LAPORAN PRAKTIKUM FARMAKOLOGI SISTEM ORGAN

SEMESTER GENAP 2014 - 2015

PENGUJIAN AKTIVITAS ANALGETIKA

Hari / Jam Praktikum : Selasa, 10.00-13.00

Tanggal Praktikum : 17 Maret 2014

Kelompok : 2

Asisten : Nadiya Nurul Afifah

Raisa Mutiarani

Anggota :

Nama Lengkap NPM Tugas

Dhita Dwi P 260110130131 Alat Bahan, Prosedur

Prasetyo Dwi A.P 260110130135 Pembahasan

Popy Sarah C 260110130136 Tujuan,Prinsip,Editor

Yogiyanto 260110130137 Pembahasan

Hazrati Ummi 260110130138 Teori Dasar, Dapus

Theresia Ratnadevi 260110130148 Data Pengamatan Perhitungan

LABORATORIUM FARMAKOLOGI

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS PADJADJARAN

JATINANGOR

2014

PENGUJIAN AKTIVITAS ANALGETIKA

I. Tujuan

1. Mengenal berbagai cara untuk mengevaluasi secara eksperimental

aktivitas analgetika suatu obat

2. Memahami dasar-dasar perbedaan daya analgetik berbagai obat

analgetika.

II. Prinsip

1. Obat analgetika non narkotik

Analgetika non narkotik adalah obat-obat yang tidak bersidfat narkotik dan

tidak bekerja sentral. Penggunaan obat Analgesik Non-Narkotik atau Obat

Analgesik Perifer ini cenderung mampu menghhilangkan atau meringankan rasa

sakit tanpa berpengaruh pada sistem susunan saraf pusat atau bahkan hingga efek

menurunkan tingkat kesadaran. Obat ini tidak mengakibatkan efek ketagihan pada

pengguna. Oleh karena itu tidak hanya digunakan sebagai obat antinyeri, melainkan

juga pada demam (infeksi virus/kuman, salesma, pilek) dan peradangan seperti

rematik dan encok. Obat-obat ini banyak diberikan untuk nyeri ringan sampai

sedang (Tjay, 2007).

2. Obat Analgetika Narkotik

Obat anagetik narkotik merupakan kelompok obat yang memiliki sifat

opium atau morfin. Analgetika narkotik secara khusus digunakan untuk menghalau

atau meredakan rasa nyeri hebat seperti pada fractura dan kanker. Jenis obat ini pada

umumnya dapat menimbulkan ketergantungan pada pemakai. Salah satu contoh

analgetik narkotika adalah morfin (Tjay, 2007).

3. Waktu reaksi

Jumlah waktu yang dibutuhkan oleh organisme untuk bereaksi sejak

rangsang muncul (Purves, 2004).

4. Daya Proteksi

Kemampuan bertahannya suatu hewan percobaan terhadap respon dilihat

dari pemberian control positif, negative, maupun uji (Diphalma, 1986).

III. Teori Dasar

Nyeri akut berfungsi sebagai fungsi biologis penting karena memberikan

peringatan tentang tingkat cedera atau potensi untuk memburuk. Ini adalah respon

cepat terhadap rangsangan berbahaya yang tidak menghasilkan durasi jangka

panjang. Di sisi lain, dapat memiliki efek psikologis dan emosional yang

merugikan. Oleh karena itu, perhatian sedang difokuskan pada pencegahan agresif

dan pengobatan nyeri akut untuk mengurangi komplikasi dan perkembangan ke

negara nyeri kronis (Kumaravelu, 2010).

Analgetika narkotik adalah senyawa yang dengan selektif dapat memblokir

atau menekan fungsi sistem saraf pusat, yang dimanfaatkan untuk mengurangi rasa

sakit, yang ringan, sedang ataupun berat, seperti rasa sakit yang disebabkan oleh

penyakit kanker, serangan jantung akut, sesudah operasi, radang dan tumor. Efek

analgesik terjadi dikarenakan adanya pengikatan obat pada sisi reseptor khas pada

sel dalam otak dan spinal cord. Rangsangan reseptor juga menimbulkan efek rasa

senang yang berlebihan dan rasa mengantuk (Siswandono dan Soekardjo, 2008).

Impuls nyeri disalurkan ke susunan saraf pusat melalui dua jalur, yaitu jalur

nyeri yang berlangsung cepat dengan glutamate sebagai neurotransmiternya dan

jalur nyeri lambat dengan Substansi P sebagai neurotransmiternya. Reseptor nyeri

(nociceptor) tersebar di kulit, otot, tulang, dan sendi yang merupakan ujung saraf

bebas. (Guyton & Hall 1997; Ganong 2003).

Obat analgesik anti inflamasi non steroid atau NSAID merupakan suatu

kelompok obat dengan struktur kimia yang sangat heterogen, dimana efek samping

dan efek terapinya berhubungan dengan kesamaan mekanisme kerja sediaan

ini.yang menghambat atau sebagai inhibitor pada enzim cyclooxygenase (COX).

Kemajuan penelitian memberikan penjelasan mengapa sediaan yang heterogen

tersebut memiliki kesamaan efek terapi dan efek samping, ternyata hal ini terjadi

berdasarkan atas penghambatan biosintesis prostaglandin (PG). Prostaglandin

memperlihatkan secara invitro bahwa dosis rendah aspirin dan indometason

menghambat produksi enzimatik PG. Dimana juga telah dibuktikan bahwa jika sel

mengalami kerusakan maka PG akan dilepas.Namun demikian obat AINS secara

umum tidak menghambat biosintesis leukotrin,yang diketahui turut berperan dalam

inflamasi. AINS menghambat enzim cyclooxygenase (COX) sehingga konversi

asam arakidonat menjadi PGG2 terganggu. Setiap obat menghambat

cyclooxysigenase dengan cara yang berbeda (Fajriani, 2008).

Enzim siklooksigenase merupakan enzim yang mengkatalisis pembentukan

prostaglandin, suatu mediator inflamasi, dan produk metabolisme asam arakidonat.

Enzim COX terdiri dari 2 iso-enzim yaitu COX-1 dan COX-2. Enzim COX-1 ber-

sifat konstitutif untuk memelihara fisiologi normal dan homeostasis, sedangkan

COX-2 merupakan enzim yang terinduksi pada sel yang mengalami inflamasi oleh

sitokin, endotoksin, dan faktor per-tumbuhan (growth factors). COX-2 juga

berperan dalam proliferasi sel kanker. Ekspresi berlebihan COX-2 ditemukan pada

kebanyakan tumor (Kurumbail, et al.,1996).

Terdapat dua mekanisme kerja obat analgetik, yaitu:

a. Analgesik Nonopioid/Perifer (Non-Opioid Analgesics)

Obat-obatan analgesic non-narkotik atau perifer secara langsung

memiliki target aksi pada enzim, yaitu enzim siklooksigenase (COX). Efek

samping yang paling umum dari golongan obat ini adalah gangguan gastrik dan

usus, kerusakan darah, kerusakan hati dan ginjal serta reaksi alergi di kulit. Efek

samping biasanya disebabkan oleh penggunaan dalam jangka waktu lama dan

dengan dosis yang besar. Hai ini terjadi karena COX berperan dalam sintesis

mediator nyeri, salah satunya adalah prostaglandin. Mekanisme umum dari

analgetik jenis ini adalah menghalangi pembentukan prostaglandin dengan jalan

menginhibisi enzim COX pada daerah yang terluka dengan demikian mengurangi

pembentukan mediator nyeri . Mekanismenya tidak berbeda dengan NSAID dan

COX-2 inhibitors. (Goodman and Gilman, 2007).

b. Analgesik Opioid/Analgesik Narkotika

Mekanisme kerja utamanya ialah dalam menghambat laju kerja

prostaglandin dengan cara menghambat terbentuknya enzim COX yang memiliki

fungsi dalam kerja analgesiknya dan efek samping yang dimilikinya.

Kebanyakan analgesik OAINS diduga bekerja diperifer . Efek analgesiknya

dalam kurun waktu satu jam setelah pemberian per-oral akan terlihat. Sementara

efek antiinflamasi OAINS dalam waktu satu-dua minggu pemberian akan

muncul, sedangkan efek maksimumnya timbul dari 1-4 minggu. Setelah

pemberiannya peroral, konsentrasi puncaknya NSAID didalam darah dicapai

dalam waktu 1-3 jam setelah pemberian, absorbsinya umumnya tidak

dipengaruhi oleh adanya makanan. Volume distribusinya relatif kecil (< 0.2 L/kg)

dan mempunyai ikatan dengan protein plasma yang tinggi. Waktu paruh

penghapusan zatnya untuk golongan derivat arylalkanot sekitar 2-5 jam, waktu

paruh dari masing-masing zat sangat bervariasi (Goodman and Gilman, 2007).

Ketika terjadi kerusakan pada sel, jumlah molekul yang kehilangan satu

buah elektron dari pasangan elektron bebasnya meningkat seiring dengan

peningkatan produksi peroksida, padahal tubuh memproduksi zat pencegah oksidasi

endogen yang terbatas seperti superoksida dismutase (SOD) yang bekerja

menstabilkan radikal. Apabila jumlah molekul yang kehilangan satu buah elektron

dari pasangan elektron bebasnya makin banyak, zat pencegah oksidasi endogen tak

mampu lagi mengatasinya secara efektif sehingga dibutuhkan zat pencegah oksidasi

eksogen. Adanya senyawa macarangioside A dan mallophenol B dapat menangkap

radikal bebas tersebut yang diduga dapat menghambat jalur oksigenase dan

lipooksigenase (YPOBAP, 1991).

Orientasi dosis asam asetat dilakukan dengan tujuan untuk mendapatkan

dosis optimal asam asetat dalam menimbulkan jumlah geliat sehingga dapat

memudahkan pengamatan. Asam asetat adalah suatu iritan yang merusak jaringan

secara spesifik, yang menyebabkan nyeri pada rongga perut pada pemberian

intraperitoneal. Hal itu disebabkan oleh kenaikan ion H akibat turunnya pH di bawah

6 yang menyebabkan luka pada membran. Kerusakan pada membran sel ini akan

mengaktifkan enzim fosfolipase pada fosfolipid membran sel sehingga

menghasilkan asam arakidonat yang akhirnya akan membentuk prostaglandin

Terbentuknya prostaglandin ini akan merangsang reseptor nyeri sehingga mencit

akan memberikan respon dengan cara menggeliat untuk menyesuaikan keadaan

yang dirasakannya (YPOBAP, 1991).

IV. Alat dan Bahan

4.1 Alat

1. Alat suntik 1 ml

2. Sonde oral mencit

3. Stopwatch

4. Timbangan mencit

5. Wadah penyimpanan mencit

4.2 Bahan

1. Asam asetat 0,7% v/v

2. Obat analgetika standar (asam asetil salisilat/aspirin)

3. Obat analgetika yang diuji (asam mefenamat, parasetamol)

4. Larutan NaCl fisiologis atau larutan suspensi gom arab 1-2%

5. Mencit putih jantan dengan berat badan antara 20-25 gram.

4.3 Gambar Alat

No. Nama Alat Gambar

1 Baskom

2

Botol kaca

3

Kapas

4 Ram Kawat

5 Sonde oral

6 Stopwatch/ jam

7

Syringe

8 Timbangan Mencit

V. Prosedur

Hewan dibagi atas tiga kelompok yang terdiri dari kelompok kontrol negatif,

kelompok kontrol positif (obat standar) dan kelompok obat uji (dua jenis) setiap

kelompok terdiri atas 4-5 ekor mencit semua hewan dari setiap kelompok diberi

perlakuan sesuai dengan kelompoknya, yaitu kelompok kontrol negatif diberi

larutan NaCl fisiologis atau larutan suspensi gom arab 1-2% ,kelompok kontrol

positif (obat standar) diberi asam asetil salisilat dan kelompok obat uji diberi asam

mefenamat, parasetamol.Pemberian zat/obat dilakukan secara oral setelah 30 menit,

hewan diberi asam asetat 0,7% secara intraperitoneal setelah diberi asam asetat,

gerakan geliat hewan diamati, dan jumlah geliat dicatat setiap 5 menit selama 60

menit jangka waktu pengamatan. Data yang diperoleh dianalisis secara statistik

berdasarkan analisis variansi dan kebermaknaan perbedaan jumlah geliat antara

kelompok kontrol dan kelompok uji dianalisis dengan Students t-test.Daya proteksi

obat uji terhadap rasa nyeri efektivitas analgetiknya dihitung dengan rumus berikut:

% Proteksi = 100 ( Jumlah geliat kelompok uji

Jumlah geliat kelompok kontrol ) 100%

% Efektivitas analgetik = % Proteksi zat uji

% Proteksi as.asetil salisilat 100% kemudian data yang

didapat disajikan dalam bentuk tabel atau grafik.

VI. Data Pengamatan dan Perhitungan

Table 1. Data Pengamatan

Hipotesis

o Hipotesis pengaruh utama faktor A (waktu)

Ho : 1 = 2 = 3 = 4 = 5 = 6 = 0 atau faktor waktu tidak

mempengaruhi jumlah geliat pada mencit.

Perlakuan Berat

Badan

Volume

Geliat

total 0 -

5' 5' - 10' 10' - 15' 15' - 20' 20' - 25' 25' - 30'

PGA kontrol

negatif

25.4 0.32 8 26 20 17 13 19 103

25.5 0.32 13 21 8 9 11 9 71

28 0.35 1 10 14 17 14 3 59

26.8 0.34 0 6 22 32 35 18 113

23.2 0.30 6 19 21 19 17 16 98

28 82 85 94 90 65 444

5.6 16.4 17 18.8 18 13 74

obat standar

ibuprofen

25.1 0.31 1 14 11 15 10 5 56

23 0.28 0 0 0 0 0 0 0

22.5 0.28 1 27 23 14 13 7 85

27.7 0.35 11 13 12 16 18 9 79

23.9 0.30 12 18 17 16 16 11 90

25 72 63 61 57 32 310

5 14.4 12.6 12.2 11.4 6.4 51.66667

obat uji asam

mefenamat

23.6 0.30 5 20 13 9 14 11 72

28.8 0.36 0 1 3 9 9 3 25

23.9 0.29 0 26 11 8 6 3 54

21.9 0.26 0 0 7 13 0 0 20

24.9 0.32 4 13 6 17 10 6 56

9 60 40 56 39 23 227

1.8 12 8 11.2 7.8 4.6 37.83333

H1 : i 0; i = 1, 2, 3, 4, 5, 6 atau faktor waktu mempengaruhi

jumlah geliat pada mencit.

o Hipotesis pengaruh utama faktor B (pemberian jenis obat)

Ho : 1 = 2 = 3 = 4 = 5 = 6= 0 atau faktor pemberian jenis

obat tidak mempengaruhi jumlah geliat pada mencit.

H1 : i 0; i = 1, 2, 3, 4, 5, 6 atau faktor pemberian jenis obat

mempengaruhi jumlah geliat pada mencit.

o Hipotesis pengaruh interaksi A dan B

Ho : ()11 = ()12 = ()13 = ()21 = ()22 = ()23 = ()31 =

()32 = ()33 = ()41 = ()42 = ()43 = ()51 = ()52 = ()53 =

()61 = ()62 = ()63 = 0 atau faktor interaksi tidak

mempengaruhi jumlah geliat pada mencit.

H1 : ij 0; i = 1, 2, 3, 4, 5, 6; j = 1, 2, 3 atau faktor interaksi

mempengaruhi jumlah geliat pada mencit.

Perhitungan

1. FK= ( )2

=

(981)2

653 =

962361

90 = 10692,9

2. JKP = =1

=1 ij2

=

(282+282+852+942+ 902++232)

5 10692,9=

64133

5 -

10692,9 = 12826,6 -10692,9 = 2133,7

3. JKA = 2=1

=

(622+2142+1882+2112+ 1862+1202)

35 10692,9 =

178501

15 -

10692,9 = 11900,07-10692,9 = 1207,167

4. JKB = ..2=1

=

(4442+3102+2272)

65 10692,9 =

344765

30 - 10692,9 =

11492,17- 10692,9= 799,2667

Total 62 214 188 211 186 120 981

Rata-rata 327

5. JKT= 2=1 =1

=1 = (8

2 + 262+202 + + 62)- 10692,9

= 26780 - 10692,9= 16087,1

6. JKAB = JKP JKA JKB = 2133,7 - 1207,167 - 799,2667 = 127,2667

7. JKG = JKT JKP = 16087,1 - 2133,7 = 13953,4

8. dbP = ab -1 = (6x3) 1 = 17

9. dbA = a 1 = 6 1 = 5

10. dbB = b 1 = 3 1 = 2

11. dbAB = (a 1) (b 1) = 5 x 2 = 10

12. dbG = ab(r 1) = 18 x (5 -1) = 72

13. dbT = abr 1 = (6x3x5) 1 = 89

14. KTA =

=

1207,167

5 = 241,4334

15. KTB =

=

799,2667

2 = 1066,85

16. KTAB =

=

127,2667

10 = 12,72667

17. KTG =

=

13953,4

72 = 193,7972

18. FhitungA= / = 1,245804

19. FhitungB = / = 5,504981

20. FhitungAB = / = 0,06567

21. FA = F(dbA, db galat) = 2,342

22. FB = F(dbB, db galat) = 3,124

23. FAB = F(dbAB, db galat) = 1,965

Table 2. Table Anava

Sumber

geragaman db JK KT fhitung

Perlakuan 17 2133.7 125.5118 0.647645

A 5 1207.167 241.4334 1.245804

B 2 2133.7 1066.85 5.504981

interaksi ab 10 127 12.72667 0.06567

Galat 72 13953.4 193.7972

Total 89 16087.1

24. % proteksi uji = 100 (37,833

74) 100% = 48,87%

25. % proteksi ibuprofen = 100 (51,667

74) 100% = 30,18%

26. % efisiensi = 48,87

30,18 100% = 161,93%

Pengaruh perlakuan

- Fhit F(db perlakuan, db galat)

o Terima Ho: perlakuan tidak berpengaruh terhadap respon yang

diamati atau tidak ada perbedaan antar perlakuan.

- Fhit > F(db perlakuan, db galat)

o Tolak Ho: perlakuan berpengaruh terhadap respon yang diamati

atau tidak ada perbedaan antar perlakuan.

Hasil :

- FhitungA 1,245804 FA 2,342 maka Ho diterima, atau waktu tidak

berpengaruh terhadap jumlah geliat dari mencit yang diamati atau tidak

ada perbedaan antarperlakuan.

- FhitungB 5,504981 > FB 3,124 maka Ho ditolak, atau jenis pemberian

obat berpengaruh terhadap jumlah geliat yang diamati atau ada

perbedaan antar perlakuan.

- FhitungAB 0,06567 FAB 1,965 maka Ho diterima, atau interaksi antara

waktu dengan jenis pemberian obat tidak berpengaruh pada jumlah geliat

dari mencit yang diamati.

Uji Lanjut

Uji lanjut dilakukan untuk melihat apakah ada pengaruh yang signifikan

dari perbedaan pemberian jenis obat terhadap respon geliat dari mencit. Uji

lanjut digunakan metode uji Duncan.

1. Menghitung nilai r(p,db).

= 0,05; db = 72; perlakuan (p) = 2, 3.

r untuk db 72 = 1,7706 (2 perlakuan)

r untuk db 72 = 1,8298 (3 perlakuan)

2. Menghitung wilayah nyata terpendek (Rp)

=

=

139,7972

5= 27,95944=5,288

Rp = S . r(p,db)

Rp2 = 5,288 x 1,7706 = 9,363

Rp3 = 5,288 x 1,8298 = 9,676

Kriteria pengujian:

Nilai mutlak kedua selisih kedua rata-rata yang akan dilihat dibandingkan

dengan wilayah nyata terpendek (Rp) dengan criteria pengujian:

3. Mengurutkan table rata-rata perlakuan dari kecil ke besar.

Perlakuan Jumlah Geliat Rata-rata geliat

Kontrol negatif 103 71 59 113 98 88,8

Obat standar 56 0 85 79 90 62

Obat uji 72 25 54 20 56 45,4

Perlakuan Rata-rata geliat

Kontrol negatif 88,8

Obat standar 62

Obat uji 45,4

Mengurutkan:

C B A

Perlakuan Rata-rata geliat 45,4 62 88,8

Obat uji (C) 45,4 0

Obat standar (B) 62

16,6

(2)

nyata 0

Kontrol negatif (A) 88,8

43,4

(3)

nyata

26,8

(2)

Nyata 0

Keterangan:

- Angka (2) dan (3) menunjukkan peringkat (p) untuk dibandingkan selisih

perbedaan dua rata-rata sesuai dengan peringkatnya (rendah ke tinggi).

Maksudnya antara B dan C bertetangga 2, sedangkan A dan C

bertetangga 3.

4. Kesimpulan dari Hipotesis

Berdasarkan hasil dari uji Duncan, maka perbedaan dari jenis obat yang

diberikan terhadap mencit memberikan perbedaan yang nyata pada taraf 5%.

Grafik

0

2

4

6

8

10

12

14

16

18

20

0 10 20 30 40

PGA Kontrol Negatif

Obat Standar Ibuprofen

Obat Uji Asam Mefenamat

0

10

20

30

40

50

60

70

80

PGA KontrolNegatif

Obat StandarIbuprofen

Obat Uji AsamMefenamat

Rata-rata Jumlah Geliat PGAKontrol Negatif

Rata-rata Jumlah Geliat ObatStandar Ibuprofen

Rata-rata jumlah geliat obatuji

VII. Pembahasan

Pada praktikum kali ini dilakukan percobaan mengenai uji aktivitas

analgesik. Obat analgesik adalah obat yang digunakan untuk menekan atau

mengurangi rasa nyeri terhadap rangsang nyeri mekanik, termik, listrik, atau

kimiawi di sistem syaraf pusat dan perifer. Mekanisme umum kerja obat ini adalah

penghambatan pembentukan prostaglandin yang merupakan mediator nyeri. Obat-

obat analgesik dibagi menjadi dua golongan, yaitu golongan kuat (analgesik

narkotik) yang bekerja sentral terhadap sistem saraf pusat, dan golongan analgesik

lemah (analgesik non-narkotik) yang bekerja terhadap sistem saraf perifer.

Metode yang digunakan adalah metode induksi kimia dengan subjek kerja

obat berupa mencit. Prinsip dari metode ini adalah dengan cara mengamati jumlah

geliat dari mencit setelah diberikan obat tiap 5 menit. Mencit dibagi menjadi 3

kelompok yang akan diamati yaitu: kelompok 1 sebagai kelompok kontrol negatif

yang diberikan suspensi gom arab, kelompok 2 sebagai kelompok kontrol positif

(diberi ibuprofen), kelompok 3 sebagai kelompok uji (diberi asam mefenamat).

Asam mefenamat ini dapat memberikan efek samping pada asam lambung sehingga

dari sinilah dapat dilakukan perbandingan antara mencit yg diberikan aspirin dan

asam mefenamat. Penambahan gom arab dimaksudkan sebagai cairan infus sebagai

pemberi rasa anestesi pada mencit. Semua zat tersebut dimasukkan secara peroral

pada mencit.

Asam asetat merupakan asam lemah yang tidak terkonjugasi dalam tubuh,

pemberian sediaan asam asetat terhadap hewan percobaan akan merangsang

prostaglandin untuk menimbulkan rasa nyeri akibat adanya kerusakan jaringan atau

inflamasi. Prostaglandin meyebabkan sensitisasi reseptor nyeri terhadap stimulasi

mekanik dan kimiawi sehingga prostaglandin dapat menimbulkan keadaan

hiperalgesia, kemudian mediator kimiawi seperti bradikinin dan histamin

merangsang dan menimbulkan nyeri yang nyata . Akibat dari adanya rasa nyeri

inilah hewan percobaan akan menggeliat saat efek dari penginduksi ini bekerja.

Hewan uji yang digunakan adalah mencit putih jantan. Karena

alasan biologisnya yang lebih stabil bila dibandingkan dengan mencit betina yang

kondisi biologisnya dipengaruhi masa siklus estrus.

Mencit jantan digunakan sebagai hewan uji serta pemberian asam asetat

0,7% secara intraperitonial sebagai perangsang terbentuknya prostaglandin dan

menimbulkan rasa nyeri pada mencit.metode ini dianggap baik untuk pengujian

analgetik karena obat yang termasuk kedalam analgetik lemah pun dapat

memberikan hasil positif (terbukti memberikanefek analgetik). Rasa nyeri pada

mencit diperlihatkan dalam bentuk respon gerakan geliat dimana frekuensi geliat

hewan uji dalam waktu tertentu menyatakan derajat nyeri yang dirasakannya

Geliat mencit menandakan adanya respon nyeri yang dirasakan oleh mencit

tersebut, sehingga semakin banyak geliat menandakan rasa nyeri yang semakin kuat.

Begitupun sebaliknya, semakin jarang mencit menggeliat berarti nyeri yang

dirasakan semakin ringan.

Setelah dibagi menjadi 3 kelompok, mencit kemudian didiamkan selama 30

menit, tujuannya agar semua zat yang dimasukkan kedalam tubuh mencit tersebut

bisa bereaksi terlebih dahulu dalam tubuh mencit. Lalu, diberikan asam asetat yang

dimasukkan secara intraperitonial, asam asetat ini merupakan zat penginduksi nyeri

pada mencit. Dengan demikian akan bisa dilihat bagaimana efek dari obat analgesik

tersebut bekerja setelah diberikan zat penginduksi nyeri tadi. Hal ini dilakukan

dengan cara melihat gerakan geliat dari mencit dalam selang waktu setiap 5 menit

sekali selama 30 menit. Data pengamatan ini selanjutnya akan dianalisis secara

stastik berdasarkan analisis variansi dan kebermaknaan perbedaan jumlah geliat

kelompok kontrol dan kelompok uji.

Mencit ditimbang masing-masing dan diperoleh hasil berat mencit I gram,

mencit II 25,5 gram, mencit II 23 gram, dan mencit III 28,8gram. Pada setiap mencit

diberikan obat yang berbeda-beda dan diberi dosis sesuai rumus :

0,25

=

Pada mencit I diberikan kontrol negatif dengan dosis NaCl 0,32 ml, mencit

II diberikan ibuprofen dengan dosis 0,28 ml, pada mencit III diberikan asam

mefenamat dengan dosis 0,36 ml. Tujuan pemberian dosis berbeda-beda

berdasarkan berat badan adalah untuk memperoleh efek farmakologis yang sama

dengan suatu obat pada setiap spesies hewan kuantitatif. Hal demikian akan lebih

diperlukan bila obat dipakai pada manusia dan pendekatan terbaik adalah dengan

menggunakan perbandingan luas permukaan tubuh. Berat absolut untuk mencit

adalah 20 gram.

Kemudian obat diberikan kepada masing-masing mencit dengan cara

disuntik intraperitonial yaitu di area abdomen bagian bawah. Jarum disuntikkan

dengan sudut 100 dari abdomen agak kepinggir untuk mencegah terkenanya

kandung kemih dan apabila terlalu tinggi akan mengenai hati. Mencit yang

sebelumnya sudah diberi asam asetat 0,7 % v/v sebagai penginduksi rasa sakit akan

menggeliat-geliat karena kesakitan. Lalu dilihat, diperhatikan dan dicatat geliat dari

masing-masing mencit setiap 5 menit selama 30 menit. Hal ini dilakukan untuk

mengetahui lama kerja respon obat jenis analgesik.

Dari percobaan yang dilakukan didapatkan data bahwa mencit I yang

diperlakukan sebagai kontrol negatif dengan pemberian larutan gom arab kemudian

larutan asam asetat, , 5 menit pertama menggeliat sebanyak 13 kali, menit ke 10

sebanyak 21 kali dan menit ke 15 melakukan geliat sebanyak 8 kali. Pada menit ke

20 tejadi 9 kali geliat, menit 25 sebanyak 11 geliat dan sampai pada menit terakhir

yaitu 9 kali geliat sehingga jika ditotalkan jumlah geliat mencit I selama 30 menit

adalah sebanyak 71 kali.

Mencit II yang diberikan ibuprofen sebagai kontrol positif lalu asam asetat

pada 5 menit pertama tidak menunjukkan tanda menggeliat, bahkan hingga menit

ke-30 mencit tetap tidak menggeliat sama sekali. Hal ini dapat disebabkan oleh

banyak hal, bisa berasal dari fisiologi mencit tersebut yang mungkin cukup kuat

untuk menahan efek dari asam asetat, bisa juga karena ibuprofen yang diberikan

memberi efektivitas kerja analgesik yang tinggi (dosis atau volume yang berlebih),

atau mungkin juga pemberian asam asetat yang dilakukan secara intra peritoneal

tidak dilakukan dengan baik sehingga asam asetat tidak diabsorbsi secara sempurna.

Mencit III yang diberikan asam mefenamat lalu asam asetat. Pada 5 menit

pertama mencit belum menggeliat sama sekali, kemudian pada menit ke 10 mencit

tersebut melakukan 1 kali geliat, menit ke 15 melakukan geliat sebanyak 3 kali. Pada

menit ke 20 terjadi 9 kali geliat, menit ke 25 sebanyak 9 kali dan sampai pada menit

ke-30 mencit menggeliat sebanyak 3 kali geliat sehingga jika ditotalkan jumlah

geliat mencit 1 selama 30 menit yaitu sebanyak 25 kali.

Ibuprofen merupakan derivat asam fenil propionat dari kelompok obat

antiinflamasi non steroid. Senyawa ini bekerja melalui penghambatan enzim siklo-

oksigenase pada biosintesis prostaglandin, sehingga konversi asam arakidonat

menjadi PG-G2 terganggu. Prostaglandin berperan dalam patogenesis inflamasi,

analgesia dan demam. Dengan demikian maka ibuprofen mempunyai efek

antiinflamasi dan analgetik-antipiretik. Khasiat ibuprofen sebanding, bahkan lebih

besar dari pada asetosal (aspirin) dengan efek samping yang lebih ringan terhadap

lambung.

Dari hasil pengamatan dapat dilihat bahwa mencit I menggeliat lebih banyak

dari mencit II dan III. Hal ini dikarenakan mencit hanya diberikan suspensi gom

arab yang tidak mempunyai efek analgetik. Seharusnya dengan pemberian obat

analgesik geliatan dari mencit akan berkurang. Hasil yang didapat tidak sesuai

dikarenakan beberapa faktor. Diantaranya mencit yang digunakan memiliki daya

tahan tubuh yang berbeda-beda. Selain itu kesalahan terjadi pada praktikan,

kesalahan dalam pemberian suntikan menyebabkan ketidaktepatan distribusi zat

aktif sehingga efek farmakologis yang diinginkan tidak sesuai.

Kemudian pada saat diberikan obat analgesik pada masing-masing mencit

yang seharusnya didiamkan hingga 30 menit sebelum diberikan asam asetat 0,7%

dilakukan lebih cepat sehingga obat analgesik tersebut belum bekerja sepenuhnya.

Selain itu faktor yang menyebabkan kesalahan yaitu kurang teliti dalam menghitung

jumlah geliat, seperti menghitung geliat lebih dari satu yang sebenarnya sisa

menggeliat sebelumnya dan begitu juga sebaliknya ada geliat yang tidak dihitung

karena lengah.

Percobaan pengujian aktivitas analgetik ini dilakukan dengan dua faktor,

yaitu faktor variasi waktu dan faktor pemberian jenis obat yang berbeda-beda. Oleh

karena itu, perhitungan statistik digunakan dengan metode percobaan faktorial.

Berdasarkan hasil perhitungan, ditemukan bahwa waktu tidak

mempengaruhi jumlah geliat dari mencit. Sedangkan, pemberian jenis obat yang

berbeda (tidak diberikan, diberikan ibuprofen, diberikan asam mefenamat)

memberikan pengaruh yang signifikan terhadap jumlah geliat dari mencit. Dan,

tidak terdapat interaksi antara waktu dan pemberian jenis obat kepada mencit

terhadap jumlah geliat.

Hasil perhitungan statistik menyatakan bahwa perbedaan pemberian jenis

obat memberikan pengaruh terhadap jumlah geliat dari mencit. Pernyataan ini belum

cukup jelas. Untuk menggali lebih dalam lagi obat mana yang sebenarnya paling

memberikan pengaruh yang signifikan, maka dilakukan uji lanjut dengan

menggunakan uji Duncan.

Dalam uji Duncan ini, karena waktu sudah terbukti tidak berpengaruh pada

jumlah geliat, maka yang dibandingkan adalah jenis obat yang dinyatakan sebagai

perlakuan dan jumlah geliat dari lima kali pengulangan. Dari lima pengulangan ini

kemudian dirata-ratakan dan dari rata-rata ini saling disandingkan satu sama lain

untuk menjelaskan mana yang sebenarnya memberikan pengaruh yang paling

spesifik. Berdasarkan uji lanjut Duncan, ketiga perlakuan memberikan perbedaan

yang signifikan dan dapat dinyatakan bahwa obat analgetika yang diujikan kepada

hewan mencit mempunyai aktivitas yang berbeda-beda dalam mengurangi atau

menghilangkan rasa sakit yang diinduksi secara kimia (geliat dari mencit yang

diinduksi oleh asam asetat).

Berdasarkan hasil dari grafik, pertambahan waktu cenderung menunjukkan

jumlah geliat yang meningkat. Secara farmakologi, grafik tersebut menjelaskan

bahwa semakin bertambahnya waktu, efek obat sebagai analgesik sudah mulai

berkurang, sehingga jumlah geliatan pada mencit cenderung meningkat. Jika

ditinjau kembali penjelasan secara farmakologi, terkesan bahwa waktu

menunjukkan pengaruh terhadap jumlah geliat sedangkan statistik menjelaskan

bahwa waktu tidak menunjukkan pengaruh. Sebagai penjelasan dari permasalahan

tersebut, perlu kembali dilihat juga bahwa semakin lama waktu, jumlah geliat juga

cenderung menurun, hal ini disebabkan karena efek induksi dari asam asetat juga

sudah mulai berkurang. Jadi, terdapat dua faktor yang menunjukkan perubahan

jumlah geliat jika dilihat dari segi waktu yaitu efek dari obat, dan efek dari asam

asetat itu sendiri. Karena itulah mengapa waktu tidak memberikan perubahan yang

signifikan terhadap jumlah geliat dari mencit. Lalu, bagaimana dengan faktor waktu

pada kontrol negatif yang tidak menerima efek dari obat analgesik? Perlu diingat

kembali, efek dari asam asetat berkurang dengan sendirinya dalam tubuh mencit

(tidak konstan). Sehingga, bukan karena lama waktu yang mempengaruhi jumlah

geliatan, tapi sesungguhnya efek dari asam asetat dan analgesik itu sendiri. Sehingga

pada kontrol negatif (yang tidak menerima pengaruh obat) waktu juga bukanlah

faktor yang mempengaruhi jumlah geliat mencit.

Berdasarkan grafik, terlihat bahwa asam mefenamat mempunyai efek

analgesik paling baik yang ditunjukkan dari rata-rata jumlah geliat total yang paling

sedikit. Hal ini juga ditunjukkan dari perhitungan persen efisiensi asam mefenamat

yang menunjukkan persen yang lebih dari 100%. Namun, hal ini bebeda dengan

percobaan yang dilakukan oleh Nugraha tahun 2011 yang menunjukkan bahwa

ibuprofen memiliki efek analgesic yang lebih baik dibandingkan dengan asam

mefenamat yang ditunjukkan dalam persen daya analgesic yaitu ibuprofen 66,67%

dan asam mefenamat adalah 50%. Penyimpangan ini dapat disebabkan karena

pemberian obat yang tidak benar (ada obat yang terbuang sehingga pemberian obat

tidak sesuai dengan perhitungan dosis), penyuntikan asam asetat yang kurang baik

sehingga ada asam asetat yang terbuang, atau dari mencit itu sendiri seperti faktor

metabolisme tikus, usia, berat badan, jenis kelamin, dan keadaan psikis dari mencit

tersebut.

Kontrol negatif adalah kelompok mencit yang tidak diberikan obat analgesik

apapun atau hanya pembawa obat tanpa zat aktif. Pengadaan kontrol negarif ini

sendiri bertujuan untuk membandingkan kelompok yang diberikan analgesik,

dengan kelompok yang tidak diberikan analgesik. Atau dengan kata lain, kontrol

negatif digunakan dengan tujuan sebagai sebagai pembanding.

VIII. Kesimpulan

1. Berbagai cara untuk mengevaluasi secara eksperimental aktivitas

analgetika suatu obat dapat diamati.

2. Dasar-dasar perbedaan daya analgetik berbagai obat analgetika dapat

dipahami.

DAFTAR PUSTAKA

Fajriani, 2008. Pemberian Obat-Obatan Anti Inflamasi Non Steroid ( AINS ) Pada

Anak. Avaiable online at:

http://jdentistry.ui.ac.id/index.php/JDI/article/view/27/23 [Diakses 17

Maret 2015 pukul 07.00].

Ganong, William F. 2003. Fisiologi Saraf & Sel Otot. Dalam H. M. Djauhari.

Goodman and Gilman. 2007. Dasar Farmakologi Terapi. Edisi 10, diterjemahkan

oleh Amalia. Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta.

Kumaravelu, P., Kaliappan V., Viswanathan G., David D.C., Venkatesan H. 2010.

A Comparative Study of Oral Analgesics: Etoricoxib with Tramadol in

Acute Postoperative Pain: A Randomised Double Blind Study. Avaiable

online at:

http://www.jcdr.net/article.s/PDF/742/612_937_E(C)_F(P)_R(P)_P

F_p .pdf Diakses tanggal 14 Oktober 2015.

Kurumbail, R.G., et al.,1996, Cyclooxygenase-2 (Prostaglandin Synthase-2

Complexed with a Selective Inhibittor), SC-558 IN I222 Space

Goup.1996. Available from: http://www.pdb.org/

pdb/explore/explore.do?structureId=6COX [Accessed at 17 March

2015].

Nugraha, Linus Seta Adi.2011.Analgetika.Sebuah percobaan. Semarang: Akademi

Farmasi Theresiana.

Widjajakusumah: Buku Ajar Fisiologi Kedokteran. Edisi 20. Jakarta: EGC.

Yayasan Pengembangan Obat Bahan Alami Phytomedika (YPOBAP). 1991.

Penapisan Farmakologi Pengujian Fitokimia dan Pengujian Klinik.

pp. 49. Yayasan Pengembangan Obat Bahan Alami Phytomedika;

Jakarta.