15

BAB IPENDAHULUAN

1.1 Pendahuluan Ilmu kedokteran forensik merupakan salah satu cabang spesialistik dari ilmu kedokteran, yang mempelajari pemanfaatan ilmu kedokteran untuk kepentingan penegakan hukum serta keadilan. Ilmu ini dimanfaatkan dalam membuat terangnya perkara pidana yang menimbulkan korban manusia, baik korban hidup maupun korban mati.1Salah satu cabang ilmu kedokteran forensik yang cukup penting dalam penyelidikan suatu kasus adalah forensik molekuler. Forensik molekuler ini baru berkembang dalam dua dekade terakhir, yang memanfaatkan pengetahuan kedokteran dan biologi pada tingkat molekul atau DNA (Deoxyribonucleic Acid).1 DNA (Deoxyribonucleic Acid) adalah asam nukleat yang mengandung materi genetik dan berfungsi mengatur perkembangan biologis seluruh kehidupan manusia. Dalam bidang forensik, DNA memiliki peranan penting dalam penyampai informasi genetik dan dapat menunjang dalam kasus forensik seperti identifikasi personal pada kasus mayat tak di kenal, kasus pembunuhan, perkosaan serta berbagai analisis keayahan atau penentuan kekerabatan seseorang yang dilakukan melalui tes paternitas.1,2Tes paternitas adalah tes DNA untuk menentukan apakah seorang pria adalah ayah biologis dari seorang anak, tes paternitas akan membandingkan pola DNA anak dengan terduga ayah untuk memeriksa bukti pewarisan DNA yang menunjukkan kepastian adanya hubungan biologis.3,4

Pengelompokan sistem yang digunakan dalam tes paternitas dibagi menjadi empat, yaitu:a. Sistem sel darah merah terdiri dari sistem ABO, Rhesus (Rh), MNS, Kell (K), Duffy (Fy), Kidd (Jk), Lutheran.b. Sistem biokimia meliputi pemeriksaan plasma protein dan enzim sel darah merah terdiri dari haptoglobin (Hp), phosphoglucomutase (PGM), Esterase D (EsD), erythrocyte acid phosphatase (EAP), glyoxalase (GLO), adenokinase deaminase (ADA), adenylate kinase (AK), Group spesific component (GC), Gm dan KM.c. Human Leucocyte Antigen (HLA) yang mengidentifikasi antigen pada leukosit.d. DNA profilingPada prinsipnya dalam penyelesaian kasus disputed paternity (ragu ayah) semakin banyak sistem yang diperiksa, maka peluang untuk memastikan bukan ayah akan semakin besar. Dengan pemeriksaan semua serologi forensik seperti sel darah merah, biokimia, dan HLA kurang akurat jika dibandingkan dengan pemeriksaan DNA yang memiliki peluang memastikan status keayahan sebesar 99,9%. Tes DNA ini didasarkan pada analisis informasi genetik yang sangat spesifik dalam membedakan ciri setiap individu sehingga dapat menentukan identitas seseorang hampir 100% pasti sebagai ayah biologis si anak.3,4Dengan menetapkan formula indeks paternitas dari Charles H Brenner, sangat cocok untuk menentukan hubungan kekerabatan berdasarkan profil DNA. Pencocokan informasi kekerabatan dengan berdasarkan profil DNA umumnya ilmiah, jelas, dan sangat kuat serta bila ada yang cocok dengan bukti DNA, orang akan ingin tahu seberapa besar kemungkinan ada kecocokan antara terduga ayah dan anak, oleh karena itu beberapa masalah seperti penentuan kekerabatan dan campuran DNA membutuhkan analisis statistik yang kompleks.Berdasarkan pada kemampuan profil DNA untuk menentukan garis keturunan seseorang dapat disimpulkan sangatlah cocok menerapkan rumus statistik probabilitas untuk mendapatkan persentase kecocokan profil DNA antara terduga ayah dan anak misalnya pada contoh kasus hubungan kekerabatan pada kasus tertukarnya bayi, kasus bayi tabung, missing person, DVI (disaster victim identification) kasus anak angkat dan lain-lain dapat diatasi dengan cepat.1.2 Rumusan MasalahBerdasarkan latar belakang di atas, maka adapun rumusan masalah dari referat ini adalah:1. Apa yang dimaksud dengan DNA (Deoxyribo Nucleic Acid)?2. Bagaimana struktur DNA (Deoxyribo Nucleic Acid)?3. Apa saja tujuan dari pemeriksaan DNA (Deoxyribo Nucleic Acid)?4. Apa saja bahan atau sampel untuk pemeriksaan DNA (Deoxyribo Nucleic Acid)?5. Apa saja teknik pemeriksaan DNA (Deoxyribo Nucleic Acid)?6. Apa yang dimaksud dengan tes paternitas?7. Apa indikasi dilakukannya tes paternitas?8. Bagaimana proses analisis hasil pemeriksaan DNA untuk tes paternitas?

1.3 Tujuan Penulisan1.3.1Tujuan UmumMengetahui teknik pemeriksaan DNA paternitas yang dilakukan dalam analisis keayahan.1.3.2 Tujuan KhususAdapun tujuan khusus yang lebih spesifik tentang penulisan referat mengenai pemeriksaan DNA paternitas ini adalah sebagai berikut:1. Untuk memastikan identitas ayah biologis seseorang anak yang tidak diketahui atau belum jelas.2. Untuk mengumpulkan dan memeriksa tanda bukti untuk penentuan identitas ayah biologis seorang anak.3. Membuat laporan tertulis yang objektif berdasarkan fakta dalam bentuk visum et repertum.

1.4 Manfaat Penulisan Adapun manfaat dari penulisan referat ini adalah :1. Memenuhi sebagian persyaratan menempuh ujian kepaniteraan klinik di bagian ilmu kedokteran forensik dan medikolegal.2. Menambah pengetahuan penulis dan pembaca mengenai pemeriksaan DNA paternitas.

BAB IITINJAUAN PUSTAKA2.1.1 Definisi DNADNA adalah asam nukleat yang mengandung materi genetik dan berfungsi mengatur perkembangan biologis seluruh kehidupan secara biologis. DNA memiliki struktur pilinan utas ganda yang terdiri dari komponen gula pentosa (deoksiribosa), gugus fosfat dan pasangan basa. Pasangan basa pada DNA terdiri dari dua macam yaitu basa pirin dan pirimidin. Basa pirin terdiri atas adenin (A) dan guanin (G) yang memiliki struktur cincin ganda sedangkan basa pirimidin terdiri atas sitosin dan timin yang mempunyai struktur cincin tunggal. Adenin selalu berpasangan dengan timin dan sitosin selalu berpasangan dengan berpasangan dengan guanin, kedua basa pada masing-masing pasangan dihubungkan dengan ikatan hidrogen. Kedua rantai berjalan memilin satu sama lain dalam rantai helix ganda. DNA sebagai pembawa keterangan genetik dalam sel mempunyai unit esensial berupa kodon yaitu yang merupakan triplet urutan basa dan masing-masing triplet mengkodekan sebuah asam amino tertentu. Kode genetik hanya menentukan struktur protein primer. Protein ini dapat merupakan komponen struktural makromolekul atau enzim yang mengendalikan sintesis non protein.5Di dalam setiap sel berinti terdapat dua jenis DNA yaitu core DNA (c-DNA) yang terdapat di dalam inti sel dan mitokondria DNA (mt-DNA) yang terdapat dalam organel mitokondria. c-DNA merupakan materi genetik yang membawa sifat individu dan diturunkan dari ayah dan ibu menurut hukum Mendel. Berdasarkan pola pewarisan ini maka pemeriksaan c-DNA dapat digunakan untuk mencari hubungan anak-ibu maupun anak-bapak. DNA mitokondria (mt-DNA) merupakan materi genetik yang membawa kode genetik dari berbagai enzim dan protein yang berkaitan dengan proses pembentukan dan penuaan. Berbeda dengan c-DNA, mt-DNA berbentuk lingkaran ganda yang hanya diturunkan dari ibu kepada anak, sehingga pemeriksaan mt-DNA hanya dapat digunakan untuk mencari hubungan anak-ibu. Dalam forensik yang dimaksud dengan pemeriksaan DNA umumnya merujuk pada pemeriksaan c-DNA yang penggunannya lebih luas.52.2 Struktur DNADNA adalah polimer, lebih tepatnya, suatu himpunan dua polimer yang terbelit. Tiap tiap monomer yang menyusun polimer ini adalah nukleotida yang terdiri dari elemen: fosfat, gula dan basa. Gula dan fosfat dari seluruh nukleotida seluruhnya sama, tetapi nukleotida dapat dibedakan dengan meninjau komponen basanya menjadi empat tipe, termasuk dua kategori, purin: Adenin (A), Guanin (G), yang memiliki dua siklus organik dan pirimidin: Cytosine (C) dan Thymine (T) yang memiliki satu siklus organik.Ada tiga struktur DNA yang dikenal selama ini. Stuktur struktur DNA tersebut adalah sebagai berikut:51. Struktur primerDNA tersusun dari monomer monomer nukleotida. Setiap nukleotida terdiri dari satu basa nitrogen berupa senyawa purin atau pirimidin, satu gula pentosa berupa 2-deoksi-D-ribosa dalam bentuk furanosa, dan satu molekul fosfat. Penulisan urutan basa dimulai dari kiri yaitu ujung 5 bebas (tidak terikat nukleotida lain) menuju ujung dengan gugus 3 hidroksil bebas atau dengan arah 53.2. Struktur sekunderSalah satu sifat biokimia DNA yang menentukan fungsi nya sebagai pembawa informasi genetik adalah komposisi basa penyusun. Pada tahun 1949 1953, Edwin Chargaff menggunakan metode kromatografi untuk pemisahan dan analisis kuantitatif keempat basa DNA, yang diisolasi dari berbagai organisme. Kesimpulan yang diambil dari data yang terkumpul adalah sebagai berikut:a. Komposisi basa DNA bervariasi antara spesies yang satu dengan spesies yang lain.b. Sampel DNA yang diisolasi dari berbagai jaringan pada spesies yang sama mempunyai komposisi basa yang sama.c. Komposisi DNA pada suatu spesies tidak berubah oleh perubahan usia, keadaan nutrisi maupun perubahan lingkungan.d. Hampir semua DNA yang diteliti mempunyai jumlah residu adenin yang sama dengan jumlah residu timin (A=T), dan jumlah residu guanin yang sama dengan jumlah residu sitosin (G=C) maka A+G = C+T, yang disebut aturan Charrgaff.e. DNA yang diekstraksi dari spesies spesies dengan hubungan kekerabatan yang dekat mempunyai komposisi basa yang hampir sama.Pada tahun 1953, James D. Watson dan Francis H.C. Crick berhasil menguraikan struktur sekunder DNA yang berbentuk heliks ganda melalui analisis pola difraksi sinar X dan membangun model strukturnya (Darnell, et al. Dalam T. Milanda, 1994). Heliks ganda tersebut tersusun dari dua untai polinukleotida secara antiparalel (arah 53 saling berlawanan), berputar ke kanan dan melingkar suatu sumbu. Unit gula fosfat berada di luar molekul DNA dengan basa basa komplenter yang berpasangan di dalam molekul. Ikatan hidrogen di antara pasangan basa memegangi kedua untai heliks ganda tersebut (Willbraham and Matta dalam T.Milanda, 1994). Kedua untai melingkar sedemikian rupa sehingga keduanya tidak dapat dipisahkan kembali bila putaran masing masing untai dibuka.(a) StrukturprimerDNA (b) StruktursekunderDNAGambar1StrukturDNA(PrentisSteve,1990)

Jarak diantara kedua untai hanya memungkinkan pemasangan basa purin (lebih besar) dengan basa pirimidin (lebih kecil). Adenin berpasangan dengan timin membentuk dua ikatan hidrogen sedangkan guanin berpasangan dengan sitosin membentuk tiga ikatan hidrogen.Dua ikatan glikosidik yang mengikat pasangan basa pada cincin gula, tidak persis berhadapan. Akibatnya, jarak antara unit unit gula fosfat yang berhadapan sepanjang heliks ganda tidak sama dan membentuk celah antara yang berbeda, yaitu celah mayor dan celah minor (Marks, et al., 1996; Robert K. Murray, et al., 2000)3. Struktur TersierKebanyakan DNA virus dan DNA mitokondria merupakan molekul lingkar. Konformasi ini terjadi karena kedua untai polinukleotida membentuk struktur tertutup yang tidak berujung. Molekul DNA lingkar tertutup yang diisolasi dari bakteri, virus dan mitokondria seringkali berbentuk superkoil, selain itu DNA dapat berbentuk molekul linier dengan ujung ujung rantai yang bebas.

2.3 Tujuan Pemeriksaan DNASebagai suatu bidang cabang ilmu kedokteran forensik yang baru, ilmu ini melengkapi dan menyempurnakan tujuan dari berbagai pemeriksaan. Pemeriksaan DNA ini umumnya digunakan untuk dua tujuan, yaitu:1a. Tujuan pribadi atau identifikasi personal, seperti penentuan perwalian anak atau penentuan orang tua dari anak. Sebagai contoh, prinsip analisis DNA finger print pada kasus ragu ayah (disputed paternity), meliputi pelacakan pita maternal (pita anak yang sesuai dengan pita ibu), kemudian pita anak sisanya (pita paternal) di cocokkan dengan pita tersangka ayah. Tersangka dinyatakan sebagai bukan ayah jika tak ada pita yang cocok, dan sebaliknya.b. Tujuan hukum, yang meliputi masalah forensik seperti identifikasi kasus mayat tak di kenal atau telah hancur, kasus pembunuhan, perkosaan. Sehingga untuk mengenali identitasnya diperlukan pencocokan antara DNA korban dengan terduga keluarga korban ataupun untuk pembuktian kejahatan. Pada identifikasi mayat tak dikenal, dilakukan pembandingan pita korban dengan pita orang tua atau anak-anak tersangka korban. Jika korban benar adalah tersangka, maka akan didapatkan bahwa separuh pita anak akan cocok dengan ibunya dan separuhnya lagi cocok dengan pita ayahnya. Pada kasus perkosaan, dilakukan pembandingan pita DNA dari apus vagina (vaginal swab) dengan pita DNA tersangka pelaku. Jika tersangka benar adalah pelaku, maka akan dijumpai pita DNA yanhg persis pola susunannya.

2.4 Bahan dan Sampel Pemeriksaan DNABahan sampel DNA dapat dipilih dari jaringan apa saja, karena DNA dapat diperoleh dari semua sel berinti. Sel yang tidak memiliki DNA hanyalah selDarah merah karena sel darah merah tidak memiliki inti. Untuk tes diperlukan spesimen yang diambil dari ibu, anak dan pria yang diduga sebagai ayah biologisnya. Tes tidak dapat dilakukan jika pesimen tidak lengkap, misalny tanpa spesimen yang diambil dari ibu. Kalaupun dilakukan, kesimpulan tes yang akandiperolehsangatrendahyaitukurangdari50%.6Halyangpalingpentingpadatahappengambilanbahanatauspesimenadalahjangansampaiterjadikontaminasi.Artinyaspesimenyangakandiperiksatercampurdenganspesimenindividulainsehinggamengakibatkankesalahan pengambilan kesimpulan dalam menentukan siapa ayah biologis anak tersebut. Bahan sampel setelah dikumpulkan harus diberi perlakuan tertentu agar tidak rusak. Secara umum DNA dapat rusak akibat pengaruh lingkungan seperti paparan sinar matahari, terkenapanas, bahankimia,air danakibatkerjaenzim DNAase yang terdapat dalamjaringansendiri. Untukituterhadapberbagaibahan sampel tersebut harusdiberi perlakuansebagai berikut:61.JaringanUntuk bahan sampel yang segar,sampel terbaik adalah jaringan limpa, kelenjar getah bening dan hati. Sedangkan untuk bahan yang telah busuk, otak yang terbaik meskipun kondisinyatelahmencair. Bahansampeldiambil,dibungkuskertasalumuniumdandibekukan pada suhu dibawah 20C.2.DarahDarah cair diberikanpengawetEDTA,dan disimpan dalam termoses ataulemari es.Alternatiflain,bahan diserap engankainkasalalu dikeringkan. Bercak keringdapat dikerokdenganscalpel, dibawa denganbendanya ataudiusap dengan kain kasa basah lalu dikeringkan.3.CairanmaniDiserapdengankainkasakemudiandikeringkan.4.Tulang,GigidanRambutDibungkusdengankertasalumuniumdandisimpanpadasuhudibawah20C.Bahanyangtelahdikeringkandapatdisimpanpada suhu kamar.Sampel rambut diambil 1015 helai beserta akarnya. Sampelgigidipilih palingsedikit empat,molarjika mungkin. Sampel gigi sebaiknya tidak rusak oleh endodontia. Sampel tulang sebaiknya dari femur.

2.5 Teknik Pemeriksaan DNAAdapun jenis-jenis teknik pemerksaan DNA adalah sebagai berikut:1. Restriction Fragment Length Polymorphism (RFLP)Teknik pertama yang digunakan analisa DNA dalam bidang forensiik adalah RFLP. Polimorfisme yang dinamakan Restriction Fragment Leght Polymorphism (RFLP) adalah suatu polimorfisme DNA yang terjadi akibat variasi panjang fragmen DNA setelah dipotong dengan enzim retriksi tertentu menjadi fragmen Variable Number Of Tandem Repeat (VNTR). Teknik ini dilakukan dengan memanfaatkan enzim retriksi yang berfungsi memotong DNA pada tempat-tempat tertentu dengan cara mengenali urutan basa tertentu seperti AATT. Urutan basa tersebut disebut sebagai recognition sequence. Enzim yang berbeda memiliki recognition sequence yang berbeda. Enzim ini lalu memotong DNA menjadi segmen-segmen yang berbeda. Panjang segmen tersebut bervariasi pada tiap orang, hal ini disebabkan karena titik potong enzim yang berbeda dan panjang segmen antara titik potong juga berbeda. Analisa yang dihasilkan adalah variasi pada panjang fragmen DNA yang telah ditentukan. Setelah selesai, pola RFLP tampak seperti kode batang (bar code). Saat membandingkan hasil analisa dua sampel, pola batang pada autoradiograf dibandingkan untuk menentukan apakah kedua sampel tersebut berasal dari sumber yang sama.7,8Proses pada teknik Restriction Fragment Leght Polymorphism (RFLP) diawali dengan proses pemotongan dengan menggunakan enzim retriksi tertentu. Kemudian dengan menggunakan gel yang dialiri arus listrik, potongan DNA diurutkan berdasarkan panjangnya. Proses ini dinamakan electrophoresis, prinsip pada proses in adalah potongan DNA yang lebih pendek bergerak lebih cepat daripada yang lebih panjang. Untuk mendeteksi adanya segmen yang bersifat polimorfik maka dilakukan suatu prosedur yang disebut sebagai Southern Blooting. Dalam prosedur ini pada gel ditambahkan suatu zat kimia yang berfungsi untuk memisahkan rantai ganda menjadi rantai tunggal, kemudian membran nilon diletakkan diatas gel dan bahan penyerap diatas membran nilon. Cairan akan bergerak ke dalam bahan penyerap bersama potongan DNA rantai tunggal. Kemudian dengan menggunakan fragmen pendek DNA (DNA probe) yang mengandung petanda radioaktif maka akan dideteksi DNA yang berasal dari lokasi pada genome yang memiliki ciri yang jelas dan sangat polimorfik. Pada proses ini DNA probe akan berikatan dengan potongan DNA rantai tunggal dan membentuk DNA rantai ganda pada bahan nilon. DNA probe yang tidak berikatan akan dicuci. Membran nilon yang berisi potongan DNA yang telah ditandai dengan DNA probe selanjutnya ditransfer pada selembar film X-ray. Pada proses ini akan tampak hasil berupa kode batang yang disebut autorad. Pola inilah yang dibandingkan untuk mengetahui apakah kedua sampel bersal dari sumber yang sama. Pada teknik RFLP tidak hanya digunakan satu DNA probe, diamana DNA probe yang berbeda menandai lokus yang berbeda.7,8Walaupun penggunaanya telah mulai digeser oleh teknologi baru RFLP tetap adalah teknik terbaik untuk diskriminasi masing-masing lokus. Hal ini disebabkan oleh karena lokus-lokus yang dipergunakan untuk RFLP dapat menunjukkan ratusan variasi untuk tiap lokus. Dengan demikian jika dua sampel berasal dari sumber yang berbeda, RFLP dapat membedakannya menggunakan jumlah lokus yang lebih sedikit. RFLP dapat menentukan apabila sebuah sampel berasal dari lebih satu sumber dan dapat membedakan sumbernya dengan baik. Tingginya daya diskriminasi teknik ini disebabkan oleh hipervariabilitas pada tiap lokus dan kemampuan untuk memeriksa lebih dari satu lokus. Kelemahan teknik ini adalah memerlukan sampel DNA dalam jumlah lebih besar dan harus dalam kondisi baik jika dibandingkan dengan teknik menggunakan PCR. Teknik ini juga membutuhkan lebih banyak tenaga.7,8

2. Polymerase Chain Reaction (PCR)Metode analisa DNA yang selanjutnya adalah Polymerase Chain Reaction (PCR) yaitu suatu metode untuk memperbanyak fragmen DNA tertentu secara in vitro dengan enzim polymerase DNA. Teknik ini didesain agar yang diperbanyak hanya segmen tertentu dari sampel dengan tingkat akurasi yang tinggi, sehingga dapat diperoleh informasi dari sampel yang jumlahnya sedikit atau bahkan pada sampel DNA yang sudah mulai terdegradasi. Sampel DNA yang disiapkan dengan metode PCR dapat diananlisis menggunakan beberapa cara. Secara umum variasi per lokus sampel DNA yang disiapkan melalui PCR lebih rendah daripada variasi pada RFLP. Dengan demikian hasil dapat diperoleh dari sampel yang kurang secara kualitas maupun kuantitas namun kekuatan deskriminasinya lebih rendah dengan jumlah lokus yang sama. Kekuatan metode analisis PCR adalah kemampuan untuk menganalisa beberapa lokus secara bersamaan dengan proses yang otomatis.7Proses yang terjadi pada teknik ini serupa dengan cara DNA memperbanyak jumlahnya dalam sel. Ada tiga tahap yang dilakukan di laboratorium. Pertama, proses yang dinamakan denaturation yaitu segmen atau urutan DNA rantai ganda dipisahkan menjadi dua rantai tunggal dengan cara memanaskan. Kedua proses Annealing atau Hybridization, pada proses ini setiap rantai tunggal tersebut dipersiapkan dengan cara mengikatkannya dengan DNA primer. DNA primer adalah DNA pendek yang dibuat secara sintetis yang menunjukkan urutan DNA yang akan diperbanyak. Proses ketiga disebut Extension yaitu enzim DNA polymerase ditambahkan bersama dengan sejumlah basa bebas dari keempat jenis basa DNA dilanjutkan dengan proses replikasi.2 Keunggulan PCR dibandingkan RFLP adalah:7a. Simpel dan mudah dilaksanakan di laboraturiumb. Hasil diperoleh dalam waktu singkat (dalam beberapa hari)c. Oleh karena kapasitas produksi segmen DNA yang tidak terbatas maka metode yang berdasarkan PCR memungkinkan untuk menganalisa DNA dalam jumlah sangat sedikit.

Kekurangan metode PCR adalah :7a. Mudah terkontaminasib. Kontaminasi merupakan masalah yang besar pada PCR karena sistem ini memperbanyak DNA yang ada dengan tingkat akurasi yang tinggi. Sebuah molekul DNA dapat menjadi jutaan bahkan milyaran DNA dalam waktu tiga jam, jika ada sebuah molekul DNA bakteri atau kontaminan lain tercampur maka molekul tersebut juga akan diperbanyak dalam laju yang sama sehingga akan terjadi salah kesimpulan.c. Kebanyakan lokus dalam PCR memiliki alel lebih sedikit dibandingkan VNTR pada metode RFLP.d. Tidak seperti VNTR yang menggunakan area yang tidak berfungsi, beberapa lokus dari PCR adalah gen yang fungsional, ini berarti telah terjadi seleksi alam yang menyebabkan perbedaan yang lebih besar dari subgroup populasi.

Gambar 3. Electrophegram

3. STRs (Short Tandem Repeats)Metode STRs (Short Tandem Repeats) adalah salah satu metode analisis yang berdasar pada metode Polymerase Chain Reaction (PCR). STRs (Short Tandem Repeat) adalah suatu istilah genetik yang digunakan untuk menggambarkan urutan DNA pendek (2 5 pasangan basa) yang diulang. Genome setiap manusia mengandung ratusan STRs. Metode ini paling banyak dikembangkan karena metode ini cepat, otomatis dan memiliki kekuatan diskriminasi yang tinggi. Dengan metode STRs dapat memeriksa sampel DNA yang rusak atau dibawah standar karena ukuran fragmen DNA yang diperbanyak oleh PCR hanya berkisar antara 200 500 pasangan basa. Selain itu pada metode ini dapat dilakukan pemeriksaan pada setiap lokus yang memiliki tingkat polimorfisme sedang dengan memeriksa banyak lokus dalam waktu bersamaan. Teknik yang digunakan adalah multiplexing yaitu dengan memeriksa banyak lokus dan berbeda pada satu tabung. Dengan cara ini dapat menghemat waktu dan menghemat sampel. Analisis pada teknik ini didasarkan pada perbedaan urutan basa STRs dan perbedaan panjang atau pengulangan basa STRs.7

Gambar 4.marka STR 13 CODIS locus inti pada kromosom manusia4. Y- STRs (Y-Short Tandem Repeats)Y- STRs adalah STRs yang ditemukan pada kromosom Y. Y- STRs dapat diperiksa menggunakan jumlah sampel kecil dan rusak dengan metode dan alat yang sama dengan pemeriksaan STRs pada kromosom autosomal. Karena kromosom Y hanya terdapat pada pria maka Y- STRs dapat berguna untuk menyaring informasi genetik yang spesifik dari pria yang yang menjadi sampel. Pemeriksaan Y- STRs dapat digunakan untuk memeriksa sampel tanpa sperma yang bercampur antara sampel laki-laki dan perempuan, seperti sampel darah atau air liur yang diambil dari korban kasus perkosaan. Pemeriksaan ini juga dapat mendeteksi profil pria ketika hanya profil wanita yang tampak jelas saat menggunakan STRs. Karena kromosom Y tidak mempunyai homolog pada genom manusia, maka disebut hemizygous. Kromosom Y tidak mempunyai partner yang sama seperti pada kromosom autosomal. Walaupun ia berpasangan selama pembelahan sel, rekombinasi genetik yang terjadi hanya sedikit atau yidak ada sama sekali, hal ini diwariskan kepada keturunannya. Y- STRs sangat berguna untuk menyelesaikan kasus disputed paternity pada anak laki-laki, karena kromosom Y diturunkan oleh ayah kepada anak laki-laki.75. mtDNA (Mitochondrial DNA)Aplikasi penggunaan mitokondria DNA (mtDNA) dalam identifikasi forensik dimulai pada tahun 1990. Mitokondria adalah partikel intraselular yang terdapat di luar nukleus dalam sitoplasma sel. Mitokondria mengandung DNA kecil berupa molekul berbentuk sirkular yang terdiri dari 16569 pasangan basa yang dapat diidentifikasi. Setiap sel mengandung 100 1000 mitokondria.7Ciri khas dari mtDNA adalah pola penurunannya. Tidak seperti DNA inti yang tersusun dari kombinasi separuh DNA orang tua, mitokondria DNA hanya mengandung DNA ibu. Mitokondria diturunkan melalui sel telur tidak melalui sperma walaupun sperma secara struktural juga mengandung mitokondria dalam jumlah kecil, hal ini disebabkan karena bagian mitokondria sperma tidak masuk ke dalam sel telur sehingga hanya mitokondria ibu yang secara normal diturunkan pada anaknya.7Mitokondria DNA bersifat seperti kromosom Y yang tidak mempunyai homolog pada genom manusia, maka disebut hemizygous hal ini menyebabkan Mitokondria DNA dan Kromosom Y diturunkan secara spesifik. Jika dari pemeriksaan Mitokondria DNA dapat mengetahui garis ibu, maka dari pemeriksaan Kromosom Y dapat mengetahui garis ayah pada anak laki-laki. Perbedaan yang terlihat bahwa Mitokondria DNA adalah marker sitoplasmik yang diturunkan ibu kepada semua anaknya sedangkan Kromosom Y adalah marker nuklear yang hanya diturunkan seorang ayah pada anak laki-lakinya.76. CODIS (Combined DNA Index System)CODIS merupakan analisis DNA yang baru dikembangkan FBI. FBI memilih 13 STR yang digunakan sebagai deretan lokus utama standar dan meningkatkan pengembangan kemampuan laboraturium untuk melakukan pemeriksaan pada lokus tersebut. Laboratorium di seluruh dunia menggunakan lokus yang sama. Pengumpulan 13 lokus utama meningkatkan kemampuan diskriminasi. Kemungkinan ditemukan kecocokan antara dua orang yang tidak berhubungan berdasarkan random di Caucasian Amerika adalah satu diantara 575 trilyun. Angka kemungkinan ini lebih kecil dibandingkan UK system.4,5 FBI secara aktif dilibatkan dalam pengumpulan data frekuensi populasi pada grup dan subgrup populasi yang berbeda. Populasi ini kemudian dibagi lagi, misalnya data dari Jepang, Cina, Korea dan Vietnam. Pada dunia bagian barat terdapat data untuk Bahamian, Jamaica dan Trinidadian.9FBI menyediakan software sebagai fasilitas pada penggunaan CODIS, termasuk pelatihan penggunaan sistem serta menyediakan dukungan bagi laboraturium untuk melakukan analisis DNA. CODIS menggunakan dua indeks atau putunjuk untuk melakukan pemeriksaan pada kasus kriminal dengan analisis dna. Convicted Offender Index mengandung profil narapidana yang melakukan tindakan criminal. The Forensik Index mengandung profil DNA dari fakta yang didapatkan pada kasus criminal misalnya darah atau semen. Kedua indeks ini didapatkan dengan komputer.92.6 Definisi Tes PaternitasTes paternitas dengan menggunakan analisis DNA adalah analisis informasi genetik yang sangat spesifik dalam membedakan ciri setiap individu sehingga dapat menentukan identitas seseorang hampir 100 % pasti sebagai ayah biologis si anak, sedangkan metode konvensional dengan analisis fenotip berupa tes golongan darah sistem ABO, Rhesus, MNS dan tes Human Leukocyte Antigen (HLA) hanya dapat mengeksklusi pria yang diduga sebagai ayah biologis.2.7 Indikasi Tes PaternitasBeberapa indikasi dari pemeriksaan tes paternitas, yaitu :10a. Untuk mengeksklusikan seseorang yang dituduh sebagai ayah biologis dari seorang anak. b. Untuk kasus dimana seorang wanita yang pernah melakukan hubungan intim dengan lebih dari satu orang pria pada saat yang berdekatan, kemudian wanita tersebut hamil tanpa diketahui siapa sebenarnya ayah biologis anak.c. Untuk kasus dimana seorang wanita menuduh seorang pria sebagai ayah dari anaknya, sedangkan pria tersebut menyangkal telah menghamili si wanita.d. Untuk menentukan hubungan anak-ayah dalam menentukan ahli waris maupun urusan klaim asuransi.e. Untuk penentuan status keayahan yang tidak hanya menyangkut masalah psikologi namun juga penting dalam aspek hukum dan aspek medis.2.8 Analisis Hasil Pemeriksaan DNA PaternitasAnalisis DNA untuk tes paternitas meliputi beberapa tahap yaitu tahap pengambilan spesimen, tahap proses laboraturium, tahap perhitungan statistik dan pengambilan kesimpulan. Untuk metode tes DNA di Indonesia, masih memanfaatkan metode elektroforesis DNA. Intreprestasi hasilnya adalah dengan cara menganalisa pola DNA menggunakan marka STR (short tandem repeats). STR adalah lokus DNA yang tersusun atas pengulangan 2-6 basa. Dalam genom manusia dapat ditemukan pengulangan basa yang bervariasi jumlah dan jenisnya. Dengan menganalisa STR ini, maka DNA tersebut dapat diprofilkan dan dibandingkan dengan sampel DNA terduga lainnya. Beberapa tahapan tes DNA yaitu :11a. Tahapan preparasi sampel yang meliputi pengambilan sampel DNA (isolasi) dan pemurnian DNA. Dalam tahap ini diperlukan kesterilan alat-alat yang digunakan. Untuk sampel darah, dalam isolasinya dapat digunakan bahan kimia phenolchloroform sedangkan untuk sampel rambut dapat digunakan bahan kimia Chilex. Selanjutnya DNA dimurnikan dari kotoran-kotoran seperti protein, sel debris, dan lain lain. Untuk metode pemurnian biasanya digunakan tehnik sentrifugasi dan metode filtrasi vakum. Tetapi berbagai ilmuwan telah banyak meninggalkan cara tersebut dan beralih ke produk-produk pemurnian yang telah dipasarkan seperti produk butir magnet yang memanfaatkan silica-coated paramagnetic resin yang memungkinkan metode pemisahan DNA yang lebih sederhana dan cepat.b. Tahapan selanjutnya adalah memasukan sampel DNA yang telah dimurnikan kedalam mesin PCR (polymerase chain reaction) sebagai tahapan amplifikasi. Hasil akhir dari tahap amplifikasi ini adalah berupa kopi urutan DNA lengkap dari DNA sampel. Selanjutnya kopi urutan DNA ini akan dikarakterisasi dengan elektroforesis untuk melihat pola pitanya. Karena urutan DNA setiap orang berbeda maka jumlah dan lokasi pita DNA (pola elektroforesis) setiap individu juga berbeda. Pola pita inilah yang disebut DNA sidik jari (DNA finger print) yang akan dianalisa pola STR nya. Tahap terakhir adalah DNA berada dalam tahapan typing, proses ini dimaksudkan untuk memperoleh tipe DNA. Mesin PCR akan membaca data-data DNA dan menampilkannya dalam bentuk angka-angka dan gambar-gambar identfikasi DNA. Finishing dari tes DNA ini adalah mencocokan tipe-tipe DNA.c. Hasil analisis laboratorium atau profil DNA akan terlihat berupa pita-pita DNA yang terdapat pada gel poliakrilamid. Pita DNA anak kemudian dibandingkan dengan pita DNA ayah dan ibunya. Dapat dilihat bahwa masing-masing orang memiliki dua pita sebagai representasi dua alel yang menggambarkan DNA pada satu pasang kromosom. Salah satu pita pada kolom DNA anak sama tinggi dengan salah satu pita ibu yang menunjukkan alel tersebut berasal dari ibu, artinya pita anak yang kedua berasal dari pihak ayah terlihat bahwa salah satu pita ayah sama tinggi dengan pita kedua anak. Kemudian dilakukan perhitungan statistik sehingga dapat diambil kesimpulan bahwa pria tersebut kemungkinan besar adalah ayah dengan kemungkinan sekian persen dibandingkan dengan orang lain dalam ras yang sama.

BAB IIIILUSTRASI KASUSMr.Aadalahseoranglaki- laki usia 65 tahun berkebangsaan Belanda, memiliki anak laki-laki JUAN dari Istri pertamanya di Belanda. Pada tahun 2008, diketahui Mr. A telah memiliki istri kedua di Jambi Nyonya S dan dari hubungan mereka lahir seorang bayi laki-laki BEJO yang pada saat pemeriksaan telah berusia satu bulan. Karena keluarga besar Mr. A yang berada di Belanda ingin mengetahui pasti apakah bayi tersebut benar-benar anak dari Mr. A, maka mereka meminta dilakukannya uji keayahan atau tes paternitas dengan menggunakan tes DNA. Permasalahannya, Mr. A telah meninggal sejak tahun 2010, sehingga sampel dari ayah tidak mungkin di peroleh. Sehingga, sampel yang dipakai sebagai pembanding adalah sampel dari anak pertama Mr. A (JUAN). Dari tes tersebut dapat diperoleh hasil, apakah JUAN berasal dari satu garis keturunan yang sama dengan BEJO atau tidak. Pada kasus ini keluarga pasien meminta pengujian DNA kepada bagian forensik melalui Rumah Sakit Umum Daerah Raden Mattaher Jambi. Selanjutnya, setelah dilakukannya informed concent, sampel diambil dari JUAN sebagai pembanding dan BEJO sebagai individu yang ingin di uji. Sampel yang digunakan untuk JUAN adalah darah, sedangkan sampel untuk BEJO diambil dari swab mucosa pipi. Kemudian sampel dikirim ke bagian / unit Biologi Molekuler Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Universitas Jambi untuk dilakukannya pengujian DNA.PengujianDNAyangdipakaipadakasusiniadalahmenggunakanDNA kromosom Y. Tes Y-STR penurunan paternal digunakan untuk menentukan apakah dua atau lebih laki-laki mempunyai hubungan keluarga melalui ayah mereka (secara paternal/garis ayah). Tes ini sering digunakan untuk memberikan bukti tambahan pada kasus paternitas yang sulit dimana terduga ayah tidak dapat di tes (dalam kasus ini, ayah telah meninggal). Hasil tes ini juga dapat digunakan untuk konfirmasi hubungan biologis dari anak laki-laki angkat. Dimana hasil dari pengujian tersebut dapat dilihat pada lampiran dibawah ini:BAGIAN / SMF / INSTALASI KEDOKTERAN FORENSIK FAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU KESEHATAN UNIVERSITAS JAMBI / RUMAH SAKIT UMUM DAERAH RADEN MATTAHER JAMBINOMOR AKREDITASI : YM. 00.03.3.5.3974Jl.Let.Jend.Suprapto No.31 Telanaipura-JAMBI 36122Telp (0741) 61692 61694 fax. (0741) 60014

SURAT KETERANGAN MEDISNO : /SKM/III/2014

Sehubungan dengan permintaan saudara MB kami yang bertanda tangan di bawah ini dokter dr. M. Ainurrofiq, Sp. KF, MH, dokter pemerintah pada Instalasi Kedokteran Forensik Rumah Sakit Umum Daerah Raden Mattaher jambi, telah melakukan pemeriksaan DNA dari sampel darah dan swab pipi, bekerja sama dengan Unit Biomol Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Universitas Jambi terhadap :Nama:JUANJeniskelamin:LakilakiKewarganegaraan:BelandaUmur:37tahunTanggalLahir:9Mei1973

Nama:BEJOJeniskelamin:LakilakiKewarganegaraan:-Umur:1bulanTanggalLahir:9Februari2010

HASIL PEMERIKSAAN------------------------------------------------------------------1. Dari hasil pemeriksaan DNA kromosom Y dengan metode standar menunjukan JUAN dan BEJO adalah saudara seayah. ----------------------------------------------2. Hasil pemeriksaan secara lengkap terlampir. -----------------------------------------

KESIMPULAN------------------------------------------------------------------------------Dari pemeriksaan DNA JUAN dan BEJO adalah berasal dari individu dengan garis keturunan ayah (Paternal) yang sama.-----------------------------------------------

PENUTUP-------------------------------------------------------------------------------------Demikianlah keterangan tertulis ini saya buat dengan sesungguhnya dengan mengingat sumpah sewaktu menerima jabatan sebagai dokter-------------------------

Jambi, 10 Maret 2014 TTD

Dr. Ainurrofiq, Sp. KF, MH

UNIT BIOLOGI MOLEKULER FAKULTAS KEDOKTERANDAN ILMU KESEHATAN UNIVERSITAS JAMBIPELAYANAN IDENTIFIKASI DNAHasil Pemeriksaan Hubungan Saudara Laki-laki

Terduga kakakAdikIbu kandung

Nama JUANBEJOSRH

NomorBF0004BF0005-

Jenis sampelDarahSwab mucosa-

Tanggal lahir9-5-19739-2-2010-

Tanggal terima sp7-2-20147-2-2014-

TglLaporan:04-03-2014

VariasialeldilaporkansebagaiangkadaripasanganaleldalambasepairSTR LociJUANBEJOKeterangan

DYS 395128 bp128 bpCocok

DYS 393136 bp136 bpCocok

DYS 3900 (nol)0 (nol)Cocok

DYS 19200 bp200 bpCocok

ProbabilitasPaternity:100%

Conclusion: DNA Profiling was performed by standart methods and has been completed on blood sample in the name of JUAN as allege brother and BEJO as brother.Based on the observed scintific evidence, it is concluded, in reference to the samples from 4 STR Loci that have been analyzed, the alleged brother JUAN was match in the brother BEJO as brother. There is 100% probability that JUAN was brother BEJO. Therefore, JUAN as brother of BEJO.

BAB IVPEMBAHASAN

Permintaan uji keayahan pada laporan kasus ini awalnya di sampaikan oleh keluarga Mr. A (ayah) yang ingin mengetahui pasti apakah bayi BEJO benar-benar anak dari Mr. A. Pihak keluarga Mr.A meminta dilakukannya uji keayahan atau tes paternitastas dengan menggunakan tes DNA kepada bagian forensik melalui Rumah Sakit Umum Daerah Raden Mattaher Jambi. Ada beberapa surat-surat yang perlu dipersiapkan sebelum melakukan tes DNA, seperti informed consent, surat keterangan lahir, Kartu Tanda Penduduk (KTP), atau tanda pengenal lain, serta foto-foto dari korban dan terduga untuk mengetahui identitas yang benar dari mereka. Pada kasus ini semua berkas-berkas tersebut telah dipersiapkan dengan baik. Namun keluarga Mr. A selaku orang yang meminta pengujian tes DNA tidak menyertakan surat dari polisi atau jaksa, sehingga hasil tes ini diterbitkan sebagai surat keterangan medis yang nantinya tidak memiliki kekuatan hukum di pengadilan. Sampel yang dipilih pada kasus ini adalah dari darah dan swab mukosa pipi bagian dalam. Hampir semua bagian tubuh dapat digunakan untuk sampel tes DNA, tetapi yang sering digunakan adalah darah, rambut, usapan mulut pada pipi bagian dalam dan kuku. Sampel DNA yang digunakan bisa dari inti sel maupun mitokondrianya. Namun yang paling akurat adalah inti sel karena inti sel tidak bisa berubah. Sampel pemeriksaan DNA inti yang digunakan adalah sampel sel darah putih karena lebih mudah dalam pengambilannya. Hal yang penting adalah bagaimana bahan sampel setelah dikumpulkan harus diberi perlakuan tertentu agar tidak rusak. Dalam kasus ini darah telah diberikan bahan pengawet, yaituEDTA dan disimpan dalam lemari es.Ada beberapa tes yang dapat digunakan untuk menguji keayahan seseorang, seperti: Sistem sel darah merah, Sistem biokimia, tes Human Leukocyte Antigen (HLA), dan tes DNA sendiri. Dalam kasus ini Mr. A selaku ayah BEJO sudah meninggal, sehingga tes paternitas yang dapat digunakan untuk memecahkan masalah ini hanyalah tes DNA. TesDNAitusendirimemiliki berbagai cara, namun yang dapat digunakan dalam kasus ini adalah tes Y-Short Tandem Repeats (Y-STR) dengan memeriksa kromosom Y. Y-STR merupakan DNA inti (c-DNA) yang diturunkan secara total dari seorang pria kepada semua anak laki-lakinya.Pada kasus ini, Y-STR diturunkan oleh ayah (Mr.A) kepada anak dari istri pertamanya (JUAN) dan anak dari istri keduanya (BEJO). Jadi jika benar BEJO adalah anak kandung dari Mr. A maka profil Y-STR BEJO akan sama persis dengan profil Y-STR JUAN.Untuk metode tes DNA di Indonesia, masih memanfaatkan metode elektroforesis DNA. Dengan intreprestasi hasil dengan cara menganalisa pola DNA menggunakan marka STR (short tandem repeats) seperti tes DNA yang diterapkan Unit Biomol Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Universitas Jambi pada kasus ini. Karena urutan DNA setiap orang berbeda maka jumlah dan lokasi pita DNA (pola elektroforesis) setiap individu juga berbeda. Pola pita inilah yang disebut DNA sidik jari (DNA finger print) yang akan dianalisa pola STR nya. Tahapan terakhir dari tes DNA ini adalah tahapan typing, proses ini dimaksudkan untuk memperoleh tipe DNA. Mesin PCR akan membaca data-data DNA dan menampilkannya dalam bentuk angka-angka dan gambar-gambar identfikasi DNA. Finishing dari tes DNA ini adalah mencocokan tipe-tipe DNA.Dari hasil tes Y-STR pada kasus ini ternyata Profil Y-STR dari sampel BEJO cocok dengan profil Y-STR dari anak pertama dari istri pertama Mr. A JUAN. Dengan demikian dapat disimpulkan bahwa JUAN dan BEJO adalah berasal dari individu dengan garis keturunan ayah/ Paternal (Mr. A) yang sama.

BAB VPENUTUP

5.1 KesimpulanAdapun kesimpulan dari referat ini adalah :1. DNA adalah asam nukleat yang mengandung materi genetik dan berfungsi mengatur perkembangan biologis seluruh kehidupan secara biologis. 2. DNA ini umumnya digunakan untuk dua tujuan, yaitu tujuan pribadi atau identifikasi personal dan tujuan hukum.3. DNA memiliki struktur pilinan utas ganda yang terdiri dari komponen gula pentosa (deoksiribosa), gugus fosfat dan pasangan basa. 4. Sampel dalam pemeriksaan DNA dapat diperoleh dari jaringan, darah, cairanmani, tulang,gigidanrambut.5. Pemeriksaan DNA bisa dilakukan dengan beberapa teknik, yaitu Restriction Fragment Length Polymorphism (RFLP), Polymerase Chain Reaction (PCR), STRs (Short Tandem Repeats), Y- STRs (Y-Short Tandem Repeats), mtDNA (Mitochondrial DNA), dan CODIS (Combined DNA Index System).6. Tes paternitas dengan menggunakan analisis DNA adalah analisis informasi genetik yang sangat spesifik dalam membedakan ciri setiap individu sehingga dapat menentukan identitas seseorang hampir 100 % pasti sebagai ayah biologis si anak, sedangkan metode konvensional dengan analisis fenotip berupa tes golongan darah sistem ABO, Rhesus, MNS dan tes Human Leukocyte Antigen (HLA) hanya dapat mengeksklusi pria yang diduga sebagai ayah biologis.7. Beberapa indikasi dari pemeriksaan tes paternitas, yaitu : Untuk mengeksklusikan seseorang yang dituduh sebagai ayah biologis dari seorang anak. Untuk kasus dimana seorang wanita yang pernah melakukan hubungan intim dengan lebih dari satu orang pria pada saat yang berdekatan, kemudian wanita tersebut hamil tanpa diketahui siapa sebenarnya ayah biologis anak. Untuk kasus dimana seorang wanita menuduh seorang pria sebagai ayah dari anaknya, sedangkan pria tersebut menyangkal telah menghamili si wanita. Untuk menentukan hubungan anak-ayah dalam menentukan ahli waris maupun urusan klaim asuransi. Untuk penentuan status keayahan yang tidak hanya menyangkut masalah psikologi namun juga penting dalam aspek hukum dan aspek medis.8. Analisis DNA untuk tes paternitas meliputi beberapa tahap yaitu tahap pengambilan spesimen, tahap proses laboratorium, tahap perhitungan statistik dan pengambilan kesimpulan. Untuk metode tes DNA di Indonesia, masih memanfaatkan metode elektroforesis DNA. Intreprestasi hasilnya adalah dengan cara menganalisa pola DNA menggunakan marka STR (short tandem repeats). STR adalah lokus DNA yang tersusun atas pengulangan 2-6 basa. Dalam genom manusia dapat ditemukan pengulangan basa yang bervariasi jumlah dan jenisnya. Dengan menganalisa STR ini, maka DNA tersebut dapat diprofilkan dan dibandingkan dengan sampel DNA terduga lainnya.

5.2 SaranBerdasarkan referat yang telah dibuat, maka adapaun saran yang dapat kami berikan adalah:1. Harus ada kerja sama yang baik dalam hal pemeriksaan DNA antara pihak Rumah Sakit, pihak yang berwajib, maupun pihak yang bersangkutan.2. Untuk kegunaan pendidikan, diperlukan kerjasama dan koordinasi yang baik antar bagian dalam Rumah Sakit.

DAFTAR PUSTAKA1. Ilmu kedokteran forensik. Edisi kedua. Jakarta: Bagian kedokteran forensik fakultas kedokteran Universitas Indonesia. 2. Benecke, Mark. DNA typing in forensic medicine and in criminal investigations: a current survey. Germany: Institut fur Rechtsmedizin, Universitat zu Koln. Diakses tanggal 01-Maret-2014. Available at: http://www.denverda.org/dna/forensic_dna_articles.htm 3. DNA paternity test. Diakses tanggal 3 maret 2014. Available at: http://my.clevelandclinic.org/services/paternity_test/hic_dna_paternity_test.aspx4. Anonim.PusdokkesPolriTheIndonesianpolicecentreformedicalandHealthService.Availableat:http://www.pusdokkes.polri.go.id/naskah/dokpol/ladok polihtml. Di akses tanggal 5 maret 20145. Cantor Charles, Spengler Sylvia. Primer on Molecular Genetiks Available at: www.ornl.gov/hgmis/publicat/primer/toc. Di akses tanggal 5 maret 20146. Kolbinsky L, Levine, Margolis-Nuno H. 2007. Analysis DNA Forensik. Chelsea House of Publishing Infobase, New York.7. Norah Rudin & Keith Inman. Introduction to Forensic DNA Analysis. 2nd ed. London New York Washington DC : CRC Press LLC. 20028. Curran Thomas. Forensic DNA Analisys : Technology and Aplication. Available at: http ://www.denverda.org/DNA/Forensic_ DNA_Articles.htm : diakses 5 Maret 2014.9. Samuels Julie E., Asplen Christopher The Future of Forensic DNA Testing, Prediction of the Research and Development Working Group. Available: http:/ /www.denverda.org /DNA/Forensic _DNA_ Articles. htm: diakses 5 Maret 201410. Cordner, Stephen D., Plueckhahn Vernon D. Ethics, Legal Medicine and Forensic Pathology. Melbourne University Press. Australia. 199111. Anonym. DNA Genetik Testing-Paternity and Forensik Use. Available at: http://www.genetiks.edu.au. Diakses : 6 maret 2014.