Replikasi Dan Rekombinan Dna

download Replikasi Dan Rekombinan Dna

of 20

  • date post

    05-Jan-2016
  • Category

    Documents

  • view

    20
  • download

    1

Embed Size (px)

description

DNA rekombinan

Transcript of Replikasi Dan Rekombinan Dna

  • REPLIKASIKULIAH BLOK 1.1DRA.ETI YERIZEL,MS

  • DNA

  • Blok Pembangun DNADNA merupakan struktur yang dibangun oleh KH (pentosa), fosfat dan suatu basa dlam bentuk polimer dan berkombinasi membentuk helix ganda.

    Blok pembangun DNA adalah 5-carbon sugar deoxyribose yang saling dihubungkan oleh ikatan fosfodiester sehingga terbentuk dua untai ganda dengan tulang punggungnya dibentuk dari ikatan KH-fosfat pada bagian luar helix.

  • DNAKedua strand dari helix saling merupakan komplemeternya masing-masing. Masing-masing strand mempunyai template yang dapat mereplikasikan komplemennya masing-masing.

    Setiap pentosa-nya juga terikat pada salah satu dari keempat basa yang terdiri dari adenine (A), guanine (G), cytosine (C) atau thymine (T).

  • REPLIKASI DNA

  • Replikasi DNAProses perbanyakan DNADNA ------ 2 DNA

    Replikasi melibatkan suatu mekanisme yang integrated dari beberapa enzim dan protein

    DNA polimerase I, II dan III dan RNA polimerase

  • Aturan Dasar Replikasi1. Replikasi adalah: suatu proses yang semiconcervative, satu arah2. Replikasi mempunyai arah:Bermula pada suatu titik pada kromosom, berlangsung ke kedua arah, two growing point or fork. Pergerakan kedua fork menjauh menghasilkan suatu bentuk gelembung3. Replikasi bermula pada suatu titik pada kromosom. Mungkin ada beberapa titik pemula, dan beberapa fork, replikasi secara keseluruhan berlangsung lebih cepat

  • Replikasi4. Replikasi dari kedua strand berlangsung dengan pemasukan NTP dengan arah 5-3

    5. Pada single strand tidak berlangsung secara simultan, dengan satu DNA polimerase. Replikasi secara short discontinous pulseAnimal cell = 1000 nucleotidaProkaryot cell = 1000 2000 nucleotida

    6. Replikasi pada tingkat short fragmen dimulai dengan terbentuknya short Segmen dari RNA sebagai primer untuk DNA polimerase, kekosongn atau gap yang terjadi diisi oleh DNA (Okazaki Fragmen)

  • REPLIKASI INVIVOMEMBUTUHKAN BANYAK ENZIM

  • Penemu mesin PCRPOLYMERASE CHAIN REACTION (PCR)PERTAMA KALI DITEMUKAN OLEH;KARY MULLIS TAHUN 1985

    MENDAPAT HADIAH NOBEL TAHUN 1994

  • PCRSuatu teknik atau metode invitro untuk perbanyakan (replikasi) DNA secara enzimatik tanpa menggunakan sel hidup atau organisme

    Dengan teknik PCR,maka:Dapat menghasilkan DNA dalam jumlah besarWaktu singkat

  • Replikasi dengan PCRtahap. Denaturasi

  • Tahap 2.Anaeling 64C

  • Tahap Perpanjangan rantai72C

  • Akhir Siklus ke 1

  • Target replikasi,Siklus yg diulangNo. of No. Amplicon Cycles Copies of target 2438416532664201,048,576301,073,741,824

  • RT PCR