PENGARUH GEL GETAH BUAH NANGKA (Artocarpus …repository.ub.ac.id/167959/1/Himmah Islaura Mas’udi...

PENGARUH GEL GETAH BUAH NANGKA (Artocarpus heterophyllus Lam.)TERHADAP KETEBALAN EPITEL PADA PROSES PENYEMBUHAN ULSER

TRAUMATIK TIKUS PUTIH (Rattus norvegicus)

SKRIPSI

Untuk Memenuhi Persyaratan MemperolehGelar Sarjana Kedokteran Gigi

Oleh:

Himmah Islaura Mas’udi

NIM 145070401111018

PROGRAM STUDI SARJANA KEDOKTERAN GIGIFAKULTAS KEDOKTERAN GIGI

UNIVERSITAS BRAWIJAYAMALANG

2018

viii

DAFTAR ISI

Halaman Judul....................................................................................................... i

Halaman Persetujuan ............................................................................................ ii

Halaman Pengesahan ........................................................................................... iii

Kata Pengantar...................................................................................................... iv

Abstrak ................................................................................................................ vi

Abstract ................................................................................................................ vii

Daftar Isi ................................................................................................................ viii

Daftar Gambar....................................................................................................... xii

Daftar Tabel........................................................................................................... xiii

Daftar Lampiran..................................................................................................... xiv

Daftar Singkatan.................................................................................................... xv

BAB I. PENDAHULUAN1.1 Latar Belakang.................................................................................. 1

1.2 Rumusan Masalah ............................................................................ 4

1.3 Tujuan Penelitian .............................................................................. 4

1.3.1 Tujuan Umum.......................................................................... 4

1.3.2 Tujuan Khusus ........................................................................ 4

1.4 Manfaat Penelitian ............................................................................ 5

1.4.1 Manfaat Akademis................................................................... 5

1.4.2 Manfaat Praktis ....................................................................... 5

BAB II. TINJAUAN PUSTAKA2.1 Ulser Traumatik................................................................................. 6

2.1.1 Definisi .................................................................................... 6

2.1.2 Klasifikasi ................................................................................. 6

2.1.3 Gambaran Klinis....................................................................... 10

2.1.4 Gambaran Histopatologi........................................................... 10

2.1.5 Diagnosis Banding ................................................................... 11

2.1.6 Penatalaksanaan...................................................................... 11

ix

2.2 Penyembuhan Luka .......................................................................... 12

2.2.1 Definisi .................................................................................... 12

2.2.2 Proses Penyembuhan Luka..................................................... 12

2.3 Jaringan Epitel Rongga Mulut ........................................................... 20

2.4 Nangka (Artocarpus heterophyllus) ................................................... 23

2.4.1 Taksonomi............................................................................... 23

2.4.2 Morfologi ................................................................................. 24

2.4.3 Habitat dan Daerah Distribusi.................................................. 24

2.4.4 Kandungan.............................................................................. 24

2.4.5 Sifat dan Khasiat ..................................................................... 25

2.4.6 Getah nangka.......................................................................... 26

2.4.7 Kandungan getah nangka........................................................ 27

2.5 Gel ................................................................................................... 30

2.6 Tikus Putih (Rattus Norvegicus) ........................................................ 30

BAB III. KERANGKA KONSEP3.1 Kerangka Konsep ............................................................................. 33

3.2 Hipotesis Penelitian .......................................................................... 35

BAB IV. METODE PENELITIAN4.1 Desain Penelitian .............................................................................. 36

4.2 Sampel Penelitian ............................................................................. 37

4.2.1 Pemilihan Binatang Coba dan Teknik Randomisasi................. 37

4.2.1.1 Kriteria Inklusi.............................................................. 37

4.2.1.2 Kriteria Eksklusi........................................................... 38

4.2.2 Estimasi Jumlah Pengulangan ................................................ 38

4.3 Variabel Penelitian ............................................................................ 38

4.3.1 Variabel Independen ............................................................... 39

4.3.2 Variabel Dependen.................................................................. 39

4.3.3 Variabel Terkendali.................................................................. 39

4.4 Tempat dan Waktu Penelitian ........................................................... 39

x

4.5 Alat dan Bahan Penelitian ................................................................. 40

4.5.1 Pemeliharaan Hewan Coba..................................................... 40

4.5.2 Pembuatan Gel Getah Buah Nangka (Artocarpus Heterophyllus) 40

4.5.3 Perlakuan Hewan Coba .......................................................... 40

4.5.4 Pemeriksaan Histologi ............................................................ 41

4.6 Definisi Operasional .......................................................................... 41

4.6.1 Getah Buah Nangka ............................................................... 41

4.6.2 Gel Getah Buah Nangka ......................................................... 41

4.6.3 Ulser Traumatik ...................................................................... 42

4.6.4 Ketebalan Epitel ..................................................................... 42

4.7 Prosedur Penelitian........................................................................... 43

4.7.1 Persiapan Hewan Coba........................................................... 43

4.7.2 Pemeliharaan Hewan Coba..................................................... 43

4.7.3 Determinasi Buah Nangka........................................................ 44

4.7.4 Pengambilan Getah Buah Nangka ........................................... 44

4.7.5 Pembuatan Gel Topikal ........................................................... 44

4.7.6 Pembuatan Ulser Traumatik .................................................... 46

4.7.7 Pemberian Gel Getah Nangka................................................. 47

4.7.8 Pembedahan Hewan Coba...................................................... 47

4.7.9 Prosedur Pembuatan Preparat ................................................ 47

4.7.10 Pengamatan Sediaan Histologi Mukosa Labial Rahang Bawah

Rattus norvegicus ....................................................................... 48

4.8 Analisis Data ..................................................................................... 49

4.9 Skema Prosedur Penelitian ............................................................... 51

4.9.1 Pembuatan Gel Getah Buah Nangka ...................................... 51

4.9.2 Uji Efektivitas Gel Getah Buah Nangka 0.5%, 1% dan 2% ...... 52

BAB V. HASIL PENELITIAN DAN ANALISIS DATA5.1 Hasil Penelitian .................................................................................. 53

5.2 Analisis Data ...................................................................................... 58

5.2.1 Uji Normalitas Data................................................................... 58

xi

5.2.2 Uji Homogenitas Ragam........................................................... 58

5.2.3 Uji One-way Anova................................................................... 59

5.2.4 Uji Post Hoc Multiple Comparison ............................................ 59

5.2.5 Uji Korelasi Pearson ................................................................ 60

5.2.6 Uji Korelasi Regresi .................................................................. 61

5.2.7 Uji Independent T-test .............................................................. 61

BAB VI. PEMBAHASAN ...................................................................................... 62

BAB VII. PENUTUP7.1 Kesimpulan . ...................................................................................... 67

7.1 Saran . ............................................................................................... 68

Daftar Pustaka....................................................................................................... 69

Lampiran ............................................................................................................... 76

xii

DAFTAR GAMBAR

Gambar 2.1 Ulser Traumatik akibat trauma elektrik ............................................... 7

Gambar 2.2. Ulser traumatik akibat makanan yang panas..................................... 8

Gambar 2.3. Ulser traumatik akut .......................................................................... 9

Gambar 2.4. Ulser traumatik kronis ....................................................................... 9

Gambar 2.5. Gambaran histopatologis dari mukosa bukal tikus yang dilakukan ulserasi

satu hari sebelumnya ........................................................................ 11

Gambar 2.6. Gambaran histopatologis dari ulser kronis ........................................ 11

Gambar 2.7 Fase yang terjadi dalam penyembuhan luka ...................................... 13

Gambar 2.8 Reepitelisasi yang terjadi pada penyembuhan luka............................ 19

Gambar 2.9 Lapisan-lapisan pada epitel mukosa rongga mulut manusia berdasarkan

tipenya .............................................................................................. 22

Gambar 2.10. Buah Nangka ................................................................................. 23

Gambar 2.11. Getah buah nangka ........................................................................ 26

Gambar 2.12. Rattus norvegicus ........................................................................... 31

Gambar 5.1 Pengukuran ketebalan epitel ..................................................... ......... 55

Gambar 5.2 Ketebalan epitel pada hari ke-3 dengan perbesaran mikroskop 400x. 55

Gambar 5.3 Ketebalan epitel pada hari ke-7 dengan perbesaran mikroskop 400x 56

Gambar 5.4 Diagram rata-rata ketebalan lapisan epitel pada masing-masing

kelompok...................................................................................... 57

xiii

DAFTAR TABEL

Tabel 2.1. Kandungan Artocarpus heterophyllus Lam............................................ 24

Tabel 2.2. Aktivitas Farmakologik Artocarpus heterophyllus Lam. ......................... 26

Tabel 4.1 Formulasi sediaan gel getah buah nangka............................................. 43

Tabel 5.1 Hasil pengujian gel).......................................................................... 53Tabel 5.2 Hasil perhitungan rerata ketebalan epitel pada tikus putih (Rattus

norvegicus)................................................................ ...................... 57

xiv

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1 Pernyataan Keaslian Tulisan............................................................... 77

Lampiran 2 Hasil Uji Statistik ................................................................................. 78

Lampiran 3 Foto Bahan dan Alat Penelitian........................................................... 92

Lampiran 4 Ethical Clearance ................................................................................ 94

Lampiran 5 Determinasi Nangka (Artocarpus heterophyllus Lam.) ....................... 95

xv

DAFTAR SINGKATAN

EGF : Epidermal Growth Factor

FGF : Fibroblast Growth Factor

GAGs : Glikosaminoglikan

HE : Haematoxylin-Eosin

HGF : Hepatocyte Growth Factor

IFN- : Interferon -

IGF-1 : Insulin-like Growth Factor 1

IL-2 : Interleukin-2

IL-6 : Interleukin-6

KGF : Keratinocyte Growth Factor

Lam. : Lamarck

MMP : Matriks metalloproteinase

NO : Nitric Oxide

PDGF : Platelet Derived Growth Factor

TGF-α : Transforming Growth Factor Alfa

TGF-β : Transforming Growth Factor Beta

VEGF : Vascular Endothelial Growth Factor

Th1 : T helper 1

vi

ABSTRAK

Mas’udi, Himmah Islaura. 2018. Pengaruh Gel Getah Buah Nangka (Artocarpusheterophyllus Lam.) terhadap Ketebalan Epitel pada ProsesPenyembuhan Ulser Traumatik Tikus Putih (Rattus Norvegicus). Skripsi,Program Studi Sarjana Kedokteran Gigi, Fakultas Kedokteran Gigi,Universitas Brawijaya, Malang. Pembimbing: (1) Dr. drg. Nur Permatasari,MS. (2) drg. Nenny Prasetyaningrum, M. Ked.

Ulser traumatik merupakan lesi di rongga mulut yang sering dijumpai.Epitelisasi mempunyai peran penting dalam perbaikan jaringan. Getahbuah nangka memiliki kandungan flavonoid, tanin, alkaloid, dan artocarpain-Hyang bermanfaat bagi proses penyembuhan luka. Penelitian ini bertujuan untukmengetahui pengaruh gel getah buah nangka (Artocarpus heterophyllus Lam.)terhadap ketebalan epitel pada proses penyembuhan ulser traumatik tikus putih(Rattus norvegicus). Metode penelitian yang digunakan adalah Randomized PostTest Only Control Group Design. Objek penelitian adalah 40 tikus Rattusnorvegicus jantan yang dibagi menjadi 8 kelompok, yaitu kelompok kontrol(pemberian senyawa pembawa gel tanpa getah), kelompok perlakuan 1,perlakuan 2, dan perlakuan 3 (pemberian gel getah buah nangka masing-masingdengan dosis 0,5%, 1%, dan 2%) dengan 2 time series yaitu hari ke-3 dan harike-7 setelah induksi panas. Variabel yang diteliti adalah ketebalan epitel padajaringan ulser traumatik mukosa labial tikus yang diukur dari sediaan preparathistologis dengan pengecatan hematoxylin-eosin. Analisis data menggunakanuji One-Way Anova menunjukkan bahwa perbedaan ketebalan epitelantarkelompok signifikan pada hari ke-3 (p0,05). Kesimpulan pada penelitian ini yaitu gel getah buah nangkaberpengaruh terhadap ketebalan epitel pada proses penyembuhan ulsertraumatik tikus putih (Rattus norvegicus) yang diamati hari ke-3 pasca induksipanas.

Kata Kunci: Ulser traumatik, getah buah nangka, penyembuhan luka, ketebalanepitel

vii

ABSTRACT

Mas’udi, Himmah Islaura. 2018. The Effect of Jackfruit (Artocarpus heterophyllusLam.) Latex Gel on the Epithelium Thickness of Traumatic Ulcer WoundHealing Process of White Rats (Rattus norvegicus). Bachelor Thesis,Faculty of Dentistry, Brawijaya University, Malang. Supervisors: (1) Dr.drg. Nur Permatasari, MS. (2) drg. Nenny Prasetyaningrum, M. Ked.

Traumatic ulcer is a lesion frequently found in the oral cavity.Epithelialization process has an important role to the injured tissue repair.Jackfruit latex contains flavonoid, tanin, alkaloid, and artocarpain-H that hasvarious benefits on the wound healing process. The aim of this research is tounderstand the effect of jackfruit (Artocarpus heterophyllus Lam.) latex gel on theepithelium thickness of traumatic ulcer wound healing process of white rats(Rattus norvegicus). The method used in this study was the Randomized PostTest Only Control Group Design. The object used in this research were 40 maleRattus norvegicus rats divided into 8 groups, which are the control group (givencontrol gel without jackfruit latex), treatment group 1, treatment group 2, andtreatment group 3 (given jackfruit latex gel with the dose of 0,5%, 1%, and 2%,respectively), each on 2 time series, which are on day 3 dan day 7 after heatinduction. The variables tested were epithelium thickness of traumatic ulcer onthe inner lip mucosa, measured by hematoxylin-eosin stained histological slides.The data were then analyzed using One Way Anova, showing that the epitheliumthickness differs significantly between day 3 groups (p0,05). It can be concluded from this researchthat jackfruit (Artocarpus heterophyllus Lam.) latex gel effects the epitheliumthickness of traumatic ulcer wound healing process of white rats (Rattusnorvegicus) on day 3 of heat induction.

Keywords: Traumatic ulcer, jackfruit latex, wound healing, epithelium thickness

1

BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Ulser adalah suatu kerusakan lapisan epitel yang ditutupi oleh

gumpalan fibrin, dengan warna kuning keputihan dan berbatas jelas

(Greenberg et al., 2008). Ulser dapat disebabkan karena berbagai hal,

diantaranya karena kelainan genetik, infeksi, imunologis, neoplasma,

ataupun karena trauma. Ulser yang disebabkan oleh karena trauma disebut

sebagai ulser traumatik. Prevalensi terjadinya ulser pada rongga mulut

diperkirakan mencapai lebih dari 25% dari populasi di seluruh dunia (Paleri

et al., 2010). Ulser traumatik menimbulkan rasa sakit pada daerah lesi dan

bisa bertahan selama beberapa hari, sehingga menyebabkan gangguan

bicara, pengunyahan, dan penelanan yang berpengaruh terhadap

penurunan kondisi tubuh apabila terjadi dalam jangka waktu lama. Sebagian

besar ulser ini disebabkan karena mukosa oral yang tergigit, sehingga

nampak pada regio-regio yang biasanya diapit oleh gigi-geligi, yaitu mukosa

labial bawah, lidah, dan mukosa bukal (Regezi et al., 2012).

Selama ini, perawatan yang sering dilakukan pada kasus ulser

traumatik adalah dengan kortikosteroid topikal. Sediaan topikal berupa gel

atau salep banyak dipilih karena memiliki onset kerja yang cepat dan mudah

digunakan (Mathew, 2015). Salah satu kortikosteroid topikal yang sering

digunakan adalah triamcinolone acetonide, karena memiliki kemampuan

sebagai antiinflamasi, antialergi, dan analgesik sehingga dapat

mempercepat proses penyembuhan ulser dan mengurangi nyeri. Namun,

penggunaan kortikosteroid topikal pada mukosa oral dapat menyebabkan

2

efek samping berupa kandidiasis, karena penggunaan obat ini dapat

mengubah kondisi flora normal pada rongga mulut (Parkarwar et al., 2017).

Selain itu, penggunaan kortikosteroid topikal dapat menyebabkan reaksi

hipersensitivitas terhadap obat, mulut terbakar, dan oral hairy leukoplakia

dalam penggunaan jangka panjang (Mehdipour & Zenouz, 2012).

Proses penyembuhan luka bertujuan untuk memulihkan kondisi

jaringan seperti semula. Proses penyembuhan luka merupakan proses yang

sangat kompleks yang terdiri atas beberapa fase, yakni fase inflamasi,

proliferasi, dan remodeling (maturasi). Proses epitelisasi atau proses

pembentukan epitel baru pada jaringan luka merupakan salah satu proses

utama yang dianggap sebagai parameter dalam keberhasilan penyembuhan

luka. Tanpa adanya reepitelisasi, luka tidak dapat dianggap sembuh karena

luka yang terbuka dapat menjadi portal masuknya infeksi pada daerah luka

(Pastar et al., 2014). Proses reepitelisasi berlangsung setelah 24 jam terjadi

luka hingga hari ke-14 (Politis, 2016).

Indonesia merupakan negara yang dikenal dengan keanekaragaman

hayatinya, dimana terdapat banyak tanaman yang digunakan sebagai

alternatif pengobatan terhadap berbagai macam penyakit. Selain sangat

mudah didapatkan di masyarakat, tanaman obat memiliki resiko efek

samping yang lebih sedikit daripada obat sintetis. Salah satunya adalah

tanaman nangka (Artocarpus heterophyllus Lam.), yang dikenal memiliki sifat

antibakteri, antiinflamasi, dan antioksidan (Prakash et al., 2009).

Seluruh bagian dari tanaman nangka, mulai dari buah, daun, akar,

biji, bahkan getahnya memiliki khasiat untuk penanganan berbagai penyakit.

Namun selama ini, pemanfaatan nangka di Indonesia masih terbatas dimana

3

sebagian besar masyarakat hanya mengonsumsi daging buah segarnya

saja. Keberadaan getah nangka yang melimpah di seluruh bagian

tanamannya masih sangat jarang digunakan dan dibuang sebagai limbah.

Hal ini sangat disayangkan, karena getah nangka memiliki kandungan

flavonoid, tanin, alkaloid, dan artocarpain-H yang bermanfaat pada proses

penyembuhan luka (Madhavi et al., 2013). Sebagaimana penelitian

sebelumnya yang dilakukan oleh Stefanus (2015) dan Siswanto (2015) yang

menunjukkan efektivitas gel getah buah nangka sebagai antijerawat secara

in vitro dan in vivo.

Flavonoid yang terkandung dalam getah buah nangka memiliki

kemampuan sebagai imunomodulator, yang akan merangsang sel-sel

inflamasi untuk mesekresikan sitokin dan growth factor yang penting

dalam proses penyembuhan luka. Flavonoid juga berperan sebagai

antiinflamasi, yang menyebabkan reaksi inflamasi berlangsung lebih

singkat dan fase proliferasi dapat terjadi lebih cepat. Tanin dan alkaloid

berperan sebagai antioksidan dan antimikroba, sedangkan artocarpain-H

dapat memberikan efek antiinflamasi dan analgesik yang baik melalui

penghambatan prostaglandin, serotonin, dan histamin (Napanggala et al.,

2014; Chanda, 2009).

Berdasarkan data-data diatas, penelitian ini bertujuan untuk

mengetahui pengaruh gel getah buah nangka (Artocarpus heterophyllus

Lam.) terhadap ketebalan epitel pada proses penyembuhan ulser traumatik

tikus putih (Rattus norvegicus), sehingga memiliki potensi untuk

dikembangkan dan diaplikasikan dalam dunia medis di masa mendatang.

4

1.2 Rumusan Masalah

Berdasarkan latar belakang tersebut diatas, maka permasalahan yang

muncul adalah:

Apakah gel getah buah nangka (Artocarpus heterophyllus Lam.)

berpengaruh terhadap ketebalan epitel pada proses penyembuhan ulser

traumatik tikus putih (Rattus norvegicus)?

1.3 Tujuan Penelitian

1.3.1 Tujuan Umum

Untuk mengetahui pengaruh gel getah buah nangka (Artocarpus

heterophyllus Lam.) terhadap ketebalan epitel pada proses

penyembuhan ulser traumatik tikus putih (Rattus norvegicus) pasca

induksi panas.

1.3.2 Tujuan Khusus

1. Untuk mengetahui ketebalan epitel pada proses penyembuhan ulser

traumatik tikus putih (Rattus norvegicus) setelah diaplikasikan basis

gel tanpa getah buah nangka pada hari ke-3 dan hari ke-7

2. Untuk mengetahui ketebalan epitel pada proses penyembuhan ulser

traumatik tikus putih (Rattus norvegicus) setelah diaplikasikan gel

getah buah nangka (Artocarpus heterophyllus Lam.) dosis 0,5%,

1%, dan 2% pada hari ke-3 dan hari ke-7

3. Untuk menganalisa pengaruh pemberian gel getah buah nangka

(Artocarpus heterophyllus Lam.) dosis 0,5%, 1%, dan 2% terhadap

ketebalan epitel pada proses penyembuhan ulser traumatik tikus

putih (Rattus norvegicus) pada hari ke 3 dan 7.

5

4. Untuk mengetahui hubungan dosis pemberian gel getah buah

nangka (Artocarpus heterophyllus Lam.) terhadap ketebalan epitel

pada proses penyembuhan ulser traumatik tikus putih (Rattus

norvegicus).

1.4 Manfaat Penelitian

1.4.1 Manfaat Akademis

1. Dapat digunakan sebagai dasar teori untuk menambah

wawasan ilmu kedokteran gigi dalam pemanfaatan getah

nangka (Artocarpus heterophyllus Lam.).

2. Dapat digunakan sebagai dasar untuk pengembangan

penelitian selanjutnya dalam bidang kesehatan, khususnya

tentang penyembuhan ulser traumatik.

1.4.2 Manfaat Praktis

1. Dapat digunakan untuk meningkatkan pelayanan kesehatan

rongga mulut dengan menggunakan bahan alami yang sangat

mudah didapatkan oleh masyarakat.

2. Masyarakat dapat memanfaatkan bahan yang selama ini masih

sangat jarang digunakan, sehingga nilai guna getah nangka

bisa meningkat.

6

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Ulser Traumatik

2.1.1 Definisi

Ulser mukosa adalah suatu kerusakan lapisan epitel yang ditutupi oleh

gumpalan fibrin, dengan warna kuning keputihan dan berbatas jelas (Greenberg

et al., 2008). Ulser merupakan lesi yang terbentuk oleh karena adanya

kerusakan lokal dari jaringan epitelium. Ulser yang terbentuk di mukosa mulut

merupakan gambaran lesi oral yang sangat umum dijumpai pada kebanyakan

orang di berbagai usia maupun jenis kelamin. Prevalensi terjadinya ulser adalah

25% dari populasi di dunia (Paleri et al., 2010).

Ulser traumatik adalah bentukan lesi ulseratif yang disebabkan oleh

karena adanya trauma mekanik, suhu, elektrik, maupun kimia. Lokasinya sering

berada pada mukosa pipi, mukosa bibir, palatum, dan tepi perifer dari lidah

(Neville et al., 2016).

2.1.2 Klasifikasi

Berdasarkan etiologinya, ulser traumatik dapat dibedakan menjadi:

a. Ulser traumatik mekanis

Ulser yang disebabkan oleh karena terjadinya trauma mekanis pada

mukosa oral kebanyakan sembuh dalam beberapa hari. Trauma mekanis yang

terjadi biasanya disebabkan karena permukaan yang tajam seperti tepi protesa,

alat ortodonti, tergigit secara tidak sengaja saat menyunyah, menyikat gigi yang

terlalu keras, tusuk gigi, atau alat makan seperti garpu. Ulser bersifat sakit,

7

dikelilingi oleh eritema, dasarnya ditutup oleh eksudat fibrous dan selanjutnya

terbentuk jaringan granulasi dan regenerasi epitel (Neville et al., 2016).

b. Ulser traumatik elektrik

Gambar 2.1. Ulser Traumatik akibat trauma elektrik (Neville et al., 2016)

Terdapat dua macam ulser traumatik elektrik, yaitu contact burns dan arc

type. Contact burns disebabkan oleh karena sengatan listrik secara langsung

dari sumber listrik ke tempat pijakan. Arus listrik tersebut bisa menyebabkan

serangan jantung dan bisa berakibat fatal. Pada arc type¸ saliva berperan

sebagai media penghantar listrik, dan arus listrik mengalir diantara sumber listrik

dan mulut. Pada rongga mulut, arc type ini terjadi lebih sering daripada contact

burns (Neville et al., 2016).

Sejumlah 90% dari kejadian ulser traumatik elektrik terjadi pada anak-

anak dengan umur kurang dari 4 tahun. Bagian dari rongga mulut yang paling

sering terkena adalah bibir, dengan melibatkan komisura bibir. Pada awalnya,

bagian yang terkena sengatan listrik seringkali tidak terasa sakit, hangus, berupa

daerah berwarna kekuningan dengan atau tanpa adanya perdarahan, dengan

pembengkakan yang dapat bertahan hingga 12 hari. Pada hari keempat, area

yang terkena sengatan listrik dapat menjadi nekrotik dan terkelupas. Gigi yang

berdekatan dengan daerah yang terkena bisa menjadi nonvital, dengan atau

8

tanpa adanya nekrosis pada tulang alveolar di sekelilingnya. Pasien yang

terkena sengatan listrik bertegangan tinggi bisa terkena paralisis nervus fasialis

yang proses penyembuhannya bisa dalam hitungan minggu sampai bulan


c. Ulser traumatik termal

Gambar 2.2. Ulser traumatik akibat makanan panas (Neville et al., 2016)

Sebagian besar ulser traumatik akibat termal pada rongga mulut

disebabkan karena makanan atau minuman yang panas. Biasanya, ulser

tersebut terjadi di palatum atau mukosa bukal posterior. Lesi ini tampak sebagai

zona eritema dan ulserasi dengan sisa epitel yang nekrotik di sekelilingnya.


Regezi et al. menyebutkan bahwa ulser traumatik dapat dibedakan

menjadi 2 macam berdasarkan perjalanan penyakitnya, yaitu:

a. Ulser traumatik akut

Ciri-ciri:

1) Nyeri

2) Memiliki dasar kekuningan dengan halo eritema

3) Ada riwayat trauma sebelumnya

4) Sembuh dalam kurun waktu 7-10 hari setelah faktor penyebabnya

dihilangkan

9

Gambar 2.3. Ulser traumatik akut (Regezi et al., 2012)

b. Ulser traumatik kronis

Ciri-ciri:

a. Nyeri ringan atau tidak nyeri sama sekali

b. Dasar kekuningan dengan tepi yang mengalami peninggian

c. Adanya riwayat trauma (jika pasien ingat)

d. Penyembuhannya lama jika teriritasi, khususnya jika terjadi di lidah

e. Gambaran klinisnya mirip dengan karsinoma atau ulser karena infeksi

f. Dapat disebabkan karena terdapat sisi yang tajam pada gigi, restorasi,

dan alat kedokteran gigi seperti gigi tiruan (Regezi et al., 2012; Anura,

2014)

Gambar 2.4. Ulser traumatik kronis (Regezi et al., 2012)

10

2.1.3 Gambaran Klinis

Ulser traumatik biasanya tampak sebagai lesi tunggal yang nyeri dengan

permukaan merah atau putih-kekuningan dan tepi kemerahan, serta memiliki

tekstur yang halus. Secara klinis, tampak adanya ulserasi dan nekrosis dari

mukosa dengan adanya riwayat trauma. Perluasan dan letak dari ulserasi

tergantung dari agen yang menjadi penyebab trauma, intensitas trauma, durasi,

serta adanya infeksi ada saat terjadinya trauma (Greenberg et al., 2008;

Laskaris, 2012).

2.1.4 Gambaran Histopatologi

Ulser yang akut memperlihatkan hilangnya epitel permukaan yang

digantikan dengan jaringan fibrin yang didominasi neutrofil. Dasar dari ulser

mengandung pembuluh kapiler yang terdilatasi, yang selanjutnya diisi oleh

jaringan granulasi. Reepitelisasi dimulai dari tepi ulserasi, dengan sel-sel yang

berproliferasi diatas jaringan granulasi dan dibawah jaringan fibrin (Regezi et al.,

2012).

Pada ulser kronis, terjadi pembentukan jaringan granulasi dengan adanya

jaringan parut pada bagian dalam luka. Terlihat infiltrasi dari sel radang akut dan

kronis. Reepitelisasi terkadang gagal terbentuk karena trauma yang terjadi terus

menerus atau faktor lokal yang kurang menguntungkan. Hal ini kemungkinan

terjadi karena kurangnya ekspresi molekul adhesi (integrin), dan/atau kurangnya

reseptor matriks ekstraseluler terhadap integrin keratinosit. Pada granuloma

traumatik, jejas pada jaringan dan inflamasi dapat menyebar pada otot skeletal

disekelilingnya. Secara histologis, ciri khasnya berupa dominasi dari infiltrasi

makrofag dan eosinofil (Regezi et al., 2012).

11

Gambar 2.5 Gambaran histopatologis mukosa bukal tikus yang dilakukan ulserasi

satu hari sebelumnya (Cavalcante et al., 2011)

Gambar 2.6. Gambaran histopatologis ulser kronis (Regezi et al., 2012)

2.1.5 Diagnosis Banding

Diagnosis banding dari ulser traumatik adalah karsinoma sel skuamosa

dan kanker lainnya, sifilis, tuberkulosis, aphthae, eosinofilik, dan ulser lainnya

(Laskaris, 2012).

2.1.6 Penatalaksanaan

Eliminasi faktor penyebab harus dilakukan pada ulser traumatik yang

pencetusnya jelas. Anestesi topikal atau pemberian lapisan pelindung dapat

diaplikasikan sebagai penghilang nyeri sementara. Apabila faktor pencetus

trauma tidak jelas atau lesi tidak merespon terhadap perawatan, maka

diindikasikan untuk dilakukan biopsi (Neville et al., 2016). Sebagian besar dari

lesi ulser pada membran mukosa rongga mulut cukup diobservasi

penyembuhannya saja. Namun, jika terdapat nyeri yang sangat mengganggu,

12

dapat diberikan perawatan secara topikal seperti kortikosteroid topikal (Regezi et

al., 2012).

2.2 Penyembuhan Luka

2.2.1 Definisi

Luka terjadi karena rusaknya struktur dan fungsi anatomis normal akibat

proses patologis yang berasal dari internal maupun eksternal yang mengenai

organ tertentu. Efek yang akan muncul ketika terdapat luka antara lain

kehilangan seluruh atau sebagian fungsi organ, perdarahan dan pembekuan

darah, kontaminasi bakteri serta kematian sel. Luka yang tidak sembuh dalam

waktu yang lama dikhawatirkan mengalami komplikasi (Setyarini et.al., 2013)

Proses penyembuhan luka adalah proses penggantian dan perbaikan

fungsi dari jaringan yang rusak. Sifat penyembuhan pada semua luka bervariasi,

bergantung pada lokasi, keparahan, dan luas cedera (Hardjito et.al., 2012).

Penyembuhan luka merupakan sebuah proses transisi yang merupakan salah

satu proses paling kompleks dalam fisiologi manusia yang melibatkan

serangkaian reaksi dan interaksi kompleks antara sel dan mediator (Prasetyono,

2009).

2.2.2 Proses Penyembuhan Luka

Proses penyembuhan luka terdiri dari tiga fase yaitu, hemostasis dan

inflamasi, proliferasi, dan remodeling jaringan (van Neck et al., 2012). Urutan dari

ketiga fase tersebut mengikuti dari fase yang terjadi sebelumnya, namun juga

tumpang tindih dalam satu waktu. Durasi dari setiap fase tergantung pada ukuran

luka (Larjava et al., 2012)

13

Gambar 2.7. Fase yang terjadi dalam penyembuhan luka (Larjava et al., 2012)

2.2.2.1 Fase Hemostasis dan Inflamasi

Hemostasis dan inflamasi terjadi segera setelah luka terbentuk.

Tujuannya adalah untuk mencegah perdarahan dan keluarnya cairan yang terlalu

banyak, serta sebagai penghalang dari invasi mikroorganisme. Hemostasis

didapatkan melalui vasokonstriksi dan pembekuan darah. Proses pembekuan

darah bermula dari terbentuknya platelet plug yang diikuti dengan bekuan fibrin¸

yang menyediakan matriks sementara untuk migrasi sel. Platelet juga

menghasilkan beberapa growth factor dan sitokin, diantaranya fibroblast growth

factor (FGF), epidermal growth factor (EGF), platelet derived growth factor

(PDGF), transforming growth factor beta (TGF-β), dan vascular endothelial

growth factor (VEGF). Faktor-faktor ini berada di dalam bekuan fibrin dan

berfungsi sebagai promotor proses penyembuhan luka dengan merekrut sel-sel

inflamasi ke arah terjadinya luka dan menginisisasi angiogenesis (van Neck et

al., 2012).

14

Setelah perdarahan dapat dikontrol, dimulailah fase inflamasi. Fase

inflamasi adalah reaksi pertahanan jaringan hidup terhadap semua bentuk luka

dengan melibatkan fungsi darah dan pembuluh darah, saraf, limfa, cairan, serta

sel-sel di sekitar luka. Proses ini akan memusnahkan, melarutkan, atau

membatasi agen-agen penyebab infeksi sekaligus merintis jalan untuk proses

perbaikan atau pemulihan terhadap jaringan yang rusak (Abdurrahmat, 2014).

Mikroorganisme patogen yang memasuki jaringan melalui luka yang

terbuka akan mengaktifkan sistem komplemen dalam tubuh. Glikoprotein

permukaan sel mikroorganisme yang masuk ke daerah luka akan berakibat

dilepaskannya opsonin, histamin, chemotoxin, dan kinin oleh sistem komplemen,

yang akan menyebabkan vasodilatasi kapiler, meningkatkan permeabilitas

kapiler, sehingga sejumlah protein plasma dan sel darah akan keluar dari kapiler

darah menuju tempat terjadinya infeksi atau jejas (Abdurrahmat, 2014; Kumar,

2013).

Pada awal proses peradangan (30 menit-1 jam), neutrofil akan melakukan

fagositosis dengan cepat dan selanjutnya mati akibat mikroorganisme yang

memiliki virulensi yang lebih tinggi dari neutrofil. Pada tahap berikutnya monosit

yang telah sampai ke daerah luka akan berubah menjadi makrofag dan

mengganti kedudukan neutrofil untuk melakukan fagositosis. Monosit memiliki

ukuran yang lebih besar serta kemampuan fagositosis yang lebih tinggi daripada

neutrofil sehingga lebih banyak mikroorganisme yang dapat dibunuh. Tahap

inflamasi ini dapat berlangsung antara 1 sampai dengan 4 hari, tergantung dari

besarnya luka serta tingkat kontaminasi mikroorganisme atau tingkat infeksi yang

terjadi pada luka tersebut (Abdurrahmat, 2014).

15

2.2.2.2 Fase proliferasi

Setelah stimulus penyebab luka dihentikan, hemostasis tercapai, respon

inflamasi terlaksana, dan luka bebas dari debris, barulah fase proliferasi dapat

dimulai untuk memperbaiki defek. Fase ini ditandai dengan angiogenesis, migrasi

fibroblas, pembentukan jaringan granulasi, dan reepitelisasi. Pada tahap lanjutan

dari fase proliferasi ini, matriks fibrin/fibronectin provisional akan digantikan oleh

jaringan granulasi yang baru (Young et al., 2011; van Neck et al., 2012).

a. Angiogenesis

Angiogenesis adalah proses pembentukan pembuluh darah baru dari

pembuluh darah yang sudah ada, khususnya dari venula. Angiogenesis dipicu

sejak saat bekuan fibrin melepas TGF-β, Platelet-Derived Growth Faktor (PDGF)

dan Fibroblast Growth Factor (FGF). Dalam menanggapi hipoksia, Vascular

Endothelial Growth Factor (VEGF) dilepaskan dan dengan kombinasi dengan

sitokin lain, akan menginduksi sel endotel untuk memicu neovaskularisasi dan

perbaikan pembuluh darah yang rusak (Young et al., 2011). Proses

neovaskularisasi mencapai puncaknya pada hari ke-5 setelah terjadi luka.

Tahapan yang terjadi dalam perkembangan pembuluh darah kapiler baru

menurut Kumar et al. (2013) adalah:

1) Vasodilatasi sebagai respon dari NO dan peningkatan permeabilitas yang

diinduksi VEGF

2) Separasi perisit dari permukaan abluminal (luar) pembuluh darah

3) Migrasi sel endotel menuju daerah perlukaan

4) Proliferasi sel endotel

5) Remodeling menjadi kapiler

16

6) Perekrutan sel periendotel (perisit pada kapiler kecil dan sel otot halus

pada pembuluh yang lebih besar) untuk menyokong pembuluh endotel

7) Supresi proliferasi endotel, serta migrasi dan deposisi membran basal.

Awalnya pusat luka relatif avaskular, sehingga hanya mengandalkan

difusi darah dari kapiler yang rusak di tepi luka. Sebagai hasil dari proses

angiogenesis, terbentuklah jaringan pembuluh darah kapiler di seluruh bagian

yang mengalami luka, yang berasal dari cabang pembuluh darah yang sehat.

Kapiler yang rapuh dan permeabel memberikan kontribusi lebih lanjut pada

edema jaringan dan wujud dari jaringan granulasi (Young et al., 2011).

b. Migrasi fibroblas

Migrasi fibroblas terjadi pada hari kedua hingga keempat setelah

perlukaan. Fibroblas dirangsang untuk berproliferasi oleh faktor pertumbuhan

(terutama oleh TGF-β, dan PDGF), dan kemudian bermigrasi ke tempat

terjadinya luka dan mendominasi populasi sel selama satu minggu pertama.

Pada area perlukaan, fibroblas berproliferasi dan memproduksi beberapa

molekul struktural, termasuk fibrin, fibronektin, glikosaminoglikan (GAGs), dan

selanjutnya diikuti pembentukan kolagen. Komponen-komponen ini membentuk

matriks provisional berdasar fibrin/fibronektin, yang berperan dalam

pembentukan jaringan granulasi yang menggantikan bekuan fibrin (van Neck et

al., 2012; Young et al., 2011).

Pembentukan jaringan granulasi dimulai 3 sampai 5 hari setelah

terbentuknya luka dan dicirikan dengan adanya angiogenesis. Pembuluh kapiler

yang baru akan menginvasi matriks fibrin/fibronectin sementara dalam waktu

beberapa hari, yang kemudian membentuk sebuah jejaring mikrovaskular yang

disebut dengan stroma vaskular. Stroma ini, bersama dengan makrofag dan

17

fibroblas, akan membentuk jaringan granulasi akut sebagai pengganti dari

matriks fibrin/fibronektin sementara. Kemudian, kolagen akan terakumulasi dan

angiogenesis berkurang sehingga kepadatan jejaring mirovaskular akan hilang

(van Neck et al., 2012).

Jaringan granulasi terdiri dari berbagai tipe kolagen (mayoritas kolagen

tipe 3) dibandingkan dengan jaringan yang tidak mengalami luka. Setelah matriks

cukup terbentuk, fibroblas akan berubah menjadi fenotip myofibroblas dan

mengembangkan pseudopodia (kaki semu) untuk menghubungkan ke fibronektin

dan kolagen serta membantu dalam kontraksi luka. Kolagen yang disintesis oleh

fibroblas merupakan kunci dari kuatnya jaringan yang terbentuk (Young et al.,

2011).

c. Reepitelisasi

Penyembuhan luka sangat dipengaruhi oleh reepitelisasi, karena semakin

cepat proses reepitelisasi maka semakin cepat pula luka tertutup sehingga

semakin cepat penyembuhan luka (Prasetyo et al., 2010). Secara umum,

reepitelisasi melibatkan beberapa proses, yaitu migrasi keratinosit epitel dari tepi

luka, proliferasi keratinosit yang digunakan untuk menambah epithelial tongue

yang meningkat dan bermigrasi, diferensiasi neo-epitelium menjadi epitel yang

berlapis, pengembalian zona membran basal yang utuh yang menghubungkan

epitel dengan dermis di bawahnya, dan repopulasi sel-sel khusus yang mengatur

fungsi sensoris (sel Merkel), pigmentasi (melanosit), dan fungsi imun (sel

Langerhans) (Widagdo, 2004).

Jaringan epitel terpisah dari jaringan ikat dibawahnya oleh sebuah

membran basal yang dilekatkan via hemidesmosom. Pada saat terjadi reaksi

inflamasi tahap awal, sitokin-sitokin proinflamasi dan faktor pertumbuhan yakni

18

FGF, EGF, TGF-β, TGF-α, IGF-1, dan HGF, akan menginisiasi pengaktifan sel-

sel keratinosit di membran basal. Keratinosit kemudian mengalami perubahan

fenotip parsial yang mengakibatkan bentuknya menjadi lebih datar dan motil,

sehingga sel epitel pada tepi luka mulai melepaskan perlekatan

hemidesmosomnya dan menunjukkan tanda-tanda pertama migrasi ke arah

lateral. Studi histologis menunjukkan bahwa migrasi keratinosit dari ujung luka

menuju matriks provisional ini berlangsung selama 24 jam pertama terjadinya

luka (Larjava et al., 2012).

Keratinosit mulai bergerak ke area luka pada 24 jam setelah perlukaan.

Selama migrasi, keratinosit bergerak secara lateral dan meregenerasi membran

basal. Sel epitel bermigrasi melalui matriks fibrin-fibronektin provisional sampai

sel-sel tersebut bertemu dengan sel epitel dari ujung lainnya. Migrasi ini

merupakan proses yang kompleks yang bergantung pada reseptor permukaan

sel integrin. Ekspresi dari integrin menyediakan kekuatan adhesi yang optimal

pada sel-sel yang bermigrasi terhadap matriks ekstraselular (Larjava, 2012; van

Neck et al., 2012).

Setelah epitel yang bermigrasi bergabung dengan sisi lainnya dan

permukaan luka telah tertutup, migrasi epitel berhenti karena penghambatan

kontak. Pada tahap ini sudah terbentuklah epitel berlapis dengan disertai

membran basal. Proses reepitelisasi ini berlangsung kurang dari 48 jam pada

luka sayatan, namun bisa memakan waktu yang lebih lama pada kasus dengan

defek yang lebih luas. Proses reepitelisasi yang sempurna biasanya tercapai

dalam waktu 14 hari. Pembentukan jaringan granulasi dan remodeling akan tetap

berjalan setelah proses reepitelisasi selesai (Larjava et al, 2012; Regan et al.,

2011).

19

Gambar 2.8 Reepitelisasi pada penyembuhan luka (Schäfer&Werner, 2008)

d. Kontraksi luka

Luka mulai berkontraksi pada hari ke-7 setelah terjadinya luka, yang

utamanya dimediasi oleh myofibroblast. Myofibroblas adalah fibroblast yang

memilki mikrofilamen intraseluler aktin sehingga memiliki kemampuan untuk

mengkontraksi matriks. Myofibroblas dapat mengonstriksikan luka dengan

bantuan interaksi spesifik antara integrin dan matriks kolagen. Interaksi antara

aktin dan myosin menyebabkan badan sel terletak lebih berdekatan sehingga

memperkecil area jaringan yang harus mengalami perbaikan dari luka, dan

20

sebagai pelindung dari faktor-faktor yang dapat mengganggu proses

penyembuhan (Young et al., 2011; Regan et al., 2011).

2.2.2.3 Remodeling jaringan/ Fase Maturasi

Fase remodeling jaringan adalah tahap akhir dan paling panjang dari

proses penyembuhan luka. Fase ini dimulai pada saat fase proliferasi sedang

berlangsung, dari hari ke-7 hingga bisa mencapai satu tahun setelahnya. Pada

fase ini, terjadi remodeling dari jaringan granulasi dibawah lapisan epitel yang

baru. Remodeling jaringan akan terjadi ketika terjadi homeostasis antara sintesis

dan degradasi kolagen (Prasetyono, 2009).

Kolagen tipe 3 yang terbentuk dan didepositkan oleh fibroblas selama

fase proliferasi akan digantikan oleh kolagen tipe 1 selama beberapa bulan

selanjutnya, melalui proses lambat dari degradasi kolagen tipe 3. Degradasi ini

dimediasi oleh matriks metalloproteinase (MMP) yang disekresikan oleh

makrofag, fibroblas, dan sel-sel endotel. Kekuatan tensil dari luka akan

meningkat secara perlahan, menunjukkan pergantian dari tipe kolagen dan

meningkatnya persilangan kolagen. Saat berawalnya fase maturasi, kekuatan

dari luka hanya 20%-30% dari jaringan normal, yang kemudian akan meningkat

menjadi 70%-80% saat fase remodeling berakhir (Prasetyono, 2009).

2.3 Jaringan Epitel Rongga Mulut

Mukosa mulut mengandung dua lapisan yaitu lapisan epitel dan jaringan

pengikat (lamina propria). Epitel mulut merupakan epitel berlapis pipih yang

merupakan lapisan terluar dari mukosa mulut, sedangkan lamina propria

merupakan lapisan serat-serat yang saling terikat dan berfungsi memberikan

kekuatan pada epitel. Lamina propria mengandung pembuluh darah, kelenjar

saliva minor, saraf, fibroblas,dan sel-sel lainnya. Sel-sel epitel sebagian besar

21

merupakan sel keratosit, yang apabila mengalami proses pematangan, maka sel

tersebut akan terdorong ke permukaan atas. Proses ini berasal dari mitosis yang

terjadi pada sel epitel mukosa. Sel-sel epitel yang terdorong ke lapisan paing

atas tidak mempunyai inti dan selnya semakin tipis. Epitel mukosa mulut

merupakan susunan lapisan sel yang berbeda karena mengalami proses mitosis

sel yang terus menerus. Setiap sel dalam tubuh mempunyai pola pematangan

tertentu, demikian pula mukosa mulut mempunyai waktu pergantian yang

khusus. Waktu pergantian jaringan epitel mukosa mulut antara 14 sampai 24 hari

(Yohana et al., 2015).

Sel-sel epitel mukosa mulut tersusun dari 4 lapisan secara berurutan dari

yang paling dalam ke permukaan, yaitu lapisan geminativum/basalis, lapisan

spinosum, lapisan granulosum, dan lapisan corneum. Stratum basalis

mengandung sel-sel induk yang bermitosis secara berkelanjutan dan anak

selnya ditransfer ke lapisan yang lebih superfisial. Lapisan ini terdiri dari selapis

sel berbentuk kubus yang berbatasan dengan lamina propia. Stratum spinosum

memiliki karakteristik sel yang mulai matang dan terdiri dari beberapa lapis sel

berbentuk bulat/oval. Stratum granulosum lebih matang dari stratum spinosum

dan mengandung granula keratohyalin yang banyak sebagai bakal sel keratin.

Lapisan ini terdiri dari beberapa lapis sel yang lebih gepeng. Stratum corneum

terdiri dari selapis/ berlapis-lapis sel berbentuk pipih yang tidak berstuktur dan

tidak memiliki inti sel (Jones et al., 2013).

Berdasarkan struktur perbedaan regional, diferensiasi, dan kecepatan

penggantian sel, maka mukosa mulut mamalia dapat dikelompokkan menjadi 3

tipe yaitu mukosa pengunyahan (masticatory), mukosa penutup (lining), dan

mukosa khusus (specialized). Lokasi mukosa pengunyahan pada regio rongga

22

mulut yang menerima tekanan kunyah seperti gingiva dan palatum durum.

Jaringan epitelnya parakeratinised (mempunyai lapisan keratin tipis yang

beberapa selnya masih memiliki inti sel yang tidak sempurna). Lokasi mukosa

penutup berada pada dasar mulut, permukaan inferior lidah, permukaan dalam

bibir dan pipi, palatum molle dan mukosa alveolaris kecuali gingiva. Tipe

epitelnya nonkeratinised (tidak memiliki lapisan keratin). Mukosa khusus berada

pada dorsum lidah dan berfungsi untuk pengecapan, dengan tipe epitel

ortokeratinised (memiliki lapisan keratin yang tebal yang terdiri dari sel-sel yang

sudah tidak berinti. (Jones et al., 2013).

Gambar 2.9 Lapisan-lapisan pada epitel mukosa rongga mulut manusiaberdasarkan tipenya (a) ortokeratinised (b) parakeratinized (c) nonkeratinised

(Squier&Brogden, 2010)

23

2.4 Nangka (Artocarpus heterophyllus)

Tanaman nangka merupakan jenis tanaman yang banyak berada di

daerah tropis, seperti di Indonesia. Seluruh bagian dari tanaman nangka memiliki

khasiat sebagai pengobatan tradisional, diantaranya sebagai pengobatan

demam, luka, penyakit kulit, konvulsi, diuretik, konstipasi, penyakit mata, gigitan

ular, dan lain-lain (Prakash et al., 2009).

Gambar 2.10. Buah Nangka (Elevitch et al., 2006)

2.4.1 Taksonomi

Taksonomi nangka adalah sebagai berikut:

Kingdom :Plantae

Subkingdom :Tracheobionta

Divisi :Magnoliophyta

Kelas :Magnoliopsida

Subkelas :Hamamelidae

Ordo :Urticales

Famili :Moraceae

Genus :Artocarpus

Spesies :Artocarpus heterophyllus Lam.

24

2.4.2 Morfologi

Tanaman nangka merupakan tanaman buah tahunan yang berkerabat

dekat dengan cempedak, kluwih, dan sukun. Umur tanamannya panjang, dapat

mencapai puluhan tahun. Tinggi tanaman dapat mencapai 25 m. Panjang buah

nangka berkisar 30-90 cm, diameter 25-50 cm, dengan berat rata – rata 15-20

kg, walaupun ada yang menghasilkan 60 buah per pohon per tahun.

2.4.3 Habitat dan Daerah Distribusi

Tanaman nangka diperkirakan berasal dari hutan hujan di Malaysia dan

Ghat Barat di India, dan juga ditemukan di Afrika tengah dan timur, Asia

tenggara, kepulauan Karibia, Brazil, Australia, Puerto Rico, dan kepulauan

Pasifik (Madhavi et al., 2013).

2.4.4 Kandungan

Sejumlah penelitian telah menunjukkan bahwa tanaman nangka

mengandung berbagai macam senyawa, diantaranya karotenoid, flavanoid,

volatile acids sterols dan tanin, dengan konsentrasi yang bervariasi tergantung

varietasnya (Arora, 2016).

Tabel 2.1 Kandungan Artocarpus heterophyllus Lam. (Arora et al., 2016)

25

2.4.5 Sifat dan Khasiat

Tumbuhan nangka dilaporkan memiliki sifat antibakteri, antiinflamasi,

antidiabetes, antioksidan, dan sifat sebagai immunomodulator. Artocarpus

heterophyllus dapat digunakan sebagai pengobatan untuk demam, luka, penyakit

kulit, konvulsi, diuretik, konstipasi, penyakit mata, gigitan ular, dan lain

sebagainya (Prakash et.al., 2009).

Ekstrak etanol, metanol, dan kloroform dari getah buah nangka memiliki

kemampuan sebagai antimikroba. Zat tersebut secara teori efektif terhadap

penyembuhan luka dengan cara mencegah infeksi, dan mencegah meluasnya

luka akibat toksik bakteri. Antimikroba pada getah buah nangka reaktif terhadap

beberapa bakteri dan jamur gram positif (Bacillus cereus, Bacillus subtillis dan

Staphylococcus aureus), gram negatif (Escherichia coli dan Pseudomonas

aeurignosa), dan jamur yakni Aspergillus flavus, Aspergillus niger, Candida

albicans and Saccharomyces cerevisiae (Madhavi et al., 2010).

26

Tabel 2.2 Aktivitas Farmakologik Artocarpus heterophyllus Lam.

(Arora et al., 2016)

2.4.6 Getah nangka

Gambar 2.11 Getah buah nangka

Getah pada tanaman nangka dapat ditemukan pada seluruh bagian dari

tanaman ini. Penggunaan getah nangka diantaranya adalah sebagai bahan

kosmetik, obat-obatan, dan industri pangan. Getah nangka telah dijadikan

sebagai obat tradisional karena memiliki sifat mempercepat terbentuknya bekuan

darah, berperan dalam homeostasis, penyembuhan luka, dan sebagai

antimikroba (Madhavi et al., 2013).

27

2.4.7 Kandungan Getah Nangka

Penelitian yang dilakukan oleh Madhavi (2013) menunjukkan bahwa

ekstrak getah nangka memiliki kandungan fenol, flavonoid, tanin, protein,

karbohidrat, glikosida, dan alkaloid dalam jumlah yang berarti. Dalam penelitian

tersebut juga dapat diketahui bahwa ekstrak getah nangka memilik sifat

antimikroba dan antijamur yang signifikan, apabila dibandingkan dengan obat-

obatan antibakteri dan antijamur standar. Jumlah total dari kandungan flavonoid

berkisar antara 7.76±0.15to7.63±0.45µg/gm, yang setara dengan kandungan

quercetin dalam mg. Jumlah total dari kandungan tanin setara dengan

kandungan asam tanat dalam mg, yaitu 2.13±0.15 to1.76±0.05 µg /gm. Jumlah

total dari alkaloid setara dengan kandungan boldine dalam mg, 8.56±0.30to

7.26±0.25 mg/gm.

Penelitian sebelumnya yang dilakukan oleh Stefanus (2015) dan

Siswanto (2015) menunjukkan efektivitas gel getah buah nangka sebagai

antijerawat secara in vitro dan in vivo. Buah nangka termasuk ke dalam salah

satu famili dan genus yang menghasilkan berbagai jenis senyawa flavonoid,

tanin, dan alkaloid.

a. Flavonoid

Flavonoid termasuk senyawa fenolik alam yang potensial sebagai

antioksidan dan mempunyai bioaktivitas sebagai obat. Flavonoid bermanfaat

untuk melindungi struktur sel, meningkatkan efektivitas vitamin C, mencegah

keropos tulang, sebagai astringen, antiinflamasi, dan antibiotik (Redha, 2010).

Peran flavonoid dalam penyembuhan luka disebutkan karena memiliki sifat

astringen dan antimikroba, yang akan membantu dalam kontraksi luka dan

peningkatan kecepatan epitelisasi (Soni et al., 2012).

28

Flavonoid memiliki kemampuan imunomodulator yang mampu

meningkatkan produksi IL-2 (Interleukin-2) yang merangsang proliferasi dan

diferensiasi sel T, sel B, dan sel NK (Parlinaningrum dkk, 2014). Sel T kemudian

berdiferensiasi menjadi Th1 yang mensekresi berbagai macam produk seperti

IFN-, sitokin yang berperan dalam proses inflamasi, aktivasi makrofag, dan

mitogen fibroblas (Kumar et al., 2013). Makrofag yang aktif berfungsi untuk

melakukan fagositosis, memproduksi sitokin, perbaikan jaringan (fibroblast

stimulating factor, fibronektin, kolagenase), dan memproduksi hormon

pertumbuhan (growth factor). Growth factor ini bertanggung jawab atas terjadinya

inflamasi dan proses mitogen fibroblas yang penting dalam proses penyembuhan

luka (Napanggala et al., 2014).

Aktivitas antiinflamasi flavonoid dilakukan melalui penghambatan

siklooksigenase dan lipoksigenase sehingga terjadi pembatasan jumlah sel

inflamasi yang bermigrasi ke jaringan perlukaan, sehingga reaksi inflamasi akan

berlangsung lebih singkat dan kemampuan proliferatif dari TGF-β tidak

terhambat. Proses ini mengakibatkan fase proliferasi dapat segera terjadi

(Napanggala et al., 2014).

Kandungan flavanoid yang terkandung dalam getah merupakan

antioksidan kuat yang mampu merangsang dan meningkatkan kecepatan

epitelisasi serta mengurangi lipid peroksidasi. Penurunan lipid peroksidasi oleh

flavonoid akan mencegah nekrosis, memperbaiki vaskularisasi, dan

meningkatkan viabilitas kolagen dengan meningkatkan kekuatan anyaman

kolagen. Sebagai antioksidan, flavonoid dapat meningkatkan level enzim

antioksidan pada jaringan granulasi. Flavonoid juga bekerja dalam proses

29

membunuh atau menghambat pertumbuhan mikroorganisme pada jaringan yang

hidup seperti pada kulit dan membran mukosa (Rupina dkk, 2016).

b. Tanin

Pada proses penyembuhan luka, tanin berperan sebagai anti radikal

bebas dan antimikroba yang membantu dalam kontraksi luka dan peningkatan

kecepatan epitelisasi. Radikal bebas dapat menjadi salah satu faktor yang

menyebabkan tertundanya penyembuhan luka. Oleh karena itu, ekstrak herbal

yang mengandung antioksidan dan antimikroba bisa menjadi terapi yang baik

untuk mempercepat penyembuhan luka (Thakur et al., 2011).

c. Alkaloid

Alkaloid merupakan suatu golongan senyawa organik yang terbanyak

ditemukan di alam. Alkaloid merupakan salah satu metabolit sekunder yang

terdapat pada tumbuhan, yang bisa dijumpai pada bagian daun, ranting, biji, dan

kulit batang. Semua alkaloid mengandung atom nitrogen yang bersifat basa dan

merupakan bagian dari cincin heterosiklik. Alkaloid mempunyai kegiatan fisiologi

yang menonjol dan sering digunakan secara luas dalam bidang pengobatan

(Nilda dkk, 2011).

Alkaloid dapat berfungsi sebagai zat antioksidan (Hanani dkk, 2005).

Pengaruh alkaloid dalam bidang kesehatan dapat berupa pemicu sistem saraf,

menaikkan tekanan darah, mengurangi rasa sakit, antimikroba, obat penenang,

obat penyakit jantung dan lain-lain lain (Simbala, 2009).

d. Artocarpain H

Ekstrak getah tanaman nangka mengandung protease yakni Artocarpain-H

yang dilaporkan memiliki aktivitas analgesik dan antiinflamasi. Efek antiinflamasi

yang signifikan oleh Artocarpain-H ini dapat dikarenakan adanya

30

pemghambatan mediator inflamasi seperti histamin, serotonin, dan prostaglandin.

Hasil penelitian menunjukkan bahwa kandungan Artocarpain-H dapat berfungsi

sebagai agen terapeutik yang efektif untuk kondisi inflamasi akut (Chanda et al.,

2009)

2.5 Gel

Gel merupakan suatu sediaan semipadat yang jernih, tembus cahaya dan

mengandung zat aktif, merupakan dispersi koloid yang mempunyai kekuatan

yang disebabkan jaringan material saling berikatan pada fase terdispersi. Gel

bermanfaat pada pengobatan karena kemampuan bahan ini untuk berikatan

dengan mukosa membran. Obat topikal dengan sediaan gel lebih baik dan dapat

diterima karena lebih mudah diaplikasikan. Sediaan gel akan tetap melekat pada

mukosa cukup lama. Perlekatan obat yang cukup lama akan mempermudah

penetrasi obat ke lesi dan melindungi lesi dari kontaminasi benda asing (BPOM,

2015). Formulasi gel yang baik dilihat berdasarkan sifat fisik sediaan gel, yaitu

pH, daya lekat, daya sebar, homogenitas dan viskositas (Husnani, 2017) .

2.6 Tikus Putih (Rattus norvegicus)

Hewan laboratorium atau hewan percobaan adalah hewan yang sengaja

dipelihara dan diternakkan untuk dipakai sebagai hewan model guna

mempelajari dan mengembangkan berbagai macam bidang ilmu dalam skala

penelitian atau pengamatan laboratoris. Tikus putih (Rattus norvegicus) banyak

digunakan sebagai hewan percobaan pada berbagai penelitian (Widiartini et. al,

2013).

31

Menurut Krinke (2000), klasifikasi tikus putih (Rattus norvegicus) adalah

sebagai berikut:

Kingdom : Animalia

Phylum : Chodata

Subphylum : Vertebrata

Class : Mammalia

Order : Rodentia

Family : Muridae

Genus : Rattus

Soecias : norvegicus

‘

Gambar 2.9. Rattus norvegicus (Al-Hajj et al., 2016)

Keunggulan tikus putih dibandingkan tikus liar antara lain lebih cepat

dewasa, tidak memperlihatkan perkawinan musiman, dan umumnya lebih cepat

berkembang biak. Kelebihan lainnya sebagai hewan laboratorium adalah sangat

mudah ditangani, dapat ditinggal sendirian dalam kandang asal dapat

mendengar suara tikus lain dan berukuran cukup besar sehingga memudahkan

penelitian. Biasanya pada umur empat minggu beratnya 35-40 g, dan berat

dewasa rata-rata 200-250 g, tetapi bervariasi tergantung pada galurnya.

32

Beberapa galur tikus yang sering digunakan dalam penelitian antara lain galur

Wistar, Sprague-Dawley, Long Evans, dan Holdzman (Widiartini dkk, 2013).

Tikus putih (Rattus norvegicus) strain wistar dipilih sebagai sampel

karena tikus merupakan hewan coba yang tergolong jinak, mudah diperoleh

dalam jumlah banyak, mempunyai respon yang lebih cepat, mudah

perawatannya, dan fungsi metabolismenya mirip dengan manusia serta harganya

lebih terjangkau dibandingkan dengan menggunakan marmot (Cavia cobaya).

Para ilmuwan telah memunculkan banyak strain atau galur tikus khusus untuk

eksperimen. Sebagian besar berasal dari tikus Wistar albino, yang masih

digunakan secara luas (Sulistiawati, 2011).

33

BAB III

KERANGKA KONSEP

3.1 Kerangka Konsep

Keterangan:

: Alur yang diteliti

: Alur yang tidak diteliti

: Meningkat akibat kandungan dalam gel getah buah nangka

: Variabel yang diteliti

: Variabel yang tidak diteliti

Fase inflamasi

Ulser traumatik

Gel getah buah nangka

Flavonoid Alkaloid Tanin

Artocarpain-H IL-6, IL-1, TNF-α,

TGF-β, EGF, FGF, VEGF, PDGF ↑

Angiogenesis ↑

Epitelisasi ↑

Fibroblast ↑

Kolagen ↑

Fase remodeling

Penyembuhan luka

34

Proses penyembuhan luka pada ulser traumatik diawali dengan proses

hemostasis dan inflamasi, yang diikuti fase proliferasi dan fase maturasi

(remodeling) jaringan. Flavonoid yang terkandung dalam getah buah nangka

memiliki kemampuan sebagai imunomodulator, yang akan merangsang sel-sel

inflamasi untuk mesekresikan sitokin dan growth factor yang penting dalam

proses penyembuhan luka. Flavonoid dan artocarpain-H berperan sebagai

anttinflamasi, sehingga reaksi inflamasi akan berlangsung lebih singkat dan fase

proliferasi dapat terjadi lebih cepat (Napanggala et al., 2014; Chanda, 2009).

Hemostasis terjadi melalui vasokonstriksi dan pembekuan darah. Setelah

didapatkan keadaan hemostasis, terjadi fase inflamasi dimana neutrofil dan

monosit yang kemudian digantikan oleh makrofag bergerak menuju tempat

terjadinya luka. Aktivasi platelet dan makrofag menyebabkan pelepasan berbagai

faktor pertumbuhan dan sitokin yang berpengaruh terhadap penyembuhan luka

(Li et. al., 2007).

Faktor pertumbuhan berupa FGF,TGF-β, dan EGF-α akan menstimulasi

kemotaksis dan proliferasi fibroblast, yang akan mensintesis kolagen dan matriks

ekstraseluler baru. Sedangkan VEGF, PDGF, dan FGF akan menstimulasi

proliferasi endotel yang berpengaruh dalam proses pembentukan pembuluh

darah baru. Semua proses ini, disertai Keratinocyte Growth Factors (KGF) dan

IL-6 yang menarik keratinosit untuk bermigrasi, akan meningkatkan kecepatan

epitelisasi jaringan luka (van Neck et al., 2012).

Selain itu, flavonoid, tanin, dan alkaloid yang terkandung dalam getah

buah nangka juga berperan sebagai antioksidan dan antimikroba, yang

35

membantu dalam kontraksi luka serta merangsang dan meningkatkan kecepatan

epitelisasi, angiogenesis, dan proliferasi fibroblas (Rupina et al., 2016).

Penelitian ini akan menguji pengaruh pemberian gel getah buah nangka

(Artocarpus heterophyllus Lam.) dalam mempercepat proses reepitelisasi.

Pemberian gel getah buah nangka akan mempengaruhi kecepatan dari

pembentukan jaringan baru dan berdampak pada semakin cepatnya proses

penyembuhan luka pada ulser traumatik tikus putih (Rattus norvegicus).

3.2 Hipotesis Penelitian

Gel getah buah nangka (Artocarpus heterophyllus Lam.) berpengaruh

terhadap ketebalan epitel pada proses penyembuhan ulser traumatik tikus putih

(Rattus norvegicus).

36

BAB IV

METODE PENELITIAN

4.1 Desain Penelitian

Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental murni dengan

Randomized Post Test Only Control Group Design. Subjek dibagi menjadi 8

kelompok dalam 2 time series secara random, dengan tiap kelompok terdiri dari 5

ekor tikus. Kelompok I merupakan kelompok kontrol yang diberikan senyawa

pembawa gel tanpa getah, kelompok II, III, dan IV merupakan kelompok

perlakuan yang masing-masing diberi gel getah buah nangka secara topikal

dengan dosis 0,5%, 1%, dan 2%. Perlakuan diberikan sehari 2 kali setiap hari

selama 3 dan 7 hari. Pembedahan hewan coba dilakukan pada hari ke-3 karena

merupakan puncak migrasi epitel mukosa ke perlukaan, sedangkan hari ke-7

merupakan puncak fase proliferasi. Kemudian jaringan diobservasi dan

dibandingkan pengaruh gel getah buah nangka terhadap ketebalan epitel.

4.1. Kerangka Desain Penelitian

RS

P3 (3)

K (7)

P1 (7)

P2 (3)

P1 (3)

K (3)

P3 (7)

P2 (7)

Observasi

37

Keterangan :S = SampelR = RandomK (3) = Kelompok kontrol yang diberi perlakuan induksi panas, diaplikasikansenyawa pembawa gel tanpa getah nangka, dan dilakukan pembedahan padahari ke-3K (7) = Kelompok kontrol yang diberi perlakuan induksi panas, diaplikasikansenyawa pembawa gel tanpa getah nangka, dan dilakukan pembedahan padahari ke-7P1 (3) = Kelompok perlakuan 1 yang diberi perlakuan induksi panas dandiaplikasikan gel getah nangka 0,5% kemudian dilakukan pembedahan pada harike-3P1 (7) = Kelompok perlakuan 1 yang diberi perlakuan induksi panas dandiaplikasikan gel getah nangka 0,5% kemudian dilakukan pembedahan pada harike-7P2 (3) = Kelompok perlakuan 2 yang diberi perlakuan induksi panas dandiaplikasikan gel getah nangka 1% kemudian dilakukan pembedahan pada harike-3P2 (7) = Kelompok perlakuan 2 yang diberi perlakuan induksi panas dandiaplikasikan gel getah nangka 1% kemudian dilakukan pembedahan pada harike-7P3 (3) = Kelompok perlakuan 3 yang diberi perlakuan induksi panas dandiaplikasikan gel getah nangka 2% kemudian dilakukan pembedahan pada harike-3P3 (7) = Kelompok perlakuan 3 yang diberi perlakuan induksi panas dandiaplikasikan gel getah nangka 2% kemudian dilakukan pembedahan pada harike-7

4.2 Sampel Penelitian

4.2.1 Pemilihan Binatang Coba dan Teknik Randomisasi

4.2.1.1 Kriteria Inklusi

Sampel penelitian dipilih berdasarkan ketentuain kriteria inklusi, yaitu:

a. Tikus putih strain wistar

b. Berjenis kelamin jantan

c. Usia 2,5-3 bulan

d. Berat badan 150-180 gram

38

e. Sehat, yang ditandai dengan gerakannya yang aktif, mata jernih,

bulu yang tebal dan berwarna putih mengkilap

f. Tidak ada abnormalitas anatomis yang tampak

4.2.1.2 Kriteria Eksklusi

Sampel penelitian dipilih berdasarkan ketentuan kriteria eksklusi,

yaitu:

a. Tikus yang pernah digunakan dalam penelitian sebelumnya

b. Tikus yang kondisinya menurun atau mati selama penelitian

berlangsung

4.2.2 Estimasi Jumlah Pengulangan

Jumlah sampel pada penelitian, setiap tikus mendapatkan perlakuan

berbeda dalam rongga mulut, yaitu dibagi menjadi 4 perlakuan (kontrol, P1,

P2, dan P3). Penelitian ini menggunakan 2 time series yaitu hari ke 3 dan 7.

Menurut Hanafilah tahun 2005, jumlah sampel tiap perlakuan didapatkan dari

rumus (t - 1) (r - 1) ≥ 15, dengan t adalah jumlah perlakuan dan r adalah

jumlah sampel yang diperlukan disetiap perlakuan. Dari rumus tersebut maka

diperoleh hasil perhitungan :

(t - 1) (r - 1) ≥ 15

(4 perlakuan x 2 time series – 1) (r – 1) ≥ 15

(8 - 1)(r – 1) ≥ 15

7 (r – 1) ≥ 15

7 r – 7 ≥ 15

7 r ≥ 22

r ≥ 3,14 ≈ 4 + 1 = 5 (untuk menghindari berkurangnya jumlah sampel

penelitian akibat tikus mati sebelum dan/atau selama penelitian)

39

Sampel yang digunakan adalah 5 tikus untuk setiap kelompok

perlakuan. Total tikus yang akan digunakan pada penelitian ini sejumlah 4

(perlakuan) x 2 (hari pengamatan) x 5 (tikus yang dibedah setiap time series)

= 40 tikus. Maka diperlukan sampel sejumlah 20 tikus untuk satu kali

pembedahan.

4.3 Variabel Penelitian

Variabel dalam penelitian ini dibagi menjadi 3, yaitu:

4.3.1 Variabel Independen

Gel getah buah nangka (Artocarpus heterophyllus Lam.) diberikan kepada

kelompok perlakuan. Dosis gel getah buah nangka yang digunakan secara

topikal adalah 0,5%, 1%, dan 2%.

4.3.2 Variabel Dependen

Ketebalan lapisan epitel yang terlihat dalam preparat histologi

4.3.3 Variabel Terkendali

a. Makanan dan minuman sampel

b. Kebersihan kandang

c. Jenis kelamin tikus

d. Jenis tikus

e. Berat badan tikus

f. Umur tikus

4.4 Tempat dan Waktu Penelitian

Penelitian ini dilakukan di UPT Materia Medica Batu, Laboratorium Fisiologi

Hewan Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam (FMIPA) Universitas

40

Brawijaya, Laboratorium Farmasi, Laboratorium Biokimia, dan Laboratorium

Patologi Anatomi Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya Malang dalam

jangka waktu ±4 bulan dimulai dari bulan September sampai Desember 2017.

4.5 Alat dan Bahan Penelitian

4.5.1 Pemeliharaan Hewan Coba

Alat yang dibutuhkan adalah kandang tikus ukuran 15 x 30 x 42 cm3

yang diisi 2-3 ekor tikus dan diberi alas sekam yang diganti 2 kali setiap

minggu, tutup kandang dari anyaman kawat, tempat makan, dan botol air

minum. Diet normal terdiri dari 67% Comfeed PAR-S dan terigu dalam

perbandingan 2:1 dengan air secukupnya diberikan dalam bentuk pelet

4.5.2 Pembuatan Gel Getah Buah Nangka (Artocarpus heterophyllus

Lam.)

Alat yang dibutuhkan untuk membuat gel getah buah nangka adalah

freeze dryer, neraca digital, gelas ukur, pipet, gelas beaker, mortar, pestle,

spatula, dan wadah untuk menyimpan gel. Alat yang dibutuhkan untuk uji gel

adalah pH meter, object glass, glass lab, dan beban. Bahan yang dibutuhkan

adalah getah buah nangka, natrium metabisulfit 0,7%, etanol 96%, karbopol ,

TEA, gliserol, natrium metabisulfit, metil paraben, propil paraben, dan

aquadest.

4.5.3 Perlakuan Hewan Coba

Alat yang dibutuhkan adalah cement stopper, bunsen, gunting bedah,

pinset, talenan, dan tabung organ. Bahan yang dibutuhkan adalah

handscoon, masker, ketamine, formalin 10%, dan alkohol 70%.

41

4.5.4 Pemeriksaan Histologi

Alat yang dibutuhkan adalah talenan, pisau scalpel, pinset, saringan,

tissue cassete, mesin prosesor otomatis, mesin vakum, mesin blocking,

freezer, mesin dan pisau mikrotom, water bath, object glass, kaca penutup,

rak khusus untuk pewarnaan, oven. Bahan yang dibutuhkan adalah

potongan jaringan yang telah difiksasi dengan formalin 10%, ethanol

absolute, xylol, paraffin, lithium carbonate, entellan, larutan Hematoksilin,

larutan eosin.

4.6 Definisi Operasional

4.6.1 Getah buah nangka

Getah buah nangka (Artocarpus heterophyllus Lam.) adalah zat cair

pekat berwarna putih yang terdapat pada buah nangka. Getah buah nangka

diperoleh dari buah nangka di UD Putra Fajar Kota Batu, dan diambil dengan

cara dipotong pada bagian tengahnya, lalu getah yang keluar ditampung

dalam wadah steril dan ditambahkan natrium metabisulfit 0,7% untuk

mencegah terjadinya oksidasi (Siswanto, 2015). Nangka yang dipilih adalah

nangka yang sudah matang. Ciri-ciri buah nangka yang sudah matang yaitu

memiliki duri yang besar dan jarang, mempunyai aroma nangka yang khas

walaupun dalam jarak yang agak jauh, setelah dipetik daging buahnya

berwarna kuning segar.

4.6.2 Gel getah buah nangka

Gel getah buah nangka adalah sediaan semipadat yang mengandung

zat aktif dari getah buah nangka. Gel yang digunakan pada penelitian ini

berasal dari getah buah nangka (Artocarpus heterophyllus Lam.) yang telah

42

dilakukan proses freeze drying, kemudian dicampurkan dengan basis dalam

3 dosis yakni 0,5%, 1%, dan 2%. Dosis tersebut sesuai dengan penelitian

oleh Siswanto (2015) dan Stefanus (2015) yang meneliti formulasi gel serbuk

getah nangka sebagai antijerawat secara in vitro dan in vivo. Warna gel

adalah putih kekuningan (Siswanto, 2015).

4.6.3 Ulser traumatik

Ulser traumatik adalah bentukan lesi ulseratif yang disebabkan oleh

karena adanya trauma (Neville et al., 2016). Ulser traumatik dibuat dengan

cara induksi panas, yakni menggunakan ujung cement stopper berdiameter

4mm yang dipanaskan dengan bunsen selama 10 detik atau sampai warna

cement stopper berubah merah, kemudian ditempelkan pada mukosa labial

rahang bawah tikus putih selama 4 detik untuk membentuk ulser. Tikus

sebelumnya dianastesi dengan ketamine 0,2 ml (10mg/kgBB) secara

intramuskular. Kemudian jaringan perlukaan dibiarkan selama 24 jam atau

sampai terbentuk ulser. Ulser yang sudah terbentuk ditandai dengan adanya

daerah eritema yang awalnya terlihat di bagian tepi dan bagian tengah ulser

berupa membran fibrinopurulen berwarna abu-abu kuning.

4.6.4 Ketebalan Epitel

Ketebalan epitel adalah ukuran tebalnya epitel berlapis pipih pada

lapisan terluar dari mukosa mulut. Penghitungan ketebalan lapisan epitel

dilihat dan diukur pada preparat biopsi eksisi sekitar ulser yang diambil pada

hari ke-3 dan hari ke-7 setelah ulserasi yang kemudian dilakukan pewarnaan

Hematoksilin-Eosin (HE). Ketebalan epitel diukur dengan menggunakan

mikrometer okuler pada mikroskop digital dan software viewer gambar

dengan pembesaran 400x (Atik et al., 2009). Untuk satu gambar histologi,

43

pertama ditentukan panjang area luka yang diukur ketebalan epitelnya

sepanjang 4000 µm (setara dengan kedalaman luka ulserasi, yaitu ± 4 mm)

dalam pembesaran 100x agar seluruh area terlihat. Ujung luka satu dengan

ujung luka yang lain ditandai, kemudian ditentukan 5 garis pengukur dengan

jarak yang sama. Selanjutnya perbesaran diubah menjadi 400x dan dengan

mikrometer digital dibuat garis yang ditarik dari ujung epitel berkeratin hingga

lamina basalis, dan secara otomatis akan menunjukkan besarnya ketebalan

jaringan epitel hingga ke-5 titik terukur. Terakhir, diambil rata-rata dari data

tersebut. Adanya peningkatan tebal epitel pada jaringan luka, dilihat dari

perbedaan ketebalan epitel dibandingkan dengan kontrol (Widagdo, 2004;

Pastar et al., 2013).

4.7 Prosedur penelitian

4.7.1 Persiapan Hewan Coba

Hewan coba diseleksi berdasarkan kriteria sampel, kemudian dibagi

menjadi 8 kelompok, masing-masing terdiri dari 5 ekor tikus yang dipelihara

di dalam tempat pemeliharaan hewan coba.

4.7.2 Pemeliharaan Hewan Coba

Tikus dipelihara dan diadaptasikan dalam laboratorium selama 1

minggu. Tempat pemeliharaan tikus menggunakan box plastik berukuran 15

x 30 x 42 cm3 yang masing-masing diisi 2-3 ekor tikus, ditutup dengan kawat

kasa, diberi alas sekam yang diganti 2 kali setiap minggu. Kebutuhan

makanan tikus dewasa adalah 40 gram/hari/ekor. Diet normal terdiri dari

Comfeed PAR-S dan terigu dalam perbandingan 2 : 1 dengan air

secukupnya diberikan dalam bentuk pelet.

44

4.7.3 Determinasi Buah Nangka

Determinasi buah nangka dilakukan di UPT Materia Medica Batu.

4.7.4 Pengambilan Getah Buah Nangka

Getah buah nangka (Artocarpus heterophyllus Lam.) diperoleh dari

UD Putra Fajar Batu. Getah buah nangka diperoleh buah nangka yang

dipotong pada bagian tengahnya, lalu getah yang keluar ditampung dalam

wadah steril dan ditambahkan natrium metabisulfit 0,7% untuk mencegah

terjadinya oksidasi (Siswanto, 2015).

4.7.5 Pembuatan Gel Topikal

Getah yang telah dimasukkan ke dalam wadah steril kemudian

dikirim ke laboratorium Fisiologi Hewan di Fakultas Matematika dan IPA

(FMIPA) Universitas Brawijaya untuk dilakukan proses freeze drying. Proses

tersebut memakan waktu minimal 24 jam setelah getah nangka dibekukan

terlebih dahulu. Hasil yang didapatkan dari proses tersebut berupa sediaan

getah dalam bentuk serbuk dan siap dibentuk menjadi sediaan gel di

laboratorium Farmasi Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya. Prosedur

pembuatan gel dilakukan dengan cara:

a. Persiapan alat dan bahan

b. Mengukur jumlah bahan yang dibutuhkan sesuai formulasi gel

45

Tabel 4.1 Formulasi sediaan gel getah buah nangka (Febiati, 2016)

BahanFormula

Kontrol 0,5% 1% 2%

Getah buah nangka(Artocarpus

heterophyllus Lam.)- 0,15 gram 0,3 gram 0,6 gram

Karbopol 940 0,6 gram 0,6 gram 0,6 gram 0,6 gram

TEA 0,375 gram 0,375 gram 0,375 gram 0,375 gram

Gliserol 3,75 gram 3,75 gram 3,75 gram 3,75 gram

Natrium metabisulfit 0,15 gram 0,15 gram 0,15 gram 0,15 gram

Metil paraben 0,054 gram 0,054 gram 0,054 gram 0,054 gram

Propil paraben 0,06 gram 0,06 gram 0,06 gram 0,06 gram

Aquadest 25,011 gram 24,861gram 24,711 gram24,411gram

Total 30 gram 30 gram 30 gram 30 gram

c. Pembuatan gel getah buah nangka

(1)Alat dan bahan disiapkan, ditimbang bahan-bahan yang diperlukan

(2)Karbopol 940 dikembangkan dalam aquadest sebanyak 20 kali berat

dari karbopol 940 di dalam lumpang dan alu, lalu digerus hingga

terbentuk dispersi yang homogen.

(3)Setelah mengembang ditambahkan natrium metabisulfit, metil paraben

dan propil paraben yang telah dilarutkan di dalam gliserol hingga

homogen.

(4)Kemudian ditambahkan getah buah nangka (Artocarpus heterophyllus

Lam.) dan aquadest sampai volume yang diinginkan dengan

pengadukan perlahan secara kontinyu sampai membentuk gel yang

homogen.

(5)Tambahkan dengan TEA tetes demi tetes sampai pH yang diinginkan

46

(6)Gel disimpan dalam wadah gel (Febiati, 2016).

d. Evaluasi sediaan gel dilakukan, meliputi:

(1)Uji organoleptik

Uji organoleptik dilakukan untuk melihat tampilan fisik sediaan dengan

cara melakukan pengamatan terhadap bentuk, warna dan bau dari

sediaan yang telah dibuat.

(2)Uji homogenitas

Gel dioleskan diatas kaca objek, kemudian kaca objek tersebut

dikatupkan dengan kaca objek lainnya dan dilihat apakah gel tersebut

homogen atau tidak. Homogenitas ditunjukkan dengan tidak adanya

butiran kasar.

(3)Uji pemeriksaan pH

Elektroda dicuci dan dibilas dengan air suling. Dikalibrasi pH meter

dengan menggunakan larutan dapar pH 7 (dapat fosfat ekimolal) dan

dapar pH 4 (dapar KHP) kemudian nilai pH gel getah nangka ditentukan

(Stefanus, 2015).

(4)Uji daya lekat

Gel sebanyak 0,5 gram diletakkan di atas glass lab dan ditutup dengan

glass lab yang lain. Kemudian gel diberikan beban sebesar 20 gram

selama 1 menit, dan diameter gel diukur dengan menggunakan

penggaris. Beban diganti menjadi 50 gram dan 100 gram masing-masing

selama 1 menit dan diukur dengan cara yang sama.

4.7.6 Pembuatan Ulser Traumatik

Pembuatan ulser traumatik yang ddinduksi panas didahului dengan

anastesi menggunakan ketamine 0,2 ml intramuscular¸ kemudian diinduksi

47

dengan ujung cement stopper kedokteran gigi yang sebelumnya telah

dipanaskan dengan bunsen selama 10 detik dan ditempelkan pada mukosa

labial rahang bawah tanpa tekanan selama 4 detik sehingga terbentuk ulser

setelah diinkubasi pasca induksi.

1) Mempersiapkan alat dan bahan

2) Melakukan anestesi intramuskular menggunakan ketamine 0,2 ml

3) Ujung cement stopper kedokteran gigi yang sebelumnya telah dipanaskan

dengan bunsen selama 10 detik pada mukosa labial tikus selama 4 detik

(Herlina, 2016).

4.7.7 Pemberian Gel Getah Nangka

Pemberian gel getah nangka dilakukan 24 jam setelah induksi panas

(ulser telah terbentuk) dengan frekuensi 2 kali sehari sampai hari ke-3 dan

hari ke-7 pada kelompok perlakuan (P1, P2 dan P3), sedangkan kelompok

kontrol diberikan senyawa pembawa gel tanpa getah.

4.7.8 Pembedahan Hewan Coba

Pada hari ke-3 dan hari ke-7, hewan coba dieuthanasia dengan

menggunakan injeksi ketamine dosis letal secara IM pada paha tikus.

Setelah itu, jaringan ulser diswab dengan alkohol 70% lalu dibuat biopsi

eksisi.

4.7.9 Prosedur Pembuatan Preparat

a. Fiksasi

Pada tahap fiksasi, dilakukan perendaman jaringan ulser pada larutan

formalin 10% selama 18-24 jam. Kemudian jaringan dicuci dengan

menggunakan aquadest selama 15 menit (Jusuf, 2009).

48

b. Embedding

Jaringan ulser dimasukkan pada beberapa cairan, yaitu aseton selama 1

jam x 4, xylol selama setengah jam x 4, paraffin cair selama 1 x 3 dan

penanaman jaringan mukosa pada paraffin blok (Jusuf, 2009).

c. Slicing

Blok yang sudah tertanam jaringan ulser diletakkan pada balok es selama

±15 menit, kemudian blok ditempelkan pada cakram mikrotom rotary

kemudian sayat jaringan ulser secara vertical dengan ukuran 4 micron.

Sayatan jaringgan ulser yang berbentuk pita diambil dengan menggunakan

kuas kecil, kemudian diletakkan pada waterbath yang mengandung gelatin

dengan suhu 36ºC. setelah sayatan ulser merentang, sayatan diambil

dengan menggunakan object glass dan didiamkan selama 24 jam (Jusuf,

2009).

d. Staining

Object glass dimasukkan dalam xylol selama 15 menit x 3, alkohol 96%

selama 15 menit x 3, kemudian dicuci dengan air mengalir selama 15 menit.

Setelah itu, object glass dimasukkan pada pewarna Haematoxylin selama 15

menit dan dicuci dengan air mengalir selama 15 menit. Object glass

dimasukkan ke dalam Lithium Carbonate selama 20 detik, dan dicuci dengan

air mengalir selama 15 menit. Object glass dimasukkan ke dalam pewarna

Eosin selama 15 menit, alkohol 96% selama 15 menit x 3, dan xylol selama

15 menit x 3. Terakhir, preparat ditutup dengan menggunakan deck glass

Entellan (Jusuf, 2009).

49

4.7.10 Pengamatan Sediaan Histologi Mukosa Labial Rattus norvegicus

Pengamatan sediaan histologi mukosa labial tikus yang dibedah pada

hari ke-3 dan hari ke-7 dilakukan dengan menggunakan mikrometer okuler

pada mikroskop digital dan software viewer gambar dengan pembesaran

400x (Atik et al., 2009). Untuk satu gambar histologi, pertama ditentukan

panjang area luka yang diukur ketebalan epitelnya sepanjang 4000 µm

(setara dengan lebar luka ulserasi, yaitu ± 4 mm) dalam pembesaran 100x

agar seluruh area terlihat. Ujung luka satu dengan ujung luka yang lain

ditandai, kemudian ditentukan 5 garis pengukur dengan jarak yang sama.

Selanjutnya perbesaran diubah menjadi 400x dan dengan mikrometer digital

dibuat garis yang ditarik dari ujung epitel berkeratin hingga lamina basalis,

dan secara otomatis akan menunjukkan besarnya ketebalan jaringan epitel

hingga ke-5 titik terukur. Terakhir, diambil rata-rata dari data tersebut.

4.8 Analisis Data

Hasil pengukuran ketebalan lapisan epitel pada kelompok kontrol dan

perlakuan dianalisis secara statistik dengan menggunakan aplikasi analisis

statistik dengan tingkat signifikasi 0,05 (p = 0,05) dan taraf kepercayaan 95% (α

= 0,05). Langkah-langkah uji hipostesis komparatif dan korelatif adalah sebagai

berikut :

1. Uji normalitas data : bertujuan untuk menginterpretasikan apakah suatu data

memiliki distibusi normal atau tidak. Untuk penyajian data yang terdistribusi

normal, maka digunakan mean dan standar deviasi sebagai pasangan ukuran

pemusatan dan penyebaran, uji hipotesis menggunakan uji parametrik.

Sedangkan untuk penyajian data yang tidak terdistribusi normal digunakan

50

median dan minumun-maksimum sebagai pasangan ukuran pemusatan dan

penyebaran, uji hipotesis menggunakan uji non parametrik.

2. Uji homogenitas varian : bertujuan untuk menguji berlaku atau tidaknya

asumsi ANOVA, yaitu apakah data yang diperoleh dari sertiap perlakuan

memiliki varian yang homogen. Jika didapatkan varian yang homogen, maka

analisa dapat dilanjutkan dengan uji ANOVA.

3. Uji One-Way ANOVA : bertujuan untuk membandingkan nilai rata-rata dari

masing-masing kelompok perlakuan dan mengetahui minimal ada dua

kelompok yang berbeda signifikan.

4. Post Hoc test (uji Least Significant Difference) : bertujuan untuk mengetahui

kelompok mana yang berbeda secara signifikan dari hasil tes ANOVA. Uji Pos

Hoc yang digunakan adalah uji Turke dengan tingkat kemaknaan 95% (p <

0,05).

5. Uji korelasi Pearson : bertujuan untuk mengetahui besarnya perbedaan

secara kualitatif kelompok yang berbeda secara signifikan yang telah

ditentukan sebelumnya dari hasil Uji Pos Hoc (LSD)

6. Uji korelasi-regresi : bertujuan untuk mengetahui kekuatan hubungan antara

dosis gel getah buah nangka terhadap ketebalan lapisan epitel (Dahlan,

2008).

7. Independent T-test: untuk membandingkan dua rata-rata dua grup yang tidak

berhubungan.

51

4.9 Skema Prosedur Penelitian

4.9.1 Pembuatan Gel Getah Nangka

Getah Buah Nangka

Freeze dry selama 24 jam

Karbopol dikembangkan dalamaquadest

Ditambah natrium metabisulfit,

metil paraben, dan propil paraben

yang telah dilarutkan dallam

gliserol

Campurkan dan tambahkan aquadest sampai

volume yang diinginkan sambil diaduk hingga

homogen

Tambahkan dengan TEA tetes demi tetes sampai

pH yang diinginkan sambil diaduk hingga

homogen

Gel disimpan dalam wadah tertutup

52

4.9.2 Pengaruh Gel Getah Buah Nangka 0.5%, 1% dan 2%

Sample Rattus norvegicus

(40 Ekor)

Penyesuaian selama

7 hari

Injeksi ketamine 0,2 ml dan perlakuan induksipanas pada mukosa labial bawah

Kontrol Perlakuan 1(P1)

Perlakuan 2(P2)

Perlakuan 3(P3)

Tunggu ulserterbentuk

selama 24 jam

Aplikasipembawa geltanpa getah

Aplikasi gelgetah

nangka 0,5%

Aplikasi gelgetah

nangka 1%

Aplikasi gelgetah

nangka 2%

Dilakukan euthanasia menggunakan ketamine dosis letal danpembedahan mukosa labial rahang bawah pada hari ke 3 dan ke-7

Pembuatan preparat histologi jaringan

Perhitungan ketebalan lapisan epitel

Analisis data

Kesimpulan


selama 24 jam


selama 24 jam


selama 24 jam

53

BAB V

HASIL PENELITIAN DAN ANALISIS DATA

5.1 Hasil Penelitian

Penelitian ini menggunakan hewan coba berupa tikus putih (Rattus

norvegicus) yang dibagi menjadi 8 kelompok, yaitu kelompok kontrol (K),

perlakuan 1 (P1), perlakuan 2 (P2), dan perlakuan 3 (P3) masing-masing pada

hari ke-3 dan hari ke-7. Tikus diberikan perlakuan berupa induksi panas pada

mukosa labial bawah

PENGARUH GEL GETAH BUAH NANGKA (Artocarpus …repository.ub.ac.id/167959/1/Himmah Islaura Mas’udi...

Documents

Transcript of PENGARUH GEL GETAH BUAH NANGKA (Artocarpus …repository.ub.ac.id/167959/1/Himmah Islaura Mas’udi...