PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI - core.ac.uk · undur-undur daratdid prove gives the...

i

EFEK HIPOGLIKEMIK UNDUR-UNDUR DARAT

(Myrmileon sp.) PADA TIKUS PUTIH JANTAN

TERBEBANI GLUKOSA

SKRIPSI

Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.)

Program Studi Ilmu Farmasi

Oleh:

Andy Francisca Irawan

NIM: 048114135

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SANATA DHARMA

YOGYAKARTA

2007

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

ii

EFEK HIPOGLIKEMIK UNDUR-UNDUR DARAT

(Myrmileon sp.) PADA TIKUS PUTIH JANTAN

TERBEBANI GLUKOSA

SKRIPSI

Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.)

Program Studi Ilmu Farmasi

Oleh:

Andy Francisca Irawan

NIM: 048114135

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SANATA DHARMA

YOGYAKARTA

2007


iii


iv


v

HALAMAN PERSEMBAHAN

Whatever you do, work at it with all your heart

as working for the Lord not for men.

(Colossians 3:23)

Karya kecilku ini kupersembahkan kepada: Tuhanku (Bapaku Yang Sempurna, Penuntun Jalanku dan Pengharapanku) Bunda Maria (Bunda Yang Paling Setia) Papaku, Mamaku, dan Cie2ku ”cie lili” (Kalian karunia terindah Tuhan bagiku! ) Nenekku ( Yang selalu bersemangat, semoga selalu bersemangat dan sehat) Keluarga Besar Keluarga Angkatku Semua Sahabatku Almamaterku


vi

KATA PENGANTAR

Puji dan syukur penulis haturkan kepada Tuhan Yang Maha Esa yang

telah melimpahkan rahmat dan berkatnya untuk menyelesaikan penelitian dan

penulisan skripsi yang berjudul Efek Hipoglikemik Undur-Undur Darat

(Myrmileon sp.) pada Tikus Putih Jantan Terbebani Glukosa. Penelitian ini

dilakukan untuk memenuhi salah satu syarat tugas akhir untuk mencapai gelar

sarjana ilmu Farmasi bidang studi Farmasi Universitas Sanata Dharma

Yogyakarta.

Penulis telah banyak mendapat bantuan baik moral maupun spiritual dan

dukungan yang berupa bimbingan, dorongan, sarana, maupun fasilitas dari

berbagai pihak dalam penulisan skripsi ini, oleh karena itu penulis ingin

mengucapkan terima kasih kepada:

1. Ibu Rita Suhadi, M.Si., Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas

Sanata Dharma Yogyakarta dan selaku dosen penguji yang telah

memberikan masukan dan saran dalam penyusunan skripsi ini.

2. Bapak Yosef Wijoyo, M.Si., Apt. selaku dosen pembimbing atas

bimbingan, waktu, diskusi, dan pengarahan selama penelitian sampai

penyusunan skripsi.

3. Bapak Drs. Mulyono, Apt. selaku dosen penguji yang telah memberikan

masukan dan saran dalam penyusunan skripsi ini.

4. dr. Fenty, M.Kes., Sp.PK. selaku dosen penguj i yang telah memberikan

masukan dan saran dalam penyusunan skripsi ini.


vii

5. Ibu Christine Patramurti, M.Si., Apt.; Bapak Yohanes Dwiatmaka, M.Si.,;

Bapak Ipang Djunarko S.Si., Apt.; dan Romo Drs. Petrus Sunu Hardiyanta,

S.J., S.Si., yang telah memberikan masukan dan saran dalam penyusunan

skripsi ini.

6. Prof. Dr. Jusup Subagja, M.Sc. dan Bapak Sukirno, S.Si. yang telah

memberikan masukan dan bantuan dalam mengidentifikasi undur-undur

darat (Myrmileon sp.).

7. Keluargaku tercinta, papaku Benny Irawan Liong, mamaku Yulita

Megasari, kakakku Shirly Irawan atas cinta, dan nenekku Ong Siek Nio

atas cinta, pengorbanan, dukungan, semangat, dan doanya yang tak pernah

berhenti.

8. Semua guru dan dosenku dari TK hingga kuliah, terima kasih atas segala

pengajaran, kesabaran, dan ketekunan kalian.

9. Mas Heru, Mas Parjiman, Mas Kayat dan Mas Yuwono selaku staf

laboratorium Farmakologi Toksikologi dan Boifarmasetika. Terima kasih

atas bantuan, dan canda yang diberikan.

10. Sahabatku Ika Sindu, Hepi, Icka Gravilla, Riris, Niken, Aya, Shella,

Naomi, Veevee yang tak pernah lelah menemaniku.

11. Sahabatku Novi, Nike, Apri, Lala, Yasinta, Andrew, Arif yang selalu

memberikan semangat, canda, keceriaan sehingga proses perkuliahan

menjadi menyenangkan.

12. Tintus, Lidia, Acin, Brian, Ari, Fandy, Meri, Mbak Nana, Maduma, Keke,

Nur, Sisil, Yudi, Rosa semua teman-teman di Kelas C angkatan 2004


viii

ataupun kelas FKK 2004 yang tidak dapat disebutkan satu persatu. Terima

kasih atas kebersamaan, segala suka duka di Fakultas Farmasi Universitas

Sanata Dharma ini.

13. Feri, Liza, Rizki, Dika teman penelitian dan seperjuangan yang luar biasa.

14. Novi, Selvi, Listy, Meta, Maria, Ricka, Indah, Renny, Lia, Lanni, Nike,

Yohana, Melisa, Aning, Ratih, Wiwit, Eka, Chicha dan teman-teman kost

DEWI lainnya. Terima kasih atas kebersamaan dan kekompakkannya

selama ini.

15. Teman-teman di UKF Dolan-dolan terima kasih atas keceriaan dan

kekeluargaannya selama ini.

16. Teman-teman kecilku Feefee, Biandi, Nyndia, Nana, Edo, Yurico, Arif,

dan Edwin yang mencerahkan pikiranku selama liburan.

17. Teman-teman PKB dan PD yang selalu menguatkan dan meneguhkan

pikiran positifku.

18. Kak Dessi terima kasih atas kerja sama dan bantuannya selama penelitian.

19. Pihak lain yang tidak dapat disebutkan satu persatu oleh penulis.

Penulis menyadari masih ada kekurangan dalam penyusunan skripsi ini,

maka penulis sangat mengharapkan saran dan kritik yang membangun dari

berbagai pihak demi kemajuan dan kesempurnaan penelitian yang telah dilakukan.

Semoga skripsi ini memberikan manfaat bagi kita semua.


ix

PERNYATAAN KEASLIAN KARYA

Saya menyatakan dengan sesungguhnya bahwa skripsi yang saya tulis ini

tidak memuat karya atau bagian orang lain, kecuali yang telah disebutkan dalam

kutipan dan daftar pustaka, sebagaimana layaknya karya ilmiah. Sejauh

pengetahuan penulis belum pernah dilakukan penelitian mengenai efek

hipoglikemik undur-undur darat (Myrmileon sp.) pada tikus putih jantan terbebani

glukosa.


x

INTISARI

Jenis penelitian yang dilakukan adalah eksperimental murni dan dikerjakan mengikuti rancangan acak lengkap pola searah. Penelitian ini dilakukan dengan menggunakan 35 ekor tikus yang terdiri atas tujuh kelompok perlakuan. Kelompok I sebagai kontrol negatif diberi perlakuan aquades, kelompok II sebagai kontrol negatif diberi perlakuan CMC 1%, kelompok III diberi perlakuan glibenklamid sebagai kontrol positif dan kelompok IV, V, VI dan VII diberi perlakuan undur-undur darat dengan peringkat konsentrasi yang berbeda, semua pemberian dilakukan secara per-oral. Efek hipoglikemik undur-undur darat diuji mengikuti metode uji toleransi glukosa oral (UTGO). Kadar glukosa darah ditetapkan pada menit ke-0 sebelum UTGO dan menit ke-5, 15, 30, 60, 90, 120, 180, 240, dan 300 setelah UTGO dari hewan uji yang sebelumnya telah mendapat pra-perlakuan kontrol negatif, positif, dan undur-undur darat. Data kadar glukosa darah pada tiap kelompok dianalisis secara statistik menggunakan metode GLM Repeated Measure. Kemudian AUC0-300 diuji dengan Kruskall-Wallis dan dilanjutkan uji Mann-Whitney bertaraf kepercayaan 95%.

Hasil penelitian menunjukkan adanya undur-undur darat dengan dosis 6,3 mg/kgBB dan konsentrasi 0,63 mg/ml; 1,26 mg/ml; 2,52 mg/ml; dan 5,04 mg/ml memberikan penurunan kadar glukosa darah sebesar 20,47 %; 27,85 %; 20,15 %; 20,41 % terhadap kontrol negatif. Peringkat konsentrasi undur-undur darat sebesar 0,63 mg/ml; 1,26 mg/ml; dan 5,04 mg/ml menunjukkan penurunan kadar glukosa darah secara bermakna terhadap kontrol negatif. Peringkat konsentrasi undur-undur darat sebesar 0,63 mg/ml; 1,26 mg/ml dan 5,04 mg/ml juga menunjukkan penurunan kadar glukosa darah secara bermakna terhadap kontrol positif. Hal ini menunjukkan bahwa undur-undur darat terbukti memiliki efek hipoglikemik tetapi potensi yang dimiliki kecil dibandingkan potensi glibenklamid.

Kata kunci: undur-undur darat, diabetes mellitus, efek hipoglikemik


xi

ABSTRACT

The research type was the pure experimental and worked by following the complete-random-design of one way-pattern. This research was tested by using thirty five white-male-rat which were divided into seven different treatment groups. The First group was given to the aquadest treatment as the negative control, the second group was given to the CMC 1% as the negative control; while third group as the positive control was given to the glibenclamida treatment and the rest of the groups were given to undur-undur darat treatment with different concentration given for each group, all of the processes were given through the oral method. The hypoglycemic effect of undur-undur darat was tested by following the Oral Glucose Tolerance Test (UTGO) method. The blood-glucose-contents were taken, at the 0 minutes before the UTGO and also taken at minutes of 5, 15, 30, 60, 90, 120, 180, 240, and 300 after the UTGO, from the tested animal that had been gotten the pre-treatment of the negative control, positive control and undur-undur darat control before. Then the data of blood-glucose-contents was analyzed statistically using GLM Repeated Measure design. The AUC 0-300 was statistically analyzed using the Kruskall-Wallis test and then continued by using the Mann-Whitney test with 95 % level of convidence.

The result of the research showed that the 6,3 mg/kgBB doses of undur-undur darat reduced the concentration blood glucose contents for 20, 47 % of the 0,63 mg/ml concentration given; for 27, 85 % of the 1,26 mg/ml concentration given; for 20, 15 % of the 2,52 mg/ml concentration given; for 20, 41 % of the 5,04 mg/ml concentration given; toward the negative control. The concentration given ranks of 0,63 mg/ml; 1,26 mg/ml; and 5,04 mg/ml which gave the significantly effect in reducing the concentration blood glucose contents towards the negative control. While the given concentration ranks of 0,63 mg/ml; 1,26 mg/ml; and 5,04 mg/ml also gave the significantly effect in reducing the blood-glucose-contents towards the positive control. Thus, it can be concluded that undur-undur darat did prove gives the hypoglycemic effect but just small potensial if compared with glibenclamida.

Key words: Myrmileon sp., Undur-undur darat, Diabetes Mellitus, Hypoglycemic

Effect.


xii

DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL ........................................................................................... ii

HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING................................................... iii

HALAMAN PENGESAHAN .............................................................................. iv

HALAMAN PERSEMBAHAN ........................................................................... v

KATA PENGANTAR...........................................................................................vi

PERNYATAAN KEASLIAN KARYA ............................................................... ix

INTISARI...............................................................................................................x

ABSTRACT............................................................................................................xi

DAFTAR ISI……………………………………………………………………..xii

DAFTAR TABEL………………………………………………………………xvii

DAFTAR GAMBAR…………………………………………………………..xix

DAFTAR LAMPIRAN………………………………………………………..xx

DAFTAR SINGKATAN, ARTI LAMBANG DAN ISTILAH..........................xxi

BAB I PENGANTAR ......................................................................................... 1

A. Latar Belakang ............................................................................................... 1

1. Permasalahan ............................................................................................ 3

2. Keaslian penelitian.................................................................................... 3

3. Manfaat penelitian..................................................................................... 4

a. Manfaat teoritis…………………………..................…………………....4

b. Manfaat praktis..........................................................................................4


xiii

B. Tujuan Penelitian ............................................................................................ 4

a. Tujuan Umum............................................................................................4

b. Tujuan Khusus...........................................................................................4

BAB II PENELAAHAN PUSTAKA ................................................................. 5

A. Binatang Undur-undur Darat .......................................................................... 5

1. Sinonim ..................................................................................................... 5

2. Taksonomi binatang undur-undur darat .................................................... 5

3. Morfologi binatang ................................................................................... 6

B. Transport Glukosa............................................................................................6

C. Diabetes Melitus ............................................................................................. 9

1. Definisi...................................................................................................... 9

2. Gejala……………… ................................................................................ 10

3. Klasifikasi ................................................................................................. 11

4. Diagnosis penyakit .................................................................................... 13

5. Terapi ........................................................................................................ 15

D. Teknik Uji Diabetik dan Metode Penetapan Kadar Glukosa Darah............... 15

1. Teknik uji diabetik.....................................................................................15

2. Metode penetapan kadar glukosa darah.....................................................16

E. Glibenklamida ................................................................................................. 17

F. Spektrofotometri ............................................................................................. 18

G. Keterangan Empiris ......................................................................................... 19


xiv

BAB III METODOLOGI PENELITIAN ......................................................... 20

A. Jenis dan Rancangan Penelitian...................................................................... 20

B. Variabel Penelitian.......................................................................................... 20

1. Variabel utama .......................................................................................... 20

2. Variabel pengacau terkendali.................................................................... 21

3. Variabel pengacau tak terkendali…………...…………………………....21

C. Bahan dan Alat Penelitian............................................................................... 21

1. Bahan penelitian........................................................................................ 21

2. Alat penelitian........................................................................................... 23

D. Jalannya Penelitian......................................................................................... 23

1. Determinasi binatang undur-undur darat .................................................. 23

2. Pembuatan simplisia uji ............................................................................ 24

a. Pengolahan bahan……………………………………………………24

b. Pembuatan air halusan undur-undur darat ...………………………...24

c. Pasca pengolahan......... .......................................................................24

d. Penetapan peringkat konsentrasi undur-undur darat............................25

3. Preparasi bahan......................................................................................... 26

a. Pembuatan larutan asam benzoat 0,1% b/v……………………..……26

b. Pembuatan larutan stok glukosa 10mg/ml ...………………………...26

c. Pembuatan larutan natrium oksalat p.a. 2% b/v...................................26

d. Penentuan keseragaman bobot kaplet glibenklamida .........................26

e. Penentuan dosis glibenklamida ...........................................................27


xv

f. Pembuatan larutan glibenklamida 0,1125 mg/ml.................................27

4. Percobaan pendahuluan ............................................................................ 28

a. Penetapan waktu resapan stabil larutan glukosa murni .......................28

b. Penetapan panjang gelombang maksimum .........................................28

c. Pembuatan kurva baku ........................................................................28

d. Penetapan waktu pemberian glibenklamida ........................................28

e. Penetapan waktu pemberian undur-undur darat ..................................29

f. Pengelompokan dan perlakuan hewan uji ...........................................30

5. Penetapan kadar glukosa darah................................................................. 31

E. Analisis Hasil ..................................................................................................33

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ............................................................ 34

A. Determinasi Binatang Undur -Undur Darat ................................................... 34

B. Pembuatan simplisia uji dan preparasi bahan ............................................... 34

C. Percobaan Pendahuluan .. ............................................................................... 34

1. Waktu resapan stabil glukosa ……………………………………………34

2. Penetapan panjang gelombang maksimum ……………………………...37

3. Pembuatan kurva baku …………………………………………………..38

4. Penetapan waktu pemberian larutan glibenklamida ……………………..40

5. Penetapan waktu pemberian undur-undur darat ………………...….……43

D. Efek Hipoglikemik Undur- Undur Darat ....................................................... 45


xvi

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN .............................................................. 58

DAFTAR PUSTAKA .......................................................................................... 59

LAMPIRAN ......................................................................................................... 62

BIOGRAFI PENULIS ........................................................................................ 97


xvii

DAFTAR TABEL

Tabel I Nilai glukosa plasma puasa dan toleransi glukosa.........................14

Tabel II Diagnosis DM dengan pemberian glukosa oral 100g atau 75 g.....14

Tabel III Isi pereaksi enzim Glucose GOD-PAP..........................................22

Tabel IV Keseragaman bobot tablet..............................................................27

Tabel V Volume pengukuran kadar glukosa darah......................................32

Tabel VI Data hasil penetapan waktu resapan stabil larutan glukosa standar

........................................................................................................36

Tabel VII Hubungan kadar dan resapan glukosa pada ? maksimum 502nm.39

Tabel VIII Hasil UTGO dan perhitungan prosentase selisih LDDK 3000− larutan

glibenklamida................................................................................41

Tabel IX Hasil UTGO dan perhitungan prosentase selisih LDDK 3000− air

halusan undur-undur darat.............................................................43

Tabel X Data kadar glukosa darah rata-rata dan LDDK 3000− setiap

kelompok perlakuan.......................................................................46

Tabel XI Hasil analisis GLM Repeated Measure kadar glukosa darah........49

Tabel XII Pengaruh praperlakuan undur-undur darat terhadap LDDK 3000−

kadar glukosa darah tikus putih jantan dan prosentase perbedaan

terhadap kontrol positif dan kontrol negatif..................................51

Tabel XIII a Hasil analisis homogenitas variansi menggunakan uji Anova One

Way................................................................................................54


xviii

Tabel XIII b Test Mean LDDK 3000− ketujuh kelompok perlakuan dengan uji

Kruskal-Wallis...............................................................................55

Tabel XIV Hasil uji Mann-Whitney LDDK 3000− glukosa darah tikus putih

jantan terbebani glukosa................................................................55


xix

DAFTAR GAMBAR

Gambar 1. Sekresi insulin akibat peningkatan kadar glukosa dalam darah…8

Gambar 2. Insulin memperantarai transport glukosa ke dalam sel…………..9

Gambar 3. Struktur Glibenklamida………………………………………...17

Gambar 4. Reaksi enzimatik antara glukosa dan reagen GOD-PAP………35

Gambar 5. Grafik hubungan resapan glukosa murni 100 mg/dl pada ? 500nm

terhadap waktu………………….. ……………...………………36

Gambar 6. Kurva hubungan antara ? dan resapan maksimum glukosa standar

selama operating time……………………………………………37

Gambar 7. Kurva baku seri kadar glukosa pada ? maksimum 502 nm selama

operating time ( pada menit 15-35 )………………….....………..40

Gambar 8. Diagram penentuan selang waktu pemberian glibenklamida

terhadap % selisih LDDK……………….……………………….42

Gambar 9. Diagram penentuan selang waktu pemberian undur-undur darat

terhadap LDDK…………………….………………...…………..44

Gambar 10. Kurva hubungan antara waktu sampling dan kadar rata-rata

glukosa darah akibat pemberian aquadest, CMC, glibenklamida,

dan undur-undur darat………………..…………………………..47

Gambar 11. Diagram LDDK 3000− ± SE glukosa darah masing-masing

perlakuan........................................................................................53


xx

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Determinasi binatang undur-undur darat.............................. 62

Lampiran 2. Foto undur-undur darat ........................................................ 63

Lampiran 3. Foto air halusan undur-undur darat……..…......................... 64

Lampiran 4. Foto hewan uji percobaan (tikus putih jantan) ...................... 65

Lampiran 5. Foto alat penelitian ................................................................ 66

Lampiran 6. Preparasi bahan ...................................................................... 68

Lampiran 7. Data kadar glukosa darah pada tiap perlakuan dan waktu

sampling ............................................................................... 73

Lampiran 8. Hasil uji distribusi data dengan Tes Kolmogorov Smirnov .. 76

Lampiran 9. Hasil uji GLM Repeated Measure kadar glukosa darah .. 77

Lampiran 10. Hasil uji Kruskal Wallis ........................................................ 87

Lampiran 11. Hasil uji Mann Whitney ......................................................... 88

Lampiran 13. Hasil uji Anova One Way ...................................................... 94

Lampiran 13. Leaflet GOD-PAP.................................................................. 95


xxi

DAFTAR SINGKATAN, ARTI LAMBANG, DAN ISTILAH

ad libitum : tanpa batas

Antikoagulan : bekerja untuk mencegah pembekuan darah; berbagai

substansi yang menekan, memperlambat atau meniadakan

pembekuan darah

CMC : Carboxy Methyl Cellulosa

DM : Diabetes Mellitus

Geoxalated : darah yang mengandung oksalat sebagai antikoagulan

GOD–PAP : Glucose Oxidase - Phenol Antipirin atau Glukosa

Oksidase Phenol p-aminophenazone

Herbal : Obat tradisional yang dibuat dengan cara sederhana

seperti infusa, dekok, dan sebagainya yang berasal dari

simplisia

Hipoglikemi(k) : penurunan kadar glukosa dalam darah secara abnormal

LDDK : Luas Daerah di Bawah Kurva, kadar glukosa dalam darah

vs waktu

LDDK 3000− : Luas Daerah di Bawah Kurva dari menit ke-0 sampai

menit ke-300

? : panjang gelombang


1

BAB I

PENGANTAR

A. Latar Belakang

Pada masa modern seperti saat ini, kepraktisan dalam hidup sangat

ditonjolkan dalam menjalani kehidupan karena waktu yang digunakan dianggap

sangat berharga. Untuk menghemat waktu tersebut maka banyak teknologi-

teknologi yang berkembang untuk membantu manusia melakukan suatu

pekerjaan. Teknologi ini memanjakan manusia sehingga metabolisme tubuh

menurun dan menyebabkan menurunnya kondisi kesehatan dan meningkatnya

penyakit degeneratif.

Penyakit degeneratif merupakan penyakit akibat fungsi atau struktur dari

jaringan atau organ tubuh yang secara progresif menurun dari waktu ke waktu

karena usia atau pilihan gaya hidup yang tidak sehat (Subroto, 2006). Diabetes

mellitus merupakan penyakit kronik yang mendunia, dapat menimbulkan

komplikasi yang merugikan pada semua organ tubuh dan berbagai macam

keluhan. Penyakit yang menjadi ”momok” bagi manusia di seluruh dunia ini,

semakin meningkat terutama karena kurangnya kontrol pola hidup dan asupan

makanan. Oleh karena itu, penyakit ini perlu diwaspadai mengingat banyaknya

komplikasi yang dapat ditimbulkan pada berbagai organ.

Data epidemiologi menunjukkan jumlah penderita diabetes mellitus di dunia

pada tahun 1994 adalah 110,4 juta, diperkirakan pada tahun 2010 akan melonjak

dua kali lipat menjadi 239,3 juta. Jumlah penderita kencing manis (diabetes


2

mellitus) di Indonesia sekitar 17 juta orang (8,6 persen dari jumlah penduduk)

atau menduduki urutan terbesar ke-4 setelah India, China dan Amerika Serikat

(AS), ungkap Menkes Siti Fadilah Supari pada dialog tentang Diabetes

memperingatai Hari Lanjut Usia (Lansia) Nasional, di Jakarta, Rabu 22 Juni 2005

(Anonim, 2002).

Selama ini pengobatan untuk penyakit diabetes mellitus adalah dengan

menggunakan obat hipoglikemik oral (OHO), suntikan insulin, diet, ataupun

gabungan ketiganya. Banyak obat hipoglikemik oral yang tersedia di pasaran

sekarang, tetapi harga yang diberikan pun tidak murah padahal penderita penyakit

ini harus mengkonsumsi obat dalam jangka waktu yang panjang sehingga tidak

semua masyarakat dapat melakukan pengobatan. Selain itu kondisi masyarakat di

desa yang jauh dari kota ataupun tidak adanya jasa apotek membuat pengobatan

ini sulit diperoleh. Oleh karena itu, perlu adanya suatu solusi lain untuk

pengobatan diabetes mellitus seperti memanfaatkan tanaman obat, hewan, ataupun

bahan alam lain yang dapat diperoleh dari lingkungan sekitar, yang telah terbukti

dapat berkhasiat sebagai obat hipoglikemik.

Undur-undur darat merupakan salah satu solusi obat tradisional dari hewan

yang oleh masyarakat digunakan untuk menurunkan kadar gula darah pada

penderita diabetes. Hewan yang baru dikenal masyarakat dua tahun terakhir ini

tampaknya semakin dipercaya oleh masyarakat dan berkembang terus dari

pembicaraan di masyarakat, bahkan tak jarang pengalaman orang-orang yang

menggunakannya semakin meyakinkan akan manfaat hewan tersebut. Hewan ini


3

sekarang semakin diburu dan dibudidayakan untuk keperluan pengobatan

penyakit.

Untuk lebih memperoleh bukti khasiatnya maka perlu dilakukan penelitian

ilmiah. Meski belum diketahui secara pasti kandungan maupun mekanismenya,

namun diperkirakan efeknya dapat menurunkan kadar glukosa darah seperti

halnya obat hipoglikemik oral. Dengan didapatnya data yang meyakinkan secara

ilmiah maka penggunaan undur-undur darat sebagai obat hipoglikemik oral dapat

dijamin kebenarannya.

Penelitian pengaruh undur-undur darat terhadap kadar glukosa darah dapat

dilakukan dengan cara mengukur kadar glukosa darah dari hewan uji seperti tikus

yaitu dengan memberikan beban glukosa dan diamati pengaruh terhadap toleransi

glukosa.

1. Permasalahan

Permasalahan yang diangkat penulis pada penelitian ini adalah apakah

undur-undur darat memiliki efek hipoglikemik pada tikus putih jantan terbebani

glukosa?

2. Keaslian Penelitian

Sejauh penelusuran penulis, penelitian menggunakan undur-undur darat

masih jarang dilakukan di Indonesia.


4

3. Manfaat Penelitian

a. Manfaat teoritis

Penelitian ini diharapkan dapat mengembangkan manfaat undur-undur

darat sebagai obat tradisional yang berkhasiat sebagai antidiabetes.

b. Manfaat praktis

Penelitian ini diharapkan dapat memberikan sumbangan pemikiran,

informasi, dan masukan kepada masyarakat pada umumnya dan khususnya

para penderita diabetes mellitus mengenai penggunaan undur-undur darat

sebagai obat antidiabetes.

B. Tujuan

Penelitian ini bertujuan untuk :

1. Tujuan Umum

Tujuan penelitian ini secara umum adalah untuk membuktikan kebenaran

efek hipoglikemik undur-undur darat.

2. Tujuan Khusus

Tujuan penelitian ini secara khusus adalah untuk memperoleh data sebagai

bukti adanya efek hipoglikemik akibat pemberian undur-undur darat pada

tikus jantan terbebani glukosa.


5

BAB II

PENELAAHAN PUSTAKA

A. Binatang Undur-undur Darat

1. Sinonim

Berdasarkan Wayne's Word Noteworthy Plant Originally Published In July

1997, binatang undur-undur darat memiliki sinonim doodlebug (Armstrong,

2007).

2. Taksonomi binatang undur-undur darat

Class : Insecta (Insects)

Subclass : Myrientomata

Section : Pterygota (Winged Insects)

Division : Neoptilota

Subdivision : Endopterygota

Superorder : Neuropteroidea

Order : Neuroptera

Suborder : Planipennia

Family : Myrmeleontidae (Antlions)

(Swanson, 2007).


6

3. Morfologi binatang

Berbeda dengan serangga lainnya, undur-undur darat mempunyai bentuk

tubuh yang teradaptasi untuk membuat lubang di tanah dan pola hidup sebagai

predator. Undur-undur darat mempunyai tubuh yang lebar, datar, kaki yang

pendek (sangat cocok untuk berjalan mundur), dan kepala datar dengan mandible

yang berbentuk seperti sickle. Bentuk larva tidak menyerupai undur-undur dewasa

yaitu serangga yang dapat terbang dengan tubuh yang kecil dan panjang serta

sayap terbentang lebar (Anonim, 2008).

B. Transport Glukosa

Karbohidrat glukosa adalah karbohidrat terpenting dalam kaitannya

dengan penyediaan energi di dalam tubuh, hal ini dikarenakan semua jenis

karbohidrat baik monosakarida, disakarida, maupun polisakarida yang dikonsumsi

manusia akan terkonversi menjadi glukosa di dalam tubuh. Glukosa ini akan

berperan sebagai salah satu molekul utama bagi pembentukan energi di dalam

tubuh. Glukosa yang telah diserap (diabsorpsi) oleh usus halus kemudian akan

terdistribusi ke dalam semua sel tubuh melalui aliran darah (Irawan, 2007).

Glukosa di dalam tubuh selain tersimpan dalam bentuk glikogen di dalam

otot dan hati, juga tersimpan pada plasma darah dalam bentuk glukosa darah

(blood glucose). Di dalam tubuh glukosa berperan sebagai bahan bakar bagi

proses metabolisme, dan sumber energi utama bagi kerja otak. Glukosa digunakan


7

untuk mensintesis molekul ATP (adenosine triphosphate) melalui proses oksidasi.

ATP merupakan molekul-molekul dasar penghasil energi di dalam tubuh. Dalam

kebutuhan seharian, glukosa menyediakan hampir 50-75% dari total kebutuhan

energi tubuh (Irawan, 2007).

Sekresi insulin oleh sel ß (beta) tergantung oleh 3 faktor utama yaitu kadar

glukosa darah, ATP-sensitive K + channels dan Voltage-sensitive Calsium

Channels sel ß pankreas. Mekanisme kerja faktor- faktor tersebut adalah sebagai

berikut: pada keadaan puasa, kadar glukosa darah turun, ATP-sensitive K +

channels pada membrane sel ß akan terbuka sehingga ion kalium akan

meninggalkan sel ß, dan Ca-channels tertutup, akibatnya kalsium tidak dapat

masuk ke dalam sel ß, dan perangsangan sel ß untuk mensekresi insulin menurun

(Merentek, 2006).

Pada saat keadaan setelah makan, kadar glukosa darah akan meningkat

dan akan ditangkap oleh sel ß melalui glucose transporter 2 (GLUT2) dan dibawa

ke dalam sel ß. Di dalam sel, glukosa akan mengalami fosforilase menjadi

glukosa-6-fosfat (G6P) dengan bantuan enzim glukokinase. Glukosa-6-fosfat akan

mengalami glikolisis menjadi asam piruvat. Proses glikolisis juga menghasilkan

produk 6-8 ATP. Penambahan ATP ini akan meningkatkan rasio ATP/ADP dan

menutup kanal kalium. Penumpukan kalium dalam sel mengakibatkan

depolarisasi membran sel sehingga membuka kanal kalsium dan kalsium akan

masuk kedalam sel dan insulin akan dilepaskan ke dalam sel (Merentek, 2006).


8

Gambar 1. Sekresi insulin akibat peningkatan kadar glukosa dalam darah

(Cartailler, 2004)

Sekresi insulin pada orang non diabetes meliputi 2 fase, yaitu early peak

(fase 1) yang terjadi dalam 3–10 menit pertama setelah makan. Insulin yang

disekresi pada fase ini adalah insulin yang disimpan dalam sel beta (siap pakai).

Fase 2 atau disebut juga fase lanjut adalah sekresi insulin yang dimulai 20 menit

setelah stimulasi glukosa. Pada fase 1 pemberian glukosa meningkatkan sekresi

insulin untuk mencegah kenaikan kadar glukosa darah, dan kenaikan glukosa

darah selanjutnya akan merangsang fase 2 untuk meningkatkan produksi insulin.

Pada diabetes mellitus tipe-2, sekresi insulin pada fase 1 tidak mampu

menurunkan glukosa darah sehingga merangsang fase 2 untuk menghasilkan

insulin lebih banyak, tetapi sudah tidak mampu meningkatkan sekresi insulin

sebagaimana pada orang non diabetes (Merentek, 2006).


9

Gambar 2. Insulin memperantarai transport glukosa ke dalam sel

(Cartailler, 2004)

C. Diabetes Mellitus

1. Definisi

Diabetes Mellitus adalah penyakit kelainan metabolik glukosa akibat

defisiensi atau penurunan efektivitas insulin (adalah hormon yang

disekresikan oleh sel ß pada pankreas yang berperan dalam metabolisme

glukosa), gangguan metabolik glukosa pada kasus diabetes mellitus akan

mempengaruhi metabolisme tubuh yang lain(seperti metabolisme karbohidrat,

lemak, protein, dan air) (Wijayakusuma, 2006) dan menghasilkan gangguan

mikrovaskuler, dan makrovaskuler (Triptitt dkk, 2005).

Hiperglikemia timbul karena penyerapan glukosa ke dalam sel

terhambat serta metabolismenya diganggu. Dalam keadaan normal, kira-kira


10

lima puluh persen glukosa yang dimakan mengalami metabolisme sempurna

menjadi CO 2 dan air, lima persen diubah menjadi glikogen dan kira-kira tiga

puluh sampai empat puluh persen diubah menjadi lemak. Pada diabetes

mellitus semua proses tersebut terganggu, glukosa tidak dapat masuk ke dalam

sel, sehingga energi terutama diperoleh dari metabolisme protein dan lemak.

Sebenarnya hiperglikemia sendiri relatif tidak berbahaya, kecuali bila hebat

hingga darah menjadi hiperosmotik terhadap cairan intrasel. Yang nyata

berbahaya adalah glikosuria yang timbul, karena glukosa bersifat diuretik

osmotik, sehingga diuresis sangat meningkat disertai hilangnya berbagai

elektrolit. Hal inilah yang menyebabkan terjadinya dehidrasi dan hilangnya

elektrolit pada penderita diabetes yang tidak diobati (Handoko dan Suharto,

1995).

2. Gejala

Gejala klasik penyakit diabetes melitus, dikenal dengan istilah trio-P,

yaitu poliuria (banyak kencing), polidipsi (banyak minum), dan polipagia

(banyak makan).

a. Poliuria (banyak kencing) merupakan gejala umum pada penderita

diabetes melitus. Banyaknya kencing ini disebabkan kadar gula yang

berlebihan, sehingga merangsang tubuh untuk berusaha mengeluarkannya

melalui ginjal bersama air kencing. Gejala banyak kencing ini terutama

menonjol pada waktu malam hari, yaitu saat kadar gula dalam darah relatif

tinggi.


11

b. Polidipsi (banyak minum) sebenarnya merupakan akibat (reaksi tubuh)

dari banyak kencing tersebut. Untuk menghindari tubuh kekurangan cairan

(dehidrasi), maka secara otomatis akan timbul rasa haus atau kering yang

menyebabkan timbulnya keinginan untuk terus minum selama kadar gula

dalam darah belum terkontrol baik. Sehingga dengan demikian akan

terjadi banyak kencing dan banyak minum.

c. Polifagia (banyak makan) merupakan gejala yang tidak menonjol.

Terjadinya banyak makan ini disebabkan oleh berkurangnya cadangan

gula dalam tubuh meskipun kadar gula dalam darah tinggi. Sehingga

dengan demikian tubuh berusaha untuk memperoleh tambahan cadangan

gula dari makanan yang diterima. Badan kehilangan 4 kalori untuk setiap

gram glukosa yang diekskresi. Polifagia timbul karena perangsangan pusat

nafsu makan di hipotalamus oleh kurangnya pemakaian glukosa di

kelenjar itu (Lanywati, 2001; Handoko dan Suharto, 1995).

3. Klasifikasi

Berdasarkan klasifikasi American Diabetes Association/World Health

Organization (ADA/WHO), diabetes mellitus diklasifikasikan menjadi empat

tipe berdasarkan penyebab dan proses penyakitnya, yaitu:

a. diabetes mellitus tipe-1 (insulin dependent diabetes mellitus)

Pada tipe I, sel pankreas yang menghasilkan insulin mengalami

kerusakan. Akibatnya, sel-sel β pada pankreas tidak dapat mensekresi

insulin atau jika dapat mensekresi insulin, hanya dalam jumlah kecil.


12

Kerusakan pada sel-sel β disebabkan oleh peradangan pada pankreas

(pankreatitis) yang dapat disebabkan oleh infeksi virus atau akibat

endapan-endapan besi dalam pankreas (hemokromatosis atau

hemosiderosis). Akibat sel-sel β tidak dapat membentuk insulin maka

penderita tipe I ini selalu tergantung pada insulin.

b. diabetes mellitus tipe-2 (non-insulin dependent diabetes)

Sel-sel β pankreas tidak rusak, walaupun mungkin hanya terdapat

sedikit yang normal sehingga masih bisa mensekresi insulin, tetapi dalam

jumlah yang kecil sehingga tidak cukup untuk memenuhi kebutuhan

tubuh. Pada tipe-2 ini juga disebabkan pasien mengalami resistensi insulin

dimana sel-sel β pankreas mensekresi insulin dalam jumlah normal

ataupun lebih banyak tetapi jaringan relatif tidak sensitif pada aksi insulin

dan tidak memberikan respon yang seharusnya (Crowley, 2001). Alasan

terjadinya respon yang buruk dari jaringan ini tidak diketahui secara pasti,

tetapi sepertinya berkaitan dengan obesitas, karena mengurangi sifat

respon dari insulin (Crowley, 2001). Biasanya, penderita tipe ini adalah

orang dewasa gemuk diatas 40 tahun, tetapi kadang-kadang juga

menyerang segala umur.

c. diabetes mellitus tipe lain

Tipe ini disebabkan oleh berbagai kelainan genetik spesifik (kerusakan

genetik sel ß pankreas dan kerja insulin), penyakit pada pankreas, obat-

obatan, bahan kimia, infeksi, dan lain- lain.


13

d. diabetes mellitus saat kehamilan

Diabetes mellitus saat kehamilan merupakan istilah yang digunakan

untuk wanita yang menderita diabetes selama kehamilan dan kembali

normal sesudah hamil. Banyak wanita yang mengalami diabetes

kehamilan kembali normal saat postpartum (setelah kelahiran), tetapi pada

beberapa wanita tidak demikian.

(Wijayakusuma, 2006)

4. Diagnosis Penyakit

Cara dan kriteria diagnosis diabetes melitus adalah sebagai berikut:

a. Berdasarkan glukosa plasma puasa

Glukosa plasma dalam keadaan puasa dibagi atas tiga nilai, yaitu <

100mg/dl, antara > 100 mg/dl sampai < 125 mg/dl, dan =126 mg/dl. Kadar

glukosa plasma puasa <110 mg/dl dinyatakan normal, =126 mg/dl adalah

diabetes melitus, sedangkan antara 110-126 mg/dl disebut glukosa darah

puasa terganggu atau impaired fasting glucose (IFG).

b. Berdasarkan tes toleransi glukosa oral

Sesuai dengan kesepakatan WHO maka tes toleransi glukosa oral harus

dilakukan dengan beban 75 gram setelah berpuasa minimal 8 jam.

Penilaian adalah sebagai berikut: toleransi glukosa normal bila < 140

mg/dl, toleransi glukosa terganggu atau impaired glucose tolerance (IGT)

bila kadar glukosa 140 mg/dl - 200 mg/dl, dan kadar glukosa = 200 mg/dl

disebut diabetes melitus. Pasien dengan IFG dan IGT secara umum


14

mengacu pada ‘prediabetes’ yang mempunyai resiko besar berkembang

menjadi diabetes di masa depan.

c. HbA1c

Rekomendasi determinasi HbA1c ini untuk memonitor kontrol glikemik

pada pasien diabetes. Karena tidak adanya standar baik dan beberapa

negara belum siap untuk mengakses tes ini, maka determinasi HbA1c tidak

direkomendasikan untuk mendiagnosis diabetes sewaktu-waktu.

§ Glukosa plasma puasa

- Normal < 100 mg/dl (5,6 mmol/L)

- Glukosa plasma puasa terganggu 100 -125 mg/dl (5,6 – 6,9 mmol/L)

- Diabetes melitus = 126 mg/dl (7,0 mmol/L)

§ Hasil tes toleransi glukosa oral, glukosa plasma 2 jam

- Normal < 140 mg/dl (7,8 mmmol/L)

- Toleransi glukosa terganggu 140 - 200 mg/dl (7,8 - 11,1 mmol/L)

- Diabetes melitus = 200 mg/dl (11,1 mmol/L)

Tabel 1. Nilai glukosa pl asma puasa dan toleransi glukosa

§ Pemberian glukosa oral 100g

- Puasa = 95 mg/dl (5,3 mmol/L)

- 1 jam = 180 mg/dl (10 mmol/L)

- 2 jam = 155 mg/dl (8,6 mmol/L)

- 3 jam = 140 mg/dl (7,8 mmol/L)

§ Pemberian glukosa oral 75g

- Puasa = 95 mg/dl (5,3 mmol/L)

- 1 jam = 180 mg/dl (10 mmol/L)

- 2 jam = 155 mg/dl (8,6 mmol/L)

Tabel 2. Diagnosis DM dengan pemberian glukosa oral 100g atau 75 g

(DiPiro et al, 2005)


15

5. Terapi

Terapi terbaru bagi penatalaksanaan diabetes mellitus dibagi menjadi

terapi primer dan terapi sekunder, yang masing-masing mencakup hal-hal

berikut:

a. Terapi primer. Terapi primer terdiri atas diet diabetes mellitus, latihan

fisik/olah raga, dan penyuluhan kesehatan.

b. Terapi sekunder. Terapi sekunder terdiri obat antidiabetika dan

cangkok pankreas (Lanywati, 2001).

D. Teknik Uji Diabetik dan Metode Penetapan Kadar Glukosa Darah

1. Teknik Uji Diabetik

Pada suatu penelitian yang bertujuan untuk membuktikan khasiat suatu

obat antidiabetes, hewan uji yang digunakan perlu diubah keadaannya menjadi

diabetes baik DMTI maupun DMTTI. Suatu keadaan DMTI dapat dibuat secara

pankreatektomi dan juga secara kimia dengan menggunakan zat kimia sebagai

induktor (diabetogen) seperti aloksan, streptozosin, adrenalin, glukagon, dan

EDTA yang diberikan secara parenteral. Diabetogen-diabetogen tersebut mampu

menginduksi diabetes secara permanen yang ditandai dengan terjadinya

hiperglikemi yang diakibatkan oleh rusaknya sel β pada pankreas. Diabetes

Mellitus Tidak Tergantung Insulin dapat dihasilkan dengan pembebasan glukosa

peroral sebagai diabetoagen pada dosis 1,75 g/kgBB hewan uji, keadaan

hiperglikemi hanya berlangsung beberapa jam setelah pembebanan glukosa

tersebut (Anonim, 1991).


16

2. Metode Penetapan Kadar Glukosa Darah

Secara umum menurut Widowati dkk (1997) metode penentuan glukosa

darah dapat ditentukan dengan beberapa cara yaitu:

a. metode kondensasi dengan gugus amina

Prinsip: aldosa dikondensasikan dengan orto-toluidin dalam suasana asam

dan menghasilkan larutan berwarna hijau setelah dipanaskan. Kadar glukosa darah

dapat ditentukan sesuai dengan intensitas warna yang terjadi diukur secara

spektrofotometri.

b. metode enzimatik

Glukosa dapat ditentukan secara enzimatik, dengan menggunakan enzim

glukosa oksidase (GOD). Dengan adanya glukosa oksidase, maka glukosa

dioksidasi oleh udara (O 2 ) menjadi asam glukuronat disertai pembentukan

hidrogen peroksida. Dengan adanya enzim peroksidase (POD), H 2 O 2 akan

membebaskan O 2 yang mengoksidasi akseptor kromogen yang sesuai serta

memberikan warna merah. Akseptor kromogennya dapat berupa senyawa

aminoantipirin dan fenol atau orthodianisidin, kadar glukosa darah ditentukan

berdasarkan intensitas warna yang terjadi, diukur secara spektrofotometri.

c. metode oksidasi-reduksi

Kadar glukosa darah ditentukan dengan cara dioksidasi dengan

menggunakan suatu oksidan ferrisianida. Oksida ini direduksi menjadi

ferrosianida oleh glukosa dalam suatu suasana basa dengan pemanasan, kemudian

kelebihan garam ferri dititrasi secara iodometri.


17

E. Glibenklamida

Gambar 3. Struktur Glibenklamid (Evans dan Rushakoff, 2007)

Glibenklamida merupakan obat hipoglikemik oral yang digunakan secara

luas di dalam pengobatan diabetes mellitus tidak tergantung insulin (tipe-2).

Glibenklamida merupakan sulfonilurea paling poten dan dikenal sebagai

sulfonilurea ”generasi kedua” (Dollery, 1999).

Aksi farmakologi glibenklamida adalah mentimulasi pelepasan insulin

dengan meningkatkan fungsi sel-sel islet β pankreas. Pada terapi jangka pendek,

hal ini signifikan dengan peningkatan sirkulasi konsentrasi insulin, tetapi dengan

penggunaan berkelanjutan biasanya terjadi penurunan kadar insulin tanpa merusak

kontrol glikemik. Sulfonilurea menunjukkan peningkatan sintesis glikogen dan

penghambatan glikogenolisisi dan glukoneogenesis pada hati. Pada subyek

normal puasa, peningkatan konsentrasi insulin dalam plasma dan penurunan

glukosa plasma terjadi 15-60 menit setelah pemberian glibenklamida oral dan

mencapai maksimum setelah 1-2 jam sebelum kembali ke nilai dasar setelah 3 jam

(Dollery, 1999).

Glibenklamida dimetabolisme dalam hati menjadi produk dengan aktivitas

hipoglikemik yang sangat rendah. Meskipun analisis spesifik untuk senyawa yang

tidak dimetabolisme menimbulkan dugaan terdapatnya suatu waktu-paruh plasma

yang singkat, tetapi efek biologis glibenklamida jelas bertahan selama 24 jam

setelah pemberian satu dosis tunggal yang diberikan pada pagi hari pada pasien

CO

Cl

OCH3

NH CH2

O2S NH NHCH2 CO2


18

diabetes. Awal dosis pemberian yang biasa adalah 2,5 mg/hari atau kurang, dan

rata-rata dosis pemeliharaan adalah 5-10 mg/hari yang diberikan sebagai dosis

tunggal pada pagi hari. Tidak dianjurkan untuk memberikan dosis pemeliharaan

lebih dari 20 mg/hari (Nolte and Karam, 2002).

F. Spektrofotometri

Spektrofotometri UV-Vis adalah salah satu teknik analisis fisika-kimia

yang mengamati tentang interaksi atom atau molekul dengan radiasi

elektromagnetik pada panjang gelombang 190 – 380 nm (UV) dan 380 – 780 nm

(Vis) dengan memakai spektrofotometer (Mulja dan Suharman, 1995). Prinsip

kerja spektrofotometri adalah berdasarkan atas interaksi antara radiasi

elektromagnetik dengan materi. Materi dapat berupa atom, ion, atau molekul,

sedang radiasi elektromagnetik merupakan salah satu jenis energi yang

ditransmisikan dalam ruang dengan kecepatan tinggi (Khopkar, 1990). Interaksi

antara molekul yang mempunyai gugus kromofor dan radiasi elektromagnetik

pada daerah sinar ultraviolet dan sinar tampak (200-800 nm) akan menghasilkan

spektra serapan elektronik. Spektra serapan ini dapat digunakan untuk analisis

kuantitatif karena jumlah radiasi elektromagnetik yang diserap ada hubungannya

dengan jumlah molekul penyerap (Skoog, 1985).

Panjang gelombang dimana terjadi eksitasi elektronik yang memberikan

serapan maksimum disebut sebagai panjang gelombang serapan maksimum.

Penentuan panjang gelombang pada saat serapan maksimum dapat digunakan

untuk mengidentifikasi molekul (Mulja dan Suharman, 1995). Pada analisis


19

kuantitatif, pengukuran serapan dilakukan pada panjang gelombang saat serapan

maksimum, disebabkan dua alasan:

i. Sensitivitas maksimum diperoleh dengan mengerjakan pada pita maksimum

karena pada konsentrasi yang diberikan maka pada panjang gelombang

tersebut memberikan respon yang paling kuat.

ii. Pada pita maksimum, perubahan yang kecil pada panjang gelombang akan

memberikan perubahan serapan yang minimal (kecuali kalau pita absorpsi

sangat tajam). Dengan demikian kesalahan kecil dalam meletakan tanda

pemilih panjang gelombang pada instrumen tidakk akan mengakiibatkan

kesalahan besar pada pengukuran serapan (Fatah, 1989).

G. Keterangan Empiris

Penelitian ini sifatnya “trial and error” untuk mendapatkan pengetahuan

empiris tentang efek hipoglikemik undur-undur darat terhadap penurunan kadar

glukosa darah tikus putih jantan yang dibebani glukosa.

Cara makan: masukkan 2 ekor undur-undur darat ke dalam kapsul kosong,

biasanya dimasukkan dalam keadaan hidup. Makan dua ekor saja perhari, karena

ada yang memakan 7 ekor sekaligus berefek badan terasa panas dan kadar gula

langsung turun (Anonim, 2008).


20

BAB III

METODE PENELITIAN

A. Jenis dan Rancangan Penelitian

Jenis penelitian yang dilakukan termasuk jenis penelitian eksperimental

murni dan dikerjakan mengikuti rancangan acak lengkap pola searah. Penelitian

ini dilakukan di Laboratorium Biokimia-Mikrobiologi dan Laboratorium

Farmakologi Toksikologi Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma.

B. Variabel Penelitian

1. Variabel utama

a. Variabel bebas : Konsentrasi undur-undur darat.

Konsentrasi undur-undur darat adalah jumlah gram (g) banyaknya undur-

undur darat yang dilarutkan dalam mililiter (ml) aquades kemudian

disuntikkan pada tikus putih jantan terbebani glukosa.

b. Variabel tergantung : LDDK0-300 kadar glukosa dalam darah.

LDDK0-300 kadar glukosa dalam darah adalah besaran yang menggambarkan

jumlah kadar glukosa dalam darah pada rentang waktu mulai menit ke-0

sampai menit ke-300 yang dihitung menggunakan metode trapezoid.


21

2. Variabel pengacau terkendali

a. Jenis kelamin : jantan.

b. Galur spesies subyek uji : galur Wistar.

c. Warna : putih.

d. Berat badan subyek uji : antara 175-225 gram.

e. Umur subyek uji : antara 2-3 bulan.

f. Cara pemberian : peroral.

3. Variabel pengacau tak terkendali

a. Keadaan patologi subjek uji.

b. Kandungan dalam undur-undur darat.

C. Bahan dan Alat Penelitian

1. Bahan penelitian

a. hewan uji

Tikus putih jantan galur Wistar, umur 2 - 3 bulan, berat badan 175-225 gram,

dari Laboratorium Farmakologi Toksikologi Fakultas Farmasi Universitas Sanata

Dharma.

b. bahan uji

Undur-undur darat (Myrmileon sp.) yang diperoleh dari Kebun Obat

Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.

c. senyawa pembanding

Senyawa pembanding berupa kaplet generik glibenklamida yang

diproduksi oleh PT. Indofarma.


22

d. pereaksi untuk pengukuran kadar glukosa darah

Pereaksi yang digunakan adalah enzim Glucose GOD FS*(DiaSys,

Germany) yang terdiri atas:

Tabel III. Isi pereaksi enzim Glucose GOD-PAP Reagen :

Phosphat buffer pH 7,5 250 mmol/l

Phenol 5 mmol/l

4-aminoantipyrine 0,5 mmol/l

Glukosa oksidase (GOD) ≥ 10 kU/l

Phenol AminoAntipirin Peroksidase (PAP) ≤ 1 kU/l

Glukosa standar 100mg/dl (5,5 mmol/dl)

e. lain- lain

1) Sodium oksalat p.a 2 mg/ml darah sebagai antikoagulan pada waktu

pengambilan darah.

2) Glukosa monohidrat p.a (Merck) dengan dosis 1,75 g/kgBB sebagai

larutan untuk pembuatan kurva baku dan untuk uji toleransi glukosa oral

yang diperoleh dari LPPT Universitas Gadjah Mada.

3) Asam benzoat p.a 0,1% b/v sebagai pengawet glukosa monohidrat yang

diperoleh dari Laboratorium Kimia Analisis Fakultas Farmasi Universitas

Sanata Dharma Yogyakarta.

4) Aquades sebagai cairan pelarut undur-undur darat yang diperoleh dari

Laboratorium Farmakologi Toksikologi Fakultas Farmasi Universitas

Sanata Dharma.


23

5) Parafin cair sebagai pelancar aliran darah dalam pengambilan sampel

darah dari hewan uji, yang diperoleh dari Laboratorium Biofarmasetika

dan Bioanalisis Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.

2. Alat penelitian

1) Seperangkat alat gelas ( Beaker glass, labu takar, gelas ukur, pengaduk)

merk pyrex.

2) Mortir dan stamper.

3) Jarum suntik (injeksi peroral) yaitu jarum suntik yang ujungnya diberi

bulatan kecil dengan lubang ditengahnya agar tidak melukai hewan uji.

4) Mikropipet.

5) Sentrifuge (Hettich WBA SS, Germany) ,yellow tipe, microtube, surgical

blade.

6) Spektrometer Ultraviolet –Visibel (Optima® SP300, Japan) dan kuvet

7) Alat timbang elektrik (Mettler Toledo AB 204, Switzerland)

8) Vortex (Janke-Kankel IKA® - Labortechnik)

9) Holder

D. Jalannya Penelitian

1. Determinasi binatang undur-undur darat

Determinasi binatang undur-undur darat (Myrmileon sp.) dilakukan di

Laboratorium Entomologi Fakultas Biologi Universitas Gadjah Mada Yogyakarta.


24

2. Pembuatan simplisia uji

a. pengolahan bahan

1) mempersiapkan bahan mentah

Pengambilan undur-undur darat dipilih dari undur-undur darat yang

berbentuk larva.

2) Pembersihan

Undur-undur darat yang akan diolah harus bebas dari debu, kotoran, pasir

atau tanah serta terbebas dari bakteri atau jamur penyebab penyakit.

b. pembuatan air halusan undur-undur darat

Undur-undur darat yang telah bersih ditimbang sebanyak dua ekor, digerus

dengan menggunakan mortir dan stamper sampai halus dan ditambah dengan

aquades sebanyak 10 ml (konsentrasi ± 0,05g/10ml). Ambil sebanyak 6,3 ml

kemudian ditambahkan aguadest sampai 25 ml (konsentrasi ± 0,0315g/25ml)

dan air halusan pun siap digunakan. Air halusan yang dibuat tidak

menggunakan blender karena hanya memerlukan sedikit dan jumlah yang

kecil jadi proses penghalusan tidak memungkinkan untuk menggunakan

blender.

c. Pascapengolahan

Air halusan undur-undur selalu dibuat baru setiap kali akan digunakan untuk

menghindari kontaminasi bakteri, pertumbuhan jamur, gangguan serangga

yang dapat merusak air halusan tersebut.


25

d. Penetapan peringkat konsentrasi undur-undur darat

Sebelumnya dilakukan penetapan dosis undur-undur darat terlebih dahulu.

Berdasarkan pengalaman empiris di masyarakat, penggunaan undur-undur

darat untuk menurunkan kadar glukosa darah yaitu sebanyak 2 ekor atau ±

0,05g/50kgBB. Untuk manusia 70 kg dibutuhkan 0,07 g undur-undur darat

dan dikonversikan ke tikus 200 gram dengan faktor konversi 0,018.

0,07 g undur-undur darat x 0,018 = 0,00126 g/200g

= 0,0063 g/kgBB = 6,3 mg/kgBB

Ditentukan volume pemberiannya= 1,0 ml

Perhitungan konsentrasi undur-undur darat:

Volume pemberian x Konsentrasi = Dosis x Berat Badan

1,0 x Konsentrasi = 0,0063 g/kgBB x 200 g

Konsentrasi = 0,00126 g/ml = 1,26 mg/ml

Konsentrasi undur-undur darat yang dibuat adalah 1,26 mg/ml

Berdasarkan perhitungan maka besarnya konsentrasi undur-undur darat pada

hewan uji tikus yaitu 1,26 mg/ml. Untuk selanjutnya digunakan satu

konsentrasi dibawah dan dua diatas konsentrasi orientasi dengan

pengurangan/penambahan faktor perkalian 2 sehingga didapat rentang

konsentrasi undur-undur darat yang digunakan adalah 0,63 mg/ml; 1,26

mg/ml; 2,52 mg/ml; 5,04 mg/ml.


26

3. Preparasi bahan

a. pembuatan larutan asam benzoat p.a. 0,1% b/v

Serbuk asam benzoat p.a. ditimbang sebanyak 0,5 gram dan dilarutkan

dengan aquades panas dalam labu takar 500 ml sampai tanda.

b. pembuatan larutan stok glukosa p.a. 1% b/v

Glukosa monohidrat p.a. ditimbang sebanyak 1 gram dan dilarutkan

dengan aquades dan menggunakan pengawet asam benzoat 0,1% b/v dalam

labu takar 100 ml sampai tanda.

c. pembuatan larutan natrium oksalat p.a. 2% b/v

Natrium oksalat p.a. ditimbang sebanyak 1 gram dan dilarutkan dengan

aquades dalam labu takar 50 ml sampai tanda.

d. penentuan keseragaman bobot kaplet glibenklamida

Penentuan keseragaman bobot kaplet glibenklamida mengacu pada

Anonim 1979. Timbang 20 tablet, hitung bobot tablet. Jika ditimbang satu-

satu, tidak boleh lebih dari 2 tablet yang masing-masing bobotnya

menyimpang dari bobot rata-ratanya lebih besar dari harga yang

ditetapkan kolom A, dan tidak satu tabletpun menyimpang dari bobot rata-

ratanya lebih dari harga yang ditetapkan kolom B. Nilai penyimpangan

bobot rata-rata kolom A dan B dapat dilihat pada tabel IV.


27

Tabel IV. Keseragaman bobot tablet

Penyimpangan bobot rata-rata dalam %

Bobot rata-rata A B

25 mg atau kurang 15 % 30 %

26 mg sampai dengan 150 mg 10 % 20 %

151 mg sampai dengan 300 mg 7.5 % 15 %

Lebih dari 300 mg 5 % 10 %

e. penentuan dosis glibenklamida

Dosis glibenklamida yaitu 5 mg pada manusia dengan berat badan 70 kg,

dikonversikan ke tikus 200 gram dengan faktor konversi 0,018

5 mg glibenklamida x 0,018 = 0,09 mg glibenklamida/ 200 gram

= 0,45 mg glibenklamida/ kg BB

Berdasarkan perhitungan maka besarnya dosis glibenklamida pada hewan

uji tikus yaitu 0,45 mg/ kgBB.

f. pembuatan larutan glibenklamida 0,1125mg/ml

Timbang serbuk glibenklamida setara dengan 25 mg glibenklamida murni,

larutkan dengan aquades dalam labu takar 10 ml sampai tanda sebagai

larutan induk glibenklamida. Buat dengan konsentrasi 0,1125 mg/ml

dalam labu ukur 10 ml dari larutan induk glibenklamida tersebut.


28

4. Percobaan pendahuluan

a. penetapan waktu resapan stabil glukosa standar (operating time)

Sebanyak 25 µl larutan glukosa standar direaksikan dengan 2,5 ml pereaksi

GOD-PAP. Campuran larutan tersebut kemudian divortex dan segera diukur

resapannya pada panjang gelombang 500 nm (sesuai dengan yang tertulis

dalam leaflet Glucose GOD FS*) selama 60 menit. Waktu resapan stabil yang

digunakan adalah waktu inkubasi yang memberikan resapan stabil.

b. penetapan panjang gelombang serapan maksimum (? maksimal)

Sebanyak 25 µl larutan glukosa standar direaksikan dengan 2,5 ml pereaksi

GOD-PAP. Campuran larutan tersebut kemudian divortex dan diukur pada

rentang panjang gelombang 400 - 600 nm. Panjang gelombang yang

menunjukkan serapan yang paling tinggi adalah panjang gelombang serapan

maksimum (? maksimal).

c. pembuatan kurva baku

Memipet 0,75 ml; 1,0 ml; 1,5 ml; 2,0 ml; dan 2,25 ml larutan glukosa

monohidrat 1% b/v. Penetapan kadar glukosa darah dilakukan seperti pada

penetapan kadar glukosa darah dengan metode GOD-PAP. Resapan diukur

secara spektrofotometri pada panjang gelombang serapan maksimum

(? maksimal).

d. penetapan waktu pemberian glibenklamida

Tujuan dari penetapan pemberian glibenklamida adalah untuk melihat

pengaruh waktu pemberian terhadap efek hipoglikemik glibenklamida, agar

pada saat uji toleransi glikosa oral (UTGO) glibenklamida sudah memberikan


29

efek penurunan kadar glukosa darah. Orientasi ini menggunakan 6 ekor tikus

yang terbagi dalam 3 kelompok dimana masing-masing kelompok diberi

perlakuan perlakuan kontrol positif dan kontrol negatif. Perlakuan tersebut

dilakukan terhadap masing-masing kelompok yaitu pada menit ke-15 sebelum

UTGO untuk kelompok kesatu, menit ke-30 sebelum UTGO untuk kelompok

kedua, dan menit ke-45 sebelum UTGO untuk kelompok ketiga. Semua

pemberian dilakukan secara peroral, selanjutnya dilakukan UTGO dengan

diberikan larutan glukosa monohidrat 15% b/v; 1,75 g/kgBB. Pengambilan

cuplikan darah dilakukan sesaat sebelum perlakuan sebagai menit ke-0 dan

pada menit ke-15, 30, 45, 60, 90, 120, 180, 240, dan 300 setelah UTGO.

Pengukuran kadar glukosa darah dilakukan dengan menggunakan metode

GOD-PAP. Selanjutnya dibuat kurva UTGO dan perhitungan harga LDKK0-

300. Penentuan waktu pemberian undur-undur darat didasarkan pada harga

selisih LDKK0-300 kontrol positif dan negatif tertinggi.

e. penetapan waktu pemberian undur-undur darat

Penetapan waktu pemberian undur-undur darat digunakan untuk melihat

pengaruh waktu pemberian terhadap efek penurunan kadar glukosa darah, agar

pada saat dilakukan UTGO undur-undur darat sudah memberikan efek dalam

menurunkan kadar glukosa darah. Orientasi ini menggunakan 3 ekor tikus

yang masing-masing diberi undur-undur darat pada menit ke-15, 30, dan 45

sebelum UTGO. Semua pemberian dilakukan secara peroral, selanjutnya

dilakukan UTGO dengan diberikan larutan glukosa monohidrat 15% b/v; 1,75

g/kgBB. Pengambilan cuplikan darah dilakukan sesaat sebelum perlakuan


30

sebagai menit ke-0 dan pada menit ke-15, 30, 45, 60, 90, 120, 180, 240, dan

300 setelah UTGO. Pengukuran kadar glukosa darah dilakukan dengan

menggunakan metode GOD-PAP. Selanjutnya dibuat kurva UTGO dan

perhitungan harga LDKK0-300. Penentuan waktu pemberian undur-undur darat

didasarkan pada harga LDKK0-300 terendah.

f. pengelompokan dan perlakuan hewan uji

Penelitian ini mengikuti rancangan acak lengkap pola searah, yang mana 35

ekor tikus dibagi secara acak menjadi 7 kelompok, masing-masing kelompok

terdiri dari 5 ekor. Tiap hewan uji diadaptasikan dengan kondisi yang sama,

jauh dari kebisingan dan dihindarkan dari stress. Sebelum mendapat

perlakuan, masing-masing kelompok dipuasakan selama 18 jam dengan tetap

diberi minum ad libitum, lalu diberi perlakuan sebagai berikut:

1) Kelompok I

Aquades 5 ml/ kg BB (kontrol negatif untuk perlakuan undur- undur

darat)

2) Kelompok II

Larutan CMC 1% b/v 5ml/kg BB (kontrol negatif untuk perlakuan

glibenklamida)

3) Kelompok III

Larutan glibenklamida 0,45 mg/kgBB (kontrol positif)

4) Kelompok IV

Undur-undur darat dosis 6,3 mg/kgBB dengan konsentrasi 0,63 mg/ml


31

5) Kelompok V


6) Kelompok VI


7) Kelompok VII


Semua pemberian dilakukan secara peroral, selanjutnya dilakukan UTGO

dengan diberikan larutan glukosa monohidrat 15% b/v; 1,75 g/kgBB.

Pengambilan cuplikan darah dilakukan sesaat sebelum UTGO sebagai menit

ke-0 dan pada menit ke-15, 30, 45, 60, 90, 120, 180, 240, dan 300 setelah

UTGO. Pengukuran kadar glukosa darah dilakukan dengan menggunakan

metode GOD-PAP. Selanjutnya dibuat kurva UTGO dan perhitungan harga

LDKK0-300.

5. Penetapan kadar glukosa darah

Kadar glukosa darah ditetapkan dengan metode GOD-PAP. Pada tiap

kelompok dilakukan pengambilan cuplikan darah sebanyak 0,5 ml melalui

vena lateralis ekor dan ditampung dalam microtube yang berisi 50 µl sodium

oksalat 2%. Pengambilan cuplikan darah dilakukan sesaat sebelum perlakuan

sebagai menit ke-0 dan pada menit ke-15, 30, 45, 60, 90, 120, 180, 240, dan

300 setelah UTGO. Kemudian darah geoxalated ini dipusingkan 3000 rpm

selama 10 menit. Selanjutnya diambil 0,025 ml plasma darah, kemudian

dilakukan pengukuran seperti dalam tabel V


32

Tabel V. Volume pengukuran kadar glukosa darah

Bahan Sampel (ml) Standar (ml) Blangko (ml)

Supernatan

0.025

-

-

Larutan baku glukosa -

0,025

-

Asam benzoat 1% b/v -

-

0,025

Pereaksi GOD-PAP 2,5 2,5 2,5

Bahan-bahan tersebut dicampur dan diinkubasi selama operating time.

Kemudian kadar glukosa darah ditetapkan secara spektrofotometri visibel

menggunakan metode GOD-PAP. Resapan diukur pada panjang gelombang

maksimum. Kemudian kadar glukosa darah dihitung dengan rumus:

Kadar glukosa = (As / Ast) x 100 mg%

Keterangan : As = resapan sampel Ast = resapan standar

Selanjutnya dibuat kurva dengan mem-plot-kan nilai kadar glukosa darah

lawan waktu ke-0 sampai menit ke 300 dengan metode trapezoid (LDDK0-300)

dan rumus yang digunakan adalah sebagai berikut:

LDDK to-tn = t1 – to x (Co + C1) + t2 – t1 x (C2 + C1) +

2 2

t3 – t2 x (C3 + C2) + tn – tn-1 x (Cn + Cn-1)

2 2

Keterangan:

t = waktu (jam-1/menit-1)

C = konsentrasi zat dalam darah (mg/ml)

LDDKto-tn = luas daerah di bawah kurva dari waktu ke-0 sampai ke-n


33

E. Analisis Hasil

Data kadar glukosa darah pada tiap kelompok dianalisis secara statistik

menggunakan metode General-Linier Model Repeated Measured. Dari harga

LDDK0-300 glukosa darah dilakukan uji distribusi menggunakan uji Kolmogorov

Smirnov kemudian jika distribusinya normal dilanjutkan dengan analisis Anova

One Way dan post hoc tests LSD dengan tingkat kepercayaan 95%. Jika nilai

LDDK0-300 glukosa darah mempunyai variansi yang berbeda maka dilakukan uji

Kruskal Wallis dan dilanjutkan uji Mann Whitney dengan tingkat kepercayaan

95% untuk mengetahui perbedaan masing-masing kelompok.


34

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

A. Determinasi Binatang Undur-Undur Darat

Binatang undur-undur darat yang digunakan dalam penelitian ini

dideterminasi agar tidak terjadi kesalahan dalam menggunakan binatang undur-

undur darat sehingga pada akhirnya dapat dikonfirmasi bahwa binatang yang

dipakai memang benar binatang undur-undur darat (Myrmileon sp.). Bukti

determinasi dapat dilihat pada lampiran 1.

B. Pembuatan Simplisia Uji dan Preparasi Bahan

Pembuatan simplisia uji sesuai tata cara yang tertera pada halaman 24.

Preparasi bahan sesuai tata cara yang tertera pada halaman 26-27.

C. Percobaan Pendahuluan

1. Waktu resapan stabil glukosa

Reaksi antara glukosa dan reagen GOD-PAP merupakan reaksi enzimatis

yang menghasilkan senyawa berwarna, karena itulah maka perlu dilakukan uji

stabilitas glukosa untuk mengetahui Operating Time (OT) dari reaksi tersebut.

Penentuan OT ini bertujuan untuk mengetahui waktu resapan saat senyawa

berwarna yang terbentuk memberikan resapan yang stabil pada pengukuran


35

H O H

HOH

CH2OH

H

OHOHH

OHOH

H

HC

OH

HOH

CH2OH

H

O

OHOH

+ O2 + H2O2

glukosa

GOD

asam glukonat hidrogen peroksida

H2O2 H2N

N

N

CH3

OCH3

PAP

OH

O

N

N

CH3N

O

CH3

+ + + H2O

fenol

hidrogen peroksida

4 amino-antipirinkuinonimin

(berwarna merah muda)

menggunakan spektrofotometri visible. Pengukuran dilakukan pada panjang

gelombang 500 nm (sesuai pada leaflet enzim GOD-PAP) selama 60 menit.

Reagen GOD-PAP bekerja secara enzimatik dengan prinsip adanya GOD

(glucose oxidase) yang akan mengkatalisis oksidasi glukosa menjadi asam

glukonat dan hydrogen peroksida. Hidrogen peroksida akan bereaksi dengan

adanya enzim peroksidase, bersama dengan fenol dan 4-amino-antipirin

membentuk senyawa kuinonimin yang berwarna merah muda. Intensitas warna

merah muda yang terbentuk sebanding dengan konsentrasi glukosa. Reaksi yang

terjadi adalah sebagai berikut:

Gambar 4. Reaksi enzimatik antara glukosa dan reagen GOD-PAP(DiaSysy, 2006)


36

Data penetapan waktu resapan stabil glukosa standar 100 mg/dl tampak dalam

tabel VI.

Tabel VI. Data hasil penetapan waktu resapan stabil larutan glukosa standar

Waktu (menit) Resapan

5 0,336 10 0,361 15 0,365 20 0,365 25 0,364 30 0,364 35 0,363 40 0,362 45 0,361 50 0,361 55 0,361 60 0,360

Grafik hubungan resapan glukosa murni 100 mg/dl pada ? 500 nm terhadap waktu

seperti berikut:

Gambar 5. Grafik hubungan resapan glukosa murni 100 mg/dl pada ? 500 nm terhadap waktu


37

Dari grafik pada gambar 5 dapat dilihat bahwa pada menit ke-15 sampai menit ke-

35 memberikan grafik yang relatif datar, artinya pada menit tersebut terjadi reaksi

yang stabil dan sempurna antara glukosa murni dengan pereaksi GOD-PAP. Hal

ini berarti penetapan kadar glukosa darah dapat dilakukan pada menit ke-15-35

setelah pemberian pereaksi GOD-PAP. Akan tetapi untuk lebih meminimalkan

perbedaan resapan, maka pengerjaan OT dilakukan dari menit ke-15 sampai 35.

2. Penetapan panjang gelombang maksimum

Instrumen ukur (spektrofotometer visible) serta kondisi yang digunakan

dalam penelitian ini berbeda dengan instrument yang digunakan oleh DiaSys.

Oleh karena itu perlu dilakukan percobaan awal untuk mengetahui besar panjang

gelombang yang memberi resapan yang maksimum. Penetapan panjang

gelombang maksimum diukur pada rentang panjang gelombang 400-600nm.

Gambar 6. Kurva hubungan antara ? dan resapan maksimum glukosa standar selama operating time


38

Berdasarkan gambar 6 dapat dilihat bahwa resapan maksimum terjadi pada

panjang gelombang 502 nm. Pada leaflet DiaSys tertera bahwa panjang

gelombang saat resapan maksimum terjadi pada panjang gelombang 500nm.

Perbedaan panjang gelombang ini dikarenakan instrumen yang digunakan belum

tentu sama. Oleh karena itu pada pengukuran kadar glukosa pada percobaan ini

dilakukan pada panjang gelombang 502 nm.

3. Pembuatan kurva baku

Pada penelitian ini penetapan kadar glukosa darah dilakukan

menggunakan spektrofotometer sehingga harus memenuhi persyaratan hukum

Lambert-Beer. Hukum Lambert-Beer menjelaskan bahwa resapan akan meningkat

seiring dengan meningkatnya kadar. Oleh karena itu perlu dilakukan pembuatan

kurva baku untuk menunjukkan bahwa penetapan kadar glukosa dan secara

spektrofotometri ini telah memenuhi hukum Lambert-Beer.

Pembuatan kurva baku menggunakan larutan glukosa monohidrat 10

mg/ml (1% b/v) sebagai larutan stok glukosa. Tetapi larutan ini dibuat dengan

menggunakan pelarut asam benzoat. Sebagai pelarut digunakan aquades dan

ditambahkan asam benzoat sebagai pengawet glukosa selama kurun waktu

tertentu. Pengawetan ini perlu dilakukan karena glukosa merupakan media yang

baik untuk pertumbuhan mikroorganisme sehingga dengan penggunaan asam

benzoat diharapkan dapat meminimalkan faktor- faktor yang dapat menganggu

penetapan kadar glukosa darah.


39

Kurva baku dibuat dengan kadar 75 mg/dl, 100 mg/dl, 150 mg/dl, 200

mg/dl, 225 mg/dl. Kadar glukosa ditetapkan pada panjang gelombang 502 nm dan

waktu resapan maksimum(operating time) pada menit ke-15-35 sesuai dengan

hasil percobaaan pendahuluan yang telah dilakukan sebelumnya.

Dari hasil pengukuran resapan larutan glukosa standar pada panjang

gelombang 502 nm diperoleh data sebagai berikut:

Tabel VII. Hubungan kadar dan resapan glukosa pada ? maksimum 502 nm

Kadar (mg/dl) Resapan Persamaan Regresi Linear

75,3705 0,266

100,4940 0,343

150,7410 0,478

200,9880 0,668

226,1115 0,717

A = 0,03217

B = 0,00307

r = 0,9976

y = 0,00307x + 0,03217

Dari tabel VII. diatas terlihat bahwa harga koefisien regresi hubungan kadar dan

resapan glukosa pada ? 502 nm mendekati ±1, dan setelah dibandingkan dengan r

tabel dengan taraf kepercayaan 95% dengan df3 (df: degree of freedom, yaitu

jumlah sampel dikurangi dua) didapat bahwa r tabel sebesar 0,878. Dapat dilihat

bahwa harga r hitung lebih besar dari r tabel. Hal ini berarti bahwa persamaan

kurva baku tersebut memiliki linieritas yang baik.

Pada persamaan kurva baku tersebut sudut yang dibentuk oleh kurva

hubungan konsentrasi dan serapan sangat kecil, sehingga dari segi sensitivitas


40

kurva tersebut tidak dapat disajikan. Oleh karena itu, maka diperlukan faktor

koreksi (manipulasi) menjadi 300 kali lebih besar. Sehingga persamaan kurva

baku yang diperoleh menjadi y = 0,9199 X + 9,6508 dengan r = 0,9976.

Gambar 7. Kurva baku seri kadar glukosa pada ? maksimum 502 nm selama operating time ( pada menit 15-35 )

4. Penetapan waktu pemberian larutan glibenklamida

Waktu pemberian larutan glibenklamida didasarkan pada prosentase

penurunan harga luas daerah di bawah kurva dari menit ke-0 sampai menit ke-300

(LDDK 3000− ). Hasil UTGO dan perhitungan prosentase selisih LDDK 3000−

teringkas pada tabel VIII.


41

Tabel VIII. Hasil UTGO dan perhitungan prosentase selisih LDDK 3000− larutan glibenklamida

LDDK 3000− (mg.menit/dl) Waktu pemberian

larutan

glibenklamida

sebelum UTGO

(menit ke-)

Kontrol negatif

(CMC 1%)

Perlakuan

(larutan

glibenklamida)

Selisih

LDDK 3000−

(mg.menit/dl)

% Selisih

LDDK 3000−

15 40435,517 25659,985 14775,532 36,541

30 46982,475 19380,681 27601,794 58,749

45 45915,023 31039,283 14875,740 32,398

Dari tabel VIII. dapat kita lihat bahwa larutan glibenklamida yang diberikan

secara peroral pada menit ke-30 sebelum UTGO dapat menurunkan harga

LDDK 3000− sebesar 58,749% yang nilainya paling besar dibandingkan pemberian

pada menit yang lain sehingga ditetapkan pemberian larutan glibenklamida

sebagai kontrol positif untuk dibandingkan dengan pemberian undur-undur darat

yang digunakan yaitu 30 menit sebelum UTGO. Untuk lebih jelasnya dapat dilihat

pada gambar 8.


42

Gambar 8. Diagram penentuan selang waktu pemberian glibenklamida terhadap % selisih LDDK

Pada gambar 8 diatas dapat diamati bahwa pada menit ke-30

glibenklamida memberikan prosentase selisih LDDK 3000− yang paling besar

terhadap kontrol dibandingkan menit-menit lainnya. Pada menit ke-30 inilah

glibenklamida telah mencapai onset sehingga kemampuan untuk menurunkan

kadar glukosa darah paling tinggi dibandingkan dengan yang lainnya. Jadi,

kemampuan glibenklamida yang paling efektif dalam menurunkan kadar glukosa

darah adalah pada menit ke-30. Jika dibandingkan dengan menit ke-15 dan menit

ke-45, kemampuan menurunkan kadar glukosa darah berbeda banyak dengan

menit ke-30, sehingga dipilih menit ke-30.


43

5. Penetapan waktu pemberian undur-undur darat

Waktu pemberian undur-undur darat didasarkan pada prosentase

penurunan harga luas luas daerah di bawah kurva dari menit ke-0 sampai menit

ke-300 (LDDK 3000− ). Hasil UTGO dan perhitungan prosentase selisih LDDK 3000−

teringkas pada tabel IX.

Tabel IX. Hasil UTGO dan perhitungan prosentase selisih LDDK 3000− undur-undur darat

Waktu pemberian undur-undur darat sebelum UTGO

(menit ke-)

LDDK 3000− (md.menit/dl)

15 41539,097

30 35867,141

45 30892,516

Dari tabel IX. dapat kita lihat bahwa undur-undur darat yang diberikan secara

peroral pada menit ke-45 sebelum UTGO memberikan harga LDDK 3000− sebesar

30892,516 yang nilainya paling kecil dibandingkan pemberian pada menit yang

lain sehingga ditetapkan pemberian undur-undur darat yang digunakan yaitu 45

menit sebelum UTGO. Untuk lebih jelasnya dapat dilihat pada gambar 9.


44

Gambar 9. Diagram penentuan selang waktu pemberian undur-undur darat terhadap LDDK

Pada gambar 9 diatas dapat diamati bahwa pada menit ke-45 undur-undur darat

memberikan nilai LDDK 3000− yang paling kecil dibandingkan menit-menit

lainnya. Pada menit ke-45 inilah undur-undur darat telah mencapai onset sehingga

kemampuan untuk menurunkan kadar glukosa darah paling tinggi dibandingkan

dengan yang lainnya. Berdasarkan data tersebut maka ditetapkan pemberian

undur-undur darat yang digunakan yaitu 45 menit sebelum UTGO.


45

D. Efek Hipoglikemik Undur-undur Darat

Pada penelitian ini dilakukan penetapan kadar glukosa darah dengan

kontrol negatif diberi aquades; kontrol negatif diberi larutan CMC 1%; kontrol

positif diberi larutan glibenklamida dengan dosis 0,45 mg/kgBB; dan empat

kelompok perlakuan yaitu kelompok I diberi undur-undur dosis 6,3 mg/kgBB

dengan konsentrasi 0,63 mg/ml; kelompok II diberi undur-undur dosis 6,3

mg/kgBB dengan konsentrasi 1,26 mg/ml; kelompok III diberi undur-undur dosis

6,3 mg/kgBB dengan konsentrasi 2,52 mg/ml; dan kelompok IV diberi undur-

undur dosis 6,3 mg/kgBB dengan konsentrasi 5,04 mg/ml.

Kadar glukosa darah diukur menggunakan spektrofotometri visible dengan

metode enzimatik GOD-PAP. Sebelum dilakukan pengukuran resapan glukosa

perlakuan terlebih dahulu dilakukan pengukuran resapan glukosa standar.

Perhitungan kadar glukosa menggunakan perbandingan relatif antara kadar dan

resapan dari standar dan perlakuan.


46

Kontrol –

(aquades)

Kontrol -

(CMC1%)

Kontrol + Perlakuan I Perlakuan II Perlakuan III Perlakuan IV Kelompok perlakuan

128,5805 122,6744 98,9904 121,3724 118,9950 107,6801 102,3057 0

165,7347 160,2880 127,3538 147,7438 147,1689 149,0388 145,1190 15

201,7217 164,1600 129,3574 142,6602 142,7386 143,0826 133,0209 30

202,3701 138,4082 105,8151 138,0849 123,4945 118,9901 121,5687 45

182,5934 129,1277 73,5697 122,7704 116,5029 146,0273 118,8085 60

142,9753 112,6564 45,7697 120,6734 108,4038 109,2193 113,3467 90

147,3846 113,5168 40,7607 116,0981 87,0138 112,0301 112,4070 120

126,6353 111,1199 49,4639 108,5361 90,6134 109,6208 113,1705 180

125,7275 108,9073 46,9594 99,2584 100,2354 105,5385 110,1753 240

126,3759 113,8241 58,1670 105,4859 101,0661 107,5462 110,1753 300

Kadar glukosa darah

rata-rata (mg/dl)

tikus putih jantan

43474,7158 35872,5835 18573,3720 34576,8265 31365,4540 34713,7670 34600,8437 LDDK 3000− (mg.menit/dl)

Tabel X. Data kadar glukosa darah rata-rata dan LDDK 3000− setiap kelompok perlakuan


47

Selanjutnya grafik hubungan antara kadar glukosa darah dan waktu sampling dari

tiap-tiap kelompok perlakuan yaitu aquades, larutan CMC, larutan glibenklamida,

dan undur-undur darat dapat dilihat pada gambar 10.

Gambar 10. Kurva hubungan antara waktu sampling dan kadar rata-rata glukosa darah akibat pemberian aquades, CMC, glibenklamida, dan undur-undur darat

Keterangan:

Kontrol negatif : aquades

Kontrol negatif : CMC 1 %

Kontrol positif : glibenklamida dosis 0,45 mg/kgBB

Konsentrasi 1 : undur-undur dosis 6,3 mg/kgBB dengan konsentrasi 0,63m g/ml

Konsentrasi 2 : undur-undur dosis 6,3 mg/kgBB dengan konsentrasi 1,26 mg/ml


Konsentrasi 4 : undur-undur dosis 6,3 mg/kgBB dengan konsentrasi 5,04 mg/ml.


48

Gambar 10 memaparkan respon kadar glukosa darah hewan uji akibat

pembebanan glukosa saat UTGO pada berbagai perlakuan. Pada kelompok

kontrol negatif aquades menunjukkan rata-rata kadar glukosa paling tinggi

dibandingkan perlakuan lainnya. Hal ini dikarenakan pada kontrol negatif

aquades, tikus hanya diberi aquades yang tidak memiliki efek terapetik, sehingga

kadar glukosa darah ditentukan oleh kemampuan tubuh tikus sendiri untuk

menurunkan kadar glukosa tanpa adanya penambahan obat ataupun undur-undur

darat. Hal ini memberikan hasil bahwa kelompok kontrol negatif aquades ini

mempunyai rata-rata kadar glukosa yang paling tinggi jika dibandingkan dengan

kelompok lainnya.

Hasil percobaan menunjukkan bahwa kadar glukosa darah mencapai

maksimum pada menit ke-30 sampai menit ke-60, kemudian kadar glukosa darah

menurun kembali setelah dua sampai tiga jam setelah pemberian glukosa oral. Hal

ini sesuai dengan teori Mayes (1990) dimana kadar glukosa darah pada individu

normal meningkat dalam satu jam setelah pemberian glukosa oral. Absorpsi

glukosa menjadi normal kembali setelah dua sampai tiga jam setelah pemberian

glukosa. Hal ini berarti bahwa tubuh hewan uji tersebut berada dalam keadaan

sehat karena masih dapat mentoleransi pembebanan glukosa UTGO pada tingkat

normal.

Kontrol positif memberikan rata-rata kadar glukosa yang paling rendah

diantara kelompok perlakuan lainnya. Hal ini disebabkan karena penggunaan

larutan glibenklamida sebagai kontrol positif, merupakan obat hipoglikemik oral


49

golongan sulfonilurea yang memiliki efek terapetik menurunkan kadar glukosa

darah.

Dari kelompok perlakuan I sampai IV, ternyata kelompok perlakuan II

dengan dosis 6,3 mg/kgBB dengan konsentrasi 1,26 mg/ml memberikan

penurunan kadar glukosa darah yang paling baik dibandingkan perlakuan dengan

undur-undur darat lainnya. Hal ini terlihat dari nilai LDDK 3000− kelompok

tersebut paling kecil dari nilai LDDK 3000− perlakuan undur-undur darat lainnya (I,

III, dan IV). Perlakuan undur-undur darat lain hampir sama nilainya satu sama

lain, hanya mempunyai selisih sedikit antara perlakuan satu dengan yang lainnya.

Data kadar glukosa darah kemudian dianalisis mengikuti tata cara

rancangan GLM Repeated Measure untuk melihat perbedaan harga kadar glukosa

darah pada setiap waktu cuplikan akibat berbagai perlakuan. Hasil analisis statistic

secara GLM Repeated Measure menunjukkan adanya perbedaan yang bermakna

apabila probability (p) < 0,05 dan perbedaan yang tidak bermakna apabila p >

0,05. Hasil analisis dapat dilihat secara ringkas pada tabel XI.

Tabel XI. Hasil analisis GLM Repeated Measure kadar glukosa darah

Subjek variasi Jumlah kuadrat

Db Rata-rata kuadrat

F p

Tes antar subjek Periode (waktu) 124820,054 9 13868,895 67,271 0,000 BB Periode perlakuan 43697,860 54 809,220 3,925 0,000 BB

Diantara subjek

Perlakuan (konsentrasi)

156213,184 6 26035,531 10,303 0,000 BB

Keterangan : BB = berbeda bermakna (p < 0,05)

BTB = berbeda tidak bermakna (p > 0,05)


50

Pada tabel XI dapat kita lihat adanya perbedaan yang bermakna (p < 0,05)

antara purata kadar glukosa darah hewan uji yang dipengaruhi oleh periode waktu

(p= 0,000). Hal ini menunjukkan bahwa secara statistik terjadi perbedaan kadar

glukosa darah yang bermakna (signifikan) dari setiap waktu sampling darah

(menit ke-0 sampai 300) pada taraf kepercayaan 95%. Juga terlihat perbedaan

yang bermakna (p < 0,05) antara purata kadar plasma hewan uji yang dipengaruhi

oleh perlakuan (konsentrasi), sehingga perlakuan antar kelompok terbukti

memberi pengaruh signifikan terhadap perbedaan kadar glukosa darah pada menit

ke-0 sampai 300 dengan taraf kepercayaan 95%.

Kemampuan undur-undur darat dalam menurunkan kadar glukosa darah

dapat diperjelas dengan membandingkan nilai LDDK 3000− glukosa darah dari

masing-masing kelompok. LDDK 3000− merupakan besaran yang menggambarkan

jumlah glukosa darah yang diamati pada menit ke-0 sampai menit ke-300 pada

setiap kelompok perlakuan. Tabel XII berikut akan menunjukkan adanya

perbedaan antara kelompok kontrol negatif aquades, kontrol negatif CMC, kontrol

positif glibenklamida, perlakuan I, II, III, dan IV.


51

Tabel XII. pengaruh praperlakuan undur-undur darat terhadap LDDK 3000− kadar glukosa darah tikus putih jantan dan prosentase perbedaan terhadap kontrol positif dan

kontrol negatif

Prosentase perbedaan terhadap

Kelompok perlakuan

N

Mean LDDK 3000− ±SE

(mg.menit/dl)

Kontrol

negatif

CMC

Kontrol

negatif

aquades

Kontrol

positif

glibenklamida

Kontrol negatif CMC 5 35872,58 ± 392,17997 - - 93,14

Kontrol negatif Aquades 5 43474,72 ± 3185,877 - - -

Kontrol positif glibenklamida 5 18573,37 ± 328,87961 -48,22 - -

Perlakuan I 5 34576,83 ± 1893,881 - -20,47 86,16

Perlakuan II 5 31365,45 ± 3075,361 - -27,85 68,87

Perlakuan III 5 34713,77 ± 1577,326 - -20,15 86,90

Perlakuan IV 5 34600,84 ± 2315,080 - -20,41 86,29

Keterangan:




Perlakuan I : undur-undur dosis 6,3 mg/kgBB dengan konsentrasi 0,63 mg/ml

Perlakuan II : undur-undur dosis 6,3 mg/kgBB dengan konsentrasi 1,26 mg/ml

Perlakuan III : undur-undur dosis 6,3 mg/kgBB dengan konsentrasi 2,52 mg/ml

Perlakuan IV : undur-undur dosis 6,3 mg/kgBB dengan konsentrasi 5,04 mg/ml

Pada tabel diatas menunjukkan adanya perbedaan antara semua kelompok

perlakuan bila dibandingkan dengan kontrol negatif aquades. Perbedaan kelompok

perlakuan I, II, III, IV dengan kontrol negatif aquades secara berturut-turut adalah

20,47%; 27,85%; 20,15%; dan 20,41%. Penurunan yang paling besar terlihat pada

kontrol positif dengan pemberian glibenklamida dibandingkan dengan kontrol


52

negatif CMC 1% yaitu sebesar 48,22%. Sedangkan pada kelompok perlakuan

penurunan paling besar terjadi pada perlakuan II dosis 6,3 mg/kgBB dengan

konsentrasi 1,26 mg/ml yaitu 27,85%.

Pada tabel XII diatas juga menunjukkan adanya perbedaan antara semua

kelompok bila dibandingkan dengan kontrol positif glibenklamida. Perbedaan

kelompok perlakuan I, II, III, IV dengan kontrol negatif aquades secara berturut-

turut adalah 86,16 %; 68,87 %; 86,90 %; dan 86,29 %. Perbedaan yang paling

besar terhadap kontrol positif glibenklamida terlihat pada kontrol negatif CMC

1% yaitu sebesar 93,14%. Sedangkan pada kelompok perlakuan perbedaan paling

kecil terhadap kontrol positif glibenklamida terjadi pada perlakuan II dosis 6,3

mg/kgBB dengan konsentrasi 1,26 mg/ml yaitu 68,87%.

Dari jabaran diatas maka dapat dilihat bahwa undur-undur darat yang

dapat menurunkan kadar glukosa dalam darah adalah perlakuan II dengan diberi

undur-undur darat dosis 6,3 mg/kgBB dengan konsentrasi 1,26 mg/ml. Perlakuan

ini lebih baik dibandingkan perlakuan dengan undur-undur darat lainnya.

Gambaran mean LDDK pada tiap kelompok perlakuan dapat dilihat pada gambar

11.


53

Gambar 11. Diagram LDDK 3000− ± SE glukosa darah masing-masing perlakuan

Keterangan:








Data LDDK 3000− dari tujuh kelompok perlakuan ini kemudian dianalisis

menggunakan uji Anova One Way untuk terlebih dahuju mengetahui homogenits

variansi data LDDK 3000− . Dari hasil uji tersebut menunjukkan bahwa variansi data

LDDK 3000− memang berbeda, sehingga uji Anova One Way tidak dapat


54

dilanjutkan. Syarat-syarat yang harus dipenuhi agar dapat diuji menggunakan uji

Anova One Way adalah data mempunyai distribusi normal, dan variansi data

sama. Data dalam percobaan ini memenuhi syarat distribusi normal tetapi tidak

memenuhi syarat variansi data sama, sehingga data percobaan ini tidak dianalisis

dengan uji Anova One Way tetapi menggunakan uji Kruskal-Wallis. Perbedaan

variansi data LDDK 3000− dapat dilihat pada tabel XIIIa yang menunjukkan bahwa

nilai p < 0,05 yaitu 0,007

Tabel XIIIa. Hasil analisis homogenitas variansi menggunakan uji Anova One Way

Levene Statistic df1 df2 Sig. 3.757 6 28 .007

Uji Kruskal-Wallis dilakukan untuk mengetahui apakah ada perbedaan

nilai LDDK 3000− yang bermakna dari kelompok-kelompok perlakuan. Berdasarkan

tabel XIIIb dapat diketahui bahwa ketujuh kelompok perlakuan memiliki rata-rata

nilai LDDK 3000− (purata) yang berbeda. Hal ini disebabkan nilai probabilitasnya

yaitu sebesar 0,007 atau p < 0,05

Tabel XIIIb. Test Mean LDDK 3000− ketujuh kelompok perlakuan dengan uji Kruskal-Wallis

LDDK Chi-Square 17.669

df 6 Asymp. Sig. .007

Setelah diketahui bahwa ada perbedaan LDDK 3000− yang signifikan di

antara ketujuh kelompok perlakuan, masalah yang timbul adalah kelompok

perlakuan mana yang berbeda dan tidak berbeda. Untuk itu analisis Kruskal-


55

Wallis ini dilanjutkan dengan uji Mann-Whitney untuk mengetahui pengaruh

peringkat konsentrasi undur-undur darat pada masing-masing kelompok. Hasil uji

dinyatakan berbeda bermakna antar kelompok perlakuan bila nilai p < 0,05. Hasil

ini secara ringkas dapat dilihat dalam tabel XIV.

Tabel XIV. Hasil uji Mann-Whitney LDDK 3000− glukosa darah tikus putih jantan terbebani glukosa

1 2 3 4 5 6 7

1 - * ** BB BB BTB BB

2 * - BB *** *** *** ***

3 ** BB - BB BB BB BB

4 BB *** BB - BTB BTB BTB

5 BB *** BB BTB - BTB BTB

6 BTB *** BB BTB BTB - BTB

7 BB *** BB BTB BTB BTB -

Keterangan:

1 = Kontrol Negatif Aquades

2 = Kontrol Negatif CMC

3 = Kontrol Positif Glibenklamida

4 = undur-undur dosis 6,3 mg/kgBB dengan konsentrasi 0,63 mg/ml




BB = Berbeda Bermakna

BTB = Berbeda Tidak Bermakna

* = kontrol negatif aquades dan kontrol negatif CMC t idak berkaitan satu sama lain

** = kontrol positif glibenklamid tidak dilarutkan menggunakan aquades

*** = perlakuan undur-undur darat tidak dilarutkan dalam CMC


56

Hasil uji Mann-Whitney LDDK 3000− glukosa darah pada tabel XIV

menunjukkan perbedaan yang bermakna antara kontrol negatif CMC 1% terhadap

kontrol positif glibenklamida. Kontrol positif glibenklamida tidak dibandingkan

dengan kontrol negatif aquades karena larutan glibenklamida dibuat dengan

pelarut CMC 1% bukan menggunakan pelarut aquades. Hal ini dilakukan karena

glibenklamid tidak larut dalam aquades.

Kelompok perlakuan undur-undur darat tidak dibandingkan dengan

kontrol negatif CMC 1% karena kelompok perlakuan tersebut tidak menggunakan

perlarut CMC 1% tetapi menggunakan pelarut aquades sehingga kelompok

perlakuan undur-undur darat hanya dibandingkan dengan kontrol negatif aquades.

Semua kelompok perlakuan menggunakan undur-undur darat

menunjukkan perbedaan yang bermakna bila dibandingkan dengan kontrol negatif

aquades kecuali perlakuan III dosis 6,3 mg/kgBB dengan konsentrasi 1,26 mg/ml.

Perlakuan III menunjukkan perbedaan yang tidak bermakna dibandingkan dengan

kontrol negatif aquades, hal ini berarti bahwa perlakuan III (dosis 6,3 mg/kgBB

dengan konsentrasi 2,52 mg/ml) dapat menurunkan kadar glukosa darah tetapi

sangat lemah. Sedangkan kelompok perlakuan dengan undur-undur darat lainnya

dapat menurunkan kadar glukosa darah tetapi perlu dilihat juga bila dibandingkan

dengan kontrol positif glibenklamida.

Kelompok perlakuan undur-undur darat dibandingkan juga dengan kontrol

positif glibenklamida. Semua kelompok perlakuan undur-undur darat

menunjukkan perbedaan yang bermakna dengan kontrol positif glibenklamida.


57

Hal ini menunjukkan bahwa undur-undur darat kecuali perlakuan III (dosis 6,3

mg/kgBB dengan konsentrasi 2,52 mg/ml) dapat menurunkan kadar glukosa darah

tetapi penurunan yang terjadi tidak sebaik glibenklamida. Dari semua perlakuan

dengan undur-undur darat, perlakuan yang memberikan penurunan terbesar adalah

perlakuan II dosis 6,3 mg/kgBB dengan konsentrasi 1,26 mg/ml. Hal ini dilihat

dari Gambar 11 yaitu diagram LDDK 3000− glukosa darah masing-masing

perlakuan, dimana perlakuan II mempunyai nilai purata LDDK 3000− yang terkecil

dibandingkan perlakuan dengan undur-undur darat lainnya. Perlu ditekankan juga

walaupun perlakuan II mempunyai kemampuan menurunkan kadar glukosa darah

yang lebih besar dibandingkan perlakuan dengan undur-undur darat lainnya, tetapi

kemampuan perlakuan II tidak sebaik yang dimiliki kontrol positif

glibenklamida.


58

BAB V

KESIMPULAN DAN SARAN

A. Kesimpulan

Hasil penelitian menunjukkan bahwa undur-undur darat dengan dosis 6,3

mg/kgBB dengan konsentrasi 0,63 mg/ml sampai dengan konsentrasi 5,04 mg/ml

memberikan penurunan kadar glukosa darah sebesar 20,15% sampai 27,85%

terhadap kontrol negatif aquades. Undur-undur darat dosis 6,3 mg/kgBB dengan

konsentrasi 0,63 mg/ml; 1,26 mg/ml; 5,04 mg/ml memberikan efek penurunan

kadar glukosa darah secara berbeda bermakna terhadap kontrol negatif aquades.

Undur-undur darat dosis 6,3 mg/kgBB dengan konsentrasi 0,63 mg/ml; 1,26

mg/ml; 5,04 mg/ml juga memberikan efek penurunan kadar glukosa darah secara

berbeda bermakna terhadap kontrol positif glibenklamida. Nilai purata kadar

glukosa darah yang didapatkan dari perlakuan dengan undur-undur darat (terdapat

dalam tabel XII) dipertimbangkan kembali. Purata kadar glukosa darah dari

perlakuan undur-undur darat lebih mendekati nilai kontrol negatif aquades. Hal ini

menunjukkan bahwa undur-undur darat terbukti memiliki potensi efek

hipoglikemik tetapi potensi yang dimiliki kecil dibandingkan dengan

glibenklamid.

B. Saran

Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut tentang efek hipoglikemik undur-

undur darat dalam jangka waktu yang lebih lama (pemberiannya bukan dosis

tunggal tetapi dosis berulang).


59

DAFTAR PUSTAKA

Anonim, 1979, Farmakope Indonesia, Edisi III, 7, 9, 32, Departemen Kesehatan

Republik Indonesia, Jakarta

Anonim, 1991, Penapisan Farmakologi, Pengujian Fitokimia dan Pengujian

Klinik (Pedoman Pengujian dan Pengembangan Fitofarmaka), 233-240,

Balai Pengembangan dan Pemanfaatan Obat Bahan Alam, Jakarta

Anonim, 2002, News and article, Error! Hyperlink reference not valid.. diakses

tanggal 28 September 2007

Anonim, 2008, Antlions: The good, the odd, the ugly, Error! Hyperlink reference

not valid.. diakses tanggal 20 Januari 2008

Armstrong, W.P., 2007, Antlions: Denizens Of The Sand, Error! Hyperlink

reference not valid.. diakses tanggal 20 Januari 2008

Cartailler, J.P., 2004, Insulin - from secretion to action, www.betacell.org/content/

articles/print.php?aid=1, diakses tanggal 30 April 2008

Crowley, Leonard V., 2001, An Introduction to Human Disease: Pathology and

Pathophysiology Corelations, 5 th Edition, 586, Jones and Bartlett

Publishers, Canada.

Dollery, S.C., 1999, Therapeutic Drugs, 2 nd Edition, Vol I, G 64-69, Churchill

Livingstone, London

Fatah, A.M., 1989, Spektroskopi, 45-46, Fakultas Farmasi UGM, Yogyakarta

Handoko, T., dan Suharto, B., 1995, Insulin, Glukagon dan Anti Diabetik Oral

dalam Ganiswarna, (Ed.), Farmakologi dan Terapi, Edisi 4, 462-473,

Bagian Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia, Jakarta


60

Irawan,M.A., 2007, Glukosa dan Metabolisme Energi, http://www.pssplab.com/

journal/06.pdf, diakses tanggal 25 April 2008

Katzung, B.G., 2002, Farmakologi Dasar dan Klinik. diterjemahkan oleh Bagian

Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Airlangga. Buku 2 Edisi 8,

699. Salemba Medika. Jakarta

Khopkar, 1990, Basic Concepts of Analytical Chemistry, diterjemahkan oleh

Saptoraharjo, 193, 204, UI Press, Jakarta

Lanywati, E., 2006, Diabetes Mellitus Penyakit Kencing Manis, 13-14, 30,

Kanisius. Yogyakarta

Mayes, P.A., 1990, Glukoneogenesis dan Pengendalian Kadar Glukosa Darah,

dalam Murray, R.K., Granner, D.K., Mayes, P.A., Rodwell, V.W., (Eds.),

Harper’s Biochemistry, diterjemahkan oleh Andry Hartono, Edisi 22, 227,

ECG, Jakarta

Merentek, E., 2006, Resistensi Insulin Pada Diabetes mellitus Tipe 2, Majalah

Cermin Dunia Kedokteran, No 150,38, 39, Jakarta

Mulja, H.M., Suharman, 1995, Analisis Instrumental, 1-59, 238 Airlangga

University Press, Surabaya

Nolte, M.S., and Karam, J.H., 2002, Hormon Pankreas dan Obat Anti Diabetes,

dalam Katzung, B.G., (Eds.), Farmakologi Dasar dan Klinik,

diterjemahkan oleh Bagian Farmakologi Fakultas edokteran Universitas

Airlangga, Buku 2, Edisi 8, 699, Salemba Medika, Jakarta

Subroto, Ahkam. M, 2006, Ramuan Herbal untuk Diabetes Melitus, 5-6, Penebar

Swadaya, Jakarta


61

Swanson, Mark, 2007, Antlion Taxonomy, Error! Hyperlink reference not valid..

diakses tanggal 20 Januari 2008

Triptitt, C.L., Reasner, C.A., and Isley, W.L., 2005, Endocrinologic Disorders, in

DiPiro, J.T., Talbert, R.L., Yee, G.C., Matzke, G.R., Wells, B.G., and

Posey, L.M., (Eds.), Pharmacotherapy: A Pathophysiologic Approach,

6 th Edition, 1333-1363, McGraw-Hill Companies, USA

Widowati, L., Dzulkarnain, B., dan Sa’roni, 1997, Tanaman Obat untuk Diabetes

Mellitus, Cermin Dunia Kedokteran., 116, 53-60, Jakarta

Widyaningrum, Y., 2004, Efek Hepatoprotektif Kombinasi Jus Wortel ( Daucus

arota L.) dan Apel Hijau (Pyrus macus L.) pada Mencit Jantan Terinduksi

Parasetamol, Skripsi, Fakultas Farmasi, Universitas Sanata Dharma,

Yogyakarta.

Wijayakusuma, Hembing., 2006, Bebas Diabetes Mellitus ala Hembing, 7-8, 15-

16, Puspa Swara, Jakarta


62

Lampiran 1. Determinasi binatang undur-undur darat.


63

Lamp iran 2. Foto undur-undur darat

Foto undur-undur darat 1

Foto undur-undur darat 2


64

Lampiran 3. Foto air halusan undur-undur darat

Foto air halusan undur-undur darat 1

Foto air halusan undur-undur darat 2


65

Lampiran 4. Foto hewan uji percobaan (tikus putih jantan)

Foto tikus putih jantan 1

Foto tikus putih jantan2


66

Lampiran 5. Foto alat penelitian

Foto mortir dan stamper

Foto timbangan elektrik (Mettler Toledo AB240, Switzerland)


67

Foto sentrifuge (Hettich WBA SS, Germany)

Foto vortex (Janke-Kankel IKA®- Labortechnik)

Foto spektrofotometri visible (Optima ® SP300, Japan)


68

Lampiran 6. Preparasi bahan

a. Pembuatan larutan asam benzoat 0,1% b/v

Berat kertas = 0,4658 g

Berat kertas + asam benzoat = 0,5665 g

Berat kertas + sisa = 0,4660 g -

Berat asam benzoat = 0,1005 g

Sebanyak 0,1005 g serbuk asam benzoat p.a. dilarutkan dengan aquades panas

dalam labu takar 100,0 ml sampai tanda.

b. Pembuatan Larutan Stock Glukosa 10 mg/ml


Berat kertas + glukosa monohidrat = 1,4051 g


Berat glukosa monohidrat = 1,0003 g

Glukosa Monohidrat sebanyak 1,0003 g dilarutkan dengan larutan asam

benzoat 0,1% p.a. b/v dalm labu takar 50 ml sampai tanda.


69

c. Natrium oksalat 2% b/v


Berat kertas + sodium oksalat = 5,4819 g


Berat sodium oksalat = 5,0361 g

Natrium Oksalat sebanyak 5,0361 g dilatutkan dengan aquadest dalam labu

takar 250 ml sampai tanda.

d. Keseragaman bobot tablet

Berat rata-rata tablet glibenklamida = 201,79 mg. Berdasarkan

Anonim 1979 tablet dengan bobot 151mg - 300mg memiliki penyimpangan

rata-rata tablet pada kolom A = 7.5 % dan kolom B = 15%

Kolom A: 7,5% x 201,79 mg = 15,13 mg ± 201,79 mg. Berdasarkan

penimbangan dua puluh tablet, tidak ada tablet yang menyimpang dari range

186,66 mg – 216,92 mg. Kolom B: 15% x 201,79 mg = 30,2685 mg ± 201,79

mg. Berdasarkan penimbangan dua puluh tablet, tidak ada tablet yang

menyimpang dari range 171, 5215 mg - 232,0585 mg. Ini berarti bahwa semua

tablet memenuhi keseragaman bobot tablet.


70

e. Pembuatan larutan glibenklamida 0,1125mg/ml

Berat rata-rata tablet glibenklamida = 201,79 mg

Tiap tablet mengandung 5 mg zat aktif glibenklamida sehingga serbuk yang

harus ditimbang untuk mendapatkan 25 mg zat aktif adalah

= (25 mg : 5 mg ) x 201,79 mg = 1,008975 g

Sejumlah 1,008975 g dilarutkan dalam labu ukur 10 ml sebagai larutan induk

dengan konsentrasi 0,25%. Untuk mendapatkan larutan glibenklamida dengan

konsentrasi 0,1125 mg/ml dengan volume 10 ml, maka

C1 . V1 = C2 . V2

25 mg/10ml . x = 0,1125 mg/ml . 10 ml

x = 0,45 ml

Sebanyak 0,45 ml larutan induk dilarutkan dalam labu ukur 10 ml dengan

aquades hingga tanda.

f. Perhitungan Volume Penyuntikan

• Glibenklamida

D : 0,45 mg/kgBB

C : 0,1125 mg/ml

BB : 188,3 g


71

V = (D x BB) = 0,45 mg/kgBB x 188,3 g = 0,75 ml

C 0,1125 mg/ml

• Air halusan undur-undur darat dosis 0,0063 g/kgBB

D : 0,0063 g/kgBB

C : 0,0315 g/25ml

BB : 200 g

V = C

BBD )( ×=

mlgkgkgBBg

25/0315,0200,0/0063,0 ×

= 1,0 ml

• Glukosa

D : 1,75 g/kgBB

C : 15 g/100ml

BB : 178,7 g

V = C

BBD )( ×=

mlgkgkgBBg

100/157,178/75,1 ×

= 2,085 ml


72

g. Perhitungan LDDK0-300

Menit 0 15 30 45 60 90 120 180 240 300

Resapan 0,389 0,416 0,475 0,425 0,430 0,333 0,395 0,386 0,323 0,352

Kadar 119,54 127,84 145,97 130,60 132,14 102,33 121,38 118,62 99,26 108,17

Standar glukosa 100.18 mg/dl = 0,326

Kadar glukosa menit 0 = (0,389: 0,326) x 100.18 mg/dl = 119,54 mg/dl

LDDK 0-300 = 54,119(2

015×

−+127,84) + 84,127(

21530

×−

+145,97) +

97,145(2

3045×

−+130,60) + 60,130(

24560

×−

+132,14) +

14,132(2

6090×

−+102,33) + 33,102(

290120

×−

+121,38) +

38,121(2

120180×

−+118,62) + 62,118(

2180240

×−

+99,26)

+ 26,99(2

240300×

−+108,17) = 34785,66 mg.menit /dl


73

Lampiran 7. Data kadar glukosa darah (mg/dl) pada tiap perlakuan dan waktu

sampling.

Kontrol Negatif Aquadest 0 15 30 45 60 90 12

0

18

0

24

0

30

0

LD

DK

1 15

4,3

22

6

19

9,0

63

2

25

5,7

99

4

25

6,4

47

8

21

6,2

46

1

18

0,9

07

6

18

4,4

73

9

15

3,3

50

0

14

3,2

99

5

15

5,6

19

4

5288

8,71

80

2 13

8,1

12

2

18

8,0

40

1

22

9,2

14

4

19

4,8

48

5

16

1,1

30

9

14

4,2

72

2

13

9,7

33

3

12

7,4

13

4

11

4,1

20

9

10

8,6

09

4

4220

9,33

54

3 98,

88

32

12

4,8

19

7

14

8,1

62

7

15

3,6

74

2

15

3,9

98

4

98,

88

32

10

4,3

94

7

73,

27

08

12

2,5

50

3

11

6,7

14

6

3352

1,39

51

4 13

8,4

36

4

14

0,7

05

9

19

6,4

69

5

20

8,7

89

4

20

6,8

44

1

14

4,2

72

2

16

4,0

48

8

15

7,5

64

7

13

2,9

24

9

12

7,0

89

2

4683

4,15

00

5 11

3,1

48

3

17

6,0

44

5

17

8,9

62

3

19

8,0

90

6

17

4,7

47

6

14

6,5

41

6

14

4,2

72

2

12

1,5

77

7

11

5,7

41

9

12

3,8

47

1

4191

9,98

06

−X

12

8,5

80

5

16

5,7

34

7

20

1,7

21

7

20

2,3

70

1

18

2,5

93

4

14

2,9

75

3

14

7,3

84

6

12

6,6

35

3

12

5,7

27

5

12

6,3

75

9

4347

4,71

58


74

Kontrol Negatif CMC

0 15 30 45 60 90 120 180 240 300 LDDK

1 119,5399 127,8371 145,9678 130,6028 132,1393 102,3311 121,3837 118,6180 99,2581 108,1698 34785,6612

2 127,8371 167,7861 169,9372 142,2802 131,8320 118,3107 127,2225 104,4822 103,8676 104,1749 36025,6192

3 118,6180 176,0833 169,0153 130,6028 131,5247 102,9457 96,4924 124,1494 122,3056 124,4567 36935,9972

4 113,7012 150,2700 172,3956 141,6656 98,0289 120,7691 128,1444 107,2479 114,9304 122,3056 36412,8179

5 133,6758 179,4636 163,4839 146,8897 152,1138 118,9253 94,3413 101,1019 104,1749 110,0136 35202,8218

−X

122,6744 160,2880 164,1600 138,4082 129,1277 112,6564 113,5168 111,1199 108,9073 113,8241 35872,5835

Kontrol Positif Glibenklamida

0 15 30 45 60 90 120 180 240 300 LDDK

1 100,8061 141,8173 133,6777 93,6057 54,7859 39,7589 36,3153 53,5337 55,0990 50,7161 18391,6392

2 115,8331 130,8601 138,6867 106,7543 76,0742 62,9256 66,3693 44,1418 38,8198 44,7679 19420,0495

3 98,6147 122,4074 121,4683 102,3714 90,1620 42,8896 24,4189 36,6283 48,8378 75,7611 17748,2958

4 86,0922 125,2250 132,1124 112,7025 69,4999 34,1238 30,6801 50,7161 49,4639 62,6125 18053,5317

5 93,6057 116,4593 120,8421 113,6417 77,3264 49,1508 46,0202 62,2994 42,5765 56,9774 19253,3438

−X

98,9904 127,3538 129,3574 105,8151 73,5697 45,7697 40,7607 49,4639 46,9594 58,1670 18573,3720

Perlakuan 1

0 15 30 45 60 90 120 180 240 300 LDDK

1 139,8006 171,5735 143,9311 144,8843 135,3524 126,4560 128,3624 139,4829 123,5965 123,5965 40062,4126

2 128,0447 126,1383 119,7837 129,6333 128,9979 102,6264 91,8236 98,1782 73,0776 63,5457 28888,6883

3 82,9272 133,4461 156,0048 131,8574 104,5327 128,3624 102,3086 102,3086 96,9073 88,3286 32351,1369

4 128,6801 147,1084 153,1452 146,7907 136,3056 130,2688 115,6532 103,8973 101,6732 92,4591 34958,1009

5 127,4092 160,4530 140,4361 137,2588 108,6632 115,6532 142,3425 98,8136 101,0377 159,4998 36623,7937

−X

121,3724 147,7438 142,6602 138,0849 122,7704 120,6734 116,0981 108,5361 99,2584 105,4859 34576,8265


75

Perlakuan 2

0 15 30 45 60 90 120 180 240 300 LDDK

1 131,5244 114,9108 121,1409 105,2195 97,6049 81,6836 80,2991 71,6462 85,4909 68,8773 25860,1196

2 133,2550 168,2128 162,6749 143,6385 130,8322 137,4084 98,2972 113,1802 110,4113 118,3720 36573,3010

3 75,4535 132,9089 94,4899 88,2598 57,4554 69,5695 54,5714 66,8005 75,7996 84,7986 22101,2907

4 130,4860 173,7507 191,4026 155,4065 152,6375 125,2943 85,4909 100,7200 110,0652 112,1419 35838,6680

5 124,2559 146,0613 143,9846 124,9482 143,9846 128,0632 119,4103 100,7200 119,4103 121,1409 36453,8907

−X

118,9950 147,1689 142,7386 123,4945 116,5029 108,4038 87,0138 90,6134 100,2354 101,0661 31365,4540

Perlakuan 3

0 15 30 45 60 90 120 180 240 300 LDDK

1 112,4316 160,9512 130,1664 112,0970 209,8054 113,4355 95,7007 113,7701 107,4124 102,7277 35674,4551

2 103,7316 128,1587 138,5318 97,7086 132,8433 118,4548 109,4201 123,4740 121,8009 107,0777 35639,3203

3 119,1240 172,3282 161,6205 128,8279 142,2126 110,7585 131,5049 114,4393 120,7971 125,1471 38143,9355

4 95,7007 132,5087 149,9088 118,1201 108,0816 98,0431 106,4085 80,6429 72,2775 89,0084 28732,8060

5 107,4124 151,2473 135,1856 138,1972 137,1934 105,4047 117,1163 115,7778 105,4047 113,7701 35378,3183

−X

107,6701 149,0388 143,0826 118,9901 146,0273 109,2193 112,0301 109,6208 105,5385 107,5462 34713,7670

Perlakuan 4

0 15 30 45 60 90 120 180 240 300 LDDK

1 101,3073 133,9018 133,9018 120,1005 101,3073 101,0136 101,6009 99,2518 109,2357 108,0611 32211,3131

2 85,7441 138,8938 144,7666 94,7836 96,3253 92,2043 88,3869 84,5696 87,2124 92,2043 28348,4222

3 93,9662 140,9493 98,9026 112,4658 98,6645 106,5929 407,4738 117,1640 109,2357 112,1721 33162,7207

4 123,9179 126,2671 138,0128 135,9573 155,6315 142,1238 145,6476 146,2349 135,3700 122,4497 41822,2915

5 106,5929 185,5832 151,5205 141,5366 142,1238 124,7988 117,9259 118,6323 109,8230 115,9895 37459,4711

−X

102,3057 145,1190 133,0209 121,5687 118,8085 113,3467 112,4070 113,1705 110,1753 110,1753 34600,8437


76

Lampiran 8. Hasil uji distribusi data dengan Tes Kolmogorov Smirnov

One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test

LDDK N 35

Mean 33311.0804 Normal Parameters(a,b) Std. Deviation 8236.35479

Absolute .171 Positive .107

Most Extreme Differences

Negative -.171 Kolmogorov-Smirnov Z 1.012 Asymp. Sig. (2-tailed) .257 a Test distribution is Normal. b Calculated from data.


77

Lampiran 9. Hasil uji GLM Repeated Measure kadar glukosa darah


78


79


80


81


82


83


84


85


86


87

Lampiran 10. Hasil uji Kruskal Wallis

Kruskal-Wallis Test Ranks

Perlakuan N Mean Rank LDDK Kontrol Negatif Aquadest 5 29.60 Kontrol Negatif CMC 5 20.80 Kontrol Positif

Glibenklamid 5 3.00

Volume 1 5 18.80 Volume 2 5 16.60 Volume 3 5 19.00 Volume 4 5 18.20 Total 35

Test Statistics(a,b)

LDDK Chi-Square 17.669 df 6 Asymp. Sig. .007 a Kruskal Wallis Test b Grouping Variable: Perlakuan


88

Lampiran 11. Hasil uji Mann Whitney ampiran 11. Hasil uji Mann Whitney


89


90


91


92


93


94

Lampiran 12. Hasil uji Anova One Way


95

Lampiran 13. Leaflet GOD-PAP


96


97

BIOGRAFI PENULIS

Penulis bernama lengkap Andy Francisca Irawan lahir dari pasangan

Benny Irawan Liong dan Yulita Megasari di kota Semarang, provinsi

Jawa Tengah, sebagai anak bungsu dari dua bersaudara. Penulis

menyelesaikan TK di TK Maria Purworejo pada tahun 1990-1992,

SD Maria Purworejo pada tahun 1992-1998, SMP Bruderan

Purworejo pada tahun 1998-2001, dan SMU Stella Duce 1

Yogyakarta pada tahun 2001-2004. Kemudian penulis melanjutkan pendidikan ke Perguruan

Tinggi di Fakultas Farmasi Sanata Dharma Yogyakarta pada tahun 2004. Selama menempuh

pendidikan di Fakultas Farmasi Sanata Dharma Yogyakarta, penulis menjadi BEMF (Badan

Eksekutif Mahasiswa Farmasi) 2006-2007 dalam divisi Pengabdian Masyarakat. Penulis juga

aktif menjadi panitia beberapa kegiatan seperti PIMFI (Pekan Ilmiah Mahasiswa Farmasi

Indonesia ) 2005, TITRASI (Tiga Hari Temu Akrab Farmasi) 2005, TITRASI 2006,

Penyuluhan Self Medication dan Sunatan Masal “Ibu Aktif, Anak Sehat” yang bekerja sama

dengan Gerakan Jogja Bangkit. Penulis juga magang di Rumah Sakit BETHESDA Jogjakarta

sebagai mahasiswa Farmasi Sanata Dharma selama beberapa bulan.


PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI - core.ac.uk · undur-undur daratdid prove gives the...

Documents

Transcript of PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI - core.ac.uk · undur-undur daratdid prove gives the...