PENGAMBILAN DAN PENGOLAHAN SPESIMEN DARAH DAN CAIRAN

TUBUH

KUALITAS PEMERIKSAAN PASIEN

- Pasien

- Pasien perawatan

- Pasien anak

- Pasien remaja

- Pasien dewasa

- Pasien geriatrik

PENGENDALIAN INFEKSI

- Isolasi sebagai sistem keamanan

- Standar dan pencegahan

PENGAMBILAN SPESIMEN

- Variable pengambilan darah

- Prosedur pengambilan darah

- Jenis Antikoagulan darah

- Bahan tambahan dan antikoagulan

- Prosedur venipuncture

PROSES PENGAMBILAN DARAH VENA`

- Perlengkapan dan peralatan

- Langkah awal prosedur

- Pemilihan lokasi pengambilan darah yang tepat

1

- Persiapan lokasi venipuncture

- Pengambilan darah vena

- Pemutusan prosedur

- Masalah proses pengambilan darah

- Komplikasi proses pengambilan darah

- Pengumpulan kultur darah

- Pengambilan darah kapiler dan perifer dengan tusukan pada kulit

PENGAMBILAN DARAH KAPILER

- Persediaan dan peralatan

- Pemilihan lokasi pengambilan darah yang tepat

- Menyiapkan daerah pengambilan

- Proses penusukankulit

- Pengumpulan darah kapiler

- Darah kapiler untuk pemeriksaan

- Mengumpulkan mikrospesimen

- Peralatan laser

SPECIEMENS: PERSIAPAN UMUM

- Pengolahan sampel darah

- Sampel yang tidak dapat digunakan

- Pengaruh obat terhadap sampel

- Pencatatan dan pelaporan

- Pengawetan dan penyimpanan sampel

URIN

- Jenis sampel urin

- Wadah untuk pengambilan urin

- Pengumpulan sampel urin

- Pengawetan sampel urin

2

- Pelabelan dan pengolahan sampel urin

CAIRAN TUBUH

- Cairan serebrospinal

- Cairan sinovial

- Cairan pericardial, pleura dan peritoneal

- Cairan semen

KULTUR SWABS

- Swab tenggorok

- Feses

- Keringat

- Air liur / saliva

TUJUAN PEMBELAJARAN

Pada bab ini siswa diharapkan dapat:

- Mengidentifikasi tujuh faktor yang harus dimonitor pada kualitas metode

pemeriksaan

- Menunjukan dan mempraktekan cara mengumpulkan sampel dari pasien

- Menjelaskan pada pasien tujuan pengambilan sampel

- Menjelaskan dan menerapkan tentang tindakan pencegahan

- Menjelaskan peralatan yang digunakan untuk pengumpulan darah vena

- Menjelaskan dan menunjukan tehnik pengambilan darah vena

- Mengidentifikasi kode warna pada tabung dan zat tambahan pada tabung

- Membandingkan antikoagulan dan zat tambahan yang digunakan untuk

mengawetkan sampel darah

- Menjelaskan cara kerja EDTA dan heparin

- Menjelaskan kesalahan yang petensial terjadi pada proses pengumpulan

sampel

3

- Mencatat dan menjelaskan lima situasi yang menyulitkan dalam pemilihan

tempat venipuncture

- Mengidentifikasi delapan permasalahan yang timbul pada saat phlebotomydan

dan menjelaskan penangananya

- Menjelaskan beberapa teknik pengambilan sampel pada vena yang kecil

- Menjelaskan pengambilan sampel pada pasien anak dan usia lanjut

- Mencatat enam kategori komplikasi pada phlebotomydan menjelaskan gejala

dan terapi bila terjadi komplikasi

- Menjelaskan dan menunjukan teknik yang tepat untuk pengumpulan sampel

darah kapiler

- Menjelaskan tujuan penggunaan system unopette

- Mengidentifikasi dan membandingkan syarat sampel urin untuk urin

rutin,termasuk urin midstream ,jumlah urin dan penyimpanan urin

- Menjelaskan dan membedakan berbagai jenis urin, termasuk urin midstream,

jumlah urin dan penyinpanan urin

- Menjelaskan dengan singkat prosedur pengumpulan sampel cairan tubuh

lainnya termasuk cairan serebrospinal, cairan pleura, dan cairan sinovial

- Mengumpulkan dan menjelaskan prosedur yang tepat untuk pengambilan

swab tenggorokan untuk kultur

- Pengumpulan feses untuk darah samar dan uji lainnya

- Menjelaskan hukum medis yang berkaitan dengan pengumpulan sampel

KUALITAS PEMERIKSAAN

Ketepatan pemeriksaan laboratorium dimulai dengan kualitas sampel yang

diterima oleh laboratorium. Kualitas ini tergantung pada bagaimana sampel

dikumpulkan, dibawa dan diproses. Sebuah uji laboratorium tidak akan lebih baik

jika sampel tidak dikumpulkan dengan benar atau disimpan atau penanganan yang

4

tidak benar, hal ini mengakibatkan analisis yang tidak akurat sehingga hasil analisis

tidak dapat digunakan oleh dokter untuk mendiagnosa dan memberikan terapi.

Penilaian kualitas pemeriksaan atau quality assurance digunakan untuk

menggambarkan manajemen terapi pada pasien.( lihat gambar 8). Seperti

laboratorium klinik yang lain, penilaian kualitas memerlukan kebijakan dalam

mempertahankan dan memberi kontrol pada pasien dan sampel.

Penilaian kualitas dan pemantauan proses pangambilan sampel, terdiri dari:

- Persiapan pasien untuk setiap sampel yang akan diambil

- Pengambilan sampel yang benar

- Peralatan untuk membawa sampel

- Kinerja laboratorium yang diminta

- Validasi hasil tes

- Pencatatan dan pelaporan hasil tes

- Salin hasil tes ke rekam medik pasien

- Dokumentasi, pemeliharaan dan ketersediaan catatan menggambarkan

kualitas pemeriksaan dan pengendalian kualitas.

PASIEN

Peran phlebotomist sangatlah penting untuk pasien atau laboratorium.Lebih

dari duapertiga kesalahan laboratorium disebabkan kesalahan sebelum tes dilakukan

atau kesalahan preanalitik. Kebanyakan kesalahan ini terkait dengan pengumpulan

dan penanaganan sampel.Phlebotomist dapat mengurangi kesalahan dengan latihan

dan selalu waspada terhadap sumber kesalahan. Selain itu, phlebotomist adalah staf

laboratorium yang paling sering berhubungan dengan pasien. Ini berarti bahwa

gambaran laboratorium hanya diwakili oleh phlebotomist.

Phlebotomist ini diharapkan dapat memberikan kepuasan kepada pelanggan.

Hal ini penting untuk memahami dan mengetahui harapan pasien, mengelola harapan

5

yang tidak realistis melalui pendidikan pasien, dan bersikap diplomatis dengan

keluhan pasien. Jika pasien tidak bahagia, phlebotomist harus mendengarkan dengan

penuh minat, mengekspresikan perhatian yang tulus, dan membuat upaya untuk

menyelesaikan masalah yang ada. Jika phlebotomist melakukan kesalahan,

mengucapkan permintaan maaf dengan tepat.

PASIEN KEMITRAAN

Pemberian pelayanan kesehatan melibatkan kemitraan antara pasien dengan

dokter dan profesional kesehatan lainnya.Ketika mengumpulkan sampel darah,

penting bagi phlebotomist untuk memperhatikan hak pasien setiap saat.The American

Hospital Associationtelah mengembangkan dokumen kemitraan pasien perawatan

yang memperhatikan hak pasien. Dokumen ini menekankan hal-hal berikut:

- Rumah sakit perawatan yang berkualitas

- Lingkungan yang bersih dan aman

- Keterlibatan pasien dalam perawatan mereka

- Perlindungan terhadap privasi pasien

- Memberi bantuan terhadap pasien saat meninggalkan rumah sakit

- Memberi bantuan untuk pasien dalam klaim tagihan

Pasien sendiri atau orang lain yang dipilih pasien dapat melaksanakan hak-hak pasien

ini. Pembuat keputusan ini dapat bertindak atas nama pasien jika pasien tidak

memiliki kemampuan dalam mengambil keputusan, secara hukum tidak kompeten,

atau masih dibawah umur.

Sifat kemitraan pelayanan kesehatan bagi pasien atau keluarga mereka atau

perwakilan mereka yang mengambil bagian dalam perawatan mereka. Dengan

demikian, pasien bertanggung jawab dalam riwayat medis yang akurat dan setiap

petunjuk ditulis terlebih dahulu mengikuti peraturan rumah sakit. Dan sesuai dengan

kegiatan yang memberi kontribusi terhadap gaya hidup sehat.

6

PASIEN ANAK

Ketika bekerja dengan anak-anak, penting untuk bersikap lembut dan penuh

kasih. Kita harus berusaha berinteraksi dengan pasien anak-anak dan menyadari

bahwa pasien dan orang tuanya mungkin memiliki kecemasan tentang prosedur dan

belum terbiasa dengan itu. Beri penjelasan kepada orang tua dan anak.

Jangan terburu- buru dan beri cukup waktu dalam prosedur ini. Sangat penting

untuk memberi waktu lebih untuk mendapat kepercayaan anak dalam melakukan

pengambilan sampel.Dalam bekerja dengan pasien anak, sangat penting untuk

meningkatkan keberanian mereka.Mintalah bantuan dalam menangani pasien anak

yang sangat kecil atau anak yang tidak kooperatif. Anak yang lebih besar akan lebih

responsif ketika diijinkan terlibat dalam pengambilan sampel.

Setiap rumah sakit mempunyai aturan sendiri, tetapi beberapa tindakan

pencegahan yang umum diberlakukan. Setelah bekerja dengan bayi di tempat tidur,

sisi boks bayi harus dikembalikan pada posisi semula. Jika bayi dalam inkubator,

usahakan inkubator sebisa mungkin tetap tertutup. Ketika inkubator menggunakan

oksigen jangan lupa untuk menutup kembali ketika proses pengambilan sampel telah

selesai. Semua bahan habis pakai harus dibuang ketempat sampah.

PASIEN REMAJA

Ketika mendapatkan sampel darah dari pasien remaja, penting untuk bersikap

santai dan waspada terhadap kecemasan yang timbul. Teknik interaksi yang baik,

waktu yang cukup harus dilakukan ketika prosedur ini akan dilakukan, tatapanmata

petugas vcukup untuk member dukungan pada pasien dalam mempertahankan kontrol

diri.

7

PASIEN DEWASA

Pasien dewasa harus diberi penjelasan secara singkat apa yang diharapkan dari

mereka dan tes apa yang akan mereka lakukan. Penjelasan yang lengkap sangatlah

penting.Pasien harus disambut dengan ramah dan bijaksana tanpa menjadi terlalu

akrab, percakapan dapat dimulai dengan menyenangkan dan pelan.Pasien harus diberi

penjelasan tentang tujuan dari pengambilan darah.Setiap informasi pribadi yang

diungkapkan pasien tanggapi dengan keyakinan, pasien yang religius harus dihormati,

laporan laboratorium harus dirahasiakan begitupun dengan informasi pribadi yang

telah disampaikan. Informasi tentang pasien lain dan dokter harus dijaga

kerahasiannya. Jika pasien yang sama sering terlihat,phlebomist akan menjadi akrab

dengan kepentingan pasien termasuk hobi atau keluarganya dan menggunakan ini

sebagai topik pembicaraan. Banyak pasien di rumah sakit sangat kesepian dan

membutuhkan teman. Kadang-kadang pasien yang sakit berat tidak mau berbicara

sama sekali dan ini harus dihormati. Hal ini penting untuk menghormati pasien tetapi

harus dicoba untuk meningkatkan semangat pasien sebisa mungkin.

Sekalipun pasien tidak menyenangkan, phlebotomist harus tetap

ramah.Senyuman dapat menjadi keajaiban.Sangatlah penting untuk tetap sabar,

gembira dan percaya diri dalam bekerja walaupun pasien tidak menyenangkan.

Di rumah sakit, sebelum meninggalkan ruangan pasien harus diperiksa kembali

semua peralatan laboratorium harus ada pada tempatnya. Tempat tabung yang berisi

koleksi darah harus dijaga dan jauhkan dari jangkauan pasien.Alat dan bahan habis

pakai harus dibuang ke tempat sampah.

8

PASIEN USIA LANJUT

Sangatlah penting untuk bersikap bebas dan hormat pada pasien usia lanjut.

Jangan meredahkan mereka. Panggillah mereka dangan nama yang formal misalnya

tuan atau nyonya daripada hanya nama depan mereka. Pasien secara umum terutama

pasien tua sangat menikmati percakapan pendek.Jika pasien kelihatan kurang

pendengaran berbicaralah lebih lambat dan nyaring.

KONTROL TERHADAP INFEKSI

ISOLASI SEBAGAI SISTEM KEAMANAN

Isolasi didefinisikan sebagai pemisahan pasien yang sakit berat dengan tujuan

menghentikan penyebaran infeksi kepada orang lain atau untuk melindungi pasien

dari faktor penularan. Istilah isolasi telah berubah dari makna pencegahan yang

dilakukan petugas kesehatan untuk beberapa pasien menjadi sistem keselamatan yang

dilakukan oleh semua orang dalam proses perawatan rutin. Tindakan isolasi adalah

tindakan pencegahan rutin yang harus dilakukan sebagai bagian dari proses

perawatan sehari-hari.

Teknik isolasi modern menggabungkan teori yang berbasis luas yang

membahas kebutuhan pasien maupun karyawan untuk memastikan bahwa

lingkungan kerja pada fasilitas kesehatan sangat aman. Saat ini telah digunakan dua

tingkat strategi keamanan.

9

STANDAR PENCEGAHAN/ KEWASPADAAN DAN TAMBAHAN

Konsep pencegahan diterapkan pada petugas kesehatan untuk mengubah cara

pandang mereka terhadap pengendalian infeksi. Dua sistem kewaspadaan telah

dikembangkan dengan tujuan meminimalisasi resiko infeksi dan memaksimalkan

tingkat keamanan dalam lingkungan fasilitas kesehatan.

Sistem pengedalian infeksi pertama adalah mempraktekan kewaspadaan

standar. Teori kewaspadan standar yaitu perlunya mengurangi resiko penularan

mikroba, termasuk HIV dari sumber infeksi yang teridentifikasi maupun yang tidak

teridentifikasi. Protokol tindakan kewaspadaan dengan pelindung harus dilakukan

ketika kontak dengan darah dan cairan tubuh lainya.

Sistem pengendalian infeksi yang kedua dikembangkan untuk memberikan

pencegahan tambahan dalam mengontrol penularan agen infeksi dalam keadaan

khusus ketika kewaspadaan standar saja tidak cukup.

Penularan agen infeksi dibagi menjadi 3 kategori yaitu kontak langsung,

kontak lewat udara dan kontak dengan tetesan air liur

PENCEGAHAN KONTAK LANGSUNG

Pencegahan kontak langsung dirancang untuk menghentikan penyebaran

mikroorganisme melalui kontak langsung , seperti kontak kulit ke kulit dan kontak

tidak langsung biasanya berasal dari orang melakukan kontak dengan benda mati yng

terkontaminasi.pencegahan kontak langsung termasuk mengenakan sarung tangan

saat kontak dengan kulit pasien atau dengan benda yang telah dipegang pasien.

Memakai baju khusus disarankan bagi perawat yang melakukan kontak langsung

dengan pasien atau saat mendatangi kamar pasien.

10

PENCEGAHAN AIRBONE

Pencegahan airbone dirancang untuk memberikan perlindungan dari bakteri

udara yang sangat kecil atau partikel debu , yang mungkin berada diudara selama

jangka waktu yang panjang. Terdapat panduan dalam penggunaan perlindungan

pernapasan dan penggunaan system penanganan udara khusus untuk mengendalikan

bakteri udara.

PENCEGAHAN DROPLET

Pencegahan droplet melindungi perawat, pengunjung, dan pasien lain dari

droplet yang mungkin dikeluarkan saat batuk, bersin ataupun berbicara. Pedoman

termasuk menggunakan masker saat bekerja dekat dengan pasien.Panduan dalam

penempatan pasien yang menggunakan ruangan khusus dengan kemampuan udara

khusus harus dilaksanakan.Pedoman khusus untuk pemindahan dan penempatan

pasien dan pengelolaan lingkungan harus dilaksanakn sesuai dengan kebutuhan

masing-masing.

PENGUMPULAN/ PENGAMBILAN SAMPEL

Darah adalah jenis sampel yang paling sering dianalisis di laboratorium

klinik.Sampel urin dan cairan tubuh juga sering dianalisis. Sampel feses dan yang

lainya misalnya swab tenggorok, kultur cairan dari luka abses, dikirim ke

laboratorium mikrobiologi untuk dianalisis.

Pengetahuan tentang peralatan pengambilan sampel, pengawetan dan

pengolahan sampel sangat penting.Sampel darah yang dikumpulkan dengan benar

sangat penting untuk kualitas kinerja laboratorium.ketaatan pada aturan pengumpulan

sampel sangat penting untuk keakuratan pengujian apapun.Kesalahan preanalitik

seperti kesalahan identifikasi, baik dari pasien atau sampel, merupakan sumber

potensial utama kesalahan.

11

Sampel darah mungkin diambil oleh petugas dengan perbedaan latar belakang

pendidikan, tergantung pada fasilitas. Di beberapa institusi, pengambilan sampel

darah dilakukan oleh ahli laboratorium klinis/ tehnolog medis atau teknisi

laboratorium klinis/ teknisi laboratorium medis. Pada institusi lain, individu dilatih

khusus, atau phlebotomist melakukan pengambilan sampel darah. Selain pengadaan

sampel, tranportasi sampel, penanganan dan pengolahan sampel juga harus dipahami

oleh siapapun yang mengambil sampel darah.

VARIABEL PENGAMBILAN SAMPEL

Sebagian besar pemeriksaan laboratorium klinik adalah darah, plasma, dan

serum.Sampel darah diambil dari pasien puasa dan tidak puasa. Puasa didefinisikan

sebagai tidak mendapat asupan cairan lain selain air selama 8-10 jam sebelum

pengambilan darah. Sampel puasa sebagian besar tidak diperlukan pada pemeriksaan

laboratorium.Darah puasa diambil pada pagi hari sebelum sarapan.Asupan makanan,

obat-obatan, aktivitas, dan waktu sepanjang hari dapat mempengaruhi hasil

laboratorium untuk sampel darah.

Darah yang diambil langsung setelah makan digambarkan sebagai sampel

postpandrial. Dalam kasus glukosa darah, sampel diambil 2 jam setelah makan.

Setelah 2 jam kadar glukosa darah harus kembali mendekati kadar gula darah puasa

bagi pasien yang tidak diabetes. Darah tidak harus diambil ketika pasien dalan terapi

infuse intravena, jika memungkinkan.

Variasi biologi yang mempengaruhi sampel darah meliputi:

- Postur tubuh

- Istirahat lama

- Latihan

12

- Irama sirkadian/variasi diurnal

- Konsumsi makanan

- Merokok

- Konsumsi alkohol

- Obat-obatan

PROSEDUR PENGAMBILAN DARAH

Terdapat dua sumber darah untuk tes pada laboratorium klinik: darah kapiler

dan darah vena. The clinical and laboratory institute (CLSI), sebelumnya formely the

national committee for clinical laboratory standards (NCCLS) telah menetapkan

standar khusus dalam pengambilan darah vena dan darah kapiler. Darah arteri

mungkin diperlukan untuk melakukan prosedur tertentu, seperti analisa gas darah.

LAPISAN NORMAL ANTIKOAGULAN DARAH

Darah dalam tubuh secara in vivo adalah dalam bentuk cair, tetapi diluar tubuh

atau in vitroakan menggumpal dalam beberapa menit. Darah yang baru saja diambil

dan dimasukan tabung muncul sebagai cairan, berwarna gelap merah. Dalam

beberapa menit akan mulai menggumpal atau mengental, membentuk setengah padat,

massa seperti jelly. Jika dibiarkan dalam tabung massa ini akan menyusut, atau

menarik kembali dalam waktu 1 jam, dan akan beretraksi sempurna dalam waktu 24

jam.

Ketika koagulasi terjadi, cairan pucat kuning disebut serum memisahkan diri

dari bekuan darah dan muncul di bagian atas tabung. Selama proses pembekuan,

faktor-faktor tertentu muncul dari sampel darah. Fibrinogen merupakan salah satu zat

yang penting yang ditemukan dalam darah dalam sirkulasi yang diperlukan untuk

terjadinya pembekuan.Fibrinogen terdiri dari fibrin ketika pembekuan terjadi, dan

fibrin adalah benang halus yang terdiri dari sel sel darah merah dan sel sel darah

putih.Untuk mendapatkan serum digunakan tabung dengan tambahan zat aditif

13

tertentu.Serum digunakan untuk pemeriksaan kimia, serologi, dan tes laboratorium

lainnya dan dapat diperoleh dari bekuan darah yang disentrifus.

Ketika whole blood tetap setelah dicampur dengan zat yang mencegah

penggumpalan darah (antikoagulan),darah dapat dipisahkan menjadi plasma, cairan

berwarna kekuning-kuningan dan komponen sel seperti eritrosit, lekosit, dan

trombosit. Whole blood yang dibiarkan membeku secara normal akan menghasilkan

serum yamg berwarna.

Ketika sampel darah dengan antikoagulan tetap segar untuk sementara waktu,

komponen akan menjadi tiga lapisan yang berbeda, yaitu:

- Plasma, lapisan paling atas yaitu cairan yang merupakan 55 % dari total

volume darah.

- Buffy coat, cairan putih keabu-abuan terdiri dari lekosit, merupakan 1% dari

total volume darah.

- Eritrosit lapisan paling bawah yang terdiri dari sel darah merah, merupakan 45

% dari total volume darah.

14

ZAT ADITIF DAN ANTIKOAGULAN

Beberapa antikoagulan yang sering digunakan adalah asam dipotassium

ethylenediaminetetraacetic (K2EDTA), natrium sitrat, dan heparin. Masing-masing

jenis antikoagulan mencegah pembekuan darah dengan cara tertentu. Perbandingan

yang tepat untuk darah dan antikoagulan adalah penting untuk menghindari kesalahan

dalam hasil tes.Antikoagulan yang spesifik diperlukan untuk prosedur pada

laboratorium manual.

DIPOTASSIUM EDTA

Garam dari chelating (pengikat kalsium) merupakan agen K2EDTA

direkomendasikan oleh The International Council for Standardization in

Haematology (ICSH) dan CLSI sebagai antikoagulan pilihan untuk menghitung sel

darah dan ukuran sel darah karena kurang menyusutkan dari sel darah merah dan

kurang meningkatkan volume sel. EDTA disemprotkan pada dinding tabung bagiaan

dalam kemudian ditutup. Perbandingan yang tepat antara EDTA dan darah sangat

penting karena beberapa tes akan dipengaruhi bila perbandingannya tidak benar.

EDTA yang tidak tepat akan menyusutkan eritrosit sehingga mempengaruhi hasil tes

seperti volume sel yang dihitung manual atau mikrohematrokit.

NATRIUM SITRAT

Natrium sitrat pada konsentrasi larutan 3,2 % telah diadopsi sebagai konsentrat

tepat oleh ICSH dan the International and Hemostasis for Coagulation Studies. The

Collage of America Pathologist (CAP) juga merekomendasikan penggunaan sodium

sitras 3,2% .

Sodium sitrat juga digunakan sebagai antikoagulan untuk waktu prothrombin

diaktifkan (aPTT) dan waktu prothrombin (PT) dan untuk tingkat sedimentasi

eritrosit westergren (LED). Perbandingan yang tepat yaitu satu bagian antikoagulan

berbandingan sembilan bagian darah dimasukan dalam tabung.Kelebihan

antikoagulan dapat mengubah pengenceran yang diharapkan dari darah dan

15

menyebabkan kesalahan hasil.Karena antikoagulan ini menimbulkan pengenceran

pada darah maka sodium sitras umumnya tidak dapat dipakai untuk tes hematologi

kebanyakan.

HEPARIN

Heparin digunakan sebagai antikoagulan in vivo dan in vitro, karena berfungsi

sebagai zat yang menginaktifkan factor pembekuan thrombin. Heparin adalah

antikoagulan yang umum digunakan dalam kimia dan uji kimia khusus.Heparin

adalah antikoagulan yang hanya digunakan untuk pengambilan darah dalam hal

menentukan pH, gas darah, elektrolit, dan kalsium terionisasi.Heparin tidak boleh

digunakan untuk uji koagulasi atau hematologi. Heparin adalah antikoagulan yang

direkomendasikan untuk pengambilan sampel whole blood atau sampel plasma

karena sifat heparin minim pengkhelat, efek minimal pada pergeseran air, dan

konsentrasi kation relativ rendah.

Heparin tersedia sebagai natrium, lithium, dan garam ammonium, heparin

litium adalah bentuk heparin yang direkomendasikan untuk digunakan karena tidak

mengganggu ketika tes ion dilakukan.Heparin lithium pada dasarnya bebas dari ion

asing.Hal ini tidak boleh digunakan ketika dilakukan pemeriksaan lithium dalam

darah. Heparin yang diperlukan sangat sedikit, sehingga lapisan dalam tabung atau

jarun suntik cukup member efek antikoagulan. Tabung yang berisi heparin harus

dikocok 8-10 kali ketika diisi sampel darah yang diambil sehingga dapat tercampur

dengan sempurna.

NATRIUM FLUORIDA

Sebuah antikoagulan aditif dan kering, natrium fluoride digunakan terutama

untuk pengawetan sampel glukosa darah untuk mencegah glikolisis atau perusakan

glukosa.

16

EFEK SAMPING ZAT ADITIF

Zat aditif yang dipilih sebagai antikoagulan tidak boleh mengubah komponen

darah atau mempengaruhi hasil tes laboratorium. Berikut ini adalah efek samping dari

penggunaan zat aditif yang tidak benar atau jumlah yang salah:

- Mempengaruhi pemeriksaan, zat aditif mungkin terdiri dari komponen zat yang

sama atau bereaksi dengan cara yang sama, seperti bahan yang diukur.

Misalnya penggunaan natrium oksalat sebagai antikoagulan dalam penentuan

natrium.

- Menghilang konstituen sel, zat aditif dapat mengubah konstituen yang akan

diukur. Misalnya penggunaan antikoagulan oksalat untuk pemeriksaan

kalsium, oksalat mengubah kalsium dari darah dengan membentuk suatu garam

larut kalsium oksalat.

- Berpengaruh terhadap enzim, zat aditif mempengaruhi reaksi enzim, misalnya

penggunaan natrium fluorida pada pemeriksaan enzim; dimana natrium

fluorida menghancurkan banyak enzim.

- Perubahan konstituen sel, zat aditif dapat mengubah konstituen sel. Misalnya

penggunaan antikoagulan oksalat dalam hematologi. Oksalat mendistorsi

morfologi sel; krenasi sel darah merah, munculnya vakuola dalam granulosit

dan bentuk-bentuk aneh dari limfosit dan monosit muncul cepat ketika oksalat

digunakan sebagai antikoagulan, contoh lain adalah penggunaan heparin

sebagai antikoagulan dalam pembuatan apusan darahyang akan diwarnai dalam

waktu 2 jam, heparin memberi latar belakang biru dengan wright’s stain.

- Salah jumlah pemberian antikoagulan, jika terlalu sedikit zat aditif yang

digunakan, sebagian darah akan membeku. Hal ini mengganggu jumlah sel.

Sebagai perbandingan, jika terlalu banyak antikoagulan yang digunakan darah

akan terlalu cair dengan demikian mengganggu pengukuran jumlah darah

tertentu.

17

PROSEDUR VENIPUNCTURE

PENGAMBILAN DARAH YANG AMAN:PERALATAN

DAN PERLENGKAPAN

Peningkatan keselamatan telah menyebabkan pengembangan produk

baru pada berbagai perusahaan.Desain baru dari alat ini mengurangi insiden

postphlebhotomy.Sarstedt ( Newton,NC) dan perusahaan BD ( Franklin Lakes,N)

adalah perusahaan yang menawarkan variasi alat pengambilan darah.

Produk alat pengambilan darah BD meliputi:

- Jarum vacutainer dari BD adalah contoh jarum keselamatan yang mengurangi

luka tusuk..

- Alat transfer darah dari BD adalah alat yang mudah digunakan , bebas dari

perlengketan yang aman dan sederhana untuk transfer sampel.

- BD vacutainer safety- lok blood collection, adalah perangkat aman yang

bersayap dalam infus dan pengambilan darah. Perangkat ini berperisai dan

berpelindung ganda yang memungkinkan digunakan oleh satu tangan untuk

meminimalisasi resiko cedera jarum suntik dan yang memungkinkan untuk

visibilitas darah.

- Tabung plastic vacutainer dari BD menawarkan metode yang aman untuk

pengambilan darah yang mengurangi resiko kerusakan tabung dan tumpahan

sampel.

- BD genie safety lancets adalah produk sekali pakai untuk pengambilan darah

kapiler yang meminimalisasi resiko tertusuk atau digunakan kembali.

- BD quickheel lancet safety adalah produk keamanan yang dirancang untuk

bayi dan bayi premature. Ini adalah fitur pisau bedah yang secara permanen

dapat ditarik setelah membuat sayatan.

Produk lainnya diproduksi oleh Ram Scientific ( Needlam, Mass ) termasuk

tabung mikro kapiler yang dilapisi berbagai antikoagulan dan gel pemisah, lancet

18

pengunci haemolance dan capiject yang berlapis silikon, dan tabung darah kapiler

yang berwarna.

Jarum standar untuk pengambilan darah adalah jarum 21 gauge. Jarum

butterfly digunakan pada saat jumlah pasien lebih banyak. Jarum ganda yang

panjang dan runcing dimasukan dalam pembuluh darah pasien dan tabung.Jarum

steril yang digunakan harus sesuai dengan pegangan digunakan.Berbagai ukuran

jarum tersedia, selain panjangnya jarum diklasifikasikan berdasarkan ukuran gauge,

semakin tinggi ukuran gauge semakin kecil diameternya.Pemegang jarum yang

dirancang khusus untuk mengamankan jarum yaitu sekali pakai digunakan untuk

mengamankan jarum. BD Vacutainer Standard Yellow Needle Holders (no 364888

dan 364983) tidak digunakan lagi dan tidak tersedia lagi sebagai satu-satunya

pemegang jarum dalam perlengkapan pengambilan sampel darah. Telah digunakan

komponen lain yang lebih aman misalnya BD Vacutainer Blood Transfer Device,

BD Vacutainer Direct Draw Adapter, dan BD Vacutainer Luer-Lock Access Device.

BD Vacutainer One Use Holder adalah needle holder plastic yang jernih,

dengan ditandai “Do not Reuse” atau “Single Use”. Setelah dilakukan venapungsi,

rangkaian holder dan jarumnya dibuang ke kontainer. Jarum tidak perlu dilepas dari

holder. Needle holder yang baru ini pemakaiannya sama dengan BD Vacutainer

Standard Yellow Needle Holder.Tidak ada perubahan dalam teknik venapungsi saat

dilakukan perubahan kebijakan ke single use holder. BD Vacutainer One Use Holder

mudah sekali digunakan untuk prosedur venapungsi, yang sesuai dengan system BD

Vacutainer Venous Blood Collection, termasuk didalamnya BD Vacutainer Eclipse

Needle, BD Vacutainer Safety Lock Blood Collection Set, dan BD Vacutainer

Multiple Sample Adapters.

Pada tanggal 15 Oktober 2003, US Occupational Safety and Health

Administration (OSHA) menerbitkan buletin Safety and Health Information (SHIB)

(www.osha.com) untuk mengklarifikasi posisi OSHA dalam penggunaan reuse tube

19

holder dalam prosedur pengambilan darah, klarifikasi OSHA Bloodborne Pathogen

Standard (29 CFR.910.1030 (d) (2) (vii) (A)). Standart telah melarang pelepasan

jarum yang telah terkontaminasi dari alat-alat medis. Larangan pelepasan jarum dari

alat dari setiap alat dicantumkan berdasarkan standart tahun 1991dan 2001, OSHA

(CPL 2-2.69), dan dalam surat interpretasi 2002. Maksud dari SHIB adalah untuk

mengulangi statemen OSHA sebelumnya (tidak ada periode emas) bahwa praktek

terbaik adalah mencegah cedera tusukan jarum setelah prosedur phlebotomy yaitu

penggunaan “sharp with engineered sharps injury protection (SESIP)” (misalnya

jarun yang aman) berhubungan dengan pemegang jarum dan pembuangan dengan

seluruh unit segera setelah darah pasien diambil.

Berdasarkan OSHA SHIB dan pedoman kepatuhan OSHA (CPL 2-2.69),

kondisi tertentu kadang memerlukan spuit untuk pengambilan darah.Darah yang

diambil dengan spuit harus dipindahkan ke dalam tabung sebelum membuang spuit

yang terkontaminasi. Dalam situasi ini, spuit dengan teknologi pencegahan cedera

dan teknik yang aman harus diterapkan sebisa mungkin. Pemindahan darah dari spuit

ke tabung harus dilakukan tanpa jarum (misalnya BD vacutainer).

Sesuai peraturan OSHA, ketidakpatuhan akan mengahasilkan adanya surat

resmi dari kantor kepatuhan OSHA setelah beberapa inspeksi. Hal ini adalah

kewajiban dari setiap fasilitas untuk mengevaluasi pekerjaan mereka, mengontrol

penerapan teknik yang sesuai, dan menerapkan elemen-elemen yang dapat diterapkan

untuk meningkatkan kepatuhan sesuai dengan peraturan dan regulasi OSHA terbaru.

OSHA SHIB telah memberikan langkah-langkah Toolbox Evaluasi untuk diikuti

(Kotak 3-1)

Box 3-1

OSHA Safety and Health Information (SHIB) : Toolbox Evaluasi

20

1. Karyawan pertama kali harus mengevaluasi, memilih, dan menggunakan

teknologi yang sesuai (misalnya jarum dengan teknik perlindungan

terhadap jarum) termasuk single used pemegang tabung dengan jarum

dengan penerapan teknologi proteksi jarum (SESIP).

2. Penggunaan teknologi dan pengontrolan terhadap praktek memberikan

derajat paling tinggi untuk mengeleminasi cedera yang sering terjadi

setelah pengambilan darah. Pembuangan pemegang tabung bersama jarum

yang terkontaminasi dilakukan setelah penggunaan prosedur keamanan,

memberikan peran yang besar terhadap pengontrolan wabah.

3. Dalam situasi yang jarang, pelepasan jarum diterima.

Jika karyawan mampu memberikan alasan bahwa tidak ada

alternatif lain (misal tidak mampu menyediakan tabung single use

karena rendahnya suplay alat ini)

Jika diperlukan untuk prosedur taknis khusus atau prosedur

kedokteran gigi tertentu.

Pada kasus yang jarang, karyawan harus memastikan bahwa jarum

yang terkontaminasi terlindungi dengan prosedur SESIP sebelum

dibuang. Sehingga karyawan harus memastikan kontainer tempat

pembuangan jarum harus tersedia di lokasi yang mudah dijangkau

oleh mereka. Informasi ini harus secara jelas diberikan dan

didokumentasikan pada Rencana Pengawasan.

4. Jika memerlukan pengambilan darah dengan spuit, proteksi perlindungan

terhadap jarum harus diterapkan, dimana pelepasan jarum harus dengan

cara yang aman dan pemindahan darah ke dalam tabung dalam keadaan

jarum sudah dilepas.

21

Tabung Vacutainer Penampung Darah

Tabung vacutainer paling sering digunakan dalam pengambilan darah vena.

Sistem tabung vacutainer pengumpul darah terdiri dari jarum, pemegang jarum yang

tidak dapat dipakai ulang, tabung vacum yang dapat menampung darah dalam jumlah

tertentu. (gambar 3.3) Tabung vacutainer terdapat dalam berbagai ukuran (ml),

diantaranya ukuran pediatric, dimana terdapat kode warna tertentu. Warna tersebut

menunjukkan tipe antikoagulan atau adanya gel separator. BD merekomendasikan

suhu penyimpanan semua BD vacutainer tidak lebih dari 25oC atau 77oE. Jika suhu

lebih tinggi, tabung akan kehilangan ke vakumannya. Tabung evakuasi ini untuk

single use.

Jika pengambilan darah memerlukan lebih dari 1 tabung, harus diikuti protokol untuk

menghindari kontaminasi silang diantara tabung yang mungkin dapat terjadi karena

adanya perbedaan zat tambahannya. (table 3.1). Kesalahan tersebut dapat

berpengaruh pada hasil pemeriksaan.

Gambar 3.2

Tabel 3.1

22

Alat pemisah serum (Serum Separator Devise/SSDs) diperlukan pada pemrosesan

darah beku. Untuk mendapatkan serum, tabung pemisah serum dapat digunakan.

Tabung vakutainer dari kaca dapat digunakan. Tabung serum separator terdiri dari 2

tipe utama, yang digunakan untuk sentrifugasi dan yang digunakan setelah

sentrifugasi. Tabung yang digunakan selama sentrifugasi mungkin selain terdapat

sistem gel atau dimasukkan dalam tabung pengumpul sebelum sentrifugasi. Tabung

yang mengandung gel, mengandung lapisan silicon khusus, yang karena viskositas

dan densitasnya, bergerak membentuk barier antara cel dan serum selama

centrifugasi.

Darah menyentuh lapisan gel selama sentrifugasi, karena adanya perubahan

sementara dari viskositas. Gel mulai di dasar tabung. Darah ditambahkan ke dalam

tabung, dan bekuan terbentuk setelah minimal 30 menit. Setelah terbentuk bekuan,

tabung di sentrifus. Gel akan naik dan memagari sel dan atas serum. Gel akan

mengeras dan membentuk lapisan yang inert. Tutup tabung ini tidak perlu dilepas

untuk menghilangkan produksi aerosol dan penguapan sebelum disentrifugasi. Serum

separator menghasilkan lebih banyak serum, dalam waktu yang lebih pendek karena

hanya diperlukan 1 langkah sentrifugasi.

Tabung vacum khusus yang baru, digunakan untuk pengambilan, transportasi

dan penampungan darah, yaitu ChexBCT, di design untuk imunophenotyping dengan

flowcytometri. Zat tambahan dalam tabung menjaga integritas CD (cluster of

differentiation) sel darah selama 7 hari. Spesimen akan stabil dalam suhu ruang

selama transpotrasi dan penyimpanan.

23

Teknik spuit

Spuit plastik disposable digunakan untuk kasus yang khusus dalam pengambilan

darah. Jika seorang pasien mempunyai vena yang sulit untuk diambil darahnya, atau

keadaan tertentu, spuit dapat digunakan. Beberapa fasilitas merekomendasikan

penggunaan spuit untuk pengambilan darah yang bervariasi dari protokol tabung

vakutainer.

Pedoman umum

1. Petugas phlebotomy sebaiknya memperkenalkan dirinya secara baik pada

pasien dan menjelaskan secara jelas prosedur yang akan dilakukan.

2. Identitas pasien adalah langkah pertama yang penting dalam pengambilan

darah. Jika perlu, tanyakan nama pasien dan cek kembali label nama yang

tercantum. Jika pasien tidak dapat memberikan namanya atau identitas

yang ada pada tempat tidurnya hilang, harus ditanyakan pada perawat

untuk mengidentifikasi pasien tersebut. Beberapa pedoman harus dibuat

dalam permintaan tes.

3. Permintaan tes harus di cek dan tabung yang sesuai harus disediakan.

Semua specimen harus diberi label segera setelah specimen tersebut

diambil. Pelabelan sebelunya tidak dianjurkan.

4. Nama pasien, nomor identitas, nomor klinik, tanggal dan jam pengambilan

biasanya dituliskan di label. Pada kondisi tertentu label harus

mencantumkan waktu pengambilan dan tipe specimen. Format permintaan

yang lengkap harus diikutkan dalam pengiriman ke laboratorium. Catatan

pengambilan darah kapiler, dilakukan secara steril, dengan lanset

disposable. Lanset tersebut harus dibuang dalam container yang tahan

tusukan setelah 1x pemakaian.

24

Label

Kualitas kebijakan penilaian diimplementasikan dalam laboratorium klinik untuk

melindungi pasien dari beberapa efek samping atau hasil yang error dari pengelolaan

spesimen yang tidak sesuai, yang dimulai dengan pengambilan specimen. Penilaian

laboratorium klinik dan akreditasi mensyaratkan bahwa specimen dilabel secara benar

pada waktu pengambilan. Semua penampung specimen harus diberi label oleh orang

yang melakukan pengambilan untuk memastikan bahwa specimen tersebut benar-

benar diambil dari pasien yang identitasnya tercantum dalam label.

Kontainer yang tidak dilabel atau label yang tidak sesuai sebaiknya tidak

diterima di laboratorium. Label specimen dianggap tidak benar jika tidak lengkap

atau tidak ada identitas pasien dalam tabung atau kontainer tersebut. Beberapa

kontainer spesimen dikirim dalam kantong plastik. Tidak dianjurkan jika yang diberi

label hanya plastiknya, tetapi kontainer harus dilabel juga. Jika identifikasi tidak

sesuai, maka spesimen tidak akan diterima. Spesimen juga tidak akan diterima jika

identitas pasien tidak sama antara kontainer dan lembar permintaan.

Pada beberapa laboratorium, label sudah terkomputerisasi, yang akan

mempermudah untuk memastikan informasi yang sesuai setiap pasien. Label dengan

bar-code akan mempermudah hal ini. Salah satu sistem computer otomatis, sistem

identifikasi pasien BD.id (http://www.bd.com) akan menghilangkan kesalahan

labeling karena sistem tersebut membaca barcode pada lengan pasien. Software

tersebut mencantumkan test, tabung yang sesuai, kuantitas tabung yang diperlukan

pasien, kemudian menyamakan label kode laboratorium untuk mengidentifikasi

tabung.

Setiap laboratorium mempunyai pedoman masing-masing untuk penanganan

pelabelan yang salah atau spesimen yang tidak dapat diterima.

25

Pengambilan darah vena (phlebotomy)

Alat dan bahan :

Permintaan tes

Tourniquet dan sarung tangan

Jarum disposable steril dan pemegangnya

Berbagai tabung vacutainer

Alcohol (70%) dan kapas

Beberapa alat khusus

Kantong plastik

Prosedur inisiasi

1. Identifikasi pasien

2. Menyiapkan semua peralatan yang diperlukan disamping pasien

3. Memakai sarung tangan

4. Bungkus plastik pada jarum harus terpasang sampai hendak

digunakan untuk venapungsi. Tabung vacutainer dipasang dalam

holder dan ditekan sampai ujung stopper mencapai batas dari

holder. Jangan menekan tabung ke holder melebihi batas, karena

akan menghilangkan daya vakumnya.

Pemilihan lokasi yang sesuai

Pengambilan specimen darah dari jalur intravena (IV) harus dihindari karena akan

meningkatkan risiko percampuran cairan dengan sampel darah dan menghasilkan

hasil yang tidak tepat.

1. Inspeksi kedua lengan. Pilih tempat yang tidak sering digunakan berulang

kali untuk phlebotomy. Pada lengan, terdapat 3 vena yang sering

26

digunakan untuk venapungsi : v.cephalica, v. basilica, dan v.mediana

cubiti (gambar 3.3)

Gambar 3.3

2. Pasang tourniquet (gambar 3.4). jangan tinggalkan tourniquet lebih dari

2 menit. Pemasangan tourniquet yang terlalu lama akan meningkatkan

beberapa analisa kimia darah, termasuk albumin, aspartat

aminotransferase (AST), kalsium, kolesterol, besi, lemak, bilirubin total,

dan protein total.

3. Untuk memperjelas vena, minta pasien untuk mengepalkan tangan.

Dengan jari telunjuk, palpasi diperlukan untuk mendapatkan vena yang

diinginkan. (lihat gambar 3.4). Tempat yang ideal adalah dekat dengan

lipatan lengan atau sedikit dibawahnya. Palpasi penting dilakukan untuk

mengidentifikasi vena dimana perasaan melenting dibandingkan dengan

jaringan sekitar. Vena yang besar tidak selalu menjadi pilihan yang baik

karena ada kecenderungan untuk bergeser saat vena pungsi. Vena

superficial dan kecil sebaiknya juga dihindari. Jika vena yang diharapkan

tidak ditemukan pada salah satu lengan, periksa lengan satunya

menggunakan tourniquet dan palpasi. Vena di tempat lain seperti

pinggang, tangan, dan kaki hanya dapat digunakan untuk phlebotomy.

Gambar 3.3

27

Pemilihan lokasi untuk situasi khusus

Lima keadaan spesifik yang bisa terjadi venapugsi yang sulit atau sumber dari

kesalahan preanalitik.

1. Jalur intravena

Lengan dengan jalur IV sebaiknya tidak digunakan untuk venapungsi karena akan

mengkontaminasi specimen. Sebaiknya dipilih lengan lain pasien atau lokasi

alternatif.

2. Edema

Edema adalah akumulasi abnormal cairan di ruangan intrasel jaringan.

3. Jaringan parut atau pesien luka bakar

Vena akan sulit dipalpasi pada area dengan parut yang luas atau bekas luka bakar.

Sebaiknya digunakan lokasi alternatif atau darah kapiler.

4. Pasien dialysis

Darah sebaiknya tidak diambil dari lengan yang terpasang kanula (akses sementara

dialysis) atau fistula ( penyatuan vena dan artery yang menetap). Staf yang terlatih

28

dapat mengambil darah dari cannula. Lokasi venepungsi yang lebih disukai adalah

vena pada tangan atau vena yang jauh dari fistula di lengan bagian bawah.

5. Pasien mastektomi

Jika pasien mastektomi dengan pengambilan nododuli limfatisi yang berdekatan,

venapungsi sebaiknya tidak dilakukan pada sisi yang sama dengan mastektomi.

Persiapan lokasi venapungsi

1. Setelah lokasi yang sesuai telah dipilih, pasang tornikuet.

2. Dengan kapas alcohol 70% bersihkan area venapungsi. Gunakan gerakan

berputar dari dalam keluar. Jangan kembali ke area yang sudah dibersihkan.

3. Biarkan kering.

Melakukan venapungsi

Hindari menyentuh area yang sudah dibersihkan

1. Gunakan 1 tangan untuk memegang rangkaian tabung vacutainer. Posisi

lengan pasien lurus ke bawah. Gunakan 1 atau lebih jari dari tangan yang lain

unuk meregangkan kulit area venapungsi. Hal ini akan mengencangkan kulit

dan mengamankan vena.

2. Pegang jarum sekitar 1 s/d 2 inchi dibawah dan lurus dengan lokasi

venapungsi. Lubang jarum sebaiknya menghadap ke atas.

3. Tusukkan jarum ke kulit ke dalam vena. Gerakan tusukan harus lembut. Satu

tangan harus mememegang unit needle holder sementara tangan lainnya

menekan tabung sampai di ujung holder plastik. Penting menjaga jarum tidak

bergeser selama phlebotomy untuk menghindari terputusnya aliran darah.

Sampel multiple dapat diambil dengan memasukkan tabung tambahan ke

needle holder. (lihat table 3.1 untuk permintaan tabung vacutainer multiple)

29

Penyelesaian prosedur

1. Tornikuet dapat dilepas segera setelah darah mulai mengalir ke dalam tabung

vakutainer atau spuit atau segera sebelum jumlah darah yang diinginkan

didapat.

2. Minta pasien membuka tangannya.

3. Cabut unit pengambil darah dengan 1 tangan dan segera tekan kapas dengan

tangan yang lain setelah jumlah darah yang diinginkan sudah didapat.

4. Jika memungkinkan anjurkan pasien untuk mengangkat seluruh lengan dan

tekan kapas dengan tangan satunya. Jika pasien tidak dapat melakukannya,

pasang penekan sampai perdarahan terhenti.

5. Pasang plester perekat nonalergenik atau strip disekitar tempat venapungsi.

Kegagalan dalam penekanan dapat menghasilkan hematom (pengumpulan

darah di bawah kulit yang menimbulkan ruam).

6. Campur darah dalam tabung dengan antikoagulan dengan cara membalik

tabung beberapa kali. Tabung tidak boleh dikocok. Buang peralatan ke dalam

tempat sampah yang sesuai.

7. Beri label semua tabung sesuai permintaan laboratorium.

8. Bersihkan area kerja, buang sarung tangan, dan cuci tangan. Jika pasien

adalah pasien rawat jalan, tunggu beberapa menit dan yakinkan pasien tidak

merasa pusing atau mual sebelum pergi.

Masalah-masalah phlebotomy

Kadang-kadang venapungsi gagal. Jangan mengulangi venapungsi lebih dari 2x.

Jika 2x gagal, beritahukan ke supervisor phlebotomy. Masalah-masalah yang

dapat timbul pada phlebotomy sebagai berikut :

1. Penolakan pasien yang akan diambil darahnya.

2. Kesulitan pengambilan specimen karena jarum tidak mampu menembus

dinding vena.

30

3. Pergerakan vena.

4. Gerakan tiba-tiba dari pasien yang menyebabkan jarum keluar dari lengan

sebelum selesai.

5. Antikoagulan yang tidak sesuai

6. Jumlah darah yang kurang memadai dalam tabung evakuasi

7. Kelemahan atau kesakitan setelah dilakukannya venapungsi.

Komplikasi phlebotomy

Pasien dapat mengalami komplikasi setelah prosedur phlebotomy. Komplikasi dapat

dibagi menjadi 6 katagori utama, sebagai berikut :

1. Komplikasi vaskuler. Perdarahan dari tempat venapungsi, dan hematom

sering terjadi sebagai komplikasi.

2. Infeksi. Komplikasi kedua tersering adalah infeksi pada daerah venapungsi.

3. Anemia. Anemia iatrogenic dikenal juga anemia nosokomial, physician

induced anemia, atau anemia karena kehilangan darah karena pengambilan.

Masalah ini sering terjadi pada pasien anak-anak.

4. Komplikasi neurologi. Pasien postphlebotomy dapat mengalami komplikasi

neorologi, termasuk kejang dan nyeri.

5. Komplikasi kardiovaskuler. Komplikasi kardiovaskuler termasuk orthostatic

hipotensi, pingsan, dan henti jantung.

6. Komplikasi dermatologi. Komplikasi dermatologi yang sering terjadi setelah

phlebotomy adalah reaksi alergi terhadap iodine dalam kasus donor darah.

31

Pengumpulan kultur darah

Peningkatan rata-rata positif palsu sering terjadi dan berhubungan dengan biaya

pelayanan kesehatan. Untuk memastikan pengumpulan darah bebas dari kontaminasi,

(baik dari pasien, petugas atau personel yang lain), dilakukan dengan membersihkan

kulit dan tabung sebelum dilakukan pengambilan.

Kulit dibersihkan 3x dengan larutan povidon iodine atau preparat clorhexidin

glukonat. Dengan menggunakan aplikator scrub, laruran povidon iodine dioleskan

pada tempat tusukan dengan gerakan konsentris ke arah luar, dimulai di tempat

tusukan. Langkah ini diulang 3x. setelah pembersihan ketiga, povidon iodine

dibersihkan dengan kapas alcohol jika warna larutan menimbulkan kesulitan dalam

menentukan lokasi vena. Jika vena harus disentuh sebelum venapungsi, sarung tangan

tempat jari petugas harus dibersihkan dengan povidon iodine 3x. melakukan

venapungsi dengan jarum dan spuit steril, atau dimasukkan ke dalam botol kultur

dengan system evakuasi/vakum. Setiap botol kultur harus dibersihkan dengan alkohol

sebelum diinjeksi sejumlah darah yang diperlukan dalam inti botol. Botol kultur

diberi label dan dibawa ke laboratorium.

Pengambilan darah kapiler atau perifer dengan tusukan kulit.

Darah kapiler dapat digunakan untuk bermacam-macam pemeriksaan laboratorium.

Darah kapiler sering digunakan untuk POCTs/ Point of Care Test. POCT yang sering

digunakan adalah pemeriksaan untuk glukosa menggunakan alat pembaca dan stip

reagen, seperti yang digunakan pasien diabetes di rumah (lihat diskusi tentang

POCT).

Pengambilan Blood Spot untuk program screening neonatal

Sebagian negara menerapkan peraturan bahwa bayi baru lahir harus di screening

untuk beberapa penyakit yang dapat menimbulkan abnormalitas yang serius,

termasuk retardasi mental, jika tidak didiagnosis dan di terapi segera. Penyakit ini

32

termasuk phenilketonuria (PKU), galaktosemia, hipotyroidisme, dan

hemoglobinopati. CLSI mempunyai set standar untuk kertas filter atau blood spot

untuk program screening ini. Darah harus diambil 1-3 hari setelah lahir sebelum bayi

pulang dari rumah sakit, minimal 24 jam setelah lahir dan setelah pemberian makanan

untuk test PKU yang valid. Terdapat kenaikan jika bayi di tes sebelum umur 24 jam.

Jika bayi pulang lebih awal, klinisi memilih mengambil sampel lebih awal daripada

tidak mendapat sampel sama sekali.

Pada sebagian besar program screening neonatal, spesimen diambil dengan

kertas saring dan dikirim ke laboratorium tujuan untuk dianalisis. Kartu khusus

dengan kertas saring disuplai laboratorium, pemeriksaannya di ruang perawatan atau

laboratorium sentral. Terdapat informasi pada kartu tersebut, dan informasi yang

diperlukan harus tersedia dan diperlakukan sama seperti permintaan tes yang lain.

Kertas saring yang ada dalam kartu mengandung lingkaran-lingkaran untuk

mengidentifikasi porsi kertas untuk menentukan tempat spesimen, dimana kertas

saring akan menyerap sejumlah darah yang diperlukan untuk pemeriksaan.

Pengambilan darah dilakukan dengan tusukan pada tumit, sesuai prosedur

institusi. Jika sudah timbul tetesan darah, lingkaran pada kertas saring disentuhkan

sampai lingkaran terisi penuh. Tetesan yang cukup besar harus terbentuk sehingga

pengisian lingkaran dilakukan hanya dengan 1 langkah. Kertas saring dikeringkan

dan dikirim ke laboratorium dalam kantong plastik atau kontainer khusus. Prosedur

langkah pengambilan sampel yang dibuat oleh laboratorium harus diikuti.

Pemeriksaan darah kapiler di samping pasien (POCT(Point-of-Care Testing))

Sampel darah kapiler untuk pemeriksaan glukosa dan pemeriksaan lain banyak

digunakan di fasilitas kesehatan untuk pemeriksaan di samping pasien atau point of

care testing (POCT). Kadar glukosa tersedia dalam waktu 1-2 menit, tergantung

system yang digunakan. CLSI telah membuat panduan untuk pemeriksaan ini karena

33

pemeriksaan tersebut dilakukan pada penanganan perawatan akut dan perawatan

jangka lama. (POCT juga didiskusikan pada BAB 1)

POCT untuk glukosa juga dikerjakan di rumah oleh banyak pasien rawat

jalan, menggunakan darah mereka sendiri dan salah satu alat pengukur glukosa.

Penting sekali untuk pasien diabetes terutama insulin dependent DM untuk

memonitor kadar glukosa darah mereka beberapa kali sehari dan mampu menentukan

dosis insulin untuk menjaga pengotrolan kadar glukosa darah.

Untuk pasien DM yang rawat inap, POCT juga alat yang berguna untuk

manajemen diabetes. Kadar glukosa darah kadang tak stabil pada pasien ini, situasi

yang memerlukan penentuan dosis insulin. POCT memberikan hasil yang cepat,

sehingga dosis dapat ditentukan dengan segera. Permintaan dan pengambilan darah

vena untuk pemeriksaan glukosa dilakukan laboratorium central yang frekuensi dan

kecepatan hasil sangat diperlukan, sering tidak praktis, sehingga POCT dianggap

lebih berguna. Program kontrol kualitas yang baik harus dilakukan untuk memastikan

reabilitas hasil POCT. Sampel whole blood diambil dengan pungsi pada tumit (hanya

untuk bayi baru lahir), jari, atau garis merah heparinisasi, menggunakan kebijakan

standar pencegahan. Darah arteri atau vena sebaiknya jangan digunakan, kecuali

manual dari pabrik pembuat POCT khusus menggunakan sampel tersebut. Alat

POCT sebaiknya dikalibrasi disesuaikan menurut pabrik pembuatnya. Hasil harus

segera dicatat dalam rekam medis pasien yang membedakan antara pemeriksaan

bedside dan hasil pemeriksaan lab central.

Sangat penting untuk memahami dan menyadari keterbatasn setiap system

POCT yang dijelaskan oleh pabriknya, sehingga didapatkan hasil yang reliable.

Penggunaan quality assessment, memastikan reliabilitas prosedur ini. Penggunaan

POCT baik di samping pasien atau pasien memeriksa sendiri untuk glukosa,

dimaksudkan untuk pengelolaan pasien diabetes dan bukan untuk diagnosis. POCT

34

tidak digunakan untuk menggantikan pemeriksaan laboratorium standar untuk

glokosa tetapi hanya sebagai tambahan.

Banyak promosi alat-alat tersebut, dimana setiap produk memeriksa kadar

glukosa dengan strip reagennya. Tetesan darah disentuhkan ke strip reagen dan

berdasarkan prosedur khusus, kemudian hasil dapat dibaca. Alat tersebut menjanjikan

akurasi dan standardisasi hasil jika penggunaan berdasarkan petunjuk yang ada. Strip

reagen harus disimpan dengan hati-hati dan dilihat masa berlakunya. Strip tersebut

khusus hanya untuk glukosa. Alat pengukur tersebut dikemas dalam kemasan yang

mudah dibawa dan cukup kecil sehingga cukup dimasukkan dalam kantong atau tas.

Pengambilan darah kapiler

Alat dan bahan

Alkohol (70%) dan kapas atau tissue alkohol

Sarung tangan disposable dan kapas steril

Lancet steril

Peralatan sesuai pemeriksaan yang diinginkan (misalnya kaca preparat untuk

hapusan darah, mikropipet dan diluents untuk CBC, tabung mikrohematokrit)

Pemilihan lokasi yang sesuai

1. Biasanya ujung jari (jari 3 atau 4), tumit, dan jempol lokasi yang sesuai untuk

pengambilan darah kapiler yang jumlahnya sedikit. Daun telinga dapat

digunakan sebagai alternatif terakhir pada orang dewasa. Jangan menusuk

kulit yang terinfeksi. Permukaan yang menghadap telapak kaki dari tumit atau

jempol adalah lokasi yang sesuai untuk bayi baru lahir pada kasus yang

khusus seperti korban luka bakar. Lokasi ideal pada bayi adal medial atau

lateral telapak kaki dan jaraknya tidak lebih dari ½ kurva posterior tumit.

(gambar 3-5,A). CLSI merekomendasikan jangan menggunakan jari pada

35

bayi. Bagian belakang tumit tidak boleh digunakan karena akan beresiko

melukai tulang tumit, kartilago dan saraf pada area ini.

2. Tempat pengambilan darah harus hangat untuk memastikan aliran darah pada

tempat tersebut lancer.

Persiapan lokasi

1. Pegang tempat yang hendak di pungsi dengan jempol dan jari telunjuk.

2. Usap area dengan kapas alcohol 70% dan biarkan kering.

3. Usap dengan kapas kering. Jika area tidak kering, darah tidak akan

membentuk tetesan yang bulat dan akan sulit untuk pengambilannya.

Penusukan kulit

1. Gunakan lanset steril disposable sekali tusuk, dan buang pada container yang

disediakan.

2. Pegang area, tusuk 1x dengan tusukan yang tegas (gambar 3-5,B)

3. Usap tetesan pertama darah karena tetesan pertama tercampur dengan cairan

limphe dan mungkin alcohol.

4. Beri tekanan yang secukupnya untuk mendapatkan specimen yang diinginkan.

Pengambilan darah kapiler khusus Unopette

System unopete adalah pengambilan sampel dengan jumlah sangat sedikit

(microsample) untuk digunakan pada prosedur manual atau otomatis. (gambar 3-6)

Walaupun larutan atau jumlah sampel berbeda antar pemeriksaan,

pengambilan darah secara umum sama. Pencegahan stsndar harus dilaksanakan

sebagaimana mestinya selama memproses specimen dan pembuangan limbah. Setiap

sistem terdiri dari pipet kapiler dan penampung yang mengandung larutan spesifik.

36

Prosedur Pengumpulan dan Pengenceran

Tempatkan penampung pada permukaan yang datar. Pegang penampung dengan satu tangan. Dengan sisi lain, mengambil mikropipet, ditutupi dengan pelindung pipet, dan dorong dengan kuat ujung pelindung pipet unit melalui leher penampung.

Lepaskan pipet dan pelindung dari leher penampung. Buang pelindung dari pipet.

Kumpulkan darah kapiler yang mengalir bebas ke bagian pipet menggunakan teknik yang dijelaskan dalam prosedur untuk pengumpulan darah kapiler. Ketika pipet telah diisi sampai akhir lubang kapiler di leher pipet, tidak akan menarik lebih banyak darah.

Membersihkan darah berlebih dari luar pipet, berhati-hati untuk tidak menyentuh sampel darah dalam pipa kapiler.

Sementara menekan sedikit penampung dengan satu tangan, terakhir menutup pipet dengan jari telunjuk dari sisi lain dan masukkan kapiler pipet ke dalam penampung.

Bersamaan dengan itu, melepaskan tekanan pada penampung dan jari telunjuk dari pipet. Tindakan ini akan menarik darah ke pengencer.

Bilas lubang pipet dengan squezzing dan melepaskan penampung (ulangi langkah 5 dan 6) dua atau theree kali. Ini benar-benar akan membersihkan darah dari pipet kapiler.

Tempatkan jari telunjuk di atas pipet terbalik, dan dengan lembut memiringkan seluruh unit naik dan turun beberapa kali agar tercampur

Untuk mengangkut spesimen,lepaskan pipet dari penampung dan menempatkan info akhir pada penampung. Label wadah dengan nama pasien dan identifikasi lain yang sesuai.

Untuk menggunakan unit ini untuk pengujian, membalikkan spesimen untuk mencampurnya, dan membuang beberapa tetes cairan tersebut. Unit ini kemudian dapat digunakan untuk melakukan prosedur pada sebuah hemositometer .

37

Darah kapiler untuk Slides

Buat sebuah tusukan pada jari atau tumit, buang darah pertama yang keluar, slide kaca disentuh sampai tetes kedua . Slide ditempatkan pada permukaan yang datar dan slide penyebar digunakan untuk menyiapkan apusan (lihat Bab 12). Slide diperbolehkan untuk dianginkan, diberi label dengan benar, dan kemudian diangkut ke laboratorium untuk pemeriksaan.

Mengumpulkan Microspecimens

terkadang tidak semua darah kapiler dapat dikumpulkan, dan banyak penentu laboratorium yang telah digunakan sebagai acuan untuk menguji sampel.secara umum prosedur yang sama dapat untuk mengambarkan selain darah kapiler.untuk prosedur kimia, darah bisa dikumpulkan dalam tabung kapiler atau microtainer dengan menyentuh ujung tabung untuk mengeluarkan darah,sementara tabung dipegang dalam posisi sedikit kebawah. Darah memasuki unit pengumpul oleh kapiler.beberapa tabung dapat diisi dari sekali tusukan,jika diperlukan tabung ditutup dan dibawa kelaboratorium untuk dilakukan pemeriksaan. Jika memerlukan serum,Teknik sentrifugasi harus dengan hati hati . dikarenakan Microcontainers tersedia dengan berbagai aditif, termasuk pemisah serum gel. Tabung kapiler dapat berisiheparin atau polos. Untuk pemeriksaan khusus, 100 atau 200 lambda mikropipet dapat digunakan. Kotak 3-2 menunjukkan urutan kekuatan menarik untuk darah kapiler.

38

Peralatan Laser

Teknologi laser adalah perubahan radikal pertama dalam proses mengeluarkan darah di lebih dari 100 tahun. Persetujuan perangkat revolusioner dari makanan dan Drug Administration (FDA) pada tahun 1997. The Lasette (Cell Robotika, Albuquerque, NM) dan Laser Lancet (Transmedica International, Little Rock, Ark) dapat menarik darah tanpa menggunakan benda tajam.

Urutan untuk pengambilan kapiler Spesimen

1. gas darah

2. Slides / pap

3. tabung EDTA

4. Minicontainers aditif lainnya

5. Wadah Serum, minicontainers

SPESIMEN: PERSIAPAN UMUM

Analisis kimia yang akurat dari cairan biologis tergantung pada koleksi yang tepat, pengawetan, dan persiapan sampel, selain teknik dan metode analisis yang digunakan. Penentuan kuantitatif yang paling sempurna tidak ada gunanya jika spesimen tidak benar ditangani dalam langkah-langkah awal prosedur.

Pengolahan Darah Spesimen

Spesimen darah harus benar ditangani setelah pengumpulan. CLSI telah publiched standar untuk penanganan spesimen darah setelah pengumpulan oleh venipuncture. Jika tidak ada antikoagulan yang digunakan, darah akan menggumpal dan serum diperoleh. Setelah ditempatkan dalam tabung polos tanpa aditif, darah akan membeku. Serum tersebut kemudian didapat dari gumpalan dengan sentrifugasi. Untuk mencegah penanganan berlebihan cairan biologis, banyak laboratorium sistem instrumentasi sekarang dapat menggunakan serum langsung dari tabung disentrifugasi, tanpa langkah pemisahan lain dan tanpa melepas tutup.

Hal ini penting untuk memisahkan plasma atau serum dari sel-sel darah yang tersisa, atau bekuan, sesegera mungkin. ketika spesimen biologi sedang ditangani, kebutuhan untuk tindakan pencegahan keamanan tertentu harus ditekankan. Standard Kewaspadaan kebijakan harus digunakan karena semua spesimen darah harus

39

dipertimbangkan menular dan harus ditangani dengan sarung tangan. Bagian luar tabung mungkin terkena darah, dan penanganan laboratorium awal dari semua spesimen memerlukan kontak langsung dengan tabung. Ketika penutup harus dibuka dari tabung,tutup harus dibuka dengan hati-hati, karena ini bisa menyebabkan infeksi jika terhirup atau kontak dari aerosol menular dengan selaput lendir. Penutup harus diputar dengan lembut dan hati-hati sambil ditutup dengan kasa pelindung untuk meminimalkan risiko dari aerosol. Langkah pengolahan ini dapat dilakukan dengan menggunakan pelindung plastik pelindung untuk mencegah percikan langsung. Untuk memisahkan serum dan plasma dari sel-sel darah yang tersisa, tabung harus disentrifugasi.

Untuk menguji spesimen secepat mungkin adalah hal yang terbaik. Spesimen harus diproses di mana mereka dapat disimpan dengan baik sehingga unsur yang akan diukur tidak akan berubah. Spesimen yang dikumpulkan di tempat penyimpanan dari laboratorium pengujian harus menjamin pengiriman yang akan dibuat dalam waktu kurang dari 2 jam dari koleksi dan bahwa spesimen telah disimpan dengan benar, termasuk pendingin, atau pembekuan jika perlu.

Jika serum atau plasma disentrifugasi harus dikeluarkan ke dalam tabung atau botol terpisah,mengunakan pipet serum atau plasma dengan menggunakan suction mekanik dan pipet sekali pakai, gunakan pelindung plastik pelindung untuk mencegah percikan langsung. Semua tabung serum dan plasma,harus dibuang dalam wadah Biohazard ketika tidak lagi diperlukan.

Penggunaan Tabung Pemisah Serum

Dengan banyak metode automanted, pengolahan, darah sering memakan waktu lebih lama daripada analysis. cara yang efisien untuk memisahkan serum dari sel-sel yang dibutuhkan. Seperti telah dibahas sebelumnya, khusus tabung pemisah serum. Yang menyerupai tabung vakum biasa tapi mengandung gel, dapat digunakan. Gel tersebut dipindahkan di dalam tabung selama sentrifugasi dan dari penghalang antara serum dan sel-sel. Serum dapat dengan mudah dipindahkan ke wadah yang sesuai atau dapat disedot langsung ke analyzer digunakan untuk pengujian. Dengan langsung aspirating spesimen disentrifugasi dalam tabung koleksi primer analyzer, kemudian disimpan, dan mengurangi risiko penularan bahan biohazardous. Penggunaan langsung dari tabung utama dalam pengujian juga mengurangi risiko mislabeling spesimen selama transfer ke tabung tambahan. Khusus produk koleksi spesimen yang dirancang untuk menghemat waktu dan untuk menyediakan mekanisme yang lebih aman untuk memproses spesimen darah.

40

Pemusingan Spesimen

Setelah pembekuan telah terjadi, tabung disentrifugasi dengan tutup. Hal ini penting untuk mengingatkan staf yang menangani spesimen darah dalam semua langkah analisis laboratorium untuk menggunakan Kewaspadaan Standar. Standard kewaspadaan mengharuskan semua orang penanganan spesimen untuk memakai sarung tangan. Bila perlu, penutup harus hati-hati dilepas dari tabung koleksi darah untuk mencegah aerosolisasi dari spesimen. Sentrifuge harus ditutupi dan ditempatkan di daerah terlindung. Ketika serum atau plasma sampel harus dikeluarkan dari sel-sel darah atau bekuan, hisap mekanik mengunakan pipetting, dan semua tabung spesimen dan perlengkapan harus dibuang dengan benar dalam wadah Biohazard.

Penggunaan analisis otomatis sering memungkinkan penggunaan tabung koleksi utama untuk analisis sendiri. Dalam kasus ini tabung darah primer disentrifugasi dengan penutup dan serum disedot langsung ke analyzer.

Spesimen yang tidak dapat diterima

Berbagai kondisi membuat spesimen darah tidak cocok untuk pengujian. Spesimen bergumpal tidak cocok untuk jumlah sel karena sel-sel terjebak dalam bekuan dan karena itu tidak dihitung. Jumlah sel pada sampel bergumpal akan palsu rendah.

Spesimen Hemolyzed

Hemolisis dalam spesimen mungkin merupakan penyebab paling umum dari penampilan abnormal. Serum atau plasma hemolisis tidak layak sebagai spesimen untuk beberapa penentuan kimia.

Sebuah spesimen yang hemolisis tampak merah, biasanya merah yang jelas, karena sel darah merah telah segaris dan hemoglobin telah dilepaskan ke bagian cairan darah. Seringkali penyebab hemolisis dalam spesimen adalah teknik yang digunakan untuk venipuncture. Sebuah venipuncture yang buruk, dengan trauma yang berlebihan pada pembuluh darah, dapat mengakibatkan spesimen hemolisis. Kesalahan pengunaan ukuran jarum dan kontak dengan alkohol pada kulit adalah penyebab lain. Hemolisis darah juga bisa terjadi akibat pembekuan, terlalu lama terkena kehangatan, atau membiarkan serum atau plasma untuk tetap terlalu lama di sel sebelum pengujian atau pemindahan ke tabung lain. Sebuah penentuan apakah hemolisis yang in vitro atau in vivo juga berguna. Meskipun relatif jarang, in vivo hemolisis merupakan temuan klinis yang signifikan.

41

Serum atau plasma Hemolisis tidak cocok untuk beberapa penentuan kimia karena zat dalam sel (misalnya, K +) dapat dilepaskan ke dalam serum atau plasma jika serum yang tersisa pada sel-sel untuk waktu yang lama. Selain itu, beberapa konstituen lain, termasuk enzim, asam phospates, laktat dehidrogenase (LDH), dan aspartat aminotransferase (AST, GOT), hadir dalam jumlah besar di sel darah merah, sehingga hemolisis sel darah merah secara signifikan akan meningkatkan nilai yang diperoleh untuk ini zat dalam serum. Hemoglobin yang dilepaskan selama hemolisis dan dapat langsung mengganggu reaksi, atau warnanya dapat mengganggu analisis fotometrik dari spesimen. Prosedur yang harus dilakukan dengan memeriksa untuk menentukan apakah spesimen tampak normal dan dapat digunakan.

ikterik Spesimen

Ikterik (kuning) serum atau plasma specimen dengan penampilan abnormal. Ketika serum atau plasma berwarna kuning kecoklatan ada kemungkinan terjadi peningkatan pigmen empedu, yaitu bilirubin. Desctruction intravlarascular berlebihan dari sel darah merah, obstruksi saluran empedu, atau gangguan hati mengarah pada akumulasi pigmen empedu dalam darah, dan kulit menjadi kuning. Mereka yang melakukan penentuan laboratorium klinis harus mencatat setiap penampilan abnormal serum atau plasma dan melaporkanya. Warna abnormal serum dapat mengganggu pengukuran fotometrik.

spesimen lipemic

Plasma atau serum lipemik ber warna putih susu. Kehadiran lipid, dalam serum atau plasma dapat menyebabkan gambaran yang abnormal . Seringkali, lipemia ini hasil dari pengumpulan darah dari pasien terlalu cepat setelah makan. Penggunaan spesimen serum lipemic tidak mengganggu pada beberapa pemeriksaan kimia tetapi mungkin mengganggu yang lainnya (misalnya, tes trigliserida).

Pengaruh obat obatan pada spesiemen

Darah diambil dari pasien yang memakai jenis obat tertentu dapat memberikan hasil kimia yang tidak valid untuk beberapa unsur pemeriksaan. Obat dapat mengubah beberapa reaksi.obat kimia dapat mempengaruhi hasil laboratorium dalam dua cara umum: beberapa tindakan dari obat atau metabolitnya dapat menyebabkan perubahan (in vivo) dalam konsentrasi zat yang diukur, atau phsycal atau sifat kimia dari obat dapat mengubah analisis secara langsung (in vitro). Jumlah obat yang mempengaruhi pengukuran laboratorium meningkat.

42

Pencatatan dan Pelaporan Proses

Sebagai bagian dari pengolahan dan penanganan spesimen laboratorium, hati-hati, dengan pencatatan dan pelaporan yang harus dilakukan di tempat di laboratorium, terlepas dari ukuran fasilitas. Buku catatan dan laporan yang dicetak sangat penting untuk pengoperasian laboratorium apapun. Dokumen catatan setiap hari dari berbagai spesimen pasien diterima dalam lembaran buku dan laporan hasil yang dihasilkan oleh sistem informasi laboratorium, bila digunakan (lihat Bab 10).

Barang yang akan dicatatkan pada lembar catatan adalah nama pasien, nomor identifikasi, jenis spesimen yang dikumpulkan (deskripsi spesimen dan sumbernya), tanggal dan waktu pengambilan spesimen, dan tes laboratorium harus dilakukan. Lembar catatan juga harus menunjukkan waktu ketika spesimen tiba di laboratorium. Lembar catatan juga dapat mencakup kolom untuk hasil tes dan tanggal ketika tes selesai. Hasil dapat didokumentasikan oleh tangan, dengan menggunakan laporan instrumen-dicetak laboratorium, atau hasil cetakan komputer. Data lembar catatan adalah bagian dari catatan permanen dari laboratorium dan harus disimpan dan tersedia untuk referensi di masa mendatang.

Sebuah laporan dicetak sering dikirim ke dokter dengan data penting yang berkaitan dengan hasil tes. Hasil laporan juga tersedia secara elektronik di berbagai fasilitas. Informasi berikut harus disertakan dalam laporan ini: nama pasien, nomor identifikasi, tanggal dan waktu pengambilan spesimen, deskripsi dan sumber spesimen, inisial orang yang mengumpulkan spesimen, tes diminta, nama dokter yang meminta tes , hasil tes dan inisial atau tanda tangan dari orang yang melakukan tes. Sebagian besar dokumentasi ini dilakukan dengan menggunakan laboratorium sistem informasi terkomputerisasi. Salinan laporan laboratorium ini dapat dikirimkan ke catatan medis departemen dan kantor akuntansi untuk tujuan penagihan pasien.

Menjaga dan Menyimpan Spesimen

Beberapa kandungan kimia berubah dengan cepat setelah darah dikeluarkan dari pembuluh darah. Kebijakan terbaik adalah dengan melakukan tes pada spesimen segera. Ketika spesimen harus dipertahankan sampai tes dapat dilakukan, ada cara untuk menghambat perubahan seperti mencegah glikolisis.

Dengan sedikit pengecualian, semakin rendah suhu, semakin besar stabilitas kandungan kimia. Selain itu, pertumbuhan bakteri jauh dihambat oleh pendinginan dan benar-benar dihambat oleh pembekuan. Suhu kamar umumnya dianggap 180c ke

43

300c, suhu kulkas 40c, dan beku sekitar-50c atau kurang. Pendinginan adalah cara sederhana dan dapat diandalkan menghambat perubahan, termasuk tindakan bakteriologi dan glikolisis, meskipun beberapa perubahan masih berlangsung. Spesimen dalam pendingin harus dibawa ke suhu kamar sebelum analisis kimia. Menghilangkan sel-sel dari plasma dan untuk mencegah perubahan serum. Beberapa spesimen yang diperlukan untuk tes tertentu, seperti bilirubin, harus terlindung dari cahaya atau diuji langsung. Bilirubin adalah zat peka cahaya.

Serum atau plasma dapat diawetkan dengan pembekuan. Seluruh darah tidak dapat dibekukan karena pembekuan dapat memecah sel darah merah (hemolisis). Pembekuan mempertahankan aktivitas enzim dalam serum dan plasma. Serum dan plasma beku memiliki concetrations yang berbeda, dan karena itu spesimen ini harus dicampur/ diaduk dengan baik sebelum digunakan dalam pemeriksaan kimia.

Setiap tindakan pencegahan harus diambil untuk menjaga kandungan kimia dalam spesimen dari saat pengumpulan dengan waktu pemeriksaan di laboratorium, agar hasilnya menjadi bermakna. Secara umum, tabung untuk mengumpulkan darah untuk penentuan kimia harus steril, dan harus bersih dari bahan kimia.

Penyimpanan Spesimen

pemerosesan serum individu atau tabung plasma akan tergantung pada analisis yang akan dilakukan dan waktu yang akan dilalui sebelum analisis. Serum atau plasma dapat disimpan pada suhu kamar, pendingin beku, dan terlindung dari cahaya, tergantung pada keadaan dan apa yang akan dilakukan. Beberapa spesimen harus dianalisis segera setelah mereka mencapai laboratorium, seperti spesimen untuk gas darah dan pH analisis. Spesimen darah untuk hematologi dapat disimpan dalam lemari es selama 2 jam yang digunakan dalam pengujian. Setelah penyimpanan, antikoagulan darah, serum, atau plasma harus dicampur/diaduk setelah mencapai suhu kamar.

Plasma dan serum sering dapat dibekukan dan diawetkan sampai akan diperiksa. Seluruh darah tidak dapat dibekukan karena sel darah merah pecah pada titik beku. Pembekuan mempertahankan unsur sebagian kimia dalam serum dan plasma memberi methoad pengawetan sampel untuk laboratorium. Secara umum, pendingin spesimen menghambat perubahan dari banyak konstituen. Dengan semua spesimen biologi, bagaimanapun, pengawetan harus menjadi pengecualian, bukan aturan. Penentuan laboratorium paling baik dilakukan pada spesimen segar.

44

Menghilangkan zat yang mengganggu

Cairan biologis yang sangat kompleks dalam komposisi nya. Ada ratusan zat terdeteksi dalam urin dan darah, analisis kimia tidak mungkin dapat untuk mengisolasi setiap substansi sepenuhnya sebelum itu bisa diukur. Sebuah metode yang optimal adalah salah satu yang dapat menguji zat khusus, sedangkan zat lainnya tetap ada. Sebuah tes dikatakan spesifik ketika tidak ada zat lain mengganggu. Dalam analisis kimia, hampir semua hamper semua pemeriksaan terkena gangguan. Kadang-kadang gangguan cukup kecil atau cukup tahu bahwa hal itu tidak secara signifikan mengubah akurasi atau ketepatan hasil tes. Kadang-kadang gangguan tidak mempengaruhi hasil, dan spesimen harus diperlakukan khusus sebelum analisis dapat berlangsung. Artinya, zat penyebab gangguan tersebut harus diisolasi, atau dibuang, dari spesimen.

URIN

Urin memberikan banyak informasi dengan cepat dan ekonomis. Informasi klinis yang didapat dari sampel urin dipengaruhi oleh metode pengambilan, waktu dan proses penanganan.

Tersedia berbagai metode pengambilan urin dan tabung penampung. Sampel harus didapatkan dengan teliti, diawetkan dan diproses sebelum pemeriksaan agar hasil yang dilaporkan dapat dipercaya. Jika pemeriksaan urin tidak bisa dilakukan dalam 2 jam setelah pengambilan, sampel harus disimpan pada suhu 40c secepat mungkin setelah diambil. Sampel dapat disimpan dalam lemari es selama 6 hingga 8 jam tanpa mengalami perubahan berarti pada unsur-unsurnya.

Jenis sampel urin

Urin sewaktu

Sampel urin sewaktu merupakan jenis sampel yang umum diperiksa. Sampel sewaktu atau sampel yang diambil kapan saja, dapat memberikan informasi yang tidak akurat mengenai kesehatan pasien karena sampel terlalu encer dan menghasilkan rendah palsu. Walaupun tidak ada pedoman yang spesifik mengenai cara pengambilan, disarankan untuk mencegah kontaminasi dalam sampel. Hal ini membutuhkan petunjuk khusus kepada pasien sehingga tidak menyentuh bagian dalam tabung atau tutup tabung.

Sampel urin pagi I

45

Urin yang dikemihkan pertama kali pada pagi hari merupakan sampel yang dipilih untuk urinalisis dan pemeriksaan mikroskopis. Secara umum, urin ini lebih pekat karena berada lebih lama dalam kandung kemih (sepanjang malam). Sampel ini mengandung unsur-unsur seluler dan analit (seperti glukosa, protein) dalam jumlah yang relatif tinggi. Urin yang dikemihkan dalam waktu 8 jam (terutama sepanjang malam) harus ditampung dan disimpan dalam lemari es sehingga didapatkan sampel 8 jam yang sesungguhnya. Untuk pemeriksaan glukosa dalam urin, sampel yang paling baik adalah urin yang dikemihkan 2 hingga 3 jam setelah makan. Ini merupakan salah satu pengecualian dari penggunaan sampel urin pagi I.

Sampel urin pancar tengah

Urin pancar tengah merupakan jenis sampel untuk pemeriksaan kultur dan tes sensitivitas karena mengurangi insiden kontaminasi seluler dan mikroba. Pertama-tama pasien diminta membersihkan daerah urethral dan kemudian sebagian pertama urin dikemihkan ke dalam toilet. Langkah pertama ini secara signifikan dapat menurunkan insiden kontaminasi pada sampel urin. Kemudian sampel urin pancar tengah dimasukkan ke dalam wadah yang bersih. Metode pengambilan sampel ini dapat dilakukan kapan saja, baik siang maupun malam hari.

Sampel urin 24 jam

Pemeriksaan yang umumnya menggunakan sampel urin 24 jam adalah pemeriksaan kreatinin, nitrogen urea dalam urin, glukosa, sodium, potassium dan unsur-unsur lain yang dipengaruhi variasi diurnal (seperti katekolamin, 17-hidroksisteroid). Kandung kemih harus dikosongkan sebelum memulai waktu pengambilan. Kemudian ditetapkan periode selama 24 jam, semua urin diambil dan ditampung dalam wadah penampung sampai akhir periode. Biasanya sampel disimpan dalam lemari es. Penentuan waktu yang akurat sangat penting untuk menentukan berbagai konsentrasi analit dan rasio kalkulasi.

Sampel urin kateter

Prosedur ini dilakukan jika pasien terbaring di tempat tidur atau tidak bisa berkemih sendiri. Penyedia layanan kesehatan dapat menggunakan kateter yang telah terpasang atau memasang kateter Folley ke dalam kandung kemih melalui urethra untuk mengambil sampel urin.

Sampel urin aspirasi suprapubik

46

Metode ini digunakan jika pasien yang terbaring di tempat tidur tidak bisa dipasang kateter atau pemeriksaan yang membutuhkan sampel steril. Sampel urin diambil dengan jarum aspirasi melalui dinding abdomen ke kandung kemih.

Sampel anak-anak

Untuk bayi dan anak kecil, kantong urin khusus ditempelkan ke kulit sekitar daerah urethral. Ketika proses pengambilan sampel sudah selesai, urin dituang ke wadah penampung atau langsung dipindahkan ke tabung evakuasi dengan sedotan. Urin yang diambil dari popok tidak disarankan untuk pemeriksaan laboratorium karena kontaminasi bahan popok dapat mempengaruhi hasil pemeriksaan. Jika dibutuhkan sampel urin 24 jam, sebuah tabung khusus dapat ditempelkan ke kantong, yang dihubungkan ke botol penampung.

Wadah untuk menampung urin

Merupakan hal yang penting untuk menggunakan tabung atau wadah yang kering, bersih dan bebas dari partikel atau unsur pengganggu untuk menampung sampel urin. Tersedia beberapa jenis wadah yang sesuai untuk hal ini. Disposable, inert, wadah plastik dengan tutup yang tahan pecah, kantong plastik atau guci biasanya sering digunakan.

Semua pispot yang digunakan untuk menampung urin harus benar-benar bersih dan bebas dari bahan pembersih atau pemutih. Label harus selalu tertempel erat pada wadah urin, bukan pada tutupnya.

Botol penampung urin

Botol penampung urin tersedia dalam berbagai bentuk dan ukuran, dengan tutup ulir atau tutup snap on. Standar CLSI untuk urin (GP-16A2) menganjurkan untuk menggunakan botol penampung utama yang dapat menampung minimal 50 ml, mempunyai dasar yang lebar dan mempunyai mulut dengan diameter minimal 4 cm. Dasar yang lebar mencegah tumpahan dan mulut dengan diameter 4 cm memudahkan proses pengambilan urin. Beberapa botol untuk menampung urin mempunyai mulut khusus sehingga memungkinkan sistem transport tertutup untuk memindahkan urin langsung dari botol ke tabung.

Tabung urinalisis

47

Tabung pemindah, sama seperti yang digunakan dalam pengambilan darah, diisi melalui pipa yang ada di tutupnya, atau langsung dari alat pengambilan, dan digunakan untuk mengakses sampel kateter.

Untuk tujuan pemeriksaan, tabung pemeriksaan dengan dasar berbentuk kerucut memberikan kumpulan sedimen yang paling bagus untuk pemeriksaan mikroskopis. Beberapa tabung didesain khusus untuk digunakan dengan pipet untuk sampling yang terstandarisasi. Tabung urinalisis biasanya dapat diisi volume 8 sampai 15 ml.

BD memproduksi tabung urin plastik dengan pengawet. Tabung ini mengandung klorhexidin, ethyl paraben dan sodium propionat dan dapat mempertahankan integritas sampel sampai 72 jam tanpa dimasukkan lemari es.

Wadah untuk menampung urin 24 jam

Wadah untuk menampung sampel urin 24 jam sebaiknya dapat menampung hingga 3 L dan dapat diberi warna agar bahan analit yang sensitif terhadap cahaya dapat terlindungi dari proses degradasi (misal porfirin, urobilinogen).

Jika membutuhkan pengawet, dipilih bahan yang kurang berbahaya dan ditambahkan ke dalam wadah penampung sebelum sampel urin diambil. Pengawet yang biasa digunakan untuk sampel urin 24 jam adalah asam hidroklorida, asam borat, asam asetat dan toluen. Label peringatan harus tertempel pada wadah. Lembar data mengenai keselamatan bahan harus diberikan kepada pasien, dan penyedia pelayanan kesehatan harus menjelaskan semua potensi bahaya.

Wadah untuk kultur urin

Standar CLSI menganjurkan wadah penampung urin yang steril unruk pemeriksaan mikrobiologi. Wadah ini sebaiknya mempunyai tutup yang rapat untuk mencegah kebocoran sampel dan melindungi sampel dari kontaminasi.

Tabung untuk mengirim urin

Tabung untuk mengirim urin harus sesuai dengan sistem otomatis dan peralatan yang digunakan di laboratorium. Wadah penampung dan tabung untuk mengirim harus sesuai dengan sistem pneumatik tube jika peralatan ini digunakan untuk mengirim sampel urin di laboratorium. Peralatan yang tahan pecah sangat penting untuk hal ini.

Pengambilan sampel urin rutin

48

Sampel untuk urinalisis harus ditampung dalam wadah yang bersih dan kering, sampel yang digunakan harus urin segar. Untuk pemeriksaan skrining rutin, biasanya digunakan urin segar yang baru dikemihkan, urin sewaktu, urin pancar tengah. Untuk kebanyakan pemeriksaan rutin, termasuk kadar protein dan pemeriksaan unsur sedimen urin, sampel urin pagi I adalah sampel urin yang paling sesuai.

Kadang-kadang, diperlukan sampel urin dengan kateterisasi. Jenis sampel ini diambil oleh dokter atau petugas yang ditunjuk dan diambil dengan memasukkan kateter ke dalam kandung kemih melalui urethra untuk mengambil urin. Kateterisasi dilakukan berdasarkan keadaan khusus atau untuk mengambil sampel urin steril untuk pemeriksaan bakteriologi. Risiko infeksi selalu terjadi pada waktu melakukan tindakan invasif, seperti kateterisasi. Pada kebanyakan keadaan, sampel urin pancar tengah sudah mencukupi untuk kultur bakteriologi.

Ketika pemeriksaan kultur bakteriologi dan urinalisis rutin keduanya harus dilakukan pada sampel urin yang sama, maka pemeriksaan kultur harus dilakukan yang pertama kemudian urinalisis rutin, untuk mencegah kontaminasi pada sampel sebelum dilakukan kultur pada media bakteriologi. Prosedur 3.1 menjelaskan cara pengambilan sampel urin yang sesuai untuk pemeriksaan kultur urin.

Pengambilan sampel urin untuk periode waktu tertentu

Jika pengambilan sampel dilakukan pada pasien rawat jalan, pasien harus mendapat petunjuk yang jelas mengenai cara pengambilan urin. Kandung kemih dikosongkan pada saat permulaan waktu (misal pada jam 8 pagi) dan waktu ini dicatat pada wadah penampung. Semua unsur yang dikemihkan ditampung dan dimasukkan ke dalam wadah penampung, dari mulai urin yang dikemihkan pada pukul 8 pagi hingga seharian. Sampel urin ini akan lengkap setelah 24 jam.

Untuk pengambilan sampel selain 24 jam, pada prinsipnya sama. Sampel ini diawetkan dengan dimasukkan ke dalam lemari es selama proses menampung urin, dapat ditambahkan pengawet kimia yang sesuai yang ditambahkan ke dalam wadah sebelum proses pengambilan sampel dimulai.

Prosedur 3.1. Petunjuk bagi pasien : cara pengambilan sampel urin pancar tengah untuk pemeriksaan kultur

49

Cuci tangan hingga bersih memakai sabun dan air.

Buka tutup wadah penampung urin yang telah tersedia. Hati-hati jangan menyentuh bagian dalam wadah.

Bersihkan daerah genital anda sesuai dengan prosedur berikut :

Laki-laki :

Jika anda tidak disunat, kulup ditarik ke belakang sebelum dibersihkan.

Bersihkan ujung penis menggunakan kassa pembersih steril, dimulai dari ujung kemudian bergerak menuju ke pangkal. Ulangi proses ini menggunakan kassa yang baru.

Wanita :

Jongkok di atas toilet, dengan menggunakan jari-jari tangan untuk memisahkan dan terus membuka lipatan kulit di daerah genital anda.

Bersihkan saluran kencing dan daerah sekitarnya dengan kassa pembersih steril, mulai dari depan ke belakang. Ulangi proses ini menggunakan kassa yang baru.

Buang kassa bekas ke dalam tempat sampah (bukan ke dalam toilet).

Mulailah berkemih ke dalam toilet. Setelah urin dikemihkan selama beberapa detik, tampung aliran urin bagian tengah ke dalam wadah penampung. Jika jumlah urin sudah mencukupi (kira-kira setengah penuh) lanjutkan berkemih ke dalam toilet.

Tutup wadah penampung dengan erat.

Cuci tangan hingga bersih memakai sabun dan air.

Serahkan wadah kepada perawat atau petugas laboratorium atau tinggalkan pada tempat yang telah ditentukan.

Pastikan label sampel telah memuat identitas anda dengan benar.

Jangka waktu penampungan urin

pasien dengan diinstruksikan tentang rincian dari proses pengumpulan urine, jika pengambilan akan dilakukan secara rawat jalan. Kandung kemih dikosongkan pada saat mulai (misalnya, 08:00) dan kali ini tercatat pada wadah koleksi. Urin pertama

50

dibuang pada awal penampungan. Semua urin selanjutnya dikumpulkan dan dimasukkan ke dalam wadah, dan sampai urin di 08:00 hari berikutnya. spesimen urine terakhir akan melengkapi koleksi 24 jam.

Untuk koleksi waktunya selain dari 24 jam, prinsip pengumpulan sampel sama dengan urin 24 jam. Spesimen pengumumpulan ini dapat diawetkan dengan pendinginan. Sebelum urin ditampung wadah penampung dapat diberikan pengawet kimia yang tepat.

Total volume sampel koleksi waktunya diukur dan dicatat, dan sampel yang digunakan tercampur dengan baik, sebelum dipisahkan untuk analisis.

Pengambilan sampel urin untuk kultur

Sampel urin pancar tengah sesuai untuk pemeriksaan kultur (lihat prosedur 3.1). Perlu diperhatikan, glans penis pada pria dan orificium urethra pada wanita dibersihkan menggunakan larutan antiseptik yang lembut dengan kassa steril atau kapas. Pasien diberi petunjuk agar berkemih dan membuang aliran urin awal ke dalam toilet atau pispot. Pada wanita, selama proses berkemih, labia harus dibuka agar tidak terjadi kontaminasi. Sampel urin pancar tengah harus ditampung dalam wadah steril, dan tidak boleh ada bagian perineum (pada wanita) yang menyentuh wadah penampung. Setelah sampel ditampung, sisa urin dibuang

Pengawetan Sampel Urin

Bila sampel urin dibiarkan pada suhu ruangan untuk jangka waktu tertentu, maka urin akan segera mengalami perubahan. Komposisi urin akan berubah dalam waktu 30 menit setelah pengambilan urin. Hal ini disebabkan karena pada suhu ruangan akan terjadi pemecahan urea oleh bakteri, yang akan menghasilkan amonia. Bilamana bereaksi dengan ion hidrogen, maka amonia tersebut akan berubah kembali menjadi ion amonium, yang akan meningkatkan pH, yang mempengaruhi silinder dan sel-sel lain yang ada pada urine. Bermacam-macam pemeriksaan laboratorium urin harus dilaksanakan segera setelah urin dikumpulkan. Tidak boleh lebih dari 1 hingga 2 jam, jika lebih maka urin harus diawetkan.

Metode terbaik dalam hal pengawetan urin adalah dengan memasukkan ke dalam lemari es segera setelah dilakukan sampling urin. Sampel akan bertahan dalam waktu 6 - 8jam tanpa perlu ditambahkan bahan pengawet. Sampel tersebut dapat dibekukan pada suhu -24 hingga -160C setelah pengambilan. Beberapa zat kimia pengawet juga dapat ditambahkan untuk pemeriksaan urin rutin. Terdapat berbagai macam prinsip

51

pengawetan urin, akan tetapi garis besarnya adalah dengan menekan aktivitas bakteri atau perubahan komposisi secara kimia, atau untuk tetap melarutkan zat-zat yang ada dalam urin jika tidak maka akan terbentuk presipitat. Ada kalanya sampel yang diambil tidak diberikan bahan pengawet, sebab akan mengganggu hasil pemeriksaan kimia. Secara umum waktu pengawetan berkisar antara 24 hingga 72 jam.

Selain dimasukkan ke dalam lemari es, zat pengawet kimia lainnya juga ditambahkan seperti asam hidroklorida, asam borat dan asam asetat. Asam borat membuat urin dapat dibiarkan berada di suhu ruangan, hampir sama baiknya dengan jika ditaruh di lemari es. Selain itu zat pengawet lainnya yang dapat digunakan:

Toluen, larutan yang lebih ringan daripada urine maupun air, mencegah pertumbuhan bakteri dengan meniadakan kontak urin dengan udara. Lapisan tipis dari toluen yang ditambahkan cukup untuk melapisi permukaan urin. Toluen harus disaring atau urin harus diambil menggunakan pipet menembus lapisan toluen bilamana kita ingin memeriksa urin. Toluen (toluol) merupakan zat pengawet yang terbaik sebab tidak mengganggu pemeriksaan urin rutin.

Formaldehid (formalin), zat pengawet, memfiksasi unsur dari sedimen yang ada di urin, termasuk bakteri. Ini akan mengganggu pemeriksaan reduksi untuk gula dalam urin, dan mungkin akan membentuk endapan dengan urea yang mengganggu pemeriksaan sedimen dalam mikroskop. Sekarang telah tersedia tablet pengawet yang memproduksi formaldehid. Tablet ini lebih sering digunakan dibandingkan bentuk cairnya, dan lebih tidak mengganggu pemeriksaan kimia dan sedimen urin.

Thymol, zat kristal, bekerja dengan mencegah pertumbuhan bakteri. Thymol akan mengganggu pemeriksaan protein urin dan bilirubin.

BD Vacutainer Plus Plastic UA Preservative Tube terdiri dari (klorhexidin, ethyl paraben, sodium propionat) yang akan mengawetkan sampel hingga 72 jam tanpa perlu dimasukkan ke dalam lemari es. Ketika sampel dimasukkan dari tempat penampungan ke dalam tabung pengawet, hal ini akan membuat suatu lingkungan yang stabil bagi sampel hingga pemeriksaan dilakukan dan akan mengurangi resiko dari pertumbuhan bakteri dan perubahan komposisi dari sampel.

Zat tambahan khusus seperti asam natrium untuk pemeriksaan merkuri, sodium bikarbonat dan EDTA untuk porfirin, dan sodium bikarbonat untuk pemeriksaan urobilinogen.

52

Zat pengawet paling umum yang digunakan untuk pemeriksaan kultur dan sensitivitas adalah asam borat, yang tersedia dalam bentuk tablet, cair, atau liofilik. Secara klinis diduga bahwa asam borat dalam bentuk bukan buffer akan sangat berbahaya bagi makhluk hidup dibandingkan dengan buffer. Pengawet untuk kultur dan sentivitas dibuat sedemikian rupa sehingga sampel berada dalam kondisi stabil dengan cara menghalangi proliferasi dari bakteri yang dapat mengakibatkan positif palsu atau pertumbuhan bakteri secara berlebihan.

Sampel urin yang diawetkan dapat disimpan pada suhu ruangan hingga dilakukan pemeriksaan. Lama pengawetan dijelaskan oleh masing-masing pabrik.

Petunjuk Pengawetan Sampel

Petunjuk CLSI untuk pemeriksaan mikrobiologi urin merekomendasikan penggunaan lemari es pada suhu 2-8ºC atau menggunakan zat pengawet jika pemeriksaan akan ditunda lebih dari 8 jam setelah pengambilan sampel.

Bahan pengawet tidak boleh mengandung merkuri dan harus aman terhadap lingkungan. American Hospital Association and Enviromental Protection Agency membuat sebuah kesepakatan untuk mengurangi penggunaan merkuri bagi industri yang menyangkut masalah kesehatan. (http://www.epa.gov/mercury)

Perbandingan antara jumlah sampel dengan pengawet harus diperhatikan agar dapat meningkatkan akurasi pemeriksaan. Mempertahankan rasio yang baik sangat penting ketika memindahkan sample ke dalam tabung pengawet. Garis indikator pada tabung sangat penting untuk menentukan kadar yang tepat.

Sistem evakuasi tabung didesain agar kadar sampel sesuai dengan zat pengawet. Sistem ini juga berperan untuk mengurangi kemungkinan paparan antara petugas kesehatan dengan sampel.

Pemberian Label dan Pemrosesan Sampel Urin

Terdapat berbagai macam sampel urin, oleh karena itu diperlukan kriteria tertentu dalam proses pengambilan dan pengiriman urin.

Label

53

Terdiri dari nama pasien, dan identifikasi yang diperlukan mengenai sampel. Pastikan bahwa informasi pada tempat pengiriman sesuai dengan jenis pemeriksaan yang dibutuhkan. Jika tempat penampungan digunakan juga sebagai media transport, maka label harus ditaruh pada media transport tersebut bukan pada tutupnya, sebab tutup dapat tertukar dengan wadah yang lainnya. Pastikan label yang digunakan dapat tahan pada suhu lemari es.

Tanggal dan Waktu Pengambilan

Terdiri dari tanggal dan waktu pengumpulan urin. Dengan demikian kita dampat mengkonfirmasikan bahwa proses pengambilan sudah dilakukan dengan benar. Untuk sampel dengan periode waktu tertentu, pastikan waktu awal dan akhirnya. Catatan mengenai keadaan sampel saat tiba di laboratorium penting untuk memastikan sampel telah diproses dan dikirim dengan benar.

Metode Pengambilan

Metode pengambilan sampel harus diperiksa ketika sampel diterima di laboratorium untuk memastikan bahwa sampel yang diterima sesuai dengan pemeriksaan yang diminta.

Pengawetan

Periksa apakah digunakan zat pengawet atau kemungkinan urin berada di luar lemari es lebih dari 2 jam. Pastikan bahwa metode pengawetan yang digunakan sesuai dengan tes yang diminta.

Perlindungan cahaya

Pastikan bahwa spesimen disampaikan untuk pengujian analisis peka cahaya dikumpulkan dalam wadah yang melindungi spesimen dari cahaya.

Cairan Tubuh

Cairan tubuh steril dapat ditemukan di berbagai tempat dalam tubuh (kavitas) pada kondisi normal. Pada berbagai kelainan atau penyakit, jumlah cairan ini dapat meningkat. Sampel cairan tersebut dapat diaspirasi dari berbagai organ tubuh (tabel 3-2), dapat dilakukan pemeriksaan jumlah sel darah merah dan sel darah putih, hitung jenis sel darah putih, komposisi kimia dan mikroorganisme. Dalam memproses sampel cairan tubuh harus memperhatikan Petunjuk Standar.

54

Pemeriksaan yang dilakukan tergantung pada sumber sampel dan sampel harus segar. Hitung jenis sel tidak bisa dilakukan pada sampel yang membeku, sehingga perlu ditambahkan antikoagulan.

Cairan Cerebrospinal (LCS)

Cairan cerebrospinal (LCS) berperan sebagai shock absorben jaringan otak dan medula spinalis, transpor nutrisi, sebagai pelumas sistem saraf pusat dan berperan pula dalam perkembangan otak. LCS ditemukan dalam ventrikel, pada canalis centralis, dan di ruang subarachnoid pada otak dan medula spinalis.

Total cairan LCS berkisar antara 150 ml pada orang dewasa dan kurang lebih 60 ml pada anak-anak. Di laboratorium, LCS diperiksa secara makroskopis, dan mikroskopis. Dalam klinis, pemeriksaan LCS berfungsi untuk mendiagnosis kelainan seperti perdarahan subarachnoid, meningitis, multipel sklerosis, dan neoplasma.

Pada keadaan normal LCS jernih dan tidak berwarna. Setiap ada perubahan warna harus dicatat. LCS atau supernatan yang berwarna kuning menunjukkan keadaan xanthokromia, yang terjadi karena pelepasan hemoglobin dari sel darah merah yang telah lisis. Warna merah segar dapat ditemukan pada perdarahan subarachnoid maupun perdarahan intracerebral. Normal LCS mempunyai viskositas seperti air. Endapan dapat terjadi karena peningkatan protein. Formasi gel dapat terjadi diakibatkan peningkatan fibrinogen.

Sampel LCS harus segera dikirim ke laboratorium untuk pemeriksaan. Sistem 4 atau 5 tabung harus sesuai dengan standar pemeriksaan. Tabung tersebut didesain untuk pemeriksaan hematologi rutin, mikrobiologi, kimia klinik, dan imunologi / serologi.

Cairan Sinovial

Cairan sinovial adalah cairan yang terdapat dalam persendian. Athrocentesis menghasilkan biopsi cairan di sendi. Normalnya sendi memiliki sedikit cairan

55

sinovial. Aspirasi cairan dengan athrocentesis akan memberikan informasi mengenai penyakit sendi. Berbagai penyakit sendi (seperti reumatoid artritis, gout) akan dijumpai perubahan dalam jumlah dan tipe sel, komposisi kimia dan kristal. Arthrocentesis juga dapat mengurangi tekanan dalam sendi.

Cairan sinovial berbeda dengan cairan lainnya sebab terdapat kristal dan sangat kental. Idealnya pengambilan menggunakan 3 tabung: (1) tabung steril untuk kultur; (2) tabung dengan Heparin atau antikoagulan EDTA untuk hitung sel, identifikasi kristal dan membuat preparat hapus, dan (3) tabung tanpa antikoagulan untuk mengevaluasi secara makroskopis, analisis kristal, endapan fibrinogen, dan untuk pemeriksaan kimia atau imunologi. Sodium heparin, atau EDTA merupakan zat pengawet yang dianjurkan. Untuk pemeriksaan endapan, cairan ini dikumpulkan dalam tabung tanpa antikoagulan.

Cairan Perikardial, Pleura, dan Peritoneal.

Cairan pada perikardial, pleura dan periteneal disebut dengan serous. Secara normal diproduksi oleh tubuh dan diabsorbsi kembali, sehingga hanya tersisa dalam volume yang kecil. Cairan ini berwarna pucat. Cairan ini menjadi lebih kental meningkat sebanding dengan peningkatan jumlah sel, sebagai indikasi adanya inflamasi. Peningkatan volume cairan tubuh ini terjadi pada proses inflamasi dan penurunan protein serum.

Cairan serous tersebut diaspirasi oleh klinisi jika mengganggu fungsi organ terkait dan untuk diagnosis. Sampel ditampung dengan berbagai wadah, tergantung dari pemeriksaan yang diinginkan. Tabung EDTA digunakan untuk menghitung sel dan membuat preparat hapus, tabung steril untuk kultur, dan tabung oxalat atau fluoride untuk pemeriksaan protein, glukosa dan pemeriksaan kimia lannya. Jika volume yang didapat banyak maka perlu wadah besar yang sudah diberi antikoagulan. Jika cairan sudah membeku, maka tidak bisa digunakan untuk pemeriksaan.

Cairan Seminalis/semen

Fungsi utama dari cairan seminalis sebagai transportasi sperma ke mukosa cerviks. Setelah berada pada traktus reproduktif wanita, sperma berada di cairan seminalis

56

selama beberapa waktu untuk menembus mukus. Setiap struktur reproduksi pria menghasilkan komponen spesifik untuk membentuk cairan seminalis. Cairan seminalis mengandung berbagai unsur, di antaranya spermatozoa. Cairan seminalis diperiksa secara makroskopis, kimia, dan mikroskopis. Posedur ini dilakukan untuk memeriksa unsur-unsur secara fisik dan kimia, untuk memeriksa jumlah sperma dan untuk menilai motilitas dan morfologi seluler. Indikasi pemeriksaan cairan seminalis seperti infertilitas, protokol inseminasi buatan, menilai postvasektomi, dan mengevaluasi kemungkinan kelainan sexual.

Dibutuhkan sampel segar. Sampel ditampung dalam wadah gelas atau plastik yang bersih dan steril. Idealnya cairan seminalis dianalisis setelah 30 menit setelah diambil. Sampel harus disimpan pada suhu 37ºC dan diperiksa 1-2 jam setelah didapat. Setelah 1 jam disimpan dalam wadah plastik, motilitas sperma berkurang secara signifikan. Kebanyakan laboratorium memeriksa 2 sampel yang dikumpulkan selang beberapa hari. Teknik pangambilan, pengiriman yang baik, dan pemeriksaan yang sesuai merupakan faktor yang penting untuk analisis cairan seminalis. Prosedur standar harus dilakukan dalam menangani sampel semen, darah dan cairan tubuh lainnya.

Sebelum pemeriksaan, pasien tidak boleh melakukan hubungan seksual selama 3-5 hari. Tidak boleh lebih dari 5 hari. Kondom yang mengandung spermiticide, juga tidak boleh digunakan. Pasien juga harus diajarkan bahwa sampel harus berada dalam keadaan hangat jika melakukan sampling di rumah.

Pada kasus medikolegal, identifikasi dan keamanan yang baik dan prosedur diatur secara hukum. Pada kasus pemerkosaan, usap vagina diperlukan untuk mengevaluasi keberadaan sperma . Sperma dapat ditemukan 24-72 jam setelah hubungan badan, namun tidak adanya sperma bukan berarti tidak terjadi hubungan badan.

Kultur Swab

Swab dari luka, abses, tenggorok, dan tempat lainnya dikirim ke laboratorium dalam suatu wadah yang steril untuk kultur. Swab ini berpotensi infeksius dan harus diperlakukan secara hati-hati di laboratorium. Wadah tempat swab harus diberi label dengan baik dan diperiksa segera.secara langsung. Kebanyakan bakteri akan mati jika dibiarkan pada swab kering., jadi jika kultur tidak segera dilakukan perlu adanya media transport. Kebanyakan orgnisme dapat hidup beberapa jam jika disimpan dengan baik, namun pemeriksaan segera adalah yang terbaik. Harus diperhatikan metode untuk membuang material yang terkontaminasi.

57

Pengumpulan Kultur Tenggorok

Swab tenggorok berfungsi untuk menentukan kuman Streptokokus ß hemolikus grup A streptococcus yang menyebabkan pharyngitis (prosedur 3-2 dan gambar 3-7). Sampel ini dapat digunakan untuk kultur pada darah domba atau dengan tes cepat dengan metode ekstraksi seldengan mereaksikan antigen polisakarida dengan antibodi yang sesuai. Rapid test ini sangat populer, terutama oleh klinisi, sebab hasilnya dapat terlihat selang berapa menit.

Feses

Feses harus dikumpulkan pada wadah plastik yang bersih. Biasanya digunakan feses yang menempel pada sarung tangan pada saat pemeriksaan rektal. Wadah harus diberi label dengan baik, termasuk waktu pengambilan (untuk sampel dengan periode waktu tertentu) dan pemeriksaan laboratorium yang diminta.

Material feses dalam jumlah kecil, kadang digunakan untuk pemeriksaan darah samar. Keberadaan darah samar sangat penting untuk mengetahui adanya keganasan kolon. Kebanyakan pasien rawat jalan sering meminta untuk mengambil fesesnya secara langsung dan menaruhnya di kertas saring yang didapat dari klinisi. Sampel kemudian dikirim kembali ke klinisi atau laboratorium untuk pemeriksaan. Pada orang dewasa, keseimbangan metabolik dan perhitungan nitrogen feses dan lemak membutuhkan pengumpulan feses selama 3 hari (72 jam).

Pada anak, dapat dilakukan pemeriksaan skrining aktivitas tripsin untuk mendeteksi adanya fibrosis kistik. Biasanya, sampel feses diambil dari popok.

58

Keringat

Pemeriksaan keringat untuk mendeteksi peningkatan elektrolit, untuk mengkonfirmasi diagnosis fibrosis kistik.

saliva

Ludah atau saliva merupakan cairan viskos yang jernih, bersifat basa, dihasilkan oleh kelenjar dalam mulut. Pemeriksaan mengenai virus, bakteri, pemeriksaan kimia hormon, terapi obat, penyalahgunaan obat dapat diperiksa dengan saliva. Biasanya, pasien disuruh mengunyak wax atau kapas gigi selama beberapa menit dan kemudian saliva dikumpulkan.

Chain of Custody (penyimpanan) Informasi Sampel

Ketika sampel dibutuhkan untuk kepentingan medikolegal, dibutuhkan penanganan tertentu. Dalam medikolegal atau forensik, data sampel yang tersedia berhubungan dengan hukum. Langkah pemrosesan sampel mulai dari pemberian label, pengiriman, penyimpanan dan pemeriksaan harus didokumentasikan dengan baik. Hal ini untuk memastikan sampel tidak disabotase pihak tertentu, sampel berasal dari orang yang tepat dan hasilnya akurat. Setiap tahap pengumpulan, pengolahan, pemrosesan dan pelaporan harus didokumentasikan, ini yang disebut chain of custody.

Dokumen chain of custody harus ditandatangani oleh setiap orang yang terlibat dalam penanganan sampel. Prosesnya dapat bervariasi antara laboratorium, tapi tujuan utamanya sama yaitu agar hasilnya dapat dipertanggungjawabkan di pengadilan dan telah melalui semua tahap pemrosesan untuk menjamin integritas hasil.

59