perbandingan non - parametrik Kruskal- Wallis digunakan untuk mengukur hubungan antara

bakteri dan tingkat keparahan telinga untuk populasi gabungan . Karena hanya tiga anak

dalam kelompok Aborigin memiliki diagnosis OM, dan dua anak-anak di non – Aborigin

Kelompok memiliki OM diagnosis supuratif , analisis terpisah dalam kelompok tidak dapat

dilakukan . S. pneumoniae , diukur dengan jumlah koloni pengenceran serial atau RTQPCR ,

adalah positif berhubungan dengan telinga ( P = 0,0001 - 0,0016 ; Gambar 4 ) seperti H.

influenzae dan M. Catarrhalis ( data tidak ditampilkan ) . Jumlah beban bakteri hidung diukur

dengan RTQ - PCR juga positif terkait dengan keadaan telinga ( P = 0,0001 ) , seperti rasio

patogen pernafasan terhadap total beban bakteri ( P = 0,0032 ). Dalam rangka untuk menilai

kegunaan dari beban bakteri sebagai prediktor hasilnya , probabilitas dari OM diagnosis

supuratif di berbagai jumlah bakteri ditentukan . Hasil analisis menunjukkan bahwa

probabilitas supuratif OM meningkat dengan kepadatan S. pneumoniae , H. influenzae , atau

M. catarrhalis , beban patogen gabungan , dan beban total bakteri sebagaimana ditentukan

oleh RTQ - PCR ( Gambar 5 ) .

Dibandingkan dengan M. catarrhalis , baik S. pneumoniae dan H. influenzae dikaitkan

dengan probabilitas yang lebih tinggi OM supuratif pada jumlah yang lebih rendah . Kedua

gabungan beban patogen dan beban total bakteri hanya terkait dengan probabilitas yang lebih

besar dari supuratif OM di jumlah tinggi ( Gambar 5 ) . Untuk penyeka - negatif dan RTQ -

PCR – positif untuk S. pneumoniae ( 18 dari 103 penyeka ) dan H. Influenzae ( 24 dari 103

penyeka ) , ada hubungan statistik yang signifikan tanpa OM atau OME ( P = 0,0001 ) . untuk

sejenis sampel M. catarrhalis ( 6 dari 103 penyeka ) tidak ada hubungan dengan telinga .

Sebuah perbandingan lebih lanjut dibuat dengan rutinitas semi-kuantitatif penilaian beban

bakteri didirikan di laboratorium kami . Meskipun presisi rendah metode sederhana,

hubungan yang signifikan ditunjukkan untuk semua bakteri diuji dan keberadaan dan tingkat

keparahan penyakit telinga ( Chi2 tepat, S. pneumoniae , P = 0,003 , H. influenzae , P = 0,012

, M. catarrhalis , P = 0,013 ) .

Pemilihan beban ambang batas untuk memprediksi OM

Menggunakan sensitivitas dan spesifisitas tindakan, ambang batas bakteri nilai beban yang

bisa mengidentifikasi anak-anak yang paling mungkin memiliki OM supuratif dari mereka

yang kurang mungkin yang terkena dampak diperkirakan. Misalnya, sensitivitas dari RTQ-

PCR perkiraan 105 sel (ml sampel) -1 untuk memprediksi supuratif OM adalah 79% sampai

96% bagi individu spesies patogen, dan 82% untuk pernapasan gabungan patogen (Gambar

6a). Spesifisitas berkisar dari 49% menjadi 61% bagi individu, dan 52% untuk gabungan

patogen (Gambar 6b). Analisis ini menunjukkan bahwa tingginya jumlah patogen pernafasan

hidung terjadi pada anak-anak tanpa OM, tapi hitungan rendah itu tidak mungkin pada anak

dengan supuratif OM. Analisis koloni seri pengenceran menghitung data dan RTQ-PCR data

untuk memprediksi supuratif OM atau OM menunjukkan hasil yang sama.

diskusi

Korelasi positif antara beban bakteri hidung dan telinga

Dalam penelitian ini, korelasi positif antara jumlah bakteri hidung dan keadaan telinga (ada

OM, OME, atau supuratif OM) yang diamati. Hubungan ini diadakan untuk satuan dan

gabungan patogen pernafasan bakteri (S. pneumoniae, H. influenzae, M. catarrhalis atau),

beban total bakteri, dan proporsi patogen pernafasan terhadap total bakteri.

Muatan bakteri Nasal sebagai penanda diagnostik

muatan bakteri patogen pernafasan hidung adalah sangat sensitif dari supuratif OM, tetapi

memiliki kekhususan yang rendah, dan karenanya bukan merupakan alat diagnostik yang

dapat diandalkan. Namun demikian, sensitivitas tinggi mendukung pandangan bahwa rendah

muatan bakteri membuat kehadiran supuratif OM menjadi mungkin.

Perbandingan muatan bakteri hidung di Aborigin dan non - anak Aborigin

Perbandingan anak-anak Aborigin dan non – Aborigin dengan OME menunjukkan secara

signifikan lebih tinggi dari S. pneumoniae dan M. catarrhalis dalam kelompok Aborigin .

Selain itu , proporsi swab positif untuk ketiga patogen secara signifikan lebih tinggi untuk

anak-anak Aborigin dibandingkan dengan anak non - Aborigin . Kami percaya bahwa high-

density bakteri pernapasan pada beberapa anak-anak Aborigin adalah hasil dari tingginya

tingkat crossinfection didorong oleh prasarana kesehatan penduduk dan miskin, waktu yang

lama , dan penekanan kekebalan akibat nutrisi yang tidak memadai dan usia dini pertama

Infeksi [ 1,8,9 ] . Selain itu, kami berhipotesis bahwa highdensity pengangkutan S.

pneumoniae , H. influenzae , dan M. catarrhalis memprediksi persistensi OME , dan

pengembangan menjadi supuratif OM .

Pendeteksi unggulan patogen pernafasan bakteri dengan RTQ - PCR

RTQ - PCR terbukti menjadi metode yang lebih sensitif untuk mengukur S. pneumoniae , H.

influenzae , M. catarrhalis dan di penyeka hidung . Untuk S. pneumoniae , ini mungkin

karena diplococci atau rantai diplococci dihitung sebagai koloni tunggal di plate ,

dibandingkan dengan pencacahan lebih tepat dengan PCR [ 19 ] . Kematian bakteri dalam

penyimpanan mungkin faktor penyebabnya . Namun, kami telah mendeteksi hanya perubahan

kecil dalam jumlah yang layak lebih dari 6 tahun penyimpanan . Penjelasan lain mungkin

deteksi dirilis DNA dalam hidung . Namun, bukti menunjukkan bahwa DNA adalah

dibersihkan efisien dari permukaan mukosa melalui kombinasi lisis bakteri dan mekanisme

pembersihan imun , karena DNA bakteri tidak dapat bertahan hidup dalam Bentuk

amplifiable selama lebih dari tiga hari di hadapan dari efusi telinga tengah [ 20 ] .

Penggunaan antibiotik dalam waktu 4 minggu koleksi usap didokumentasikan hanya 3 anak

dan tidak menjelaskan fenomena ini . Jadi Penjelasan yang paling mungkin untuk budaya -

negatif , RTQPCR - hal positif berkaitan dengan metabolisme ditekan negara yang

memungkinkan banyak spesies bakteri yang berbeda untuk bertahan hidup di negara non -

ditanami [ 21,22 ] . beberapa hipotesis ada untuk menjelaskan fenomena ini [ 23 ] .

Relevansi klinis bakteri non - kultur

Bentuk non - kultur dari S. pneumoniae dan H. Influenzae dalam efusi telinga tengah

mendapatkan respon imun dan mungkin memiliki peran penting dalam patogenesis OME [ 24

] . Dalam penelitian kami , kehadiran bakteri ini dalam penyeka hidung dikaitkan dengan ada

atau OM OM non - akut ( OME ) . Orang lain telah menunjukkan bahwa sementara kultur -

negatif, PCR - positif pneumokokus akut OM terjadi, ini pneumokokus klinis kurang parah

daripada kultur positif akut OM [ 19 ] . Yang menarik adalah apakah bakteri non – kultur

dapat timbul kembali atau memiliki peran langsung dalam ketekunan patogen efusi , atau OM

akut berulang . dengan meningkatkan kecenderungan penggunaan diagnostik berbasis PCR ,

penting untuk memperjelas peran non – kultur organisme penyakit .

kesimpulan

Penelitian ini menunjukkan hubungan yang signifikan antara bakteri hidung dan keberadaan

dan tingkat keparahan arus penyakit telinga pada individu . Asosiasi ini bertahan apakah

beban bakteri diukur dengan semiquantitative kultur , jumlah koloni serial, atau RTQ - PCR .

Deteksi bakteri non - kultur oleh RTQPCR mungkin memiliki implikasi untuk patogenesis

OM termasuk kegigihan infeksi meskipun terapi agresif . Swab dengan banyak bakteri yang

lebih tinggi lebih mungkin untuk memiliki diperoleh dari anak-anak Aborigin dengan

supuratif OM . Namun, pengukuran beban bakteri tidak dapat diandalkan cukup pada anak-

anak membedakan dengan supuratif OM untuk digunakan diagnostik . Meskipun rendahnya

spesifisitas beban bakteri sebagai ukuran negara telinga , tinggi sensitivitas mendukung

pandangan bahwa muatan bakteri rendah membuat kehadiran supuratif OM mungkin .

pengamatan ini juga menunjukkan bahwa pengurangan muatan bakteri mungkin penting

sebelum pengurangan dramatis dalam supuratif OM dapat dicapai untuk anak-anak Aborigin

yang tinggal di masyarakat terpencil Australia .

Kontribusi Penulis

HS - V berpartisipasi dalam desain penelitian , dilakukan analisis mikrobiologi , dan

penyusunan naskah . RB dikembangkan dan dilaksanakan dengan analisis molekuler . MN

dikembangkan dan dilaksanakan dengan analisis molekuler , dan berpartisipasi dalam desain

penelitian. NAJ dan NH mengkoordinasikan pengembangan molekul teknik , dan

berpartisipasi dalam desain studi . SH melakukan analisis statistik . AJL dan PSM di

penelitian , adalah kepala peneliti dari studi asli dari mana penyeka berasal , dan

berpartisipasi dalam desain penelitian.