BIOPROSPEKSI TUMBUHAN SIRIH HUTAN ( PIPER ADUNCUM L ) SEBAGAI SUMBER BAHAN BAKU OBAT LARVASIDA NYAMUK AEDES AEGYPTI *)

Bioprospeksi Sirih Hutan Plant ( Piper aduncum L) as a source of raw material medicine Larvacidal Mousquito Aedes aegypti L *)

Sudrajat , Dwi Susanto, Djoko Mintargo , Rudi Kartika **)

ABSTRACT

This study aims to assess bioprospective P.aduncum L from the local forests of East Kalimantan, the identification of bioactive substances, the analysis yield results derived bioactive substances and test the effectiveness of each fraction as toxic mosquito larvasida on A. aegypti L.

Laboratory studies conducted to identify the bioactive substances in each fraction by phytochemical methods and test the effectiveness of the toxicity the rough extract, fractionation results carried out on the leaves and stems with a suitable solvent, and then conducted bioassay against A.salina Leach (BSLT) followed to show the LC50 values after 24 hours of exposure. Meanwhile, the bioassay L A.aegypti follow the WHO protocol with slight modifications.

The active compounds of the extraction of the leaves and stems P.aduncum L by hexan extracts, water extracts and chloroform extracts are identified were flavonoid compounds, steroids and saponins. To use as a mosquito larvasida materials, the fraction of the most effective way to kill larvae A.aegypti L is the result of extraction of the leaves with a poison power almost 200% compared to extract stem.

The results showed that extracts of P. aduncum L.has potential as againts A.aegypti L larvae and are prospective as a source of raw materials larvasida.   Keywords: Bioprospeksi- P.aduncum L bioactive substances- larvasida A. Aegypti L

-----------------------------------------------------------------------

**) Dosen FMIPA UNMUL Samarinda

1

I. PENDAHULUAN

Di taksir sekitar 2.5 milyar penduduk saat ini memiliki risiko terhadap dengue

fever (DF), DHF, dan dengue shock syndrome (DSS). Ukuran dan penyebaran dengue

adalah pandemi,tidak dapat diprediksi dari kasus epidemi dan sirkulasi strain virulen dan

non-virulen DHF /DSS menjadi suatu model sendiri untuk penyakit infeksi darurat.

Untuk mengatasi masalah ini telah dikembangkan vaccine virus dengue, namun hingga

saat ini keberhasilannya masih menemui kendala ( National Institute of Allergy and

Infectious Diseases, 2007).

Penggunaan insektisida sintetik dikenal sangat efektif, relatif murah, mudah dan

praktis tetapi berdampak negatif terhadap lingkungan hidup. Oleh karena itu, diperlukan

upaya pencarian terhadap bahan-bahan insektisida ramah lingkungan dan mudah terurai

dengan mengembangkan salah satu insektisida alternatif dari ekstrak tumbuhan.

Salah satu tumbuhan yang dapat digunakan sebagai insektisida adalah Piper

aduncum L. Hal ini berdasarkan hasil penelitian Bernard, et al, 1995 yang menyatakan

bahwa daun Piper spp (Piperaceae) menghasilkan zat bioaktif antara lain zat

phenylpropanoids, lignoids dan flavonoids. Selain itu berdasarkan hasil penelitian

Gottlieb et al, (1981), menyatakan bahwa senyawa phenylpropanoid bersifat

insektisida,khususnya senyawa dimethoxy-4,5-methylenedioxy-allylbenzene (dillapiol).

Mengingat Tumbuhan P.aduncum hidup liar, kosmopolitan, cepat tumbuh, dan

mendominasi kawasan-kawasan hutan terdegradasi dan lahan terlantar berpotensi

sebagai sumberdaya alam hayati yang melimpah.

Berdasarkan uraian di atas, maka perlu dilakukan analisis kandungan zat bioaktif

yang ada dalam bagian-bagian tumbuhan ( daun dan batang), sifat daya racunnya ,

perbandingan efektivitas daya larvasida terhadap nyamuk A. Aegypti L antara fraksi-

fraksi, dan rendemen kandungan zat bioaktifnya.

2

II. METODE PENELITIAN

Sumber Ekstrak. Bahan tumbuhan uji yang digunakan ialah daun dan batang

P.aduncum L yang diperoleh dari Lempake , Kodya Samarinda. Daun dan Kulit batang

dipotong-potong terlebih dahulu kemudian dikering anginkan di dalam

laboratorium.Sampel kemudian diblender hingga menjadi serbuk dan diayak

menggunakan kasa berjalinan 1 mm.

Cara Penelitian

Ekstraksi

Bagian-bagian tumbuhan Sirih Hutan ( Daun dan kulit batang dan kayu) secara

bergantian ditumbuk halus dan dimaserasi dengan etanol 95 % selama 3 x 24 jam,

sampai maserat berwarna bening. Maserat yang diperoleh diuapkan dengan rota

evaporator sehingga diperoleh ekstrak etanol kental daun/kulit dan kayu P.aduncum L.

Ekstrak etanol yang diperoleh ( ekstrak kasar) kemudian diuji kandungan senyawa

kimianya.

Ekstrak kasar kering dilarutkan dalam pelarut hexana-metanol-air. Fraksi air

yang tersisa dikeringkan dengan freeze dryer. Pada fase hexana dan fase metanol –air

kemudian dievaporasi pada suhu 50 o C. Fase hexana akan menghasilkan fraksi hexana

dan kemudian dilakukan uji fitokimia dan uji toksisitas akut dan daya larvasidanya

terhadap larva A.aegypti L. Hal yang sama dillakukan terhadap fase metanol-air dipartisi

dengan pelarut CHCl3 –air ( 1:1). Partisi akan menghasilkan fraksi kloroform dan fraksi

air, kemudian dilakukan uji fitokimia, uji toksisitas akut dan daya larvasidanya.

Identifikasi zat bioaktif

Pada penelitian identifikasi senyawa aktif ditujukan untuk menentukan golongan

senyawa aktif apa yang terdapat di dalam setiap isolat dilakukan dengan uji busa untuk

golongan saponin, uji warna dengan larutan SbCl3 dalam kloroform, uji warna

Liebermann Buchard untuk menentukan adanya triterpenoid.

3

Identifikasi adanya senyawa alkaloid

Hasil ekstrak sampel ( ekstrak kasar) atau fraksi aktif sebanyak dua tetes

dimasukkan ke dalam plat tetes dan ditambahkan pereaksi Dragendroff. Bila terjadi

perubahan warna jingga sampai merah coklat berarti ekstrak mengandung senyawa

alkaloid.

Identifikasi adanya senyawa saponin

Sebanyak dua tetes ekstrak kasar atau fraksi aktif dimasukkan ke dalam tabung

reaksi dan ditambahkan 10 ml air panas,kemudian didinginkan, lalu dikocok kuat-kuat

selama 10 detik. Bila terdapat senyawa saponin dalam ekstrak yang diuji, maka akan

terbentuk buih mantap selama kurang lebih 10 menit. Tinggi buih 1 Cm sampai 10 Cm,

dan buih tidak hilang jika ditambahkan 1 tetes HCl 2 N ( Harborne, 1987).

Identifikasi adanya senyawa flavonoid

Sebanyak dua tetes ekstrak kasar atau fraksi aktif dimasukkan ke dalam plat

tetes,ditambahkan serbuk Magnesium dan ditambahkan HCl pekat dua tetes. Bila

terbentuk warna orange ( kuning-coklat), menunjukkan ekstrak mengandung flavonoid (

Harborne, 1987).

Identifikasi adanya senyawa triterpenoid

Sebanyak 1 ml ekstrak kasar atau fraksi aktif dimasukkan ke dalam plat

tetes,ditambahkan 10 tetes asam asetat anhidrid ( AC20) dan 2 tetes asam sulfat pekat

secara berurutan. Larutan diaduk secara perlahan beberapa saat sampai kering. Uji positif

ditandai dengan terbentuknya warna merah atau ungu untuk triterpenoid serta hijau atau

biru untuk steroid (Harborne, 1987).

Uji Toksisitas dengan Metode BSLT.

Uji BSLT mengikuti metode Meyer et al., 1982 , dengan sedikit modifikasi. Uji

ini digunakan untuk mempelajari toksisitas sampel secara umum dengan menggunakan

telur udang Artemia salina Leach. Disiapkan bejana uji untuk penetasan telur udang

Artemia. Di satu ruang dalam bejana tersebut diletakkan lampu pijar/neon 40-60 watt

untuk menghangatkan suhu dalam penetasan ( 25-30 oC), sedangkan di ruang sebelahnya

diberi air laut.Air laut dapat dibuat dengan kadar garam NaCl 15 g/L. Kedalam air laut

dimasukkan ± 50-100 mg telur udang Artemia untuk ditetaskan. Kadar oksigen dijaga > 3

4

mg/L dengan cara memberikan aerator / blower ke dalam media dalam bejana

pemeliharaan.

Telur akan menetas 24 jam menjadi Nauplii dan akan menuju daerah terang

melalui sekat. Pada bagian telur ditutup dengan alumunium foil ( menjadi ruang gelap),

dan lampu dinyalakan selama 48 jam untuk menetaskan telur. Larva ( Nauplii) yang

sehat bersifat fototropik dan siap dijadikan hewan uji setelah berumur 48 jam. Diambil

larva udang Artemia yang akan diuji dengan pipet.

Larutan stok (induk) sampel dibuat dengan konsentrasi 50 mg dalam 5 ml metanol

atau dengan pelarut lain yang sesuai, lalu dibuat serangkaian konsentrasi sebesar 1 , 10,

100, 200, 500, 1000 dan 1500 µg/ml ke dalam vial-vial ( bejana uji). Larutan uji dalam

vial ( bejana uji) tersebut diuapkan sampai kering dan tidak mengandung pelarut organik.

Untuk kontrol negatif ( blanko) diberi perlakuan sama seperti larutan uji tetapi tanpa

ekstrak ( hanya diberi metanol dalam jumlah yang sama dengan sampel). Setiap

konsentrasi dibuat tiga replikasi ( triplikat).Jika kelompok kontrol menunjukkan

mortalitas > 5 %, maka pengujian di ulang kembali.

Ekstrak kering dalam vial ( bejana uji) dilarutkan dalam air laut secukupnya. Bila

sampel tidak larut tambahkan 2 tetes larutan dimethyl sulfoxide (DMSO). Sepuluh ekor

larva Artemia dipindahkan ke dalam masing-masing vial ( bejana uji) yang telah berisi

senyawa uji dan ditambahkan air laut sampai volume 5 ml. Ke dalam setiap vial

( bejana uji) dimasukkan satu tetes suspensi ragi ( 0,6 mg/ml) sebagai pakannya.

Pengamatan dilakukan selama 24 jam dan tingkat toksisitas ditentukan dengan

menghitung jumlah larva yang mati. Hasil dibandingkan dengan kontrol negatif.

jumlah kematian – jumlah kematian kontrol X 100 % % kematian = ----------------------------------------------------------------- Jumlah larva awal ( 10 )

Uji toksisitas terhadap larva nyamuk A.aegypti

Penelitian ini dilakukan dalam 3 tahap, yaitu tahap kolonisasi nyamuk, pembuatan

ekstrak daun, kulit dan kayu P.aduncum L.

(1). Pemeliharaan hewan Uji ( Kolonisasi nyamuk)

5

Maksud dilakukan kolonisasi larva nyamuk adalah untuk dapat menyediakan

larva nyamuk sebanyak-banyaknya dengan jenis yang sama sesuai dengan kebutuhan.

Cara kerja kolonisasi Aedes aegypti L dilakukan menurut WHO yang dimodifikasi.

Urutan kerja kolonisasi nyamuk Aedes aegypti L dikelompokkan menjadi empat tahap

yaitu pemeliharaan, pemeliharaan pupa, pemeliharaan nyamuk dan koleksi

telur.Kolonisasi nyamuk dimulai pada tahap telur dan berasal dari hasil tangkapan di

lapangan, kemudian dipelihara dalam laboratorium dengan memberi makan berupa liver

bubuk,hingga diperoleh telurnya. Kelompok telur ini kemudian ditetaskan sampai

berbentuk larva instar III yang siap diberi perlakuan.

(2).Pengujian Ekstrak Tumbuhan Terhadap Mortalitas Larva Nyamuk Aedes

aegypti L

Ekstrak Tumbuhan dilakukan menggunakan methanol / ethanol dengan teknik

maserasi. Ekstrak yang diperoleh dikeringkan dengan rotavapor pada tekanan rendah

dan suhu 40 C.Ampas dimaserasi dengan ethanol destilasi sehingga diperoleh ekstrak

kering. Terhadap ekstrak ethanol dilakukan bioassay dengan larva Aedes aegypti L

di dalam wadah yang berbeda konsentrasinya .

Bioassay dilakukan mengikuti panduan WHO ( 1981) dengan sedikit modifikasi.

Minyak esensial dilarutkan dalam ethanol 95 % sebagai larutan stock. Dari larutan stock

dibuat konsentrasi perlakuan 200, 100, 50, 25 dan 12.5 mg/lt ( ppm) dengan

mengencerkannya menggunakan air destilasi dan setiap konsentrasi perlakuan di ulang 3

kali. Larutan uji diletakkan dalam beaker 250 ml dan diisi 20 ekor larva A.aegypti L

stadium instar 3. Setiap set perlakuan eksperimen dikontrol dengan 3 ulangan yang

berisikan 2 ml ethanol dan 198 ml air destilasi. Semua beaker glass dijaga di dalam suhu

ruangan dan kematian ( mortalitas) larva dicatat selama 24-jam tanpa pemberian pakan.

Analisis Data

Data hasil penelitian kemudian ditabulasikan ke dalam tabel pengamatan,

sedangkan hasil isolasi diuraikan secara deskriptif. Nilai dugaan kematian 50 % hari

( LC-50 dalam unit waktu ) ditentukan dengan menggunakan persamaan garis

regresi antara log konsentrasi dan probit kematian ( Probit analisis). Efektivitas

dari fraksi-fraksi terhadap larva Artemia salina Leach dinyatakan dalam LC-50

6

(ppm) duapuluh empat jam dan empat puluh delapan jam setelah perlakuan. Data LC-

50 kemudian diperbandingkan, jika LC-50 tersebut memiliki konsentrasi kecil maka

isolat tersebut sangat efektif dipergunakan sebagai larvasida dan sebaliknya.

III.HASIL DAN PEMBAHASAN

Hasil penelitian dibagi menjadi beberapa bagian yakni skrening fitokimia untuk

identifikasi senyawa aktif; efektivitas daya racun setiap fraksi fraksi sebagai dasar

pertimbangan aplikasi pemanfaatannya di lapangan dan penemuan jenis-jenis senyawa

aktif sebagai larvasida nyamuk A.aegypti L.

Hasil Skrening Fitokimia terhadap P.aduncum L

Hasil identifikasi adanya senyawa metabolit sekunder terhadap setiap fraksi

ekstrak daun dan batang P.aduncum L disajikan dalam Tabel 1. Dari Tabel 1 tersebut,

terlihat bahwa ekstrak daun dan batang P.aduncum L dapat diidentifikasi adanya

kelompok senyawa aktif saponin, steroid dan flavonoid di dalam ekstrak kasar. Di dalam

fraksi air terdeteksi adanya saponin; senyawa steroid dalam fraksi heksan dan flavonoid

pada fraksi kloroform sampel daun dan batang. Sebaliknya senyawa alkaloid tidak

terdeteksi pada seluruh fraksi.

Tampak ekstrak batang dalam fraksi kloroform terdeteksi adanya senyawa

flavonoid. Menurut Harbone, 1987, flavonoid merupakan turunan senyawa flavon.

Senyawa ini terutama dalam bunga dan tersebar luas pada daun. Senyawa ini menurut

Sarmoko, 2009, berasal dari senyawa chalcone yang berkhasiat sebagai obat kanker.

Orjala et al., 1994., melaporkan bahwa P.aduncum L mengandung aduncamida, aduncin

A,B,C; minyak atsiri; benzenoid; oksigen heterosiklik; steroid; fenilpropa; flavonoid;

dihidrochalcone; piperaduncin A,B dan C; 2 ‘,4’,6’-trihidroksi;4-metoksi-

dihidrochalcone(TMHC);2’,6’-dihidroksi-4’; metoksidihidro chalcone ( DMHC),

asebogenin dan saponin.

7

Tabel 1. Hasil Skrening Fitokimia tiap-tiap Faksi dari Ekstrak P.aduncum L

Metabolit sekunder

Sample Daun Sample BatangHeksan CHCl3 Air Ekstrak

kasarHeksan CHCl3 Air Ekstrak

kasarSaponin - - + ++ - - + ++Triterpenoid - - - - - - - -Steroid + - - + + - - +Flavonoid - + - + - - - +Alkaloid - - - - - - - -Keterangan: + terdeksi, - tidak terdeteksi

Potensi daya Racun ( Uji Bhrine Saline Lethal Test )

Hasil uji daya racun terhadap A.salina Leach setiap fraksi dari ekstrak sampel

daun dan batang P.aduncum L disajikan dalam Tabel 2. Berdasarkan uji sitotoksik

menggunakan metode BSLT diketahui bahwa dari enam fraksi ekstrak daun dan batang

P.aduncum L bersifat racun. Sifat toksik ini diketahui dari nilai LC50-24 jam terhadap

A.salina Leach yakni antara 11.8 – 66.2 ppm. Suatu zat dikatakan aktif ( toksis) bila nilai

LC50 < 1000 ppm untuk esktrak bahan dan < 30 ppm untuk suatu senyawa. Sifat toksis

dari daun dan batang P.aduncum L erat kaitannya dengan kandungan senyawa yang ada

di dalamnya antara lain saponin, steroid dan flavonoid.

Dari Tabel 2, tampak bahwa daya racun ( LC50-24 jam) terhadap A.salina L

tertinggi ditunjukkan oleh fraksi heksan batang ( 11,8 ppm) diikuti oleh fraksi kloroform

batang ( 15,5 ppm); fraksi heksan daun ( 19.5 ppm); fraksi kloroform daun ( 22.1 ppm);

fraksi air daun ( 28.1 ppm) dan fraksi air batang ( 66.2 ppm).

Tabel. 2. Nilai LC50-24 Jam setiap fraksi ekstrak P.aduncum L terhadap A.salina L

Fraksi LC50 (ppm) Rangking Daya Racun

Heksan Daun 19.5 3CHCl3 Daun 22.1 4Air Daun 28.1 5Heksan Batang 11.8 1CHCl3 Batang 15.5 2

8

Air Batang 66.2 6

Daya racun tersebut berhubungan erat dengan kandungan zat metabolit

sekundernya. Tampak bahwa daya racun terbaik ditunjukkan oleh fraksi heksan batang

dan di dalam fraksi ini dapat diidentifikasi adanya senyawa steroid. Adanya zat steroid

dan flavonoid dari sample daun P.aduncum L menunjukkan daya racun yang cukup baik .

Rendemen (yield) ekstrak kasar dan hasil fraksinasi P.aduncum L

Sampel batang dan daun yang telah dikeringkan dan dihaluskan direndam

menggunakan ethanol 95%. Ethanol digunakan sebagai solvent untuk menarik metabolite

sekunder yang terdapat dalam sampel. Untuk mendapatkan ekstrak kasar (crude extract),

ethanol tersebut diuapkan menggunakan rotary evaporator dengan kondisi temperature:

40oC ; pressure: 500-550 mm Hg vaccum. Hasil rendemen (yield) ekstrak kasar dari

sampel daun dan batang P.aduncum L , disajikan dalam Tabel 3 dan Tabel 4.

Tabel 3. Hasil rendemen metabolit sekunder ( % berat kering / berat kering sampel) sampel daun dan batang P.aduncum L.

Sampel Berat Kering (g) Berat Ekstrak Kasar (g)

Rendemen (%)

Daun 467.2 79.41 17.0Batang 1000 26.9 2.69

Ekstrak kasar daun dan batang kemudian di fraksinasi menjadi fraksi heksan,

chloroform dan air. Tabel 4 di bawah ini menggambarkan hasil rendemen dari

tiap fraksi.

Tabel 4. Hasil rendemen metabolit sekunder ( % berat kering / berat kering sampel) dalam setiap fraksi sampel daun dan batang P.aduncum L.

Sampel Berat ekstrak

kasar (g)

Berat fraksi (g) Rendemen (%)Heksan CHCl3 Air Heksan CHCl3 Air

Daun 4.50 0.60 1.40 2.33 13.33 31.11 51.78Batang 15.13 1.09 0.37 12.2 7.20 2.45 87.24

Hasil dari Tabel 4 di atas diperoleh gambaran bahwa rendemen dari sampel daun

diperoleh nilai sebesar 17,0 % dan lebih besar dibandingkan dari sampel batang yang

memiliki nilai rendemen sebanyak 2,69 %. Dari hasil partisi terhadap nilai rendemen

9

kasar dengan pelarut yang sesuai, diperoleh nilai rendemen dalam fraksi air

menunjukkan nilai terbesar yakni 51,78 % untuk sampel daun dan 87,24 % untuk sampel

batang. Nilai rendemen untuk sampel daun secara urutan dari besar ke kecil ditunjukkan

oleh fraksi air, diikuti oleh fraksi kloroform dan fraksi heksan adalah 51,78 %; 31,11 %

dan 13,33 %.Sedangkan untuk sampel batang diperoleh nilai rendemen dari besar ke kecil

ditunjukkan oleh rendemen fraksi air ( 87,24%); fraksi heksan 7,20 % dan fraksi

kloroform sebanyak 2.45 %.

Dari hasil partisi tersebut di atas, tampak bahwa rendemen terbaik untuk sampel

daun dan batang ditunjukkan oleh fraksi air. Keadaan ini membantu di dalam

pengembangan ekstraksi bahan zat bioaktif ( molecule cultivation) tersebut, bahwa

dengan pelarut air telah mampu mengekstraksi zat bioaktif sebesar 51,78 – 87,24 %.

Senyawa bioaktif yang terdeteksi dalam fraksi air tersebut adalah saponin.

Daya Larvasida Ekstraks kasar P.aduncum L terhadap larva A. aegypti L

Nilai daya racun ekstrak kasar daun dan batang P.aduncum L terhadap larva A.aegypti L

disajikan dalam Tabel 5 dan Tabel 6. Tampak bahwa nilai LC50-48 jam ekstrak kasar

sampel daun lebih beracun dibandingkan sampel batang, hal ini ditunjukkan oleh nilai

LC50-48 jam ekstrak daun sebesar 2200 ppm (b/v) dan LC50-48 jam ekstrak batang

sebesar 4350 ppm (b/w). Daya racun ekstrak kasar daun menunjukkan hampir 200 %

dibandingkan ekstrak kasar batang.

Tabel 5. Mortalitas larva Aedes aegypti dalam 48 jam setelah perlakuan variasi konsentrasi ekstrak Batang Sirih Hutan ( P. aduncum L )

No Konsentrasi(X) ppm Log X n

Mortalitas (m)Larva Uji 48 Jam

%-tase Mortalitas

Probit Kematian

U1 U2 U3 U41 0 % - 40 0 0 0 0 0 02. 1580 3,19 40 2 2 3 2 25 4,333. 2500 3,39 40 3 4 2 3 30 4,484. 3950 3,59 40 4 3 4 3 35 4,615. 6240 3,79 40 3 3 2 3 27 4,396. 9800 3,99 40 8 10 10 10 95 6,64Nilai LC50-48 Jam ekstrak batang P.aduncum L terhadap larva nyamuk A.aegypti instar III adalah 4350 ppm b/v).

Tabel 6. Mortalitas larva Aedes aegypti dalam 48 jam setelah perlakuan variasi

10

konsentrasi ekstrak daun tumbuhan Sirih Hutan ( Piper aduncum L )

No Konsentrasi(X) ppm

Log X nMortalitas (m)

Larva Uji 48 Jam%-tase

MortalitasProbit

KematianU1 U2 U3 U4

1 0 % - 80 0 0 0 0 0 02. 1580 3,19 80 4 2 3 2 13,75 3,873. 2500 3,39 80 8 8 9 9 42,5 4,804. 3950 3,59 80 11 12 12 13 60 5,255. 6240 3,79 80 17 16 15 17 81,25 5,886. 9800 3,99 80 20 20 20 20 100 7,05

Nilai LC50-48 Jam ekstrak kasar daun P.aduncum L terhadap larva nyamuk

A.aegypti instar III adalah 2200 ppm ( b/v). Hal ini menunjukkan bahwa Tumbuhan

P.aduncum L yang hidup liar, kosmopolitan ( menyebar pada berbagai tipe lahan

terdegradasi), fastgrowing species memiliki potensi nilai ekonomis yang tinggi dan

praktis karena masyarakat dapat menggunakannya sebagai larvasida, terutama untuk

membasmi jentik-jentik nyamuk demam penyebab penyakit demam berdarah. Mereka

dapat menggunakannya dengan cara merebus dengan air, kemudian bahan ini dapat

diaplikasikan di lapangan karena bahan ini memiliki risiko/ efek samping yang relatif

kecil karena terbuat dari bahan alami.

Dari uraian di atas, dapat dipilih bahan mana yang akan digunakan. Bila ingin

menghasilkan daya bunuh yang paling efektif dan efisiensi biaya harus dipilih, maka

fraksi air adalah pilihan terbaik untuk bahan dari batang, maupun dari daun.

KESIMPULAN DAN SARAN

Kesimpulan

1. Senyawa aktif hasil pemisahan ( ekstraksi) terhadap bagian daun dan batang

P.aduncum L asal Kalimantan Timur yang dapat diidentifikasi dalam ekstrak

heksan, ekstrak air dan ekstrak kloroform adalah jenis senyawa golongan

flavonoid, steroid , alkaloid dan saponin.

11

2. Senyawa aktif yang ada dalam daun dan batang P.aduncum L bersifat bioaktif

dengan toksisitas tinggi yang ditunjukkan oleh nilai LC50 hasil BSLT < 1000

ppm dimana nilai LC50 – 24 jam dari seluruh fraksi ekstrak terhadap A.salina

Leach antara 11.8 – 66, 2 ppm ( b/v).

3. Untuk kepentingan analisis kelayakan usaha, nilai rendemen zat bioaktif dari

sampel daun diperoleh nilai sebesar 17,0 % ( berat kering) dan lebih besar

dibandingkan dengan sampel yang berasal dari batang P.aduncum L.

4. Untuk pemakaian sebagai bahan larvasida nyamuk , fraksi yang paling efektif

untuk membunuh A.aegypti L adalah hasil ekstraksi terhadap bagian daun

dengan daya racun hampir 200 % dibandingkan ekstrak batang.

Saran

1.Kandungan senyawa aktif perlu terus ditelusuri sampai ditemukan struktur kimianya (

elusidasi struktur jenis-jenis senyawa bioaktif tersebut). Ini merupakan sumbangan

baru bagi pengembangan ilmu pengetahuan, khususnya dalam aspek senyawa bioaktif

dari tanaman yang belum diteliti.Dalam penggunaannya sebagai pestisida komersial,

bahan ini perlu dievaluasi nilai ekonomisnya serta tahapan-tahapan yang dipersyaratkan

oleh WHO yaitu uji klinis dan farmakologis terhadap manusia, organisme hidup

lainnya yang berguna dan terhadap lingkungan hidup. Selain itu perlu diteliti teknologi

bioproses ekstraktif senyawa bioaktifnya ( moleculer bioactive cultivation) yang

terbaik.

2. Penelitian ini kelak kemudian hari dapat bermanfaat bagi pengembangan industri

bahan baku pestisida, khususnya pengganti bahan abate sebagai pembasmi larva

nyamuk yang penggunaannya tetap besar dan masih diimpor dari luar negeri.Apabila

hasil penelitian dikembangkan akan berguna bagi bidang bioteknologi tanaman pada

umumnya dan khususnya bioteknologi industri untuk produksi metabolit sekunder,

sedangkan sisi lain adalah Agrobioteknologi yang nantinya memusatkan untuk

peningkatan produksi bahan baku obat-obatan/pestisida sehingga dapat menghemat

pengeluaran devisa Negara. Sehingga perlu dilakukan analisis kelayakan usaha mikro

dari segi lingkungan, sosial dan ekonominya.

12

UCAPAN TERIMAKASIH

Ucapan terimakasih kami sampaikan kepada Direktur Dirlitabmas, Direktorat

Jenderal Pendidikan Tinggi, Depdikbud di Jakarta yang telah membiayai penelitian ini,

Ketua Lembaga Penelitian Unmul, Dekan FMIPA Unmul, Kepala Laboratorium Kepala

Laboratorium Toksikologi FMIPA UNMUL dan Kepala Puslitbang Bioteknologi LIPI di

Jakarta yang telah memberikan kesempatan dan fasilitas kepada kami untuk

melaksanakan penelitian ini.

DAFTAR PUSTAKA

Bernard CB, Krishanmurty HG, Chauret D, Durst T, et al. (1995). Insecticidal defenses of Piperaceae from the neotropics. J. Chem. Ecol. 21: 801-814.

Gottlieb ORM, Koketsu M, Magalhães MT, Maia JGS, et al. (1981). Óleos essenciais da Amazônia VII. Acta Amazon. 11: 143-148.

Harborne, 1987. Phytochemical Methods. London :Chapman and Hall.

Metcalf, R.L. & Luchman,W.H.1982. Introduction to insect pest management.Jhon Wiley & Sons. New York.p.5-6.

Meyer, B.N., N.R. Feerigni.J.E.Outnam, L.B. Jacobson, D.E.Nicholas, J.E.McLaughlin. Planta Medica 45 (1982) 31-34.

National Institute of Allergy and Infectious Diseases.Dengue fever-overview.[Cited 2007 Dec 12] Available at http://www3.niaid.nih.gov /healthscience/healthtropics/ dengue/overview.htm.

The Center fo Disease Control.The dengue fever fact sheet-CDC Division of Vector-Borne Infectious Diseases [Cited 2007 Dec12].Available at http://.cdc. gov/ncidod/dvbid/dengue.

13