Medium Dan Pembuatan Medium

Dian Hidayaturrahma/130341614840Firmanti Syukuriasri/130341614837Lianasari Wijaya/130341614779Meania Primasta/130341614846Wawan Yuliati Ningsih/130341614844

MEDIUM ADALAH ........

suatu bahan yang terdiri atas campuran nutrisi yang di pakai untuk menumbuhkan mikroorganisme.

•Syarat –syarat suatu medium :-mengandung nutrisi yang mudah digunakan oleh mikroorganisme-mempunyai tekanan osmose, tegangan permukaan dan pHsesuai-mengandung toksin-steril

• Penggolongan medium :A. Berdasarkan bahan :a. Medium alamiah atau substratb. Medium semi alamiah(bahan alami + senyawa kimia)c. Medium buatan atau medium sintesisB. Berdasarkan kegunaan :d. Medium umum(nutrien agar, taoge ekstrak agar, potato dextrose

agar)e. Medium Selektiff. Medium Perkayaang. Medium Penguji (Assay Medium)h. Medium KhususC. Berdasarkan fisiknya:i. Medium padat (agar)j. Medium cair (broth)

Cara Membuat Medium :• Mencampur bahan- bahan • Menyaring Medium • Menentukan dan mengatur pH• Memasukkan medium dalam tempat tertentu• Sterilisasi Medium

Nutrient AgarNutrien agar adalah medium umum untuk uji air dan produk dairy. NA juga digunakan untuk pertumbuhan mayoritas dari mikroorganisme yang tidak selektif, dalam artian mikroorganisme heterotrof.

Nutrient Broth(Nutrien Cair) adalah medium yang berbentuk cair dengan bahan dasar adalah ekstrak beef dan pepton. Perbedaan konsentris antara nutrient agar dengan nutrient broth yaitu nutrient agar berbentuk padat dan nutrient cair berbentuk cair.

• Medium dan cara pembuatan medium• Pembuatan Medium Potato Dektrosa Agar (PDA)• Tujuan : Mengetahui cara membuat medium agar padat semi

buatanBahan dan alat :1. Kentang,dektrosa, agar, akuades2. Beaker gelas, erlenmeyer, tabung reaksi,cawan petri,corong,

kapas, kompor timbangan analitis

Cara kerja : • Kentang sebanyak 200 gram dicuci bersih, dikupas dan diiris kecil-

kecil, kemudian dididihkan dengan 1 liter akuades selama 1 jam. • Saring dan pisahkan ampas dari filtratnya.• Masukkan 10 gram dektrosa dan 15 gram agar ke dalam filtrate dan

diaduk di atas penangas air sampai larut benar.• Masukkan kedalam tabung reaksi masing-masing sebanyak 5 ml

untuk media miring dan 10 ml untuk media tegak, masing-masing sebanyak 25 tabung dan 5 tabung, sisanya dimasukkan kedalam Erlenmeyer, kemudian sumbat dengan kapas dan ditutup atasnya dengan alumunium foil, kemudian sterilkan dengan autoclave (temperatur 1210 C) selama 15 menit. Setelah dari autoclave untuk membuat media miring, iringkan tabung reaksi, setelah padat simpan di almari es.

• Untuk membuat media padat di cawan petri, masukkan media yang sudah disterilkan kedalam cawan yang sebelumnya juga sudah disterilkan sebanyak 20 ml. Diamkan supayaa padat, kemudian simpan didalam almari es dengan posisi terbalik, untuk menghindari kontaminan dari uap air.

• Untuk membuat media cair caranya sama pada pembuatan media padat, hanya sewaktu membuat tidak diberi agar.

• Pembuatan Medium Nutrient Agar Tujuan : mengetahui cara membuat medium agar padatBahan dan alat yang perlukan :• 3 gram pepton, 2 gram ekstrak daging, 10 gram agar- agar, 500ml

akuades• Beaker gelas 1000 ml, gelas ukur 10 ml, timbangan analitis, corong,

kapassaring, erlenmenyer, tabung reaksi, kompor.

• Cara kerja :• Ekstrak daging, pepton di larutkan dalam akuades 500ml kemudiam

dididihkan selama 25 menit.• Masukkan agar- agar sedikit demi sedikit kedalamnya sambil diaduk

sampai homogen.• Saring dengan kapas kedalam erlenmeyer.• Masukkan kedalam tabung reaksi sebnayak 5 ml dan 10 ml

kemudian disumbant dengan kapas steril.• Sterilkan dengan autoclaver(121⁰C. 15 Ibs) selama 15 menit.• Buat medium miring untuk tabung 5 ml dan medium tegak untuk 10

ml

• Pembuatan Medium Nutrient CairTujuan : Mengetahui cara membuat medium cairBahan dan alat yang di perlukan :• Ekstrak daging, pepton NaCl, akuades, larutan BTB (brothymol

blue), larutan NaOH 0,1 N• Erlenmeyer, tabung reaksi, beaker gelas, corong, kapas, kompor,

timbangan, komparator blok, penangas air.

• Cara kerja :• Timbang ekstrak daging 3gram, pepton 5 gram,

danlarutkan dalam 1000ml akuades hingga homogen dengan menggunakan penangas air hingga mendidih.• Dinginkan dan jadikan volume 1000ml kembali

dengan akuades.• Stel pH medium dengan menggunakan komparator

blok. Masukkan 10 ml medium kedalam tabung reaksi tambahkan BTB 0,04%. Masukkan tabung kedalam lubang komparator blok(mempunyai 4 tabung) secara persilangan dan pada dua lubang persilangan lainnya akuades dan larutan strandart. Lihat melalui lubang pengintai.

• Bila medium yang ditambahkan indikator berwarna kuning berarti reaksi asam, maka netralkan dengan NaOH 0.1 N sampai warnanya sama dengan larutan standart. Jumlah ml larutan standart NaOH atau HCl yang ditambahkan dicatat untuk 10ml medium, dengan demikian dapat dihitung kebutuhan NaOH atau HCl yang di perlukan untuk menetralkan sisa medium yang ada.• Saring medium dengan menggunakan kapas,

sterilkan dengan autoclave pada tekanan 2 atm,temperatur 121⁰C selama 20 ml.