PENGARUH JUS BUAH PEPAYA (Carica papaya L) …repository.ub.ac.id/7287/1/Anna Mariana Zainnuriah...

PENGARUH JUS BUAH PEPAYA (Carica papaya L) TERHADAPJUMLAH

LIMFOSIT PADA PENYEMBUHAN LUKA PASCA GINGIVEKTOMI TIKUS

WISTAR JANTAN (Rattus norvegicus)

SKRIPSI

Untuk Memenuhi Persyaratan

Memperoleh Gelar Sarjana Kedokteran Gigi

Oleh:

Anna Mariana Zainnuriah Wahdah

NIM : 135070400111010

PROGRAM STUDI PENDIDIKAN DOKTER GIGI

FAKULTAS KEDOKTERAN GIGI

UNIVERSITAS BRAWIJAYA

MALANG

2017

ii

HALAMAN PENGESAHAN

SKRIPSI

PENGARUH JUS BUAH PEPAYA (Carica papaya L) TERHADAP JUMLAH

LIMFOSIT PADA PENYEMBUHAN LUKA PASCA GINGIVEKTOMI TIKUS

WISTAR JANTAN (Rattus norvegicus)

Untuk Memperoleh Gelar Sarjana Kedokteran Gigi

Telah diuji pada

Hari: Jumat

Tanggal: 21 Juli 2017

Telah dinyatakan lulus oleh:

Penguji 1

Dr. drg. Nur Permatasari., MS

NIP. 19601005 199103 2001

Penguji II/ Pembimbing I Penguji III/ Pembimbing II

Dr. dr. Nurdiana., M. Kes drg.Joko Widyastomo, Sp. BM

NIP. 19551015 198603 2001 NIP. 19610520 198711 1 001

Mengetahui,

Dekan Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Brawijaya

Drg. R. Setyohadi, MS

NIP. 195802121985031003

iii

KATA PENGANTAR

Puji dan syukur penulis hanturkan kepada Tuhan Yang Maha Esa, Allah

SWT, atas berkat dan rahmat-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan Skripsi

dengan judul “Pengaruh Jus Buah Pepaya (Carica papaya L. ) Terhadap Jumlah

Limfosit pada Penyembuhan Luka Pasca Gingivektomi Tikus Wistar Jantan

(Rattus norvegicus)”.

Skripsi ini telah penulis susun semaksimal mungkin dengan bantuan

berupa masukan, motivasi, kritik dan saran dari berbagai pihak sehingga dapat

mempermudah dan memperlancar penulisan skripsi.

Dengan selesainya Skripsi ini, penulis mengucapkan terima kasih

kepada:

1. R. Setyohadi, drg. MS., selaku Dekan Fakultas Kedokteran Gigi Universitas

Brawijaya.

2. Kartika Andari Wulan, drg. Sp. Pros., selaku Ketua Program Studi

Pendidikan Kedokteran Gigi Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Brawijaya.

3. Dr. Nurdiana, dr., M. Kes., sebagai pembimbing pertama yang telah

memberikan bimbingan, saran, dan masukan, sehingga penulis dapat

menyelesaikan Skripsi ini.

4. Joko Widyastomo, drg., Sp. BM sebagai pembimbing kedua yang telah

memberikan bimbingan dalam pembuatan Skripsi ini selesai.

5. Dr. Nur Permatasari, drg., MS selaku dosen penguji skripsi kesediaannya

memberikan koreksi, saran dan masukan.

6. Kedua orang tua penulis, Ayahanda Prof. Dr. M. Syafiie Idrus, M.Ec, PhD

(Alm.) dan Dr. Ibunda Rahayu Puji Suci,SE. MS adik penulis, Rina Auliya

Wahdah yang selalu menjadi motivasi.

iv

7. Teman seperjuangan penelitian Farmakologi : Anta Seri K., Eliza Rahma P,

Juwita Ladu A., Wafa Aprilia yang menjadi rekan, memberi dukungan dan

membagi ilmunya selama proses pembuatan Skripsi ini.

8. Teman terdekat Anta Seri K, Eliza Rahma P, Fadhilah Laksmita, Kartika

Dian L, Ayu Ramayani dan Dita Ajeng yang selalu membantu, memotivasi

dan membesarkan hati.

9. Teman-teman Fakultas Kedokteran Gigi Uiversitas Brawijaya Angkatan 2013

yang selalu membantu dan mendukung.

10. Sahabat yang selalu setia Dewi Ristya, Rista Choirun, Amalia Amanda,

Risna Rasyida, Regina Anky, Aisiyah Agustina, Bagas Paramajana, Andrian

Pramana dan Satrio Nugroho

11. Semua pihak yang telah membantu dalam menyelesaikan Skripsi ini yang

tidak dapat penulis sebutkan satu persatu.

Penulis menyadari bahwa penulisan ini masih jauh dari sempurna, oleh

karena itu penulis tetap membuka diri untuk kritik dan saran yang membangun.

Akhirnya, semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi yang membutuhkan.

Malang, 21 Juni 2017

Penulis

v

DAFTAR ISI

JUDUL COVER ................................................................................................... 1

HALAMAN PERSETUJUAN ................................................................................ ii

KATA PENGANTAR ............................................................................................ iii

DAFTAR ISI ......................................................................................................... v

DAFTAR TABEL ................................................................................................. vii

DAFTAR GAMBAR ............................................................................................ viii

DAFTAR SINGKATAN ....................................................................................... viii

ABSTRAK ..............................................................................................................

BABI .................................................................................................................... 1

1.1 Latar Belakang .......................................................................................... 1

1.2 Rumusan Masalah ................................................................................. 5

1.3 Tujuan Penelitian ................................................................................... 5

1.4 Manfaat Penelitian ................................................................................. 5

BAB II .................................................................................................................. 6

2.1 Gingiva .................................................................................................. 6

2.2 Gingivektomi .......................................................................................... 9

2.3 Luka .................................................................................................... 15

2.4 Limfosit ................................................................................................ 22

2.5 Pepaya ................................................................................................ 26

2.6 Tikus wistar ......................................................................................... 28

BAB III ............................................................................................................... 31

3.1 Kerangka Konsep ..................................................................................... 31

3.2 Hipotesis Penelitian ............................................................................. 32

BAB IV ............................................................................................................... 33

4.1 Rancangan Penelitian .......................................................................... 33

vi

4.2 Sampel ................................................................................................ 34

4.3 Variabel Penelitian ............................................................................... 35

4.4 Lokasi dan Waktu Penelitian ................................................................ 35

4.5 Definisi Operasional............................................................................. 35

4.6 Alat dan Bahan Penelitian ................................................................... 36

4.7 Prosedur Penelitian ............................................................................. 37

4.8 Alur Penelitian ..................................................................................... 43

4.9 Analisis Data ....................................................................................... 46

BAB V ................................................................................................................ 47

5.1 Hasil Penelitian .................................................................................... 47

5.2 Analisis Data ............................................................................................ 53

BAB VI ............................................................................................................... 59

BAB VII .............................................................................................................. 64

7.1 Kesimpulan .......................................................................................... 64

7.2 Saran ................................................................................................... 64

DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 65

LAMPIRAN ........................................................................................................ 69

vii

DAFTAR TABEL

Tabel 2.1 Kandungan Buah Pepaya ................................................................. 26

Tabel 2.2 Biologi Tikus....................................................................................... 30

Tabel 5.1 Jumlah limfosit hari ke-3 .................................................................... 52

Tabel 5.2 Jumlah limfosit hari ke-5 .................................................................... 52

Tabel 5.3 Histogram .......................................................................................... 53

Tabel 5.4 Uji Normalitas hari ke-3 ...................................................................... 54

Tabel 5.5 Uji Normalitas hari ke-5 ...................................................................... 54

Tabel 5.6 Uji Homogenitas hari ke-3 .................................................................. 55

Tabel 5.7 Uji Homogenitas hari ke-5 .................................................................. 55

Tabel 5.8 Uji Anova hari ke-3 ............................................................................. 56

Tabel 5.9 Uji Anova hari ke-5 ............................................................................. 56

Tabel 5.10 Uji Post Hoc Tukey hari ke-3 ............................................................ 57

Tabel 5.11 Uji Post Hoc Tukey hari ke-5 ............................................................ 57

viii

DAFTAR GAMBAR

Gambar 2.1 Gingiva ............................................................................................. 6

Gambar 2.2 Limfosit .......................................................................................... 22

Gambar 2.3 Pepaya (Caricca papaya L) ............................................................ 25

Gambar 2.4 Tikus strain Wistar(Rattus norvegicus) ........................................... 28

Gambar 3.1 Kerangka Konsep........................................................................... 31

Gambar 4.1 Contoh Prosedur Gingivektomi pada Manusia ............................... 40

Gambar 4.2 Limfosit pada Gingiva ..................................................................... 43

Gambar 5.1 Gambaran limfosit pasca gingivektomi kelompok KP hari ke-3 ....... 48

Gambar 5.2 Gambaran limfosit pasca gingivektomi kelompok P1 hari ke-3 ....... 49

Gambar 5.3 Gambaran limfosit pasca gingivektomi kelompokP2 hari ke-3 ........ 49

Gambar 5.4 Gambaran limfosit pasca gingivektomi kelompokP3 hari ke-3 ........ 49

ambar 5.5 Gambaran limfosit pasca gingivektomi kelompok KP hari ke-5 ......... 50




ix

DAFTAR SINGKATAN

1. PMN : Polimorfonuklear

2. CO2 : Karbondioksida

3. Nd : YAG : Neodymium-doped yttrium aluminium garnet

4. NSAID : Non steroid anti-inflammatory

5. H2O : Hidrogen Monoksida

6. HE : Hematoxillen- Eosin

7. BNF : Buffered Neutral Formalin

8. HSD : High Standar Deviation

9. IFN-Ɣ : limfokin interferon Ɣ

10. NO : Nitric Oxide

11. ROS : Reactive Oxygen Species

12. TGF-β :Transforming Growth Factor

13. VEGF : Vascular Endothelial Growth Factor

BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Gingivektomi adalah suatu tindakan bedah untuk mengeksisi gingiva,

dengan tujuan menghilangkan dinding poket sebagai jalan untuk menghilangkan

kalkulus atau karang gigi disertai penghalusan dinding akar. Hal ini menciptakan

lingkungan yang baik bagi penyembuhan gingiva dan pemulihan kontur gingival.

(Carranza,2012). Teknik ini memiliki banyak keuntungan, dengan cara yang

sederhana dan kemudahan penguasaan untuk operator. (Cohen,2007). Prosedur

gingivektomi ini menyebabkan daerah luka di lapisi oleh gumpalan darah dan

terjadi inflamasi akut.

Luka adalah rusak atau terbukanya suatu jaringan yang berkelanjutan

dari kulit, mukosa membran dan tulang atau organ tertentu. Luka mengakibatkan

efek seperti hilangnya seluruh atau sebagian fungsi organ, respon rasa sakit,

perdarahan dan pembekuan darah, kontaminasi bakteri, dan kematian sel

(Kozier, 1995).

Luka ada bermacam-macam sesuai dengan faktor penyebab, bentuk,

kedalaman dan lokasi. Dalam dunia kedokteran gigi, luka sering berada pada

rongga mulut atau daerah sekitar rongga mulut. Luka di dalam rongga mulut

umumnya terletak pada gusi atau gingiva bisa disebabkan banyak hal dan proses

penyembuhan luka yang berbeda.

Wound healing atau penyembuhan luka adalah suatu proses alami, baik

secara selular maupun biokimia, yang dilakukan oleh tubuh untuk regenerasi

jaringan dermis atau epidermissebagai respon jejas. Daerah luka yang terbuka

akan mengalami epitelialisasi untuk menutup luka pada hari ke 7-14 dan

keratinisasi terjadi pada minggu ke 2- 3. (Hawks, 2005)

2

Luka pada gingiva dapat sembuh secara klinis dalam waktu beberapa

minggu, tetapi penyembuhan sempurna dan pembentukan serabut gingiva

memerlukan waktu hingga beberapa bulan. Dalam proses penyembuhan luka

terdapat fase inflamasi. Pada fase ini pembuluh darah dan sel radang yang

berperan. Sel radang terdiri dari PMN (Polimorfonuklear), limfosit dan makrofag.

Sel radang ini akan bekerja pada daerah yang berjejas untuk menghancurkan

mikroorganisme yang masuk melalui luka. (Price,2011)

Penyembuhan luka ada empat fase yaitu fase inflamasi, proliferasi,

maturasi, remodeling. Proses penyembuhan ini membutuhkan waktu yang lama

untuk mencapai kembali normal dan didalam proses ini fase inflamasi merupakan

fase yang penting karena pada fase ini terjadi netralisasi yaitu proses

pembuangan agen penyerang, perusakan jaringan dan juga pembentukan

kondisi yang diperlukan untuk pemulihan atau perbaikan jaringan. Fase inflamasi

ini berperan penting pada tingkat seluler. Segera setelah dimulainya proses

peradangan, daerah yang mengalami radang akan diserbu oleh neutrofil dan

makrofag. Aktifasi sistem imun spesifik akibat keradangan akan mengaktifkan

makrofag untuk memproduksi sejumlah sitokin dan faktor pertumbuhan yang

berperan pada proliferasi kolagen dan fibroblas, meningkatkan sintesin protein,

memfagositosis sisa sel, mikroorganisme serta mempengaruhi matriks

ekstraseluler sehingga penyembuhan luka dapat segera tercapai. Fase inflamasi

ini terjadi mulai pada hari pertama setelah perlukaan sampai hari keempat.

Salahsatu mediator inflamasi yang keluar ke jaringan yang terluka adalah sel

limfosit dari hari ke-1 sampai pada hari yang ke-5 dan mencapai puncak pada

hari ke-7 (Robbins dan Kumar, 2007).

Limfosit merupakan sel inti dari sistem ketahan tubuh atau imunitas yang

memiliki peranan penting dalam proses keradangan dengan menghancurkan

mikroorganisme yang masuk ke dalam tubuh (antigen), mensintesis dan

3

mensekresi sebuah pertahanan tubuh (antibodi) berupa immunoglobulin ke

dalam jaringan darah sebagai respon terhadap keberadaan benda asing (Sheeler

dan Bianchi, 1982).

Luka pasca gingivektomi biasanya akan sembuh kurang lebih 14-21 hari.

Luka ini biasanya akan dilindungi dengan periodontal pack sebagai periodontal

dressing. Tujuan dari periodontal pack ini adalah untuk melindungi benda asing

masuk kedaerah luka terbuka seperti makanan, pasta gigi dan lainnya.

Periodontal dressing ini bukan sebagai obat melainkan hanya penutup luka agar

luka tersebut cepat kering. Namun cukup banyak pasien yang mengeluh tidak

nyaman memakai periodontal dressing tersebut karena terasa mengganjal.

Kekurangan dari periodontal dressing ini selain tidak nyaman, sering lepas

sebelum luka mengering. Periodontal dressing biasanya dibuka setelah satu

minggu. Setelah semua kotoran sudah dibersihkan dan luka diirigasi dengan air

hangat. Bila luka masih belum terepitelisasi dengan baik dan masih rentan,

makakembali dipasang dressing yang baru selama 1 minggu kemudian. Pasca

Gingivektomi, dokter gigi akan menyertakan obat berupa analgesik untuk

menghilangkan rasa nyeri setelah efek obat bius hilang. (Carranza, 2012).

Saat ini belum terdapat solusi lain untuk mempercepat penyembuhan luka

pasca gingivektomi. Penggunaan periodontal dressing bukan sebagai obat

penyembuh luka, melainkan hanya sebagai pelindung. Penyembuhan luka pada

gingiva pasca gingivektomi berbeda dengan luka oral mukosa lain.

Penyembuhan luka pada rongga mulut sebenarnya bisa dibantu dengan

menggunakan bahan herbal. Bahan herbal berasal dari tumbuhan atau buah-

buahan yang memiliki senyawa aktif untuk mempercepat penyembuhan luka.

Buah yang memiliki senyawa aktif salah satunya adalah buah pepaya.

Tanaman Pepaya ( Carica Pepaya L. ) merupakan buah yang sangat

mudah ditemukan dan sering dijual di pasaran. Awalnya, buah ini berasal dari

4

Meksiko, lalu berkembang banyak dan dibudidayakan di Indonesia. Pepaya

memiliki beberapa nama lain, seperti kates atau gandul (jawa), gedang (sunda).

Pepaya memiliki berbagai manfaat bagi kesehatan, daging buah pepaya

termasuk rendah kalori. Kandungan zat gizi utama dalam pepaya yaitu 0,6%

protein, 9,8% karbohidrat dan 0,1% lemak. Sementara itu , senyawa aktif yang

terkandung di dalamnya adalah serat, vitamin C , vitamin A, Vitamin B kompleks

dan kalium. Kandungan vitamin C pada pepaya lebih tinggi dibandingkan dengan

kandungan vitamin C pada jeruk manis (Desty, 2013). Pada bagian buah pepaya

terdapat kandungan beta- karoten, pectin, d- galaktosa,1-arabinosa, papain,

papayotomin dan vitokinose. Buah pepaya juga kaya antioksidan seperti karoten,

vitamin C, dan flavonoid (Yellia Mangan, 2009).

Erna Septiningsih sudah pernah meneliti tentang keefektifan tanaman

pepaya yaitu efek ekstrak etanol 70% daun pepaya terhadap penyembuhan luka

bakar pada kelinci dengan bentuk sediaan berupa gel sehingga mempermudah

aplikasinya pada luka bakar. Menurut Erna Septiningsih dalam penelitiannya,

kandungan pada daun pepaya adalah enzim papain, flavonoid, alkaloid karpain,

pseudo karpain, glikosida, karposid, dan saponin. Ada beberapa kesamaan

senyawa aktif yang terkandung dalam daun pepaya dengan buah pepaya.

Berdasarkan informasi tentang buah pepaya ( Carica Pepaya L.) tersebut

perlu dilakukan penelitian tentang pengaruh buah pepaya terhadap peningkatan

limfosit darah pada penyembuhan luka post gingivektomi tikus wistar jantan

(Rattus novergicus).

1.2 Rumusan Masalah

Apakah pemberian jus buah pepaya ( Carica pepaya L.) dapat

meningkatkanlimfosit pada jaringan gingiva pasca gingivektomi pada tikus

wistar jantan ?

5

1.3 Tujuan Penelitian

1.3.1 Tujuan umum

Mengetahui pengaruh buah pepaya ( Carica papaya L.) terhadap proses

pembentukan limfosit pada penyembuhan luka gingival pasca

gingivektomi.

1.3.2 Tujuan Khusus

1. Membandingankan jumlah limfosit antara kelompok perlakuan tanpa

diberikan jus buah pepaya dengan kelompok perlakuan yang diberikan

jus buah pepaya.

2. Mengetahui hubungan antara jumlah limfosit dan konsentrasi buah

pepaya.

1.4 Manfaat Penelitian

1.4.1 Manfaat Bagi Ilmu Pengetahuan dan Penulis

1.4.1.1 Hasil penelitian ini diharapkan dapat digunakan sebagai dasar penelitian

selanjutnya untuk penggunaan buah pepaya ( Carica Pepaya L.)

1.4.1.2 Menambah pengetahuan dalam ilmu kedokteran gigi tentang buah

pepaya ( Carica Pepaya L.) tehadap penyembuhan luka pasca

gingivektomi.

1.4.2 Bagi Masyarakat Umum

1.4.2.1 Hasil Penelitian ini diharapkan dapat membantu masyarakat dalam

mempercepat penyembuhan luka dengan menggunakan buah pepaya.

6

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Gingiva

Gambar 2.1 Gingiva Sumber http://pocketdentistry.com

2.1.1 Definisi

Gingiva adalah bagian mukosa rongga mulut yang mengelilingi gigi dan

menutupi lingir (ridge) alveolar. Gingiva merupakan bagian dari jaringan

penyangga atau pendukung gigi, periodonsium (Manson,2013). Gingiva berupa

jaringan ikat fibrosa yang ditutupi epitel, mengelilingi dan melekat ke gigi dan

tulang alveolar dan meluas ke pertautan muko-gingiva (Harty,2013)

Fungsi gingiva adalah melindungi akar gigi, selaput periodontal dan tulang

alveolar terhadap rangsangan dari luar, khususnya dari bakteri-bakteri dalam

mulut (Itjiningsih, 1995).

2.1.2 Anatomi Gingiva

Gingiva yang normal meliputi tulang dan gigi akar alveolar ke tingkat

hanya koronal cementoenamel junction. Gingiva dibagi anatomis menjadi

marginal, terpasang (attached), dan interdental. (Carranza, 2002). Meskipun

7

masing-masing jenis gingiva menunjukkan variasi dalam diferensiasi, histologi,

dan ketebalan sesuai dengan fungsional tuntutan, semua jenis secara khusus

disusun untuk berfungsi tepat terhadap anti mekanik dan mikroba Artinya,

struktur spesifik gingiva yang berbeda mencerminkan efektivitas sebagai

penghalang untuk penetrasi oleh mikroba dan agen berbahaya ke jaringan yang

lebih dalam. (Manson, 2013)

Marginal Gingiva

Tepi atas dari gingiva. Bentuknya mengikuti kurva dari garis servikal gigi.

Biasanya sekitar 1 mm lebar, gingiva marginal membentuk dinding jaringan lunak

dari sulkus gingiva. (Carranza, 2009)

Sulkus Gingiva

Sulkus gingiva adalah ruang antara gingiva margin dan gigi. Sulkus

gingiva yang sehat memiliki kedalam ≤ 2. Gambaran klinisnya berupa celah

dangkal di sekitar gigi yang dibatasi oleh permukaan gigi di satu sisi dan epitel

melapisi free margin gingiva. Pada tes kedalaman probing dari sulkus gingiva

normal secara klinis pada manusia adalah 2 sampai 3 mm.

Attached Gingiva

Attached Gingiva merupakan anatomi lanjutan dari margin gingiva.

Gingiva yang melekat dari dasar sulkus hingga mucogingiva junction.

(Harty,2013) Pada Attached Gingiva ini terasa keras dan melekat erat pada

periosteum yang mendasari tulang alveolar.

Interdental Gingiva

Interdental gingiva adalah gingiva yang berada diantara gigi geligi.

Gingiva interdental menempati lubang di dinding gingiva, yaitu ruang

interproksimal di bawah area kontak gigi. bentuknya meruncing ke arah

8

interproksimal, sedangkan permukaan sisi mesial dan distal sedikit cekung.

Perbatasan lateral dan ujung papila interdental dibentuk oleh gingiva marginal

gigi sebelahnya. Epitelium lajur biasanya sangat tipis, tidak ada keratinisasi dan

terbentuk dari beberapa lapis sel. Daerah interdental berperan sangat penting

karena merupakan daerah pertahanan bakteri yang paling persisten dan

strukturnya menyebabkan daerah ini sangat peka yang biasanya timbul lesi awal

pada gejala radang pada gingiva (Putri, 2009)

2.1.3 Gambaran Klinis Gingiva Sehat

1. Warna Gingiva

Warna gingiva normal umumnya berwarna merah muda atau merah

jambu yang diakibatkan oleh adanya suplai darah dan derajat lapisan keratin

epitelium serta sel-sel pigmen. Warna ini bervariasi pada setiap orang dan erat

hubungannya dengan pigmentasi kutaneous. Pigmentasi pada gingiva biasanya

terjadi pada individu yang memiliki ras warna kulit gelap. Pigmentasi pada

attached gingiva mulai dari merah kecoklatan sampai hitam. Warna pada alveolar

mukosa lebih terlihat terang atau merah disebabkan oleh mukosa alveolar tidak

mempunyai lapisan keratin dan tipisnya lapisan pada sel epitel

2. Ukuran Gingiva

Ukuran gingiva ditentukan oleh jumlah elemen seluler, interseluler dan

suplai darah. Perubahan ukuran gingiva merupakan gambaran yang paling

sering dijumpai pada penyakit periodontal. Ukurannya menyesuikan sesuai

dengan ukuran gigi. Tidak tampak terlalu menonjol atau pembesaran.

3. Kontur Gingiva

9

Kontur dan ukuran gingiva sangat bervariasi. Keadaan ini dipengaruhi

oleh bentuk dan susunan gigi geligi pada lengkungnya, lokalisasi dan luas area

kontak proksimal dan dimensi embrasur (interdental) gingiva oral maupun

vestibular. Interdental papil menutupi bagian interdental gingiva sehingga tampak

lancip meruncing.

4. Konsistensi Gingiva

Gingiva melekat erat ke struktur dibawahnya dan tidak memiliki lapisan

submukosa sehingga gingiva tidak dapat digerakkan.

5. Tekstur Gingiva

Tekstur gingva yang sehat akan terasa kenyal. Pada permukaan attached

gingiva akan tampak berkerut atau berbintik seperti kulit jeruk. Gambaran ini

biasanya disebut stippling. Stippling akan muncul dan terlihat jelas bila

permukaan gingiva dikeringkan. (Carranza, 2002)

2.2 Gingivektomi

2.2.1 Definisi

Bedah periodontal yang dilakukan dengan mengeksisi jaringan gingiva

yang membesar untuk menciptakan bentuk anatomis yang baru dapat disebut

dengan gingivektomi. Tujuan dari prosedur bedah periodontal ini untuk

menghilangkan poket gingiva pada penyakit periodontal atau pada pembesaran

gingiva karena obat-obatan sehingga dapat tercipta suatu gingiva yang normal

baik dari fungsi kesehatan maupun estetika (Suryono, 2012). Dengan mengambil

dinding poket, gingivektomi memungkinkan pandangan dan akses yang lebih

baik untuk melakukan eliminasi kalkulus dan penghalusan permukaan akar

10

dengan baik. Sehingga dapat tercipta lingkungan yang lebih baik untuk

penyembuhan gingiva dan restorasi kontur gingiva fisiologis (Yusrini, 2014).

2.2.2 Indikasi dan Kontraindikasi

Indikasi gingivektomi menurut Cohen (2009) adalah sebagai berikut:

- Poket supraboni

- Jaringan keratin yang adekuat

- Poket dengan kedalaman lebih dari 3 mm

- Kehilangan tulang horizontal yang tidak membutuhan bedah tulang

- Pembesaran gingiva

- Daerah dengan akses terbatas

- Topigrafi gingiva yang tidak estetik dan asimetri

- Menghilangkan jaringan lunak yang menghalangi erupsi gigi

- Menciptakan kontur gingiva yang baik pasca akut necrotizing gingivitis

ulseratif dan prosedur bedah flap

Sedangkan kontraindikasi gingivektomi menurut Cohen (2009) adalah

sebagai berikut:

- Jaringan keratin yang inadekuat

- Poket yang meluas hingga ke mukogingiva line

- Kebutuhan akan reseksi tulang

- Jaringan yang inflamasi dan edema

- Area yang butuh estetik

- Bagian palatal yang dangkal

- Perawatan poket infraboni

- Oral hygiene yang buruk

11

2.2.3 Prosedur Gingivektomi

Fase Presurgical

Hal yang harus dilakukan pertama kali sebelum melakukan gingivektomi

adalah mengurangi keradangan dan menghilangkan faktor lokal, seperti kalkulus,

plak, atau tumpatan yang overhanging. Ketika mengawali proses gingivektomi,

yang dilakukan adalah melakukan anastesi lokal yang adekuat dan

vasokonstriktor yang berperan untuk mengendalikan perdarahan. Jika anastesi

telah diberikan, kemudian melakukan probing pada poket gingiva untuk

mengetahui kedalamannya dan untuk memastikan bahwa poket gingiva tidak

meluas hingga ke mucogingiva junction. Yang perlu diperhatikan adalah perlu

atau tidaknya dilakukan bedah tulang, karena salah satu kontraindikasi

dilakukannya gingivektomi adalah kebutuhan akan bedah tulang (Cohen, 2009).

Mengukur Kedalaman Poket

Periodontal probe digunakan untuk menandai dasar poket dengan

serangkaian titik perdarahan kecil. Tiga titik (mesial, distal, dan bukal) dibuat

pada setiap permukaan bukal dan lingual. Tanda ini menggambarkan batas

penghilangan poket. Kemudian langkah selanjutnya adalah pembuatan bleeding

point dengan menggunakan poket marker untuk menunjukkan batas dari poket

yang harus dihilangkan. Penanda poket atau pocket marker diletakkan kedalam

poket dan diposisikan sejajar dengan gigi. Saat dasar poket telah tercapai,

jaringan tersebut ditandai. Kemudian setelah titik-titik perdarahan ditetapkan,

titik-titik tersebut akan membentuk garis putus-putus yang menguraikan sayatan.

Penanda poket tidak boleh diletakkan miring karena dapat membentuk garis

sayatan yang terlalu dalam (Cohen, 2009).

12

Insisi

Ada dua macam jenis insisi untuk prosedur gingivektomi, yaitu continuous

dan discontinuous. Kedua jenis insisi tersebut dimulai dari gigi paling ujung pada

daerah yang akan dilakukan gingivektomi. Skalpel atau pisau gingivektomi

adalah alat yang dapat dipakai untuk melakukan insisi. Pisau gingivektomi lebih

mudah digunakan sebab angulasi dan bentuk pisaunya. Ujung pisau digunakan

sebagai insisi primer yang dimulai dari bagian sedikit apikal dari bleeding point.

Untuk menghilangkan poket dengan maksimal serta menghasilkan bevel jaringan

sebesar 45° dengan cara memegang pisau sedemikian rupa agar insisi yang

dilakukan sangat dengat dengan tulang. Pisau Orban atau Pisau Kirkland

interproksimal digunakan untuk membebaskan jaringan interproksimal,

ditempatkan pada interdental dengan sudut 45°, baik bukal maupun lingual

setelah itu, jaringan dibuang menggunakan hoe atau scaler. Dilanjutkan dengan

melakukan scalling dan root planing untuk menghilangkan jaringan granulasi

yang tersisa, kalkulus dan sementum dengan menggunakan scaler atau kuret

(Cohen, 2009). Setelah dilakukan perawatan scalling dan root planing, jaringan

yang nekrose dibersihkan dengan saline agar bersih dan tidak terjadi

pendarahan, kemudian dipasang periodontal dressing. Periodontal dressing

dipasang untuk meningkatkan kenyamanan pasca operasi. Dressing ini akan

menghalangi pembentukan jaringan granulasi yang berlebihan dan melindungi

luka dari trauma mekanis dan kimia. Penempatan dressing harus menutupi

daerah luka, menempati sepanjang leher gigi dan tidak menutupi permukaan

oklusal, serta membentuk kerucut pada daerah interdental. Dressing tidak boleh

menutup perlekatan otot ataupun mukosa orovestibular (Suryono,2012).

13

Gingivektomi juga dapat dilakukan dengan teknik lain:

Gingivektomi dengan elektrokauter/bedah listrik

Untuk pembentukan kontur gingiva diindikasikan gingivektomi dengan

teknik bedah listrik atau elektrokauter. Pengangkatan jaringan gingiva hiperplasi,

koreksi frenulum dan otot-otot perlekatan, insisi abses periodontal, serta flep

perikoronal adalah batasan pada prosedur superfisial dari teknik ini.

Memungkinkannya pembentukan kontur jaringan yang baik dan kontrol

pendarahan adalah keuntungan teknik ini. Sedangkan kerugian teknik ini tidak

dapat digunakan pada penderita jantung yang menggunakan pacemaker (alat

pacu jantung) yang tidak kompatibel. Saat prosedur dilakukan akan menimbulkan

aroma yang tidak sedap. Kerusakan tulang dapat tidak bisa diperbaiki jika ujung

alat bedah listrik bersentuhan dengan tulang. Serta panas dari pemakaian alat

yang berlebihan akan menyebabkan kerusakan jaringan dan kehilangan

pendukung. Sementum dapat terbakar jika elektroda bersentuhan dengan akar

(Yusrin, 2014)

Gingivektomi dengan laser

Laser karbondioksida (CO2) dan laser neodymium: yttriumalumunium-

garnet (Nd:YAG) yang mempunyai panjang gelombang 10,600 nm dan 1064 nm

adalah laser yang paling sering digunakan dalam praktik kedokteran gigi. Sinar

laser (CO2) digunakan untuk eksisi gingiva, meskipun penyembuhannya agak

lama dibandingkan dengan penyembuhan bila menggunakan scalpel secara

konvensional. Penggunaan sinar laser untuk bedah mulut harus memenuhi

ukuran yang dianjurkan, untuk menghindari pantulan sinar pada permukaan alat

yang dapat menimbulkan luka terhadap jaringan sekitarnya dan penglihatan

operator (Yusrin, 2014).

14

2.2.4 Gingivoplasty

Gingivektomi sering diikuti dengan prosedur gingivoplasti. Gingivoplasti

merupakan proses pembentukan kembali gingiva yang telah kehilangan bentuk

fisiologisnya (Suryono, 2012). Setelah melakukan gingivektomi, perlu dilakukan

gingivoplasti yang bisa dilakukan dengan menggunakan gunting, tissue nipper,

atau diamond stone untuk mendapatkan kontur gingiva yang lebih baik.

Gingivoplasti diperlukan untuk membentuk permukaan interradikular dan

membuat kontur lebih rata. Jaringan yang sembuh akan tipis, daerah dari

interdental ke permukaan interradikular akan lebih rata sehingga tidak mudah

untuk dijadikan retensi makanan (Cohen, 2009). Tujuan utama gingivoplasti

adalah restorasi kontur fisiologis gingiva yang dapat membantu mencegah

terjadinya rekurensi peyakit periodontal. Pada akhirnya gingivoplasti harus dapat

meningkatkan akses untuk melakukan kontrol plak dengan efisien oleh pasien.

Biasanya prinsip-prinsip dari gingivoplasti digabungkan dengan gingivektomi,

kedua prosedur tersebut seringkali dilakukan bersamaan (Yusrin, 2014).

2.2.5 Penyembuhan pasca gingivektomi

Sel epitel pinggiran luka mulai bermigrasi keatas jaringan granulasi

setelah 12-24 jam. Setelah 5-14 hari epitelisasi permukaan pada umumnya telah

selesai. Selama 4 minggu pertama setelah gingivektomi, keratinisasi akan

berkurang. Keratinisasi permukaan mungkin tidak tampak hingga hari ke 28-42

setelah operasi. Setelah satu bulan, perbaikan epitel selesai dan perbaikan

jaringan ikat selesai sekitar 7 minggu setelah gingivektomi. Setelah hari keempat

penyembuhan, vasodilatasi dan vaskularisasi mulai berkurang serta tampak

hampir normal pada hari keenambelas. Gingiva tampak sehat, berwarna merah

15

muda dan kenyal sekitar enam minggu setelah gingivektomi. Perawatan gingiva

hiperplasi dengan perawatan gingivektomi pada kenyataannya sering

menimbulkan kekambuhan (Ruhadi, 2005)

Nyeri pasca gingivektomi dan tindakan bedah lain merupakan hal yang

penting. Nyeri pasca bedah biasanya berakhir setelah 3-4 hari. Pemberian obat

analgesik pada pasien dapat dilakukan untuk mengurangi rasa nyeri dan

dikonsumsi setiap 6 jam. Tidak dianjurkan memberikan NSAID, terutama pada

pasien yang mempunyai resiko perdarahan (Manson, 2013).

2.3 Luka

2.3.1 Definisi

Luka adalah rusak atau terbukanya suatu jaringan yang berkelanjutan dari kulit,

mukosa membran dan tulang atau organ tertentu. Luka mengakibatkan efek

seperti hilangnya seluruh atau sebagian fungsi organ, respon rasa sakit,

perdarahan dan pembekuan darah, kontaminasi bakteri, dan kematian sel

(Kozier, 1995).

2.3.2 Klasifikasi luka

Luka sering digambarkan berdasarkan bagaimana cara mendapatkan

luka itu dan menunjukkan derajat luka (Taylor, 1997).

Berdasarkan kedalaman dan luasnya luka

a. Stadium I

Luka Superfisial yaitu luka yang terjadi hanya pada lapisan teratas kulit atau

epidermis kulit.

b. Stadium II :

16

Luka Partial Thickness yaitu luka yang mengakibatkan hilangnya lapisan kulit

pada lapisan epidermis dan bagian atas dari dermis. Luka ini ditandai

dengan adanya tanda klinis seperti abrasi, blister atau cekungan yang

dangkal.

c. Stadium III

Luka Full Thickness yaitu luka yang mengakibatkan hilangnya lapisan kulit

keseluruhan meliputi kerusakan atau kematian (nekrosis) jaringan subkutan

yang dapat meluas sampai jaringan bagian bawah tetapi tidak melewati

jaringan baguan dasar. Luka ini mengenai dari lapisan epidermis, dermis dan

fasia tetapi tidak sampai mengenai otot.

d. Stadium IV

Luka Full Thickness yaitu luka yang telah mencapai atau menembus lapisan

otot, tendon dan tulang dengan adanya kerusakan yang luas. (Baranoski,

2008)

Berdasarkan waktu penyembuhan luka

a. Luka akut

Luka ini akan sembuh dengan masa penyembuhan sesuai dengan konsep

penyembuhan yang ada.

b. Luka kronis

Luka ini terjadi karena mengalami kegagalan dalam proses penyembuhan,

yang dapat dipengaruhi dari faktor intrinsik maupun kestrinsik.

Mekanisme terjadinya luka

17

a. Luka insisi (Incised wounds)

Luka ini terjadi karena teriris oleh benda yang tajam. Seperti akibat

pembedahan.

b. Luka memar (Contusion Wound)

Luka ini terjadi akibat benturan atau tekanan keras pada jaringan sehingga

muncul daerah yang bengkak membiru.

c. Luka lecet (Abraded Wound)

Luka ini terjadi akibat abrasi atau kulit bergesekan dengan benda lain yang

sifatnya keras tetapi tidak tajam.

d. Luka tusuk (Punctured Wound)

Luka ini terjadi akibat adanya benda asing yang masuk kedalam jaringan

dari arah luar dengan luka yang tidak luas

e. Luka tembus (Penetrating Wound)

Luka ini terjadi karena benda asing yang menembus organ atau jaringan

dalam tubuh, yang dapat meluas ke jaringan sekitarnya.

2.3.3 Penyembuhan luka

Penyembuhan luka adalah proses penggantian dan perbaikan fungsi

jaringan yang rusak. Penyembuhan luka melibatkan integrasi proses fisiologis.

2.3.3.1 Proses Penyembuhan Luka

Fase Inflamasi

Fase inflamasi adalah adanya respon vaskuler dan seluler yang terjadi

akibat perlukaan yang terjadi pada jaringan lunak. Tujuan yang akan dicapai

adalah menghentikan perdarahan dan membersihkan area luka dari benda asing,

sel-sel mati dan bakteri untuk mempersiapkan dimulainya proses penyembuhan.

18

Pada awal fase ini kerusakan pembuluh darah akan menyebabkan keluarnya

platelet yang berfungsi sebagai hemostasis. Platelet ini akan menutupi vaskuler

yang terbuka (clot) dan juga mengeluarkan substansi vasokonstriksi yang

mengakibatkan pembuluh darah kapiler bervasokonstriksi. Selanjutnya terjadi

penempelan endotel yang akan menutup pembuluh darah. Periode ini 5-10 menit

lamanya, setelah itu vasodilatasi kapiler terjadi akibat stimulasi saraf sensoris

dan adanya substansi vasodilator yaitu berupa histamin, bradikinin, serotonin dan

sitokin. Peningkatan permeabilitas vena membuat cairan plasma darah keluar

dari pembuluh darah dan masuk ke daerah luka sehingga oedema jaringan

terjadi akibat dari kerja Histamin Secara klinis rasa sakit pada fase inflamasi

akan terasa sampai hari ke-3 atau ke-4. Proses fase inflamasi ini berlangsung

sampai hari ke-6 (Price, 2011).

Fase Proliferatif

Pada fase ini adalah fase memperbaiki dan menyembuhkan luka.

Munculnya fase ini ditandai dengan proliferasi sel. Fibroblas sangat besar

perannya pada proses perbaikan untuk bertanggung jawab menghasilkan produk

struktur protein yang akan digunakan selama proses rekonstruksi jaringan.

Paparan sel fibroblast pada jaringan lunak yang terluka biasanya sangat jarang

dan bersembunyi di matriks jaringan penunjang. Fibroblas baru akan aktif

bergerak jika terdapat luka. Pergerakkannya dari jaringan sekitar luka ke dalam

daerah luka, kemudian akan berkembang (proliferasi) serta mengeluarkan

beberapa substansi berupa kolagen, elastin, hyaluronic acid, fibronectin dan

proteoglycan yang berperan dalam membangun jaringan baru. Kolagen disini

berfungsi membentuk calon jaringan baru dan dengan dikeluarkannya substrat

19

oleh fibroblas, yang nantinya akan memberikan pertanda bahwa makrofag,

pembuluh darah baru dan juga fibroblas sebagai satu kesatuan dapat memasuki

daerah yang luka. Dari sejumlah sel dan pembuluh darah baru yang tertanam

didalam jaringan baru tersebut disebut dengan jaringan granulasi. Jika epitel

dermis dan lapisan kolagen yang baru telah terbentuk maka fase ini akan

berhenti. Proses ini terlihat saat kontraksi akan dipercepat oleh berbagai growth

faktor yang dibentuk oleh makrofag dan platelet. (Sugiaman, 2011)

Fase Maturasi

Fase ini adalah fase pematangan yang biasanya dimulai pada minggu

ke-3 setelah perlukaan. Fase ini kurang lebih akan berakhir sampai 12 bulan.

Pada fase ini jaringan baru akan terbentuk sempurna menjadi jaringan sembuh

dan kuat. Jaringan granulasi akan mulai ditinggalkan oleh fibroblast. Jaringan

yang awalnya berwarna kemerahan akan mulai berkurang karena pembuluh

mulai regresi dan serat fibrin dari kolagen bertambah banyak untuk memperkuat

jaringan parut. Kekuatan dari jaringan parut akan mencapai puncaknya pada

minggu ke-10 setelah perlukaan. (Sussman, 2007)

Penyembuhan yang optimal akan dicapai ketika antara kolagen yang

diproduksi seimbang dengan yang dipecahkan. Saat mencapai ke pembentukan

jaringan parut, jika terjadinya penebalan atau hypertrophic scar itu terjadi karena

kolagen berlebihan, sebaliknya produksi yang berkurang maka akan menurunkan

kekuatan jaringan parut dan luka akan selalu terbuka. (Sussman, 2007)

Fase Remodelling

20

Fase ini adalah fase terakhir dalam proses penyembuhan luka. Luka

dikatakan sembuh jika terjadi kontinuitas lapisan kulit dan kekuatan jaringan

parut mampu atau tidak mengganggu untuk melakukan aktifitas normal.

Meskipun proses penyembuhanluka sama bagi setiap penderita, namun outcome

atau hasil yang dicapai sangat tergantung pada kondisi masing-masing individu,

lokasi terjadi serta luasnya luka. (Hess,2008)

2.3.4 Faktor yang mempengaruhi penyembuhan luka

a. Usia dan Nutrisi

Kemampuan dan percepatan dalam penyembuhan luka dipengaruhi dari

usia individu dan asupan nutrisi yang baik. Karena semakin tua usia individu,

sel yang diproduksi tidak secepat sel yang diproduksi oleh usia muda.

Sedangkan nutrisi memiliki peran membantu menghasilkan sel-sel

pematangan agar luka cepat tertutup.

b. Infeksi

Infeksi dapat menghambat proses penyembuhan luka dan menyebabkan

kerusakan pada jaringan sel penunjang, sehingga dapat memperparah

ukuran dari luka tersebut (William, 2008)

c. Hipovolemia

Ketika kuurangnya volume darah , maka oksigen yang tersedi akan

menurun dan akan mengakibatkan vasokonstriksi. Sehingga penyembuhan

luka akan terhambat.

d. Hematoma

Hematoma adalah bekuan darah. Pembekuan darah sangatdibutuhkan

dalam proses oenyembuhan luka. Tanpa adanya pembekuan darah atau

21

jikaterdapat kelianan dalam pembekuan darah, maka proses penyembuhan

luka dapat berlangsung lebih lama dari yang seharusnya.

e. Benda asing

Benda asing seperti debu pasir atau mikroorganisme dapat menginfeksi

dan menyebabkan terbentuknya suatu abses sebelum benda tersebut

diangkat. Abses ini timbul dari serum, fibrin, jaringan sel mati dan lekosit

(sel darah merah), yang membentuk cairan kental dengan warna dari putih

susu sampai kekuningan yang disebut dengan pus (William, 2008)

f. Iskemia

Iskemi adalah suatu keadaan dimana terdapat penurunan suplai darah

pada bagian tubuh akibat dari obstruksi dari aliran darah. Balutan pada luka

yang terlalu ketat biasanya menjadi hal yang paling sering terjadi.

g. Diabetes

Diabetes adalah salah satu penyakit sistemik yang mempengaruhi karena

sekresi insulin yang terhambat akan mengakibatkan peningkatan gula darah.

sehingga luka lama mongering. (Brem, 2007)

h. Pengobatan

Obat yang masuk ke dalam tubuh bisa juga mempengaruhi kinerja dalam

proses penyembuhan luka. Seperti antikoagulan yang berfungsi untuk

mengencerkan darah dapat mengakibatkan perdarahan. (Franz, 2007)

i. Stress

Tingkat rasa khawatir atau stress dalam masa penyembuhan juga dapat

menghambat proses penyembuhan. Rasa khawatir dan stress mampu

membuat pergerakan yang tidak terkendali seperti sering menyentuh daerah

yang terkena luka (P Mahendra, 2012 ).

22

2.4 Limfosit

Gambar 2.2 Limfosit Sumber http://www.pathologystudent.com/wp-content/uploads/2010/07/normal-

lymphs.jpg

2.4.1 Definisi

Limfosit adalah jenis sel darah putih yang merupakan sel pusat dari

sistem ketahan tubuh atau imunitas yang memiliki peranan penting dalam proses

keradangan dengan menghancurkan mikroorganisme yang masuk ke dalam

tubuh (antigen), mensintesis dan mensekresi sebuah pertahanan tubuh (antibodi)

berupa immunoglobulin ke dalam jaringan darah sebagai respon terhadap

keberadaan benda asing (Sheeler dan Bianchi, 1982).

Limfosit merupakan sel yang berbentuk bulat, mempunyai diameter yang

bervariasi antara 7 sampai 12 µm. Jumlah limfosit adalah 20 sampai 35 persen

dari leukosit darah normal. Limfosit merupakaan sel yang paling kecil diantara sel

bebas pada jaringan ikat. Mereka memiliki inti bulat, gelap karena khromatinnya

berkelompok dan tidak nampak nukleolus. yang hampir memenuhi seluruh sel.

Disekitar inti terdapat sedikit sitoplasma homogen yang basofil (Leeson et al.,

1996). Sitoplasmanya yang sedikit tampak mengelilingi inti sebagai cincin

berwarna biru muda.

23

Kebanyakan limfosit dalam jaringan ikat longgar diduga berasal dari

sirkulasi darah. Pada biakan jaringan, limfosit terbentuk didalam jaringan ikat dan

menetap disana. (Leeson et al., 1996). Limfosit paling banyak ditemukan dalam

nodus limfe, namun juga dijumpai dalam jaringan limfoid khususnya, seperti

limpa, daerah submukosa saluran cerna,timus dan sumsum tulang. Jaringan

limfoid tersebar di lokasi-lokasi yang sangat menguntungkan di dalam tubuh

untuk menahan invasi organisme atau toksin sebelumdapat menyebar luas

(Guyton & Hall, 2007).

Limfosit umumnya dalam jumlah yang sangat kecil untuk waktu yang

cukup lama yaitu sampai reaksi peradangan menjadi kronik (Price dan Wilson,

2005). Limfosit berfungsi memberikan respon imunologik untuk melawan agen

asing dengan fenomena humoral dan seluler spesifik (Bellanti, 2011).

Limfosit T secara langsung menghancurkan sel-sel sasaran spesifik,

suatu proses yang dikenal sebagai respon imun yang diperantarai sel hidup

(respon imun seluler). Sel yang menjadi sasaran limfosit T mencakup sel-sel

tubuh yang dimasuki oleh virus dan sel kanker (Sherwood, 2001).

Baik limfosit T maupun limfosit B juga memperlihatkan peristiwa memori

imunologik. Setiap limfosit disiapkan untuk memberikan respon hanya terhadap

satu antigen saja. Beberapa sel yang dihasilkan itu akan berkembang menjadi

sel efektor misalnya sebuah limfosit B akan berkembang menjadi sel plasma

yang menghasilkan antibodi. Pada saat jumlah sel radang meningkat, saat itulah

sel-sel sebagai antibodi yang dihasikan dari sumsum tulang belakang keluar

menuju daerah yang terkena luka . (Junqueira et al., 2007).

24

2.4.2 Peran Limfosit dalam Penyembuhan Luka

Respon penyembuhan luka berawal dari saat pertama muncul cedera

atau luka. Pada luka tersebut terdapat peningkatan permeabilitas dan

vasodilatasi sehingga menyebabkan munculnya edema dan rasa sakit. Proses

tersebut adalah produksi dari kinin dan prostaglandin. Pada luka awal sel yang

berperan paling banyak adalah PMN. Setelah PMN muncul sebagai fagositosis

bakteri lalu diikuti dengan munculnya makrofag dan diikuti limfosit. Peranan

limfosit dalam penyembuhan luka, limfosit melepaskan limfokin interferon Ɣ (IFN-

Ɣ) yang mengaktivasi makrofag. Setelah makrofag diaktifkan oleh limfosit akan

menghasilkan Nitric Oxide (NO) dan Reactive Oxygen Species (ROS) yang

berperan dalam fagositosis. Makrofag juga melepaskan faktor pertumbuhan yaitu

Transforming Growth Factor (TGF-β) dan Vascular Endothelial Growth Factor

(VEGF) yang mengawali dan mempercepat pembentukan formasi jaringan

granulasi berupa fibroblas dan angiogenesis sehingga terjadi penyembuhan luka

(Robbins, 2007)

Fase inflamasi ini terjadi mulai pada hari pertama setelah perlukaan

sampai hari keempat. Pada awal terjadinya keradangan, limfosit tidak begitu

banyak berperan aktif pada proses tersebut karena yang berperan pada saat itu

adalah sel radang akut seperti PMN dan makrofag yang keluar ke jaringan luka.

Sel limfosit muncul dari hari ke-1 sampai pada hari yang ke-5 mencapai puncak

dan akan mengalami penurunan pada hari ke-7 (Robbins dan Kumar, 2007).

25

2.5 Pepaya

Gambar 2.3 Pepaya (Caricca papaya L) Sumber http://tiraskita.com/foto_berita/34pepaya.jpg

2.5.1 Klasifikasi Ilmiah

Kingdom : Plantae

DIvisi : Spermatophyta

Kelas : Dicotyledoneae

Ordo : Caricales

Famili : Caricaceae

Genus : Carica

Spesies : Carica papaya L

2.5.2 Penyebaran Pepaya

Tanaman Pepaya awalnya berasal dari luar negeri yaitu Amerika Tengah,

daerah sekitar Meksiko bagian selatan dan Nicaragua. Lalu masuk ke Indonesia

yang dibawa oleh bangsa Portugis. Saat ini Indonesia masuk dalam salah satu

Negara yang cukup besar menghasilkan buah papaya (Warisno, 2007). Dan

juga iklim di Indonesia yang mendukung pertumbuhan pesat. Sehingga buah

papaya mudah di dapatkan secara bebas dipasaran.

26

Dari hasil survey Produksi Buah-Buahan di Jawa tahun 1991 menunjukan

bahwa tanaman buah papaya cukup banyak dihasilkan dari kota Malang,

Jember dan Banyuwangi, Jawa Timur. (Rukmana. 2012)

2.5.3 Kandungan Buah Pepaya untuk Proses Penyembuhan Luka

Unsur Komposisi Buah Masak Buah Mentah Daun

Energi (kalori) 46 26 79

Air (g) 86,7 92,3 75,4

Protein (g) 0,5 2,1 8

Lemak (g) - 0,1 2

Karbohidrat (g) 12,2 4,9 11,9

Vitamin A (IU) 365 50 18.250

Vitamin B (mg) 0,04 0,02 0,15

Vitamin C (mg) 78 19 40

Kalsium (mg) 23 50 353

Besi (mg) 1,7 0,4 0,8

Fosfor (mg) 12 16 63

Tabel 2.1 Kandungan Buah Pepaya Sumber : Direktorat Gizi, Depkes RI (1979) dalam Kalie (2008)

Kandungan senyawa pepaya

1. Daun

Enzim papain, alkaloid karpaina, pseudo-karpaina, glikosid, karposid dan

saponin, sakarosa, dekstrosa, dan levulosa. Alkaloid karpaina mempunyai

efek seperti digitalis.

27

2. Buah

β-karotena, pektin, d-galaktosa, l-arabinosa, papain, papayotimin papain,

serta fitokinase

3. Biji

Glukosida kakirin dan karpain. Glukosida kakirin berkhasiat sebagai obat

cacing, peluruh haid, serta peluruh kentut (karminatif)

4. Getah

Papain, kemokapain, lisosim, lipase, glutamin, dan siklotransferase

Seluruh bagian tanaman pepaya dapat digunakan sebagai obat.Daging

buah, bunga, tangkai, maupun akar pepaya. Daging pepaya matang banyak

mengandung vitamin A, C, dan B kompleks, asam amino, kalsium, besi,

enzim dan lain-lain (Jagadeesh, 2014). Proteinyang terkandung di dalam pepaya

sangat mudah dicerna. Pepayasangat bermanfaat bagi seseorang yang

mengalami gangguan pencernaan, menjalankan pola makan yang tidak sehat

danbanyak mengonsumsi protein yang sulit tercerna. Pepaya tidak hanya banyak

mengandung protein yang mudah diserap, tetapi juga membantu penyerapan

berbagai protein lain di dalam tubuh. (Effendi, 2014)

Menurut Journal of Medicinal Plants Studies (2013) yang telah diuji oleh

Aravind menyatakan bahwa enzim papain yang ditemukan pada pepaya dapat

membantu dalam menurunkan peradangan dan penyembuhan luka bakar.

Pepaya juga mempunyai efek anti-koagulan karena dapat meningkatkan

protrombin dan koagulasi tiga kali lipat. Enzim papain tersebut dapat

menghilangkan jaringan nekrotik pada jaringan yang luka kronis, luka bakar.

28

2.6 Tikus wistar

Gambar 2.4 Tikus strain Wistar(Rattus norvegicus) Sumber Bioterio

2.6.1 Klasifikasi Ilmiah

Tikus adalah hewan percobaan yang sering digunakan. Di laboratorium.

Keunggulan dari tikus adalah jumlah kelahirannya yang tinggi, siklus hidup yang

relative pendek, sifat anatomi dan fisiologis yang baik, tingkat penanganan yang

mudah, sifat bereproduksi sama seperti mamalia besar.

Kingdom : Animalia

DIvisi : Chordata

Kelas : Mammalia

Ordo : Rodentia

Famili : Muridae

Genus : Murinae

Spesies : Rattus norvegicus L.

Ada dua sifat yang membedakan tikus dari hewan percobaan lain, yaitu

bahwa tikus tidak dapat muntah karena struktur anatomi yag tidak lazim di

29

tempat esofagus bermuara ke dalam lambung, dan tikus tidak mempunyai

kantung empedu. (Smith dan Mangkoewidjojo, 1988)

Bentuk tubuh tikus wistar lebih besar dari famili tikus pada umumnya yang

dapat mencapai 40 cm diukur dari hidung hingga ujung ekor. Serta tikus jantan

biasanya memiliki ukuran lebih besar dari tikus betina, dan berwarna agak

kecoklatan, kadang-kadang ada bercak hitam atau putih dan memiliki ekor yang

lebih panjang daripada tubuhnya (Sugiyanto, 1995).

Tikus dalam percobaan Kedokteran Gigi, yaitu memakai daerah rongga

mulutnya. Sasaran yang digunakan adalah gusi atau gingiva. Struktur dari

daerah gingiva gigi mirip dengan yang diamati pada manusiadengan sulkus

gingiva dangkal dan attacthed junctional yang epitel pada permukaan gigi.

Namun, ada beberapa perbedaan seperti keratinisasi dari sulkus yang epitel

pada tikus. Perbedaan lain berkaitan dengan hubungan antara gingiva dan epitel

junctional dengankontak desmosomal antara sel-sel yang paling dangkal dari

epitel gingiva dan sel-sel non keratin dari junctional yang epitel (Listgarten,

1998).

30

Tabel 2.2 Biologi Tikus Sumber Smith dan Mangkoewidjojo (1989)

Data Nilai

Lama hidup

Berat lahir

Umur disapih

Umur dewasa

Berat badan jantan dewasa

Berat badan betina dewasa

Suhu rektal

Kecepatan tumbuh

Kebituhan minum dewasa

Kebutuhan makan dewasa

Umur saat dikawinkan

Jantan

Betina

Volume maksimal zat uji peroral

2-3 tahun

5-6 gr

21 hari

40-60 hari

300-400 gr

250-300 gr

36-39 °C

5 gr per hari

± 100 ml air / 100 gr BB per hari

± 5 gr / 100 gr BB per hari

-

65-110 hari

65-110 hari

5 ml

31

BAB III

KERANGKA KONSEP DAN HIPOTESIS PENELITIAN

3.1 Kerangka Konsep

Gambar 3.1 Kerangka Konsep

Mempengaruhi :

Variabel yang diteliti :

Flavonoid, Vitamin C Sebagai antioksidan

Limfosit meningkat

Mempercepat fase Inflamasi

Muncul PMN sebagai fagositosis bakteri pada

awal luka

Fase Inflamasi

Produksi kinin dan prostaglandin

Makrofag yang diikuti limfosit

Aktivasi mengaktifasi makrofag meningkat

Makrofag menghasilkan

TGF-β dan VEGF sebagai permulaan pembentukan

formasi jaringan

Mempercepat proses penyembuhan luka

Luka pasca gingivektomi

Jus Buah Pepaya

Meningkatkan sistem pertahanan tubuh

32

3.2 Hipotesis Penelitian

3.2.1 Keterangan Kerangka Konsep

Pasca Gingivektomi, terjadi luka terbuka pada gingiva. Adanya luka

terbuka pada gingiva maka akan memicu munculnya keradangan. Tahap awal

peruses penyembuhan luka adalah pada fase inflamasi. Pada tahap awal fase

ini PMN akan muncul didaerah luka yang berperan sebagai fagositosis bakteri

tahap awal. Setelah kemunculan PMN lalu muncul makrofag yang diikuti oleh

munculnya limfosit. Makrofag dapat teraktivasi setelah limfosit menghasilkan

limfokim interferon. Saat makrofag sudah teraktivasi, sel ini akan menghasilkan

TGF-β dan VEGF yang menjadi permulaan pembentukan formasi jaringan

granulasi.

Jus buah pepaya memiliki beberapa senyawa aktif seperti flavonoid dan

vitamin C. Senyawa ini berguna sebagai antioksidan yang dapat meningkatkan

sistem pertahanan tubuh. Meningkatnya sistem pertahanan tubuh maka akan

meningkatkan jumlah sel limfosit. Jika limfosit meningkat, maka dapat

meningkatkan aktivasi makrofag. Ketika makrofag yang teraktivasi meningkat,

maka fase inlfamasi akan lebih cepat.

3.2.2 Hipotesis

Pemberian jus buah pepaya ( Carica Pepaya L.) dapat meningkatkan

limfosit pada jaringan gingiva pasca gingivektomi pada tikus wistar jantan

33

BAB IV

METODE PENELITIAN

4.1 Rancangan Penelitian

Rancangan penelitian ini menggunakan metode true eksperimental yang

dikerjakan di labolatorium secara in vivo dengan menggunakan rancangan

percobaan Randomized Group Post Test Only Design. Penelitian ini dibagi

menjadi 8 kelompok dengan 2 time series. Desain Penelitian adalah sebagai

berikut :

Keterangan:

K1 : Kel. Kontrol 1 tanpa perlakuan, pembedahan hari ke – 3

P1 : Kel. Perlakuan 1 pemberian jus buah pepaya 60% dekapitasi hari ke – 3






P6 : Kel. Perlakuan 6 pemberian jus buah papaya 100% dekapitasi hari ke – 5

RANDOM

K1 P1 P2 K2 P4 P5 P6 P3

SAMPEL

Pengamatan limfosit pada gusi pasca gingivektomi

34

4.2 Sampel

Hasil penelitian ini diharapkan dapat berguna sebagai bahan bacaan dan

menambah literatur serta pengembangan ilmu pengetahuan dibidang

farmakognosi mengenai penelitian ini adalah tikus jenis Rattus norvegicus strain

wistar yang dipelihara di Labolatorium Farmakologi Fakultas Kedokteran

Universitas Brawijaya Malang. Pemeliharaan dilakukan dalam kandang yang

bersih. Sampel penelitian dipilih berdasarkan ketentuan kriteria inklusi dan

eksklusi. Termasuk kriteria inklusi yaitu :

Tikus jenis kelamin : Jantan

Usia : 2,5 – 3 bulan

Berat badan : 250 – 300 gram

Sehat : Gerakannya yang aktif, mata jernih

Bulu : Tebal dan berwarna putih mengkilap

Termasuk kriteria ekslusi yaitu tikus yang selama penelitian tidak mampu

makan, berat badannya kurang dari 250 gram, tikus yang mengalami diare

selama penelitian ditandai dengan feses yang tidak terbentuk, tikus yang

mengalami tanda – tanda infeksi gingiva, tikus yang kondisinya menurun atau

mati selama penelitian berlangsung.

Pada penelitian ini terbagi atas 8 kelompok sampel. Jumlah sampel yang

dibutuhkan tiap perlakuan didapat dari perhitungan dengan rumus (Hanafiah,

2005) :

(t-1) (n-1)≥ 15

(8-1) (n-1)≥ 15

8n-8-1n+1≥ 15

7n-7≥ 15

35

7n≥ 22

N≥ 3,14

Sehingga sampel yang digunakan adalah 4 tikus untuk setiap kelompok

perlakuan. Total tikus yang digunakan pada 2 time series sejumlah 32 tikus.

4.3 Variabel Penelitian

Variabel dalam penelitian ini dibagi menjadi 3 variabel, yaitu :

4.3.1 Variabel Bebas

Variabel bebas dalam penelitian ini adalah jus buah pepaya dengan

konsentrasi 60%, 80% dan 100%

4.3.2 Variabel Terikat

Variabel terikatnya adalah jumlah sel limfosit.

4.3.3 Variabel Kontrol

Variabel kontrol terdiri dari nutrisi makanan dan minuman hewan coba,

kebersihan kandang, serta umur dan jenis hewan coba.

4.4 Lokasi dan Waktu Penelitian

Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Farmakologi dan Laboratorium

Patologi Anatomi, Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya Malang dalam

jangka waktu +3 bulan.

4.5 Definisi Operasional

4.5.1 Jus Buah Pepaya

Buah pepaya (Carica papaya) yang digunakan didapat dari Kebun Raya

Purwodadi. Buah yang dipilih harus matang warna kulit hijau dengan warna

36

daging buah merah – orange, konsistensi daging yang tidak terlalu keras dan

tidak terlalu lunak . Selanjutnya buah pepaya diproses menjadi jus menggunakan

juicer. Konsentrasi yang digunakan dalam pemberian jus buah pepaya ini adalah

60%, 80% dan 100%.

4.5.2 Jumlah Sel limfosit

Jumlah sel limfosit adalah banyaknya sel limfosit yang terlihat pada

preparat yang diambil dari gingiva tikus yang dipotong secara melintang dengan

pewarnaan Hematoksilin Eosin (HE) dilihat menggunakan mikroskop cahaya

dengan pembesaran 400x per 10 lapangan pandang. Limfosit memiliki ukuran 7-

12 µm, Sitoplasmanya yang sedikit tampak mengelilingi inti sebagai cincin

berwarna biru muda, Intinya gelap karena khromatinnya berkelompok dan tidak

nampak nukleolus.

4.5.3 Gingivektomi

Gingivektomi adalah membuat luka dengan memakai bur kecil pada

gingiva tikus Rattus norvegicus dengan luas 0,5cm x 0,5 cm dengan ketebalan

0,5 mm. Dengan tujuan membuat luka terbuka gingivektomi yang nantinya akan

dilihat pengaruh jus buah pepaya terhadap sel limfositnyanya. Letak gingivektomi

adalah pada rahang bawah karena memilki ketebalan epitel gingiva paling baik

dan kontur yang paling sehat.

4.6 Alat dan Bahan Penelitian

4.6.1 Alat

Beberapa alat yang diperlukan selama proses penelitian ini berlangsung

adalah timbangan OHAUS atau neraca Sartorius untuk menghitung berat badan

tikus, kandang tikus sebanyak 8 buah, juicer untuk membuat juice buah pepaya,

37

diamond bur diameter kecil untuk melakukan gingivektomi, kuret/scaller, pinset

bedah, tempat antiseptik, syringe steril, jangka sorong untuk penghitungan luas

penampang luka, kaca mulut. Selain itu juga diperlukan alat untuk pengambilan

sampel seperti gunting bedah, jarum pentul, stereoform, kapas. Alat – alat untuk

pembuatan sediaan histologi, kotak kaca/toples sebagai ruangan pembiusan

dengan eter, botol kecil untuk tempat merendam mandibula dengan formalin

sebanyak 24 buah, slide glass dan mikroskop cahaya.

4.6.2 Bahan

Bahan – bahan yang diperlukan selama penelitian ini adalah masker,

handscoon, kasa, makanan tikus berupa pakan (pelet), serat kasar, umbi –

umbian, dan jagung, serat hijau – hijauan. Selain itu juga diperlukan eter 10%

untuk sacrifice (mengorbankan) tikus, ketamin 0,2 ml untuk anastesi, aquades

steril, tabung organ 28 buah jus buah pepaya yang dibuat setiap hari, alkohol

70%, formalin 10%, Povinde iodine 3%, xilol, parafin, bahan pewarnaan

Hematoxilen Eosin (HE), asam format 50%, alkohol asam, entelan dan novalgin.

4.7 Prosedur Penelitian

4.7.1 Pengambilan Buah Pepaya

Buah pepaya diperoleh di Malang yang didapat dari Kebun Raya

Purwodadi. Buah yang dipilih harus matang warna kulit hijau dengan warna

daging buah merah – orange, konsistensi daging yang tidak terlalu keras dan

tidak terlalu lunak. Diambil dengan cara memotong secara miring buah pepaya

yang berumur sekitar 3 – 4 bulan setelah bunga mekar.

38

4.7.2 Pembuatan Jus Buah Pepaya

Pertama – tama dilakukan pemilihan buah pepaya yang akan digunakan.

Buah pepaya dipotong – potong dengan pisau dengan mengelupas tipis – tipis

kulitnya, biji dibuang dan dilakukan penghancuran buah dengan juicer dengan

penambahan sedikit air mineral atau aquades. Selanjutnya akan didapatkan jus

buah pepaya dengan konsentrasi 100%.

Untuk mendapatkan konsentrasi yang diinginkan menggunakan rumus.

M1 V1 = M2 V2

Keterangan :

M : Massa buah dalam persen (%)

V : volume aquades dalam milliliter (ml)

Buah papaya yang di jus tanpa menggunakan air = 100 %

Konsentrasi jus:

Konsentrasi 80% :

V1 x 100 % = 100 ml x 80 %

V1 = 80 ml

Vair = 100ml - 80 ml

= 20

campuran 80 ml jus buah papaya dengan 20ml aquades

Konsentrasi 60% :

V1 x 80 % = 80 ml x 60 %

V1 = 60 ml

39

Vair = 80 ml – 60 ml

= 20 ml

campuran 60 ml jus buah papaya dengan 20ml aquades

Maka akan didapatkan jus buah pepaya dengan konsentrasi 60%, 80%, 100%.

4.7.3 Pemberian Jus Buah Pepaya

Pemberian jus buah pepaya diberikan satukali per hari secara per oral

setelah gingivektomi. Pemberian pada kelompok perlakuan I (60%), perlakuan II

(80%) dan perlakuan III (100%) per oral dengan menggunakan spuit yang

ujungnya dipasang sonde gastric sehingga dapat masuk dalam mulut tikus

hingga ke lambung. Konsentrasi yang diberikan berdasarkan konsentrasi

penelitian sebelumnya tentang efek perasan buah kepel dalam mempercepat

penyembuhan luka secara klinis (Pribadi, 2014). Pemilihan konsentrasi pada

buah pepaya sama dengan konsentrasi perasan air buah kepel, karena memiliki

kandungan yang sama dalam proses penyembuhan luka. Yaitu saponin dan

flavonoid. Jus diberikan sebanyak satu kali dalam sehari, dilakukan selama 5

hari. Pemberian jus disesuaikan dengan ukuran volume lambung tikus yaitu 5ml.

Sehingga setiap tikus akan diberikan jus dengan volume 2ml. (Febriani, 2011).

4.7.4 Prosedur Gingivektomi pada Hewan Coba

Prosedur pembuatan luka gingiva dilakukan pada tikus Wistar Rattus

novegicus yang tidak mengalami hiperplasia gingiva, tahapan yang dilakukan

antara lain :

1. Hewan coba diberikan anestesi menggunakan ketamine 0,2 ml.

2. Hewan coba diaplikasikan antiseptik pada daerah perlakuan

40

3. Insisi gingiva di regio anterior bawah. Penggunaan alat diamond bur

diameter kecil.

4. Kontrol perdarahan menggunakan kasa. Irigasi dengan antiseptic

5. Pemberian jus buah pepaya dengan konsentrasi 60%, 80% dan 100%.

Untuk kontrol dibiarkan tanpa pemberian jus buah pepaya.

6. Perawatan pasca gingivektomi dilakukan dengan pemberian pakan yang

lunak.

Gambar 4.1 Contoh Prosedur Gingivektomi pada Manusia Gambar dari hasil case base

Sumber: Oneallena. Quizlet.com

Keterangan gambar:

1. Kondisi gingival yang hiperplasia

2. Pemotongan bagian jaringan yang hyperplasia

3. Pengambilan kalkulus atau penyebab hyperplasia

4. Pengambilan sisa jaringan yang hyperplasia pada daerah marginal

atau papilla

41

5. Merapikan bagian marginal dan kontur gingiva dengan menggunakan

bur

6. Hasil prosedur gingivektomi

7. Pemberian periodontal pack sebagai pelindung luka jaringan

8. Hasil setelah penyembuhan

4.7.5 Pengambilan Sampel Jaringan

Pengambilan sampel jaringan dilakukan pada hari keenam. Proses

mengorbankan tikus dengan menggunakan eter 10%. Tikus yang telah diberi

perlakuan, dimasukkan kedalam toples kaca yang berisi kapas dan eter 10%.

Tetapi mengorbankan tikus dengan menggunakan eter kini sudah jarang atau

tidak dipakai lagi karena dapat membahayakan operator. Maka cara lainnya

adalah cervical dislocation. Apabila tikus yang dikorbankan sudah tidak

menunjukan tanda-tanda kehidupan atau mati, maka dipersiapkan proses

dekapitasi. Dekapitasi menggunakan gunting bedah. Bagian yang diambil adalah

mandibula tikus yang telah digingivektomi. Jasad tikus strain wistar jantan

kemudian dikuburkan secara layak. Mandibula direndam dalam botol – botol

yang berisi formalin 10% sebelum diproses ketahap selanjutnya. Kemudian

dilakukan pembuatan sediaan di labolatorium patologi anatomi dengan

menggunakan teknik pewarnaan HE.

4.7.5.1 Pembuatan Preparat dan Pengamatan Histologi Luka Gingiva

Pembuatan preparat dilakukan dengan estimasi setiap luka dengan 2 kali

pembuatan preparat. Sehingga dengan 4 perlakuan, 1 sampel dan 1 hari

pengamatan, masing – masing 4 preparat untuk setiap perlakuan akan

membutuhkan total 32 preparat.

42

Pengambilan jaringan gingiva beserta tulang rahang tikus yang telah

dilakukan prosedur gingivektomi dengan pemotongan secara melintang. Jaringan

gingiva tersebut dimasukkan ke dalam botol organ dengan Buffered Neutral

Formalin (BNF) 10% dengan waktu perendaman minimal 2 hari bertujuan

sebagai fiksasi jaringan dan diberi label penamaan sesuia konsentrasi perlakuan

dan hari pembedahan. Setelah itu diberikan larutan dekalsifikasi menggunakan

asam format 50% proses dekalsifikasi ini dilakukan selama 24 – 48 jam dan

harus diganti setiap hari, setelah proses dekalsifikasi selesai pencucian air

mengalir selama 3 – 8 jam untuk menghilangkan sisa bahan dekalsifikasi.

Kemudian dilakukan dehidrasi dengan merendam pada alkohol bertingkat, yaitu

pada konsetrasi 30%, 50%, 70%, 85%, 95% dengan masing – masing selama 30

menit. Stelah itu dilakukan clearing dengan xilol 2x selama 1 jam kemudian

proses infiltrasi dengan paraffin lunak pada suhu 42 – 46 C selama 2 x 1 jam.

Lalu blocking dengan paraffin keras pada suhu 46 – 52 C selama 1 jam

dilanjutkan sliding pada rotari mikrotom 4 – 6 um kemudian dipanaskan pada

suhu 60C. Selanjutnya dilakukan deparafinisasi yaitu dengan perendaman

dengan xilol 2x selama 5 menit, kemudian pada alkohol bertingkat dengan urutan

2x alkohol absolut, 30%, 50%, 70%, 85%, 95% dan H2O; masing – masing

selama 3 menit. Langkah terakhir dilakukan pewarnaan Hematoxilen – Eosin

(HE). Pertama pemberian Haris Hematoxilen selama 15 menit, lalu ditetesi

alkohol asam selama 3-10 detik dilanjutkan dengan pemberian larutan amunium

selama 3-10 detik. Kemudian diberi counter staining selama 15-20 detik

dilanjutkan dengan dehidrasi pada alkohol bertingkat. Terakhir pemberian xilol

selama 5 menit dan mounting menggunakan entelan kemudian pengamatan

dilakukan dengan menggunakan mikroskop

43

Gambar 4.2 Limfosit pada Gingiva Sumber: Nitawati, Ni Putu et.all. 2014. Respon Limfosit T Sitotoksik Pada Gingivitis Setelah

Pemberian Kurkumin.

4.7.6 Prosedur Pengambilan Data

Gingiva yang telah di gingivektomi dibuat sediaan preparat histologi

dengan teknik pewaranaan HE. Sampel pada sediaan dibagi menjadi 10 lapang

pandang dan sel limfosit dihitung di setiap lapang pandang menggunakan

mikroskop cahaya, pembesaran 400x dan presentase dibandingkan percepatan

penyembuhan dalam hitungan hari dan jumlah limfosit antara masing – masing

konsentrasi.

4.8 Alur Penelitian

Pada tahap awal penelitian, dilakukan pembuatan sediaan berupa jus

buah pepaya dengan berbagai konsentrasi, persiapan alat dan bahan penelitian,

kemudian perlakuan adaptasi hewan coba selama 1 minggu. Dilakukan

pemilihan sampel teknik randomisasi lalu sampel dikelompokkan, setelah alat

dan bahan dipersiapkan, dilanjutkan dengan melakukan prosedur gingivektomi

pada seluruh tikus, setelah itu pemberian perlakuan sesuai dengan kelompok

yang sudah ditentukan. Setelah perlakuan maka tikus dikelompokkan dalam

kandang dengan masing – masing kandang 3 ekor tikus berdasarkan kelompok

44

perlakuan. Dilakukan pembedahan pada hari ke 3 dan 5 untuk pengamatan

limfosit. Pembuatan preparat dan penghitungan sel limfosit. Selanjutnya

dilakukan analisis data dan pembuatan kesimpulan.

45

K 1

P 1

P 5

P 4

K 2

P 3

P 2

P 6

Prosedur Pengambilan Data

Analisis data

Pengamatan

Sampel berupa irisan tipis dari gingival pasca gingivektomi

Sampel dibawa ke Lab Patologi Anatomi

Adaptasi selama 1 minggu

Tikus Wistar (Rattus norvegicus)Pengamatan

sampel di bawah mikroskop

Pembagian hewan coba dalam 8 kelompok

Pengambilan sampel jaringan

Tikus dengan perlakuan gingivektomi pembedahan H-3

Tikus dengan perlakuan gingivektomi + jus buah pepaya 40%

pembedahan H-3


pembedahan H-3


pembedahan H-3

Tikus dengan perlakuan gingivektomi pembedahan H-5


pembedahan H-5

Tikus dengan perlakuan gingivektomi +jus buah pepaya 60%

pembedahan H-5


pembedahan H-5

Dilakukan anestesi dan dekapitasi pada hari ke 3 dan 5

46

4.9 Analisis Data

Hasil pengukuran jumlah yang positif pada tikus kontrol dan perlakuan

dianalisa secara statistik dan dilakukan uji hipotesis kompratif dan korelatif

adalah sebagai berikut :

a. Uji One-Way Anova : bertujuan untuk membandingkan nilai rata – rata dari

masing – masing kelompok perlakuan dan mengetahui bahwa minimal ada

dua kelompok yang berbeda signifikan.

b. Post Hoc Tes (Uji Least Significant Difference) : Bertujuan untuk mengetahui

kelompok mana yang berbeda secara signifikan dari hasil tes Anova. Uji

Post Hoc yang digunakan adalah uji Tukey dengan tingkat kemaknaan 95%

(p=0,05).

Uji Korelasi Pearson : Untuk mengetahui besarnya persamaan secara kualitatif

kelompok yang berbeda secara signifikan yang telah ditentukan sebelumnya dari

hasil Uji Post Hoc (LSD).

47

BAB V

HASIL PENELITIAN DAN ANALISA DATA

5.1 Hasil Penelitian

Penelitian menggunakan tiga kelompok hewan coba. Hewan coba yang

digunakan adalah Tikus Wistar Jantan (Rattus norvegicus) yaitu kelompok positif

dan kelompok perlakuan. Kelompok kontrol positif merupakan kelompok yang

diberikan perlakuan gingivektomi menggunakan bur dengan ukuran diameter

0,5mm pada gingival bagian anterior, tanpa diberikan jus pepaya setelah

perlakuan selama tiga hari yaitu kelompok K3 dan lima hari yaitu kelompok K5.

Kelompok perlakuan merupakan kelompok yang diberikan perlakuan

gingivektomi menggunakan bur dengan ukuran diameter 0,5mm pada gingival

bagian anterior, dan diberikan jus pepaya (Caricca papaya L) secara oral setelah

perlakuan selama tiga hari dengan konsentrasi jus 60% merupakan kelompok

perlakuan P1, 80% merupakan kelompok perlakuan kelompok perlakuan P2 dan

100% merupakan kelompok perlakuan P3 . Perlakuan lima hari dengan

konsentrasi jus 60% merupakan kelompok perlakuan P4, konsentrasi jus 80%

merupakan kelompok perlakuan P5 dan konsentrasi jus 100% merupakan

kelompok perlakuan P6.

Sebelum dilakukan penelitian ini, dilakukan uji pendahuluan terlebih

dahulu. Uji pada 4 hewan coba dengan perlakuan untuk kontrol positif dan

perlakuan yang diberi jus buah pepaya dengan konsentrasi 40%, 60% dan 80% ,

kemudian diamati secara klinis. Namun tidak ada perbedaan pada kontrol positif

dan hewan coba perlakuan yang diberikan jus buah pepaya (Carica papaya L)

dengan konsentrasi 40%, sehingga penelitian ini menggunakan konsentrasi 60%,

80% dan 100%.

48

Sampel didapatkan dengan mengambil jaringan gingival pada tikus

(Rattus norvegicus)yang didekapitasi pasca gingivektomi.Lalu dilakukan

pembuatan preparat dengan pewarnaanmenggunakan Haematoxylin-Eosin.

Untuk mengamati gambar hasil pewarnaan Haematoxylin-Eosin diamati

menggunakan software OlyVIA (Olympus Viewer for Imaging Applications).

dengan perbesaran 400 kali.

Berikut ini adalah gambaran dari limfosit pada irisan gingiva pasca

gingivektomi yang didekapitasi pada hari ketiga. Gambaran limfosit yang tampak

berbentuk bulatatau oval dengan sitoplasma berwarna biru keunguan.

Gambar 5.1 Gambaran limfosit pada irisan gingival tikus pasca gingivektomi kelompok kontrol positif hari ke-3 dengan pengecatan HE dan perbesaran 400x

Keterangan : O =gambaran limfosit

49

Gambar 5.2 Gambaran limfosit pada irisan gingival tikus pasca gingivektomi kelompok P1 hari ke-3 dengan pengecatan HE dan perbesaran 400x

Keterangan: O = gambaran limfosit

Gambar 5.3 Gambaran limfosit pada irisan gingival tikus pasca gingivektomi kelompokP2 hari ke-3 dengan pengecatan HE dan perbesaran 400x


Gambar 5.4 Gambaran limfosit pada irisan gingival tikus pasca gingivektomi kelompokP3 hari ke-3 dengan pengecatan HE dan perbesaran 400x


50

Berikut ini adalah gambaran dari limfosit pada irisan gingiva pasca

gingivektomi yang didekapitasi pada hari kelima. Gambaran limfosit yang tampak

berbentuk bulatatau oval dengan sitoplasma berwarna biru keunguan..

Gambar 5.5 Gambaran limfosit pada irisan gingival tikus pasca gingivektomi kelompok kontrol positif hari ke-5 dengan pengecatan HE dan perbesaran 400x




51



Gambar 5.8 Gambaran limfosit pada irisan gingival tikus pasca gingivektomi P6 hari ke-5 dengan pengecatan HE dan perbesaran 400x


52

Kelompok Jumlah limfosit hari

ke- 3

K1 30.8

K1 29.8

K1 30.4

K1 30.2

P1 34.3

P1 31.0

P1 30.4

P1 32.0

P2 32.4

P2 30.8

P2 31.7

P2 34.1

P3 35.2

P3 33.7

P3 31.6

P3 37.3

Tabel 5.1 Jumlah limfosit hari ke-3

Kelompok Jumlah limfosit hari

ke -5

K2 29.8

K2 32.0

K2 31.6

K2 32.5

P4 34.5

P4 32.5

P4 34.0

P4 30.8

P5 33.0

P5 32.5

P5 36.4

P5 31.3

P6 38.3

P6 36.0

P6 33.3

P6 35.2

Tabel 5.2 Jumlah limfosit hari ke-5

Keterangan








P6 : Kel. Perlakuan 6 pemberian jus buah papaya 80% dekapitasi hari ke – 5

53

Tabel 5.3 Histogram efektifitas dari jus buah pepaya terhadap peningkatan limfosit pada gingival pasca gingivektomi

5.2 Analisis Data

Data hasil penelitian berupa jumlah sel limfosit menggunakan analisa

metode One-Way Anova. Sebelum dilakukan pengujian dengan One-Way

Anova., dilakukan uji normalitas dan uji homogenitas ragam. Uji normalitas yang

digunakan adalahShapiro-Wilkkarena jumlah data yang digunakan kurang dari 50

data dan uji homogenitas menggunakan Levene’s Test.Hipotesis ditentukan

melalui suatu rumusan pada uji One-Way Anova. yaitu Ho diterima bila nilai

signifikansi lebih dari 0,05. Ho dari penelitian ini adalah Jus Buah Pepaya (Carica

papaya)tidak berpengaruh terhadap jumlah limfosit pada proses penyembuhan

luka pada gingivapasca gingivektomi tikus wistar (Rattus norvegicus), sedangkan

H1 adalah Jus Buah Pepaya (Carica papaya) berpengaruh terhadap jumlah

30.3

31.925 32.25

34.45

31.47532.95 33.3

35.7

0

5

10

15

20

25

30

35

40

Kontrol Positif Jus 60% Jus 80% Jus 100%

Hari ke-3

Hari ke-5

54

limfosit pada proses penyembuhan pasca gingivektomi tikus wistar (Rattus

norvegicus).

5.2.1 Uji Normalitas Data

Pengujian normalitas dilakukan dengan menggunakan uji Shapiro-Wilk.

Uji normalitas terpenuhi jika nilai signifikansi hasil penghitungan p>0,05.

Didapatkan hasil pengujian normalitas sebagai berikut.

Tabel 5.4 Uji Normalitas hari ke-3

Tabel 5.5 Uji Normalitas hari ke-5

Berdasarkan pada tabel diatas, didapatkan nilai signifikansi sebesar

0,069 pada hari ketiga dan 0,760 pada hari kelima. Jika nilai signifikansi

dibandingkan dengan p=0,05 maka dapat disimpulkan bahwa nilai signifikansi

lebih besar daripada 0,05. Sehingga, dari pengujian ini dapat diketahui bahwa uji

normalitas terpenuhi dan data berdistribusi normal.

5.2.2 Uji Homogenitas Ragam

Pengujian homogenitas ragam dilakukan dengan menggunakan Levene’s

Test. Uji homogenitas ragam dikatakan terpenuhi jika nilai signifikansi hasil

penghitungan p>0,05. Dari hasil analisis data didapatkan pengujian homogenitas

ragam sebagai berikut.

Tests of Normality

.148 16 .200* .965 16 .760J Limfosit hari-5Statistic df Sig. Statistic df Sig.

Kolmogorov-Smirnova

Shapiro-Wilk

This is a lower bound of the true significance.*.

Lilliefors Significance Correctiona.

Tests of Normality

.168 16 .200* .896 16 .069J Limfosit hari-3Statistic df Sig. Statistic df Sig.

Kolmogorov-Smirnova

Shapiro-Wilk

This is a lower bound of the true significance.*.

Lilliefors Significance Correctiona.

55

Test of Homogeneity of Variances

J Limfosit hari-3

1.998 3 12 .168

Levene

Statistic df1 df2 Sig.

Tabel 5.6 Uji Homogenitas hari ke-3

Tabel 5.7 Uji Homogenitas hari ke-5

Data pada Tabel menunjukkan koefisien Levene statistissebesar

1,998dengan nilai signifikansi sebesar 0,168 pada hari ketiga kemudian koefisien

Levene statistissebesar 0,394 dan nilai signifikasi 0,759 pada hari kelima. Jika

nilai signifikansi dibandingkan dengan p=0,05 maka dapat disimpulkan bahwa

nilai signifikansi lebih besar daripada 0,05. Sehingga, dari pengujian ini dapat

diketahui bahwa uji homogenitas ragam telah terpenuhi.

5.2.3 Uji One-Way Anova

Setelah kedua pengujian yang melandasi uji One-Way Anova telah

terpenuhi, selanjutnya dilakukan pengujian untuk mengetahui perubahan jumlah

limfosit. Sebagaimana telah dijelaskan dalam metode penelitian, hewan coba

yang telah digingivektomi akan diberi jus buah pepaya dengan konsentrasi 60%,

80% dan 100% sebanyak 3 kali sehari, kemudian pada kelompok kontrol positif

hewan coba hanya dilakukan gingivektomi saja. Berikut hasil penghitungan uji

one way Anova.

Test of Homogeneity of Variances

J Limfosit hari-5

.394 3 12 .759

Levene

Statistic df1 df2 Sig.

56

ANOVA

J Limfosit hari-3

34.987 3 11.662 4.297 .028

32.567 12 2.714

67.554 15

Between Groups

Within Groups

Total

Sum of

Squares df Mean Square F Sig.

ANOVA

J Limfosit hari-5

36.802 3 12.267 3.710 .043

39.677 12 3.306

76.479 15

Between Groups

Within Groups

Total

Sum of

Squares df Mean Square F Sig.

Tabel 5.8 Uji Anova hari ke-3

Tabel 5.9 Uji Anova hari ke-5

Data pada Tabel menunjukkan nilai p = 0,028 pada hari ketiga dan p =

0,043 pada hari kelima menunjukan bahwa nilai signifikansi lebih kecil daripada

p = 0,05, maka Ho ditolak sehingga dapat disimpulkan bahwa penggunaan Jus

Buah Pepaya (Carica papaya) berpengaruh terhadap jumlah limfosit pada proses

penyembuhan luka gingival pasca gingivektomipada tikus wistar (Rattus

norvegicus). Kesimpulan yang dapat diambil berdasarkan uji One-Way anova

adalah terdapat perbedaan yang jumlah peningkatan limfosit dari tiap kelompok.

5.2.4 Uji Post Hoc Test

Analisis mengenai perbedaan rata-rata dari ketiga kelompok dapat

diketahui melalui uji Post-Hoc Tukey. Metode Post-Hoc yang digunakan adalah

Uji High Standard Deviation (HSD). Pada uji ini, suatu data dikatakan berbeda

secara bermakna apabila nilai signifikansi p

57

Kelompok Kelompok Pembanding P Keterangan

K3 P1 (60%) 0.525 Tidak signifikan

P2 (80%) 0.378 Tidak signifikan

P3 (100%) 0.018 Signifikan

P1 K3 0.525 Tidak signifikan

P2 0.992 Tidak signifikan


P2 K3 0.378 Tidak signifikan



P3 K3 0.018 Signifikan



Tabel 5.10 U

PENGARUH JUS BUAH PEPAYA (Carica papaya L) …repository.ub.ac.id/7287/1/Anna Mariana Zainnuriah...

Documents

Transcript of PENGARUH JUS BUAH PEPAYA (Carica papaya L) …repository.ub.ac.id/7287/1/Anna Mariana Zainnuriah...