8/15/2019 Pewarnaa Gram

1/5

Nama : Dona Violita

Nim : G1A214009

TUGAS : Pewarnaan Gram

Pembimbing : dr. Subagio S!.""

Tanggal : 04 #ebruari 201$

Pewarnaan gram atau metode gram adala% &uatu metode em!iri& untu' membeda'an

&!e&ie& ba'teri men(adi dua 'elom!o' be&ar gram !o&iti) dan gram negati*e berda&ar'an

&i)at 'imia dan )i&i'a dinding &el mere'a metode ini diberi nama berda&ar'an !enemun+a

ilmuwan denmar' %an& ,%ri&tian gram 1- / 19/- +ang mengembang'an te'ni' ini !ada

ta%un 1--4 untu' membeda'an !neumo'o'u& dan ba'teri 'leb&iella !neumoniae.

Dalam mela'u'an !ewarnaan gram di!erlu'an em!at ma am !ewarnaan dengan

)ung&i +ang berbeda +aitu :

• Pewarnaan !rimer da!at memberi'an warna !ada &emua (eni& ba'teri3

• Pengi'at mem!er'uat i'atan 'om!le'& antara !ewarna dengan 'om!onen dinding

ba'teri

• Peng%ilang warna melarut'an &i&a at warna dan 'om!le'& at warna dengan li!id !ada

dinding ba'teri3

• Pewarnaan !engganti memberi'an warna !ada dinding ba'teri +ang 'e%ilangan

!ewarna !rimern+a.

Pada da&arn+a ba'teri memili'i bebera!a bentu' +aitu tong'at3 'o'u& dan &!irilum. 5a'teri

+ang berbentu' tong'at mau!un 'o'u& dibagi men(adi bebera!a ma am. Pada bentu' ba&il

!embagian+a +aitu ba&il tunggal di!loba&il dan tri!oba&il. Sedang'an !ada 'o'u& dibagi

mono'o'u& &atu bua% ba'teri berbentu' 'ota'3 di!lo o u& &am!ai &ta!%+lo o u&

bentu'n+a miri! bua% anggur3. "%u&u& !ada &!irul %an+a dibagi 2 +aitu &etengga%

meleng'ung dan tida' meleng'ung. Stapylococcus aureus adala% ba'teri gram !o&iti) +ang

berbentu' bola. 5a'teri ini ada +ang ber'oloni dan berbentu' &e!erti bua% anggur.5ebera!a

'ara'teri&ti' +ang dimili'i &ta!%+lo o u& Aureu&& diantaran+a %emol+ti !ada dara% agar

atala&e o6ida&e !o&iti) dan negati*e da!at tumbu% !ada &u%u ber'i&ar 1 &am!ai 4 dera(at

dan ling'ungan Na,7 !ada 'on&entra&i tinggi %ingga 1 !er&en dan meng%a&il'an en im

oagula&e. Selain itu bia&an+a Sta!+lo o u& aureu& meru!a'a !at%ogen &e!erti bi&ul &t+e&

dan )urun ulo&i& bebera!a in)e'&i radang !aru radang 'elen(ar dada radang urat dara%

1

8/15/2019 Pewarnaa Gram

2/5

&erata men+ebab'an 'era unan ma'anan +aitu dengan mele!a&'an enteroto6in& men(adi

ma'anan &e%ingga men(adi to'&i' dengan mele!a&'an &u!erantigen& 'edalam aliran dara%.

5a'teri memili'i bebera!a bentu' +aitu ba&il tong'at3 'o'o& dan &!irilum. 5a'teri

+ang berbentu' tong'at mau!un 'o'u& dibagi men(adi bebera!a ma am. Pada bentu' ba&il

!embagiann+a +aitu ba&il tunggal di!loba&il dan tri!oba&il. Sedang'an !ada 'o'u& dibagi

mono'o'u& &atu bua% ba'teri berbentu' 'ota'3 di!lo'o'u& &am!ai &t%a!+lo o u&

bentu''n+a miri! bua% anggur3. "%u&u& !ada &!iral %an+a di bagi dua +aitu &etenga%

meleng'ung dan tida' meleng'ung. 5a'teri (uga da!at dibeda'an melalui te'ni' !ewarnaan

gram. Te'ni' !ewarnaan gram ter&ebut da!at meng%a&il'an warna mera% dan ungu. 5a'teri

gram negati*e ditandai dengan !ewarnaan ungu &edang'an +ang !o&iti) berwarna mera%

te6tboo' 200-3. 8al ini bertu(uan untu' memberi'an warna !ada ba'teri !ada a'%irn+a

da!at di identi)i'a&i dengan muda% &elain itu ada endo&!ora adala% organi&m +ang dibentu'

dalam 'ondi&i +ang &tre&& 'arena 'urang nutri&i +ang memili'i 'emung'inan untu' teta!

berlan(ut diling'ungan &am!ai 'ondi&i men(adi bai' n bi 200-3.

Perbedaan dua 'elom!o' ba'teri ini dida&ar'an !ada 'emam!uan &el mena%an

mengi'at3 warna ungu dari 'ri&tal *iolet &elama !ro&e& de'olori&a&i ole% al'o%ol. 5a'teri

gram !o&iti) tida' mengalami de'olori&a&i 'arena teta! mengi'at warna ungu 'ri&tal *iolet

dan !ada ta%a! a'%ir !enge atan tida' terwarnai &a)ranin. 5a'teri gram negati) mengalami

de'olori&a&i ole% al'o%ol dan !ada ta%a! a'%ir !enge atan terwarnai men(adi mera% ole%

&a)ranin.

Dalam !ewarnaan gram di!erlu'an em!at reagen +aitu :

13 at warna utama *iolet 'ri&tal3ordan larutan 7odin3 +aitu &en+awa +ang diguna'an untu' menginten&i)'an warna utama.

23 Pen u i ; !eluntur at warna al o%ol ; a&eton3 +aitu &ol*en organi +ang diguna'an uantu'

meluntur'an at warna utama./3 at warna 'edua ; at !enutu! &a)ranin3 diguna'an untu' mewarnai 'embali &el &el +ang

tela% 'e%ilangan at utama &etela% !erla'uan denga al o%ol.

5a'teri +ang diwarnai dengan metode gram ini dibagi men(adi 2 'elom!o' &ala% &atu

di antaran+a ba'teri gram !o&iti) +ang mem!erta%an'an at warna ungu "ri&tal dan

'arenan+a tam!a' ungu tua. "elom!o' +ang lain ba'teri gram negati) 'e%ilangan ungu

"ri&tal 'eti'a di u i dengan al'o%ol dan wa'tu diberi !ewarna tandingan dengan warna

mera% &a)ranin tam!a' bewarna mera% ubaida% 200$3.

5a'teri Gram negati) adala% ba'teri +ang tida' mem!erta%an'an at warna metil ungu

!ada metode !ewarnaan Gram. 5a'teri gram !o&iti) a'an mem!erta%an'an at warna metilungu gela! &etela% di u i dengan al'o%ol &ementara ba'teri gram negati) tida'. Pada u(i

2

8/15/2019 Pewarnaa Gram

3/5

!ewarnaan Gram &uatu !ewarna !enimbal ounter&tain3 ditamba%'an &etela% metil ungu

+ang membuat &emua ba'teri gram negati) men(adi berwarna mera% atau mera% muda.

Pengu(ian ini berguna untu' meng'la&i)i'a&i'an 'edua ti!e ba'teri ini berda&ar'an !erbedaan

&tru'tur dinding &el mere'a. Pemberian 'ri&tal *iolet !ada ba'teri gram !o&iti) a'an

meninggal'an warna ungu muda. Perbedaan re&!on ter%ada! me'ani&me !ewarnaan gram

!ada ba'teri adala% dida&ar'an !ada &tru'tur dan 'om!o&i&i dinding &el ba'teri. 5a'teri gram

!o&iti) mengandung !rotein dan gram negati*e mengandung lema' dalam !er&enta&i lebi%

tinggi dan dinding &eln+a ti!i&. Pemberian al'o%ol etanol3 !ada !ra'ti'um !ewarnaan

ba'teri men+ebab'an tere'&tra'&i li!id &e%ingga mem!erbe&ar !ermeabilita& dinding &el.

Pewarnaan &a)ranin ma&u' 'e dalam &el dan men+ebab'an &el men(adi berwarna mera% !ada

ba'teri gram negati) &edang'an !ada ba'teri gram !o&iti) dinding &eln+a terde%idra&i dengan

!erla'uan al'o%ol !ori < !ori meng'erut da+a rembe& dinding &el dan membran menurun

&e%ingga !ewarna &a)ranin tida' da!at ma&u' &e%ingga &el berwarna ungu.

5ebera!a !erbedaan &i)at +ang da!at di(um!ai antara ba'teri Gram !o&iti) dan ba'teri

Gram negati) +aitu:

,iri iri ba'teri gram negati) +aitu:

Stru'tur dinding &eln+a ti!i& &e'itar 10 < 1 mm berla!i& tiga atau multila+er. Dinding &eln+a mengandung lema' lebi% ban+a' 11 22=3

!e!tidogli'an terda!at didalam la!i&an 'a'u &ebela% dalam dengan (umla% &edi'it > 10= dari berat 'ering tida'

mengandung a&am te'oat. "urang rentan ter%ada! &en+awa !eni&ilin. Pertumbu%ann+a tida' begitu di%ambat ole% at warna da&ar mi&aln+a 'ri&tal *iolet. "om!o&i&i nutri&i +ang dibutu%'an relati) &eder%ana. Tida' re&i&ten ter%ada! gangguan )i&i'. ?e&i&ten&i ter%ada! al'ali 1= "@83 lebi% !e'at Pe'a ter%ada! &tre!tomi&in To'&in +ang dibentu' ndoto'&in

,iri iri ba'teri gram !o&iti) +aitu:

Stru'tur dinding &eln+a tebal &e'itar 1 -0 nm berla!i& tunggal atau monola+er. Dinding &eln+a mengandung li!id +ang lebi% normal 1 4=3 !e!tidogli'an ada +ang

&ebagai la!i&an tunggal. "om!onen utama meru!a'an lebi% dari 0= berat ringan.

engandung a&am te'oat. 5er&i)at lebi% rentan ter%ada! !eni&ilin. Pertumbu%an di%ambat &e ara n+ata ole% at at warna &e!erti ungu 'ri&tal. "om!o&i&i nutri&i +ang dibutu%'an lebi% rumit. Bebi% re&i&ten ter%ada! gangguan )i&i'. ?e&i&ten&i ter%ada! al'ali 1= "@83 larut

3

8/15/2019 Pewarnaa Gram

4/5

Tida' !e'a ter%ada! &tre!tomi&in

PROSEDUR PENGECETAN

13 @b(e' gla&&23 Pi!et tete&/3 5un&en C 'ore' a!i43 @&e

3 5otol &em!rot$3 5a' !ewarnaan

3 i'ro&'o!

BAHAN

13 ,GV ,arbol Gentian Violet323 Bugol/3 Air #u %&in43 @il emer +

3 Na,l 0 1 =$3 AEuade&

SAMPEL

5ia'an ba'teri

METODE KERJA

13 Sedia'an ob(e' gla&& +ang beba& dari lema' dengan (alan dilewat'an diata& a!i

5un&en;&!iritu& 2 / 'ali23 Pi(ar'an o&e dan ambil ba'teri dari media dileta''an diata& ob(e' gla&& +an tela% ditete&i/3 Na,l di rata'an dengan !utaran &atu ara% meling'ar;&eara% (arum (am343 Sediaan di'ering'an di udara

3 Setela% 'ering 'emudian di )i'&a&i dengan (alan di lewat'an di ata& lam!u &!iritu& 2 /

'ali$3 Sediaan &ia! untu' diwarnai

3 Sediaan 'emudian dileta''an diata& ba' !ewarnaan

-3 Sediaan di at dengan ,GV &elama >2 menit93 5ila& dengan air mengalir103 at warna diganti dengan larutan lugol &elama > 4 deti'113 5ila& dengan air mengalir123 at warna diganti dengan al'o%ol 9$=1/3 5ila& dengan air mengalir 143 "emudian di at lagi dengan &a)ranin &elama > 1 menit1 3 5ila& lagi dengan air mengalir1$3 "ering'an dan la'u'an !emeri'&aan di bawa% mi'ro&'o! dengan !embe&aran 1006.

Sebelum mela'u'an !emeri'&aan tamba%'an oil emer + !ada !re!arat tadi.

4

8/15/2019 Pewarnaa Gram

5/5

Ket. Gambar: Ditemukan bakteri gram positif basil dan coccus

5

http://1.bp.blogspot.com/-52sjBCsCgP4/UaivSbzLXTI/AAAAAAAAADU/ld7jMl8OGVU/s1600/Isra%27s+found.jpg