'Pengaruh Vitamin E Tokotrienol dan Gabungannya dengan...

16
Pengaruh Vitamin E Tokotrienol dan Gabungannya dengan Asam Askorbat Terhadap Jumlah dan Jenis Leukosit Tikus Putih (Rattus norvegicus L.) TESIS Diajukan kepada Program Studi Magister Biologi, Fakultas Biologi, guna memenuhi sebagian dari persyaratan untuk mencapai Gelar Magister Sains Biologi (M.Si.) Oleh : Nur Auliani Lestariningrum NPM : 422011007 Program Pasca Sarjana Universitas Kristen Satya Wacana Salatiga 2013

Transcript of 'Pengaruh Vitamin E Tokotrienol dan Gabungannya dengan...

Page 1: 'Pengaruh Vitamin E Tokotrienol dan Gabungannya dengan ...repository.uksw.edu/bitstream/123456789/4050/1/T2_422011007_Judul.… · dan jenis-jenis leukosit menggunakan sediaan darah

Pengaruh Vitamin E Tokotrienol dan Gabungannya dengan Asam Askorbat

Terhadap Jumlah dan Jenis Leukosit

Tikus Putih (Rattus norvegicus L.)

TESIS

Diajukan kepada Program Studi Magister Biologi, Fakultas Biologi, guna memenuhi

sebagian dari persyaratan

untuk mencapai Gelar Magister Sains Biologi (M.Si.)

Oleh :

Nur Auliani Lestariningrum

NPM : 422011007

Program Pasca Sarjana

Universitas Kristen Satya Wacana Salatiga

2013

Page 2: 'Pengaruh Vitamin E Tokotrienol dan Gabungannya dengan ...repository.uksw.edu/bitstream/123456789/4050/1/T2_422011007_Judul.… · dan jenis-jenis leukosit menggunakan sediaan darah
Page 3: 'Pengaruh Vitamin E Tokotrienol dan Gabungannya dengan ...repository.uksw.edu/bitstream/123456789/4050/1/T2_422011007_Judul.… · dan jenis-jenis leukosit menggunakan sediaan darah

Pengaruh Vitamin E Tokotrienol dan Gabungannya dengan Asam Askorbat

Terhadap Jumlah dan Jenis Leukosit

Tikus Putih (Rattus norvegicus L.)

TESIS

Oleh :

Nur Auliani Lestariningrum

NPM : 422011007

Telah disetujui untuk diuji:

Tanggal : 13 Juni 2013

Pembimbing Utama, Pembimbing Pendamping,

Ir. Ferry F. Karwur, M.Sc., Ph.D. Dr. Ir. Martanto Martosupono

Page 4: 'Pengaruh Vitamin E Tokotrienol dan Gabungannya dengan ...repository.uksw.edu/bitstream/123456789/4050/1/T2_422011007_Judul.… · dan jenis-jenis leukosit menggunakan sediaan darah

LEMBAR PENGESAHAN

Judul Tesis : Pengaruh Vitamin E Tokotrienol dan Gabungannya dengan Asam Askorbat

terhadap Jumlah dan Jenis Leukosit Tikus Putih (Rattus norvegicus L.)

Nama Mahasiswa : Nur Auliani Lestariningrum

NPM : 422011007

Program Studi : Magister Biologi

Menyetujui,

Mengesahkan,

Ketua Program Studi Magister Biologi

Ir. Ferry F. Karwur, M.Sc., Ph.D.

Dinyatakan Lulus Ujian tanggal: 13 Juni 2013

Pembimbing Utama, Pembimbing Pendamping,

Ir. Ferry F. Karwur, M.Sc., Ph.D. Dr. Ir. Martanto Martosupono

Page 5: 'Pengaruh Vitamin E Tokotrienol dan Gabungannya dengan ...repository.uksw.edu/bitstream/123456789/4050/1/T2_422011007_Judul.… · dan jenis-jenis leukosit menggunakan sediaan darah

PERNYATAAN KEASLIAN KARYA TULIS TUGAS AKHIR

Yang bertanda tangan di bawah ini:

Nama : Nur Auliani Lestariningrum

Program Studi : Magister Biologi

Fakultas : Biologi, Universitas Kristen Satya

Wacana

menyatakan dengan sesungguhnya bahwa tugas akhir,

judul: Pengaruh Vitamin E Tokotrienol dan

Gabungannya dengan Asam Askorbat Terhadap Jumlah

dan Jenis Leukosit Tikus Putih (Rattus norvegicus L.)

yang dibimbing oleh:

1. Ir. Ferry F. Karwur, M.Sc., Ph.D.

2. Dr. Ir. Martanto Martosupono

adalah benar-benar hasil karya saya.

Di dalam laporan tugas akhir ini tidak terdapat

keseluruhan atau sebagian tulisan atau gagasan orang

lain yang saya ambil dengan cara menyalin atau meniru

dalam bentuk rangkaian kalimat atau gambar serta

simbol yang saya aku seolah-olah sebagai karya saya

sendiri tanpa memberikan pengakuan pada penulis atau

sumber aslinya.

Salatiga, 14 April 2013

Yang memberi pernyataan,

Nur Auliani Lestariningrum

Page 6: 'Pengaruh Vitamin E Tokotrienol dan Gabungannya dengan ...repository.uksw.edu/bitstream/123456789/4050/1/T2_422011007_Judul.… · dan jenis-jenis leukosit menggunakan sediaan darah

PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI TUGAS AKHIR UNTUK KEPENTINGAN AKADEMIS

Sebagai sivitas akademika Universitas Kristen Satya Wacana (UKSW), saya yang bertanda tangan di bawah ini: Nama : Nur Auliani Lestariningrum NPM : 422011007 Program Studi : Magister Biologi Fakultas : Biologi Jenis karya : Tesis demi pengembangan ilmu pengetahuan, menyetujui untuk memberikan kepada UKSW Hak bebas royalti non-eksklusif (non-exclusive royalty free right) atas karya ilmiah saya berjudul: Pengaruh Vitamin E Tokotrienol dan Gabungannya dengan Asam Askorbat terhadap Jumlah dan Jenis Leukosit Tikus Putih (Rattus norvegicus L.) Dengan hak ini, UKSW berhak menyimpan, mengalihmedia/ mengalihformatkan, mengelola dalam bentuk pangkalan data, merawat, dan mempublikasikan tugas akhir saya, selama tetap mencantumkan nama saya sebagai penulis/pencipta.

Demikian peryataan ini saya buat dengan sebenarnya.

Salatiga, 17 Juni 2013 Yang menyatakan,

Nur Auliani Lestariningrum

Mengetahui,

Pembimbing Utama, Pembimbing Pendamping,

Ir. Ferry F. Karwur, M.Sc., Ph.D. Dr. Ir. Martanto Martosupono

Page 7: 'Pengaruh Vitamin E Tokotrienol dan Gabungannya dengan ...repository.uksw.edu/bitstream/123456789/4050/1/T2_422011007_Judul.… · dan jenis-jenis leukosit menggunakan sediaan darah

i

ABSTRAK

Penelitian ini bertujuan untuk untuk mengetahui pengaruh

pemberian vitamin E tokotrienol dan gabungannya dengan asam

askorbat terhadap jumlah dan jenis leukosit. Metode yang digunakan

untuk menghitung jumlah leukosit menggunakan Haemositometer

dan jenis-jenis leukosit menggunakan sediaan darah apus tepi.

Penelitian dilakukan dengan menggunakan hewan uji coba tikus

putih jantan berumur 30 hari. Rancangan percobaan dilakukan

dengan 3 perlakuan termasuk kontrol dan 3 ulangan per masing-

masing kelompok. Data kuantatif diperoleh dengan menghitung

jumlah dan jenis leukosit pada tiap kelompok perlakuan, dan data

yang diperoleh reratanya dibandingkan dengan jumlah leukosit

normalnya. Selain itu, data jumlah leukosit diolah menggunakan uji

sidik ragam menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) dan

dilanjutkan dengan uji BNT taraf 5%. Hasil penelitian menunjukkan

bahwa pemberian asupan vitamin E tokotrienol dan gabungannya

dengan asam askorbat memberikan pengaruh secara nyata (P>0,05)

terhadap jumlah total leukosit yang ditunjukkan dengan adanya

peningkatan pada hari ke-7, berturut-turut sejumlah 10333 mm3

dan 12932 mm3 dibanding dengan kontrol sejumlah 5047 mm3.

Selain itu, pemberian vitamin E tokotrienol dan gabungannya

dengan asam askorbat memberikan pengaruh secara nyata (P>0,05)

terhadap peningkatan neutrofil berturut-turut yaitu 31,66% dan

33,66% serta 24,33% dan 22,33% bila dibandingkan dengan kontrol.

Terjadi penurunan pada persentase limfosit berturut-turut yaitu

26,66% dan 29,16%, serta 19,50% dan 17,00% bila dibandingkan

dengan kontrol. Pemberian vitamin E tokotrienol dan gabungannya

dengan asam askorbat tidak memberikan pengaruh yang nyata

(P<0,05) terhadap persentase eosinofil, basofil dan monosit.

Disimpulkan bahwa pemberian asupan gabungan viatmin E

tokotrienol dan asam askorbat lebih efektif dalam perbaikan sel yang

ditunjukkan dengan adanya peningkatan jumlah dan jenis leukosit.

Kata Kunci: Vitamin E Tokotrienol, Asam askorbat, Leukosit, tikus

putih

Page 8: 'Pengaruh Vitamin E Tokotrienol dan Gabungannya dengan ...repository.uksw.edu/bitstream/123456789/4050/1/T2_422011007_Judul.… · dan jenis-jenis leukosit menggunakan sediaan darah

ii

ABSTRACT

This study aims to investigate the effect of vitamin E

tocotrienols and combined with ascorbic acid to the total number and

types of leukocytes. The method used to calculate the number of

leukocytes using Haemocytometer and types of leukocytes using

preparations of edge lear blood. The study was conducted using

animal testing male white rats are 30 days old. The design of

experiment was conducted with three treatments including control

and three repetition per each group. Quantatif data obtained by

calculate the number and types of leukocytes in each treatment

group, and the data obtained average compared with normal

leukocyte counts. In addition, data of leukocyte count is processed

using analysis of variance test using a Completely Randomized

Design (CRD) and followed by test of Least Significant Difference

(LSD) level 5%. The results showed that feed intake of vitamin E

tocotrienols and combined with ascorbic acid influenced significantly

(P> 0.05) to the total number of leukocytes indicated by an increase at

day 7 consecutive a total of 10 333 mm3and 12 932 mm3 compared

with control is 5047 mm3.

In addition, In addition, feed intake of vitamin E tocotrienols

and combined with ascorbic acid influenced significantly (P> 0.05) to

increase neutrophil consecutive are 31.66% and 33.66% and 24.33%

and 22.33% when compared with controls. There was a decrease in

the percentage of lymphocytes in a consecutive are 26.66% and

29.16%, and 19.50% and 17.00% when compared with controls.

Vitamin E tocotrienols and combined with ascorbic acid did not give

significant effect (P <0.05) to percentage of eosinophils, basophils and

monocytes. It was concluded that the combined feed intake viatmin E

tocotrienols and ascorbic acid is more effective in the repair of cells

indicated by an increase in the total number and types of leukocytes.

Keywords: Vitamin E Tocotrienol, Ascorbic Acid, Leukocytes, White

Rats

Page 9: 'Pengaruh Vitamin E Tokotrienol dan Gabungannya dengan ...repository.uksw.edu/bitstream/123456789/4050/1/T2_422011007_Judul.… · dan jenis-jenis leukosit menggunakan sediaan darah

Prakata

Alhamdulillah, segala puji syukur penulis panjatkan atas kehadirat Allah SWT, yang telah melimpahkan rahmat dan hidayah-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan

penyusunan laporan hasil penelitian dengan judul “Pengaruh Vitamin E Tokotrienol dan Gabungannya

dengan Asam Askorbat Terhadap Jumlah dan Jenis Leukosit Tikus Putih (Rattus norvegicus L.)”. Penulis juga mengucap syukur atas segala kekuatan, kesabaran

dan kesehatan yang telah Allah SWT berikan dalam pemilihan tema penelitian, pelaksanaan penelitian, hingga

penulisan laporan hasil penelitian ini. Penulis percaya bahwa tanpa bimbinganNya, penulis tidak akan dapat memulai ataupun menyelesaikan studi di Program

Pascasarjana Magister Biologi, Universitas Kristen Satya Wacana, ini.

Adapun segala perencanaan, pelaksanaan dan

penyelesaian penelitian ini juga tidak lepas dari

bimbingan dan dukungan dari berbagai pihak. Penulis

secara khusus mengucapkan terima kasih kepada:

1. Bapak Ir. Ferry F. Karwur, M.Sc., Ph.D., selaku dosen

pembimbing pertama dan sebagai Ketua ProgramStudi magister biologi Universitas Kristen Satya

Wacana. Terima kasih untuk segala bimbingan,arahan, kesabaran, dan kepercayaan yang telahdiberikan kepada penulis untuk memulai dan

menyelesaikan studi lanjut ini.2. Bapak Dr. Ir. Martanto Martosupono, selaku dosen

pembimbing kedua. Terima kasih untuk segala

bimbingan, motivasi, masukan, keluangan waktu di

tengah segala kesibukannya, dan bantuan yang

diberikan.

3. Seluruh dosen pengajar dan staf di PPs. Magister

Biologi.

4. Kedua orang tua penulis yang dengan tanpa lelah

memberikan motivasi dan do’a restu kepada penulis.

Page 10: 'Pengaruh Vitamin E Tokotrienol dan Gabungannya dengan ...repository.uksw.edu/bitstream/123456789/4050/1/T2_422011007_Judul.… · dan jenis-jenis leukosit menggunakan sediaan darah

5. Bayu Perisha yang selalu senantiasa menemani dan

mengiringi langkah penulis dari pengambilan sampel

sampai pada terselesaikannya penulisan laporan

penelitian ini.

6. Teman-teman Magister Biologi UKSW angkatan 2011-

2012.

Akhir kata, penulis menyadari bahwa penelitian maupun

pelaporan tugas akhir ini masih jauh dari sempurna.

Penulis sangat terbuka terhadap kritik, masukan, atau

saran dari setiap pembaca. Semoga penelitian kecil ini

dapat bermanfaat bagi para pembaca.

April 2013

Penulis

Page 11: 'Pengaruh Vitamin E Tokotrienol dan Gabungannya dengan ...repository.uksw.edu/bitstream/123456789/4050/1/T2_422011007_Judul.… · dan jenis-jenis leukosit menggunakan sediaan darah

Daftar Isi

Abstrak.................................................................. i

Abstract..................................................................... ii

Prakata...................................................................... iii

Daftar Isi................................................................... v

Daftar Tabel............................................................. vii

Daftar Gambar......................................................... viii

Daftar Lampiran........................................................ x

I. PENDAHULUAN

Latar Belakang.................................................... 1

Rumusan Masalah.............................................. 5

Tujuan................................................................ 6

II. TINJAUAN PUSTAKA

Klasifikasi Tikus Putih....................................... 7

Histologi Darah.................................................. 7

Jenis Darah Leukosit.

A. Sel Granulosit.................................... 8

B. Sel Agranulosit................................. 11

Vitamin E........................................................ 15

Vitamin C (Asam askorbat).............................. 16

III. METODE PENELITIAN

Alat dan Bahan................................................. 19

Perlakuan Secara in vivo Pada Tikus Putih

dan Sampling.................................................... 20

Pengambilan Sampel Darah.............................. 21

Menghitung Leukosit........................................ 22

Pembuatan Sediaan Apus Darah Tepi

(SADT).............................................................. 23

Metode Pengecatan.......................................... 24

Page 12: 'Pengaruh Vitamin E Tokotrienol dan Gabungannya dengan ...repository.uksw.edu/bitstream/123456789/4050/1/T2_422011007_Judul.… · dan jenis-jenis leukosit menggunakan sediaan darah

Metode Pemeriksaan........................................ 25

Analisis Data.................................................... 26

IV. HASIL DAN PEMBAHASAN

Jumlah Total Leukosit pada Tikus Putih........... 27

Hitung Jenis Leukosit pada Tikus Putih dengan

Pemberian Vitamin E Tokotrienol, Vitamin E

Tokotrienol + Asam Askorbat............................. 34

Neutrofil............................................................ 40

Limfosit............................................................. 42

Eosinofil............................................................ 44

Basofil............................................................... 45

Monosit............................................................. 46

V. KESIMPULAN DAN SARAN

Kesimpulan...................................................... 50

Saran............................................................... 51

Daftar

Pustaka............................................................... 52

Lampiran............................................................ 56

Page 13: 'Pengaruh Vitamin E Tokotrienol dan Gabungannya dengan ...repository.uksw.edu/bitstream/123456789/4050/1/T2_422011007_Judul.… · dan jenis-jenis leukosit menggunakan sediaan darah

Daftar Tabel

Tabel 1. Proses Pemberian Perlakuan Asam

Askorbat dan Vitamin E

Tokotrienol, dan Pengambilan

Sampel .............................................. 21

Tabel 2. Rerata jumlah total leukosit tikus

Putih dengan pemberian Vitamin

E tokotrienol dan Vitamin E

tokotrienol + Asam askorbat................ 28

Tabel 3. Rerata persentase jenis-jenis sel

Diferensiasi leukosit dari semua

kelompok tikus putih setelah

perlakuan dengan pemberian

Vitamin E tokotrienol dibandingkan

dengan Standar Normal....................... 36

Tabel 4. Rerata persentase jenis-jenis sel

Diferensiasi leukosit dari semua

kelompok tikus putih perlakuan

dengan pemberian Vitamin

E tokotrienol dan Asam

askorbat............................................... 37

Tabel 5. Analisa Statistik rerata persentase

jumlah differensiasi sel leukosit

dari semua kelompok

tikus putih........................................... 39

Page 14: 'Pengaruh Vitamin E Tokotrienol dan Gabungannya dengan ...repository.uksw.edu/bitstream/123456789/4050/1/T2_422011007_Judul.… · dan jenis-jenis leukosit menggunakan sediaan darah

Daftar Gambar

Gambar 1. Neutrofil.................................................. 9

Gambar 2. Eosinofil.................................................. 10

Gambar 3. Basofil................................................... 11

Gambar 4. Limfosit................................................ 12

Gambar 5. Monosit................................................. 14

Gambar 6. Kurva Pertumbuhan Sel Leukosit

pada Minggu pertama hingga Minggu

akhir Pengamatan dengan

perlakuan Vitamin E Tokotrienol

dan Vitamin E tokotrienol + Asam

askorbat................................................ 29

Gambar 7. Sel Neutrofil perbesaran 1600x. (a)

Sebelum perlakuan (b)

Setelah perlakuan.................................. 41

Gambar 8. Sel Limfosit perbesaran 1600x. (a)

Sebelum perlakuan (b)

Setelah perlakuan.................................. 43

Gambar 9. Sel Eosinofil perbesaran 1600x. (a)

Sebelum perlakuan (b)

Setelah perlakuan.................................. 45

Gambar 10. Sel Basofil perbesaran 1600x. (a)

Sebelum perlakuan (b)

Setelah perlakuan................................ 46

Page 15: 'Pengaruh Vitamin E Tokotrienol dan Gabungannya dengan ...repository.uksw.edu/bitstream/123456789/4050/1/T2_422011007_Judul.… · dan jenis-jenis leukosit menggunakan sediaan darah

Gambar 11. Sel Monosit perbesaran 1600x. (a)

Sebelum perlakuan (b)

Setelah perlakuan............................... 47

Page 16: 'Pengaruh Vitamin E Tokotrienol dan Gabungannya dengan ...repository.uksw.edu/bitstream/123456789/4050/1/T2_422011007_Judul.… · dan jenis-jenis leukosit menggunakan sediaan darah

Daftar Lampiran

Lampiran 1. Jenis leukosit. a. Monosit, b. Basofil,

c. Eosinofil, d. Netrofil, e. Limfosit

dengan perbesaran mikroskop

1600X................................................. 56

Lampiran 2. Alur kerja pembuatan preparat

untuk menghitung jumlah total

leukosit................................................ 57

Lampiran 3. Alur kerja pembuatan preparat

untuk menghitung jenis-jenis

leukosit................................................ 58

Lampiran 4. Jumlah Total Leukosit.......................... 60

Lampiran 5. Jenis-Jenis Leukosit............................. 64