal 1-10.

Badarinath, A.V., RAo, K.M., Chetty, C.M.S., Ramkanth, S., Rajan, T.V.S., and

Gnanaprakash, K., 2010. A review on in-vitro antioxidant methods:

comparisions, correlations, and considerations. International Journal of

PharmTech Research, Vol. 2 No. 2, pp. 1276-85.

Baghiani, A., Charef, N., Djarmouni, M., Saadeh, H.A., Arrar, L., and Mubarak,

M.S., 2011. Free radical scanvenging and antioxidant effects of some

anthraquinone derivates. Medicinal Chemistry, Vol. 7 No.7, pp. 639-44.

72

Bahar, G., Feinmesser, R., Shpitzer, T., Popovtzer, A., and Nagler, R.M., 2007.

Salivary analysis in oral cancer patients: DNA and protein oxidation,

reactive nitrogen species, and antioxidant profile. Cancer, Vol. 109 No.1,

pp. 54-9.

Bart, H.J., 2011. Extraction of natural products from plants - an introduction. In:

H.J., Bart and S. Pilz (Eds.). Industrial Scale Natural Products

Extraction, Ed. 1st, Weinheim: Wiley-VCH Verlag GmbH & Co. KGaA.,

pp. 1-25.

Bentley, V, 2004. The Anti Ageing Plan: Your Complete Guide to Anti

Ageing Secrets That Really Work. London: Carlton Books Limited, p. 17.

BPOM, 2010. Acuan Sediaan Obat Herbal. Jakarta: Badan Pengawas Obat dan

Makanan, hal 1-8.

BPTP Yogyakarta, 2006. Teknik Budidaya Jarak Pagar (Jatropha curcas L.).

Yogyakarta: Agro Inovasi, hal 3-4.

Brown, N.S. and Bicknell, R., 2001. Hypoxia and oxidative stress in breast

cancer. Oxidative stress: its effects on the growth, metastatic potential and

response to therapy of breast cancer. Breast Cancer Research, Vol. 3 No.5,

pp. 323-7.

Bruno Jr., E.J., Ziegenfuss, T.N., and Landis, J., 2006. Vitamin C: research

update. Curr. Sports Med. Rep., Vol. 5 No.4, pp. 177-81.

Calvisi, D.F., Ladu, S., Hironaka, K., Factor, V.M., and Thorgeirsson, S.S., 2004.

Vitamin E down-modulates iNOS and NADPH oxidase in c-Myc/TGF-

alpha transgenic mouse model of liver cancer. Journal of Hepatology,

Vol. 41, pp. 815-22.

Capelli, B. and Cysewski, G., 2007. Natural Astaxanthin: King of the

Carotenoids. Holualoa: Cyanotech Corporation, pp. 11-22.

Cheeseman, K.H. and Slater, T.F., 1993. An introduction to free radicals

chemistry. British Medical Bulletin, Vol. 49 No. 3, pp. 481–93.

Chen, Y., Rongliang, Z., Zhongjian, J., and Yong, J., 1990. Flavonoid as

superoxide scavengers and antioxidants. Free Radical Biology and

Medicine, Vol. 9, pp. 19-21.

73

Chin Yen, G., Der Duh, P., and Yon Chuang, D., 2000. Antioxidant activity of

anthraquinones and anthrone. Food Chemistry, Vol. 70, pp. 437-41.

Colloca, C.B. and Sosa, V.E., 2009. Spectrometry: ultraviolet and visible spectra.

In: D.A. Sampietro, C.A.N. Catalan, and M.A. Vattuone (Eds.). Isolation,

Identification and Characterization of Allelochemicals/Natural

Products, Enfield: Science Publisher, pp. 253-92.

Dalle-Donne, I., Rossi, R., Colombo, R., Giustarini, D., and Milzani, A., 2006.

Biomarkers of oxidative damage in human disease. Clinical Chemistry,

Vol. 52 No.4, pp. 601-23.

Debenedetti, S. L., 2009. TLC and PC. In: D.A. Sampietro, C.A.N. Catalan, and

M.A. Vattuone (Eds.). Isolation, Identification and Characterization of

Allelochemicals/Natural Products, Enfield: Science Publisher,

pp. 103-34.

Depkes., 2000. Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat. Jakarta:

Departemen Kesehatan Republik Indonesia, hal 2-12.

Depkes, 2009. Farmakope Herbal Indonesia Edisi Pertama. Jakarta:

Departemen Kesehatan Republik Indonesia, hal 157-82.

Edderkaoui, M., Hong, P., Vaquero, E.C., Lee, J.K., Fischer, L., Friess, H.,

Buchler, M.W., Lerch, M.M., Pandol, S.J., and Gukovskaya, A.S., 2005.

Extracellular matrix stimulates reactive oxygen species production and

increases pancreatic cancer cell survival through 5-lipoxygenase and

NADPH oxidase. Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver. Physiol., Vol. 289,

pp. G1137–47.

Ekundayo, F. O., Adeboye, C. A., and Ekundayo, E.A., 2011. Antimicrobial

activities and phytochemical screening of pignut (Jatrophas curcas Linn.)

on some pathogenic bacteria. Journal of Medicinal Plants Research,

Vol. 5 No. 7, pp. 1261-4.

El Diwani, G., El Rafie, Sh., and Hawash, S., 2009. Antioxidant activity of

extracts obtained from residues of nodes leaves stem and root of Egyptian

Jatropha curcas. African Journal of Pharmacy and Pharmacology,

Vol. 3 No. 11, pp. 521-30.

Fauzana, D. L., 2010. Perbandingan Metode Maserasi, Remaserasi, Perkolasi dan

Reperkolasi terhadap Rendemen Ekstrak Temulawak (Curcuma

xanthorrhiza Roxb.). Bogor: Skripsi Program Sarjana.

74

Fu, R., Yuting, Z., Guo, Y., Liu, F., and Chen, F., 2014. Determination of

phenolic contents and antioxidant activities of extracts of Jatropha curcas

L. seed shell, a by-product, a new source of natural antioxidant. Journal of

Industrial Crops and Products, Vol. 58, pp. 265-70.

Gibbons, S., 2006. An introduction to planar chromatography. In: S.D. Sarker, Z.

Latif, and A.I. Gray (Eds.). Natural Products Isolation, Ed. 2nd, New

Jersey: Humana Press Inc., pp. 77-116.

Graβmann, J., 2005. Terpenoids as plant antioxidants. In: G. Litwack (Eds.).

Plant Hormones, Volume 72 (Vitamins and Hormones), Freising:

Elsevier Inc., pp. 505-35.

Graf B.A., Milbury, P.E., and Blumberg, J.B., 2005. Flavonols, flavonones,

flavanones and human health: epidemological evidence. Journal of

Medicinal Food, Vol. 8 No. 3, pp. 281-90.

Halliwell, B., 1995. How to characterize an antioxidant: an update. Biochemical

Society Symphosia, Vol. 61, pp. 73-101.

Halliwell, B., 2006. Oxidative stress and neurodegeneration: where are we now?

J. Neurochem., Vol. 97, pp. 1634–58.

Halliwell, B., Gutteridge, J.M.C., and Cross, C.E., 1992. Free radicals,

antioxidants, and human disease: where are we now? The Journal of

Laboratory and Clinical Medicine, Vol. 119 No. 6, pp. 598-620.

Hambali, E., Suryani, A., Dadang, Hariyadi, Hanafie, H., Reksowardojo, I.K.,

Rivai, M., Ihsanur, M., Suryadarma, P., Tjitrosemito, S., Soerawidjaja, T.H.,

Prawitasari, T., Prakoso, T., dan Purnama, W., 2006. Jarak Pagar

Tanaman Penghasil Biodiesel. Depok: Penebar Swadaya, hal 9-11.

Handa, S.S., 2008. An overview of extraction techniques for medicinal and

aromatic plants. In: S.S. Handa, S. Preet, S. Khanuja, G. Longo, and D.D.

Rakesh (Eds.). Extraction Technologies for Medicinal and Aromatic

Plants, Trieste: United Nations Industrial Development Organization and

the International Centre for Science and High Technology, pp. 22-6.

Heller, J., 1996. Physic Nut. Jatropha curcas L. Promoting the Conservation

and Use of Underutilized and Neglected Crops 1. Gatersleben: Institute of

Plant Genetics and Crop Plant Research/Rome: International Plant Genetic

Resources Institute, pp. 13-5.

75

Henning, R.K., 2008. Jatropha curcas L. In: G.H. Schmelzer and A. Gurib Fakim

(Eds). Plant Resources of Tropical Africa 11 (1). Medicinal Plants 1,

Wageningen: PROTA Foundations, pp. 347-52.

Houssen, W.E. and Jaspars, M., 2006. Isolation of marine natural products. In:

S.D. Sarker, Z. Latif, and A.I. Gray (Eds.). Natural Products Isolation,

Ed. 2nd, New Jersey: Humana Press Inc., pp. 353-90.

Huang, D., Ou, B., and Prior, R.R., 2005. The chemistry behind antioxidant

capacity assays. J. Agric. Food Chem., Vol. 53, pp. 1841-56.

Huang, Q., Guo, Y., Fu, R., Peng, T., Zhang, Y., and Chen, F., 2014. Antioxidant

activity of flavonoids from leaves of Jatropha curcas. ScienceAsia, Vol. 40,

pp. 193-7.

Igbinosa, O.O., Igbinosa, I.H., Chigor, V.N., Uzunuigbe, O.E., Oyedemi, S.O.,

Odjadjare, E.E., Okoh, A.I., and Igbinosa, E.I., 2011. Polyphenolic contents

and antioxidant potential of stem bark extracts from Jatropha curcas (Linn).

International Journal of Molecular Sciences, Vol. 12, pp. 2958-71.

Jiménez-Escrig, A., Jiménez-Jiménez, I., Sánchez-Moreno, C., and Saura-Calixto,

F., 2000. Evaluation of free radical scavenging of dietary carotenoids by the

stable radical 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl. Journal of the Science of

Food and Agriculture, Vol. 80, pp. 1686-90.

Jones, W.P. and Kinghorn, A.D., 2006. Extraction of plant secondary metabolites.

In: S.D. Sarker, Z. Latif, and A.I. Gray (Eds.). Natural Products Isolation,

Ed. 2nd, New Jersey: Humana Press Inc., pp. 323-51.

Jun, M., Fu, H.Y., Hong, J., Wan, X., Yang, C.S., and Ho, C.T., 2003.

Comparison of antioxidant activities of isoflavones from kudzu root

(Pueraria lobata Ohwi). Journal of Food Science, Vol. 68 No. 6,

pp. 2117-22.

Kahl, R. and Kappus, H., 1993. Toxikologie der synthetischen antioxidantien

BHA und BHT im vergleich mit dem natürlichen antioxidans vitamin E.

Zeitschrift für Lebensmittel-Untersuchung und Forschung, Vol. 196

No.4, pp. 329-38.

Kariadi, S.H.K.S., 2009. Diabates? Siapa takut!!: Panduan Lengkap untuk

Diabetesi, Keluarganya, dan Profesional Medis. Bandung: PT. Mizan

Pustaka, hal 101.

76

Klaunig, J.E., Xu, Y., Isenberg, J.S., Bachowski, S., Kolaja, K.L., Jiang, J.,

Stevenson, D.E., and Walborg Jr., E.F., 1998. The role of oxidative stress in

chemical carcinogenesis. Environmental Health Perspectives, Vol. 106

No. 1, pp. 289-95.

Krishnaiah, D., Sarbatly, R., and Nithyanandam, R., 2010. A review of the

antioxidant potential of medicinal plant species. Food Bioprod. Process.,

Vol. 89, pp. 217-33.

Li, Y., 2011. Antioxidants in Biology and Medicine: Essentials, Advances, and

Clinical Applications. New York: Nova Science Publishers, Inc., pp. 22-3.

Lotito, S.B. and Frei, B., 2006. Consumption of flavonoid-rich foods and

increased plasma antioxidant capacity in humans: cause, consequence, or

epiphenomenon? Free Radic. Biol. Med., Vol. 41 No. 12, pp. 1727-46.

Mandl, J., Szarka, A., and Banhegyi, G., 2009. Vitamin C: update on physiology

and pharmacology. Br. J. Pharmacol., Vol. 157 No. 7, pp. 1097-10.

Mardiah, Zakaria, F.R., dan Asydhad, L.A., 2006. Makanan Antikanker. Depok:

PT. Kawan Pustaka, hal 22.

Marks, D.B., Marks, A.D., and Smith, C.M., 1996. Basic Medical Biochemistry:

A Clinical Approach. Philadelphia: Lippincot Williams and Wilkins,

pp. 322-31.

Matsuse, I.T., Lim, Y.A., Hattori, M., Correa, M., and Gupta, M.P., 1999.

A search for anti-viral properties in Panamanian medicinal plants-the effect

on HIV and essential enzymes. J. Ethnopharmacol., Vol. 64 No. 1,

pp. 15-22.

Meister, A., 1994. Glutathione-ascorbic acid antioxidant system in animals. The

Journal of Biological Chemistry, Vol. 269 No. 13, pp. 9397-400.

Mitchell, R., Kumar, V., Abbas, A.K., Fausto, N., and Aster, J., 2011. Pocket

Companion to Robbins & Cotran Pathologic Basis of Disease.

Philadelphia: Elsevier Saunders, p. 9.

Molyneux, P., 2004. The use of the stable free radical diphenylpicrylhydrazyl

(DPPH) for estimating antioxidant activity, J. Sci. Technol., Vol. 26 No.2,

pp. 211-9.

77

Monteiro, G., Horta, B.B., Pimenta, D.C., Augusto, O., and Netto, L.E.S., 2007.

Reduction of 1-Cys peroxiredoxins by ascorbate changes the thiol-specific

antioxidant paradigm, revealing another function of vitamin C. Proc. Natl.

Acad. Sci., Vol. 104 No. 12, pp. 4886-91.

Nath L.K. and Dutta, S.K., 1991. Extraction and purification of curcain, a protease

from the latex of Jatropha curcas Linn. J. Pharm. Pharmacol., Vol. 43

No. 2, pp. 111-4.

Nurcholis, M. dan Sumarsih, S., 2007. Seri Budi Daya: Jarak Pagar dan

Pembuatan Biodiesel. Yogyakarta: Kanisius, hal 22-4.

Nzaramba, M.N., 2008. Relationships among Antioxidants, Phenolics, and

Specific Gravity in Potato Cultivars, and Evaluation of Wild Potato Species

for Antioxidants, Glycoalkaloids, and Anti-Cancer Activity on Human

Prostate and Colon Cancer Cells In Vitro. Texas: Dissertation Doctor of

Philosophy.

Olabinri B.M., Adepoju, E.A., Zainab, A.A., and Ahmed, A.A., 2014.

Phytochemical profiling of phytoconstituents of grape, Jatropha curcas and

Neem (Azadirachta indica) extracts. J. Pharmacognosy Phytother., Vol. 6

No. 2, pp. 17-23.

Oskoueian, E., Abdullah, N., Saad, W.Z., Omar, A.R., Ahmad, S., Kuan, W.B.,

Zolkifli, N.A., Hendra, R., and Ho, Y.W., 2011. Antioxidant, anti-

inflammatory and anticancer activities of methanolic extracts from Jatropha

curcas Linn. Journal of Medicinal Plants Research, Vol. 5 No. 1,

pp. 49-57.

Parihar, M.S. and Brewer, G.J., 2007. Mitoenergetic failure in Alzheimer disease.

Am. J. Physiol. Cell Physiol., Vol. 292, pp. C8-23.

Parveen, Upadhyay, B., Roy, S., and Kumar, A., 2007. Traditional uses of

medicinal plants among the rural communities of Churu District in the Thar

Desert, India. Journal of Ethnopharmacology, Vol. 113 No. 3,

pp. 387-99.

Patras, A., Yuan, Y.V., Costa, H.S., and Sanches-Silva, A., 2013. Antioxidant

activity of phytochemicals. In: B.K. Tiwari, N.P. Brunton, and C.S. Brennan

(Eds.). Handbook of Plant Food Phytochemicals: Sources, Stability and

Extraction, Ed. 1st, Chichester: John Wiley & Sons, Ltd., pp. 452-72.

78

Pérez-Jiménez, J., Arranz, S., Tabernero, M., Diaz- Rubio, M.E., Serrano, J.,

Goni, I., and Saura-Calixto, F., 2008. Updated methodology to determine

antioxidant capacity in plant foods, oils and beverages: extraction,

measurement and expression of results. Food Res. Int., Vol. 41 No.3,

pp. 274-85.

Pietta, P.G., 2000. Flavonoids as antioxidants. J. Nat. Prod., Vol. 63 No. 7,

pp. 1035-42.

Podsędek, A., 2007. Natural antioxidants and antioxidant activity of Brassica

vegetables: a review. LWT-Food Sci. Technol., Vol. 40, pp. 1-11.

Pokorný, J., 2007. Are natural antioxidants better and safer than synthetic

antioxidants? European Journal of Lipid Science and Technology,

Vol. 109 No. 6, pp. 629-42.

Poyton, R.O., Ball, K.A., and Castello, P.R., 2009. Mitochondrial generation of

free radicals and hypoxic signaling. Trends Endocrinol. Metab., Vol. 20

No. 7, pp. 332-40.

Prakash, A., Rigelhof, F., and Miller, E., 2001. Antioxidant Activity (Medallion

Labs). http://www.medlabs.com/Downloads/Antiox_acti_.pdf, Diakses

tanggal 04 Oktober 2014.

Prana, M.S., 2006. Budi Daya Jarak Pagar (Jatropha curcas L.) Sumber

Biodiesel, Menunjang Ketahanan Energi Nasional. Jakarta: LIPI Press,

hal 3.

Rohman, A. dan Riyanto, S., 2005. Daya antioksidan ekstrak etanol daun

kemuning (Murraya paniculata (L) Jack) secara in vitro. Majalah

Farmasi Indonesia, Vol. 16 No.3, hal. 136-40.

Rohmatussolihat, 2009. Antioksidan, penyelamat sel-sel tubuh manusia.

BioTrends, Vol. 4 No.1, hal 5-9.

Salganik, R.I., Albright, C.D., Rodgers, J., Kim, J., Zeisel, S.H., Sivashinskiy,

M.S., and Van Dyke, T.A., 2000. Dietary antioxidant depletion:

enhancement of tumor apoptosis and inhibition of brain tumor growth in

transgenic mice. Carcinogenesis, Vol. 21 No.5, pp. 909-14.

Sarker, S.D., Latif, Z., and Gray, A.I., 2006. Natural product isolation: an

overview. In: S.D., Sarker, Z. Latif, and A.I. Gray (Eds.). Natural Products

Isolation, Ed. 2nd, New Jersey: Humana Press Inc., pp. 1-25.

79

Schulte-Hermann, R., Timmermann-Trosiener, I., Barthel, G., and Bursch, W.,

1990. DNA synthesis, apoptosis, and phenotypic expression as determinants

of growth of altered foci in rat liver during phenobarbital promotion.

Cancer Res., Vol. 50, pp. 5127-35.

Seidel, V., 2006. Initial and bulk extraction. In: S.D., Sarker, Z. Latif, and A.I.

Gray (Eds.). Natural Products Isolation, Ed. 2nd, New Jersey: Humana

Press Inc., pp. 27-46.

Seifu, D., Assefa, F., and Abay, S.M., 2012. Medicinal plants as antioxidant

agents. In: A. Capasso (Eds.). Medicinal plants as Antioxidant Agents:

Understanding Their Mechanism of Action and Therapeutic Efficacy,

Kerala: Research Signpost, pp. 97-145.

Serrano, J., Goni, I., and Saura-Calixto, F., 2007. Food antioxidant capacity

determined by chemical methods may underestimate the physiological

antioxidant capacity. Food Res. Int., Vol. 40 No. 1, pp. 15-21.

Setyowati, W.A.E. dan Damayanti, D.R., 2014. Pengaruh Metode Ekstraksi

terhadap Aktivitas Antioksidan Kulit Buah Durian (Durio zibethinus

Murr.) Varietas Petruk. Seminar Nasional Pendidikan Sains IV,

http://jurnal.fkip.uns.ac.id/index.php/psdsains/article/view/5068/3575,

Diakses tanggal 29 Januari 2015.

Shahidi, F., Wanasundara, U.N., and Amarowicz, R., 1994. Natural antioxidant

from low pungency mustard flour. Food Res. Int., Vol. 27 No. 5,

pp. 489-93.

Shalaby, E.A., and Shanab, S.M.M., 2013. Antioxidant compounds, assays of

determination and mode of action. African Journal of Pharmacy and

Pharmacology, Vol. 7 No. 10, pp. 528-39.

Sharma, A., Rajappa, M., Satyam, A., and Sharma, M., 2010. Oxidant/antioxidant

dynamics in patients with advanced cervical cancer: correlation with

treatment response. Mol. Cell Biochem., Vol. 341, pp. 65-72.

Sharma, A., Saxena, S., Rani, U., Rajore, S., and Batra, A., 2010. Broad-spectrum

antimicrobial properties of medicinally important plant Jatropha curcas L.

Int. J. Pharma Sci. Rev. Res., Vol. 4 No.3, pp. 11–4.

Sichel, G., Corsaro, C., Scalia, M., Di Bilio, A.J., and Bonomo, R.P., 1991. In

vitro scavenger activity of some flavonoids and melanins against O−

𝟐●.. Free

Radic. Biol. Med., Vol. 11, pp. 1-8.

80

Singh, J., 2008. Maceration, percolation and infusion techniques for the extraction

of medicinal and aromatic plants. In: S.S. Handa, S. Preet, S. Khanuja, G.

Longo, and D.D. Rakesh (Eds.). Extraction Technologies for Medicinal

and Aromatic Plants, Trieste: United Nations Industrial Development

Organization and The International Centre for Science and High

Technology, pp. 67-9.

Sriyanti, Taslimah, Nuryono, dan Narsito, 2005. Pengaruh keasaman medium dan

imobilisasi gugus organik pada karakter silika gel dari abu sekam padi.

JSKA., Vol. 8 No.3, pp. 1-12.

Tandon, S. and Rane, S., 2008. Decoction and hot continuous extraction

techniques. In: S.S. Handa, S. Preet, S. Khanuja, G. Longo, and D.D.

Rakesh (Eds.). Extraction Technologies for Medicinal and Aromatic

Plants, Trieste: United Nations Industrial Development Organization and

the International Centre for Science and High Technology, pp. 93-106.

Triyati, E., 1985. Spektrofotometer ultra-violet dan sinar tampak serta aplikasinya

dalam oseanologi. Oseana, Vol. 10, No 1, hal 39-47.

Valya, A., 2007. Rahasia Jarak Pagar. Jakarta: Sinar Wadja Lestari, hal 13-20.

WHO, 2000. General Guidelines for Methodologies on Research and

Evaluation of Traditional Medicine. World Health Organization: Geneva,

pp. 3-27.

Wijaya, A. G., 2011. Uji Aktivitas Antioksidan Fraksi-Fraksi Hasil Pemisahan

Ekstrak Etil Asetat Kelopak Bunga Rosella (Hibiscus sabdariffa) dengan

Metode Penangkap Radikal DPPH (2,2-difenil-1-pikrilhidrazil).

Yogyakarta: Skripsi Program Sarjana.

Winarsi, H., 2007. Antioksidan Alami dan Radikal Bebas. Yogyakarta:

Kanisius, hal 14-8.

Wu, F., Schuster, D.P., Tyml, K., and Wilson, J.X., 2007. Ascorbate inhibits

NADPH oxidase subunit p47phox expression in microvascular endothelial

cells. Free Radic. Biol. Med., Vol. 42 No.1, pp. 124-31.

Yan, M.H., Wang, X., and Zhu, X., 2013. Mitochondrial defects and oxidative

stress in Alzheimer disease and Parkinson disease. Free Radic. Biol. Med.,

Vol. 62, pp. 90-101.

81

Yuhernita dan Juniarti, 2011. Analisis senyawa metabolit sekunder dari ekstrak

metanol daun surian yang berpotensi sebagai antioksidan. Makara, Vol. 15

No. 1, hal. 48-52.