Penentuan Kadar Laktosa Secara Volumetri Dengan Menggunakan Metode Gohr

50
56 BAB 1 PENDAHULUAN 1.1 Latar belakang Sebagian besar karbohidrat dalam makanan, selain kanji, berada dalam bentuk disakarida (dua gula sederhana yang menyatu). Untuk penyerapan, dilakukan penguraian enzimatik menjadi gula sederhana. Mukosa usus untuk memiliki berbagai disakaridase, yang beberapa diantaranya dapat mengalami defisiensi kongenital atau didapat. Defisiensi yang paling sering terjadi adalah mengenai laktase, enzim yang menguraikan laktosa menjadi gula konstituennya glukosa dan galaktosa. Karena aktivitas laktase usus menurun seiring dengan usia, intoleransi susu jauh lebih sering dijumpai pada orang dewasa dibandingkan anak-anak (susu kaya akan laktosa). Dalam aktivitas laktase juga terdapat perbedaan ras. Orang Asia cenderung memiliki kadar yang terendah, sedangkan orang Afrika hanya sedikit lebih tinggi. Seperti halnya makanan, air susu ibu juga mempunyai cirri-ciri tersendiri. Sebagian besar kandungan karbohidrat pada air susu ibu kebanyakan dalam bentuk disakarida laktosa yang membutuhkan enzim disakaridase yang spesifik untuk pencernannya.

description

hmm

Transcript of Penentuan Kadar Laktosa Secara Volumetri Dengan Menggunakan Metode Gohr

89

BAB 1PENDAHULUAN

1.1 Latar belakang

Sebagian besar karbohidrat dalam makanan, selain kanji, berada dalam bentuk disakarida (dua gula sederhana yang menyatu). Untuk penyerapan, dilakukan penguraian enzimatik menjadi gula sederhana. Mukosa usus untuk memiliki berbagai disakaridase, yang beberapa diantaranya dapat mengalami defisiensi kongenital atau didapat. Defisiensi yang paling sering terjadi adalah mengenai laktase, enzim yang menguraikan laktosa menjadi gula konstituennya glukosa dan galaktosa. Karena aktivitas laktase usus menurun seiring dengan usia, intoleransi susu jauh lebih sering dijumpai pada orang dewasa dibandingkan anak-anak (susu kaya akan laktosa). Dalam aktivitas laktase juga terdapat perbedaan ras. Orang Asia cenderung memiliki kadar yang terendah, sedangkan orang Afrika hanya sedikit lebih tinggi. Seperti halnya makanan, air susu ibu juga mempunyai cirri-ciri tersendiri. Sebagian besar kandungan karbohidrat pada air susu ibu kebanyakan dalam bentuk disakarida laktosa yang membutuhkan enzim disakaridase yang spesifik untuk pencernannya.

Susu merupakan sumber nutrisi yang penting untuk pertumbuhan bayi mamalia, termasuk manusia yang mengandung karbohidrat, protein, lemak mineral dan vitamin. Laktosa yang merupakan satu-satunya karbohidrat dalam susu mamalia adalah disakarida yang terdiri dar gabungan 2 monosakarida yaitu glukosa dan galaktosa. Laktosa merupakan disakarida yang merupakan sumber energi yang memasak hampir setengah dari keseluruhan kalori yang terdapat pada susu (35 40%).Selain sumber energi, laktosa didalam tubuh juga penting untuk absorbsi kalsium, galaktosa yang merupakan hasil hidrolisis laktosa, merupakan senyawa yang penting untuk perkembangan dan fungsi otak. Karena itu keberadaan laktosa sebagai karbohidrat utama yang terdapat dalam susu, termasuk asi, merupakan hal yang unik. Proses evolusi terpilihnya laktosa menjadi satu-satunya karbohidrat yang ada pada susu mamalia, mungkin merupakan cerminan dari adanya fungsi laktosa yang penting bagi tubuh bayi.

Oleh karena itu, dilakukanlah percobaan penentuan laktosa dalam susu secara volumetri dengan metode Gohr ini untuk mengetahui kadar laktosa yang terkandung pada sampel susu formula bayi, sehingga diharapkan setelah melakukan percobaan ini dapat diketahui kadar laktosa yang menjadi salah satu parameter dari kualitas susu yang baik untuk dikonsumsi sehingga dapat mengaplikasikannya adalah pengembangan ilmu gizi maupun dalam kehidupan sehari-hari.

1.2 Tujuan Percobaan

Mengetahui volume Na2S2O3 yang diperlukan untuk menitrasi sampel susu dan blanko pada percobaan.

Mengetahui jumlah K3Fe(CN)6 0.05 N yang tereduksi oleh laktosa pada sampel susu formula bayi.

Mengetahui kadar laktosa yang terkandung dalam sampel.

1.3 Prinsip Percobaan

Kandungan protein pada sampel susu diendapkan dengan maksimal oleh K4Fe(CN)6 dan ZnSO4, dimana pembentukkan kompleks kedua senyawa ini dengan protein terjadi sempurna pada suasana pH netral atau sedikit basa dengan penambahan basa kuat NaOH, dimana pencapaian pH tersebut dkideteksi oleh indikator PP yang ditandai dengan perubahan warna menjadi merah lemah dan terbentuk kompleks dengan protein berupa residu putih sehingga diperoleh filtrat bebas protein yang bening.Adanya kandungan laktosa pada filtrat bebas protein akan teroksidasi oleh K3Fe(CN)6, dimana Fe3+ akan terduksi menjadi Fe2+. Jumlah Fe3+ yang tidak bereaksi akan direduksi oleh I- dari larutan seng sulfat kalium iod, dimana I- akan teroksidasi menjadi I2 dalam suasana CH3COOH(p). Jumlah I2 yang dibebaskan direduksi kembali oleh Na2S2O3. Saat TAT akan tercapai adanya kelebihan I2 pada campuran dideteksi oleh indikator amilum yang ditandai dengan adanya kompleks berwarna biru keunguan, perubahan warna campuran dari kuning muda (sebelum TAT) menjadi putih menunjukkan bahwa TAT telah tercapai. Banyaknya volume Na2S2O3 yang terpakai setara dengan jumlah I2 yang dibebaskan, sama juga dengan julah Fe3+ yang tersisa. Hal ini menggambarkan berapa Fe3+ yang bereaksi dengan laktosa pada sampel susu, sehingga jumlah K3Fe(CN)6 yang tereduksi oleh gula pereduksi laktosa sama dengan selisih ml Na2S2O3 antara blanko dan sampel pada titrasi volumetri.

BAB 2

TINJAUAN PUSTAKA

Disakarida laktosa disebut gula susu. Berbeda dengan maltose dan selobiosa. Laktosa terdiri dari 2 monosakarida yang berlainan yaitu D-glukosa dan D-galaktosa merupakan D-sakarida alamiah yang dijumpai hanya pada binatang menyusui. Air susu sapid an manusia mengandung 5% laktosa. Laktosa diperoleh secara komersil sebagai hasil samping pabrik keju (Mayasari,2012).

Dalam metabolisme tubuh manusia yang normal, laktosa dihidrolisis secara enzimatis menjadi D-galaktosa dan D-glukosa ; kemudian galaktosa itu diubah menjadi glukosa, yang dapat mengalami metabolisme. Suatu keadaan yang disebut galaktosemia yang menyerang bayi, disebabkan oleh kurangnya enzim untuk mengubah galaktosa menjadi glukosa. Galaktosemia dicirikan oleh tingginya kadar galaktosa dalam darah dan air seni. Gejalanya beranekaragam mulai dari muntah-muntah sampai keterbelakngan mental dan jasmani, dan kadang-kadang kematian. Pengobatannya dilakuakn dengan menghilangkan susu dan produk susu dari dalam makanan. (Suatu susu buatan yang terbuat dari kedelai dapat dijadikan pengganti) (Fessenden, 1982).

Kadang-kadang ada orang yang kekurangan enzim laktase. Dalam keadaan seperti ini beberapa disakarida yang masuk dalam insulin akan difermentasikan oleh bakteri usus dan apabila jumlahnya banyak, atau terjadi diare. Dalam perdagangan laktosa diperoleh sebagai hasil tambahan pada pembuatan keju atau dibuat dari susu skim (Poedjiadi, 1994).

Penguaraian karbohidrat dalam proses pencernaan menghasilkan beberapa oligosakarida dan monosakarida. Oligosakarida tidak dapat dicernakan pada proses diatas karena mulut tidak memiliki enzim untuk memecah ikatan -1,4. Oligosakarida ini akan diproses lebih lanjut menjadi monosakarida yang sebelum memasuki usus halus dan siklus glikolisis. Reaksi yang terpenting dalam tahap ini adalah pemecahan disakarida seperti sukrosa, laktosa dan maltose. Reaksi penguraian ketiga disakarida ini menghasilkan unit-unit heksosanya.

Sukrosa

H2O

Fruktosa + Glukosa SukroaseLaktosaH2O

Galaktosa + Glukosa

Laktase

MaltosaH2O

Glukosa + Glukosa

Maltase

(Toha, 2005).

Dasar ilmu dari pengetahuan dan teknologi produk susu adalah air susu, karena air susu adalah bahan baku dari semua produk susu. Susu sebagian besar digunakan sebagai produk pangan. Dipandang dari segi gizi, susu merupakan makanan yang hampir sempurna dan merupakan makanan alamiah bagi binatang menyusui yang baru lahir, dimana susu merupakan satu-satunya sumber makanan pemberi kehidupan segera sesudah kelahiran. Susu didefinisikan sebagai sekresi dari kalenjar susu binatang yang menyusui anaknya (Buckle, 2010).

Komposisi susu dapat sangat beragam tergantung pada beberapa faktor, akan tetapi angka rata-rata untuk semua jenis kondisi dan jenis sapi perah adalah sebagai berikut :

Lemak 3,9%

Protein

3,4%

Laktosa4,8%

Abu

0,72%

Air

87,10%

Bersama dengan bahan-bahan lain dalam jumlah sedikit seperti sitrat, enzim-enzim, fosfolipid, vitamin A, vitamin B dan vitamin C. Susu dari binatang menyusui selain sapi perah yang digunakan ditempat-tempat lain dan komposisi rata-ratanya, perlihatakan pada tabel 2.1Tabel 2.1 Komposisi Rata-rata Beberapa Jenis Susu Mamalia

JenisLemak

%Protein

%Laktosa

%Abu

%Air

%

Kambing

Ikan paus

Kelinci

Kerbau

Kuda

Domba

Anjing laut

Sapi

Manusia4.09

22.24

13.60

7.40

1.59

8.28

54.00

3.90

3.803.71

11.90

12.95

4.74

2.00

5.44

12.00

3.40

1.204.20

1.79

2.40

4.64

6.14

4.78

Tidak ada

4.80

7.000.79

1.66

2.55

0.78

0.41

0.90

0.53

0.72

0.2187.81

63.00

68.50

82.40

89.86

80.60

34.00

87.10

87.60

(Buckle, 2010).

Laktosa adalah karbohidrat utama yang terdapat didalam susu. Laktosa adalah disakarida yang terdiri dari glukosa dan galaktosa. Laktosa ini terdapat dalam susu dalam fase larutan yang sesungguhnya dan dengan demikian mudah diasimilasikan sebagai makanan dengan proses hidrolisa menjadi glukosa dan galaktosa oleh enzim usus, lactase ( galaktosidase). Tetapi sekarang sudah diketahui bahwa banyak kelompok-kelompok suku yang tidak tahan terhadap laktosa dan ini telah diketahui sebagai akibat dari kurangnya enzim laktosa dalam mukosa usus. Pemberian laktosa atau susu dalam keadaan seperti ini menyebabkan mencret atau gangguan-gangguan perut yang lain. Lebih dari 70% orang-orang dewasa di Afrika, Asia dan Indian Amerika menunjukkan adanya kekurangan enzim laktase. Kondisi ini tidak terdapat pada waktu lahir, tetapi berkembang sesudah waktu sapih. Juga telah diketahui bahwa kekuranganlaktosa yang menyebabkan tidak tahan terhadap laktosa, merupakan akibat yang biasa dari gangguan gastrointestinal yang mungkin berasal dari bakteri. Sayangnya kondisi yang terakhir ini mungkin juga terdapat pada anak-anak muda dari Negara yang sedang berkembang karena higlene yang kurang memadai dalam penanganan bahan pangan (Buckle, 2010).

Laktosa tidak semanis gula tebu dan mempunyai daya larut hanya sekitar 20% pada suhu kamar. Laktosa ini akan mengendap dari larutan sebagai Kristal yang keras seperti pasir, oleh karena itu harus dijaga jangan sampai kristal-kristal ini terbentuk pada pembuatan es krim dan susu kental. Laktosa mudah sekali diragikan oleh bakteri asam laktat menjadi asam laktat yang merupakan ciri khas susu yang diasamkan (Buckle, 2010).

Protein susu sapi dapat dikelompokkan ke dalam dua golongan, kasein, yaitu fosfoprotein dan meliputi 78 persen dari bobot total dan protein serum susu meliputi 17 % dari bobot total. Golongan kedua mencakup - laktoglobulin (8.5%), - laktalbumin (5.2%), globulin imun (1.7%) dan albumin serum. Selain itu, sekitar 5% dari bobot total susu merupakan senyawa yang mengandung nitrogen non protein (senyawa NNP) dan ini meliputi peptide dan asam amino. Susu mengandung juga enzim yang jumlahnya sangat sedikit, termasuk peroksidase, fosfatase asam, fosfatase basa, xantina oksidase dan amylase (deMan, 1997).

Karbohidrat khas susu ialah laktosa atau gula susu. Dengan sedikit kekecualian kecil, dapat dinyatakan bahwa laktosa adalah gula satu-satunya dalam semua spesies dan tidak terdapat ditempat lain. Laktosa merupakan komponen utama bgahan kering susu sapi, karena mencakup 50% dari bahan padat total. Kandungan laktosa susu sapi mempunyai rentang mulai dari 4.4 sampai 5.2 persen dengan rata-rata 48 persen dinyatakan sebagai laktosa tanair. Kandungan laktosa susu manusia lebih tinggi, sekitar 7.0 persen (deMan, 1997).

Laktosa merupakan disakarida yang terdiri atas D-glukosa dan D-galaktosa dan disebut secara kimia 4-o--D-galaktopiranosil-D-glukopiranosa (gambar 2.1). Laktosa dapat dihidrolisis dengan enzim -D-galaktosidase (lactase) dan dengan larutan encer asam kuat. Asam organic seperti asam sitrat, yang mudah menghidrolisis sukrosa tidak dapat menghidrolisis laktosa. Perbedaan ini merupakan dasar dari cara penentuan kedua gula itu adalah campuran.

Gambar 2.1 Laktosa

(deMan, 1997)Tabel 2.2 Beberapa sifat fisika kedua bentuk umum laktosa

Sifat -hidrat -anhidrida

Titik leleh1 2020C (dec) 2520 (dec)Rotasi jenis2 []20D +89.40 +350Kelarutan (g/100 ml)

Air pada 200C 8 55 Air pada 1000C 70 95Bobot jenis (200C) 1.54 1.59Bahang jenis 0.299 0.289Bahan pembakaran (cal/gm1-) 3761.6 3932.7

Sumber : Jennes dan Patton (1959)1Harga berubah bergantung pada laju pemanasan, -hidrat kehilangan air (1200C)

2Harga didasarkan pada anhidrat, kedua bentuk memutarotasi ke +55.40

Laktosa dapat berada dalam dua bentuk kristal, bentuk -hidrat dan bentuk - anhidrat dan dapat ditemukan dalam tahana amorf atau lirkaca. Bentuk yang paling umum ialah -hidrat (C12H22O11.H2O), yang dapat diperoleh dengan cara kristalisasi dari larutan jenuh pada suhu dibawah 93.50C. Jika kristalisasi dilakukan diatas 93.50, Kristal yang terbentuk ialah jenis anhidrat. Beberapa sifat kedua bentuk ini disenaraikan oleh Jennes dan Patton (1959) (tabel 2.2) (deMan, 1997).Kelarutan laktosa lebih kecil daripada kelarutan sebagian besar gula yang lain dan ini dapat menimbulkan masalah dalam sejumlah makanan yang mengandung laktosa. Jika susu dipekatkan 3:1, konsentrasi laktosa mendekati kelarutan akhirnya. Jika produk ini didinginkan atau jika di tambahi sukrosa, kristal -hidrat akan tumbuh. Kristal laktosa seperti itu sangat keras dan tajam dan jika dibiarkan tanpa gangguan dapat tumbuh menjadi besar, menimbulkan rasa seperti kerikil atau seperti pasir dalam mulut (deMan, 1997).

Warna dari sebuah larutan Iodine 0,1 N cukup intens sehingga iodine dapat bertindak sebagai indikator bagi dirinya sendiri. Iodine juga memberikan warna ungu atau violet yang intens untuk zat-zat pelarut seperti karbontetraklorida dan kloroform dan terkadang kondisi ini dipergunakan dalam mendeteksi titik akhir dari titrasi-titrasi. Namun demikian, suatu larutan (penyebaran koloida) dari kanji lebih umum digunakan, karena warna biru gelap dari kompleks iodine-kanji bertindak sebagai suatu tes yang amat sensitive untuk iodine. Mekanisme pembentukkan kompleks yang berwarna ini tidak diketahui, namun ada pemikiran bahwa molekul-molekul iodine tertahan dipermukaan -amylose, suatu konstituen dari kanji, larutan-larutan kanji dengan mudah di dekomposisi oleh bakteri dan biasanya sebuah substansi seperti asam borat ditamabahkan sebagai bahan pengawet (Underwood, 2002).Penyakit pada sapi biasanya mengacaukan keseimbangan unsur-unsur didalam susu. Biasanya terdapat kenaikan kandungan lemak dan garam dan penurunan kandungan laktosa (Buckle, 2010).

Susu digunakan sebagai sumber laktosa komersial yang diolah dari whey yang didapat sebagai hasil samping pada pembuatan keju. Laktosa dipakai sebagai salah satu unsur dalam makanan anak-anak pada masyarakat Barat dan produk obat-obatan. Laktosa dipakai sebagai bahan pengisi dalam pembuatan tablet-tablet dan kapsul obat untuk menghasilkan warna coklat dalam produk-produk bakery. Laktosa juga digunakan oleh pihak militer dalam pembuatan tirai-tirai asap, tanda-tanda dan lilin-lilin sasaran (Buckle, 2010).

Yogurt adalah produk susu yang mengalami fermentasi. Pembuatannya telah berevolusi dari pengalaman beberapa abad yang lalu dengan membiarkan susu yang tercemar secara alami menjadi masam pada suhu panas, mungkin sekitar 40-500C (Buckle, 2010).

Laktosa amorf atau laktosa lirkaca terbentuk jika larutan yang mengandung laktosa dikeringkan dengan cepat (deMan, 1997).

Laktosa adalah salah satu unsur yang penting sebagai sumber kalori yang terdapat dalam susu baik itu ASI, susu sapi murni maupun susu formula. ASI mengandung laktosa 6.8 7.3 %

2.3 Tabel Komposisi ASI

KomposisiASI Awal

(kolostrum)1-5 hrPeralihan

6-10 hrASI MaturBerkisar antara

Energi (kkal)

Laktosa (gr/100ml)

Lemak (gr/100 ml)

Protein (gr/100 ml)

Non Protein Nitrogen

Mineral (gr/100 ml)

Ig A (mg/100 ml)

Ig G (mg/100 ml)

Ig M (mg/100 ml)

Lisozim (mg/100 ml)

Laktoferin (mg/100 ml)57.006.5

2.9

1.195

-

0.3

335.9

5.9

17.1

14.2 16.4

420 52063.06.7

3.6

0.965

0.023

0.3

-

-

-

-

-65.07.0

3.8

1.324

0.042

0.2

119.62.9

2.9

24.3 27.5

250 - 27050.34 75.465.0 7.67

2.3 4.78

0.8 1.5

-

0.2 0.3

-

-

-

-

-

Sumber : Lacorence RA. Breast Feeding, a guide for the medical proffesion. USA : Mosby, 1980.

(Tehuteru, 1999). BAB 3

METODOLOGI PERCOBAAN

3.1 Alat dan Bahan

3.1.1 Alat Gelas ukur Labu ukur 100 ml Labu Erlenmeyer Neraca analitik Spatula Botol semprot Pembakar Bunsen Kaki tiga Kawat kasa Pipet tetes Corong kaca Buret Tiang statif Klem Stopwatch Korek api3.1.2 Bahan Sampel susu formula bayi Larutan K4Fe(CN)6 Larutan ZnSO4 30% Larutan NaOH 0.1 N Indikator PP Larutan K3Fe(CN)6 0.05 N Larutan ZnSO4 KI Larutan asam asetat pekat Larutan Na2S2O3 0.05 N Indikator amilum 1 % Aquades Kertas saring Kertas label Alumunium foil Vaselin Spiritus3.2 Prosedur percobaan

3.2.1 Sampel Dimasukkan 0.5 gram susu ke dalam labu takar 100 ml

Ditambahkan 50 ml aquades, 1 ml K4Fe(CN)6 dan 1 ml ZnSO4 30%

Ditambahkan aquades sampai tanda tera dan dihomogenkan

Didiamkan selama 15 menit kemudian disaring melalui kertas saring yang kering

Dimasukkan 5 ml filtrate bebas protein ke dalam labu Erlenmeyer 100 ml

Ditambahkan 15 ml aquades dan 100 ml larutan K3Fe(CN)6 0.05 N

Dipanaskan labu Erlenmeyer selama 20 menit kemudian didinginkan

Ditambahkan 10 ml larutan sulfat seng kalium Iodida dan 10 ml larutan asam asetat pekat

I2 yang dibebaskan dititrasi dengan Na2S2O3 sampai larutan berwarna kuning muda

Ditambahkan beberapa tetes larutan amilum 1% dan dilanjutkan titrasi sampai warna biru tua hilang

Dicatat volume titrasi sebagai nilai a3.2.2 Blanko

Dimasukkan 20 ml aquades dan 10 ml larutan K3Fe(CN)6 0.05 N ke dalam labu Erlenmeyer 100 ml Dipanaskan labu Erlenmeyer selama 20 menit kemudian didinginkan

Ditambahkan 10 ml larutan sulfat seng kalium Iodida dan 10 ml larutan asam asetat pekat

Dititrasi dengan Na2S2O3 sampai larutan berwarna kuning muda

Ditambahkan beberapa tetets larutan amilum 1% dan dilanjutkan titrasi sampai dengan warna biru tua hilang

Dicatat volume titrasi sebagai nilai b3.3Flowsheet 3.3.1 Sampel3.3.2 Blankov2BAB 4

HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Tabel Pengamatan

No.PerlakuanPengamatan

1. Dimasukkan 5 gr susu bubuk kedalam labu takar 100 mL, kemudian ditambahkan 50 mL aquades, 1 mL larutan K4Fe(CN)6 15% dan 1 mL larutan ZnSO4.

Ditambahkan 2 tetes indikator pp, lalu ditambahkan larutan NaOH 0,1 N sampai timbul warna merah tanah

Ditambahkan aquades sampai tanda tera

Dibiarkan selama 15 menit, lalu disaring melalui kertas saring yang kering

Dalam labu Erlenmeyer 100 mL, dimasukkan 5 mL filtrat bebas protein, 15 mL aquades dan 10 mL larutan K3Fe(CN)6 0,05 N

Dipanaskan labu Erlenmeyer itu dalam penangas yang mendidih selama 20 menit, lalu didinginkan

Setelah dingin, ditambahkan 10 mL larutan sulfat-seng-kalium iod dan 10 mL larutan asam asetat pekat (CH3COOH) (p)Kemudian larutan I2 yang dibebaskan dititrasi dengan larutan Na2S2O3 (Natrium Thio Sulfat) sampai larutan berwarna kuning muda

Ditambahkan beberapa tetes larutan amilum 1% dan dilanjutkan titrasi sampai warna biru hilang (Hasil A)

Dilakukan pada percobaan blanko dengan 20 mL aquades dan 10 mL larutan K3Fe(CN)6 0,05 N (seperti diatas) Hasil B. Susu bubuk putih kekuningan

Ditambah aquades larutan putih keruh

Ditambah K4Fe(CN)6 dan ZnSO4: larutan putih keruh, endapan putih

Ditambahkan indikator pp: larutan putih keruh, endapan putih

Ditambahkan NaOH 0,1 N: larutan merah lemah, endapan putih

Larutan bening

Larutan bening, terdapat endapan putih kemerahan.

Ditambahkan K3Fe(CN)6 0,05 N: larutan kuning jernih

Setelah dipanaskan larutan berwarna kuning jernih

Didinginkan: kuning keruh

Ditambahkan ZnSO4 + KI: larutan berwarna jingga, terdapat gumpalan kuning

Ditambahkan CH3COOH (p): larutan jingga pekat (merah jingga

Larutan berwarna kuning

Ditambahakan amilum: warna biru

Warna TAT: putih susu

Volume titran A = 16,3 mL

Blanko + K3Fe(CN)6 ( kuning jernih

ZnSO4-KI: larutan jingga dan gumpalan kuning

Ditambahkan CH3COOH (p) larutan warna jingga kecoklatan (merah jingga

Warna TAT: keabu-abuan

Volume titran B = 20,7 mL

Ditambahkan amilum larutan biru

4.2 Perhitungan

Jumlah K3Fe(CN)6 0.05 N yang direduksi oleh gula

Diketahui :

b = volume Na2S2O3 pada titrasi blanko = 20.7 / 2 = 10.35 ml

a = volume Na2S2O3 pada titrasi sampel = 16.3 / 2 = 8.15 ml

Ditanya :

ml K3Fe(CN)6 0.05 N yang tereduksi ?

Penyelesaian :

ml K3Fe(CN)6 0.05 N yang tereduksi = b a

= 10.35 8.15 ml

= 2.2 ml Jumlah mg laktosa dalam filtrat 100 ml

Diketahui :

x = mg laktosa ekuivalen dengan (b-a) = 4 mg

volume filtrat dititrasi = 5 ml

volume filtrat total

= 100 ml

Ditanya :

y = mg laktosa dalam filtrat 100 ml ?

Penyelesaian :

= 80 mg Kadar laktosa dalam 0.5 gr sampel susu

Diketahui :

y = jumlah laktosa dalam 100 ml filtrat = 163.8 mg

berat sampel = 0.5 g = 500 mg

Ditanya :

Kadar laktosa dalam % (b/b) .?Penyelesaian :

% laktosa = =

= 16 %

4.3 Reaksi4.3.1 Laktosa dengan Fe3+

4.3.2 Setengah reaksi Fe3+ + I-

Reduksi : Fe3+ ( Fe2+

Fe3+ + e ( Fe2+

Oksidasi : I- (I2

2I- (I2 2I-( I2 + 2e- Redoks : Fe3+ + e ( Fe2+ x2 2I-( I2 + 2e- x1

2Fe3+ + 2e ( 2Fe2+

2I-( I2 + 2e- Redoks : 2Fe3+ + 2I- ( 2Fe2+ + I2

4.3.3 Setengah reaksi Na2S2O3 dengan I2Reduksi : 3I2 ( 6 I-3I2 + 6e( 6 I-

Oksidasi :2S2O32- ( S4O62-

2S2O32- ( S4O62- + 2e-Redoks :3I2 + 6e( 6 I-

x 1

2S2O32- ( S4O62- + 2e-x 3

3I2 + 6e( 6 I-

6S2O32- ( 3S4O62- + 6e- Reaksi di Erlenmeyer :

3I2 + 6S2O32- ( 6 I- + 3S4O62-

Reaksi lengkap :

I2 + 2Na2S2O3

Na2S4O6 + NaI

(Basset, 1994)

4.3.4 Amilum dengan I2

4.4 Pembahasan

Laktosa merupakan sumber energy yang memasok hamper setengah keseluruhan kalori susu (35-45%). Disamping itu laktosa juga penting untuk absorpsi kalsium. Namun studi klinik membuktikan, mineralisasi tulang bayi yang mendapat formula susu sapi (mengandung laktosa) maupun formula kedelai (karbohidratnya terdiri dari polimer glukosa), tidak ada perbedaan. Laktosa (gula susu) hanya terdapat dalam susu dan terdiri atas satu unit glukosa dan satu unit galaktosa. Kadar laktosa pada susu ibu (ASI) 4,8 gram per 100 mL. Banyak orang terutama yang berkulit berwarna (termasuk orang Indonesia) tidak tahan terhadap susu sapi, karena kekurangan enzim lactase yang dibentuk didalam dinding usus dan diperlukan untuk pemecahan laktosa menjadi glukosa dan galaktosa. Kekurangan laktase ini menyebabkan ketidaktahanan terhadap laktosa. Laktosa yang tidak dicerna tidak dapat diserap dan tetap tinggal dalam saluran pencernaan. Hal ini mempengaruhi jenis mikroorganisme yang tumbuh, yang menyebabkan gejala kembung, kejang perut dan diare. Ketidaktahanan terhadap laktosa lebih banyak pada orang tua.

Ada beberapa terminologi yang perlu dipahami sehubung dengan gangguan absorpsi laktosa yaitu:

Defisiensi laktase: rendah (atau tidak ada) aktivitas laktase pada pemeriksaan hasil absorpsi mukosa usus halus.

Malabsorpsi laktosa: ketidakmampuan usus halus mengabsorpsi laktosa yang dibuktikan dengan pemeriksaan yang sesuai uji laktosa, uji hidrogen pemanasan.

Intoleransi laktosa: munculnya gejala-gejala klinis setelah makan/minum bahan yang mengandung laktosa, yang gejalanya sebagai berikut; mencret, mual, muntah, perut kembung dan sakit perut.

Laktosa (C12H22O11) adalah gula yang diperoleh dari susu dalam bentuk anhidrat atau mengandung satu molekul air anhidrat. Berikut sifat-sifat fisika kimia laktosa.

Sifat-Sifat Fisika Kimia LaktosaKeterangan

BM

Kelarutan

Kejernihan Serbuk atau massa hablur, keras putih atau krem, tidak berbau atau rasa sedikit manis. Stabil diudara tetapi mudah menyerap bau

Mudah (pelan-pelan) larut dalam air dan lebih mudah larut dalam air mendidih, sangat sukar larut dalam etanol, tidak larut dalam kkloroform dan dalam eter.

(Larutan 3 g dalam 100 mL air mendidih), terbentuk larutan jernih tidak berwarna dan tidak berbau.

Laktosa dengan hidrolisis akan menghasilkan D-galaktosa dan D-glukosa ikatan glukosa dan galaktosa terjadi antara atom karbon nomor 1 pada galaktosa dan atom karbon nomor 4 pada glukosa. Laktosa mempunyai sifat mereduksi dan mutarotasi. Berikut ini gambar struktur reaksinya:

Nilai biologi protein ASI lebih tinggi ketimbang protein lain. Kebanyakan susu formula dirancang untuk memenuhi kebutuhan sebesar 2,3 g/100 kkal (bandingkan dengan 1,6gr/100 kkal). Takaran yang dianjurkan adalah sebesar 1,8 gr/100 kkal dengan PER setara dengan Casein (takaran minimum). Asupan protein, yang menampilkan gejala seperti:

1) Detargi

2) Hiperammonia

3) Dehidrasi, dan

4) Diare

Karbohidrat dalam ASI, ASI mengandung karbohidrat yang relatif lebih tinggi jika dibandingkan dengan ASS (6,5-7 gram %). Karbohidrat yang utama terdapat dalam ASI adalah laktosa. Kadar laktosa yang tinggi ini sangat menguntungkan karena laktosa ini oleh fermentasi akan diubah menjadi asam didalam usus bayi. Dengan suasana asam didalam usus bayi ini memberikan beberapa keuntungan yaitu sebagai berikut:

Sebagai penghambat pertumbuhan bakteri yang patologis

Memacu pertumbuhan mikroorganisme yang memproduksi asam organic dan mensintesis vitamin.

Memudahkan terjadinya pengendapan Ca-Caseinat

Memudahkan absorpsi dari mineral misalnya kalsium, fosfor, dan magnesium.

Mutu protein bergantung pada kemudahannya untuk dicerna dan diserap serta komposisi asam amino didalamnya. Tabel Perbandingan Unsur Protein dalam ASI dan susu sapi.

UnsurASISusu Sapi (gr/dl)

Casein

Whey

Lactoferin

Lysozyme

Albumin

IgA

Peroxidase

Bifidur factor

Nanprotein Nitrogen0,2

0,7

0,26

0,17

0

0,05

0,05

0,10

Sedikit

Sedikit

0,202,7

0,6

0,11

Sedikit

0,36

Sedikit

0,04

0,03

((0,03

Adapun fungsi perlakuan pada percobaan penentuan kadar laktosa dalam susu secara volumetri adalah:

Ditimbang susu (sampel) yaitu untuk mengukur jumlah sampel susu yang akan digunakan agar hasilnya akurat.

Didiamkan 15 menit agar endapan putih kemerahan (merah lemah) dapat dillihat dan kemudian agar larutannya terpisah dengan endapannya.

Disaring yaitu untuk memisahkan filtrat dan residunya. Filtrat yang didapat kemudian akan diambil sebanyak 5 mL.

Dititrasi dengan Na2S2O3: yaitu untuk mengetahui jumlah iod yang dipakai pada saat penitrasian dan untuk menentukan TAT (Titik Akhir Titrasi).

Dipanaskan yaituu untuk mempekatkan larutan blanko (20 mL aquades, 10 mL K3Fe(CN)6 0,05 N).

Sampel susu yang diencerkan untuk mengurangi konsentrasi pada sampel tersebut, agar pada saat penitrasian tidak banyak larutan Na2S2O3 (Natrium Thio Sulfat) yang banyak digunakan.

Penambahan indikator pp untuk membuat larutan sensitive agar terlihat perubahan warnanya.

Adapun fungsi bahan/reagen yang digunakan dalam percobaan inni yaitu:

Sampel susu Childkid: sebagai sampel yang akan ditentukan kadar laktosanya dalam percobaan ini.

Blanko sebagai larutan pembanding untuk menentukan banyaknya iod yang digunakan. Larutan K4Fe(CN)6 15% untuk mengendapkan protein dalam susu dan laktosa yang diperoleh ditetapkan secara iodometri.

Larutan ZnSO4 30% untuk mengendapkan protein dalam susu dan laktosa yang diperoleh ditetapkan secara iodometri.

Indikator PP: sebagai pereaksi sensitive agar dapat diketahui perubahan warna yang dihasilkan .

Larutan NaOH 0,1 N untuk membuat suasana netral atau sedikit basa pada larutan.

Larutan K3Fe(CN)6 0,05 N sebagai larutan pereaksi pada percobaan ini dimana laktosa yang merupakan gula reduksi pada larutan akan mereduksi Fe3+ pada larutan K3Fe(CN)6 menjadi Fe2+.

Larutan seng-sulfat-kalium iod sebagai penyedia iodida yang ditambahkan secara berlebih sehingga ion Fe2+ bereaksi dengan I- dan membentuk FeI2 yang mudah terurai dalam suasana asam

Larutan asam asetat (CH3COOH) pekat sebagai katalis yang akan mempercepat reaksi berlangsung.

Larutan I2 sebagai membebaskan larutan Na2S2O3 sampai larutan berwarna kuning muda, dimana menyebabkan larutan I2 tereduksi sedangkan larutan Na2S2O3 teroksidasi perubahan warna terjadi warna jingga pekat dengan endapan merah jingga ketika belum dititrasi menjadi kuning muda dan setelah dititrasi larutan berwarna kuning.

Larutan Na2S2O3 (Natrium thiosulfat) sebagai larutan yang menandakan TAT telah tercapai.

Larutan amilum 1% sebagai larutan yang menandakan TAT telah tercapai dengan volume.

Kertas saring untuk menyaring sampel susu dan memisahkannya dari residu sampel susu tersebut.

Sunlight untuk mencuci alat-alat yang dipakai/digunakan.

Aquades yaitu sebagai larutan pengencer, juga sebagai larutan untuk memanaskan blanko pada hotplate, juga sebagai cairan yang membersihkan alat-alat praktikum.

Larutan sulfat seng kalium iod mengandung NaCl, ZnSO4 & KI yang ketiganya berperan sebagai berikut:

NaCl yaitu untuk mengatur keadaan pH menjadi netral.

KI yaitu pada garam ini Iodium (I2) yang sedikit larut dalam air tetap mudah larut dalam larutan yang mengandung ion iodida, I- (bereaksi dengan membentuk kompleks ion triiodida I3-).

ZnSO4 yaitu mengikat garam KI, agar ion I- tidak mudah teroksidasi oleh O2 yang dipercepat reaksinya dengan suasana asam/adanya O nya sebelum direaksikan. Membentuk kompleks dengan K4Fe(CN)6 jika masih tersisa dalam filtrate bebas protein, sehingga mengakibatkan terbentuk kompleks kuning kecoklatan seperti gel juga mengikat pengotor lainnya. Plastik dan karet gelang untuk mengikat dan menutup rapat labu Erlenmeyer yang didalamnya berisikan larutan sampel susu dan blanko yang kemudian dititrasi, agar Iodnya tidak menguap karena mudah rusak konsentrasinya oleh udara.

Vaselin untuk melumas keran pembuka/penutup buret agar tidak macet (mudah dibuka dan ditutup).

Alumunium foil: untuk menutup beaker glass yang berisi sampel susu bubuk agar tidak tumpah.

Serbet untuk mengangkat sampel blanko dari hot plate/ penangas air.

Adapun fungsi alat dalam percobaan penentuan kadar laktosa dalam percobaan ini, yaitu:

Hot plate: untuk memanaskan blanko yang diletakkan di dalam labu Erlenmeyer yang dimasukkan ke dalam gelas beaker yang berisi air mendidih.

Buret: sebagai tempat larutan Na2S2O3 (Natrium Thio Sulfat) diletakkan untuk mentitrasi sampel susu dan blanko.

Klem dan tiang statif: sebagai tempat buret diletakkan dalam proses penitrasian.

Beaker glass sebagai tempat untuk meletakkan sampel susu bubuk pada saat penimbangan dengan neraca analit, juga sebagai tempat meletakkan aquades panas yang nantinya blanko diletakkan didalamnya.

Neraca analitik untuk menimbang sampel susu bubuk yang akan digunakan.

Pipet tetes untuk mengambil larutan NaOH 0,1 N; larutan K4Fe(CN)6 15%; ZnSO4 30%; K3Fe(CN)6 0,05 N; CH3COOH pekat; amilum 1%; I2; indikator pp dan aquades pada percobaan ini.

Labu ukur untuk tempat sampel susu bubuk diletakkan, yang telah diberi larutan K4Fe(CN)6 15%, ZnSO4 30%, ind. pp dan larutan NaOH 0,1 N sebagai sampel A.

Labu Erlenmeyer sebagai tempat filtrat sampel susu bubuk dan blanko yang akan dititrasi dengan menggunakan larutan Na2S2O3 (Natrium Thio Sulfat).

Corong kaca untuk menyaring larutan susu yang akan diambil/dipisahkan filtrat dan residunya dalam percobaan ini.

Sikat tabung untuk membersihkan labu ukur dan labu ukur setelah pemakaian agar senyawa-senyawa yang masih menempel pada kedua tempat tersebut hilang.

Botol semprot untuk meletakkan aquades, agar memudahkan pada saat pemipetan untuk memenuhi larutan pada labu ukur agar hasilnya akurat.

Gelas ukur untuk mengukur setiap larutan/reagen yang digunakan agar hasilnya pas/tepat.

Adapun faktor kesalahan yang terjadi selama proses percobaan ini, yaitu:

Kurang tepatnya pada saat penimbangan sampel susu bubuk, karena terburu-buru hingga hasilnya kurang akurat.

Kurang tepat dan teliti pada saat pemipetan larutan/reagen yang digunakan dalam percobaan ini.

Kurang tepat dan akurat pada saat melarutkan sampel susu bubuk di dalam labu ukur, sehingga aquades melebihi batas tanda tera.

Kurang teliti dan akurat pada saat penintrasian dan pembacaan larutan yang digunakan.

Kurang teliti pada saat pemanasan waktunya terlalu lama.

Pada saat penitrasian, labu Erlenmeyer yang berisi sampel susu dan blanko tidak ditutup rapat dengan plastik karet, sehingga tidak dapat menghasilkan hasil yang diinginkan.

Pada saat penyaringan residu terikut dengan filtrate sehingga hasil kurang memuaskan dan akurat.

Adapun hasil percobaan yang didapatkan dari praktikum/percobaan penentuan kadar laktosa dalam susu secara volumetrik yaitu dilakukan 2 tahap, tahap pertama membuat sampel A (sampel susu bubuk Chilkid) dan blanko B. Pada sampel susu bubuk langkah pertama yaitu dilakukan penimbangan sampel sebanyak 5 gr dengan karakteristik berwarna putih kekuningan. Kemudian dimasukkan kedalam labu takar 100 mL dan selanjutnya ditambahkan larutan K4Fe(CN)6 15% yang hasilnya larutan putih keruh, lalu ditambahkan larutan ZnSO4 30% sebanyak 1 mL yang hasilnya putih keruh dan terdapat endapan putih. Pada langkah ini larutan K4Fe(CN)6 15% sebagai pengikat protein dalam sampel urin.

Pada percobaan ini adalah menentukan kadar laktosa dalam susu secara volumetri dengan metode Gohr. Dimana percobaan ini berdasarkan sifat laktosa sebagai gula reduksi, sehingga secara kuantitatif dapat ditentukan kadarnya dengan menggunakan K3Fe (CN)6. Prinsipnya laktosa dalam susu dipisahkan dari kandungan protein susu dengan menambahkan larutan K4Fe(CN)6 dan larutan ZnSO4 untuk mengendapkan protein dalam susu, dan laktosa yang diperoleh ditetapkan secara iodometri.

Pertama-tama ditimbang dengan tepat sebanyak 0,5 gram susu child-kid dengan menggunakan neraca analitik. Kemudian dimasukan susu yang berupa serbuk halus, berwarna putih tersebut kedalam labu takar 100 mL. Susu disini berfungsi sebagai sampel yang ingin ditentukan kadar laktosanya. Kemudian ditambahkan 50 mL aquades fungsi dari penambahan aquades disini adalah untuk melarutkan susu tersebut. Diperoleh larutan berwarna putih dengan sedikit endapan tidak larut. Endapan disini terbentuk karena susu akan larut sempurna dalam air panas. Kemudian setelah itu ditambahkan 1 mL larutan K4Fe(CN)6 15 % fungsi dari penambahan K4Fe(CN)6 akan membentuk komplek yang stabil. Kemudian ditambahkan 1 mL ZnSO4 30% disini sama dengan K4Fe(CN)6 15% yaitu untuk mengendapkan protein dan lebih menstabilkan endapan yang tebentuk dimana protein akan mengendapkan pada saat penambahan logam. Salah satunya logam Zn yang terkandung dalam ZnSO4 dimana terbentuk larutan putih dengan sedikit endapan tidak larut.

Selanjutnya pada larutan ditambahkan 2 tetes indikator pp. kemudian ditambahkan larutan NaOH 0,1 N sampai timbul warna merah lemah, fungsi dan penambahan larutan NaOH disini adalah untuk membuat suasana netral atau sedikit basa pada larutan. Itu sebabnya indikator ditambahkan terlebih dahulu, agar penambahan NaOH tidak terlalu berlebih karena akan mengakibatkan larutan bersifat terlalu basa, dimana terbentuk larutan bersifat sedikit basa. Selanjutnya ditambahkan aquades hingga tanda tera, fungsi penambahan aquades disini adalah untuk untuk melarutkan seluruh laktosa yang terkandung pada suhu dan terbentuk larutan berwarna merah lemah kemudian dibiarkan selama 15 menit, fungsi dari pendiaman disini adalah untuk memberikan waktu pada larutan agar protein dapat terendap seluruhnya dimana terbentuk 2 fase larutan, dimana fase atas berupa larutan berwarna merah lemah dan fase bawah berupa endapan berwarna putih. Kemudian disaring melalui kertas saring yang kering. Fungsi dari penyaringan disini berfungsi untuk memisahkan antara filtrat bebas protein dengan residu berupa endapan putih dimana diperoleh filtrat berupa larutan bening dan residu berupa endapan/gumpalan putih.

Kemudian dimasukan 5 mL filtrat bebas protein kedalam labu erlenmeyer, filtrat bebas protein berfungsi sebagai larutan yang akan dianalisis kadar laktosanya dikatakan bebas protein karena protein yang terkandung didalamnya telah diendapkan dan terpisah dari larutan yang dianggap bahwa larutan tersebut bebas protein. Mengapa protein dalam sampel harus dipisahkan kerena yang akan dianalisa adalah laktosa pada sampel, sehingga keberadaan protein pada sampel dapat menggangu proses analisa. Kemudian ditambahkan 15 mL aquades, fungsi dari penambahan aquades disini adalah untuk mengencerkan larutan agar voluume titrat yang digunakan tidak terlalu banyak (efisien). Karena pengenceran akan menurunkan konsentrasi larutan selain itu juga mempercepat proses titrasi.

Selanjutnya filtrat bebas protein yang telah diencerkan tersebut dapat ditambahkan larutan K3Fe(CN)6 0,05 N, fungsi dari penambahan larutan K3Fe(CN)6 0,05 N disini adalah sebagaipereaksi pada percobaan ini dimana laktosa yang merupakan gula reduksi pada larutan akan mereduksi Fe3+ pada larutan K3Fe(CN)6 menjadi Fe2+ sementara laktosa sendiri teroksidasi menjadi asam laktat kemudian dipanaskan larutan tersebut dalam penangas air yang mendidih selama 20 menit. Fungsi dari pemanasan adalah untuk mempercepat reaksi yang terjadi, dimana terjadi reaksi reduksi oleh laktosa yang menyebabkan Fe3+ menjadi Fe2+ dan reaksi oksidasi yaitu laktosa menjadi asam laktat, dimana terbentuk larutan kuning keruh dimana pada proses pemanasan ini kemungkinan terjadi reaksi hidrolisis dimana laktosa terhidrolisis menjadi glukosa dan galaktosa. Setelah itu didinginkan larutan tersebut pada suhu ruang. Pendinginan disini berfungsi untuk menstabilkan larutan dimana larutan akan stabil pada suhu ruang. Fungsi dari pendinginan disini juga berfungsi agar tidak merusak reagen yang akan ditambahkan, selanjutnaya ditambahkan larutan 10 mL sulfat-seng-kalium iod. Larutan ini terdiri dari dua larutan yaitu ZnSO4 dan KI. Fungsi dari KI disini adalah sebagai penyedia ion iodida yang ditambahkan secara berlebih sehingga ion Fe2+ bereaksi dengan I( dan membentuk FeI2 yang mudah terurai dalam suasana asam yang melepas I2 yang dititrasi kembali dengan Na2S2O3. Sedangkan fungsi dari ZnSO4 adalah mendorong kekuatan iod. Kemudian ditambahkan 10 mL larutan CH3COOH pekat sebagai katalis yang akan mempercepat reaksi berlangsung. Kemudian dititrasi I2 yang dibebaskan dengan Na2S2O3 sampai larutan berwarna kuning muda dimana menyebabkan larutan I2 tereduksi sedangkan larutan Na2S2O3 teroksidasi, perubahan warna terjadi dari warna jingga pekat dengan endapan merah jingga ketika belum dititrasi menjadi kuning muda dan setelah dititrasi larutan berwarna kuning dihentikan dan ditambahkan beberapa tetes larutan amilum 1% dan terjadi perubahan warna menjadi warna biru, warna biru ini hasil reaksi dari amilum dengan I2 bebas dalam larutan. Kemudian dititrasi kembali hingga warna biru tua hilang dan diperoleh larutan putih keruh yang menandakan TAT telah tercapai dengan volume titrasi 16,3 mL penambahan amilum dilakukan saat mendekati TAT atau ketika iod sudah tinggal sedikit, karena apabila amilum ditambahkan di awal maka amilum akan bereaksi membentuk kompleks berwarna biru yang kuat sehingga sulit untuk melepaskan iod kembali yang berakibat warna biru sulit sekali lenyap/hilang sehingga TAT (Titik Akhir Titrasi) sulit teramati.BAB 5

PENUTUP

5.1 Kesimpulan

Volume Na2S2O3 yang diperlukan untuk menitrasi sampel susu formula bayi yaitu sebesar 16.5 ml sedangkan untuk blanko diperlukan volume Na2S2O3 sebesar 20.7 ml.

Berdasarkan hasil percobaan jumlah volume K3Fe(CN)6 0.05 N yang tereduksi oleh gula reduksi (laktosa) yang terkandung pada sampel susu formula bayi (Child-kid) adalah sebesar 4.4 ml.

Berdasarkan hasil percobaan diperoleh kadar laktosa dalam 0.5 gr sampel susu formula bayi (Child-kid) adalah sebesar 32.76%.

5.2 Saran

Sebaiknya pada percobaan selanjutnya dapat pula digunakan metode lain dalam menentukan kadar laktosa seperti metode asam mukat dan metode luff schroll untuk dilihat perbandingan hasil.

DAFTAR PUSTAKA

Buckle, K.A.et.al. 2010. Ilmu Pangan. Jakarta : UI-PressDeMan, John M. 1997. Kimia Makanan Edisi Kedua. Bandung : ITBFessenden, Ralph.S dan Joan.S Fessenden. 1982. Kimia Organik Edisi Ketiga Jilid 2. Jakarta : ErlanggaPoedjiadi, Anna. 2007. Dasar-Dasar Biokimia. Jakarta : UI-PressTehuteru, Edi Setiawan. 1999. Malabsorpsi Laktosa Pada Anak. Jurnal Kedokteran Trisakti. Vol 18. No.39.139Toha, Abdul Hamid A. 2005. Biokimia : Metabolisme Biomolekul. Bandung : AlfabetaUnderwood, A.L. 2002. Analisis Kimia Kuantitatif. Jakarta : Erlangga

0,5 gr sampel susu bayi

Susu bubuk putih kekuningan

Larutan putih dan endapan putih

Larutan putih dan endapan putih

Dimasukkan ke dalam labu takar 100 ml

Ditambahkan 50 ml aquades

Ditambahkan 1 ml K3Fe(CN)6 dan 1 ml ZnSO4 30%

Ditambahkan aquades hingga tanda tera

Dihomogenkan

Didiamkan selama 15 menit

Residu, endapan putih

dibuang

Filtrat bening bebas protein sebanyak 5 ml

Dimasukkan ke dalam labu Erlenmeyer

Ditambahkan 15 ml aquades dan 10 ml larutan K3Fe(CN)6 0.05 N

Larutan bening jernih

Dipanaskan selama 20 menit

Didinginkan

Disaring

Larutan kuning jernih

Ditambahkan 10 ml ZnSO4 KI

Ditambahkan 10 ml asam asetat pekat

Dititrasi dengan Na2S2O3 0.05 N

Larutan orange

Larutan kuning muda

Ditambahkan beberapa tetes indicator amilum 1%

Larutan biru tua

Larutan putih susu (TAT)

Dilanjutkan titrasi dengan Na2S2O3 0.05 N

a = 16.3 ml

Dicatat volume titrasi sebagai nilai a

Larutan putih keabu-abuan (TAT)

10 ml K3Fe(CN)6 0.05 N

Kuning jernih

Dicatat volume titrasi sebagai nilai b

Dilanjutkan titrasi dengan Na2S2O3 0.05 N

Ditambahkan beberapa tetes indikator amilum 1 %

Larutan kuning muda

Dititrasi dengan Na2S2O3 0.05 N

Ditambahkan 10 ml larutan ZnSO4 KI

Ditambahkan 10 ml asam asetat pekat

Larutan orange

Larutan kuning jernih

Dipanaskan selama 20 menit

Didinginkan

Dimasukkan ke dalam labu Erlenmeyer

b = 20.7 ml

Larutan biru tua

Larutan kuning jernih

20 ml aquades bening

88

72

67

56

59

_1461129380.unknown

_1461129381.unknown

_1461129382.unknown

_1461129378.unknown