LAPORAN BIOKIMIA

REAKSI BIURET

Tujuan Percobaan

Untuk membuktikan adanya protein pada albumin, pepton dan kasein.

Landasan Teori

Uji biuret adalah uji kimia yang digunakan untuk mendeteksi adanya ikatan peptida.

Dengan adanya kandungan peptida, suatu tembaga (II) ion membentuk ungu berwarna

kompleks dalam alkali larutan. Reaksi Biuret dapat digunakan untuk menguji konsentrasi

protein karena ikatan peptida terjadi dengan frekuensi yang sama per asam amino dalam

peptida. Intensitas warna, dan karenanya serapan pada 540 nm, berbanding lurus dengan

konsentrasi protein, menurut hukum Beer-Lambert .

Banyak protein mengandung sulfur. Mereka adalah kompleks dengan molekul terdiri dari

karbon, hidrogen, oksigen, dan nitrogen. Asam amino adalah hasil dari blok protein dan

mereka terhubung oleh ikatan peptida. Ada banyak kesamaan antara asam amino dan

molekul biuret dan keduanya bereaksi dengan cara yang sama. reagen Biuret adalah

solusi biru muda, yang ternyata ungu bila dicampur dengan larutan yang mengandung

protein. Sebuah kompleks warna ungu terbentuk ketika ion tembaga dari Bupati Biuret

bereaksi dengan ikatan peptida pada rantai polipeptida.

Karena protein dibuat dari asam amino, kehadiran ikatan peptida selama uji Biuret untuk

protein akan selalu memberikan hasil positif untuk semua jenis makanan berbasis protein.

Alat dan Bahan

Tabung reaksi

Rak tabung

Zat-zat yang akan diuji ( albumin, pepton 2%, kasein 2%)

Reagen-reagen untuk uji biuret (larutan NaOH 10% dan larutan CuSO4 7%)

Prosedur Kerja

Campurkan 2 ml larutan albumin 2% dengan 2 ml NaOH 10% dan tambahkan 1 tetes

larutan CuSO4 7%. Bila belum terbentuk warna merah jambu atau lembayung, tambahkan

1 tetes CuSO4 (maksimal 10 tetes). Ulangi percobaan dengan kasein 2% dan peptone 2%

Data Pengamatan

Foto (ki-ka : Albumin, Kasein, Pepton)

Tabel 1. Hasil Pengamatan Reaksi Biuret

Test Zat yang diuji

Volume Keadaan Awal

Tindakan 1 Hasil Tindakan 2 Hasil Makna

Reaksi Biuret

Albumin

2 ml

Bening keruh

Dilarutkan dengan 2 ml NaOH 10%

Larutan berwarna

bening, dan larut dengan

NaOH

Ditetesi 5 tetes CuSO4

7 %Larutan berubah warna

menjadi lembayung

Berubahnya warna larutan menjadi

lembayung menandakan reaksi positif

(+), dan semua larutan

mengandung protein.

Pepton Kuning keruh

Ditetesi 3 tetes CuSO4

7%

Kasein Putih keruh Ditetesi 4O tetes CuSO4

7%

Hasil Reaksi

Penetesan NaOH ditambah CuSO4 membantu untuk membentuk kompleks dengan

nitrogen dan karbon dari ikatan peptida. Perubahan pada warna sampel uji akan

memberikan hasil yang positif atau negatif. Ketika sampel berubah menjadi ungu atau

lembayung itu berarti bahwa sampel mengandung protein. Obligasi Peptida terjadi

dengan frekuensi yang sama kira-kira untuk kebanyakan protein per gram bahan. Jadi

untuk menentukan konsentrasi reaksi biuret protein dapat digunakan. Jika konsentrasi

yang lebih, sampel akan berubah menjadi lebih ungu.

Dalam percobaan ini, ketiga zat yang diuji (albumin, pepton, dan kasein) menunjukkan

hasil yang positif. Hasil yang positif itu ditandai dengan terbentuknya warna ungu pada

larutan setelah ditetesi larutan CuSO4, meskipun dengan jumlah tetesan yang berbeda.

Hasil yang didapat adalah:

Albumin larutan berubah warna menjadi warna lembayung setelah tetesan ke lima

Pepton larutan berubah warna menjadi warna lembayung setelah tetesan ke tiga

Kasein larutan berubah warna menjadi warna lembayung setelah tetesan ke tiga

Kesimpulan

Percobaan ini dilakukan untuk mengetahui adanya protein pada ketiga zat yang diuji

(albumin, pepton dan kasein). Dari hasil percobaan, dapat disimpulkan bahwa albumin,

pepton dan kasein mengandung protein.

Albumin +

Pepton +

Kasein +