REPLIKASI

KULIAH BLOK 1.1DRA.ETI YERIZEL,MS

DNA

Blok Pembangun DNADNA merupakan struktur yang dibangun oleh KH (pentosa), fosfat dan suatu basa dlam bentuk polimer dan berkombinasi membentuk helix ganda.

Blok pembangun DNA adalah “5-carbon sugar deoxyribose” yang saling dihubungkan oleh ikatan fosfodiester sehingga terbentuk dua untai ganda dengan tulang punggungnya dibentuk dari ikatan KH-fosfat pada bagian luar helix.

DNAKedua strand dari helix saling merupakan komplemeternya masing-masing. Masing-masing strand mempunyai “template” yang dapat mereplikasikan komplemennya masing-masing.

Setiap pentosa-nya juga terikat pada salah satu dari keempat basa yang terdiri dari adenine (A), guanine (G), cytosine (C) atau thymine (T).

REPLIKASI DNA

Replikasi DNA Proses perbanyakan DNA DNA ------ 2 DNA

Replikasi melibatkan suatu mekanisme yang integrated dari beberapa enzim dan protein

DNA polimerase I, II dan III dan RNA polimerase

Aturan Dasar Replikasi 1. Replikasi adalah: suatu proses yang

semiconcervative, satu arah 2. Replikasi mempunyai arah: Bermula pada suatu titik pada

kromosom, berlangsung ke kedua arah, two growing point or “fork’. Pergerakan kedua fork menjauh menghasilkan suatu bentuk gelembung

3. Replikasi bermula pada suatu titik pada kromosom. Mungkin ada beberapa titik pemula, dan beberapa fork, replikasi secara keseluruhan berlangsung lebih cepat

Replikasi 4. Replikasi dari kedua strand berlangsung dengan

pemasukan NTP dengan arah 5’-3’

5. Pada single strand tidak berlangsung secara simultan, dengan satu DNA polimerase. Replikasi secara “short discontinous pulse

Animal cell = 1000 nucleotida Prokaryot cell = 1000 – 2000 nucleotida

6. Replikasi pada tingkat “short fragmen” dimulai dengan terbentuknya “short Segmen” dari RNA sebagai primer untuk DNA polimerase, kekosongn atau gap yang terjadi diisi oleh DNA (Okazaki Fragmen)

REPLIKASI INVIVOMEMBUTUHKAN BANYAK ENZIM

Penemu mesin PCRPOLYMERASE CHAIN REACTION (PCR)PERTAMA KALI DITEMUKAN OLEH;KARY MULLIS TAHUN 1985

MENDAPAT HADIAH NOBEL TAHUN 1994

PCR Suatu teknik atau metode invitro untuk

perbanyakan (replikasi) DNA secara enzimatik tanpa menggunakan sel hidup atau organisme

Dengan teknik PCR,maka: Dapat menghasilkan DNA dalam jumlah

besar Waktu singkat

Replikasi dengan PCRtahap. Denaturasi

Tahap 2.Anaeling

64°C

Tahap Perpanjangan rantai

72°C

Akhir Siklus ke 1

Target replikasi,Siklus yg diulang

No. of No. Amplicon Cycles Copies of target 2 43 84 165 326 6420 1,048,57630 1,073,741,

824

RT PCR