Laporan Praktikum Biokimia IPembuatan Kasein

Disusun Oleh:

Nama Anggota: Rizky Novita Putri (06111410003) Ummi Khairani Urfa (06111410004) Dita Ratna Sari (06111410011)

Prodi: Pend. Kimia (Palembang)

Kelompok: 3

Dosen Pembimbing: Drs. Made Sukaryawan, M.Si Desi, S.Pd., M.T

PROGRAM STUDI PENDIDIKAN KIMIAJURUSAN PENDIDIKAN MIPAFAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKANUNIVERSITAS SRIWIJAYA2013

1. Nomor Percobaan: VII1. Nama Percobaan : Pembuatan KaseinII. Tujuan Percobaan: Memisahkan Kasein Dalam Susu Dengan Menggunakan Alkohol Dan Menghitung % Rendemen Pada Berat Kasein1. Dasar TeoriProtein berasal dari kata pionios yang artinya penting/utama. Protein merupakan faktor utama dalam sel yaitu 30 % dari berat kering sel. Secara umum protein dalam susu mencapai 3,25%. Struktur primer protein terdiri atas rantai polipeptida dari asam-asam amino yang disatukan ikatan-ikatan peptida Jenis utama protein dan fungsinya dapat dilihat pada tabel di bawah ini :No.FungsiJenisContoh

1.Katalitor.Enzim.Amilase, pepsin.

2.Struktural.Protein struktural.Kalogen (pengikat jaringan/ tulang)

3.Mortil (mekanik).Protein kontraktol.Keraten, miosin (otak).

4.Penyimpanan.Protein angkutan.Kasein dan albumin.

5.Pengangkutan.Protein angkutanAlbumin dan Hb.

6.Pengatur.Protein hormon.Insulin, hormon tumbuh.

7.Perlindungan.Antibiotik.Imuglubin.

8.Tanggap toksit.Protein toksit. Bisa ular.

Molekul protein mempunyai tingkat keragaman yang sangat tinggi, untuk ini protein dapat digolongkan berdasarkan sifat-sifatnya, salah satu diantaranya berdasarkan fungsi biologinya, antara lain:1. EnzimEnzim merupakan jenis protein yang mempunyai sifat sangat beragam dan spesifik. Enzim mempunyai fungsi sebagai katalis untuk reaksi-reaksi biokimia. Hampir seluruh reaksi-reaksi kimia dari senyawa-senyawa biomolekul dalam sel dikatalsis oleh enzim.2. Protein transporProtein transpor dalam plasma darah mengikat dan membawa molekul-molekul spesifik atau ion dari satu organ ke organ lain. Hemoglobin dari sel darah merah mengikat oksigen pada saat darah melalui paru-paru dan membawanya ke jaringan periferal, di mana dilepaskan untuk proses oksidasi bahan makanan.

3. Protein bahan makananSebagian protein dalam sel tersimpan dalam bahan makanan, seperti yang ada pada biji-bijian yang digunakan untuk pertumbuhan embrio tanaman. Kasein merupakan protein yang terbanyak dalam air susu dan protein ini merupakan protein bahan makanan. 4. Protein kontraktilBeberapa protein dalam sel dan organisme mempunyai fungsi untuk kontraksi dengan mengubah bentuk atau bergerak.5. Protein strukturBeberapa protein berfungsi sebagai serabut, kabel, atau pelindung untuk memberikan kekuatan dan proteksi dari struktur biologi (sel). 6. Protein pertahananBeberapa protein berfungsi untuk menjaga organisme dari invasi oleh organisme lain atau melindungi dari luka. Immunglobin atau antibodi merupakan protein khusus yang dibuat oleh jaringan limfosit yang dapat mengenali dan mengendapkan atau menetralkan invasi bakteri, virus atau protein asing dari spesies lain.7. Protein regulatorBeberapa protein berfungsi untuk mengatur metabolisme sel atau aktivitas fisiologi. Di anataranya adalah hormon, seperti hormon insulin, yang mengatur metabolisme glukosa.Protein merupakan bahan makanan yang sangat penting dalam menyusun komponen-komponen sel, terutama dalam proses pertumbuhan dan perkembangan mahluk hidup. Kadar protein yang terdapat dalam susu berkisar antara 2,8 persen sampai 4,0 persen. Selanjutnya Lehninger (1982) menjelaskan, bahwa dengan teknik fraksinasi secara klasik dari protein susu yang dijalankan dengan proses sedimentasi, maka macam protein susu yang dihasilkan terdiri dari kasein, laktoglobulin, dan laktalbumin. Namun setelah ditemukan teknik yang baru, ternyata masing-masing komponen tersebut masih terdiri dari fraksi-fraksi yang lain.Menurut Adnan (1984), kasein di dalam susu merupakan partikel yang besar. Di dalamnya tidak hanya terdiri dari zat-zat organik, melainkan mengandung juga zat-zat anorganik seperti kalsium, phosphor, dan magnesium.Kasein yang merupakan partikel yang besar dan senyawa yang kompleks tersebut dinamakan juga kasein misel (casein micell). Kasein misel tersebut besarnya tidak seragam, berkisar antara 30 300 m. Kasein juga mengandung sulfur (S) yang terdapat pada metionin (0,69%) dan sistin (0,09%). Kasein adalah protein yang khusus terdapat dalam susu. Oleh karena itu kasein dalam susu dapat dikoagulasikan atau digumpalkan oleh asam yang terbentuk di dalam susu sebagai aktivitas dari mikrobia.Kasein dapat diendapapkan oleh asam, enzim rennet, dan alkohol. Selain penambahan asam, pengendapan kasein susu juga dilakukan dengan penambahan renin, yaitu suatu enzim proteolitik yang diperoleh dari induk sapi betina. oleh karena itu, susu dapat dikoagulasikan (digumpalkan) oleh asam yang terbentuk di dalam susu sebagai aktivitas dari mikroba.Kasein merupakan protein yang stabil terhadap pemanasan dan tidak mengalami denaturasi bila air susu dipanaskan. Kasein di dalam air merupakan molekul besar yang terdiri dari zat-zat anorganik seperti kalsium, fosfor dan sedikit magnesium serta sitrat. Kasein merupakan suatu misel yang mengandung kalsium dan fosfat yang membentuk kalsium kaseinat phosphatase kompleks. Titik isoelektris kasein pH 4,6 5,0 dan pada titik ini kasein mudah sekali mengendap. Kasein dapat pula mengendap dengan naiknya keasaman, perubahan Ca dan P yang larut menjadi menjadi tidak larut dan terjadinya interaksi antara protein yang ada. Kasein tersuspensi dalam susu dalam kompleks yang disebut misel. Kandungan fosfat yang tinggi pada kasein terkait dengan garam kalsium fosfat sehingga susu menjadi sumber kalsium dalam diet. Kappa kasein terdapat pada bagian luar misel.

Kasein mengandung S yang terdapat dalam methionin dan cystein. Kasein merupakan campuran tiga jenis protein yaitu : -kasien, (75 %), -kasein (3 %) dan -kasein (22%). Kasein dalam susu merupakan partikel kompleks atau berupa misel yang terdiri atas Ca, P anorganik, Mg, dan sutrat selain protein kasein. Senyawa kompleks ini sering disebut Kalsium Caseinat Phosphat kompleks. Kasein penting dikonsumsi karena mengandung komposisi asam amino yang dibutuhkan tubuh. Dalam kondisi asam (pH rendah), kasein akan mengendap karena memiliki kelarutan (solubility) rendah pada kondisi asam. Susu adalah bahan makanan penting, karena mengandung kasein yang merupakan protein berkualitas juga mudah dicerna (digestible) saluran pencernaan.Kasein asam (acid casein) sangat ideal digunakan untuk kepentingan medis, nutrisi, dan produk-produk farmasi. Selain sebagai makanan, acid casein digunakan pula dalam industri pelapisan kertas (paper coating), cat, pabrik tekstil, perekat, dan kosmetik. Pemanasan, pemberian enzim proteolitik (rennin), dan pengasaman dapat memisahkan kasein dengan whey protein. Selain itu, sentrifugasi pada susu dapat pula digunakan untuk memisahkan kasein. Protein dalam kasein terususun oleh rantai-rantai peptide jika mengalami hidrolisis akan menjadi disakarida seperti berikut:

Dalam isolasi, kasein larut dalam air, alkohol dan eter namun tidak larut dalam etanol, senyawa alkali dan beberapa larutan asam.Setelah kasein dikeluarkan, maka protein lain yang tersisa dalam susu disebut whey protein. Protein serum terdiri dari b-laktoglobulin 50%, a-laktalbumin 20%, albumin, immunoglobulin, laktoferin, trasferin dan sebagian kecil protein dan enzim. Whey tidak mengandung fosfor tapi mengandung asam amino sulfur yang membentuk ikatan disulfide. Jika ikatan rusak maka protein mengalami denaturasi.Whey protein merupakan protein butiran (globular). Betha-lactoglobulin, alpha-lactalbumin, Immunoglobulin (Ig), dan Bovine Serum Albumin (BSA) adalah contoh dari whey protein. Alpha-lactalbumin merupakan protein penting dalam sintesis laktosa dan keberadaannya juga merupakan pokok dalam sintesis susu. Dalam whey protein terkandung pula beberapa enzim, hormon, antibodi, faktor pertumbuhan (growth factor), dan pembawa zat gizi (nutrient transporter). Sebagian besar whey protein kurang tercerna dalam usus. Ketika whey protein tidak tercerna secara lengkap dalam usus, maka beberapa protein utuh dapat menstimulasi reaksi kekebalan sistemik. Peristiwa ini dikenal dengan alergi protein susu (milk protein allergy).

IV. Alat dan BahanA. AlatDita Ratna Sari (06111410011)1. 2. Kertas saring3. Oven4. Corong5. beker gelas6. Penangas air7. gelas ukur8. pipet tetes9. Porselen10. Pengaduk kaca11. Neraca Analitik

B. Bahana. Susu Bubuk

b. Asam Asetat Glasial

c. Etanol 95%

d. Air (aquadest)

e. Eter

V. Prosedur PercobaanPanaskan 100 mL susu dalam air panas sehingga temperatur susu naik 40oC. Tambahkan setetes demi tetes sebanyak 1 ml asam Asetat Glasial sambil diaduk sehingga semua kasein mengendap. Saring endapannya dengan kain panjang, air diperas dari kasein. Suspensikan endapan dengan 25 ml etanol 95%. Dekantasi supernatan. Ulangi menggunakan 50 ml larutan Etanol : Eter (1:1) . Dengan 25 ml Eter-alkohol pindahkan kasein ke dalam corong buchner dan cuci dengan 25 ml eter. Isap endapan. Keringkan dan pindahkan pada kaca arloji.

VI. Hasil PengamatanPerlakuanHasil Pengamatan

Panaskan 25 ml susu dalam air panas hingga temperatur suhu naik 40 oC + tetes demi tetes sampai 0,5 ml asam asetat glasial (sampai mengendap) Larutan susu mengendap

Saring endapan susu dengan kain panjang,aor diperas dari kasein suspensikan endapan dengan 25 ml alkohol 95% (didiamkan hingga mengendap),lalu pisahkan antara air dan endapannya Setelah diperas dan endapan ditimbang kembali,didapatkan seberat 7,21 gram

Setelah diberi 25ml eter larutan diendapkan kembali dan diambil endapannya Larutan tetap berwarna putih,ditaruh diatas kaca arloji,berat arloji = 83,49 gram. Endapan = 13,16 gram

Kemudian dioven pada suhu 40oC . dan ditimbang kembaliEndapan kasein yang didapatkan adalah 1,74 gram

VII. Analisa Data

Berat SusuTakaran saji=Massa yang disajikanVolume saji Volume yang dibutuhkan27 gram= X185 ml 50 mlX= 1350 50 mlX=7,3 gram

1. SecaraTeori

2. SecaraPraktekBerat protein = Berat kaca arloji & kasein Berat kaca arloji= 85,22 83,48= 1,74

3. % Kesalahan

VIII. Persamaan Reaksi

IX. PembahasanPada percobaan 7 kali ini yaitu mengenai pembuatan kasein, yang bertujuan untuk Memisahkan kasein dalam susu dengan menggunakan alkohol dan menghitung % rendemen pada berat kasein. Pada pembuatan kasein yang dilakukan dalam percobaan ini ialah dengan menggunakan susu bubuk putih. Percobaan pertama yang dilakukan ialah memanaskan 7,3 gram susu bubuk dalam air panas sehingga temperatur susu naik 40oC. Proses pemanasan ini bertujuan untuk menurunkan kelarutan protein sehingga dapat mengendapkan protein susu pada kondisi yang sesuai atau pemanasan ini dapat menyebabkan denaturasi rusaknya struktur protein sehingga mempercepat pengendapan protein. Tapi pemanasan pada suhu ini, kasein tidak mengalami pengendapan. Pada dasarnya kasein merupakan protein yang stabil terhadap pemanasan dan tidak mengalami denaturasi apabila air susu dipanaskan. Tapi pemanasan ini akan mengubah stabilitas kasein dan menyebabkan kasein nantinya mudah dilakukan pengendapan. Selanjutnya ialah menambahan asam asetat glasial pada susu setelah pemanasan setetes demi setetes sampai kasein mengendap. Pada penambahan asam cuka (asam asetat glasial) pada susu yang telah dipanaskan berarti menambahkan konsentrasi dari ion H+ yang kemudian akan mengadakan reaksi dengan muatan negatif protein yang berasal dari gugus hiroksil bebasnya. Semakin banyak konsentrasi H+ yang ditambahkan maka semakin banyak pula penurunan pH dari susu sehingga titik isoelektriknya semakin dekat. Apabila pH isoelektrik sudah tercapai maka muatan yang saling berlawanan akan saling menetralkan sehingga akan terbentuk gumpalan. Dan dengan penambahan asam dapat menghilangkan muatan listrik dari partikel kasein karena asam akan mengikat kalsium dan kalsium kaseinat, sehingga kasein menjadi terlepas dan terbentuk endapan.Kemudian larutan dan endapan yang terbentuk disaring dengan menggunakan kain panjang dan diperas untuk memisahkan endapannya. Sehingga akan didapatkan endapan kasein yang berwarna putih, lalu endapan tersebut ditimbang dan didapatkan berat endapan sebesar 7,21gram. Setelah endapan ditimbang, maka endapan yang terbentuk tersebut disuspensi dengan etanol 95%. Proses ini bertujuan karena kasein tidak larut dalam etanol, maka dapat untuk memisahkan kasein dengan protein lain sehingga diperoleh hanya kasein saja. Protein selain kasein akan melarut sedangkan kasein tetap berbentuk endapan yang tidak dapat melarut. Setelah itu endapan yang diperoleh tersebut disuspensi kembali dengan campuran etanol dan eter dengan perbandingan 1:1. Hal ini bertujuan untuk memisahkan lemak dari endapan kasein di mana lemak akan ikut melarut bersama dengan eter, hal ini karena eter dan lemak memiliki sifat kepolaran yang tidak berbeda jauh. Sedangkan etanol akan melarutkan protein atau senyawa lain selain kasein sedangkan kasein masih berada dalam bentuk endapannya karena kasein tidak larut dalam etanol sehingga akan diperoleh kasein yang lebih murni. Setelah itu disaring kembali dan endapat berwarna putih yang didapat ditimbang, didapatkan sebesar 13,6 gram. Kemudian larutan tersebut diberi 25ml eter hingga mengendap dan disaring kembali. Hasil saringan yang didapat ialah sebesar 13,16 gram dan ditaruh diatas kaca arloji. Kemudian dioven sampai kering dengan suhu 40oC, setelah kasein benar-benar kering kemudian ditimbang dan didapatlah berat kaseinnya setelah dikurangi dengan berat kaca arloji ialah sebesar 1,74gram. Berdasarkan hasil analisa yang didapat % kasein teori yang didapat adalah sebesar 8,8% sedangkan % kasein untuk praktek yang didapat adalah sebesar 19,06. Dari hasil perhitungan tersebut terlihat hasil yang didapat sangat jauh berbeda. Dan nilai pada % kesalahan yang didapat juga sangat besar, % kesalahan ini terjadi bisa disebabkan oleh banyak faktor yaitu bisa saja karena ketidak telitian praktikan saat menimbang, mengencerkan larutan, mencampurkan larutan, kebersihan alat penyaringan dan pada saat proses penyaringan. Seharusnya setelah penyaringan semua cairannya juga perlu diperas agar diperoleh kasein yang optimal karena dimungkinkan masih terdapatnya kasein pada cairan tersebut meskipun sangat sedikit.

X. Kesimpulan1. Proses pemanasan yang dilakukan pada percobaan ini bertujuan untuk menurunkan kelarutan protein sehingga dapat mengendapkan protein susu pada kondisi yang sesuai.2. Penambahan asam asetat glasial ialah dapat menghilangkan muatan listrik dari partikel kasein karena asam akan mengikat kalsium dan kalsium kaseinat, sehingga kasein menjadi terlepas dan terbentuk endapan.3. Disuspensikannya endapan dengan campuran etanol dan eter bertujuan untuk memisahkan lemak dari endapan kasein di mana lemak akan ikut melarut bersama dengan eter.4. Persen kesalah yang didapat pada praktikum kali ini sangat besar.5. Pada pembuatan kasein ini etanol digunakan untuk melarutkan senyawa polar yang terdapat pada endapan tersebut.

XI. Daftar PustakaRarasanti.2011.Laporan Praktikum Biokimia. (Online). (http://rarasanti.blogspot.com, diakses pada tanggal 10 Nvember 2013).Rasyid, Erica.2012. Laporan Praktikum Biokimia Pemisahan. (Online).(http:// //erikunib.blogspot.com,diakses pada tanggal 10 November 2013).Alkemis, Nawan. 2011. Pembuatan Kasein. (Online).(http:// nawanalkemis.blogspot.com,diakses pada tanggal 10 November 2013).

XII. Lampiran Gambar

Setelah di oven