PENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK ALGA COKELAT (Sargassum sp.)

TERHADAP PENURUNAN SKOR INTEGRITAS MUKOSA LAMBUNG YANG

DIAMATI SECARA MIKROSKOPIS PADA LAMBUNG TIKUS Rattus norvegicus

STRAIN WISTAR YANG DIINDUKSI INDOMETASIN

TUGAS AKHIR

Untuk Memenuhi Persyaratan

Memperoleh Gelar Sarjana Kedokteran Umum

Oleh:

Shintia Lailatul Firdaus

NIM 145070100111026

PROGRAM STUDI KEDOKTERAN

FAKULTAS KEDOKTERAN

UNIVERSITAS BRAWIJAYA

MALANG

2017

DAFTAR ISI

Halaman

Halaman Judul ...................................................................................... i

Halaman Persetujuan ........................................................................... ii

Halaman Pengesahan .......................................................................... iii

Halaman Pernyataan Keaslian ................................................................ iv

Kata Pengantar ..................................................................................... v

Abstrak ................................................................................................. vii

Abstract ................................................................................................ viii

Daftar Isi ............................................................................................... ix

Daftar Tabel .......................................................................................... xiii

Daftar Gambar ...................................................................................... xiv

Daftar Lampiran ..................................................................................... xv

Daftar Singkatan .................................................................................... xvi

BAB 1 PENDAHULUAN ...................................................................... 1

1.1 Latar Belakang ...................................................................... 1

1.2 Rumusan Masalah ................................................................. 4

1.3 Tujuan Penelitian ................................................................... 4

1.3.1 Tujuan Umum .............................................................. 4

1.3.2 Tujuan Khusus ............................................................. 4

1.4 Manfaat Penelitian ................................................................. 5

1.4.1 Bagi Peneliti ................................................................. 5

1.4.2 Bagi Keilmuan .............................................................. 5

1.4.3 Bagi Pelayanan Kesehatan .......................................... 5

1.4.4 Bagi Kemasyarakatan .................................................. 5

BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA .............................................................. 6

2.1 Lambung ............................................................................... 6

2.1.1 Fisiologi dan Sekresi Lambung .................................... 6

2.2 Peradangan Lambung (Gastritis) ............................................ 8

2.2.1 Gastritis Akut ............................................................... 8

2.2.2 Gastritis Kronis ............................................................ 8

2.3 Ulkus Peptikum ..................................................................... 9

2.3.1 Definisi dan Etiologi ..................................................... 9

2.3.2 Patofisiologi ................................................................. 9

2.3.3 Tanda dan Gejala ........................................................ 10

2.3.4 Terapi Farmakologi Ulkus Peptikum ............................. 11

2.3.4.1 Antagonis Reseptor H2 .................................... 11

2.3.4.2 PPI (Proton Pump Inhibitor) .............................. 12

2.3.4.3 Analog Prostaglandin: Misoprostol ................... 12

2.4 Non-Steroid Anti-Inflammatory Drugs (NSAIDs) .................... 13

2.4.1 Definisi dan Pembagian NSAID ................................... 13

2.4.2 Farmakodinamik .......................................................... 15

2.4.3 Efek Samping .............................................................. 16

2.5 Sargassum sp. ....................................................................... 17

BAB 3 KERANGKA KONSEP DAN HIPOTESIS PENELITIAN ........... 19

3.1 Kerangka Konsep Penelitian ................................................... 19

3.3 Hipotesis Penelitian ............................................................... 21

BAB 4 METODE PENELITIAN ............................................................. 22

4.1 Desain Penelitian ................................................................... 22

4.1.1. Studi In Vivo ................................................................ 22

4.2 Subjek Penelitian ................................................................... 22

4.2.1 Populasi dan Sampel Penelitian ................................... 22

4.2.2 Perhitungan Besar Subjek Penelitian ........................... 23

4.3 Tempat dan Waktu Pelaksanaan Penelitian ........................... 24

4.4 Variabel Penelitian ................................................................. 24

4.4.1 Variabel Bebas ............................................................. 24

4.4.2 Variabel Tergantung .................................................... 24

4.5 Definisi Operasional ............................................................... 24

4.5.1 Indometasin ................................................................. 24

4.5.2 Alga Cokelat (Sargassum sp.) ...................................... 25

4.5.2.1 Alga Cokelat ..................................................... 25

4.5.2.2 Ekstrak Alga Cokelat ........................................ 25

4.5.3 Tikus Model Gastritis .................................................... 25

4.5.4 Gambaran Pendarahan Secara Mikroskopis ................ 26

4.6 Alat dan Bahan Penelitian ...................................................... 27

4.6.1 Bahan Penelitian .......................................................... 27

4.6.1.1 Bahan untuk Pemeliharaan Hewan Coba ......... 27

4.6.1.2 Bahan untuk Perlakuan Hewan Coba ............... 27

4.6.1.3 Bahan untuk Pengambilan Organ ............................. 27

4.6.1.4 Bahan untuk Pembuatan Preparat ................... 27

4.6.2 Alat Penelitian .............................................................. 28

4.6.2.1 Alat untuk Pemeliharaan Hewan Coba ............. 28

4.6.2.2 Alat untuk Penimbangan Berat Badan .............. 28

4.6.2.3 Alat untuk Pemberian Indometasin, Ekstrak Sargassum sp.,

dan Gold Standard .......................................... 28

4.6.2.4 Alat untuk Pengambilan Organ ......................... 29

4.6.2.5 Alat untuk Pembuatan Preparat ........................ 29

4.6.5.6 Alat Penilaian Mikroskopis Lesi Mukosa Lambung Tikus

......................................................................... 29

4.7 Prosedur Penelitian ............................................................... 29

4.7.1 Pembuatan Model Hewan Gastritis .............................. 29

4.7.2 Pemberian Ekstrak Alga Cokelat dan Pembedahan Kelompok

Perlakuan ..................................................................... 30

4.7.3 Prosedur Pembuatan Preparat Histopatologi ............... 30

4.7.4 Persiapan Hewan Coba ............................................... 31

4.7.5.1 Sebelum Penelitian .......................................... 31

4.7.5.2 Selama Penelitian ............................................ 32

4.7.5.3 Sesudah Penelitian .......................................... 32

4.8 Alur Penelitian dan Pengumpulan Data ................................ 33

4.8.1 Alur Penelitian .............................................................. 34

4.8.2 Teknik Pengumpulan Data ........................................... 35

4.9 Analisis Data ......................................................................... 35

4.10 Jadwal Kegiatan ................................................................. 37

BAB 5 HASIL PENELITIAN DAN ANALISIS DATA ............................ 38

5.1 Hasil Pemeriksaan Mikroskopis (Integritas Sel Epitel) Mukosa Lambung

Tikus ...................................................................................... 38

5.2 Rata-Rata Skor Integritas Mukosa Lambung Tikus Bedasarkan Ekstrak

Sargassum sp. ....................................................................... 41

5.3 Pengujian Pengaruh Ekstrak Sargassum sp. Terhadap Skor Integritas

Mukosa Lambung Tikus ........................................................ 43

5.3.1 Pengujian Kenormalan Residual Pengaruh Ekstrak Sargassum sp.

Terhadap Skor Integritas Mukosa Lambung Tikus ...... 43

5.3.2 Pengujian Homogenitas Residual Pengaruh Ekstraj Sargassum sp.

Terhadap Skor Integritas Mukosa Lambung Tikus ...... 43

5.3.3 Pengujian Perbedaan Pengaruh Ekstrak Sargassum sp. terhadap

Skor Integritas Mukosa Lambung Tikus ...................... 44

5.4 Analisis Pengaruh Ekstrak Sargassum sp. terhadap Skor Integritas Mukosa

Lambung Tikus ..................................................................... 47

5.4.1 Hasil Estimasi Pengaruh Ekstrak Sargassum sp. Terhadap Skor

Integritas Mukosa Lambung Tikus ............................... 47

5.4.1.1 Pengujian Koefisien Determinasi ...................... 47

5.4.1.2 Koefisien Korelasi ............................................ 48

5.4.1.3 Pengujian Hipotesis .......................................... 48

5.4.1.3.1 Uji Hipotesis Parsial ........................... 48

5.4.1.4 Model Empirik Regresi Linier Sederhana 49

BAB 6 PEMBAHASAN ........................................................................ 51

6.1 Hasil Penelitian ............................................................... 51

BAB 7 PENUTUP ................................................................................. 55

7.1 Kesimpulan ............................................................................ 55

7.2 Saran ..................................................................................... 55

DAFTAR PUSTAKA ............................................................................. 56

LAMPIRAN .......................................................................................... 62

vii

ABSTRAK

Firdaus, Shintia Lailatul. 2017. Pengaruh Pemberian Ekstrak Alga Cokelat

(Sargassum sp.) Terhadap Penurunan Skor Integritas Mukosa Lambung

yang Diamati Secara Mikroskopis pada Lambung Tikus Rattus

norvegicus Strain Wistar yang Diinduksi Indometasin. Tugas Akhir,

Program Studi Kedokteran, Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya.

Pembimbing: (1) dr. Bayu Lestari, M.Biomed., (2) dr. Dewi Mustika, M.Biomed.

Peptic ulcer disease (PUD) merupakan kondisi yang muncul saat lapisan mukosa protektif dari mukosa gastrointestinal mengalami kerusakan. Hal ini dikarenakan tidak seimbangnya antara factor agresif (perusak mukosa lambung) dan factor defensive (pemelihara keutuhan mukosa lambung). Sargassum mengandung agen yang memiliki efek anti-ulcer, dengan cara menjaga volume serta keasaman dari cairan lambung, dan meningkatkan system pertahanan antioksidan mukosa lambung pada model hewan coba gastritis. Penelitian ini adalah eksperimen murni dengan metode Randomized Post Only Controlled Group Design, yang dilakukan secara in vivo menggunakan tikus yang diinduksi indometasin. Dilakukan pengelompokan tikus sesuai perlakuan yang diberikan, yaitu kontrol negatif, kontrol positif, dosis 1 (150mg/KgB), dosis 2 (300mg/KgBB), dosis 3 (600mg/KgBB), dan kelompok misoprostol. Hasil penelitian dilakukan uji Pengujian Kolmogorov-Smirnov, sebesar 0.100 dengan probabilitas sebesar 0.200, menghasilkan probabilitas > alpha (5%), maka dinyatakan normal. Pengujian Levene sebesar 0.185 dengan probabilitas sebesar 0.965 menghasilkan probabilitas > alpha (5%), sehingga dinyatakan memiliki ragam yang homogen. Pengujian hipotesis secara parsial konstanta menghasilkan nilai t hitung sebesar 5.207 dengan probabilitas sebesar 0.000, menunjukkan

probabilitas < level of significance (=5%). Sehingga terdapat pengaruh signifikan secara parsial konstanta terhadap skor integritas mukosa lambung. Dari penelitian yang telah dilakukan, menunjukkan hasil yang optimum pada dosis 2 (300mg/KgBB). Pada pemberian dosis 1 (150mg/KgBB) dan 3 (600mg/KgBB) memberikan skor yang lebih tinggi dibandingkan dengan dosis 2. Maka dapat disimpulkan dengan pemberian dosis 300 mg/KgBB memberikan hasil yang paling baik, ditunjukkan dari skor integritas mukosa yang dihasilkan paling rendah dibandingkan dengan skor integritas yang dihasilkan oleh dosis 150 mg/KgBB dan 600 mg/KgBB. Kata kunci: Sargassum sp., skor integritas mukosa, ulkus peptikum

viii

ABSTRACT

Firdaus, Shintia Lailatul. 2017. The Influence of Chocolate Algae Extract

(Sargassum sp.) on Reduction of Integrity Score of Gastric Mucosa

Observed Microscopically on Stomach Rat Rattus norvegicus Wistar

Strain in Indomethacin induction. Final assignment, Medical Program,

Faculty of Medicine, Brawijaya University. Supervisors: (1) dr. Bayu Lestari,

M.Biomed., (2) dr. Dewi Mustika, M.Biomed.

Peptic ulcer disease (PUD) is a condition that occurs when the protective mucosal

layer of the gastrointestinal mucosa is damaged. This is due to the unbalanced

between aggressive factors (gastric mucosal destroyer) and defensive factor

(maintaining the integrity of the gastric mucosa). Sargassum contains agents that have

anti-ulcer effects, keeping the volume and acidity of the stomach fluid, and improving

the gastric mucosal antioxidant defense system in animal models of gastritis. This

research is a pure experiment with Randomized Post Only Controlled Group Design

method, which is done in vivo using indomethacin-induced rats. Grouped mice

according to given treatment, negative control, positive control, dose 1 (150mg / KgB),

dose 2 (300mg / KgBB), dose 3 (600mg / KgBB), and misoprostol group. The result of

the experiment was Kolmogorov-Smirnov test, 0,100 with probability equal to 0200,

yielding probability> alpha (5%), then it was stated normal. Levene test of 0.185 with

probability of 0.965 yields probability> alpha (5%), so it is stated to have a

homogeneous variety. Hypothesis testing by partial constant yields t value of 5.207

with probability of 0.000, shows probability

1

BAB 1

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Lambung adalah suatu organ berongga besar yang meluas dan menyerupai

kantung dalam rongga peritonium. Lambung terletak melintasi abdomen bagian atas

antara hepar dan diafragma disebelah anterior dan kolon transfersum disebelah

posterior. Lambung dilindungi oleh lapisan mukus. Pada mukosa lambung diproduksi

glikoprotein (berupa mukus) dan bikarbonat. Lapisan mukus ini menutupi permukaan

mukosa dengan tebal 2-3 kali tinggi sel epitel permukaan. Mukus dan bikarbonat ini

berfungsi sebagai pelindung dari mukosa terhadap pengaruh asam dan pepsin,

empedu, dan zat perusak dari luar (Abbas et. al., 2007).

Gastritis merupakan salah satu penyebab kerusakan dari mukosa lambung,

dimana proses inflamasi terjadi disana (Sudoyo, 2006). Gastritis disebabkan oleh

bakteri atau obat-obatan yang dapat bersifat akut, kronik, difus, atau lokal (Price,

2006). Gambaran yang akan ditemukan adalah berupa dyspepsia atau indigesti

(Mansjoer, 2001).

Selain gastritis gangguan lambung yang lain ialah ulkus peptikum. Dimana

terdapat luka terbuka dengan pinggiran edema disertai indurasi dengan tukak tertutup

debris (Tarigan, 2009). Hal ini dikarenakan tidak seimbangnya antara faktor agresif

(perusak mukosa lambung) dan faktor defensif (pemelihara keutuhan mukosa

lambung) (Robbins et. al., 2007). Peptic ulcer disease (PUD) merupakan kondisi yang

muncul saat lapisan mukosa protektif dari mukosa gastrointestinal mengalami

kerusakan. Lapisan protektif pada mukosa lambung berupa mucus dan bikarbonat

2

dapat rusak akibat asam lambung dan pepsin yang berasal dari usus duabelas jari.

PUD utamanya terjadi pada lambung (ulkus lambung) atau pada proksimal duodenum

(ulkus duodenum) (Lau et al., 2011).

Sebagian besar ulkus lambung disebabkan oleh infeksi Helicobacter pylori dan

Non-Steroid Anti Inflamasi Drug (NSAID), ulkus lambung terjadi pada lebih dari 25%

pasien yang menggunakan NSAID dalam jangka panjang (Borody et. al., 1998).

Mekanisme gastritis akibat NSAID sendiri diakibatkan oleh defisiensi prostaglandin

yang memiliki kontribusi dominan dalam menyebabkan ulkus pada lambung. Gastritis

akibat NSAID memiliki pathogenesis yang kompleks diantaranya karena definsiensi

prostaglandin serta interaksi dari neutrophil dan radikal bebas (Yoshikawa et. al.,

2000).

Idealnya, NSAID dihentikan sebagai langkah pertama terapi ulkus. Selanjutnya,

diberikan obat penghambat sekresi asam (penghambat histamin 2 (H2), proton pump

inhibitors (PPIs)). Akan tetapi, penghentian NSAID tidak selalu memungkinkan karena

beratnya penyakit yang mendasari (Valle, 2008). Salah satu contoh PPIs adalah

Omeprazole, Omeprazole memiliki beberapa efek samping yaitu menurunkan jumlah

magnesium dalah darah bila dikonsumsi lebih dari 3 bulan dan dapat meningkatkan

risiko osteoporosis (Dexcel, 2015).

Penurunan prostaglandin dan peningkatan radikal bebas merupakan salah satu

pathway dari terbentuknya ulkus peptikum. Sehingga dengan meningkatkan

prostaglandin dan pengikatan radikal bebas dapat menjadi pencetus pencegahan dari

ulkus peptikum. Salah satu sumber daya Indonesia yang memiliki kandungan sebagai

3

agen pencegahan ulkus peptikum dengan penghambatan pathway tersebut adalah

dengan alga cokelat (Sargassum sp).

Indonesia menyimpan potensi yang sangat besar untuk menjadi sumber utama

rumput laut di dunia. Berdasarkan identifikasi penelitian terdapat sekitar 555 jenis

rumput laut yang tumbuh di perairan Indonesia. Salah satu jenis alga yang banyak

terdapat di Indonesia adalah jenis alga cokelat seperti Sargassum sp. (Putri, 2011).

Dari berbagai penelitian, diketahui bahwa Sargassum sp. memiliki banyak manfaat

diantaranya adalah sebagai antiinflamasi, antioksidan, antitumor, imunomodulator,

dan banyak pula digunakan sebagai bahan suplemen makanan (Teng et. al., 2015).

Studi Zhang dan kawan-kawan pada 2012 menyatakan bahwa Sargassum sp.

memiliki efek terhadap sistem imun dan aktivitas antioksidan. Sargassum sp. terbukti

memiliki efek proteksi melalui peningkatan interleukin-2 (IL-2), interleukin-4 (IL-4),

interleukin-10 (IL-10). Zat ini juga memiliki kemampuan untuk menurunkan interleukin-

6 (IL-6), interleukin-1β (IL-1β), tumor necrosis factor-α (TNF-α), menormalkan aktivitas

enzim antioksidan, serta menghambat lipid peroxidation pada mukosa lambung

(Zhang et al., 2012). Studi lain menyatakan Sargassum sp. mengandung agen yang

memiliki efek anti-ulcer, dengan cara menjaga volume serta keasaman dari cairan

lambung, dan meningkatkan sistem pertahanan antioksidan mukosa lambung pada

model hewan coba gastritis menggunakan etanol. (Raghavendran et al., 2004). Studi

dari Mori dan kolega menyatakan bahwa efek anti ulkus yang dimiliki oleh Sargassum

sp., dicapai melalui pembentukan prostaglandin endogen (Mori et. al., 2006). Oleh

karena itu, melalui penelitian ini ingin membuktikan bahwa ekstrak Sargassum sp.

memiliki potensi kuat sebagai agen pencegahan ulkus peptikum yang efektif dan

4

efisien serta terjangkau bagi semua kalangan karena sumbernya yang murah dan

mudah diperoleh terutama di Indonesia.

1.2 Rumusan Masalah

Bagaimanakah pengaruh pemberian Sargassum sp. terhadap gambaran

mikroskopis lambung tikus Rattus novergicuss strain wistar model ulkus peptikum

yang telah diinduksi indometasin?

1.3 Tujuan Penelitian

1.3.1 Tujuan Umum

Mengetahui pengaruh pemberian ekstrak Sargassum sp. terhadap gambaran

perdarahan yang diamati secara mikroskopis pada lambung tikus Rattus novergicuss

strain wistar model ulkus peptikum yang telah diinduksi indometasin.

1.3.2 Tujuan Khusus

1. Mengetahui potensi ekstrak Sargassum sp. dalam menurunkan skor

integritas mukosa lambung yang diamati secara mikroskopis pada lambung

tikus Rattus novergicuss strain wistar yang telah diinduksi indometasin.

2. Mengetahui dosis optimal pemberian ekstrak Sargassum sp. berdasarkan

penurunan skor integritas mukosa lambung yang diamati secara mikroskopis

pada lambung tikus Rattus novergicuss strain wistar yang telah diinduksi

indometasin.

5

1.4 Manfaat Penelitian

1.4.1 Bagi Peneliti

1. Mengaplikasikan salah satu peran dokter sebagai researcher (peneliti) guna

mengembangkan ilmu pengetahuan.

2. Sebagai landasan ilmiah untuk penelitian selanjutnya dalam skala yang lebih

luas berhubungan dengan Sargassum sp.

1.4.2 Bagi Keilmuan

Memberikan informasi ilmiah tentang manfaat Sargassum sp. sebagai salah

satu alternatif pengobatan anti inflamasi dalam mengurangi tingkat keparahan ulkus

peptikum.

1.4.3 Bagi Pelayanan Kesehatan

1. Mampu memberikan asuhan dalam pemenuhan kebutuhan nutrisi sebagai

kebutuhan fisiologis manusia.

2. Dapat dijadikan sebagai bahan pertimbangan perusahaan industri obat

untuk menciptakan suatu alternatif baru dalam pencegahan ulkus peptikum

menggunakan ekstrak Sargassum sp.

1.4.4 Bagi Kemsyarakatan

1. Dengan mengetahui manfaat dari Sargassum sp., maka dapat

disosialisasikan pada masyarakat agar dapat memanfaatkan sebagai

pengobatan alternatif untuk ulkus peptikum.

2. Memanfaatkan Sargassum sp. sebagai komplementer bagi pengguna

NSAID.

6

BAB 2

TINJAUAN PUSTAKA

2.1. Lambung

2.1.1. Fisiologi dan Sekresi Lambung

Lambung adalah perluasan organ berongga besar menyerupai kantung dalam

rongga peritoneum yang terletak diantara esofagus dan usus halus. Dalam keadaan

kosong, lambung menyerupai tabung bentuk J, dan bila penuh, berbentuk seperti

buah pir raksasa. Lambung terdiri dari antrum kardia (yang menerima esofagus),

fundus besar seperti kubah, badan utama atau korpus dan pylorus (Price et. al., 2006).

Lambung adalah bagian saluran cerna yang melebar dengan fungsi utama

menambahkan cairan asam pada makanan yang masuk, mengubahnya melalui

aktifitas otot menjadi massa kental (khimus) dan melanjutkan proses pencernaan

yang telah dimulai dalam rongga mulut dengan menghasilkan enzim proteolitik pepsin.

Lambung juga membentuk lipase lambung yang menguraikan trigliserida dengan

bantuan lipase lingual (Junqueira et al., 2007).

Mukosa lambung terdiri atas epitel permukaan, lamina propia, dan mukosa

muskularis. Permukaan lumen mukosa ditutupi epitel selapis silindris. Epitel ini juga

meluas kedalam dan melapisi foveola gastrica yang merupakan invaginasi epitel

permukaan. Di daerah fundus lambung, foveola ini tidak dalam dan masuk kedalam

mukosa sampai kedalaman seperempat tebalnya. Di bawah epitel permukaan

terdapat lapisan jaringan ikat longgar, yaitu lamina propia, yang mengisi celah

diantara kelenjar gastrika. Lapisan luar mukosa dibatasi selapis tipis otot polos yaitu

mukosa muskularis yang terdiri atas lapisan sirkuler didalam dan longitudinal diluar.

7

Berkas serat otot polos dan mukosa muskularis meluas dan terjulur ke dalam lamina

propria diantara kelenjar lambung ke arah epitel permukaan (Junqueira et al., 2007).

Submukosa adalah lapisan tepat dibawah mukosa muskularis. Pada lambung

kosong, lapisan ini meluas sampai ke dalam lipatan atau rugae. Submukosa

mengandung jaringan ikat tidak teratur yang lebih padat dengan lebih banyak serat

kolagen dibandingkan dengan lamina propria. Muskularis mukosa tampak jelas pada

sediaan lambung, terdiri atas dua lapis otot polos yaitu lapisan sirkular dalam dan

longitudinal luar (Junqueira et al., 2007). Mukosa lambung melindungi diri dari

autodigesti melalui beberapa komponen, yaitu:

1. Sekresi mukus : merupakan lapisan tipis pada permukaan mukosa lambung.

2. Sekresi bikarbonat: merupakan sel sel epitel permukaan lambung yang

mensekresi bikarbonat ke zona batas adhesi mukus, membuat pH

mikrolingkungan netral pada perbatasan dengan sel epitel.

3. Pertahanan epitel: merupakan tautan interseluler yang menjadi pertahanan

dari difusi balik ion hidrogen.

4. Aliran darah mukosa : suplai darah mukosa menyediakan oksigen,

bikarbonat, dan nutrien untuk sel epitel.

5. Sintesis prostaglandin: produksi prostaglandin mempengaruhi banyak

komponen lain dari pertahanan mukosa, antara lain merangsang produksi

mukus dan bikarbonat yang akan menghambat sekresi asam sek parietal.

Disamping itu, aksi vasodilatasi dari prostaglandin E dan I meningkatkan

aliran darah mukosa. Obat yang menghambat sintesis prostaglandin,

misalnya NSAIDs dan obat-obat yang serupa dengan aspirin seperti

8

paracetamol akan menurunkan cytoprotection dan memicu perlukaan

mukosa lambung dan ulserasi.

Mukosa lambung memiliki fungsi melindungi lambung dari luka akibat asam

lambung dan segera melakukan perbaikan apabila hal tersebut terjadi melalui jalur

neural, endokrin, parakrin, dan autokrin. Asam lambung bermanfaat sebagai pelancar

pencernaan protein, menekan pertumbuhan bakteri, dan penyerapan kalsium, zat

besi, dan vitamin B12 (Hall dan Guyton, 2015).

2.2. Peradangan Lambung (Gastritis)

2.2.1. Gastritis Akut

Gastritis akut merupakan peradangan mukosa lambung yang disebabkan oleh

iritan lokal seperti NSAID, kafein, alkohol, endotoksin bakteri. Bahan tersebut melekat

pada epitel lambung dan menghancurkan lapisan mukosa pelindung, meninggalkan

daerah epitel yang gundul (Price & Wilson, 2006).

Peradangan mungkin disertai perdarahan ke dalam mukosa, terdapat edema

mukosa, infiltrat peradangan neutrofil dan terlepasnya epitel mukosa superfisialis

(erosi) (Robbins et al., 2007).

2.2.2. Gastritis Kronis

Gastritis kronis didefinisikan sebagai peradangan mukosa kronis yang

akhirnya menyebabkan atrofi mukosa dan metaplasia epitel (Robbins, 2007). Dinding

lambung menjadi tipis dan mukosa mempunyai permukaan yang rata (Price & Wilson,

2006).

9

2.3. Ulkus Peptikum

2.3.1. Definisi dan Etiologi

Ulkus peptikum (UP) adalah kerusakan pada lapisan mukosa, sub mukosa

sampai lapisan otot saluran cerna yang disebabkan oleh aktifitas pepsin dan asam

lambung. Ulkus peptikum dapat mengenai esofagus sampai usus halus, tetapi

kebanyakan terjadi pada bulbus duodenum (90%) dan kurvatura minor (Dodge, 2007).

Bila terjadi di antara kardia dan pilorus disebut ulkus lambung dan bila terjadi pada

daerah setelah pilorus disebut ulkus duodenum (Spiro, 2006). Ulkus peptikum sangat

jarang terjadi pada bayi dan anak dibanding dewasa, namun insiden yang pasti belum

diketahui. Pada kelompok anak, usia yang paling sering mengalami ulkus peptikum

adalah 12-18 tahun, dimana laki-laki lebih banyak dibanding perempuan (Sondheimer

et al., 2003).

2.3.2. Patofisiologi

Patogenesis Ulkus Peptikum umumnya terjadi akibat sekresi asam yang

berlebihan dan gangguan ketahanan / integritas mukosa, sehingga terjadi difusi balik

ion H+ dari lumen usus masuk ke dalam mukosa (Djuwantoro, 2000). Mekanisme

keseimbangan antara faktor agresif (perusak) dan faktor defensif (ketahanan mukosa)

sangat penting untuk mempertahankan fungsi dan integritas saluran cerna. Faktor

agresif yang utama adalah asam lambung dan pepsin. Faktor defensif yang berperan

adalah mucous barrier (mukus dan bikarbonat), mucosal resistance barrier (resistensi

mukosa), microcirculation (aliran darah mukosa) dan prostaglandin (Soemanto et al.,

2001).

10

Mekanisme kerja obat golongan non-steroid adalah melalui penghambatan

prostaglandin (Tjay et al., 2006). Prostaglandin diproduksi oleh mukosa lambung dan

diduga mempunyai efek sitoprotektif dan mekanisme kerja utama prostaglandin

adalah menghambat sekresi lambung (Katzung et al., 2004). Hambatan sintesis

prostaglandin menyebabkan sekresi asam yang berlebih, sehingga meningkatkan

keasamannya yang berpotensi menimbulkan tukak (ulcer) (Mutschler, 1986).

Kerusakan mukosa lambung dapat disebabkan oleh etanol. Etanol atau yang

dikenal sebagai alkohol di masyarakat telah menjadi masalah sosial (Brunton et al.,

2008). Etanol dapat meningkatkan produksi Reactive Oxygen Species dan

menurunkan kadar antioksidan (Fernandez-Checa et al., 2005), sehingga dapat

merusak sawar mukosa lambung. Etanol cepat berpenetrasi ke dalam mukosa

lambung dengan cara melepaskan radikal bebas dan meningkatkan permeabilitas

mukosa sehingga memungkinkan difusi balik HCl (Suleyman et al., 2001).

2.3.3. Tanda dan Gejala

Ulkus biasanya sembuh sendiri tetapi dapat timbul kembali. Nyeri dapat timbul

selama beberapa hari atau minggu dan kemudian berkurang atau menghilang. Gejala

bervariasi tergantung lokasi ulkus dan usia penderita. Contohnya anak dan orang tua

biasanya tidak memiliki gejala yang sering atau tidak ada gejala sama sekali. Oleh

karena itu ulkus biasanya diketahui ketika komplikasi terjadi. Hanya setengah dari

penderita ulkus duodenum mempunyai gejala yang sama seperti perih, rasa seperti

terbakar, nyeri, pegal, dan lapar. Rasa nyeri berlangsung terus-menerus dengan

intensitas ringan sampai berat biasanya terletak di bawah sternum. Kebanyakan

orang yang menderita ulkus duodenum, nyeri biasanya tidak terjadi ketika bangun

11

tidur tetapi timbul menjelang siang. Minum susu dan makan (yang menyangga

keasaman PH lambung) atau meminum obat antasida dapat mengurangi nyeri, tapi

mulai timbul kembali setelah 2 atau 3 jam kemudian. Nyeri yang dapat

membangunkan orang ketika malam hari juga kadang terjadi. Seringkali nyeri timbul

sekali atau lebih dalam sehari selama beberapa minggu dan hilang tanpa diobati.

Namun, nyeri biasanya timbul kembali 2 tahun kemudian dan terkadang juga dalam

beberapa tahun kemudian. Penderita biasanya akan belajar mengenai pola sakitnya

ketika kambuh (biasanya terjadi ketika stres). Makan bisa meredakan sakit untuk

sementara tetapi bisa juga malah menimbulkan sakit. Ulkus lambung terkadang

membuat jaringan bengkak (edema) yang menjalar ke usus halus, yang bisa

mencegah makanan melewati lambung. Blokade ini bisa menyebabkan kembung,

mual, atau muntah setelah makan (Keshav, 2004).

2.3.4. Terapi Farmakologi Ulkus Peptikum

2.3.4.1 Antagonis Reseptor H2

Antagonis Reseptor H2 mengurangi sekresi asam lambung dengan cara

berkompetisi dengan histamin untuk berikatan dengan reseptor H2 pada sel parietal

lambung. Bila histamin berikatan dengan H2 maka akan dihasilkan asam. Dengan

diblokirnya tempat ikatan antara histamin dan reseptor digantikan dengan obat-obat

ini, maka asam tidak akan dihasilkan. Efek samping obat golongan ini yaitu diare, sakit

kepala, kantuk, lesu, sakit pada otot dan konstipasi (Berardy and Lynda, 2005).

Contoh obat seperti Simetidin, Ranitidine, Famotidin, Nizatidin (Lacy et al, 2008).

Kemampuan antagonis reseptor H2 menurunkan asam lambung disamping dengan

toksisitas rendah merupakan kemajuan dalam pengobatan penyakit. Hasil dari

12

beberapa uji klinik menunjukkan obat-obat ini dapat menjaga gejala dengan efektif

selama episode akut dan mempercepat penyembuhan ulkus duodenal (Ghosh dan

Kinnear, 2003).

2.3.4.2 PPI (Proton Pump Inhibitor)

Mekanisme kerja PPI adalah memblokir kerja enzim KH ATPase yang akan

memecah KH ATP akan menghasilkan energi yang digunakan untuk mengeluarkan

asam dari kanalikuli serta parietal ke dalam lumen lambung. Pemakaian jangka

panjang dapat menimbulkan kenaikan gastrin darah dan dapat menimbulkan tumor

karsinoid pada tikus percobaan. Pada manusia belum terbukti gangguan

keamanannya pada pemakaian jangka panjang (Tarigan, 2009). Penghambat pompa

proton dimetabolisme dihati dan dieliminasi di ginjal. Dengan pengecualian penderita

disfungsi hati berat, tanpa penyesuaian dosis pada penyakit liverdan penyakit ginjal.

Dosis Omeprazol 20-40 mg/hr, Lansoprazol 15-30 mg/hr, Rabeprazol 20 mg/hr,

Pantoprazol 40 mg/hr dan Esomeprazol 20-40 mg/hr (Lacyet al, 2008). Inhibitor

pompa proton memiliki efek yang sangat besar terhadap produksi asam. Omeprazol

juga secara selektif menghambat karbonat anhidrase mukosa lambung, yang

kemungkinan turut berkontribusi terhadap sifat suspensi asamnya (Parischa

danHoogerwefh, 2008). Efek samping obat golongan ini jarang, meliputi sakit kepala,

diare, konstipasi, muntah, dan ruam merah pada kulit. Ibu hamil dan menyusui

sebaiknya menghindari penggunaan PPI (Lacyet al, 2008).

2.3.4.3 Analog Prostaglandin: Misoprostol

Mekanisme kerja mengurangi sekresi asam lambung, menambah sekresi

mukus, sekresi bikarbonat dan meningkatkan aliran darah mukosa. Biasanya

13

digunakan sebagai penangkal terjadinya ulkus peptikum pada pasien yang

menggunakan OAINS. Dosis 4 x 200mg atau 2 x 400 mg pagi dan malam hari. Efek

samping diare, mual, muntah, dan menimbulkan kontraksi otot uterus sehingga tidak

dianjurkan pada wanita yang bakal hamil (Tarigan, 2006). Misoprostol dapat

menyebabkan eksaserbasi klinis (kondisi penyakit bertambah parah) pada pasien

yang menderita penyakit radang usus, sehingga pemakaiannya harus dihindari pada

pasien ini. Misoprostol dikontraindikasikan selama kehamilan, karena dapat

menyebabkan aborsi akibat terjadinya peningkatan kontraktilitas uterus. Sekarang ini

misoprostol telah disetujui penggunaannya oleh United States Food and Drug

Administration (FDA) untuk pencegahan luka mukosa akibat NSAID (Parischa dan

Hoogerwefh, 2008).

2.4. Non-Steroid Anti-Inflammatory Drugs (NSAIDs)

2.4.1. Definisi dan Pembagian NSAIDs

Obat anti inflamasi non-steroid atau OAINS merupakan obat dengan sediaan

yang peresepannya paling luas, obat ini banyak digunakan untuk kasus-kasus nyeri

inflamasi karena efeknya adalah mengurangi rasa nyeri dari tingkat ringan sampai

sedang. OAINS mengandung bahan aktif yang secara farmakologi tidak homogen dan

terutama bekerja menghambat produksi prostaglandin (Sala et al., 2009). Umumnya

OAINS dibagi berdasarkan struktur kimia, waktu paruh plasma dan selektifitas

terhadap COX-1 dan COX-2. Sebagian besar OAINS dengan berapapun jumlah

dosisnya, akan diabsorpsi di traktus gastrointestinal dan 90% obat akan berikatan

dengan protein plasma, apabila protein plasma mengalami saturasi dengan obat,

14

konsentrasi obat yang aktif meningkat dengan cepat dibandingkan total kosentrasi

obat. NSAIDs dimetabolisme di hati sedangkan metabolit inaktif dikeluarkan lewat

empedu dan urin. Klasifikasi NSAIDs secara lengkap tampak pada Tabel 2.1

Tabel 2.1 Klasifikasi NSAIDs (IRA, 2014)

Obat Waktu konsentrasi puncak ( jam )

Waktu paruh ( jam)

Dosis Selektivitas

Salisilat

Asipirin 0,5 – 1 0,3 Q 4-6 jam COX1=COX2

Diflunisal 2-3 12 Q 8-12 TAD

Asam asetat

Indometasin 1.5 2.5 Q 12 jam COX1>COX2

Sulindac 8 13 Q 12 jam Tad

Etodolac 1 7 Q 6-8 jam COX1

15

Nabumetone 4-5 24 Q 12-24

jam

COX1=COX2

Coxib

Celecoxib 2-3 11 Q 12-24

jam

COX1

16

kedua isoform COX-1 dan COX-2, sehingga efek sampingnya pada gastrointestinal

meningkat dan salah satunya menyebabkan ulkus peptikum. (IRA, 2014)

2.4.3. Efek Samping

Pemakaian OAINS sering kali menimbulkan efek yang tidak diinginkan pada

gastro intestinal karena mempunyai efek secara langsung yang mana secara alamiah

obat ini merupakan bahan asam dan juga efek sistemik yang dapat menghambat

sekresi mukus, bikarbonat dan prostaglandin. Efek samping berupa lesi pada

gastrointestinal bagian atas baik peradangan maupun ulkus adalah komplikasi yang

paling sering dijumpai pada penggunaan OAINS yang dimungkinkan karena

hambatan terhadap COX-1. (IRA, 2014).

Tabel 2.2 Pengaruh NSAID (Non-Steroid Anti Inflammatory Drug) selektif dan non-selektif terhadap sistem organ (IRA, 2014)

Sistem organ NSAID non

selektif

Selektif COX 2

Gastrointestinal Dispepsia + ↓

Ulkus GI + ↓

Kolitis + ↓

Pendarahan + ↓

Renal Hipertensi + +

Retensi cairan dan

garam

+ +

Nefritis interstisial + +

Nekrosis papilaris + +

Gagal ginjal akut + +

Hepar Peningkatan serum

transaminase

+ +

Paru Serangan asma + +

17

2.5. Sargassum sp.

Rumput laut adalah makro alga yang hidup di laut maupun di air payau.

Berdasarkan identifikasi penelitian terdapat sekitar 555 jenis rumput laut yang tumbuh

di perairan Indonesia. Salah satu jenis alga yang banyak terdapat di Indonesia adalah

jenis alga cokelat (Putri, 2011). Sargassum sp. adalah salah satu genus dari kelompok

rumput laut cokelat yang merupakan genera terbesar dari famili Sargassaceae

(Sugiono et al., 2014).

Sargassum sp. mengandung natrium alginat (Na-alginat), laminarin, fucoidan,

selulosa, manitol dan mengandung antioksidan (polifenol), zat besi, iodium, vitamin C

dan mineral seperti Ca, K, Mg, Na, Fe, Cu, Zn, S, P, Mn serta mineral-mineral lainnya.

Kandungan gizi per 2gram bubuk kering Sargassum sp. adalah karbohidrat 17,835 %,

protein 0,776 %, dan polifenol 24,58 % (491,5 mg). Selain itu Sargassum sp juga

mengandung senyawa fitokimia seperti flavanoid, triterpenoid, tanin dan saponin yang

dipercaya dapat dimanfaatkan sebagai bahan pengobatan herbal (Putri, 2011).

Kemampuan Sargassum sp. sebagai obat berhubungan dengan bidang

farmakologi disebabkan adanya kandungan senyawa metabolit sekunder. Metabolit

sekunder merupakan bioactive substances yang dikembangkan melalui berbagai

penelitian untuk dijadikan obat alternatif. Studi Zhang dan kawan-kawan pada 2012

menyatakan bahwa Sargassum memiliki efek terhadap system imun dan aktivitas

antioksidan. Sargassum terbukti memiliki efek proteksi terhadap interleukin-2 (IL-2),

Kulit Alergi sulfa - + ( celecoxib)

Kardiovaskular Trombosis - +

Sistem Saraf pusat Vertigo + +

Disfungsi kognitif - +

18

interleukin-4 (IL-4), interleukin-10 (IL-10), menormalkan aktivtas enzim antioksidan,

serta menghambat lipid peroxidation pada mukosa lambung (Zhang et al., 2012).

Studi lain menyatakan Sargassum sp. mengandung agen yang memiliki efek anti-

ulcer, dengan cara menjaga volume serta keasaman dari cairan lambung, dan

meningkatkan system pertahanan antioksidan mukosa lambung pada model hewan

coba gastritis menggunakan ethanol (Raghavendran et al., 2004). Studi dari Mori dan

kolega menyatakan bahwa efek anti ulkus yang dimiliki oleh Sargassum, dicapai

melalui pembentukan prostaglandin endogen (Mori et al., 2006).

19

BAB 3

KERANGKA KONSEP DAN HIPOTESIS PENELITIAN

3.1 Kerangka Konsep Penelitian

Gambar 3.1 Skema Cara Kerja Ekstrak Sargassum sp. dalam Menghambat Ulkus Peptikum

20

Pada penelitian ini, tikus akan diberi Indometasin yang merupakan NSAID non

selektif. Indometasin memiliki kemampuan untuk menghambat enzim siklooksigenase

(COX). Terdapat dua jenis COX yang dihambat oleh NSAID yaitu COX-1 dan COX-2.

Hambatan pada COX-1 dan COX-2 merupakan mekanisme utama penghambatan

pembentukan prostaglandin (PG). Penghambatan jalur COX yang tidak spesifik,

penghambatan padai COX-1 dan COX-2, menyebabkan penurunan produksi

prostaglandin (PG) terutama diakibatkan oleh hambatan pada COX-1. Prostaglandin

dari COX-1 memberikan efek gastroprotektif pada lambung. Hilangnya prostaglandin

menyebabkan hilangnya perlindungan mukosa lambung dari asam lambung.

Hambatan pada jalur COX-2 berperan dalam meningkatkan radikal bebas dan

mendorong terjadinya inflamasi. Hambatan pada COX-1 dan COX-2 menyebabkan

keseimbangan enzim sikloksigenase menjadi terganggu dan menyebabkan

peningkatan pada efek ulcerogenic gaster (IRA, 2014). NSAIDs juga menyebabkan

hipermotilitas pada lambung yang akan berujung pada kerusakan mukosa lambung.

Kerusakan mukosa lambung yang terus menerus dapat berkembang menjadi ulkus

gaster. Ulkus gaster dapat menyebabkan munculnya bitnik-bintik perdarahan yang

selanjutnya akan tampak pada analisa makroskopis.

Ekstrak alga cokelat Sargassum sp diketahui mengandung zat aktif seperti

fucoidan, flavonoid, dan plastoquion yang mampu meningkatkan kadar prostaglandin

dan menurunkan radikal bebas (Zhang et al., 2012). Pada penelitian ini, akan melihat

efek pemberian ekstrak alga cokelat Sargassum sp sebagai pencegahan ulkus

peptikum yang dilihat dari skor integritas mukosa lambung pada tikus.

21

3.2 Hipotesis Penelitian

Pemberian ekstrak alga cokelat (Sargassum sp.) dapat menurunkan skor

integritas mukosa lambung yang diamati secara mikroskopis pada lambung tikus

Rattus novergicuss strain wistar model ulkus peptikum yang telah diinduksi

indometasin.

22

BAB 4

METODE PENELITIAN

4.1. Desain Penelitian

4.1.1. Studi In Vivo

Rancangan penelitian ini merupakan Randomized Pre-Clinical Trial yang

bersifat eksperimen murni (true experimental design) di laboratorium secara in vivo

dengan rancangan Randomized Post Test Only Controlled Group Design.

4.2. Subjek Penelitian

4.2.1. Populasi dan Sampel Penelitian

Populasi penelitian ini adalah tikus putih (Rattus noverrgicus) yang didapatkan

dari Laboratorium Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya yang

memenuhi kriteria inklusi dan eksklusi. Sampel penelitian adalah 30 ekor tikus (Rattus

novergicus) dengan kriteria inklusi:

a. Jenis kelamin : jantan

b. Usia : 2-3 bulan

c. Berat badan : 150-200 gram

d. Kondisi sehat yang ditandai dengan gerakannya yang aktif dan bulu

yang halus

23

Kriteria eksklusi :

a. Tikus yang selama penelitian tidak mau makan

b. Tikus yang kondisinya menurun atau mati selama penelitian

berlangsung

c. Tikus sakit selama penelitian berlangsung

Cara pengambilan sampel dengan metode simple random sampling (sampel

diambil random) dari populasi yang kemudian dikelompokkan kedalam masing-

masing kelompok kontrol dan perlakuan.

4.2.2. Perhitungan Besar Subjek Penelitian

Perhitungan besarnya pengulangan pada sampel adalah sebagai berikut

(Federer, 2012):

(t-1) (r-1) 15

t: jumlah perlakuan, r: jumlah ulangan

Pada penelitian ini t = 6 sehingga jumlah pengulangan adalah:

(6-1) (r-1) 15

r-1 3

r 4

jadi dalam penelitian ini jumlah sampel tiap perlakuan adalah 4

Berdasarkan perhitungan, sampel penelitian ini berjumlah 24 ekor tikus yang

dibagi menjadi 6 kelompok perlakuan sehingga setiap kelompok berisikan 4 ekor tikus.

Dilakukan penambahan 1 ekor dari jumlah minimal pengulangan sebagai cadangan

24

apabila terjadi hal-hal yang tidak diinginkan selama penelitian berlangsung. Sehingga

total sampel penelitian ini berjumlah 30 ekor tikus yang dibagi menjadi 5 kelompok

perlakuan sehingga jumlah tikus setiap kelompok berisikan 5 ekor tikus.

4.3. Tempat dan Waktu Pelaksanaan Penelitian

Penelitian ini dilaksanakan pada bulan September 2017 sampai Oktober 2017 di

Laboratorium Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya Malang.

4.4 Variabel Penelitian

4.4.1 Variabel Bebas

Variabel bebas dalam penelitian ini adalah ekstrak alga cokelat (Sargassum

sp).

4.4.2 Variabel Tergantung

Variabel tergantung pada penelitian ini adalah skor integritas mukosa lambung

tikus yang damati secara mikroskopis lambung tikus.

4.5 Definisi Operasional

4.5.1 Indometasin

Indometasin adalah obat golongan Non-Steroid Antiinflammatory Drugs

(NSAIDs) yang digunakan sebagai inducer perdarahan pada lambung tikus dengan

25

dosis 30mg/kgBB (Purnamawati, 2009). Indometasin dengan merek SIGMA,

disediakan di Laboratorium Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya.

4.5.2 Alga Cokelat (Sargassum sp.)

4.5.2.1 Alga Cokelat

Alga cokelat yang digunakan pada penelitian ini adalah jenis Sargassum sp

yang dihasilkan oleh para petani di Madura.

4.5.2.2 Ekstrak Alga Cokelat

Proses ekstraksi alga cokelat diawali dengan pengeringan dan penggilingan.

Setelah itu bubuk alga akan dicampur dengan larutan MeOH-CHCl3-H2O (4:2:1).

Proses dilanjutkan dengan melarutkan alga dengan HCl dan ultasonic extraction

(amplitudo 80%, 15 menit). Lalu dilakukan ekstraksi menggunakan waterbath pada

suhu 7090°C selama 3-5 jam. Proses selanjutnya adalah filtrasi dan presipitasi

dengan 1 M CaCl2 pada suhu 4°C semalaman. Larutan difiltrasi kemudian

dicampurkan dengan etanol absolut (3 volume) pada suhu 4°C selama 8 jam. Pada

tahapan akhir ekstrak kemudian dilakukan sentrifugasi (8500 rpm, 15 menit) pada

suhu 4°C.

4.5.3 Tikus Model Gastritis

Tikus yang digunakan adalah tikus putih (Rattus novergicus) galur wistar

dengan berat 150-200gram yang dibuat model ulkus dengan diinduksi indometasin

per oral dengan dosis 30 mg/kgBB.

26

4.5.4 Gambaran Pendarahan Secara Mikroskopis

Pengukuran hasil gambaran mikroskopis berupa kedalaman ulkus adalah

kerusakan yang terjadi mulai dari diinduksinya indometasin sampai diberikannya

Sargassum sp., kemudian dilakukan pembedahan, pengecatan HE, dan diamati

secara histopatologi, klasifikasi dari kerusakan sel adalah:

a. Ulserasi epitel mukosa lambung

Disebut ulserasi jika terdapat gap > 10 sel epitel pada lesi mukosa tiap

lapang pandang berdasarkan dengan skoring modifikasi skor integritas

epitel Barthel Manja. Diamati sebanyak 5 lapang pandang secara random

pada perbesaran mikroskop 400x.

b. Erosi permukaan epitel mukosa lambung

Disebut sebagai erosi jika terdapat gap 1-10 sel epitel pada lesi mukosa

tiap lapang pandang berdasarkan dengan skoring modifikasi skor

integritas epitel Barthel Manja. Diamati sebanyak 5 lapang pandang

secara random pada perbesaran mikroskop 400x.

c. Deskuamasi epitel

Jika terjadi kerusakan atau pengangkatan sedikit pada sel epitel mukosa

lambung berdasarkan dengan skoring modifikasi skor integritas epitel

Barthel Manja. Diamati sebanyak 5 lapang pandang secara random pada

perbesaran mikroskop 400x.

27

4.6 Alat dan Bahan Penelitian

4.6.1 Bahan Penelitian

4.6.1.1 Bahan untuk Pemeliharaan Hewan Coba

Bahan yang digunakan selama pemeliharaan Rattus novergicus strain wistar

adalah:

a. Sekam

b. Makanan tikus, makanan standar berupa campuran dari makanan ayam

jenis BK 1 dan tepung terigu dengan perbandingan 2:1 kemudian dibuat

pelet.

4.6.1.2 Bahan untuk Perlakuan Hewan Coba

Bahan yang digunakan selama perlakuan pada Rattus novergicus strain

wistar adalah:

a. Indometacin 30mg/KgBB

b. Aquades sebagai Pelarut Indometasin

c. Ekstrak Sargassum sp. 150 mg/KgBB, 300 mg/KgBB, dan 600 mg/KgBB

d. Misoprostol 90 mcg/KgBB

e. Aquades

4.6.1.3 Bahan Untuk Pengambilan Organ

a. Air untuk mencuci kotoran

4.6.1.4 Bahan untuk Pembuatan Preparat

a. Lambung Tikus

b. Formalin 10%

28

c. Alkohol 80%, 95%, 96%, dan 100%

d. Alkohol asam

e. Parafin

f. Xylol

g. Counter staining

h. Canadian balsem atau Entellan

i. Putih telur

j. Air

k. Cat Hematoksilin-Eosin (Haris Hematoxilen)

4.6.2 Alat Penelitian

4.6.2.1 Alat Untuk Pemeliharaan Hewan Coba

a. Kandang tikus berupa kotak plastik yang diisi sekam dan ditutup dengan

kawat. Ukuran kandang 15cm x 30cm x 42 cm, masing-masing kandang

berisi 5 ekor tikus

b. Wadah air minum tikus

c. Spidol untuk memberi identitas pada tikus

4.6.2.2 Alat Untuk Penimbangan Berat Badan Hewan Coba

a. Timbangan

4.6.2.3 Alat Untuk Pemberian Indometasin, Ekstrak Sargassum sp, dan

Misoprostol

a. Sonde

b. Spuit 1 cc

c. Spuit 3 cc

29

4.6.2.4 Alat untuk Pengambilan Organ

a. Handscoon

b. Papan dan nampan bedah

c. Alat bedah minor berupa: pinset, pisau bedah (scaple), gunting

d. Tempat organ berupa tabung plastik untuk pemeriksaan histopatologi

4.6.2.5 Alat untuk Pembuatan Preparat

a. Rotatory microtome

b. Object glass

c. Cover glass

4.6.2.6 Alat Penilaian Mikroskopis Lesi Mukosa Lambung Tikus

a. Mikroskop cahaya

b. Minyak imersi

c. Camera digital

d. Software komputer untuk pengambilan gambar

e. Alat tulis

4.7 Prosedur Penelitian

4.7.1 Pembuatan Model Hewan Gastritis

a. Tikus dipuaskan sehari, kemudian diinduksi indometasin 30mg/kgBB per

oral (Purnamawati, 2009)

b. Setelah 8 jam pasca induksi indometasin, dilakukan pembedahan.

c. Hasil lambung yang dibedah segera diamati secara mikroskopis.

30

4.7.2 Pemberian Ekstrak Alga Cokelat dan Pembedahan Kelompok Perlakuan

Pemberian ekstrak Sargassum sp dilakukan per oral dengan menggunakan

sonde. Diberikan pada kelompok hewan D1, D2, D3 secara berurutan sebanyak 150

mg/kgbb, 300 mg/kgbb, dan 600 mg/kgbb selama 3 hari dan 1 jam sebelum induksi

indometasin.

4.7.3 Prosedur Pembuatan Preparat Histopatologi

Metode teknik pembuatan preparat histopatologi (Muhartono, 2013)

1. Organ lambung yang telah diambil dan sudah difiksasi formalin 10% 3 jam

kemudian dipotong secara representatif (perwakilan jaringan lambung tikus

dari masing-masing kelompok)

2. Bilas organ tersebut dengan air mengalir sebanyak 3-5 kali

3. Dehidrasi organ lambung dengan: alkohol 70% selama 0,5 jam, alkohol

absolut selama 1 jam, alkohol absolut selama 1 jam, alkohol absolut selama

1 jam, alkohol xylol 1:1 selama 0,5 jam

4. Clearing: xylol selama 1 jam, xylol selama 1 jam

5. Impregnansi dengan parafin selama 1 jam dalam oven suhu 65° C

6. Blok parafin didingingkan dalam lemari es sebelum dipotong, pemotongan

menggunakan rotary microtome dengan menggunakan disposale knife, Pita

parafin dimekarkan pada waterbath dengan suhu 60° C

7. Setelah preparat jadi, kemudian dilakukan pengecatan jaringan lambung

tikus menggunakan pewarna Hematoxylin Eosin (HE)

8. Prosedur pulasan HE:

31

a. Dilakukan deparafinisasi dalam alrutan xylol selama 5 menit, larutan

xylol selama 5 menit, etanol absolut selama 1 jam

b. Hydrasi dalam alkohol 96% selama 2 menit, alkohol 70% selama 2

menit, air selama 10 menit

c. Pulasan inti dengan haris hematoksilin selama 15 menit, air mengalir,

eosin selama maksimal 1 menit

d. Dehidrasi: alkohol 70% selama 2 menit, xylol selama 2 menit, Mounting

dengan entelan dan tutup dengan deck glass.

4.7.4 Identifikasi Lesi Mukosa Lambung secara Histopatologis

Pengamatan dan pengumpulan data dilakukan dengan mengamati dibawah

mikroskop terhadap 30 preparat histopatologi mukosa lambung tikus dengan

pembesaran 400x. Setiap preparat dipilih 6 lapang pandang untuk dilihat integritas

epitelnya berdasarkan modifikasi skor integritas sel epitel Barthel Manja (Manja,

2003). Lapangan pandang dipilih secara random.

4.7.5 Persiapan Hewan Coba

4.7.5.1 Sebelum Penelitian

1. Hewan coba diseleksi sesuai dengan kriteria inklusi yang telah ditentukan.

2. Persiapan pemeliharaan hewan coba mulai dari kandang yang sudah

dibersihkan, rak tempat kandang yang sudah dibersihkan, anyaman kawat,

sekam, botol minum yang tidak bocor, timbangan dalam gram, wadah

makanan minum dan pekan.

3. Hewan coba diadaptasikan di Laboratorium Farmakologi Fakultas

Kedokteran Universitas Brawijaya selama 7 hari.

32

4. Masing-masing kandang berisi 6 ekor hewan coba dalam keadaan

kandang bersih dan penggantian sekam dilakukan 3 hari sekali.

5. Hewan coba tikus putih diberi makan dan minum sesuai dengan standart

laboratorium, kemudian dilakukan juga penimbangan berat badan diawal

dan diakhir adaptasi untuk mengetahui adanya kenaikan atau penurunan

berat badan sebagai standar pemberian ekstrak alga cokelat dan

indometasin.

4.7.5.2 Selama Penelitian

Setelah diadaptasikan selama 7 hari, tikus pada perlakuan control negatif tetap

diberi makan dan minum sesuai dengan standar laboratorium. Untuk tikus pada

kelompok D1, D2, dan D3 masing-masing akan diberikan ekstrak alga cokelat per oral

dengan dosis 150 mg/kgbb, 300 mg/kgbb, dan 600 mg/kgbb selama 4 hari. Satu jam

kemudian pada kelompok control positif dan kelompok D1, D2, dan D3 akan diinduksi

indometasin per oral pada hari ke empat.

Pembedahan dilakukan 8 jam setelah pemberian indometasin. Prosedur ini

diawali dengan dilakukannya dislokasi cervical pada tikus oleh orang yang telah

berpengalaman. Setelah itu, pengambilan organ lambung yang telah dicuci dengan

NaCl0,9% untuk menghilangkan kotoran atau darah yang tersisa.

4.7.5.3 Sesudah Penelitian

1. Pembedahan dilakukan pada hari ke-4 atau setelah 8 jam induksi

indometasin. Prosedur ini diawali dengan dilakukannya dislokasi cervical

pada tikus oleh orang yang telah berpengalaman.

33

2. Pengambilan organ lambung yang telah dicuci dengan NaCl0,9% untuk

menghilangkan kotoran atau darah yang tersisa

3. Tubuh tikus yang tersisa dibersihkan dan dikubur dengan baik.

4. Alat-alat yang digunakan dicuci dengan sabun, dan dikeringkan.

4.8 Alur Penelitian dan Pengumpulan Data

Telah ditentukan bahwa dosis Indometasin adalah 30 mg/kgBB dan dosis ekstrak

alga cokelat adalah 150 mg/kgBB, 300 mg/kgBB, dan 600 mg/kgBB, serta misoprostol

90mcg/KgBB. Sampel Penelitian dibagi dalam 6 perlakuan yaitu:

A. Kelompok 1, yaitu kelompok kontrol negatif: tidak diinduksi indometasin

maupun diberi ekstrak alga cokelat.

B. Kelompok 2, yaitu kelompok kontrol positif: diinduksi indometasin 30 mg/kgbb

tanpa tanpa ekstrak alga cokelat.

C. Kelompok 3, yaitu kelompok dosis 1: diberi ekstrak alga cokelat dosis 1 yaitu

150 mg/kgbb selama 4 hari, kemudian diinduksi indometasin 30 mg/kgbb satu

jam kemudian.

D. Kelompok 4, yaitu kelompok dosis 2: diberi ekstrak alga cokelat dosis 2 yaitu

300 mg/kgbb selama 4 hari, kemudian diinduksi indometasin 30 mg/kgbb satu

jam kemudian.

E. Kelompok 5, yaitu kelompok dosis 3: diberi ekstrak alga cokelat dosis 3 yaitu

600 mg/kgbb selama 4 hari, kemudian diinduksi indometasin 30 mg/kgbb satu

jam kemudian.

34

F. Kelompok misoprostol: diberi misoprostol 90mcg/KgBB selama 4 hari,

kemudian diinduksi indometasin 30 mg/kgbb satu jam kemudian.

4.8.1 Alur Penelitian

Gambar 4.1 Skema Alur Penelitian

35

4.8.2 Teknik Pengumpulan Data

Data dikumpulkan dalam bentuk rerata skor integritas mukosa lambung yang

didapatkan dari sampel yang dibagi menjadi 6 kelompok yaitu 1 kelompok kontrol

negatif (tikus sehat dan tidak diberi perlakuan), 1 kelompok kontrol positif (tikus hanya

diinduksi indometasin 30 mg/kgBB), 3 kelompok perlakuan (tikus diberikan ekstrak

Alga cokelat dengan dosis 150mg/kgBB, 300mg/kgBB, dan 600mg/kgBB setelah

diinduksi indometasin 30mg/kgBB), dan 1 kelompok misoprostol. Pengamatan

penurunan skor perdarahan secara mikroskopis dilakukan sesudah pemberian

perlakuan, kemudian melakukan analisa data.

4.9 Analisis Data

Rancangan pada penelitian ini menggunakan “The Post Test Control Group

Design” dimana pengukuran hanya dilakukan setelah pemberian perlakuan selesai

karena penilaian mikroskopis skor integritas mukosa lambung pada tikus hanya

mungkin dilakukan pada hewan coba yang sudah dibedah (dimatikan dulu).

Perhitungan skor integritas mukosa lambung didasarkan pada keberadaan kelompok

kontrol negatif sebagai kelompok yang menggambarkan kondisi lambung normal

(tanpa kerusakan pada mukosa).

Data yang diperoleh pada penelitian ini adalah data skor integritas mukosa

lambung tikus secara mikroskopis pada masing-masing kelompok perlakuan. Data

hasil penelitian tersebut akan diuji normalitas data dengan Kolmogorov Smirnov (nilai

P>0.05 merepresentasikan data normal) dan homogenitas data dengan Levenne

36

statistik (nilai P

37

4.10 Jadwal Kegiatan

Berikut adalah jadwal kegiatan penelitian ini :

Tabel 4.1 Jadwal Penelitian

No Kegiatan Bulan1 Bulan2

1 2 3 4 1 2 3 4

Tahap Persiapan

1. Mengurus ethical clearance

2. Mengurus perijinan laboratorium

3. Belanja alat dan bahan penelitian

4. Aklimatisasi Tikus

5 Pembuatan ekstrak kasar Sargassum sp

Tahap Pelaksanaan

1. Pemberian ekstrak kasar Sargassum

2. Penginduksian indometasin

5. Pembedahan tikus

Tahap Penyelesaian

1. Analisa data

2. Penyusunan Laporan akhir

38

BAB 5

HASIL PENELITIAN DAN ANALISA DATA

5.1 Hasil Pemeriksaan Mikroskopis (Integritas Sel Epitel) Mukosa Lambung

Tikus

Pada hari keempat setelah dilakukan pembedahan, lambung tikus dicuci dan

dilakukan pembuatan preparat histologi dengan pengecatah HE. Setelah itu dilakukan

pengamatan preparat dibawah mikroskop. Preparat dibagi bedasar perlakuan pada

tikus, yaitu kelompok negatif, kelompok positif, kelompok dosis 1, 2, dan 3, serta

kelompok misoprostol dengan jumlah 5 ekor tiap masing-masing kelompok.

Penilaiaan mikroskopis preparat didasarkan pada modifikasi skoring integritas epitel

Barthel Manja, yang memiliki tingkat kerusakan sel epitel (Manja, 2003) yang masing

masing diamati sebanyak 6 lapang pandang secara random dengan perbesaran 400x.

Berikut tabel modifikasi skoring epittel Barthel Manja.

Tabel 5.1 Tabel Modifikasi Skoring Integritas Mukosa Bedasarkan Skoring Barthel Manja (Manja, 2003)

Skor Integritas Epitel Mukosa

0 Epitel Normal (Tidak Ada Perubahan Patologis)

1 Adanya Deskuamasi Epitel

2 Erosi Permukaan Epitel Mukosa

3 Ulserasi Epitel Mukosa

39

Gambar histopatologi epitel mukosa lambung normal, adanya deskuamasi

epitel, erosi permukaan epitel mukosa, dan ulserasi diilustrasikan pada gambar

berikut.

Keterangan panah :

Sel epitel normal

Deskuamasi epitel

Erosi epitel

Ulserasi epitel

Gambar 5.1 Histopatologi Mukosa Lambung Tikus Rattus Novergicus Strain Wistar pada Perbesaran 400x. (a) kontrol negatif didapatkan sel-sel normal; (b) kontrol positif didapatkan ulserasi, erosi, dan deskuamasi sel epitel; (c) kelompok D1 didapatkan erosi dan deskuamasi sel epitel; (d) kelompok D2 didapatkan deskuamasi dan sel normal;kelompok (e) D3 didapatkan erosi dan deskuamasi; (f) kelompok misoprostol terdapat deskuamasi sel dan erosi.

(a) (b) (c)

(d) (e) (f)

40

Data yang diperoleh pada penelitian ini adalah data skor integritas mukosa

lambung tikus secara mikroskopis pada masing-masing kelompok perlakuan. Data

hasil penelitian tersebut akan diuji normalitas data dengan Kolmogorov Smirnov (nilai

P>0.05 merepresentasikan data normal) dan homogenitas data dengan Levenne

statistik (nilai P

41

5.2 Rata-Rata Skor Integritas Mukosa Lambung Tikus Berdasarkan Ekstrak

Sargassum sp.

Gambar 5.2 Rata Rata Skor Integritas Mukosa Lambung Tikus Bedasarkan

Ekstrak Sargassum sp.

Gambar diatas menginformasikan bahwa kelompok yang diinduksi indometasin

30 mg/KgBB tanpa ekstrak Sargassum sp. (K+) memiliki rata-rata skor integritas

mukosa lambung tikus Rattus norvegicus strain Wistar sebesar 2.067 ± 0.303.

Kelompok yang tidak diinduksi indometasin maupun diberi ekstrak Sargassum sp. (K-

) memiliki rata-rata skor integritas mukosa lambung tikus Rattus norvegicus strain

Wistar sebesar 0.567 ± 0.346. Selanjutnya kelompok yang diinduksi indometasin 30

mg/kgbb dengan ekstrak Sargassum sp. 150 mg/KgBB (D1) memiliki rata-rata skor

integritas mukosa lambung tikus Rattus norvegicus strain Wistar sebesar 1.767 ±

0.418. Kemudian kelompok yang diinduksi indometasin 30 mg/KgBB dengan ekstrak

Sargassum sp. 300 mg/KgBB (D2) memiliki rata-rata skor integritas mukosa lambung

tikus Rattus norvegicus strain Wistar sebesar 1.000 ± 0.391. Berikutnya kelompok

2.067 ± 0.303

0.567 ± 0.346

1.767 ± 0.418

1.000 ± 0.391

1.500 ± 0.4711.633 ± 0.492

0.000

0.500

1.000

1.500

2.000

2.500

K+ K- D1 (150mg/KgBB)

D2 (300mg/KgBB)

D3 (600mg/KgBB)

GS

Sko

r U

lku

s La

mb

un

g

Ekstrak Sargassum sp.

misoprostol

42

yang diinduksi indometasin 30 mg/KgBB dengan ekstrak Sargassum sp. 600

mg/KgBB (D3) memiliki rata-rata skor integritas mukosa lambung tikus Rattus

norvegicus strain Wistar sebesar 1.500 ± 0.471. Kemudian kelompok yang yang

diinduksi indometasin 30 mg/KgBB dengan misoprostol dosis 90 mcg/KgBB memiliki

rata-rata skor integritas mukosa lambung tikus Rattus norvegicus strain Wistar

sebesar 1.633 ± 0.492.

Berdasarkan analisis deskriptif dari keenam perlakuan dapat diketahui bahwa

kelompok yang diinduksi indometasin 30 mg/KgBB tanpa ekstrak Sargassum sp. (K+)

memiliki rata-rata skor integritas mukosa lambung tikus Rattus norvegicus strain

Wistar yang paling tinggi, sedangkan kelompok yang tidak diinduksi indometasin

maupun diberi ekstrak Sargassum sp. (K-) memiliki rata-rata skor integritas mukosa

lambung tikus Rattus norvegicus strain Wistar yang paling rendah. Sementara dari

keempat perlakuan tanpa kontrol dapat diketahui bahwa kelompok yang diinduksi

indometasin 30 mg/KgBB dengan ekstrak Sargassum sp. 300 mg/KgBB (D2) memiliki

rata-rata skor integritas mukosa lambung tikus Rattus norvegicus strain Wistar yang

paling rendah, sedangkan kelompok yang diinduksi indometasin 30 mg/KgBB dengan

ekstrak Sargassum sp. 150 mg/KgBB (D1) memiliki rata-rata skor integritas mukosa

lambung tikus Rattus norvegicus strain Wistar yang paling tinggi.

43

5.3 Pengujian Pengaruh Ekstrak Sargassum sp. Terhadap Skor Integritas

Mukosa Lambung Tikus

5.3.1 Pengujian Kenormalan Residual Pengaruh Ekstrak Sargassum sp.

terhadap Skor Integritas Mukosa Lambung Tikus

Pengujian kenormalan residual pengaruh ekstrak Sargassum sp. terhadap

skor integritas mukosa lambung tikus Rattus norvegicus strain Wistar bertujuan untuk

mengetahui normal tidaknya residual yang dihasilkan dari pengaruh ekstrak

Sargassum sp. terhadap skor integritas mukosa lambung tikus Rattus norvegicus

strain Wistar. Pengujian kenormalan residual dilakukan menggunakan Kolmogorov-

Smirnov, dengan kriteria apabila nilai probabilitas > level of significance (alpha = 5%)

maka residual dinyatakan normal.

Pada pengujian kenormalan residual didapatkan bahwa pengaruh ekstrak

Sargassum sp. terhadap skor integritas mukosa lambung tikus Rattus norvegicus

strain Wistar menghasilkan statistik Kolmogorov-Smirnov sebesar 0.100 dengan

probabilitas sebesar 0.200. Hal ini dapat diketahui bahwa pengujian normalitas

residual pengaruh ekstrak Sargassum sp. terhadap skor integritas mukosa pada

Lambung Tikus Rattus Norvegicus Strain Wistar menghasilkan probabilitas > alpha

(5%), sehingga residual tersebut dinyatakan normal.

5.3.2 Pengujian Homogenitas Residual Pengaruh Ekstrak Sargassum sp.

terhadap Skor Integritas Mukosa Lambung Tikus

Pengujian homogenitas residual pengaruh ekstrak Sargassum sp. terhadap

skor integritas mukosa lambung tikus Rattus norvegicus strain Wistar bertujuan untuk

mengetahui apakah residual memiliki ragam yang homogen atau tidak. Pengujian

44

kehomogenan residual pengaruh ekstrak Sargassum sp. terhadap skor integritas

mukosa pada Lambung Tikus Rattus Norvegicus Strain Wistar dilakukan

menggunakan Levene Test, dengan kriteria apabila nilai probabilitas > level of

significance (alpha = 5%) maka residual dinyatakan homogen.

Pada pengujian kehomogenan residual pengaruh ekstrak Sargassum sp.

terhadap skor integritas mukosa pada Lambung Tikus Rattus Norvegicus Strain

Wistar menghasilkan statistik Levene sebesar 0.185 dengan probabilitas sebesar

0.965. Hal ini dapat diketahui bahwa pengujian residual pengaruh ekstrak Sargassum

sp. terhadap skor integritas mukosa pada lambung tikus Rattus norvegicus Strain

Wistar menghasilkan probabilitas > alpha (5%), sehingga residual tersebut dinyatakan

memiliki ragam yang homogen.

5.3.3 Pengujian Perbedaan Pengaruh Ekstrak Sargassum sp. terhadap Skor

Integritas Mukosa Lambung Tikus

Pengujian perbedaan pengaruh ekstrak Sargassum sp. terhadap skor integritas

mukosa lambung tikus Rattus norvegicus strain Wistar dilakukan menggunakan

Anova dengan hipotesis berikut ini:

H0: Tidak ada perbedaan pengaruh yang signifikan ekstrak Sargassum sp. terhadap

skor integritas mukosa lambung tikus Rattus norvegicus strain Wistar

H1: Minimal ada satu pasang pengaruh ekstrak Sargassum sp. terhadap skor

integritas mukosa lambung tikus Rattus norvegicus strain Wistar yang berbeda

signifikan

Kriteria pengujian menyebutkan apabila probabilitas ≤ level of significance

(alpha = 5%) maka H0 ditolak, sehingga dapat dinyatakan bahwa minimal ada satu

45

pasang ekstrak Sargassum sp. terhadap skor integritas mukosa pada lambung tikus

Rattus norvegicus Strain Wistar yang berbeda signifikan.

Pengujian perbedaan pengaruh ekstrak Sargassum sp. terhadap skor integritas

mukosa lambung tikus Rattus norvegicus strain Wistar menghasilkan statistik uji F

sebesar 8.946 dengan probabilitas sebesar 0.000. Hal ini dapat diketahui bahwa

probabilitas > alpha (5%), sehingga H0 ditolak. Oleh karena itu, dapat dinyatakan

bahwa minimal ada satu pasang pengaruh ekstrak Sargassum sp. terhadap skor

integritas mukosa lambung tikus Rattus norvegicus strain Wistar yang berbeda

signifikan.

Untuk mengetahui pengaruh ekstrak Sargassum sp. terhadap skor integritas

mukosa lambung tikus Rattus norvegicus strain Wistar yang berbeda signifikan

dilakukan menggunakan uji tukey. Hasil uji tukey terhadap perbedaan pengaruh

ekstrak Sargassum sp. terhadap skor integritas mukosa lambung tikus Rattus

norvegicus strain Wistar dapat diketahui melalui tabel berikut ini:

Tabel 5.3 Hasil Uji Tukey Perlakuan Rata-Rata Notasi

K- 0.467 A

D2 (300 mg/KgBB) 1.000 AB

D3 (600 mg/KgBB) 1.500 BC

Misoprostol 1.633 BC

D1 (150 mg/KgBB) 1.767 BC

K+ 2.067 C

46

Gambar 5.3 Rata Rata Skor Integritas Mukosa Lambung Tikus Bedasarkan

Ekstrak Sargassum sp. dengan Notasi Tukey

Hasil analisis di atas menginformasikan bahwa kelompok yang diinduksi

indometasin 30 mg/KgBB tanpa ekstrak Sargassum sp. (K+) memiliki skor integritas

mukosa lambung tikus Rattus norvegicus strain Wistar yang paling tinggi dan berbeda

signifikan dengan kelompok yang tidak diinduksi indometasin maupun diberi ekstrak

Sargassum sp. (K-), dan kelompok yang diinduksi indometasin 30 mg/KgBB dengan

ekstrak Sargassum sp. 300 mg/KgBB (D2). Namun tidak berbeda signifikan dengan

kelompok yang diinduksi indometasin 30 mg/kgbb dengan ekstrak Sargassum sp. 150

mg/KgBB (D1), kelompok yang diinduksi indometasin 30 mg/KgBB dengan ekstrak

Sargassum sp. 600 mg/KgBB (D3), dan kelompok yang yang diinduksi indometasin

30 mg/KgBB dengan misoprostol dosis 90 mcg/KgBB.

2.067 ± 0.303

0.567 ± 0.346

1.767 ± 0.418

1.000 ± 0.391

1.500 ± 0.471

1.633 ± 0.492

0.000

0.500

1.000

1.500

2.000

2.500

K+ K- D1 (150mg/KgBB)

D2 (300mg/KgBB)

D3 (600mg/KgBB)

GS

Sko

r In

tegr

ota

s M

uko

sa L

amb

un

g

Ekstrak Sargassum sp.

(AB)

(BC)

(C)

(A)

(BC)

(BC)

47

Sedangkan kelompok yang tidak diinduksi indometasin maupun diberi ekstrak

Sargassum sp. (K-) memiliki skor integritas mukosa lambung tikus Rattus norvegicus

strain Wistar yang paling rendah dan berbeda signifikan kelompok yang diinduksi

indometasin 30 mg/KgBB tanpa ekstrak Sargassum sp. (K+), kelompok yang diinduksi

indometasin 30 mg/kgbb dengan ekstrak Sargassum sp. 150 mg/KgBB (D1),

kelompok yang diinduksi indometasin 30 mg/KgBB dengan ekstrak Sargassum sp.

600 mg/KgBB (D3), dan kelompok yang yang diinduksi indometasin 30 mg/KgBB

dengan misoprostol dosis 90 mcg/KgBB. Namun tidak berbeda signifikan dengan

kelompok yang diinduksi indometasin 30 mg/KgBB dengan ekstrak Sargassum sp.

300 mg/KgBB (D2).

5.4 Analisis Pengaruh Ekstrak Sargassum sp. terhadap Skor Integritas Mukosa

Lambung Tikus

Analisis pengaruh ekstrak Sargassum sp. terhadap skor integritas mukosa

lambung tikus Rattus norvegicus strain Wistar dilakukan dengan menggunakan

analisis regresi linier sederhana.

5.4.1 Hasil Estimasi Pengaruh Ekstrak Sargassum sp. terhadap Skor Integritas

Mukosa Lambung Tikus

5.4.1.1 Pengujian Koefisien Determinasi

Besarnya kontribusi ekstrak Sargassum sp. terhadap skor integritas mukosa

lambung dapat diketahui melalui koefisien determinasinya (R2) yaitu sebesar 0.010.

Hal ini berarti keragaman skor integritas lambung dapat dijelaskan oleh ekstrak

Sargassum sp. sebesar 1.0% atau dengan kata lain kontribusi ekstrak Sargassum sp.

48

terhadap skor integritas mukosa lambung sebesar 1.0%. Sedangkan sisanya sebesar

99.0% merupakan kontribusi dari variabel lain yang tidak dibahas dalam penelitian ini.

5.4.1.2 Koefisien Korelasi

Koefisien korelasi digunakan untuk mengetahui tingkat keseratan hubungan

dan arah hubungan ekstrak Sargassum sp. dan skor integritas mukosa lambung. Hasil

koefisien korelasi sebesar -0.101 menunjukkan ada hubungan yang lemah antara

ekstrak Sargassum sp. dan skor integritas mukosa lambung dengan arah negatif

(berlawanan). Hal ini berarti semakin tinggi ekstrak Sargassum sp. maka skor

integritas mukosa lambung semakin rendah, dan sebaliknya semakin rendah ekstrak

Sargassum sp. maka skor integritas mukosa lambung semakin tinggi.

5.4.1.3 Pengujian Hipotesis

5.4.1.3.1 Uji Hipotesis Parsial

Pengujian hipotesis parsial digunakan untuk mengetahui ada tidaknya

pengaruh ekstrak Sargassum sp. terhadap skor integritas mukosa lambung. Kriteria

pengujian menyatakan jika nilai thitung ≥ ttabel atau probabilitas < level of significance ()

maka terdapat pengaruh signifikan ekstrak Sargassum sp. terhadap skor integritas

mukosa lambung.

a. Uji Hipotesis Parsial Ekstrak Sargassum sp. terhadap Skor Integritas Mukosa

Lambung

Pengujian hipotesis secara parsial ekstrak Sargassum sp. menghasilkan nilai t

hitung sebesar -0.368 dengan probabilitas sebesar 0.719. Hasil pengujian tersebut

menunjukkan probabilitas > level of significance (=5%). Hal ini berarti tidak terdapat

49

pengaruh yang signifikan ekstrak Sargassum sp. terhadap skor integritas mukosa

lambung.

b. Uji Hipotesis Parsial antara Konstanta terhadap Skor Integritas Mukosa

Lambung

Pengujian hipotesis secara parsial konstanta menghasilkan nilai t hitung sebesar

5.000 dengan probabilitas sebesar 0.004. Hasil pengujian tersebut menunjukkan

probabilitas < level of significance (=5%). Hal ini berarti terdapat pengaruh signifikan

secara parsial konstanta terhadap skor integritas mukosa lambung.

5.4.1.4 Model Empirik Regresi Linier Sederhana

Persamaan regresi dari hasil estimasi analisis regresi linier sederhana adalah:

Gambar 5.4 Persamaan Regresi Linier Sederhana

y = 1.517 – 0.001 XR² = 0.0103

0.000

0.500

1.000

1.500

2.000

2.500

0.0 100.0 200.0 300.0 400.0 500.0 600.0 700.0

Sko

r U

lku

s La

mb

un

g

Ekstrak Sargassum sp.

50

Persamaan ini menunjukkan hal-hal sebagai berikut:

1. Konstanta sebesar 1.517 mengindikasikan bahwa apabila ekstrak Sargassum sp.

bernilai konstan (tidak berubah) maka rata-rata perubahan skor integritas mukosa

lambung sebesar 1.517.

2. Koefisien ekstrak Sargassum sp. sebesar -0.001 mengindikasikan bahwa ekstrak

Sargassum sp. berpengaruh negatif terhadap skor integritas mukosa lambung.

Hal ini berarti setiap peningkatan ekstrak Sargassum sp. sebesar 1 mg/KgBB,

maka akan menurunkan skor integritas mukosa lambung sebesar 0.001.

51

BAB 6

PEMBAHASAN

6.1 Hasil Penelitian

Tujuan dari dilakukannya penelitian ini ialah untuk membuktikan bahwa

adanya efek dari ekstrak Sargassum sp. dalam penurunan kedalaman lesi mukosa

lambung tikus Rattus norvegicus strain wistar yang diinduksi dengan indometasin

yang diamati secara mikroskopis. Dalam penelitian yang telah ada, Sargassum sp.

terbukti mengandung agen yang memiliki efek anti-ulcer, dengan cara menjaga

volume serta keasaman dari cairan lambung, dan meningkatkan system pertahanan

antioksidan mukosa lambung pada model hewan coba gastritis menggunakan

ethanol. Maka dari itu dalam penelitian ini digunakan indometasin sebagai agen

pembentuk ulcer, dan diperlukan beberapa dosis untuk mengetahui keoptimalan dari

manfaat Sargassum sp.

Salah satu faktor dari ulkus peptikum ialah obat golongan NSAID (Non-Steroid

Anti-Inflammatory Drugs), yaitu obat dimana titik kerja dengan cara menghambat

enzim siklooksigenasi (COX) yang meninmbulakn terganggunya pembentukan dari

prostaglandin (PG). Enzim COX memiliki 2 bentuk rantai, yaitu COX1 dan COX2.

COX1 memiliki efek negatif pada mukosa lambung, dimana menyebabkan penurunan

terhadap proteksi mukosa lambung. Sehingga menimbulkan inflamasi dilambuna,

selain itu hal ini merupakan salah satu patogenesis dari ulkus peptikum itu sendiri.

(Matsui et al, 2011; Katzung, 2011; Zorofchian et al, 2014).

52

Sargassum mengandung agen yang memiliki efek anti-ulcer, dengan cara

menjaga volume serta keasaman dari cairan lambung, dan meningkatkan system

pertahanan antioksidan mukosa lambung pada model hewan coba gastritis

menggunakan ethanol. (Raghavendran et al., 2004). Studi dari Mori dan kolega

menyatakan bahwa efek anti ulkus yang dimiliki oleh Sargassum, dicapai melalui

pembentukan prostaglandin endogen (Mori et al., 2006).

Dalam penelitian ini menggunakan tikus Rattus norvegicus strain wistar

merupakan subjek hewan coba. Digunakan 30 ekor tikus yang dibagi dalam 6

kelompok. Kelompok penelitian eksperimental yang dibentuk adalah kelompok kontrol

positif, kelompok kontrol negatif, kelompok dosis 1 (dengan pemberian dosis ekstrak

Sargassum sp. 150mg/KgBB), kelompok dosis 2 (dengan pemberian dosis ekstrak

Sargassum sp. 300mg/KgBB), kelompok dosis 3 (dengan pemberian dosis ekstrak

Sargassum sp. 600mg/KgBB), dan kelompok dengan menggunakan gold standard

pengobatan ulkus peptikum. Pembagian dosis pada kelompok dosis 1,2, dan 3

didasarkan dari penelitian yang yang telah ada sebelumnya dimana digunakan dosis

200mg/KgBB, 400mg/KgBB, dan 800mg/KgBB sebagai anticancer pada lambung

tikus.

Dosis Sargassum sp. yang diinduksikan pada tikus merupakan variabel bebas

atau independen dari penelitian ini, sedangkan skor integritas epitel mukosa lambung

tikus merupakan variable tergantung atau dependen. Pada perlakuan hewan coba

pemberian indometasin dan ekstrak Sargassum sp. diberikan secara peroral (sonde),

sehingga indometasin yang dapat terserap oleh pencernaan tikus (khususnya di

lambung) sekitar lebih dari 87%, sehingga untuk mengetahui kadar optimal

53

indometasin yang dapat diserap oleh lambung tikus, sebelum pemberian indometasin

tikus dipuasakan dengan tujuan untuk mengosongkan lambung tikus sehingga

ekskresi asam klorida (HCl) dapat tereksresi maksimal.

Hasil penelitian menunjukkan rata-rata dari tiap kelompok. Berdasarkan analisis

deskriptif dari keenam perlakuan dapat diketahui bahwa kelompok yang diinduksi

indometasin 30 mg/KgBB tanpa ekstrak Sargassum sp. (K+) memiliki rata-rata skor

integritas mukosa lambung tikus yang paling tinggi, sedangkan kelompok yang tidak

diinduksi indometasin maupun diberi ekstrak Sargassum sp. (K-) memiliki rata-rata

skor integritas mukosa lambung tikus yang paling rendah. Sementara dari keempat

perlakuan tanpa control dapat diketahui bahwa kelompok yang diinduksi indometasin

30 mg/KgBB dengan ekstrak Sargassum sp. 300 mg/KgBB (D2) memiliki rata-rata

skor integritas mukosa lambung tikus yang paling rendah, sedangkan kelompok yang

diinduksi indometasin 30 mg/KgBB dengan ekstrak Sargassum sp. 150 mg/KgBB (D1)

memiliki rata-rata skor integritas mukosa lambung tikus yang paling tinggi. Hal ini

menunjukkan bahwa pemberian dosis Sargassum sp. 300 mg/KgBB dapat

memberikan efek yang signifikan terhadap penurunan skor integritas mukosa

lambung tikus sehingga mendekati nilai kontrol negatif.

Kemudian dilakukan uji koefisien korelasi untuk mengetahui tingkat keeratan

hubungan dan arah hubungan ekstrak Sargassum sp. dan skor integritas mukosa

lambung. Hasil koefisien korelasi sebesar -0.101 menunjukkan ada hubungan yang

lemah antara ekstrak Sargassum sp. dan skor integritas mukosa lambung dengan

arah negatif (berlawanan). Hal ini berarti semakin tinggi ekstrak Sargassum sp. maka

skor integritas mukosa lambung semakin rendah, dan sebaliknya semakin rendah

54

ekstrak Sargassum sp. maka skor integritas mukosa lambung semakin tinggi.

Pengujian hipotesis secara parsial ekstrak Sargassum sp. menghasilkan nilai t hitung

sebesar -0.468 dengan probabilitas sebesar 0.719. Hasil pengujian tersebut

menunjukkan probabilitas > level of significance (=5%). Hal ini berarti tidak terdapat

pengaruh yang signifikan ekstrak Sargassum sp. terhadap skor integritas mukosa

lambung.

Dari hasil penelitian diatas dapat disimpulkan bahwa pemberian dosis

Sargassum sp. sebesar 300 mg/kgBB dapat memberikan penurunan skor ulkus

lambung yang optimal bila dibandingkan dengan pemberian dosis 150 mg/kgBB dan

dosis 600 mg/kgBB.

55

BAB 7

PENUTUP

7.1 Kesimpulan

Bedasarkan penelitian yang dilakukan di Laboratorium Farmakologi FKUB,

mengenai ektrak Sargassum sp. terhadap skor integritas mukosa lambung tikus yang

diinduksi indometasin, dapat diambil kesimpulan bahwa:

1. Pemberian ekstrak alga cokelat (Sargassum sp.) dapat menurunkan skor

integritas mukosa lambung yang diamati secara mikroskopis pada lambung

tikus Rattus novergicuss strain wistar model ulkus peptikum yang telah

diinduksi indometasin.

2. Ditunjukkan bahwa pemberian ekstrak Sargassum sp. pada dosis

300mg/KgBB dapat memberikan hasil yang paling baik, dimana lambung tikus

yang diinduksi indometasin yang dilhat skor ulkus lambung pada dosis ini

terlihat paling rendah dari pada dosis 150mg/KgBB dan 600mg/KgBB.

7.2 Saran

1. Disarankan pada penelitian selanjutnya untuk eksplorasi kandungan dalam

Sargassum sp. yang dapat menghambat terbentuknya ulkus lambung.

2. Diperlukannya untuk pengujian lebih dalam menganai Sargassum sp. sabagai

pencegahan utama pada ulkus peptikum.

3. Dilakukannya penelitian lanjutan mengenai efek lain dari Sargassum sp. yang

dapat membantu bidang farmasi.

56

DAFTAR PUSTAKA

Abbas, A.K., Aster, J.C., dan Kumar, V. 2015. Buku Ajar Patologi Robbins. Edisi 9.

Singapura: Elsevier: 622.

Alpers DH, Kalloo AN, Kaplowitz N, Owyang C, Powell DW. Textbook of

Gastroenterology. John Wiley & Sons; 2011 Oct 13: 777-780

Aro P, Storskrubb T, Ronkainen J, Bolling-Sternevald E, Engstrand L, Vieth M, Stolte

M, Talley NJ, Agréus L. Peptic Ulcer Disease in a General Adult Population:

the Kalixanda Study: A Random Population-Based Study. American Journal of

Epidemiology. 2006 Mar 29;163(11): 1025-34.

De Vries, A. C., Haringsma, J., & Kuipers, E. J. 2007. The Detection, Surveillance and

Treatment of Premalignant Gastric Lesions Related to Helicobacter Pylori

Infection. Helicobacter, 12(1): 1-15.

Dixon, M. F., Genta, R. M., Yardley, J. H., & Correa, P. 1996. Classification and

Grading of Gastritis: The Updated Sydney System. The American Journal of

Surgical Pathology, 20(10): 1161-1181.

Filaretova, L., Bagaeva, T., & Makara, G. B. 2002. Aggravation of Nonsteroidal Anti-

Inflammatory Drug Gastropathy by Glucocorticoid Deficiency or Blockade of

Glucocorticoid Receptors in Rats. Life Sciences, 71(21): 2457-2468.

Geibel, J., Abraham, R., Modlin, I., & Sachs, G. 1995. Gastrin-stimulated changes in

Ca2 + concentration in parietal cells depends on adenosine 30,50-cyclic

monophosphate levels. Gastroenterology 109: 1060-1067.

Gretzer, B., Maricic, N., Respondek, M., Schuligoi, R., & Peskar, B. M. 2001. Effects

of Specific Inhibition of Cyclo‐Oxygenase‐1 and Cyclo‐Oxygenase‐2 in the Rat

57

Stomach with Normal Mucosa and After Acid Challenge. British Journal of

Pharmacology, 132(7): 1565-1573.

Hall, J. and Guyton, A. 2015. Guyton and Hall Textbook of Medical Physiology.

Philadelphia: Elsevier: 881-886.

Hapsari, L. & Mulyani, W., 2010. Pembuatan Konsentrat Zat Warna untuk Bahan

Makanan dari Daun Pandan (Pandanus Amarylliofolius Roxb) dan Biji

Kesumba (Bixa Orellana Linn Beserta Penerapannya. Surakarta: Universitas

Sebelas Maret Program Studi D3 Teknik Kimia.

Herbst JJ. Ulcer disease. Dalam: Behrman RE, Kliegman RM, Arvin AM, penyunting.

Nelson Textbook of Pediatric.Edisi ke-15. Philadelphia: Saunders, 1996: 1078-

2079

Indrianto, A. B., Thobari, J. A., & Nugroho, A. E. 2012. Predictors of The Use of

Gastroproective Agents In Patients Using Nsaid In Yogyakarta

Indonesia. Indonesian Journal of Pharmacy: 41-47.

Jackson, L. M., Wu, K. C., Mahida, Y. R., Jenkins, D., & Hawkey, C. J. 2000.

Cyclooxygenase (COX) 1 and 2 in Normal, Inflamed, and Ulcerated Human

Gastric Mucosa. Gut, 47(6): 762-770.

Johnson LR. Gastrointestinal Physiology E-Book: Mosby Physiology Monograph

Series. Elsevier Health Sciences; 2013 Aug 27: 76.

Kaminishi M, Yamaguchi H, Nomura S, Oohara T, Sakai S, Fukutomi H, Nakahara A,

Kashimura H, Oda M, Kitahora T, Ichikawa H. Endoscopic Classification of

Chronic Gastritis Based on a Pilot Study by the Research Society for Gastritis.

Digestive Endoscopy. 2002 Oct 1;14(4): 138-51.

Kelly, M. K., Brown, J. M., & Thong, Y. H. 1985. Neutrophil and Monocyte Adherence

in Diabetes Mellitus, Alcoholic Cirrhosis, Uremia and Elderly Patients.

International Archives of Allergy and Immunology, 78(2): 132-138.

58

Korf, H.W., Wicht, H., Snipes, R.L., Timmermans, J.P., Paulsen, F., Rune, G. and

Baumgart-Vogt, E., 2008. The Dissection Course–Necessary and

Indispensable for Teaching Anatomy to Medical Students. Annals of Anatomy-

Anatomischer Anzeiger, 190(1): 16-22.

Lau, J. Y., Sung, J., Hill, C., Henderson, C., Howden, C. W., & Metz, D. C. 2011.

Systematic Review of the Epidemiology of Complicated Peptic Ulcer Disease:

Incidence, Recurrence, Risk Factors and Mortality. Digestion, 84